本發(fā)明涉及一種納米粒子及其制備方法，特別是一種超小尺寸的、單分散的、親水的，具有生物相容性的金屬硫族化合物納米顆粒(納米晶)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

硫化物因其獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì)在生物醫(yī)藥尤其是抗腫瘤醫(yī)藥的研究中占有非常重要的地位。例如：CuS，Ag₂S因其在近紅外區(qū)有著很好的光熱效應(yīng)常被用作光熱治療劑進(jìn)行研究而CdS與ZnS及其異質(zhì)結(jié)自1998年Chan和Nie及Bruchez等人首次利用CdSe/ZnS和CdSe/CdS量子點(diǎn)成功地標(biāo)記了HeLa細(xì)胞和3T3成纖維細(xì)胞之后便被作為生物成像探針進(jìn)行了深入的研究并取得了長足的發(fā)展。但以上硫化物納米晶的合成還有諸多缺點(diǎn)，下面以CuS納米晶的制備為例進(jìn)行進(jìn)一步說明。

2008年南京大學(xué)的Zhao Yixin等系統(tǒng)的闡述了三種制備Cu_2-xS(x＝1，0.2和0.03)的方法并第一次提出Cu_2-xS在近紅外的吸收是與載流子濃度有關(guān)的等離子體共振吸收而非之前提出的間接帶隙躍遷吸收。這三種方法分別是聲波電化學(xué)合成法(Sonoelectrochemical method)，溶劑熱合成法(Hydrothermal method)和無溶劑熱解(Solventless thermolysis method)，這三種方法合成的納米材料分別具有尺寸不均，分散性差，形貌不規(guī)則，疏水和無生物相容性等缺點(diǎn)。

2012年英國Mark T.Swihart等采取在油胺，油酸和油胺和油酸混合物溶劑體系中分別用氯化亞銅(CuCl)和硫粉(S)制備銅和硫的前體，然后將硫的前提注入銅的前提溶液中制備Cu_2-xS的方法，通過改變反應(yīng)溫度和溶劑的組成分別制備了2.8nm，6.8nm和13.5nm的Cu_2-xS的尺寸均一的單分散的納米顆粒。這種溶劑熱注入的方法有效提高了顆粒的分散性。但此種方法制備的Cu_2-xS在周圍大氣環(huán)境中非常不穩(wěn)定，易被氧氣所氧化，導(dǎo)致在近紅外處的吸收大幅度減弱。

公布號為CN102249291A的發(fā)明專利記載了一種基于羊抗人抗體為軟模板控制合成納米粒子硫化汞的制備方法，其主要是以抗體為模板，先加入汞離子，形成蛋白質(zhì)與汞離子結(jié)合 的復(fù)合物，再加入硫離子，硫離子與蛋白質(zhì)分子上的汞離子結(jié)合形成表面修飾羊抗人抗體的硫化汞納米粒子，但這種技術(shù)還存在一些缺陷，例如硫化汞納米粒子較大(平均粒徑大于10nm)，且不適于在體內(nèi)應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的主要目的在于提供一種超小尺寸金屬硫族化合物納米晶及其親生物合成方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。

為實(shí)現(xiàn)前述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括：

在本發(fā)明的一實(shí)施方案之中提供了一種超小尺寸金屬硫族化合物納米晶(簡稱超小金屬硫族化合物納米晶)的親生物合成方法，其包括：將等電點(diǎn)PI低于9.0的蛋白質(zhì)、金屬鹽于水中均勻混合形成混合溶液，再加入硫源或硒源，經(jīng)反應(yīng)后形成粒徑在10nm以下的超小尺寸金屬硫族化合物納米晶。該實(shí)施方案尤其適于合成ZnS和Ag₂S納米晶等。

在本發(fā)明的一實(shí)施方案之中，所述親生物合成方法還可包括：將蛋白質(zhì)、金屬鹽于水中均勻混合形成混合溶液，并調(diào)節(jié)所述混合溶液至呈堿性，再加入還原劑和硫源，經(jīng)反應(yīng)后形成超小尺寸金屬硫族化合物納米晶。

