專利名稱：含有桑樹提取物和類視色素的化妝用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有桑樹提取物與類視色素的化妝用組合物，也涉及應(yīng)用此種組合物調(diào)理皮膚的方法。
視黃醇(維生素A)為人體內(nèi)自然產(chǎn)生的內(nèi)生化合物，是正常的上皮細(xì)胞分化所必需的。已廣泛地將天然的和合成的維生素A衍生物用于治療多種皮膚病癥，并用作皮膚修復(fù)和再生劑。已采用視黃酸治療多種皮膚病如痤瘡、皺紋、牛皮癬、老年斑和皮膚變色。
在細(xì)胞內(nèi)，視黃醇和視黃酸與特定的細(xì)胞結(jié)合蛋白結(jié)合在一起，其中兩種主要的蛋白質(zhì)為CRABP-1和CRABP-2(Roos等，Pharmacological reviews50，315-333，1998)。這些蛋白質(zhì)通過在類視色素的新陳代謝中作為貯藏和穿梭蛋白，來調(diào)節(jié)類視色素的細(xì)胞內(nèi)濃度。此蛋白質(zhì)的濃度由細(xì)胞內(nèi)視黃酸的含量調(diào)節(jié)。類視色素的較高細(xì)胞含量增加CRABP-2的表達(dá)。因此，細(xì)胞內(nèi)該蛋白質(zhì)的含量是對(duì)細(xì)胞的類視色素活性的衡量。皮膚細(xì)胞在表皮和真皮中都含有CRABP-2。CRABP-2在體外對(duì)成纖維細(xì)胞中類視色素給藥的反應(yīng)可被用作類視色素生物活性(它可預(yù)測(cè)人類皮膚的反應(yīng))的可再現(xiàn)衡量(Elder等，J.Invest.Dermatol.，106517-521，1996)。因此，成纖維細(xì)胞的CRABP-2表達(dá)是對(duì)類視色素活性的衡量，所述類視色素活性導(dǎo)致多種因使用化妝品而使皮膚得到的益處(抗老化、抗皺紋、皮膚調(diào)理等)。
含桑樹和類視色素的化妝用組合物在本領(lǐng)域是已知的。例如，參見EP 815838(Shiseido)、EP 887070(Kibun Food Chemifa Co.)、US5,676,948、US 5,676,949和US 5,607,692。US 5332575描述了一種以黑素細(xì)胞為目標(biāo)的方法，所述方法用含有巖藻糖殘基的化合物將所述產(chǎn)品結(jié)合到黑素細(xì)胞膜上。舉出了含有0.5％水平干桑樹根樹皮提取物的化妝用組合物。在另一實(shí)施例中，采用了β-胡羅卜素或0.25維生素A丙酸酯。
本發(fā)明基于下述發(fā)現(xiàn)即桑樹提取物與經(jīng)選擇的類視色素在以特定的比例范圍混合時(shí)，表現(xiàn)出協(xié)同作用。
本發(fā)明包括一種化妝用皮膚護(hù)理組合物，它包括(i)桑樹樹根的二醇類(glycolic)提取物，含量為0.00001到10％重量；(ii)選自乙酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和亞油酸視黃酯的類視色素，以及(iii)化妝上可接受的載體，其中乙酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶80到120∶1；亞油酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶8到120∶1，棕櫚酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶16到6∶1。
本發(fā)明還包括一種化妝方法，該方法改善或預(yù)防有皺紋、褶皺、干燥、起皮、老化或光損害皮膚的狀態(tài)，并且改善皮膚厚度、彈性、柔軟性、光澤、紅暈(glow)和飽滿度。所述方法包括將本發(fā)明組合物涂抹到皮膚上。打算將本發(fā)明的組合物局部涂抹于已干燥、起皮、褶皺、有皺紋、老化、光損害的哺乳動(dòng)物皮膚，或者可預(yù)防性地涂抹本發(fā)明的組合物以減少惡化性的變化。
應(yīng)當(dāng)理解除在實(shí)例中、或者明確地指明之處外，此說明書中表示材料或反應(yīng)條件、材料的物理性能和/或應(yīng)用的數(shù)字均用詞語“大約”修飾。除非特別指明，所有數(shù)量均為所述組合物的重量比。
