一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑的制作方法
【專利摘要】一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于：該抗病毒制劑是將乳酸菌種子液與配伍好的中藥混合提取物發(fā)酵制得的，配伍中藥的各組分質(zhì)量份數(shù)如下：板藍(lán)根10～20份，大青葉10～20份，大黃5～10份，黃芪1～5份，魚腥草3～5份，青蒿1～5份，荊芥2～5份，五味子1～5份，金銀花4～7份，連翹1～5份，甘草5～7份，虎杖1～5份，大麥芽1～5份；本發(fā)明采用的中藥混合物復(fù)合依據(jù)中藥理論，科學(xué)配伍，保留了中藥方劑辨證論治的組合效應(yīng)，并運(yùn)用三次水煎得到提取物，最大程度的保留中藥的有效成分，避免了現(xiàn)有技術(shù)中中藥直接用于水產(chǎn)養(yǎng)殖而吸收不佳的缺點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】
一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物發(fā)酵中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā) 酵抗病毒制劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 乳酸菌是一類無(wú)芽孢、革蘭氏染色陽(yáng)性細(xì)菌的統(tǒng)稱，是動(dòng)物腸道內(nèi)的常在菌，具有 調(diào)節(jié)畜禽硝化到菌群平衡，提高動(dòng)物免疫性能的作用，目前市場(chǎng)上常用的乳酸菌微生態(tài)制 劑多以普通培養(yǎng)基培養(yǎng)乳酸菌，然后以液體或粉劑形式存在。目前，在防疫和治療病毒性疾 病多采用廣譜抗病毒類西藥，這類藥物，很容易產(chǎn)生抗藥性，使病毒變異，水產(chǎn)養(yǎng)殖中的病 毒性變異便是最好的證明，所以，這類藥物的使用，具有較大的局限性。近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng) 殖業(yè)發(fā)展，漁民追求高利益，集約化養(yǎng)殖使得病毒性疾病發(fā)病率極高，病毒不斷變種，傳播 快，流行廣，嚴(yán)重危害水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。臨床應(yīng)用的抗病毒藥物的作用途徑很多，如直接抑 制或殺滅病毒、干擾病毒吸附、阻止病毒穿入細(xì)胞、抑制病毒生物合成、抑制病毒釋放或增 強(qiáng)宿主抗病毒能力等。但目前國(guó)內(nèi)外治療病毒有效的西藥副作用大，抗病毒中藥品種少且 有效率低，因此，開發(fā)抗病毒的中藥新品種應(yīng)用疾病防治是十分必要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 針對(duì)上述問題，本發(fā)明的目的提供一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制 劑，有效解決現(xiàn)有水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中抗病毒制劑易產(chǎn)生抗藥性的缺點(diǎn)。
[0004] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥 發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于:該抗病毒制劑是將乳酸菌種子液與配伍好的中藥混合提取 物發(fā)酵制得的，配伍中藥的各組分質(zhì)量份數(shù)如下：
[0005] 板藍(lán)根 10~20份 大青葉 10~20份 大黃 ：5"?〇份 黃瓦 Γ5份 查腥草 3~5份 青蒿 Γ:5份 荊:芥 2飛份
[0006] 五味子 1飛份 金銀花 4~7份 連翹 Γ5份 甘草 5~7份 虎杖 Γ5份 大麥芽 Γ5份
[0007]進(jìn)一步，所述乳酸菌種子液由屎腸球菌與植物乳桿菌按3:7比例混合培養(yǎng)制得，有 效活菌數(shù)量大于1〇1()個(gè)。
[0008] 進(jìn)一步，所述中藥混合提取物為每25g中藥混合物加100g水煎三次合并制得。
[0009] 進(jìn)一步，所述抗病毒制劑中還包括MRS液體培養(yǎng)基。
[0010] -種制備用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑方法，其特征在于:包括以 下步驟：
[0011] (1)將如下重量份數(shù)的中藥放入研磨機(jī)中粉碎，并過80~100目篩，得到中藥粉 板藍(lán)根 1CT20份 大青葉 10~20份
[0012] 大黃 5?0份 黃笑 1~:5份_ 魚膜草 3~5份 青_蒿 1~5份 爾芥 2~5份 五咮子 1~5份
[0013] 金銀花 4~7份 連翹 Γ5份 甘草 5~7份 虎杖 Γ5紛 大麥芽 1~5份