在一較為具體的實(shí)施方案之中，所述親生物合成方法進(jìn)一步包括：在室溫下將可溶性金屬鹽及蛋白質(zhì)加入水中并拌混合均勻，形成混合溶液，再以堿性物質(zhì)將所述混合溶液調(diào)節(jié)至呈堿性，并持續(xù)攪拌，之后加入還原劑，攪拌至混合溶液變色，然后快速加入硫化物，并調(diào)節(jié)溫度至60～80℃，充分反應(yīng)后冷卻至室溫，獲得所述超小金屬硫族化合物納米晶。

作為較為優(yōu)選的實(shí)施方案之一，所述蛋白質(zhì)可選自牛血清白蛋白(PI＝4.7)，血清白蛋白(PI＝4.7-4.9)，卵白蛋白(PI＝4.95-4.71)，肌清蛋白(PI＝3.5)，γ1-球蛋白(PI＝5.8，6.6，7.3，8.2)γ2-球蛋白(PI＝5.2-5.5)，珠蛋白(PI＝7.5)，伴清蛋白(PI＝6.8，7.1)，肌漿蛋白(PI＝6.3)，β-乳球蛋白(PI＝5.1-5.3),卵黃蛋白(PI＝4.8-5.0)，肌球蛋白(PI＝5.1),原肌球蛋白(PI＝5.9)，鐵傳遞蛋白(PI＝3.4-3.5)，胎球蛋白(PI＝5.5-5.8)，肌紅蛋白(PI＝7.07)，血紅蛋白(人)(PI＝7.23)，血紅蛋白(雞)(PI＝6.92)，血紅蛋白(馬)(PI＝4.6-6.4)，血藍(lán)蛋白(PI＝5.6)，蚯蚓血紅蛋白(PI＝4.3-4.5)，血綠蛋白(PI＝4.6-6.2)，α1-脂蛋白(PI＝5.4)，β1-脂蛋白(PI＝5.9)，β-卵黃脂磷蛋白(PI＝3.75)，血纖蛋白原(PI＝4.8)，α-眼晶體蛋白(PI＝6.0)，β-眼晶體蛋白(PI＝5.1)，花生球蛋白(PI＝3.9)，伴花生球蛋白(PI＝3.7-5.0)，角蛋白類(PI＝4.6-4.7)，還原角蛋白 (PI＝6.5-6.8)，膠原蛋白(PI＝4.8-5.2)，魚膠(PI＝4.7-5.0)，白明膠(PI＝4.0-4.1)，α-酷蛋白(PI＝4.5)，β-酷蛋白(5.8-6.0)，γ-酷蛋白(3.83-4.41)，α-卵清粘蛋白(PI＝1.8-2.7)α1-粘蛋白(PI＝5.5)，卵黃類粘蛋白(PI＝3.2-3.3)，甲狀腺球蛋白(PI＝4)等中性及酸性蛋白，但不限于此。

進(jìn)一步的，所述金屬鹽可以選自銅鹽、鎘鹽、鋅鹽、銀鹽，鐵鹽、鉛鹽或其水合物，例如，銅鹽包括氯化銅及其水合物，硝酸銅及其水合物，硫酸銅及其水合物，醋酸銅及其水合物中的一種或幾種；鎘鹽包括氯化鎘及其水合物、硝酸鎘及其水合物、醋酸鎘及其水合物中的一種或幾種；鋅鹽包括氯化鋅、硝酸鋅及其水合物、醋酸鋅及其水合物中的一種或幾種；銀鹽包括硝酸銀和醋酸銀中的一種或兩種，但不限于此。

進(jìn)一步的，所述還原劑包括水合肼，但不限于此。

進(jìn)一步的，所述硫化物可優(yōu)選自硫化鈉及其水合物，硫化鉀及其水合物，硫化銨及其水合物等，但不限于此。

進(jìn)一步的，本發(fā)明中可采用堿性物質(zhì)將混合溶液調(diào)節(jié)至呈堿性，所述堿性物質(zhì)可以為強(qiáng)堿或者弱堿，例如，強(qiáng)堿包括氫氧化鈉，氫氧化鉀；弱堿包括氨水，但不限于此。

在本發(fā)明的一具體實(shí)施方案之中，一種以蛋白質(zhì)為模板制備超小尺寸金屬硫族化合物納米晶的親生物合成方法可以包括以下步驟：

1)將相應(yīng)的陽離子鹽溶液(CuCl₂、CdCl₂、ZnCl₂、AgNO₃等)與一定量的蛋白質(zhì)分散在水溶液中，室溫?cái)嚢杌旌暇鶆颍?/p>

