專利名稱：包含植物提取物的皮膚增白組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及皮膚增白組合物，其包含從選自天冬門屬(asparagus)、黑升麻(black cohosh)和它們的混合物的植物獲得的提取物。此提取物可以通過將選自天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分的植物與單獨(dú)的一種溶劑接觸，或通過順序地將植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸而獲得。此組合物適于通過局部施用來外用。本發(fā)明進(jìn)一步涉及這些組合物的美容用途，以及涉及抑制黑素生成的方法。
背景技術(shù)：
皮膚顏色主要由皮膚中黑素的量決定。黑素是存在于皮膚中的褐黑色色素。歸因于色素的暗色，黑素量較少則膚色較白，而黑素量較高則膚色較暗。黑素是通過黑素細(xì)胞中氨基酸酪氨酸氧化成二羥基苯丙氨酸形成的。此反應(yīng)由酪氨酸酶催化。
由于黑素形成中酪氨酸酶的關(guān)鍵作用，對于開發(fā)有效的皮膚增白組合物的許多努力集中于抑制酪氨酸酶作用和活性的物質(zhì)上。例如，已經(jīng)提出了許多組合物，其中包含多種已知的酪氨酸酶抑制劑，例如氫醌、維生素C和其衍生物、曲酸、熊果苷、谷胱甘肽、半胱氨酸和桑樹提取物。包含這些試劑的組合物通過抑制由酪氨酸酶催化的酪氨酸氧化反應(yīng)獲得了皮膚增白效果。
本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物的特定的植物提取物有效地抑制黑素的形成、黑素生成，盡管事實(shí)是此類提取物幾乎或根本不顯示對酪氨酸酶活性的抑制作用。考慮到酪氨酸酶在黑素生成中的關(guān)鍵作用以及在本領(lǐng)域中集中于抑制此酶的研發(fā)努力，這一結(jié)果是令人驚訝并出乎意料的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供適于通過局部施用來外用的皮膚增白組合物。本發(fā)明的組合物包含選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物的植物。此植物提取物可以通過將天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分與單獨(dú)的一種溶劑相接觸獲得，例如CO2，利用超臨界流體萃取。此植物提取物也可以通過順序地將天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸獲得。在理想的具體實(shí)施方案中，植物提取物通過順序地將天冬門屬植物、黑升麻植物或它們的混合物的部分與溶劑強(qiáng)度增高的兩種或多種溶劑順序接觸獲得。
在本發(fā)明的組合物中，理想地，提取物占組合物總量的約0.10％-約20％(wt/wt)。特別理想地，提取物占組合物總量的約0.25％-約15％(wt/wt)。更加理想地，提取物占組合物總量的約0.50％-10％(wt/wt)。
提取物可以從天冬門屬植物、黑升麻植物或它們的混合物的部分獲得。在本發(fā)明組合物中使用的天冬門屬植物的理想部分包括根和枝條部分。相似地，在本發(fā)明組合物中使用的黑升麻的理想部分是根部分。
本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步包含各種化妝用可接受的成分。而且，組合物可以是便于局部施用的制劑形式，例如霜膏、軟膏、泡沫劑、洗劑、硬膏劑和乳劑。
本發(fā)明的組合物在美容學(xué)上可用來使皮膚增白。相應(yīng)地，本發(fā)明也包括組合物的美容用途。
本發(fā)明也包括抑制黑素生成的方法，其包括向皮膚局部地施用本發(fā)明的組合物。
具體實(shí)施例方式
雖然本發(fā)明通過下面的權(quán)利要求來定義，但是對于本發(fā)明的附加的理解可以通過回顧下面的詳細(xì)說明來獲得。
本發(fā)明提供皮膚增白組合物，其包含植物提取物，其中植物選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物。
天冬門屬包括許多種，并且在天冬門屬范圍內(nèi)的任何適宜的天冬門屬植物都可用于本發(fā)明的組合物。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)石刁柏(Asparagus officinalis)提供的提取物在皮膚增白組合物中是尤其有效的。
