專利名稱：20－羥基二十碳四烯酸生成抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抑制由花生四烯酸生成20-羥基二十碳四烯酸(20-HETE)的羥基亞胺甲基氨基苯或羥脒基吡啶衍生物。
背景技術(shù)：
關(guān)于由花生四烯酸生成的生理活性物質(zhì)，為人們所熟知的是通過環(huán)加氧酶生成的前列腺素類，和通過脂肪氧化酶生成的白三烯類。但近年來，人們逐漸認(rèn)識到通過屬于細(xì)胞色素p450族的酶由花生四烯酸產(chǎn)生的20-HETE在體內(nèi)有多種作用(J.Vascular Research，volume32，page 79(1995))。到目前為止，已經(jīng)闡明20-HETE收縮或擴(kuò)張微血管，還在主要器官如腎和腦血管中誘導(dǎo)細(xì)胞增殖，還有人提出20-HETE在體內(nèi)發(fā)揮重要生理活性的同時(shí)，還深入?yún)⑴c多種腎臟疾病、腦血管疾病、循環(huán)疾病等的病理過程(J.Vascular Research，volume 32，page 79(1995)；Am.J.Physiol.，volume 277，page R607(1999)；Physiol.Rev.，volume 82，page 131(2002)，等)。
本發(fā)明的目的是提供一種藥物，其抑制20-HETE的生成，后者參與微血管的收縮或擴(kuò)張、在主要器官如腎臟和腦血管中誘導(dǎo)細(xì)胞增殖等。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，經(jīng)過大量的探索和研究，本發(fā)明的發(fā)明人現(xiàn)發(fā)現(xiàn)幾種抑制20-HETE生成的芳香族化合物，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明涉及下式代表的羥基甲瞇化合物或其可藥用鹽。
[其中R1代表取代的嗎啉代、取代的哌啶子基、哌嗪-1-基、取代的哌嗪-1-基、硫代嗎啉-1-基、全氫化吖庚因-1-基、全氫化吖辛因-1-基、四氫吡啶-1-基、吡咯啉-1-基、1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4，5]癸烷-8-基，十氫喹啉-1-基、單或雙(C1-4烷氧基-C1-6烷基)氨基、或單或雙(C1-6羥烷基)氨基；X代表氮原子或CR5代表的基團(tuán)；R2到R5相同或不同，分別代表氫原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、三氟甲基或鹵原子。]本發(fā)明所用的術(shù)語定義如下。取代的嗎啉代指1到3個(gè)C1-4烷基取代的嗎啉代，其實(shí)例是2-甲基嗎啉代、2-乙基嗎啉代、3-甲基嗎啉代、2，6-二甲基嗎啉代、2，3，5-三甲基嗎啉代，其中更優(yōu)選2，6-二甲基嗎啉代。
取代的哌啶子基指C1-4烷基取代的哌啶子基、C1-4烷氧基取代的哌啶子基、羥基取代的哌啶子基、C2-5烷氧羰基取代的哌啶子基、單C2-7烷基氨基羰基或二C2-7烷基氨基羰基取代的哌啶子基、C1-4烷氧基-C1-6烷基取代的哌啶子基、C1-6羥烷基取代的哌啶子基、單C1-4烷基氨基-C1-6烷基或二C1-4烷基氨基-C1-6烷基取代的哌啶子基，其實(shí)例有2-甲基哌啶子基、3-甲基哌啶子基、4-甲基哌啶子基、4-乙基哌啶子基、4-甲氧基哌啶子基、4-羥基哌啶子基、4-甲氧羰基哌啶子基、4-乙氧羰基哌啶子基、4-二甲基氨基羰基哌啶子基、3-二乙基氨基羰基哌啶子基、4-(2-甲氧乙基)哌啶子基、4-(2-羥乙基)哌啶子基、4-(2-二甲基氨基乙基)哌啶子基，其中更優(yōu)選4-羥基哌啶子基、4-(2-羥乙基)哌啶子基、4-乙氧羰基哌啶子基和3-二乙基氨基羰基哌啶子基。
取代的哌嗪-1-基指哌嗪-1-基、C1-4烷基取代的哌嗪-1-基、含4-8個(gè)環(huán)原子的環(huán)烷基取代的哌嗪-1-基、C1-4烷氧基-C1-4烷基取代的哌嗪-1-基、C1-6羥烷基取代的哌嗪-1-基、單C1-4烷基氨基-C1-6烷基或二C1-4烷基氨基-C1-6烷基取代的哌嗪-1-基、吡咯烷-1-基-C1-6烷基取代的哌嗪-1-基、嗎啉代羰基-C1-6烷基取代的哌嗪-1-基、C2-6烷酰基取代的哌嗪-1-基、苯基取代的哌嗪-1-基、吡啶基取代的哌嗪-1-基，其實(shí)例有2-甲基哌嗪-1-基、3-甲基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-乙基哌嗪-1-基、4-環(huán)己基哌嗪-1-基、4-(2-甲氧乙基)哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基、4-(2-二甲基氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基-乙基)哌嗪-1-基、4-(1-嗎啉代羰基甲基)哌嗪-1-基、4-苯基哌嗪-1-基，其中更優(yōu)選4-甲基哌嗪-1-基、4-乙基哌嗪-1-基、4-環(huán)己基哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基、4-(2-二甲基氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基-乙基)哌嗪-1-基、4-(嗎啉代羰基甲基)哌嗪-1-基、4-乙?；哙?1-基、4-苯基哌嗪-1-基和4-(2-吡啶基)哌嗪-1-基。
