專利名稱：用于治療膀胱活動過度的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療和/或預(yù)防膀胱活動過度(overactivebladder)或尿失禁的方法，以及該方法中使用的化合物和組合物。
背景技術(shù)：
膀胱活動過度(″OAB″)是包括沖動失禁、緊迫和頻繁的綜合征的一個術(shù)語。尿失禁(″UI″)是尿的不隨意流失，其是由沖動(沖動失禁)或身體或精神應(yīng)激(應(yīng)激失禁)造成的膀胱無能力保留尿所導(dǎo)致的。
正常的膀胱在腎功能的支配下以生理速度填滿。膀胱可以容納大容量的尿，這歸因于膀胱的物理性質(zhì)和神經(jīng)抑制系統(tǒng)。人們確信抑制機(jī)理牽涉到副交感神經(jīng)活性的抑制或交感神經(jīng)緊張的增高從而產(chǎn)生逼肌松弛并且使其出現(xiàn)填充。在填充過程中膀胱的出口頸和尿道收縮防止泄漏。排泄或排尿的特征在于該出口頸和尿道松弛，隨后逼肌收縮。當(dāng)膀胱排空時逼肌松弛并且出口頸和尿道收縮以封閉膀胱并維持節(jié)制。
據(jù)估計4-8％的總?cè)巳涸谌魏螘r期患有UI，盡管在大部分國家中，只診斷出約15％的此類患者。那些確診的人群也只有約70％的接受醫(yī)學(xué)治療。沖動失禁在老年人中更加普遍并且80％的情況為女性。許多失禁患者有規(guī)律地使用墊子和其他物理裝置而不接受醫(yī)學(xué)治療。失禁尿墊的美國市場據(jù)估計在1997年為$15億。
在西方國家中毒覃鹼拮抗劑羥丁寧(oxybutin)在處方中用于OAB的治療并且第二代毒覃鹼M3受體拮抗劑tolterodine也已上市用于OAB。在日本丙哌凡林和黃酮哌酯已用于處方。雌激素和孕激素療法已經(jīng)研究并被任務(wù)部分改善某些婦女中的失禁。其他研究提出α-腎上腺素能激動劑、β-腎上腺素能受體阻滯劑、膽堿能受體阻滯化合物和膽堿能受體興奮藥物可能優(yōu)異。然而，現(xiàn)有療法與副作用有關(guān)，包括便秘、視覺調(diào)節(jié)異常、xerothalmia(干眼)和″口干″副作用，一些使用者難以忍受這些副作用，因此，盡管現(xiàn)有治療有效，但仍然對UI和OAB的有效和可接受醫(yī)學(xué)治療存在很大和增長的需求。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明說明現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)某些結(jié)合神經(jīng)激肽2受體(″NK2R″)的化合物可用于治療和預(yù)防膀胱活動過度(″OAB″)和尿或尿道失禁(″UI″)。特別是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)結(jié)合NK2R受體適于治療和預(yù)防OAB和UI的化合物是具有結(jié)構(gòu)式I的結(jié)構(gòu)的某些化合物 其中，A是O或S；R1選自H或C1-4烷基；R2部分獨立地選自H或C1-4烷基；R3選自C1-4烷基；R4選自鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基或氰基，或其藥學(xué)可接受鹽，條件是當(dāng)R1，R2和R4均為H時R3不是甲基。
更加具體地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其中A是O，R1和R2均為H，R3為C1-4烷基，和R4選自H或鹵素的結(jié)構(gòu)式I的化合物適于治療和預(yù)防OAB和UI，條件是當(dāng)R4是H時R3不是甲基。
特別具體地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)式I的其中A是O，R1、R2和R4均為H，并且R3為C2-4烷基的化合物適于治療和預(yù)防OAB和UI。
最具體的適于治療和預(yù)防OAB和UI的化合物是那些在此例舉的化合物。
本發(fā)明的化合物具有NK2R結(jié)合性質(zhì)并且某些此類化合物選擇性抑制膀胱組織收縮。令人驚奇地、已經(jīng)發(fā)現(xiàn)某些非常密切相關(guān)的化合物激活BANK誘導(dǎo)的膀胱組織收縮。一種此類化合物是其中，參考結(jié)構(gòu)式I，A是S，R1、R2和R4是H且R3是甲基的化合物。
一方面，本發(fā)明提供一種包括用結(jié)構(gòu)式I的化合物治療或預(yù)防對象中、特別是人體中的OAB或UI的方法，并且更加具體地，一種包括用治療有效量的具有結(jié)構(gòu)式I的化合物治療的方法。
第二方面，本發(fā)明提供用于治療和預(yù)防哺乳動物，特別是人體中的OAB或UI的本發(fā)明的化合物。
第三方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物的藥學(xué)可接受鹽和含有所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽的組合物。
在一具體方面，本發(fā)明提供一種包括用治療有效量的抑制膀胱收縮的具有結(jié)構(gòu)式I的化合物治療或預(yù)防對象中、特別是人體中的OAB或UI的方法。
另一方面，本發(fā)明提供一種治療和預(yù)防哺乳動物且特別是人體中的OAB或UI的方法，包括用治療有效量的NK2R結(jié)合化合物與另一種治療劑聯(lián)合治療有此需要的對象。
再一方面，本發(fā)明提供一種哺乳動物中且特別是人體中的OAB或UI的治療和預(yù)防的方法，包括用治療有效量的NK2R拮抗劑與雌激素類藥物和/或促孕物質(zhì)聯(lián)合治療需要其的對象，并且補(bǔ)充或不補(bǔ)充α-腎上腺素能激動劑、β-腎上腺素能受體阻滯劑、膽堿能受體阻滯化合物或膽堿能受體興奮藥物。
另一方面，本發(fā)明提供一種用于實施本發(fā)明的方法的藥物組合物，其中含有結(jié)構(gòu)式I的化合物和藥學(xué)可接受賦形劑或稀釋劑。
在本發(fā)明的所有方面中考慮在本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)可接受鹽是鹽例如鹽酸鹽、硫酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、苯磺酸鹽(besylate)、磷酸鹽、水楊酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、醋酸鹽或馬來酸鹽。