在組合物中使用的天冬門屬可以是天冬門屬植物的一個或多個部分。理想的部分包括天冬門屬植物的根和枝條部分。當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“根”指天冬門屬植物生命周期的種植部分期間天冬門屬植物地面以下的任何部分。因此，根是植物的任何生存在空氣以下(sub-aerial)的部分。當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“枝條”指在天冬門屬植物生命周期的種植部分期間天冬門屬植物地面以上的任何部分。因此，枝條是植物的任何生存在空氣中的部分。在理想的具體實(shí)施方案中，這些部分是獨(dú)立地使用的并除去其它部分。因此，在理想的具體實(shí)施方式
中，單獨(dú)使用根和單獨(dú)使用枝條。
黑升麻屬包括許多種，并且在黑升麻屬范圍內(nèi)的任何適宜的黑升麻屬植物都可用于本發(fā)明的組合物。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)L.總狀葉升麻(Cimicifuga racemosa L.)提供的提取物在皮膚增白組合物中是尤其有效的。
在組合物中使用的黑升麻可以是黑升麻植物的一個或多個部分。根部分是黑升麻植物的理想部分。當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“根”指黑升麻植物生命周期的種植部分期間的黑升麻植物處于地下的任何部分。因此，根是植物的任何生存在空氣以下的部分。
可以通過將植物細(xì)分為小片來制備植物(天冬門屬、黑升麻或它們的混合物)的提取物。將小片研磨成粉狀形式，例如通過在攪拌機(jī)或其它相似工具中進(jìn)行機(jī)械破裂。如果不使用完整的植物，則首先將所需的部分與植物的剩余部分分離，然后細(xì)分成小片并研磨成粉狀形式?？蛇x擇地，粉狀的天冬門屬和/或黑升麻可以從商業(yè)來源獲得，例如Costec of Lake Zurich，Illinois。
在組合物中使用的提取物是通過將選自天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分的植物與一種或多種溶劑接觸獲得的。理想地，提取物是通過順序地將選自天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分的植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸得到的。當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“順序地接觸”指將植物或它的部分與第一溶劑接觸，除去殘留物，并將殘留物與第二溶劑接觸。此術(shù)語可以包含任何數(shù)量的這些步驟，并且因此可以包含任何數(shù)量的溶劑。所包括的提取步驟的數(shù)量將取決于各種因素，包括在各個步驟獲得的各種級分的抑制黑素生成能力。實(shí)施例1提供了合適的試驗(yàn)方法來測定特定的部分抑制黑素生成的能力。當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“溶劑強(qiáng)度”指溶劑在二氧化硅上的洗脫強(qiáng)度，它是一種溶劑從二氧化硅洗脫一種化合物的速度的定量表示。Paul C.Sadek在HPLC SolventGuide(John Wiley和Sons，196，ISBN 0-471-11855-9)中描述了溶劑強(qiáng)度，其在這里被引入作為參考。
當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“不同溶劑強(qiáng)度”指溶劑具有不同的與二氧化硅的洗脫強(qiáng)度，由ε°(SiOH)表示?；赟iOH的洗脫等級，溶劑可以被粗分為下述類別低溶劑強(qiáng)度(0.00-0.35ε°(SiOH))；中等溶劑強(qiáng)度(0.36-0.55ε°(SiOH))；高溶劑強(qiáng)度(0.56-0.75ε°(SiOH))和極高溶劑強(qiáng)度(＞0.76ε°(SiOH))。