[0014] (2)將步驟（1)得到的中藥粉每25g中藥粉加入100mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸 騰23~30分鐘，過濾取上清液;濾渣繼續(xù)加入100mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰34~44分 鐘，取上清液與第一次的上清液混合;然后濾渣繼續(xù)加入l〇〇mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸 騰45~50分鐘，過濾上清液與前兩次的上清液混合，得到中藥混合提取物150~200mL;
[0015] (3)MRS液體培養(yǎng)基的制備:胰蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母膏5.0g、檸檬酸銨 2.(^、葡萄糖20.(^、1?^042.(^、乙酸鈉58、吐溫-801.01^、七水硫酸鎂0.588、硫酸錳0.258、 濃度為〇 · 25~1 · 0mol/L的KH2P〇4緩沖液 1000mL，用0 · lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH至6 · 5，121°C，滅 菌25min，得到所述改良MRS液體培養(yǎng)基；
[0016] (4)將步驟(2)得到的中藥混合提取物和步驟(3)得到的MRS液體培養(yǎng)基按40~60: 60~40的重量比混合，然后加入乳酸菌種子液37~39°厭氧發(fā)酵2~3天得到抗病毒制劑。
[0017] 進(jìn)一步，所述乳酸菌種子液由屎腸球菌與植物乳桿菌按3:7比例混合培養(yǎng)制得，有 效活菌數(shù)量大于1〇1()個(gè)。
[0018] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1、本發(fā)明采用的中藥混合物復(fù)合依據(jù)中藥理論，科學(xué)配伍，保 留了中藥方劑辨證論治的組合效應(yīng)，并運(yùn)用三次水煎得到提取物，最大程度的保留中藥的 有效成分，避免了現(xiàn)有技術(shù)中中藥直接用于水產(chǎn)養(yǎng)殖而吸收不佳的缺點(diǎn)；2、本發(fā)明在中藥 混合提取物和MSR液體培養(yǎng)基混合用乳酸菌發(fā)酵直接得到抗病毒制劑，所得到的抗病毒制 劑為液態(tài)的，可以直接用于水產(chǎn)養(yǎng)殖;3、本發(fā)明含有的中藥成分經(jīng)過益生菌轉(zhuǎn)化，有利于機(jī) 體吸收;能提速療效及提高藥效;此外發(fā)酵過程分解毒性，與使用化學(xué)藥劑相比，也避免了 化學(xué)藥物的殘留，具有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，以下實(shí)施例只是描述性的，不是限 定性的，不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0020] 實(shí)施例一： 板藍(lán)根 20.g 大青葉 20g 大黃 ％ 黃茛 3g 魚腥草 3g 青蒿 1 g_
[0021] 荊齊 2g 五咮子 1g 金銀花 5g 連翹 2g 甘草 6g 虎杖 3g 大麥芽 4g
[0022] 將上述重量的中藥放入研磨機(jī)中粉碎，并過80~100目篩，得到中藥粉，然后加入 300mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰30分鐘，過濾取上清液;濾渣繼續(xù)加入300mL水，加熱至 沸騰，并且持續(xù)沸騰44分鐘，取上清液與第一次的上清液混合;然后濾渣繼續(xù)加入300mL水， 加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰50分鐘，過濾上清液與前兩次的上清液混合，得到中藥混合提取 物4 5〇mL;
[0023] MRS液體培養(yǎng)基的制備：胰蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母膏5.0g、檸檬酸銨 2.(^、葡萄糖20.(^、1(!12?042.(^、乙酸鈉58、吐溫-80 1.011^、七水硫酸鎂0.588、硫酸錳 0 · 25g、濃度為0 · 25~1 · Omol/L的KH2P〇4緩沖液1000mL，用0 · lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH至6 · 5，121 °C，滅菌25min，得到所述改良MRS液體培養(yǎng)基；
[0024]將中藥混合提取物和MRS液體培養(yǎng)基按40:60的重量比混合，然后加入乳酸菌種子 液37~39°厭氧發(fā)酵2~3天得到抗病毒制劑。
[0025] 實(shí)施例二：
[0026] 參照實(shí)施例一制備抗病毒制劑，區(qū)別在于中藥組分如下： 板藍(lán).根 20份 太青葉 20份 大黃 10份 黃芪 3份 魚膣草 5份
[0027] 青蒿 5份 荊芥 3份 五味子 1翁 金銀花 4份 連翹 5份 甘草 5份