適于在本發(fā)明中采用的桑樹提取物為來自白桑樹樹根的二醇類提取物。白桑樹也稱為Morus alba。所述提取物可從Bioland(SouthKorea)獲得。
通常，本發(fā)明組合物中桑樹提取物的用量為所述組合物的0.001％到20％重量。為降低成本并使效果最佳，優(yōu)選所述桑樹提取物的用量在0.01％到10％的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在0.1％到5％的范圍內(nèi)。
本發(fā)明組合物還包括選自乙酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和亞油酸視黃酯的類視色素。已發(fā)現(xiàn)當(dāng)將類視色素與桑樹提取物以特定的重量比結(jié)合時(shí)，這些類視色素與桑樹提取物協(xié)同地發(fā)揮作用；乙酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比在1∶80到120∶1的范圍內(nèi)，優(yōu)選1∶8到12∶1，最優(yōu)選1∶8到1.2∶1；亞油酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比在1∶8到120∶1的范圍內(nèi)，優(yōu)選1∶8到12∶1，最優(yōu)選1∶8到1.2∶1，棕櫚酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比在1∶16到6∶1的范圍內(nèi)，優(yōu)選1∶8到8∶1，最優(yōu)選1∶8到1.2∶1。
本發(fā)明的組合物還包括化妝上可接受的載體，以用作所述組合物中的桑樹提取物和類視色素的稀釋劑、分散劑或載體，從而在將所述組合物涂抹于皮膚時(shí)促進(jìn)它們的分散。
載體(不是水的，或者除水之外還含有的)可包括液態(tài)或固態(tài)的潤(rùn)膚劑、溶劑、濕潤(rùn)劑、增稠劑和粉末。一種特別優(yōu)選的非含水載體為聚二甲基硅氧烷和/或聚二甲基苯基硅氧烷。本發(fā)明的硅氧烷可為那些在25℃下粘度為大約10到10,000,000mm2/s(厘沲)的硅氧烷。特別理想的是低粘度和高粘度硅氧烷的混合物。這些硅氧烷可從GeneralElectric Company(以商標(biāo)Vicasil、SE和SF)以及Dow CorningCompany(在200和550系列中)獲得?？捎糜诒景l(fā)明組合物的硅氧烷的用量為所述組合物的5％到95％重量，優(yōu)選25％到90％重量。
所述化妝上可接受的載體通常占所述組合物的5％到99.9％、優(yōu)選25％到80％重量，并且在不存在其它化妝用添加劑時(shí)可以構(gòu)成所述組合物的剩余部分。優(yōu)選所述介質(zhì)為至少80％重量的水(以所述介質(zhì)的重量計(jì))。優(yōu)選水占本發(fā)明組合物的至少50％重量，最優(yōu)選60到80％重量(以所述組合物的重量計(jì))。
所述組合物可任選含有對(duì)皮膚有益的物質(zhì)和化妝用添加劑。可以與乳化劑一起存在油或油性物質(zhì)，以提供油包水乳狀液或者水包油乳狀液，這在很大程度上取決于所用乳化劑的平均親水性-親油性平衡(HLB)。
優(yōu)選本發(fā)明組合物包括防曬劑。防曬劑包括那些通常用于阻隔紫外線的物質(zhì)。示例性的化合物為PABA、肉桂酸酯和水楊酸酯的衍生物。例如，可采用甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯酮(也稱羥基甲氧基二苯甲酮(oxybenzone))。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯酮可分別以商標(biāo)Parsol MCX和Benzophene-3得到。在所述乳狀液中采用的防曬劑的準(zhǔn)確含量可根據(jù)對(duì)太陽紫外輻射的預(yù)期防護(hù)程度而變化。
經(jīng)常將潤(rùn)膚劑結(jié)合到本發(fā)明的化妝用組合物中。這些潤(rùn)膚劑的水平可為總組合物的0.5％到50％重量，優(yōu)選在5％至30％重量之間?？蓪?rùn)膚劑按照通用的化學(xué)種類劃分為酯、脂肪酸和醇、多元醇和烴。