理想地，通過將植物(天冬門屬、黑升麻或它們的混合物)與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸來獲得提取物。當(dāng)使用兩種或多種溶劑時(shí)，理想的是按照溶劑強(qiáng)度增高的順序來安排溶劑。因此，理想地，按照溶劑強(qiáng)度增高的順序?qū)⒅参锘蚱洳糠猪樞虻嘏c不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑相接觸。例如，理想地，將植物或其部分與低溶劑強(qiáng)度，中等溶劑強(qiáng)度和高溶劑強(qiáng)度溶劑相接觸。也可以加入極高溶劑強(qiáng)度的溶劑。
如果使用單獨(dú)的一種溶劑，理想的是此單獨(dú)的一種溶劑包含不同溶劑強(qiáng)度的成分。例如，理想的是此單種溶劑包含具有低、中等和高溶劑強(qiáng)度的成分。合適的溶劑是CO2，使用超臨界流體萃取技術(shù)。在這一具體實(shí)施方案中，CO2理想地通過壓力和溫度被壓縮到它的臨界點(diǎn)。通過溫度和/或壓力的改變，CO2的密度可以進(jìn)一步被改變來產(chǎn)生具有不同密度的液體CO2樣本，其顯示寬范圍的溶劑強(qiáng)度。然后使用這些樣本來提取天冬門屬。理想的是使用CO2和超臨界流體萃取技術(shù)，因?yàn)槠湓试S使用單獨(dú)的一種溶劑，并且在提取后CO2揮發(fā)，消除了分離步驟。表面活性劑，例如陰離子的、陽離子的、兩性的和非離子的表面活性劑也可以被用作溶劑。
可以使用多種溶劑來獲得用于本發(fā)明組合物的植物提取物。所選擇的溶劑只要能生產(chǎn)出具有理想的黑素生成抑制作用的提取物。合適的低溶劑強(qiáng)度的溶劑的例子(即ε°(SiOH)0.00-0.35)包括低級脂族烴(例如己烷、礦物油)、脂族醇(例如十二烷醇)、芳香烴(例如甲苯)、氯化烴(例如氯仿、二氯甲烷)、脂族酯(例如植物油、肉豆蔻酸異丙基酯)，脂族醚(例如二辛?；?和硅酮油(例如甲基聚硅氧烷(methicone)，環(huán)聚二甲基硅氧烷(cyclomethicone)，二甲基聚硅氧烷)。
合適的中等溶劑強(qiáng)度的溶劑的例子(即ε°(SiOH)0.36-0.55)包括中等輕酮(light ketone)(例如丙酮、甲基乙基酮)、輕醚(例如乙醚、四氫呋喃、二氧六環(huán))，輕酯(例如，乙酸乙酯)、烷撐二醇(例如丁二醇(butylene)，丙二醇(propylene))、多元醇(例如山梨醇、甘油)，甘醇醚(例如二甲基異山梨醇、乙氧基二甘醇)、乙氧基化物(例如PEG-8)和丙氧基化物(例如PPG-9)。
合適的高溶劑強(qiáng)度的溶劑的例子包括高輕醇，例如甲醇、乙醇和異丙醇。
合適的極高強(qiáng)度的溶劑的例子(即ε°(SiOH)＞0.76)包括水和其它水基溶劑和溶劑混合物，例如含水乙醇(hydroethanol)。
如上所指出的，尤其理想的是通過增加溶劑強(qiáng)度等級來安排溶劑。
當(dāng)在這里使用時(shí)，術(shù)語“含水乙醇(hydroethanol)”指乙醇和水的混合物。任何乙醇與水的合適比例都可用來制備含水乙醇。理想的混合物包含一部分乙醇和一部分水。
如上所指出的，理想地，通過順序地將選自天冬門屬、黑升麻、它們的混合物或它們的部分的植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑相接觸來獲得提取物。下面的方法適于獲得在本發(fā)明中使用的提取物。將如上所述獲得的粉狀植物物質(zhì)與第一溶劑接觸。這一制備用超聲處理來促進(jìn)提取，然后離心來分離殘留物和提取物。除去第一提取物并通過干燥法來干燥殘留物。下一步，將殘留物與第二溶劑相接觸。這一制備是再一次超聲處理并離心。除去第二提取物，并通過干燥法來干燥剩余的殘留物。通過順序地與其它溶劑接觸來進(jìn)一步地提取殘留物。對于這些步驟中的每一個，提取方法都等同于對最初兩種溶劑的描述。
如果使用單種溶劑，可以將如上所述獲得的粉狀物質(zhì)與溶劑接觸，并在提取后與殘留物分離，其可以包括促進(jìn)提取的步驟，例如超聲處理。
在這一程序后，獲得了四種提取物，可以單獨(dú)地評價(jià)其抑制黑素生成的能力。實(shí)施例1提供了合適的試驗(yàn)方法來測定提取物抑制黑素生成的能力。任何這些提取物都可用于本發(fā)明的皮膚增白組合物中。