本發(fā)明中，“Cx-y”指含有x到y(tǒng)個(gè)碳原子的基團(tuán)。
鹵原子是氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
C1-4和C1-6烷基指分別含有1-4和1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。C1-4烷基的實(shí)例有甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基和叔丁基，其中更優(yōu)選甲基。C1-6烷基的實(shí)例是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基和異己基，其中更優(yōu)選甲基和乙基。
C1-4烷氧基指含有1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，其實(shí)例有甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。
C2-5烷氧羰基指含有1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基與羰基結(jié)合組成的取代基，其實(shí)例有甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基和丁氧羰基。
單C2-7烷基氨基羰基或二C2-7烷基氨基羰基指一或二個(gè)含有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基取代的氨基與羰基結(jié)合組成的取代基，其實(shí)例有甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基和二異丁基氨基羰基，其中更優(yōu)選二乙基氨基羰基。
C1-4烷氧基-C1-4烷基指含有1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基與含有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基結(jié)合組成的取代基，其實(shí)例有甲氧甲基、乙氧甲基、甲氧乙基、乙氧乙基、丙氧乙基、異丙氧乙基、丁氧乙基和叔丁氧乙基。
C1-6羥烷基指羥基取代的含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，其實(shí)例有羥甲基、1-羥乙基、2-羥乙基、3-羥丙基和5-羥戊基，其中更優(yōu)選2-羥乙基。
單C1-4烷基氨基-C1-6烷基或二C1-4烷基氨基-C1-6烷基指一或二個(gè)含有1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基取代的氨基與含有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基結(jié)合組成的取代基，其實(shí)例有甲基氨基甲基、1-甲基氨基乙基、2-甲基氨基乙基、3-甲基氨基丙基、4-二甲基氨基丁基、二甲基氨基甲基、1-二甲基氨基乙基、2-二甲基氨基乙基和3-二甲基氨基丙基，其中更優(yōu)選2-二甲基氨基乙基。
含有4到8個(gè)環(huán)原子的環(huán)烷基指環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基，其中更優(yōu)選環(huán)己基。
吡咯烷-1-基-C1-6烷基指吡咯烷-1-基取代的含有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，其實(shí)例有吡咯烷-1-基-甲基、2-(吡咯烷-1-基)乙基、3-(吡咯烷-1-基)丙基和5-(吡咯烷-1-基)戊基，其中更優(yōu)選2-(吡咯烷-1-基)乙基。
嗎啉代羰基-C1-6烷基指嗎啉代羰基取代的含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，其實(shí)例有嗎啉代羰基甲基、2-嗎啉代羰基乙基、3-嗎啉代羰基丙基和5-嗎啉代羰基戊基，其中更優(yōu)選嗎啉代羰基甲基。
這些化合物的熔點(diǎn)、測定的MASS值、TLC的Rf值和展開劑列于表1。在TLC測定中，使用Fuji Silysia Chemical Ltd.制造的SiO2(NH)。
可藥用鹽是與堿金屬、堿土金屬、銨、烷基銨等的鹽，與無機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽。其實(shí)例有鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽、鋁鹽、三乙基銨鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、甲酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、乙基琥珀酸鹽、乳糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽、己二酸鹽、與半胱氨酸的鹽、與N-乙酰基半胱氨酸的鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、氫碘酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、苦味酸鹽、硫代氰酸鹽、十一酸鹽、與丙烯酸聚合物的鹽和與羧乙烯基聚合物的鹽。