酯可以為單酯或二酯。脂肪二酯的可接受的例子包括己二酸二丁酯、癸二酸二乙酯、二聚酸的二異丙酯(diisopropyl dimerate)和丁二酸二辛酯?？山邮艿闹ф溨觉グㄈ舛罐⑺?-乙基-己基酯、硬脂酸異丙酯和棕櫚酸異硬脂醇酯?？山邮艿娜狨グㄈ齺営退崛惐ズ蜋幟仕崛鹿瘐??？山邮艿闹辨溨觉グㄗ貦八嵩鹿瘐?、乳酸肉豆蔻酯和油酸硬脂醇酯。優(yōu)選的酯包括椰油-辛酸酯/癸酸酯(椰油-辛酸酯和椰油-癸酸酯的摻混物)、丙二醇肉豆蔻醚乙酸酯、己二酸二異丙酯和辛酸十六酯。
合適的脂肪醇和酸包括那些具有10到20個(gè)碳原子的化合物。特別優(yōu)選的是諸如十六烷基、肉豆蔻基、棕櫚基和硬脂基醇和酸的化合物。
多元醇中可用作潤(rùn)膚劑的為線性或支鏈烷基多羥基化合物。例如，優(yōu)選丙二醇、山梨醇和甘油。聚合多元醇如聚丙二醇和聚乙二醇也是有用的。也特別優(yōu)選采用丁二醇和丙二醇作滲透增強(qiáng)劑。
可用作潤(rùn)膚劑的示例性烴為那些具有12到30個(gè)碳原子的烴鏈的物質(zhì)。具體例子包括礦物油、礦脂、角鯊烯和異構(gòu)烷烴。
可存在于本發(fā)明的化妝用組合物之內(nèi)的另一類功能成分為增稠劑。增稠劑的含量通常為所述組合物的0.1到20％重量，優(yōu)選大約0.5％到10％重量。示例性的增稠劑為交聯(lián)聚丙烯酸酯材料，可以商標(biāo)Carbopol從B.F.Goodrich Company獲得?？墒褂脴淠z，諸如黃原膠、角叉菜聚糖、明膠、刺梧桐樹膠、果膠和刺槐豆膠。在特定環(huán)境下，可以通過也作為硅氧烷或潤(rùn)膚劑的材料來實(shí)現(xiàn)增稠功能。例如，超過10厘沲的硅氧烷膠和諸如硬脂酸甘油酯的酯類具有雙重功能。
粉末可以被結(jié)合到本發(fā)明的化妝用組合物中。這些粉末包括白堊、滑石、高嶺土、淀粉、綠土粘土、化學(xué)改性的硅酸鋁鎂、有機(jī)改性的蒙脫石粘土、水合硅酸鋁、熱解法二氧化硅、淀粉辛烯基丁二酸鋁及其混合物。
其它添加劑次要成分也可被結(jié)合到所述化妝用組合物中。這些成分可包括著色劑、遮光劑和香料。這些其他添加劑次要成分的含量為所述組合物的0.001％到高達(dá)20％重量。
本發(fā)明的組合物主要打算作為一種用于人類皮膚的局部化妝用產(chǎn)品，特別是作為調(diào)理、增濕和光滑皮膚，并預(yù)防和減少出現(xiàn)褶皺、有皺紋的或老化皮膚的試劑。
在使用中，可從適合的容器中或涂敷器中將少量所述組合物(例如1到100ml)涂抹于皮膚的暴露部位，并且如有必要，再用手或手指或合適的器具將其抹開和/或按摩使其滲入皮膚。
可將本發(fā)明的局部皮膚處理組合物制成洗劑、乳膏或凝膠?？蓪⑺鼋M合物包裝在合適的容器中以配合其粘度和顧客的預(yù)期用途。例如，可將洗劑或乳膏包裝在瓶中或滾珠涂敷器、或推力驅(qū)動(dòng)式噴霧裝置(propellant-driven aerosol device)或裝有適于手指操作的泵的容器中。當(dāng)組合物為膏霜時(shí)，可簡(jiǎn)單地將其儲(chǔ)存在不會(huì)變形的瓶子或擠壓式容器如軟管或有蓋的廣口容器中。所述組合物也可被裝進(jìn)膠囊中，如被結(jié)合到本文作為參考的美國(guó)專利第5,063,057號(hào)中所描述的膠囊。因此本發(fā)明也提供裝有本文所定義的化妝上可接受的組合物的密閉容器。
以下具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明并不局限于此。在所有實(shí)施例中，白藜蘆醇從Sigma獲得。類視色素從Sigma獲得。采用student“t-檢驗(yàn)”計(jì)算所有p值。
實(shí)施例采用了下述方法(1)細(xì)胞培養(yǎng)方法采用了從一個(gè)25-30歲女性自愿者的未受日曬的內(nèi)臂獲得的人成體成纖維細(xì)胞。將細(xì)胞在含10％ FBS的1∶1 DMEM/Hams F12介質(zhì)中培養(yǎng)，所述介質(zhì)保持在37℃、正常大氣氧壓力下的5％ CO2氣氛中。將第三代成體成纖維細(xì)胞用含10％ FBS的DMEM介質(zhì)培養(yǎng)于12孔板中，種密度為40,000細(xì)胞/ml/孔。將80％融合的所述細(xì)胞在無血清和無酚紅(PRF)的DMEM介質(zhì)中清洗兩次，用植物活性劑(phyto-active)預(yù)處理4小時(shí)，用類視色素給藥，并孵育48小時(shí)。