本發(fā)明的一個目的是提供一種治療OAB或UI的方法，包括使用具有上述結(jié)構(gòu)式I的化合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種方法，包括使用本發(fā)明的化合物用于預(yù)防OAB或UI。
當(dāng)本發(fā)明方法適合于哺乳動物時，通常它們也特別適合于人體。
因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種方法，其中包括用治療有效量的本發(fā)明的化合物治療患有OAB和UI并且需要其治療的人體患者。
本發(fā)明的另一目的是提供具有結(jié)構(gòu)式I的適于治療或預(yù)防OAB或UI的化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供所述適合治療或預(yù)防OAB或UI的化合物的藥學(xué)可接受鹽、組合物、混合物等。
本發(fā)明的另一個具體目的在于提供一種治療患有OAB或UI的人體患者的方法，包括施用有效的OAB或UI治療量的具有結(jié)構(gòu)式I的化合物給該患者。
本發(fā)明的另一具體目的在于提供一種方法，其中具有結(jié)構(gòu)式I的結(jié)構(gòu)的化合物為其藥學(xué)可接受鹽的形式。
在本發(fā)明治療的方法中考慮以任何生理可接受方式給藥，例如局部施用、攝取、吸入、吹入或注射。
本發(fā)明的另一方法中本發(fā)明的化合物考慮為是例如膠囊、片劑、水溶液、水混懸液、非水混懸液、栓劑、氣霧劑或散劑的形式。
本發(fā)明的一個目的是治療膀胱活動過度(″OAB″)或尿失禁(″UI″)，膀胱活動過度(″OAB″)一般和在此用于表示包括尿沖動失禁、緊迫和頻繁的綜合征，并且尿失禁(″UI″)是指尿的不隨意流失，其是由沖動(沖動失禁)或身體或精神應(yīng)激(應(yīng)激失禁)造成的膀胱無能力保留尿所導(dǎo)致的。
因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種治療患有OAB或UI的人體患者的方法。
本發(fā)明的用于治療OAB或UI的方法的一個具體目的，在此考慮的，是施用治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供具有結(jié)構(gòu)式I的用于OAB或UI的治療或預(yù)防的化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供用于治療或預(yù)防OAB或UI的本發(fā)明化合物的藥學(xué)可接受鹽、組合物、混合物等。
本發(fā)明的一個具體目的是提供治療患有OAB或UI的人體患者的方法，包括施用有效OAB或UI治療量的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-乙基苯甲酰胺給該患者。
本發(fā)明的另一具體目的在于提供一種方法，其中(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-乙基苯甲酰胺為其藥學(xué)可接受鹽的形式。
在本發(fā)明的治療方法中考慮通過任何生理可接受途徑給藥，例如經(jīng)皮、舌下或直腸局部使用；通過腹膜內(nèi)、非腸道、真皮內(nèi)或皮下注射；或通過膠囊、片劑或液體溶液或混懸液的攝取；或通過氣霧劑的粉末吸入或吹入。
一般地，考慮本發(fā)明的藥物組合物配制為允許經(jīng)生理可接受途徑給藥。在本發(fā)明的方法中考慮化合物以例如膠囊、片劑、水溶液、水混懸液、非水混懸液、栓劑、氣霧劑或散劑的形式給藥。
在本發(fā)明的某些方法中考慮化合物與一種或多種其他治療聯(lián)合給藥。此類治療劑考慮是雌激素類藥物、促孕物質(zhì)、α-腎上腺素能激動劑、β-腎上腺素能受體阻滯劑、膽堿能受體阻滯劑或膽堿能受體興奮劑。然而，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說明顯的是本發(fā)明的化合物可以與任何治療或預(yù)防劑和/或藥物或其醫(yī)學(xué)相容組合聯(lián)合給藥。
本發(fā)明考慮包括含有本發(fā)明的化合物和至少一種藥學(xué)可接受賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。
本發(fā)明還考慮包括含有例如雌激素藥物、促孕物質(zhì)、α-腎上腺素能激動劑、β-腎上腺素能受體阻滯劑、膽堿能受體阻滯劑或膽堿能受體興奮劑的藥物的藥物組合物。
本發(fā)明范圍內(nèi)考慮的藥物組合物包括那些例如膠囊、片劑、水溶液、水混懸液、非水混懸液、栓劑、氣霧劑和散劑的形式。
其他方面，本發(fā)明的目的和優(yōu)越性對于所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來說在研究本說明書和所附權(quán)利要求書后是顯而易見的。
然而，應(yīng)懂得當(dāng)用于治療OAB、UI或有關(guān)疾病中時，本發(fā)明的化合物考慮作為適當(dāng)?shù)乃幬锝M合物給藥，其含有本發(fā)明的化合物或該化合物的藥學(xué)可接受鹽，例如氯化物、硫酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、苯磺酸鹽、磷酸鹽、水楊酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、醋酸鹽、馬來酸鹽，以及藥學(xué)可接受鹽稀釋劑或載體。這些鹽通過所屬領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。藥物組合物的形式適合于所選擇的特定給藥途徑。此類形式包括，例如，用于口服給藥的片劑、膠囊、溶液或混懸液；局部給藥的溶液或混懸液；直腸給藥的栓劑；靜脈內(nèi)或肌肉內(nèi)輸注或注射的滅菌溶液或混懸液；吸入給藥的氣霧劑或霧化溶液或混懸液；或與藥學(xué)可接受固體稀釋劑例如乳糖一起通過吹入給藥的散劑。
