改善睡眠障礙的組合物及其制備方法和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種改善睡眠障礙的組合物及其制備方法和應(yīng)用，屬于睡眠障礙的治療領(lǐng)域。本發(fā)明首先公開了一種改善睡眠障礙的組合物，包括以下各組分：鹿茸血粉、γ?氨基丁酸、維生素B6和大豆卵磷脂。在本發(fā)明上述組合物的基礎(chǔ)上進(jìn)一步添加五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓，具有更好的養(yǎng)血安神、鎮(zhèn)靜、促進(jìn)睡眠，提高睡眠質(zhì)量的作用，證明鹿茸血粉、γ?氨基丁酸、維生素B6、大豆卵磷脂與五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志、茯苓之間具有明顯的協(xié)同增效作用。本發(fā)明組合物的配伍合理，無毒副作用，能夠應(yīng)用于制備改善睡眠障礙的藥物。
【專利說明】
改善睡眠障礙的組合物及其制備方法和應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及改善睡眠障礙的組合物，還涉及所述組合物的制備方法以及其在制備 改善睡眠障礙的藥物中的應(yīng)用，屬于睡眠障礙的治療領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 在當(dāng)今世界高速發(fā)展的快節(jié)奏時(shí)代，睡眠障礙(失眠癥）已經(jīng)成為一個(gè)影響現(xiàn)代人 類健康的重要問題，它不僅影響人的情緒，甚至能影響人的免疫系統(tǒng);更重要的是，睡眠障 礙往往是身體潛在某種疾病的外在表現(xiàn)形式之一。這主要是由于冠心病、糖尿病、高血壓、 腦動(dòng)脈硬化等疾病引起心腦供血不足，以及快節(jié)奏的城市生活給人們帶來的精神壓力直接 影響到睡眠中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂而導(dǎo)致。
[0003] 近年來，世界衛(wèi)生組織及許多國內(nèi)外專家非常重視睡眠障礙的診治，提出了 "中藥 按需治療"，盡量避免或"小劑量間斷"使用鎮(zhèn)靜催眠藥物的治療原則，提倡重視良好睡眠習(xí) 慣的培養(yǎng)的同時(shí)，尋求體內(nèi)環(huán)境的調(diào)理和改善，從而提高睡眠質(zhì)量。
[0004] 目前，西醫(yī)針對(duì)睡眠障礙主要采用睡眠誘導(dǎo)劑或鎮(zhèn)靜催眠藥（如艾司唑侖片），雖 然起效快、作用強(qiáng)，但存在一定的副作用或潛在的成癮性，而通過中醫(yī)藥開發(fā)具有安神促睡 眠的高端保健品逐漸成為調(diào)理睡眠障礙的首選。因此，開發(fā)一種以中國東北特產(chǎn)保健食品 鹿茸血粉結(jié)合補(bǔ)腦安神中藥材提取物制備的具有鎮(zhèn)靜催眠作用、且療效穩(wěn)定的組合物，將 具有重要的價(jià)值。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種改善睡眠障礙的組合物，該組合物具有顯 著的鎮(zhèn)靜、催眠作用，能夠促進(jìn)睡眠，提高睡眠質(zhì)量。
[0006] 本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供所述組合物的制備方法。
[0007] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
[0008] 本發(fā)明首先公開了一種改善睡眠障礙的組合物，包括以下各組分:鹿茸血粉、γ-氨基丁酸、維生素 Β6和大豆卵磷脂;各組分的重量份為:鹿茸血粉10-40份、γ -氨基丁酸5-20份、維生素 Β65-20份、大豆卵磷脂20-70份;優(yōu)選的，各組分的重量份為：鹿茸血粉30份、 γ -氨基丁酸10份、維生素 Β610份、大豆卵磷脂50份。
[0009]鹿茸血粉，是補(bǔ)血造血和促進(jìn)造血功能的原料，具有益氣補(bǔ)血，安神鎮(zhèn)靜的特效成 分，是營養(yǎng)保健佳品。鹿茸血粉含有多種氨基酸，膠原蛋白，蛋白聚糖，葡萄糖聚胺，還含有 透明質(zhì)酸，鐵卟啉，核苷酸，神經(jīng)節(jié)苷酸，血液生化酶等，可改善大腦缺血和心、肝、腎等機(jī)體 缺血；因具有增強(qiáng)造血功能，固壯腎陽，益精血，強(qiáng)筋骨作用，可用于腎陽不足，精血虧損，改 善機(jī)體新陳代謝，提高機(jī)體抗病能力，特別是增加腦供血、供氧，可改善中樞神經(jīng)功能的修 復(fù)，改善睡眠，提高睡眠質(zhì)量。