孵育后，將所述孔用1×PBS沖洗兩次，并在100μl細(xì)胞裂解緩沖液(含1×PBS、1％ TritonX、0.5％脫氧膽酸鈉、含0.1％ SDS的蛋白酶抑制劑(在異丙醇中的10mg/ml PMSF，10μl/ml))中收獲所述細(xì)胞單層。將所述懸浮液以14000rpm離心10分鐘，收集上清液，并將所述上清液的等分試樣用于蛋白質(zhì)的量化。用Pierce蛋白質(zhì)盒(protein kit)確定所述蛋白質(zhì)的濃度。將100μl上清液的其余部分(細(xì)胞溶解物)在40μl樣品緩沖液(NOVEX)和0.5％β巰基乙醇(BME)的混合物中煮沸5分鐘而使其變性。隨后將等量的蛋白質(zhì)加入到16％三-甘氨酸凝膠上用十二烷硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS page)分析蛋白質(zhì)，用蛋白質(zhì)印跡法分析CRABP-2蛋白質(zhì)表達(dá)。
3.檢測(cè)成纖維細(xì)胞的細(xì)胞視黃酸結(jié)合蛋白2(CRABP-2)和豬皮活組織檢查為測(cè)量在成纖維細(xì)胞和如上述制備的豬皮提取物中CRABP-2的含量，將所述細(xì)胞上清液再懸浮于4X樣品緩沖液和10％ BME中，煮沸5分鐘并用于蛋白質(zhì)印跡法。將等量的蛋白質(zhì)加入到16％三-甘氨酸凝膠上用十二烷硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和蛋白質(zhì)印跡法分析CRABP-2蛋白質(zhì)。將所述凝膠轉(zhuǎn)移到硝基纖維素印跡(blot)上，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序采用CRABP-2的單克隆抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡法。采用由Santa Cruz Biotechnology(SantaCruz，CA)獲得的化學(xué)發(fā)光體系使CRABP-2蛋白質(zhì)帶(band)在Western印跡中可見。通過光密度掃描對(duì)所述膜中的帶進(jìn)行量化，計(jì)算由三份樣品得到的數(shù)據(jù)，作為對(duì)照品的％，并在下表中表示為三個(gè)樣品相對(duì)于對(duì)照品(將對(duì)照品作為100％)的增大％+/-SD。
1.計(jì)算類視色素桑樹的比例在這些研究中采用的桑樹提取物含有2％固體。因此，在這些研究中加入到1ml介質(zhì)中的1μl桑樹提取物對(duì)應(yīng)于0.1％提取物×0.02％固體＝0.002％桑樹固體。
1μm類視色素對(duì)應(yīng)于大約500μg/升視黃酯；即等于50μg/100ml或0.00005％視黃酯。
因此在該體外分析體系中所用的1μm類視色素1μl桑樹提取物的比例為0.00005∶0.002或1∶80。
在下表1中列出了在本專利申請(qǐng)中所描述的體外研究中采用的類視色素與桑樹的不同比例，以及在可用于皮膚護(hù)理產(chǎn)品的配方中適合該比例的類視色素與桑樹的可能濃度。
表1
從表1中可看出，所述比例包括類視色素的0.007％到1.2％，桑樹提取物的0.5％到8％的有用范圍。
下表2-10表示在采用不同比例(1∶80(表2、3)、1∶16(表4)、1∶8(表5)、1∶16(表6)、1.2∶1(表7)、6∶1(表8)、12∶1(表9)或120∶1(表10))的亞油酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和乙酸視黃酯與桑樹提取物的試驗(yàn)中成纖維細(xì)胞的CRABP-2表達(dá)。表11對(duì)表2-10的數(shù)據(jù)進(jìn)行了總結(jié)。
表21μM視黃酯和1μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶80)