對于口服給藥一般采用含有0.1mg至最高達(dá)250mg(和通常5-100mg)的治療有效量的本發(fā)明化合物的片劑或膠囊。對于吸入給藥，本發(fā)明的化合物以例如5-100mg的日劑量范圍對人體給藥，以單一劑量或分為每天2-4個劑量。同樣地，對于靜脈內(nèi)或肌肉內(nèi)注射或輸注，通常可以采用含有至多10％w/w(并且一般0.05-5％w/w)的本發(fā)明化合物的滅菌溶液或混懸液。
本發(fā)明的化合物的給藥劑量需按照所屬領(lǐng)域公知的原理進(jìn)行必要變化，考慮給藥途徑和疾病的嚴(yán)重性和被治療患者的規(guī)模和年齡。通常，考慮本發(fā)明的化合物應(yīng)以在約0.01-約25mg/kg范圍內(nèi)的劑量，并且更特別地在0.1-5mg/kg范圍內(nèi)的劑量給藥。應(yīng)理解可以采用常規(guī)等當(dāng)量的本發(fā)明化合物的N-氧化物或藥學(xué)可接受鹽或季銨鹽。
具體實施例方式
實施例在此使用，除非另外說明(i)溫度以攝氏度計(″℃″)；操作是在室溫或常溫下進(jìn)行，也就是在18-25℃的溫度范圍內(nèi)；(ii)有機(jī)溶液用無水MgSO4干燥；溶劑的蒸發(fā)是用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下(600-4000帕斯卡；4.5-30mmHg)和至多60℃的浴溫下進(jìn)行；(iii)色譜，是指快速色譜；反相色譜，是指在粒徑為32-74μ的十八烷基硅烷(″ODS″)涂層載體上的快速色譜，稱作″PREP-40-ODS″(Art 731740-100得自Bodman Chemicals，Aston，PA，USA)；薄層色譜(″TLC″)在硅膠平板上進(jìn)行；(iv)通常，反應(yīng)的過程通過TLC檢測并且反應(yīng)時間僅僅是舉例；(v)熔點未經(jīng)校準(zhǔn)和″dec″是指分解；給出的熔點是由按所述方法制備的材料獲得的那些熔點；同質(zhì)多晶導(dǎo)致在某些制備中熔點不同的物質(zhì)的分離；(vi)終產(chǎn)物符合質(zhì)子核磁共振(″NMR″)光譜；
(vii)收率僅僅是舉例并且不一定是那些可以通過辛勤的工藝研發(fā)獲得的；如果需要更多物質(zhì)，可以重復(fù)制備；(viii)當(dāng)給出時，NMR數(shù)據(jù)是主要判斷質(zhì)子的δ值，以相對于作為內(nèi)標(biāo)的四甲基硅烷(″TMS″)的百萬分之份數(shù)(″ppm″)計，在300MHz下用全氘代二甲基亞砜(″DMSO-d6″)作為溶劑測定；采用信號形狀的常規(guī)縮寫；偶合常數(shù)(J)以Hz計；當(dāng)作出指定時Ar是指芳族質(zhì)子；(ix)化學(xué)符號具有其常規(guī)含義；采用SI單元和符號；(x)減壓是以帕斯卡計的絕對壓強(qiáng)(″Pa″)；高壓是以巴計的計量壓；(xi)溶劑比例以體積體積(″v/v″)計；(xii)質(zhì)譜(″MS″)利用70電子伏特的電子能以電子沖擊(″EI″)模式利用直接暴露探針進(jìn)行；其中所示的電離作用是通過化學(xué)電離(″CI″)或快速原子轟擊(″FAB ″)實現(xiàn)的；給出m/z的值；一般地，只報告表示母體質(zhì)量的離子；和(xiii)LC/MS是通過二極管輻射檢測器檢測。該分析使用Zorbax50mm×2.1mm穩(wěn)定結(jié)合C8分析柱。溶劑A是含0.05％三氟乙酸的水。溶劑B是90％乙腈、9.95％水和0.05％三氟乙酸。流速為1.4mL/分鐘，在3分鐘內(nèi)由5％B達(dá)到90％B。保留時間以分鐘計。電離化方法為APCI，或大氣壓化學(xué)電離法。通常，只報告表示母體離子的離子。
化學(xué)實施例實施例1(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代-5，5-二甲基-全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺含在甲醇(8.0mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丙基]-N-甲基苯甲酰胺(0.622g)加入到4-(2-氧代-5，5-二甲基全氫嘧啶-1-基)哌啶(0.400g)和乙酸(0.11mL)在甲醇(8.0mL)中的溶液內(nèi)。5分鐘后，一次性加入含在甲醇(8.0mL)中的氰基硼氫化鈉(0.119g)。攪拌過夜后，該反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉水溶液稀釋，攪拌30分鐘，和用二氯甲烷萃取。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑。所得油，其在放置后開始結(jié)晶，懸浮在乙醚中并且過濾得到標(biāo)題化合物，其為白色固體(0.720g)。
MSm/z＝545(M+1)；C29H38Cl2N4O2分析；計算值C，63.84；H，7.02；N，10.26；實測值C，63.95；H，6.95；N，10.15.
中間體4-(2-氧代-5，5-二甲基全氫嘧啶-1-基)-哌啶合成如下1a.1-芐氧基羰基-4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基氨基)-哌啶1-芐氧基羰基-4-氧代-哌啶(12.0g)在甲醇(72mL)中加入到2，2-二甲基-1，3-丙二胺(5.2mL)和乙酸(8.8mL)在甲醇(72mL)中的攪拌溶液內(nèi)。15分鐘后，一次性加入含在甲醇(72mL)中的氰基硼氫化鈉(9.7g)。攪拌過夜后，將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)；和將殘余物溶解在1N鹽酸(100mL)中。滴加濃鹽酸且連續(xù)攪拌直至氣體停止放出。酸性含水混合物用二氯甲烷洗滌，用10N氫氧化鈉堿化至pH10，并且用二氯甲烷萃取。將二氯甲烷萃取液干燥和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為粘性油。
NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.08(m，2)，2.93(m，2)，2.57(m，1)，2.46(s，2)，2.44(s，2)，1.89(m，2)，1.27(m，2)，0.89(s，6).