[0010] γ-氨基丁酸(GABA)是腦內(nèi)神經(jīng)元間的一種抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，能有效促進(jìn)睡眠的 持續(xù)性，加強(qiáng)睡眠深度，改善早醒狀態(tài)；γ -氨基丁酸還具有擴(kuò)張心腦血管作用，增加心腦、 肝、腎供血，改善心腦等器官功能，更好的促進(jìn)深度睡眠。
[0011] 維生素 B6參與人體氨基酸代謝，能促進(jìn)體內(nèi)氨基酸吸收和蛋白質(zhì)合成；參與脂肪 代謝，降低血中膽固醇，防止動(dòng)脈硬化，還可促進(jìn)γ-氨基丁酸(GABA)的合成和五羥色胺的 合成，因而可加深睡眠，是神經(jīng)系統(tǒng)不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。
[0012] 大豆卵磷脂，又稱大豆蛋黃素，是重要的生命基礎(chǔ)物質(zhì)，它不僅是構(gòu)成人體生物膜 的重要組成部分，而且是膽堿和脂肪酸的一個(gè)來源，它對(duì)維持生物膜的生理活性和機(jī)體的 正常代謝起關(guān)鍵作用，被譽(yù)為"血管清道夫"，有效修補(bǔ)被損傷的細(xì)胞膜，改善細(xì)胞膜功能， 使細(xì)胞膜軟化和年輕化，增加細(xì)胞活性，從而深入改善人體睡眠環(huán)境，促進(jìn)睡眠。
[0013] 本發(fā)明進(jìn)一步公開了一種制備所述組合物的方法，包括以下步驟:將鹿茸血粉粉 碎過篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 b6和大豆卵磷脂混合均勻，即得。
[0014] 本發(fā)明將鹿茸血粉及神經(jīng)營養(yǎng)因子γ-氨基丁酸、維生素 B6和大豆卵磷脂聯(lián)合配 伍，具有一定的改善睡眠的功效。本發(fā)明在上述組合物的基礎(chǔ)上進(jìn)一步添加以下原料藥，具 有更好的補(bǔ)脾益氣、養(yǎng)血安神、促進(jìn)睡眠，提高睡眠質(zhì)量的作用：五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和 茯苓;各組分的重量份為:五味子20-100份、天麻20-100份、百合25-100份、遠(yuǎn)志20-100份、 茯苳25-100份;優(yōu)選的，各組分的重量份為:五味子60份、天麻25份、百合100份、遠(yuǎn)志60份、 茯苓20份。
[0015] 五味子，為木蘭科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz · )Baill ·或華中五味 子Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果實(shí)。性味酸、甘，溫。歸肺，心、腎 經(jīng)。功能主治:收斂固濕，益氣生津，補(bǔ)腎寧心。五味子中含有多種營養(yǎng)成分，如五味子素、蘋 果酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、脂肪油、揮發(fā)油、糖類、樹脂、維生素 C等，還含有鎢、鐵、錳、 鋅、磷等微量元素。能增強(qiáng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮與抑制過程，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平 衡，改善睡眠環(huán)境。
[0016] 天麻，為蘭科植物天麻Gastrodia elata Blume.的干燥塊莖。性味甘，平。歸肝經(jīng)。 功能主治:平肝息風(fēng)止痙。天麻中的有效成分為天麻素，中醫(yī)認(rèn)證:天麻素能擴(kuò)張腦血管、提 高腦細(xì)胞抗缺氧能力、增加腦血流量;尤其是對(duì)椎一基底動(dòng)脈的血流改善具有良好的效果， 從而改善體內(nèi)睡眠環(huán)境；同時(shí)天麻素能改善小腦前下動(dòng)脈、小腦后下動(dòng)脈、迷路動(dòng)脈及內(nèi)耳 供血不足，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，具有較好的鎮(zhèn)靜和安眠作用，對(duì)神經(jīng)衰弱、失眠、神經(jīng)衰弱綜合征 等具有明顯的改善作用。