皮膚增白組合物中存在的提取物的量取決于數(shù)種因素，包括抑制黑素生成的預(yù)期水平，對特定提取物的特定制備的生產(chǎn)量和其它因素。理想地，提取物為組合物總量的約0.10％-約20％(wt/wt)。尤其理想地，提取物為組合物總量的約0.25％-約15％(wt/wt)。更加理想地，提取物為組合物總量的約0.50％-10％(wt/wt)。
本發(fā)明還提供了包含皮膚增白組合物的制劑。組合物可以被制備成各種形式，理想地是被制備成便于局部施用的形式。因此，制劑的合適的形式包括膏霜、軟膏、泡沫劑、洗劑、硬膏劑、凝膠和乳劑。
在各種制劑中，可以加入各種已知的常規(guī)化妝品成分。在組合物中使用的任何添加成分必須無刺激，并不應(yīng)不利地影響預(yù)期的黑素生成的抑制作用?？梢园ǖ奶砑映煞值囊粋€例子是常規(guī)的化妝用可接受的介質(zhì)?？梢允褂枚喾N介質(zhì)。合適的介質(zhì)的例子包括維持提取物在液體形式下為溶解的和均質(zhì)的狀態(tài)的那些。理想的介質(zhì)的具體例子包括丙二醇和丁二醇。其它合適的化妝用可接受的成分的例子包括醇、脂肪和油、表面活性劑、脂肪酸、硅油、濕潤劑、增濕劑、粘度調(diào)節(jié)劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、著色劑和香料。
本發(fā)明的組合物尤其適用于局部施用及用作皮膚增白劑。因此，本發(fā)明也包括本發(fā)明組合物的美容用途。具體地，本發(fā)明包括包含選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物提取物的組合物的美容用途，此提取物是通過順序地將選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物與不同極性的兩種或多種溶劑接觸得到的。而且，本發(fā)明具體地包括下面的組合物的美容用途，所述組合物包含選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物的部分的低溶劑強(qiáng)度溶劑的提取物，以及包括下面的組合物的美容用途，所述組合物包含選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物的部分的極高溶劑強(qiáng)度溶劑(例如含水乙醇)的提取物。理想地，低溶劑強(qiáng)度溶劑提取物包括選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物根部分的提取物，并且極高溶劑強(qiáng)度溶劑提取物包括選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物枝條部分提取物。
本發(fā)明還提供了抑制黑素生成的方法。此方法包括向皮膚局部地施用組合物，所述組合物包含選自天冬門屬、黑升麻和其混合物的植物提取物。理想地，提取物是選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物的植物的根的低溶劑強(qiáng)度溶劑提取物或是選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物的植物的枝條的極高溶劑強(qiáng)度溶劑提取物。理想地，提取物也可以通過順序地將選自天冬門屬、黑升麻和它們的混合物的植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑相接觸獲得。尤其理想地，通過順序地將植物(天冬門屬、黑升麻或它們的混合物)與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑按照溶劑強(qiáng)度升高的順序接觸獲得。
在此方法中，局部施用的頻率將取決于數(shù)種因素，包括抑制黑素生成的預(yù)期水平。理想地，本發(fā)明組合物可以每天兩次被施用于皮膚，并且尤其理想的是早上施用一次，晚上施用一次。在每次施用中使用的組合物的量也取決于數(shù)種因素，包括抑制黑素生成的預(yù)期水平和組合物中提取物的含量。
本發(fā)明還提供了用于抑制黑素生成的組合物和方法中可接受的植物提取物測定方法。此方法包括順序地將植物或其部分與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸，分離至少兩種分離提取物并單獨(dú)地評價(jià)每一提取物抑制黑素生成的能力。