1b.1-芐氧基羰基-4-(2-氧代-5，5-二甲基全氫嘧啶-1-基)-哌啶1-芐氧基羰基-4-(3-氨基-2，2-二甲基丙基氨基)-哌啶(3.02g)和1，1′-羰基二咪唑(2.19g)在氯仿(40mL)中的溶液回流3小時。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋并依次用1N鹽酸和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將分離的有機(jī)相干燥，蒸發(fā)，由乙醚研制，并且過濾得到所述的脲，其為白色固體(1.72g)。
MSm/z＝346(M+1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.35(m，1)，4.23(m，2)，2.87(m，6)，1.58(m，4)，1.00(s，6).
1c.4-(2-氧代-5，5-二甲基全氫嘧啶-1-基)哌啶將1-芐氧基羰基-4-(2-氧代-5，5-二甲基全氫嘧啶-1-基)哌啶(1.85g)和20％碳載氫氧化鈀(0.340g)在乙醇(30mL)中的溶液在1巴氫氣下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾且濾液蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物(0.950g)，其為白色固體。
MSm/z＝212(M+1)；NMR(CD3OD)4.28(m，1)，3.10(m，2)，2.92(m，2)，2.89(m，2)，2.66(m，2)，1.59(m，4)，1.03(s，6).
實施例2(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氫-嘧啶-1-基)-哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺檸檬酸鹽在甲醇(10.0mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0.883g)加入到在甲醇(10.0mL)中的4-(3-乙基-2-氧代全氫-嘧啶-1-基)-哌啶(0.498g)和乙酸(0.145mL)的溶液內(nèi)。5分鐘后，一次性加入在甲醇(10.0mL)中的氰基硼氫化鈉(0.159g)。攪拌3.5小時后，該反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉水溶液稀釋，攪拌30分鐘，和用二氯甲烷萃取。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑。所得油(0.970g)和檸檬酸(0.352g)溶解在甲醇和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為白色固體。
MSm/z＝545(M+1)；分析C29H38Cl2N4O2·1.00C6H8O7計算值C，56.98；H，6.28；N，7.59；實測值C，56.66；H，6.31；N，7.57.
中間體4-(3-乙基-2-氧代全氫嘧啶-1-基)-哌啶制備如下2a.1-芐氧基羰基-4-(3-乙基-2-氧代全氫嘧啶-1-基)-哌啶叔丁醇鉀(19.3mL，1M在四氫呋喃中)加入到1-芐氧基羰基-4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶(3.06g)在四氫呋喃(88mL)中的溶液內(nèi)。隨后加入碘乙烷(2.4mL)，和將該反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，90∶10)作為洗脫劑。產(chǎn)物由乙醚研制并且過濾得到所述的N-甲基化合物，其為白色固體。
MSm/z＝346(M+1)；NMR(CDCl3)7.34(m，5)，5.12(s，2)，4.54(m，1)，4.26(m，2)，3.3g(q，2，J＝7.1)，3.22(m，2)，3.11(m，2)，2.86(m，2)，1.90(m，2)，1.60(m，4)，1.10(t，3，J＝7.1).
2b.4-(3-乙基-2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶將1-芐氧基羰基-4-(3-乙基-2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶(1.85g)和20％碳載氫氧化鈀(0.340g)在乙醇(30mL)中的溶液在1巴氫氣下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾和將濾液蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物(0.950g)，其為粘性油。
MSm/z＝212(M+1)；NMR(CDCl3)4.45(m，1)，3.38(q，2，J＝7.1)，3.17(m，6)，2.72(m，2)，2.15(m，1)，1.91(m，2)，1.62(m，4)，1.10(t，2，J＝7.1).
實施例3(S)-N-{2-(3，4-二氯-苯基)-4-[4-(2-氧代-四氫-嘧啶-1-基)-哌啶-1-基]-丁基}-N-乙基-苯甲酰胺游離堿在甲醇(10.0mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-氧代-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺(0.883g)加入到1-哌啶-4-基-四氫-嘧啶-2-酮(0.498g)和乙酸(0.145mL)在甲醇(10.0mL)中的溶液。5分鐘后，一次性加入在甲醇(10.0mL)中的氰基硼氫化鈉(0.159g)。將該反應(yīng)混合物攪拌3.5小時，用碳酸氫鈉水溶液稀釋，攪拌30分鐘，和用二氯甲烷萃取。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，和標(biāo)題化合物通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑。
中間體，(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-氧代-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺，制備如下。
3a.(S)-苯甲酸4-苯甲?；被?3-(3，4-二氯-苯基)-丁酯0℃將在二氯甲烷(200mL)中的苯甲酰氯(168.3g)滴加到滴加到(S)-4-氨基-3-(3，4-二氯-苯基)-丁-1-醇(140.0g)和三乙胺(121.4g)在二氯甲烷(1400mL)中的溶液內(nèi)。室溫下攪拌該溶液過夜。次日早晨過濾所得白色沉淀，用二氯甲烷洗滌且棄去所得白色固體。母液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌且將分離的有機(jī)相干燥和蒸發(fā)。琥珀色油通過快速色譜純化用二氯甲烷∶甲醇(梯度100，90∶10)作為洗脫劑。標(biāo)題化合物分為兩份。一份(131.2g)LC/MS在2.98rt出現(xiàn)一個峰，m/z＝442(M+1)；NMR(CD3OD)8.44(m，1)，7.82(d，1，J＝8.1)，7.67(d，1，J＝7.5)，7.46(m，10)，7.21(dd，1，J＝1.7，8.3)，4.27(m，2)，3.57(m，2)，3.24(m，1)，2.16(m，2)。另一份(127.7g)進(jìn)一步通過色譜純化。