[0017] 百合，為百合科植物卷丹Li 1 ium lancif〇1 ium Thunb·、百合Li 1 ium brownii F.E.Brown var.viridulum Baker或細(xì)葉百合Lilium pumilum DC.的干燥肉質(zhì)鱗葉。性味 甘，寒。歸心、肺經(jīng)。功能主治:養(yǎng)陰潤(rùn)肺，清心安神。百合中含留體糖苷，百合苷，脫酰基百合 苷等。另含生物堿和糖苷，如β-澳洲茄邊堿，澳洲茄次堿糖苷等。現(xiàn)代研究百合還含有多種 氨基酸、脂肪、鹿糖、粗纖維、果膠、磷、媽、鐵等，還含有￥8 1、￥82^、胡蘿卜素等多種成分。具 有清心除煩、寧心安神、抗缺氧、抗疲勞、提高機(jī)體免疫力等功效，有效防治神思恍惚、失眠 多夢(mèng)、心情抑郁等癥。
[0018] 遠(yuǎn)志，為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志Polygala tenuifolia Willd.或卵葉遠(yuǎn)志Polygala sibirica L.的干燥根。性味苦、辛、溫。歸心、腎、肺經(jīng)。功能主治:安神益智，祛痰，消腫。遠(yuǎn) 志中含有皂甙、脂肪油、生物堿、樹脂、果糖和多種維生素。主要功效有寧心安神，養(yǎng)血益智， 祛痰消腫。主要用于心腎不交引起的失眠多夢(mèng)、健忘驚悸，神志恍惚。
[0019] 茯苓，為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw. )Wolf的干燥菌核。性味甘、淡，平。 歸心、肺、脾、腎經(jīng)。功能主治:利水滲濕，健脾寧心。茯苓的主要成分為茯苓多糖?，F(xiàn)代研究 茯苓含有卵磷脂、膽堿、麥角留醇、腺嘌呤、葡萄糖鉀鹽等。具有利水滲濕，健脾寧心之功效。 主要用于憂患驚恐、心神不安，驚悸失眠。
[0020] 本發(fā)明公開了 一種制備上述組合物的方法，包括以下步驟:將鹿茸血粉、五味子、 天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓分別粉碎過篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 b6和大豆卵磷脂混合均 勾，即得。
[0021] 進(jìn)一步優(yōu)選的，本發(fā)明在鹿茸血粉、γ-氨基丁酸、維生素 B6和大豆卵磷脂的基礎(chǔ) 上添加五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物;各組分的重量 份為:五味子提取物20-100份、天麻提取物20-100份、百合提取物25-100份、遠(yuǎn)志提取物20-100份、茯苓提取物25-100份;優(yōu)選的，各組分的重量份為:五味子提取物60份、天麻提取物 25份、百合提取物100份、遠(yuǎn)志提取物60份、茯苓提取物20份。
[0022] 本發(fā)明進(jìn)一步公開了一種制備所述組合物的方法，包括以下步驟：（1)分別制備五 味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物；（2)將鹿茸血粉粉碎過 篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 B6、大豆卵磷脂、五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、 遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物混合均勻，即得。
[0023] 其中，步驟（1)所述五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提 取物的制備包括:將五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓分別粉碎過篩，加水煎煮，取濾液;將濾 液濃縮成浸膏，干燥，粉碎，即得。優(yōu)選的，所述加水煎煮包括:加水10倍量(質(zhì)量比），浸泡2 小時(shí)；加水煎煮三次，每次煎煮2小時(shí)；所述濃縮包括:將濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.00~ 1.10 (60 °C )，70 %醇沉，回收乙醇，濾過，將所得濾液再經(jīng)減壓濃縮至相對(duì)密度1.15~1.20 (60°C)，得到浸膏;將浸膏在60°C減壓干燥、粉碎成細(xì)粉，得到浸膏粉。