2)向反應(yīng)體系中注入與步驟1)等體積的堿性溶液，將反應(yīng)體系調(diào)至堿性，繼續(xù)室溫?cái)嚢琛?/p>

3)攪拌5min后，加入85％的水合肼，攪拌2min后溶液變色；

4)快速注入微量的硫化物溶液，升高溫度，反應(yīng)2h后冷卻至室溫得到納米晶膠體溶液；

5)用超濾管，進(jìn)行超濾濃縮和洗滌，將游離的蛋白質(zhì)除去。

其中，ZnS和Ag₂S納米晶的制備不需要第2)和第3)步驟。

在本發(fā)明的一更為具體實(shí)施方案之中提供的超小CuS納米晶合成方法可以包括以下步驟：

1)通過攪拌在室溫下將一定質(zhì)量的蛋白質(zhì)與銅鹽水溶液混合均勻。

2)向以上均勻溶液中注入一定pH值的堿性溶液，將反應(yīng)溶液調(diào)至堿性。

3)注入微量的85％的水合肼使Cu²⁺被還原為Cu₂O。

4)加入硫化物的水溶液，將Cu₂O硫化，即可以得到超細(xì)的CuS納米晶體顆粒。

優(yōu)選的，步驟4)中注入硫化物溶液后，反應(yīng)溫度在56～70℃之間。

在本發(fā)明的一典型實(shí)施例之中，一種CuS納米晶的合成方法可以包括以下步驟：

Ⅰ、銅鹽溶液的配制

稱取一定質(zhì)量的銅鹽將其溶解于去離子水中，制成0.05mol/L銅鹽溶液，具體實(shí)施例中所用的銅鹽為二水合氯化銅(CuCl₂·2H₂O),稱取的CuCl₂·2H₂O的質(zhì)量為231.1mg,加水稀釋，然后置入25ml的容量瓶中，加水至刻度，即制成25ml的0.05mmol/L的CuCl₂溶液。

Ⅱ、硫化物溶液的制備

稱取一定質(zhì)量的硫化物將其溶解于去離子水中，制成320mg/ml的硫化物溶液，具體實(shí)施例中所用的硫化物為九水合硫化鈉(Na₂S·9H₂O)，稱取3490mg的Na₂S·9H₂O溶于5ml水中，攪拌至完全溶解，即得到320mg/ml的Na₂S溶液。

Ⅲ、超小尺寸CuS納米晶的制備

1)取0.05M的CuCl₂溶液1.0mL，牛血清白蛋白(BSA，Mw＝66,430KDa)80mg和24mL去離子水置入100mL的兩頸圓底燒瓶中，在室溫下，磁力攪拌0.5h使其充分混勻。

2)向反應(yīng)體系中注入25ml的NaOH溶液(PH＝9.0)，繼續(xù)室溫?cái)嚢琛?/p>

3)攪拌5min后，加入7.5uL的85％的水合肼，攪拌2min后溶液變?yōu)闇\黃色。

4)快速注入100uL濃度320mg/ml的Na₂S溶液，60℃下，反應(yīng)2h后冷至室溫得到淺綠色溶液。

5)用100KDa的超濾管，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000RPM，進(jìn)行超濾濃縮洗滌，以除去游離的BSA蛋白分子等。

在本發(fā)明的一實(shí)施方案之中還提供了采用前述任一種方法制備的超小尺寸金屬硫族化合物納米晶。

所述納米晶可以是Cu_xS、ZnS、Fe_yS_z、CdS、AgS、Ag₂S、PbS、Cu_xSe或CdSe納米晶等，1≤x<2，0.5≤y/z≤1，尤其優(yōu)選自CuS、CdS、Ag₂S和ZnS納米晶，其粒徑在10nm以下，特別是小于10nm。

在本發(fā)明的一實(shí)施方案之中還提供了所述超小金屬硫族化合物納米晶的用途，例如在制備生物檢測試劑或疾病治療藥劑中的應(yīng)用。

在一實(shí)施例之中提供了一種生物熒光成像制劑，其包含所述超小金屬硫族化合物納米晶。

在一實(shí)施例之中提供了一種光熱治療制劑，其包含所述超小金屬硫族化合物納米晶。

本發(fā)明選擇蛋白質(zhì)為模板制備超小尺寸金屬硫族化合物納米晶，主要是利用蛋白質(zhì)上解離的羧基功能團(tuán)與納米顆粒表面的二價(jià)銅離子離子具有良好配位能力的特性，直接制備與生物相容的的納米顆粒，且還充分利用了蛋白質(zhì)羧基和氨基官能團(tuán)及其在不同pH值下的帶電特性以及其空間結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)了超小尺寸金屬硫族化合物(例如CuS)納米顆粒在水溶液中以及在生物體液及血液中的穩(wěn)定性。