3b.(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-羥基-丁基]-苯甲酰胺(S)-苯甲酸4-苯甲?；被?3-(3，4-二氯-苯基)-丁酯(127.7g)在四氫呋喃(800mL)中的溶液和含水氫氧化鈉(800mL的2.5N氫氧化鈉)加熱回流過夜。次日將該反應(yīng)真空濃縮，溶于二氯甲烷，和用水和鹽水洗滌。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，95∶5)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物，其為黃色油(85.4g)。LC/MS一個峰2.18rt，m/z＝338(M+1)；NMR(CD3OD)7.66(m，2)，7.43(m，5)，7.20(m，1)，3.59(m，2)，3.30(m，2)，3.18(m，1)，2.00(m，1)，1.86(m，1)。
3c.(S)-N-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-丁基]-苯甲酰胺4-二甲基氨基吡啶(13.0g)和三乙胺(30.15g)溶解在(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-羥基-丁基]-苯甲酰胺(71.6g)和二氯甲烷(900mL)中的溶液。向此混合物分批加入叔丁基二甲基氯硅烷。該反應(yīng)隨后用二氯甲烷(200mL)稀釋。攪拌3小時后，該混合物進(jìn)一步用二氯甲烷稀釋，并且用稀鹽酸水溶液洗滌，水和碳酸氫鈉水溶液。干燥分離的有機(jī)層和蒸發(fā)得到琥珀色油(105.3g)。LC/MS單峰3.43rt，m/z＝452(M+1)。
3d.(S)-N-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺氫化鈉(11.16g)的漿液是在二甲基甲酰胺(1000mL)中制備且將該漿液在冰浴中冷卻。向該攪拌漿液中加入(S)-N-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-丁基]-苯甲酰胺，作為在二甲基甲酰胺(500mL)中的溶液。撤去冰浴且攪拌該溶液并允許升至常溫1小時。該反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，之后加入純凈的乙基碘(43.59g)。將該反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌30分鐘，撤去冰浴且將該溶液進(jìn)一步攪拌2小時并且允許升至常溫，加入水(200mL)和二甲基甲酰胺(200mL)的溶液且將整個反應(yīng)混合物真空濃縮。濃縮物用水稀釋并連續(xù)用乙酸乙酯洗滌。合并該乙酸乙酯層且用水和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥和蒸發(fā)得到琥珀色油(120.5g)。這種物質(zhì)無需進(jìn)一步分析就可用于下步驟。LC/MS兩個峰2.41rt 20％，m/z＝366(M+1的副產(chǎn)物，后者在合成中通過色譜除去)，和3.61rt 80％，m/z＝480(M+1)。
3e.(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-羥基-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺向(S)-N-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺(120.5g，212毫摩爾，由(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-羥基-丁基]-苯甲酰胺計的理論值)在四氫呋喃(1000mL)中的溶液內(nèi)加入四丁基氟化銨(1.0摩爾在四氫呋喃，254mL)中的溶液。攪拌過夜后真空濃縮該溶液，用二氯甲烷稀釋且用碳酸氫鈉水溶液洗滌。干燥分離的有機(jī)層和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，90∶10)作為洗脫劑，得到所述的醇，其為油(三步的收率96％)。LC/MS單峰2.33rt，m/z＝366(M+1)。
3f.(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-氧代-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺-78℃下向二甲基亞砜(82.3mL)在二氯甲烷(700mL)中加入存在于二氯甲烷(400mL)中的草酰氯(50.6mL)。加料完畢后，該溶液在-78℃下繼續(xù)攪拌30分鐘。然后滴加存在于二氯甲烷(400mL)和二甲基亞砜(10mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯-苯基)-4-羥基-丁基]-N-乙基-苯甲酰胺(106.4g)的溶液且保持內(nèi)溫低于-60℃。將該溶液在-78℃下攪拌1小時。令溫度升至-50℃且該溫度保持?jǐn)嚢?0分鐘。使該反應(yīng)混合物冷卻至-78℃且再攪拌1小時。向該溶液滴加三乙胺(202mL)，此后撤去冰浴且將該溶液攪拌過夜并允許升至常溫。該混合物用二氯甲烷稀釋，依次用稀鹽酸水溶液、水和碳酸氫鈉水溶液洗滌。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)和通過色譜純化，用二氯甲烷∶乙酸乙酯(85∶15)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物，其為油(101.9g)。LC/MS寬峰2.42rt 364(M+1)，一個小峰＜5％394(M+)。
實施例4(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-氟-N-甲基苯甲酰胺檸檬酸鹽-30℃將4-氟苯甲酰氯(0.115mL)加入到(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]-丁基]-N-甲基胺(0.400g)和吡啶(0.16mL)在二氯甲烷(10mL)中的溶液內(nèi)。該反應(yīng)混合物升至常溫且攪拌1小時。該混合物用二氯甲烷稀釋，洗滌(碳酸氫鈉水溶液，飽和硫酸銅(II)水溶液)，干燥和蒸發(fā)。該產(chǎn)物通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，80∶10)作為洗脫劑。將純化產(chǎn)物(0.350g)和檸檬酸(0.126g)溶解在在甲醇和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為玻璃狀物，需刮取出，其為白色固體(0.450g)。
MSm/z＝535(M+1)；分析C27H33Cl2FN4O2·1.10C6H8O7·0.10(C2H5)2O·0.70H2O計算值C，53.25；H，5.80；N，7.30；實測值C，53.22；H，5.70；N，7.30.