[0024] 本發(fā)明對(duì)所述粉碎沒有特殊限制，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整，例如粉碎至50-200目；粉碎后可以過50-200目篩，優(yōu)選為過100目篩。
[0025] 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明將鹿茸血粉、γ-氨基丁酸、維生素 B6和大豆卵磷脂配 伍，具有一定的改善睡眠的功效，小鼠的活動(dòng)次數(shù)較空白對(duì)照減少，但差異不顯著（P> 0.05)。為了進(jìn)一步提高該組合物改善睡眠的作用，本發(fā)明在鹿茸血粉、γ-氨基丁酸、維生 素 Β6和大豆卵磷脂的基礎(chǔ)上分別添加玄參提取物、酸棗仁提取物、地黃提取物、五味子提取 物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物等不同的中藥組合。結(jié)果表明，只有添加五味子提取物、遠(yuǎn)志提 取物、茯苓提取物、天麻提取物和百合提取物具有更好的鎮(zhèn)靜催眠作用，能夠極顯著的減少 小鼠的活動(dòng)次數(shù)(Ρ〈〇.001)，而且極顯著的延長(zhǎng)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間（Ρ〈 0.001);而添加其他中藥組合的小鼠活動(dòng)次數(shù)差異不顯著(Ρ>〇.05)或顯著(Ρ〈0.01)，延長(zhǎng) 小鼠戊巴比妥鈉催眠劑量的催眠作用顯著(Ρ〈〇.01)。以上結(jié)果證明，鹿茸血粉、γ-氨基丁 酸、維生素 Β6、大豆卵磷脂與五味子提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物、天麻提取物、百合提 取物之間具有明顯的協(xié)同增效作用。
[0026] 本發(fā)明進(jìn)一步對(duì)五味子提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物、天麻提取物和百合提取 物的用量進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明，按照特定用量配比制備的組合物（即：鹿茸血粉30mg、y-氨 基丁酸l〇mg、維生素 BslOmg、大豆卵磷脂50mg、五味子提取物60mg、遠(yuǎn)志提取物60mg、茯苳提 取物20mg、天麻提取物25mg、百合提取物100mg)具有更顯著的減少正常小鼠活動(dòng)次數(shù)(P〈 0.001)、延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間的作用(P〈0.001)。
[0027] 本發(fā)明所述組合物能夠應(yīng)用于制備改善睡眠障礙的藥物，在有效量的所述組合物 基礎(chǔ)上添加適宜的輔料或載體，即可。其中，所述藥物的劑型為口服制劑，包括:散劑、片劑、 沖劑、丸劑、乳劑、顆粒劑或膠囊劑中的任意一種;優(yōu)選為膠囊劑。
[0028] 本發(fā)明所述輔料或載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的輔料或載體，例如:稀釋劑、崩裂劑、 潤(rùn)滑劑、賦形劑、粘合劑、助流劑、填充劑、表面活性劑等;另外，還可以在組合物中加入其它 輔助劑，如香味劑和甜味劑。所述稀釋劑可以是一種或幾種增加片劑重量和體積的成分，常 用的稀釋劑包括乳糖、淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、山梨醇、甘露醇以及無機(jī)鈣鹽等。所 述崩解劑可以為交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、海藻酸、微晶纖維素中之一種 或幾種混合物。所述的潤(rùn)滑劑包括硬脂酸，硬脂酸鈉，硬脂酸鎂，硬脂酸鈣，聚乙二醇，滑石 粉，氫化植物油中之一種或幾種混合物。所述的粘合劑可以是一種或幾種有利于制粒的成 分，可以是淀粉漿，羥丙基甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮。所述助流劑可以為微粉硅膠、滑石 粉、三硅酸鎂中之一種或幾種混合物。所述表面活性劑可以為一種或幾種能夠提高潤(rùn)濕性 和增加藥物溶出的成分，例如十二烷基硫酸鈉。