進(jìn)一步的，本發(fā)明采用蛋白質(zhì)，尤其是來自人體的一些蛋白例如血清蛋白，血漿蛋白，血紅蛋白等作為模板，一方面是因其對人體完全相容無毒害作用，另一方面，還因此類蛋白在反應(yīng)過程中至少具有如下作用：一是作為表面活性劑可以控制納米晶的生長、尺寸大小以及形貌；二是蛋白質(zhì)在PH值高于其等電點(diǎn)的溶液環(huán)境中，羧基和氨基發(fā)生解離使蛋白質(zhì)帶負(fù)電，失去氫質(zhì)子的羧基變?yōu)轸人岣?fù)離子，羧酸根離子會(huì)與金屬離子，例如Cu²⁺離子發(fā)生配位，另一部分未參與配位的羧基基團(tuán)實(shí)現(xiàn)了對納米顆粒表面的羧基化，使納米晶穩(wěn)定均勻分散于水環(huán)境中并且蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)一步提高了CuS膠體的穩(wěn)定性；三是未配位自由的羧基基團(tuán)和氨基基團(tuán)可以進(jìn)一步用于交聯(lián)DNA、RNA、熒光分子等功能材料，用于生物醫(yī)學(xué)檢測和治療。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)包括：

(1)本發(fā)明提供的基于蛋白的親生物合成方法，具有反應(yīng)條件溫和，操作簡單，顆粒表面不需額外修飾就可直接用于生物光熱治療等特點(diǎn)；

(2)本發(fā)明提供的超小尺寸金屬硫族化合物納米晶尺寸均勻，分散性好，穩(wěn)定性高并且不需其他表面修飾就有非常好的生物相容性，且還具有光熱效應(yīng)，例如本發(fā)明提供的CuS納米顆粒小于10nm，通過血液循環(huán)就可以達(dá)到生物體各個(gè)組織和器官，而且容易排出體外，對生物體不會(huì)造成危害，是一種低成本的具有很大應(yīng)用前景的用于光熱治療和生物熒光成像的納米材料。

附圖說明

圖1是本發(fā)明一些實(shí)施方案之中合成的典型CuS、CdS、Ag₂S和ZnS納米晶的TEM圖片；

圖2是本發(fā)明一些實(shí)施方案之中合成的生物相容的超細(xì)CuS、CdS、Ag₂S和ZnS納米晶 分散在水溶液中的照片和在390nm激光照射下的丁達(dá)爾效應(yīng)圖片；

圖3是本發(fā)明一實(shí)施方案之中合成的生物相容的超細(xì)CuS納米晶在可見-近紅外光區(qū)范圍內(nèi)的吸收光譜圖；

圖4是本發(fā)明一實(shí)施方案之中以BSA為模板制備的Ag₂S納米晶在可見-近紅外處的吸收光譜圖；

圖5是本發(fā)明一實(shí)施方案之中以BSA為模板制備的CdS和ZnS納米晶在可見-近紅外處的吸收光譜圖；

圖6a-圖6b是本發(fā)明一實(shí)施例之中CuS納米晶水溶液在808nm激光照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖；

圖7a-圖7b是本發(fā)明一實(shí)施例之中Ag₂S納米晶水溶液在808nm激光照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖；

圖8是本發(fā)明一實(shí)施方案之中CuS納米晶和CuS納米晶光熱效應(yīng)對細(xì)胞存活率的影響圖；

圖9是本發(fā)明一實(shí)施方案之中Ag₂S納米晶和Ag₂S納米晶光熱效應(yīng)對細(xì)胞存活率的影響圖；

圖10是本發(fā)明一實(shí)施方案之中MCF-7細(xì)胞經(jīng)不同處理后熒光成像的照片；

圖11是本發(fā)明一實(shí)施方案之中經(jīng)含有Ag₂S納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)之后施加808nm光照后Hela細(xì)胞形態(tài)圖片(圓圈內(nèi)為光照部位)；