[0028] 虎杖 1份 大麥芽 1份
[0029] 將實(shí)施例一和實(shí)施例二得到的抗病毒制劑投放至鯉魚養(yǎng)殖池中，對(duì)于患鯉魚皰疹 病毒病的鯉魚，按1. OmL/每公斤魚體重計(jì)算藥量，拌飼料連續(xù)投喂5天治愈率達(dá)88 %和 90% 〇
[0030] 實(shí)施例一和實(shí)施例二中的有效活菌數(shù)量分別為6 X 101()，7 X 101()，說(shuō)明中藥混合提 取物可以增效乳酸菌的發(fā)酵。
[0031] 最后應(yīng)說(shuō)明的是：以上各實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制;盡 管參照前述各實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依 然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn) 行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明各實(shí)施例技術(shù) 方案的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于：該抗病毒制劑是將 乳酸菌種子液與配伍好的中藥混合提取物發(fā)酵制得的，配伍中藥的各組分質(zhì)量份數(shù)如下： 板藍(lán)根 1CT20份 大青葉 1(T20翁 大黃 5~10份 黃裝 1~5份 魚腥草 3~5份 青蒿 1~5份 荊芥 2~5儉 五味子 f5份 金銀花. 4~7份 連翹 1~5份 甘草 5~7份 虎杖 1~5儉 大麥芽 f 5份2. 根據(jù)權(quán)利1所述的一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于:所 述乳酸菌種子液由屎腸球菌與植物乳桿菌按3:7比例混合培養(yǎng)制得，有效活菌數(shù)量大于10 1() 個(gè)。3. 根據(jù)權(quán)利1所述的一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于:所 述中藥混合提取物為每25g中藥混合物加1 OOg水煎三次合并制得。4. 根據(jù)權(quán)利1所述的一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的乳酸菌中藥發(fā)酵抗病毒制劑，其特征在于:所 述抗病毒制劑中還包括MRS液體培養(yǎng)基。5. -種制備如權(quán)利要求1所述的抗病毒制劑的方法，其特征在于:包括以下步驟： (1)將如下重量份數(shù)的中藥放入研磨機(jī)中粉碎，并過80~100目篩，得到中藥粉 板藍(lán)根 1 (T20份 大青葉 10~20份 大黃 5~10份 黃芪 1~5份 魚腥草 3~5份 青蒿 1份 荊齊 2、份 五味子 1~5份' 金銀花 4~7份 連翹 1~5份 甘草 5~7份 虎杖 份 大麥芽 1飛份 (2)將步驟（1)得到的中藥粉每25g中藥粉加入100mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰23 ~30分鐘，過濾取上清液;濾渣繼續(xù)加入100mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰34~44分鐘， 取上清液與第一次的上清液混合;然后濾渣繼續(xù)加入100mL水，加熱至沸騰，并且持續(xù)沸騰 45~50分鐘，過濾上清液與前兩次的上清液混合，得到中藥混合提取物150~200mL; (3 )MRS液體培養(yǎng)基的制備:胰蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母膏5.0g、檸檬酸銨2.0g、 葡萄糖20.0 g、KH2P〇42.0g、乙酸鈉5g、吐溫-801. OmL、七水硫酸鎂0.58g、硫酸錳0.25g、濃度 為0 ? 25~1 ? 0mol/L的KH2P〇4緩沖液1000mL，用0 ? lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH至6 ? 5，121°C，滅菌 25min，得到所述改良MRS液體培養(yǎng)基； (4)將步驟(2)得到的中藥混合提取物和步驟(3)得到的MRS液體培養(yǎng)基按40~60:60~ 40的重量比混合，然后加入乳酸菌種子液37~39°厭氧發(fā)酵2~3天得到抗病毒制劑。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于:所述乳酸菌種子液由屎腸球菌與植物 乳桿菌按3:7比例混合培養(yǎng)制得，有效活菌數(shù)量大于101()個(gè)。
【文檔編號(hào)】A61K36/8998GK106039138SQ201610387765
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月1日
【發(fā)明人】蘇永鵬
【申請(qǐng)人】貝嘉美（天津）生物技術(shù)研發(fā)有限公司