本發(fā)明的化合物可用例如下列所示的方法合成。即，下式(a)代表的化合物 (其中，Y是鹵原子，R2、R3、R4和X與上述定義的意義相同)與下式(b)代表的化合物在有或無合適的溶劑存在下反應(yīng)R1H (b)(其中R1與上述定義的意義相同)得到下式(c)代表的化合物。(其中R1、R2、R3、R4和X與上述定義的意義相同。) 然后，在合適的溶劑中(例如甲醇、乙醇、丙醇、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈和乙酸乙酯)，用還原劑(例如，氫氣氣氛中的鈀-活性碳、鈀-活性碳/水合肼、鈀-活性碳/甲酸銨、氯化錫(II)一水合物、鐵/氯化銨和阮內(nèi)鎳/水合肼)將化合物(c)的硝基還原，制得苯胺衍生物(d)。(其中R1、R2、R3、R4和X與上述定義的意義相同。)
然后，化合物(d)與二甲基甲酰胺二甲基縮醛在合適的溶劑(例如，甲醇、乙醇、丙醇、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈和乙酸乙酯)中反應(yīng)2到72小時(shí)，反應(yīng)溫度為室溫到150℃，優(yōu)選70℃到100℃。上文中制備的中間體在合適的溶劑(例如，甲醇、乙醇、丙醇、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈和乙酸乙酯)中用羥胺鹽酸鹽處理，制得式(1)代表的本發(fā)明的化合物。或者，式(d)的化合物與原甲酸酯如原甲酸三甲酯或原甲酸三乙酯在有或無催化劑量的有機(jī)酸如乙酸、無機(jī)酸如鹽酸或胺與無機(jī)酸的鹽如吡啶鹽酸鹽存在下反應(yīng)得到一中間體。反應(yīng)溫度是從室溫到150℃，優(yōu)選70℃到100℃，反應(yīng)時(shí)間是2到72小時(shí)。將其分離或不分離，然后在合適的溶劑(例如，甲醇、乙醇、丙醇、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈和乙酸乙酯)中用羥胺處理，制得式(1)代表的本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明的藥物含式(1)所代表的化合物或其可藥用鹽作為有效成份。這樣的藥物特別用來作為腎臟疾病、腦血管疾病或循環(huán)疾病的治療劑。根據(jù)本發(fā)明的20-HETE生成抑制劑含式(1)代表的化合物或其可藥用鹽作為有效成份，它有效抑制20-HETE的生成。
在治療成人時(shí)，本發(fā)明的藥物、腎臟疾病、腦血管疾病和循環(huán)疾病的治療劑、以及20-HETE生成抑制劑的劑量優(yōu)選為每天1到2000mg式(1)所代表的化合物或其可藥用鹽，可以每天一次性給藥或分幾次給藥。劑量可以根據(jù)用途和患者的年齡、體重、癥狀等適當(dāng)增加或減少。
本發(fā)明的藥物、腎臟疾病、腦血管疾病和循環(huán)疾病的治療劑和20-HETE生成抑制劑可以口服或胃腸外給藥。其劑型是片劑、膠囊劑、顆粒劑、稀釋性粉劑、粉劑、錠劑、軟膏劑、霜?jiǎng)?、乳液劑、混懸劑、注射劑等，所有這些都可以通過常規(guī)制備方法制備(例如，根據(jù)日本藥典第12版修訂本規(guī)定的方法)?？梢愿鶕?jù)患者的癥狀、年齡和治療目的挑選適宜的劑型。在各種劑型的制備過程中，可以使用常用的賦形劑(例如，結(jié)晶纖維素、淀粉、乳糖和甘露醇)、粘合劑(例如，羥丙基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮)、潤滑劑(例如，硬脂酸鎂和滑石)、崩解劑(例如，羧甲基纖維素鈣)等。
本發(fā)明的最佳實(shí)施方式通過下列實(shí)施例將更詳細(xì)地闡明本發(fā)明。
實(shí)施例1N-羥基-N’-(3-氯-4-硫代嗎啉代苯基)甲瞇的合成將3-氯-4-氟硝基苯(0.070g，0.4mmol)和硫代嗎啉(0.165g，1.6mmol)的混合物在70℃攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓濃縮并用硅膠柱色譜(展開劑；氯仿∶甲醇＝9∶1)純化，得到黃色粉狀晶體。向其中加入鐵粉(0.27g，4.83mmol)、異丙醇(0.5ml)和1當(dāng)量的氯化銨水溶液(0.12ml，0.12mol)，隨后在70℃攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，向其中加入四氫呋喃(0.4ml)，用硅藻土濾除不溶物后，用乙酸乙酯(0.4ml)洗滌4次。減壓濃縮濾液并向其中加入甲醇(0.4ml)和二甲基甲酰胺二甲基縮醛(0.095g，0.8mmol)，隨后在70℃攪拌64小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并減壓濃縮，向其中加入甲醇(0.4ml)和羥胺鹽酸鹽(0.033g，0.48mmol)，隨后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮并向其中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(0.4ml)，隨后用乙酸乙酯萃取。減壓濃縮有機(jī)層，用NH型硅膠柱色譜(展開劑正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，并從乙酸乙酯/正己烷中重結(jié)晶得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(0.026g)(在下文表1中的化合物3)。