圖12是本發(fā)明一實(shí)施方案之中分別向荷4T1瘤老鼠的皮下注入CuS納米晶和Ag₂S納米晶在808nm光照下的小鼠照片。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合若干較佳實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的說明，這些實(shí)施例以本發(fā)明為前提，但本發(fā)明的保護(hù)范圍包括但不限于下列實(shí)施例。

實(shí)施例1以牛血清白蛋白(BSA)為模板制備超小CuS納米晶，包括如下步驟：

1.取0.05mol/L的CuCl₂溶液1.0mL，牛血清白蛋白(BSA，Mw＝66,430KDa)80mg和24mLl去離子水置入100mL的兩頸圓底燒瓶中，在室溫下，磁力攪拌0.5h使其充分混勻,攪拌速度不宜太大，防止蛋白質(zhì)形成大量泡沫。

2.向反應(yīng)體系中注入25ml的NaOH溶液(PH＝9.0)，繼續(xù)室溫?cái)嚢琛?/p>

3.攪拌5min后，加入7.5uL的85％的水合肼，攪拌2min后溶液變?yōu)闇\黃色。

4.快速注入320mg/mL的Na₂S溶液100uL，升溫至60℃，在此溫度下反應(yīng)2h后冷至室溫得到淺綠色溶液。

5.用100KDa的超濾管，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000RPM，進(jìn)行超濾濃縮洗滌，以除去游離的BSA蛋白分子，最后將產(chǎn)品分散到4.0mL的去離子水中備用，得到產(chǎn)品的濃度為1.2mg/mL。

實(shí)施例2以牛血清白蛋白(BSA)為模板制備超小CdS納米晶，包括如下步驟：

1.取0.05mol/L的CdCl₂溶液1.0mL，牛血清白蛋白(BSA，Mw＝66,430KDa)80mg和24mL去離子水置入100mL的兩頸圓底燒瓶中，在室溫下，磁力攪拌0.5h使其充分混勻,攪拌速度不宜太大，防止蛋白質(zhì)形成大量泡沫。

2.向反應(yīng)體系中注入25mL的NaOH溶液(PH＝9.0)，繼續(xù)室溫?cái)嚢琛?/p>

3.快速注入100uL濃度320mg/ml的Na₂S溶液，升溫至60℃，在此溫度下反應(yīng)2h后冷至室溫得到黃色溶液。

4.用100KDa的超濾管，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000RPM，進(jìn)行超濾濃縮洗滌，以除去游離的BSA蛋白分子，最后將產(chǎn)品分散到4ml的去離子水中備用。

實(shí)施例3以牛血清白蛋白(BSA)為模板制備超小尺寸ZnS納米晶，包括如下步驟：

1.取0.05mol/L的ZnCl₂溶液1.0mL，牛血清白蛋白(BSA，Mw＝66,430KDa)80mg和24mL去離子水置入100mL的兩頸圓底燒瓶中，在室溫下，磁力攪拌0.5h使其充分混勻,攪拌速度不宜太大，防止蛋白質(zhì)形成大量泡沫。

2.快速注入100uL濃度320mg/ml的Na₂S溶液，升溫至80℃，在此溫度下反應(yīng)2h后冷至室溫得到無色溶液。

3.用100KDa的超濾管，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000RPM，進(jìn)行超濾濃縮洗滌，以除去游離的BSA蛋白分子，最后將產(chǎn)品分散到4.0mL的去離子水中備用。

實(shí)施例4以牛血清白蛋白(BSA)為模板制備超細(xì)Ag₂S納米晶，包括如下步驟：

1.取0.05mol/L的AgNO₃溶液1ml，牛血清白蛋白(BSA，Mw＝66,430KDa)80mg和24ml去離子水置入100ml的兩頸圓底燒瓶中，在室溫下，磁力攪拌0.5h使其充分混勻,攪拌速度不宜太大，防止蛋白質(zhì)形成大量泡沫。

2.快速注入50uL濃度320mg/mL的Na₂S溶液，升溫至80℃，在此溫度下反應(yīng)2h后冷至室溫得到棕色溶液。

3.用100KDa的超濾管，離心機(jī)轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000RPM，進(jìn)行超濾濃縮洗滌，以除去游離的BSA蛋白分子，最后將產(chǎn)品分散到4.0mL的去離子水中備用。