[0029]藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明組合物能夠顯著減少正常小鼠活動(dòng)次數(shù)(P〈0.001)、 延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間（P〈〇.01)，增加戊巴比妥鈉域下催眠劑量小鼠 的入睡數(shù)(P〈〇.05);而且能夠顯著延長(zhǎng)咖啡因興奮小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間 (P〈0.001)，減少咖啡因興奮小鼠的站立次數(shù)(P〈0.01，P〈0.001)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā) 明組合物具有顯著的鎮(zhèn)靜、催眠作用。
[0030] 急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，將本發(fā)明組合物按照相當(dāng)于臨床成人日服量的1013倍灌 胃后，小鼠無一例死亡；除活動(dòng)及精神狀態(tài)稍顯遲鈍外，其攝食、飲水、皮毛、呼吸、眼睛、體 重等狀況均未見異常，未出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng);剖檢后觀察主要臟器，顏色、形態(tài)、大小、軟硬 度等均未見異常變化，表明本發(fā)明組合物的毒性較小。
[0031] 本發(fā)明所用的各味原料藥都可以在醫(yī)藥商店購買得到。
[0032] 本發(fā)明組合物的用法與用量:用藥量取決于具體劑型、患者的年齡、健康狀況等因 素。作為指導(dǎo)，用法用量:膠囊，規(guī)格為400mg/粒，總有效成分365mg/粒;成人，每日兩次，早 晚服用，每次4-6粒，晚上服用適宜睡前30-60min 口服。
[0033] 本發(fā)明技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果：
[0034] 本發(fā)明由原料鹿茸血粉、天麻提取物、五味子提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯 苓提取物、γ-氨基丁酸、大豆卵磷脂和維生素 B6配制而成的組合物，具有良好的鎮(zhèn)靜、催眠 作用，能夠極顯著減少小鼠的活動(dòng)次數(shù)，且極顯著的延長(zhǎng)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡 眠時(shí)間，達(dá)到更好的促進(jìn)睡眠、改善睡眠質(zhì)量的功效。本發(fā)明組合物中各原料配伍合理，無 任何禁忌和不良反應(yīng)，各種原輔料均符合國家有關(guān)的法律、法規(guī)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。
【附圖說明】
[0035] 圖1為將本發(fā)明組合物制備膠囊的工藝路線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0036]下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述而 更為清楚。但是應(yīng)理解所述實(shí)施例僅是范例性的，不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域 技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和 形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改或替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0037] 1、原料
[0038] 鹿茸血粉，購自長(zhǎng)春市茸生鹿產(chǎn)品有限公司。
[0039] 實(shí)施例1改善睡眠障礙的膠囊的制備
[0040] (1)鹿茸血粉:粉碎過100目篩，每粒加30mg;
[0041] (2)五味子提取物:五味子洗凈烘干并粉碎，過100目篩，經(jīng)提取加工制成濃縮物， 每粒加60mg;
[0042] (3)天麻提取物:天麻洗凈烘干并粉碎，過100目篩，經(jīng)提取加工制成濃縮物，每粒 加25mg;
[0043] (4)百合提取物：百合洗凈烘干并粉碎，過100目篩，經(jīng)提取加工制成濃縮物，每粒 加 lOOmg;
[0044] (5)遠(yuǎn)志提取物:遠(yuǎn)志洗凈烘干并粉碎，過100目篩，經(jīng)提取加工制成濃縮物，每粒 加60mg;
[0045] (6)茯苓提取物:茯苓洗凈烘干并粉碎，過100目篩，經(jīng)提取加工制成濃縮物，每粒 加20mg;
[0046] (7) γ-氨基丁酸粉:GABA國產(chǎn)，每粒加10mg;