實(shí)施例實(shí)施例1--黑素生成的抑制作用使用已知測定法的修改版本來測定各種提取物體外抑制黑素生成的能力(見Dooley，T.P.等，Skin Pharmacol.7188-200(1994)，其在這里全文引入以測定抑制黑素生成的能力。簡言之，將由小鼠得到的存活黑素細(xì)胞(M3，ATCC，Memasis，Virginia)在F12K培養(yǎng)基(Invitrogen，Carlsbad，Califomia)中生長，其中添加了10％胎牛血清、100nM12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯和1nM霍亂毒素。在最初處理前將細(xì)胞置于六孔微滴定板上24小時(shí)。通過向培養(yǎng)基中添加等分量的試驗(yàn)樣品來用各種試驗(yàn)樣品處理細(xì)胞。在第1、3和5天進(jìn)行處理。在第6天，利用1N NaOH從培養(yǎng)基中提取黑素。利用分光光度計(jì)測量法在405nm通過光密度測定提取的黑素的相對量。計(jì)數(shù)在200X放大率的顯微鏡視野下存在的黑素細(xì)胞以視覺測定細(xì)胞的顏色。
表1提供了分析的結(jié)果，其中測定了各種提取物抑制黑素生成的能力，包括陽性和陰性對照。數(shù)據(jù)清楚地顯示，所有被評價(jià)的提取物盡管不能抑制酪氨酸酶的活性(數(shù)據(jù)未顯示)，但是都能抑制黑素生成。
表1

權(quán)利要求
1.局部施用的皮膚增白組合物，其包含植物提取物，其中植物提取物是通過順序地將選自天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸得到的。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中天冬門屬包括石刁柏。
3.權(quán)利要求1的組合物，其中黑升麻包括Cimicifugo racemosa L.。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中植物包括天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的部分。
5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述部分包含根。
6.權(quán)利要求1的組合物，其中兩種或多種溶劑是按照溶劑強(qiáng)度增加的順序。
7.權(quán)利要求1的組合物，其中組合物是選自膏霜、軟膏、泡沫劑、洗劑、硬膏劑、凝膠和乳劑的制劑。
8.皮膚增白組合物，包含選自天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的植物的超臨界CO2提取物。
9.皮膚增白組合物，包含選自天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的植物的含水乙醇提取物。
10.用于制備增白皮膚的組合物的如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所定義的組合物。
11.用于抑制黑素生成的如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所定義的組合物。
全文摘要
皮膚增白組合物，其包括選自天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的植物提取物，此提取物是通過順序地將所述植物或其部分與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種溶劑接觸獲得的?？梢詥为?dú)地使用植物的根和枝條部分來獲得提取物。此組合物可局部地施用于人類皮膚并可以進(jìn)一步包含一種或多種化妝用可接受的成分。抑制黑素生成的方法，包括向皮膚局部地施用包含選自天冬門屬、黑升麻或它們的混合物的植物提取物的組合物，此提取物是通過順序地將所述植物與不同溶劑強(qiáng)度的兩種或多種的溶劑接觸獲得的。
文檔編號A61Q19/00GK1568935SQ20041004510
公開日2005年1月26日 申請日期2004年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月16日
發(fā)明者J·C·萊維雷特, S·R·米斯勒, H·羅-施密德特, A·錢德拉 申請人:通達(dá)商業(yè)集團(tuán)國際公司