表3100nM視黃酯和0.1μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶80)
表4500nM視黃酯和0.1μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶16)
表51μM視黃酯和0.1μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶8)
表6500nM視黃酯和0.01μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶1.6)
表7100nM視黃酯和0.001μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝1∶0.8或1.2∶1)
表8500nM視黃酯和0.001μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝6∶1)
表910μM視黃酯和0.01μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝12∶1)
表1010μM視黃酯和0.001μl桑樹提取物(類視色素∶桑樹＝120∶1)
表11
總體而言，在皮膚細(xì)胞中，乙酸視黃酯與桑樹提取物在1∶80到120∶1的比例下表現(xiàn)出協(xié)同效果。亞油酸視黃酯在1∶8到120∶1、棕櫚酸視黃酯在1∶16到6∶1內(nèi)表現(xiàn)出協(xié)同效果。
應(yīng)當(dāng)理解本文中舉例說明和描述的本發(fā)明的具體形式只是代表性的?？稍诓槐畴x本說明書的清晰指導(dǎo)下對(duì)舉例說明的實(shí)施方案作出更改(包括但不限于本說明書中的建議)。因此，在確定本發(fā)明的全部范圍時(shí)，應(yīng)參照以下附帶的權(quán)利要求。
權(quán)利要求
1.一種化妝用皮膚護(hù)理組合物，所述組合物含有(i)一種0.00001到10％重量的桑樹樹根的二醇類提取物，(ii)一種選自乙酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和亞油酸視黃酯的類視色素，以及(iii)一種化妝上可接受的載體，其中乙酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶80到120∶1；亞油酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶8到120∶1，棕櫚酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶16到6∶1。
2.一種化妝方法，它用于改善有皺紋、褶皺、干燥、起皮、老化或光損害皮膚的外觀，改善皮膚厚度、彈性、柔軟性和飽滿度，所述方法包括將權(quán)利要求1的組合物涂抹到皮膚上。
3.一種化妝方法，它用于增加皮膚成纖維細(xì)胞中細(xì)胞視黃酸結(jié)合蛋白的含量，所述方法包括將權(quán)利要求1的組合物涂抹到皮膚上。
全文摘要
一種化妝用皮膚護(hù)理組合物，它包括(iv)桑樹樹根的二醇類提取物，其含量為0.00001到10％重量，(v)選自乙酸視黃酯、棕櫚酸視黃酯和亞油酸視黃酯的類視色素，以及(vi)化妝上可接受的載體，其中乙酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶80到120∶1；亞油酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶8到120∶1；棕櫚酸視黃酯與所述桑樹提取物的重量比為1∶16到6∶1。
文檔編號(hào)A61Q19/08GK1411365SQ00817309
公開日2003年4月16日 申請(qǐng)日期2000年10月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年10月22日
發(fā)明者S·皮萊, M·N·馬哈彥, D·J·波卡利科, S·P·格蘭格爾, B·哈里基安 申請(qǐng)人:荷蘭聯(lián)合利華有限公司