中間體(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基胺制備如下4a.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羥基丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯將存在于二氯甲烷(125mL)中的二碳酸二叔丁酯(21.6g)在30分鐘內(nèi)滴加到含在二氯甲烷(125mL)中的(S)-N-甲基-2-(3，4-二氯苯基)-4-羥基丁基胺(25.0g)的溶液中。攪拌3小時后，洗滌該反應(yīng)混合物(0.1N鹽酸，碳酸氫鈉水溶液)，干燥，和蒸發(fā)。該產(chǎn)物通過色譜純化，用二氯甲烷∶乙醚(2∶1)作為洗脫劑，得到所述的叔丁酯，其為油(33.0g)，它在放置后結(jié)晶。
4b.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯向草酰氯(1.3mL)在二氯甲烷(30mL)中的溶液在-78℃下加入二氯甲烷(10mL)中的二甲基亞砜(2.1mL)，隨后在5分鐘內(nèi)加入含在二氯甲烷(15mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-羥基丁基]-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(3.2g)。15分鐘后，加入三乙胺(8.2mL)，和該反應(yīng)混合物升至常溫。該混合物用二氯甲烷稀釋，并且用稀鹽酸水溶液、水和碳酸氫鈉水溶液洗滌。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，并且用于下步反應(yīng)(下文)無需進(jìn)一步純化。
4c.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。
將在甲醇(10.0mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.883g)加入到含在甲醇(10.0mL)中的4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)-哌啶(0.498g)和乙酸(0.145mL)的溶液內(nèi)。5分鐘后，一次性加入在甲醇(10.0mL)中的氰基硼氫化鈉(0.159g)。攪拌3.5小時后，該反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉水溶液稀釋，攪拌30分鐘，和用二氯甲烷萃取。干燥分離的有機(jī)層，蒸發(fā)，和層析，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)作為洗脫劑。
所得油(0.970g)和檸檬酸(0.352g)溶解在在甲醇并蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為樹膠。
4d.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基胺將三氟乙酸(7.5mL)加入到在二氯甲烷(200mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]-丁基]-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(5.1g)的溶液中。30分鐘后，加入另外的三氟乙酸(7.5mL)，并且將該反應(yīng)混合物攪拌4小時。該混合物用1N氫氧化鈉(250mL)洗滌，干燥，和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為樹膠(3.8g)。
MSm/z＝413(M+1)。
實施例5(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-硫代全氫-嘧啶-1-基)-哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺二鹽酸鹽(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)-哌啶子基]-2-(3，4-二氯-苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0.356g)和1，1′-硫代羰基二咪唑在氯仿(6mL)中的攪拌溶液在室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，洗滌(碳酸氫鈉水溶液)，干燥，蒸發(fā)，并且通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，90∶10)作為洗脫劑。將所得物溶解在二氯甲烷，用醚制氯化氫沉淀為鹽酸鹽，蒸發(fā)，和置于高真空下過夜得到標(biāo)題化合物，其為白色固體。
m/z＝533(M+1)；分析C27H34Cl2N4OS·2.30HCl·0.10(C2H5)2O計算值C，52.67；H，6.01；N，8.96；實測值C，52.57；H，6.11；N，8.84.
中間體，(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺制備如下5a.1-芐氧基羰基-4-(3-氨基丙基氨基)哌啶將在甲醇(72mL)中的1-芐氧基羰基-4-氧代-哌啶(12.0g)加入到1，3-二氨基丙烷(5.2mL)和乙酸(8.8mL)在甲醇(72mL)中的攪拌溶液內(nèi)。15分鐘后，一次性加入含在甲醇(72mL)中的氰基硼氫化鈉(9.7g)。攪拌過夜后，將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)；和殘余物溶解在1N鹽酸(100mL)。滴加濃鹽酸且持續(xù)攪拌直至停止排放氣體。酸性含水混合物用二氯甲烷洗滌，用10N氫氧化鈉堿化至pH10，并且用二氯甲烷萃取。將二氯甲烷萃取液干燥和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為粘性油。
MSm/z＝292(M+1)；NMR(CD3OD)7.34(m，5)，5.10(s，2)，4.13(m，2)，2.86(m，2)，2.65(m，5)，1.90(m，2)，1.65(m，2)，1.23(m，2).
5b.1-芐氧基羰基-4-[2，2，2-三氟乙酰基)-[3-(2，2，2-三氟乙?；被?丙基]氨基]哌啶在0℃將三氟乙酸酐(10.5mL)加入到1-芐氧基-羰基-4-(3-氨基丙基氨基)哌啶(7.5g)和三乙胺(8.3mL)在氯仿(90mL)中的溶液內(nèi)。攪拌過夜后，該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，洗滌(1N鹽酸，碳酸氫鈉水溶液)，干燥，蒸發(fā)，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(98∶2)作為洗脫劑，得到三氟乙?；哙ぃ錇檎承杂?。
NMR7.36(m，5)，5.14(s，2)，4.35(m，2)，3.93(m，1)，3.35(m，4)，2.83(m，2)，1.87-1.74(m，6)；MSm/z＝484(M+1).
5c.4-[(2，2，2-三氟乙?；?[3-(2，2，2-三氟乙?；被?丙基]氨基]哌啶含在乙醇(30mL)中的1-芐氧基羰基-4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[3-(2，2，2-三氟乙酰基-氨基)丙基]氨基]哌啶(1.85g)和20％碳載氫氧化鈀(0.340g)的溶液在1巴氫氣下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾和將濾液蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物(0.950g)，其為粘性油。
NMR(CD3OD)4.39(m，1)，3.98(m，1)，3.30(m，3)，2.95(m，1)，2.82(m，1)，2.65(m，2)，2.01(m，2)，1.75(m，2)，1.32(m，2)；MSm/z＝350(M+1).
5d.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙酰基)-[2-(2，2，2-三氟乙?；?氨基)乙基]氨基]哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺將含在甲醇(4mL)中的(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-氧代丁基]-N-甲基苯甲酰胺(0.823g)加入到4-[(2，2，2-三氟乙?；?-[3-(2，2，2-三氟乙?；?氨基)丙基]氨基]哌啶(0.600g)和乙酸(0.20mL)在甲醇(8mL)中的溶液內(nèi)。5分鐘后，一次性加入含在甲醇(4mL)中的氰基硼氫化鈉(0.220g)。攪拌3小時，該反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉水溶液稀釋，攪拌30分鐘，并且用二氯甲烷萃取。將有機(jī)萃取液干燥，蒸發(fā)，和通過色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(梯度98∶2，90∶10)作為洗脫劑。將所得物溶解在二氯甲烷中，用醚制氯化氫沉淀出鹽酸鹽，蒸發(fā)，并且置于高真空下過夜得到標(biāo)題化合物，其為白色固體。MSm/z＝683(M+1)。
5e.(S)-N-[4-[4-(3-氨基丙基氨基)哌啶子基]-2-(3，4-二氯苯基)丁基]-N-甲基苯甲酰胺將(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-[(2，2，2-三氟乙?；?[3-(2，2，2-三氟乙酰基氨基)丙基]氨基]-哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺(2.5g)在20％氫氧化鉀水溶液(8.5mL)和甲醇(11mL)中的溶液攪拌1小時。該反應(yīng)混合物1N鹽酸酸化至pH2且用二氯甲烷洗滌3次。水相隨后用10N氫氧化鈉堿化至pH10且用二氯甲烷萃取。將萃取液干燥和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為粘性油。MSm/z＝491(M+1)。
實施例6實施例3的化合物的檸檬酸鹽制備如下。
將(S)-N-{2-(3，4-二氯-苯基)-4-[4-(2-氧代-四氫-嘧啶-1-基)-哌啶-1-基]-丁基}-N-乙基-苯甲酰胺游離堿(0.970g)和檸檬酸(0.352g)溶解在在甲醇和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，其為白色固體MSm/z＝531(M+1)；分析C28H36Cl2N4O2·1.10C6H8O7·0.30H2O計算值C，55.53；H，6.11；N，7.48；實測值C，55.51；H，6.19；N，7.47.