熔點(diǎn)137.0到138.5℃。
實(shí)施例2N-[2-(嗎啉代)吡啶-5-基]-N’-羥基甲瞇的合成將2-氯-5-硝基吡啶(2g，12.6mmol)和嗎啉(4.4g，55.5mmol)的混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，將從其中析出的結(jié)晶過濾得到黃色粉狀晶體。向其中加入甲醇(30ml)和鈀碳(0.25g)，將混合物在氫氣氣氛中室溫?cái)嚢?小時(shí)。用硅藻土濾除不溶物并減壓濃縮濾液。向所得殘余物中加入甲醇(20ml)和二甲基甲酰胺二甲基縮醛(1.81g，15.2mmol)，隨后攪拌回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓濃縮并向其中加入甲醇(20ml)和羥胺鹽酸鹽(1.05g，15.2mmol)，隨后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮并向其中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，隨后用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，減壓濃縮后，用NH型硅膠柱色譜(展開劑正己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)純化并從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(0.985g)(下文表1中的化合物127)。
熔點(diǎn)172.0到174.0℃。
下表列出的化合物是用相應(yīng)的起始原料按照實(shí)施例1或2相同的反應(yīng)操作合成的。實(shí)施例1和2得到的化合物作為化合物3和化合物127也列于其中。



















試驗(yàn)實(shí)施例[對來源于人類腎臟微粒體的20-HETE-生成酶的抑制作用]對上表所列的化合物，檢測了它們對20-HETE生成的抑制作用。
該實(shí)驗(yàn)是根據(jù)J.Pharmacol.Exp.Ther.，volume 268，page 474(1994)所述方法進(jìn)行的。
用DMSO將試驗(yàn)化合物溶液調(diào)至1μM，加入到含5mM氯化鎂和1mM乙二胺四乙酸(EDTA)鈉的50mM 3-嗎啉代丙磺酸緩沖液(MOPS)(pH7.4)中，然后將人類腎臟微粒體提取物(Human CellCulture Center Anatomic Gift Foundation)、[5，6，8，9，11，12，15]氚-花生四烯酸和NADPH加入其中分別作為酶源、底物和輔酶，反應(yīng)在37℃進(jìn)行1.5小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入甲酸中止反應(yīng)，然后將乙腈加入其中(終濃度50％)。用裝有帶ODS柱的放射活性物質(zhì)探測器的高效液相色譜儀(Biosil C18；Biorad制造)測量這樣生成的20-HETE的量。
不加入化合物時(shí)生成的20-HETE的量被定義為100％，計(jì)算加入化合物后20-HETE的生成被抑制50％時(shí)化合物的濃度(IC50值)。結(jié)果也顯示在上表中。
工業(yè)實(shí)用性式(1)代表的化合物或其可藥用鹽可用作20-HETE生成抑制劑。它還可以作為藥物，特別是作為治療腎臟疾病、腦血管疾病和循環(huán)疾病的藥物。
權(quán)利要求
1.下式代表的羥基甲瞇化合物或其可藥用鹽 其中R1代表取代的嗎啉代、取代的哌啶子基、哌嗪-1-基、取代的哌嗪-1-基、硫代嗎啉-1-基、全氫化吖庚因-1-基、全氫化吖辛因-1-基、四氫吡啶-1-基、吡咯啉-1-基、1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4，5]癸烷-8-基、十氫喹啉-1-基、單或二(C1-4烷氧基-C1-6烷基)氨基、或單或二(C1-6羥烷基)氨基；X是氮原子或CR5代表的基團(tuán)；R2到R5相同或不同，分別代表氫原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基、三氟甲基或鹵原子。
2. 20-羥基二十碳四烯酸生成抑制劑，其含有權(quán)利要求1所述的羥基甲瞇化合物或其可藥用鹽作為有效成分。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的20-羥基二十碳四烯酸生成抑制劑，它是治療腎臟疾病、腦血管疾病和循環(huán)疾病的藥物。
全文摘要
下式代表的羥基甲瞇化合物和其可藥用鹽，式中R
文檔編號C07D213/75GK1633413SQ0280898
公開日2005年6月29日 申請日期2002年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月26日
發(fā)明者佐藤正和, 宮田則之, 石井孝明, 松永結(jié)子, 天田英明 申請人:大正制藥株式會社