[0047] (8)維生素 B6:每粒加10mg;
[0048] (9)大豆卵磷脂:每粒加50mg;
[0049] 其中，五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物的制備 中，所述提取包括:分別向五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志或茯苓經(jīng)粉碎、過篩后的產(chǎn)物中加水10 倍量(質(zhì)量比），浸泡2小時(shí)，加水煎煮三次，每次煎煮2小時(shí)，合并濾液，濾過;將濾液減壓濃 縮至相對(duì)密度1.00~1.10 (60 °C )，70 %醇沉，回收乙醇，濾過，濃縮;將濃縮后的濾液減壓濃 縮至相對(duì)密度1.15~1.20(60°C)的浸膏;將浸膏60°C減壓干燥粉碎成細(xì)粉，得到浸膏粉。
[0050] 然后將各原料混合，并添加賦形劑，80 %乙醇制粒，干燥，整粒制成拋丸，裝入膠 囊，即得(圖1)。
[0051 ] 膠囊的制備在十萬級(jí)潔凈區(qū)：溫度18~26°C ;相對(duì)濕度45~65 % ;空氣潔凈級(jí)別不 同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5帕;潔凈室（區(qū)）與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于10帕，并應(yīng) 有指示壓差的裝置。
[0052]所制備的膠囊最終規(guī)格為400mg/粒，以上總有效成分共計(jì)365mg/粒，其余35mg作 為賦形劑添加至以上產(chǎn)品主成分中，賦形劑選擇為藥用淀粉及藥用糊精，根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)匹 配比例，并最終將以上主要成分和賦形劑制成拋丸，灌裝膠囊制成最終產(chǎn)品。
[0053] 實(shí)施例2改善睡眠障礙的組合物
[0054]按照以下比例稱取各原料:鹿茸血粉10mg、γ-氨基丁酸粉5mg、維生素 B6 5mg、大 ?卵憐脂20mg;
[0055]將鹿茸血粉粉碎過50目篩，然后與γ -氨基丁酸粉、維生素 B6和大豆卵磷脂混合均 勾，即得。
[0056] 實(shí)施例3改善睡眠障礙的組合物
[0057] 按照以下比例稱取各原料：鹿茸血粉40mg、γ-氨基丁酸粉20mg、維生素 B6 20mg、 大豆卵磷脂70mg;
[0058] 將鹿茸血粉粉碎過200目篩，然后與γ-氨基丁酸粉、維生素 B6和大豆卵磷脂混合 均勻，即得。
[0059] 實(shí)施例4改善睡眠障礙的組合物
[0060] 按照以下比例稱取各原料:鹿茸血粉30mg、γ-氨基丁酸粉10mg、維生素 B6 10mg、 大豆卵磷脂50mg。
[0061 ]將鹿茸血粉粉碎過100目篩，然后與γ -氨基丁酸粉、維生素 B6和大豆卵磷脂混合 均勻，即得。
[0062] 實(shí)施例5改善睡眠障礙的組合物
[0063]按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉10、γ-氨基丁酸粉5、維生素 B6 5、大豆 卵磷脂20、五味子20、天麻20、百合25、遠(yuǎn)志20、茯苓25;
[0064]將鹿茸血粉、五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志、茯苓分別粉碎，過50目篩，然后與γ-氨基 丁酸粉、維生素 Β6和大豆卵磷脂混合均勻，即得。
[0065] 實(shí)施例6改善睡眠障礙的組合物
[0066]按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉40、γ-氨基丁酸粉20、維生素 Β6 20、大 豆卵磷脂70、五味子100、天麻100、百合100、遠(yuǎn)志100、茯苓100;
[0067]將鹿茸血粉、五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志、茯苓分別粉碎，過200目篩，然后與γ-氨基 丁酸粉、維生素 Β6和大豆卵磷脂混合均勻，即得。
[0068] 實(shí)施例7改善睡眠障礙的組合物
[0069]按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉30、γ-氨基丁酸粉10、維生素 Β6 10、大 ?卵磷脂50、五味子60、天麻25、百合100、遠(yuǎn)志60、茯等20。