實施例7實施例3的化合物的馬來酸鹽制備如下將(S)-N-{2-(3，4-二氯-苯基)-4-[4-(2-氧代-四氫-嘧啶-1-基)-哌啶-1-基]-丁基}-N-乙基-苯甲酰胺(106.0g)游離堿在異丙醇(750mL)中的溶液加入到馬來酸(23.2g)在異丙醇(750mL)中的溶液內(nèi)。將該混合物加熱恰至回流前且隨后常溫下攪拌。1小時內(nèi)易于形成固體。常溫下攪拌過夜。冰浴中冷卻該漿液且過濾冷卻，用冷的異丙醇洗滌。壓縮固體和真空干燥過夜(250mm65℃下)得到標(biāo)題化合物(約102g)。
MSm/z＝532(M+1)；分析C28H36Cl2N4O2·1.0C4H4O4計算值C，59.35；H，6.23；N，8.65；實測值C，59.63-59.60；H，6.38·6.43，N，8.59-8.54.
利用適當(dāng)設(shè)計的體外和體內(nèi)試驗已經(jīng)證明了本發(fā)明的化合物通過其結(jié)合NK2受體的作用成為治療OAB或UI的治療劑的作用。
體外結(jié)合試驗得自用克隆化人NK1或NK2受體轉(zhuǎn)染的MEL細(xì)胞的膜的制備人肺NK1和NK2受體的克隆按照Hopkins等Biochem.Biophys，Res.Commun.1801110-1117(1991)，和Graham等，Biochem.Biophys.Res.Commun.1778-16(1991)所述方法進(jìn)行。按照Aharony等，Mol.Pharmacol.459-19，1994有關(guān)NK2受體的所述方法進(jìn)行用人速激肽受體轉(zhuǎn)染的MEL細(xì)胞的異源表達(dá)和放大生長。
得自表達(dá)NK1或NK2受體的重組MEL細(xì)胞的膜按照Hopkins等(1991)所述制備。簡單而言，細(xì)胞在4℃(Brinkman PT-20 Polytron，設(shè)定3，在冰上采用1個15秒裂解)下在由50mM Tris-HCl(pH7.4)，5mMKCl，120mMNaCl，10mM EDTA和含義若干蛋白酶抑制劑(1mM苯基甲基磺酰氟；0.1mg/ml大豆胰蛋白酶抑制劑，和1mM碘代乙酰胺)組成的緩沖液中均化。勻漿在1200xg下4℃離心45分鐘以除去細(xì)胞碎片。上清液在48,000xg下4℃離心45分鐘。沉淀用玻璃-特氟龍機(jī)動化勻漿器在重新興奮在30個體積的冰冷50mM Tris-HCl(pH7.4)緩沖液中。
受體結(jié)合試驗與MEL細(xì)胞表達(dá)克隆化NK2受體中[3H]NKA或MEL細(xì)胞表達(dá)克隆化NK1受體中[3H]SP的配體結(jié)合試驗，一般按照Aharony等，Mol.Pharmacol.459-19，1994，Aharony等，Neuropeptides 23121-130(1992)和Aharony等，J.Pharmacol.Exp.Ther.259146-155(1991)所述方法表達(dá)。簡單而言，溫育在含義膜、試驗化合物和[3H]配體(1.0-1.5nM)的試驗緩沖液中進(jìn)行。在競爭性試驗中，含有不同濃度競爭性試劑(激動劑、拮抗劑或載體)的混合物(0.315mL)在25℃下溫育30分鐘，其中含有或不合有1μM未標(biāo)記的同源配體(NKA或SP)，以確定非特異性結(jié)合。反應(yīng)是通過加入膜(0.1-0.15mg蛋白/終濃度)引起并且以一式二份進(jìn)行。飽和和動力學(xué)試驗以一式三份進(jìn)行。通過1mL的洗滌緩沖液(20mMTris-HCl，pH7.5)稀釋、隨后立刻真空過濾并且洗滌緩沖液的總體積為10mL(使用Brandel細(xì)胞收獲器MB-48R和Whatman GF/B濾器預(yù)浸漬在0.1％聚亞乙二胺)進(jìn)行受體結(jié)合的配體和游離配體的分離。
在此公開的化合物抑制[3H]配體的結(jié)合的性能如表1中所示結(jié)果。
體內(nèi)試驗
麻醉豚鼠中BANK誘發(fā)的膀胱收縮雌性豚鼠(300-450g)通過肌肉內(nèi)給予氯胺酮/賽拉嗪混合物(分別是3/10mg/kg)。將頸靜脈插導(dǎo)管并且導(dǎo)管遠(yuǎn)端與適當(dāng)?shù)幕衔锝o藥的注射器相連。隨后，通過中線腹腔切口暴露膀胱，輸尿管用約2cm的4-0絲縫線在膀胱上部扎緊，并且在結(jié)扎線上方切開從而由腎引流。插管通過近端尿道和膀胱括約肌進(jìn)入膀胱腔。用手將膀胱排空，灌注0.3mL鹽水，并且將導(dǎo)管連接于Gould p23 ID壓力傳感器來記錄膀胱壓的變化。約15分鐘的平衡期使單位在手術(shù)準(zhǔn)備后穩(wěn)定化。四氫噻吩(thiorphan)(10mg/kg iv)在激動劑接觸之前15分鐘給藥來抑制中性內(nèi)肽酶3.4.24.11。
為了建立試驗化合物的口服作用，在給予BANK之前1小時通過口飼管試驗給該動物試驗化合物(52nmol/kg，5％ PEG 400-鹽水載體)。記錄在試驗化合物存在下或不存在下出現(xiàn)的膀胱收縮的變化，為Grass7D Polygraph上的膀胱內(nèi)膀胱壓并且表示為響應(yīng)中的變化的百分比。作用持續(xù)時間的研究通過在不同時間在施用BANK之前口服給予試驗化合物(52nmol/kg，5％PEG 400-鹽水載體)進(jìn)行。反應(yīng)計算為在試驗化合物的存在下與擬處理對照下相比的對BANK的反應(yīng)之間差異的百分比。對于所有研究，給各動物施用單劑量的試驗化合物。試驗結(jié)果表示為平均值加或減平均值的標(biāo)準(zhǔn)差(±S.E.M)與基礎(chǔ)水平相比的百分變化。
在此公開的化合物抑制由BANK誘發(fā)的膀胱收縮的性能如表1中所示結(jié)果表示。
表1

本發(fā)明的化合物對于NK2受體是特異性的。在此公開的化合物一般對人體NK2受體表現(xiàn)出比對人體NK1受體100倍或更好的選擇性，如表1中結(jié)果所示。
令人驚奇地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對人體NK2受體具有相似結(jié)合親和性的化合物在測試其對BANK誘導(dǎo)的膀胱收縮的抑制能力時具有不同的效應(yīng)。例如，實施例3和5的化合物在測試其抑制氚代NKA與克隆且表述的hNK2受體的結(jié)合的性能時分別具有的Ki是8.85和8.86-Log摩爾濃度。然而發(fā)現(xiàn)實施例3的化合物對BANK誘導(dǎo)的膀胱收縮產(chǎn)生64％抑制作用，而意外地，發(fā)現(xiàn)實施例5的化合物在BANK誘導(dǎo)的膀胱收縮中產(chǎn)生增強(qiáng)作用。