進(jìn)一步的，本案發(fā)明人還對前述實(shí)施例1-4合成的超小納米晶進(jìn)行了表征和測試，其結(jié)果具體如下：

請參閱圖1所示是本發(fā)明實(shí)施例1-4中合成的典型CuS、CdS、Ag₂S和ZnS納米晶的TEM圖片。

而圖2所示是本發(fā)明實(shí)施例1-4中合成的生物相容的超細(xì)CuS、CdS、Ag₂S和ZnS納米晶分散在水溶液中的照片和在390nm激光照射下的丁達(dá)爾效應(yīng)圖片。

圖3所示是前述生物相容的超細(xì)CuS納米晶在可見-近紅外光區(qū)范圍內(nèi)的吸收光譜圖。

圖4所示是前述以BSA為模板制備的Ag₂S納米晶在可見-近紅外處的吸收光譜圖。

圖5所示是前述以BSA為模板制備的CdS和ZnS納米晶在可見-近紅外處的吸收光譜圖。

圖6a-圖6b是前述CuS納米晶水溶液在808nm激光照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖，其中圖6a為96μg/ml的CuS納米晶水溶液在不同光照功率密度下的溫度變化曲線圖，圖6b為不同濃度的CuS納米晶水溶液在2.8W/cm²功率密度的照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖。

圖7a-圖7b是前述Ag₂S納米晶水溶液在808nm激光照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖，其中圖7a為258μg/ml的Ag₂S納米晶水溶液在不同光照功率密度下的溫度變化曲線圖，圖7b為不同濃度的Ag₂S納米晶水溶液在3.90W/cm²功率密度的照射下溫度隨時(shí)間的變化曲線圖。

圖8是前述CuS納米晶和CuS納米晶光熱效應(yīng)對細(xì)胞存活率的影響圖。

圖9是前述Ag₂S納米晶和Ag₂S納米晶光熱效應(yīng)對細(xì)胞存活率的影響圖。

圖10是本發(fā)明一實(shí)施方案之中MCF-7細(xì)胞經(jīng)不同處理后熒光成像的照片，其中a：Control組；b：施加808nm的激光照射10min，其余條件與Control組相同；c：用含有100ug/ml CuS納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)12h；d：用含有100ug/ml CuS納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)4h后施加功率密度為4.75W/cm²的808nm的光照；e：用含有80ug/ml CuS納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)4h后施加功率密度為4.75W/cm²的808nm的光照：f：用含有50ug/ml CuS納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)4h后施加功率密度為4.75W/cm²的808nm的光照。

圖11是本發(fā)明一實(shí)施方案之中經(jīng)含有Ag₂S納米晶的培養(yǎng)液培養(yǎng)之后施加808nm光照后Hela細(xì)胞形態(tài)圖片(圓圈內(nèi)為光照部位)。

圖12是本發(fā)明一實(shí)施方案之中分別向荷4T1瘤老鼠的皮下注入CuS納米晶和Ag₂S納米晶在808nm光照下的小鼠照片，可以看到，注入納米晶之前，小鼠腫瘤非常明顯，然后分別注入30uL的3.2mg/ml和4.16mg/ml的CuS和A_g2S納米晶的PBS溶液后，在激光密度為1.5W/cm²的808nm光照6分鐘，老鼠的腫瘤在光熱治療下，發(fā)現(xiàn)7天后小鼠的腫瘤塊結(jié)痂消退，10天后無腫瘤再生。

此外，本案發(fā)明人還參照前述實(shí)施例的方法，并利用前述的其它蛋白等進(jìn)行了Cu_xS(1<x<2)，F(xiàn)eS，F(xiàn)e_yS_z，PbS，CuSe，Cu_xSe(1<x<2)以及CdSe納米晶等的合成，經(jīng)表征發(fā)現(xiàn)，其粒徑均小于10nm，而其可見-近紅外吸收光譜及生物學(xué)性能等方面的表現(xiàn)與前述實(shí)施例產(chǎn)品亦基本相似。

需要說明的是，本發(fā)明所揭示的乃較佳實(shí)施例的多種，凡是局部的變更或修飾而源于本發(fā)明的技術(shù)思想而為熟習(xí)該項(xiàng)技術(shù)的人所易于推知的，俱不脫離本發(fā)明的專利權(quán)范圍。