[0070] 將鹿茸血粉、五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志、茯苓分別粉碎，過100目篩，然后與γ-氨基 丁酸粉、維生素 Β6和大豆卵磷脂混合均勻，即得。
[0071] 實(shí)施例8改善睡眠障礙的組合物
[0072] 五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物的制備同實(shí)施 例1〇
[0073] 按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉10、γ-氨基丁酸粉5、維生素 Β6 5、大豆 卵磷脂20、五味子提取物20、天麻提取物20、百合提取物25、遠(yuǎn)志提取物20、茯苓提取物25;
[0074] 將鹿茸血粉粉碎過100目篩，然后與γ-氨基丁酸粉、維生素 Β6、大豆卵磷脂、五味 子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物混合均勻，即得。
[0075] 實(shí)施例9改善睡眠障礙的組合物
[0076]五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物的制備同實(shí)施 例1〇
[0077]按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉40、γ-氨基丁酸粉20、維生素 Β6 20、大 豆卵磷脂70、五味子提取物100、天麻提取物100、百合提取物100、遠(yuǎn)志提取物100、茯苓提取 物 100;
[0078]將鹿茸血粉粉碎過100目篩，然后與γ-氨基丁酸粉、維生素 Β6、大豆卵磷脂、五味 子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物混合均勻，即得。
[0079] 實(shí)施例10改善睡眠障礙的組合物
[0080] 五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物的制備同實(shí)施 例1〇
[0081 ]按照以下比例稱取各原料(mg):鹿茸血粉30、γ-氨基丁酸粉10、維生素 B6 10、大 豆卵磷脂50、五味子提取物60、天麻提取物25、百合提取物100、遠(yuǎn)志提取物60、茯苓提取物 20 〇
[0082]將鹿茸血粉粉碎過100目篩，然后與γ-氨基丁酸粉、維生素 B6、大豆卵磷脂、五味 子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物混合均勻，即得。
[0083]試驗(yàn)例1本發(fā)明組合物鎮(zhèn)靜催眠作用的觀察
[0084] 為觀察本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊的鎮(zhèn)靜催眠作用，以低、中、高三個(gè)劑量 (0.225g/kg、0.45g/kg、0.9g/kg)膠囊有效成分對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃給予，分別觀察本發(fā)明組合 物對(duì)實(shí)驗(yàn)正常小鼠自主活動(dòng)、戊巴比妥鈉域上催眠劑量、戊巴比妥鈉域下催眠劑量的影響 及藥物對(duì)咖啡因興奮小鼠自主活動(dòng)、戊巴比妥鈉域上催眠劑量的影響。
[0085] 本品測(cè)不出LD5Q，進(jìn)行最大給藥劑量試驗(yàn)，即小鼠能耐受該藥的最大濃度 (67.5% )、最大體積(40ml/kg);-日內(nèi)2次給予小鼠，50g/kg/d(折合生藥63.5g/kg/d)，觀 察小鼠的急性毒性反應(yīng)。
[0086] 1、材料
[0087] 1 · 1實(shí)驗(yàn)藥物
[0088] 膠囊，本發(fā)明實(shí)施例1制備(批號(hào)：20150618，規(guī)格:400mg/粒，用法用量:成人日服 量一次4~6粒，一日2次，鎮(zhèn)靜催眠實(shí)驗(yàn)用時(shí)以蒸餾水配成1.5 %、3 %、6 %的混懸液，急性毒 性實(shí)驗(yàn)時(shí)以蒸餾水配成最大濃度67.5%的混懸液，即日服量2.4g，折合生藥約51g);地西泮 (安徽豐原藥業(yè)股份有限公司涂山藥廠，批號(hào)：1503107，規(guī)格2.5mg/片）；咖啡因（20mg/kg，A Johnson Matthey Company，批號(hào)；15102513);戊巴比妥鈉（50mg/kg，30mg/kg上海江萊生物 科技有限公司，批號(hào)⑶20150526);西洋參含片（1.25g/片，三九集團(tuán)生產(chǎn)，批號(hào)：20150622)。 [0089] 1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