發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物在實驗室試驗動物中在若干多次的最小有效劑量下沒有顯示任何不良副作用的任何指征。
權(quán)利要求
1.一種治療或預(yù)防對象中膀胱活動過度或尿失禁的方法，包括給該對象施用治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的化合物 其中，A是O或S；R1選自H或C1-4烷基；R2部分獨立地選自H或C1-4烷基；R3選自C1-4烷基；R4選自鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基或氰基，或其藥學(xué)可接受鹽，條件是當(dāng)R1，R2和R4均為H時，R3不是甲基。
2.權(quán)利要求1的方法，包括施用適于治療和預(yù)防OAB和UI的化合物，其中，A是O，R1和R2均為H時，R3是C1-4烷基，和R4選自H或鹵素，條件是當(dāng)R4是H時R3不是甲基。
3.權(quán)利要求1的方法，包括施用其中，A是O，R1，R2和R4均為H，和R3為C2-4烷基的化合物。
4.權(quán)利要求1的方法，包括施用選自下列的化合物(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代-5，5-二甲基-全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(3-乙基-2-氧代全氫-嘧啶-1-基)-哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺；(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶于基]-丁基]-N-乙基苯甲酰胺，和(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫-嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-4-氟-N-甲基苯甲酰胺。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述對象為人。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述的藥學(xué)可接受鹽選自氯化物、硫酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、苯磺酸鹽、磷酸鹽、水楊酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、乙酸鹽和馬來酸鹽。
7.權(quán)利要求1的方法，另外包括聯(lián)合施用一種或多種其他醫(yī)學(xué)相容性治療劑。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述的其他治療劑選自雌激素類藥物、促孕物質(zhì)、α-腎上腺素能激動劑、β-腎上腺素能受體阻滯劑、膽堿能受體阻滯化合物或膽堿能受體興奮藥物。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述的化合物或其藥學(xué)可接受鹽以選自局部給藥、攝取、吸入、吹入或注射的生理可接受方式給藥。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽局部給藥。
11.權(quán)利要求10的方法，包括局部施用約0.1mg/kg-約5mg/kg的所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
12.權(quán)利要求10的方法，包括局部施用含有約0.1mg至最高達(dá)約250mg的所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽的片劑或膠囊。
13.權(quán)利要求9的方法，包括通過吸入將該化合物或其藥學(xué)可接受鹽在5-100mg的日劑量范圍、以單劑量或分為2、3或4個日劑量給藥。
14.權(quán)利要求9的方法，包括施用約0.01mg/kg-約25mg/kg的所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
15.權(quán)利要求1的方法，包括所述的治療有效量是約0.1mg-約250mg的所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽，每天給藥1-4次。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述治療有效量是約5mg～約100mg所述化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述的化合物或其鹽藥學(xué)可接受鹽作為膠囊、片劑、水溶液、水混懸劑、非水混懸劑、栓劑、氣霧劑或散劑給藥。
18.一種用于治療或預(yù)防膀胱活動過度或尿失禁的藥物組合物，含有(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺或其藥學(xué)可接受鹽和至少一種藥學(xué)可接受賦形劑或稀釋劑。
19.(S)-N-[2-(3，4-二氯苯基)-4-[4-(2-氧代全氫嘧啶-1-基)哌啶子基]丁基]-N-甲基苯甲酰胺或其藥學(xué)可接受鹽在制備用于治療或預(yù)防膀胱活動過度或尿失禁的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了使用具有結(jié)構(gòu)式(I)的NK2R結(jié)合性化合物治療或預(yù)防哺乳動物、特別是人體中的OAB或UI，其中A、R
文檔編號C07D401/04GK1622806SQ02826600
公開日2005年6月1日 申請日期2002年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月2日
發(fā)明者R·比亞韋茨基, C·丹茨曼, K·赫爾措格 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司