[0090]昆明種小白鼠，體重20 ± 2g，雌雄各半，清潔級(jí)，由長(zhǎng)春市生物制品所提供，動(dòng)物生 產(chǎn)許可證編號(hào)為:SCXK2015-0008，使用許可證編號(hào)SYXK2015-0008。
[0091] 1.3 儀器
[0092] ZZ-6小鼠自主活動(dòng)測(cè)試儀(上海欣曼科教設(shè)備有限公司）；
[0093] 電子天平BP310P(德國梅特勒）；
[0094] Diamond牌機(jī)械秒表(北京斯達(dá)恒通科技有限公司）。
[0095] 1.4統(tǒng)計(jì)方法
[0096]所有計(jì)量數(shù)據(jù)表示為li±S，進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用X2檢驗(yàn)。用SPSS10.0軟件包統(tǒng) 計(jì)分析。
[0097] 2、實(shí)驗(yàn)方法
[0098] 2.1本發(fā)明組合物對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜催眠的影響
[0099] 2.1.1本發(fā)明組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)影響的實(shí)驗(yàn)研究
[0100]本方法通過直接觀察動(dòng)物自主活動(dòng)的自動(dòng)計(jì)數(shù)法得以實(shí)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)原理是將一束光 線照射到對(duì)側(cè)的光電管上，小鼠在活動(dòng)記錄儀的實(shí)驗(yàn)箱中活動(dòng)時(shí)遮斷光線一次，就引起電 流改變一次，經(jīng)過放大裝置，使電脈沖驅(qū)使繼電器啟動(dòng)，記數(shù)器記錄一個(gè)數(shù)值。取小鼠50只， 雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照、地西泮陽性對(duì)照(3mg/kg)、實(shí)施例1制備的膠囊（以下稱本發(fā) 明組)低劑量(0 · 225g/kg)、中劑量(0 · 45g/kg)、高劑量(0 · 9g/kg)共5組，灌胃容積20ml/kg， 空白對(duì)照組生理鹽水灌胃，每日一次，連續(xù)8日。于第7天給藥60min后，采用小鼠自主活動(dòng)儀 記錄小鼠放入箱適應(yīng)lmin后，記錄5min內(nèi)的站立次數(shù)和活動(dòng)次數(shù)。重復(fù)上次實(shí)驗(yàn)3次，取平 均值。比較給藥組、空白組及陽性對(duì)照組小鼠自主活動(dòng)數(shù)。
[0101] 2.1.2本發(fā)明組合物延長(zhǎng)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn)研究
[0102] 在戊巴比妥鈉催眠基礎(chǔ)上，觀察受試物能否延長(zhǎng)睡眠時(shí)間，若睡眠時(shí)間延長(zhǎng)，則表 明受試物與戊巴比妥鈉有協(xié)同作用。正式實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定戊巴比妥鈉域上催眠 劑量為50mg/kg，戊巴比妥鈉閾上劑量為使小鼠100 %入睡，但又不使睡眠時(shí)間過長(zhǎng)的劑量， 2.1.1中測(cè)完自主活動(dòng)的小鼠于第8天給藥60min后，各組小鼠均腹腔注射戊巴比妥鈉50mg/ kg，睡眠以翻正反射消失為指標(biāo)，以動(dòng)物背向下姿勢(shì)保持30s以上者，判斷為翻正反射消失， 記錄注射戊巴比妥鈉后至小鼠翻正反射消失時(shí)間，作為入睡潛伏期，并觀察記錄翻正反射 消失至覺醒的時(shí)間作為持續(xù)睡眠時(shí)間。
[0103] 2.1.3本發(fā)明組合物戊巴比妥鈉域下劑量小鼠催眠實(shí)驗(yàn)研究
[0104]由于戊巴比妥鈉通過肝藥酶代謝，而對(duì)該酶有抑制作用的藥物，也能延長(zhǎng)戊巴比 妥鈉睡眠時(shí)間，為排除這種影響而進(jìn)行域下劑量實(shí)驗(yàn)。正式實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定戊巴 比妥鈉域下催眠劑量為30mg/kg，戊巴比妥鈉閾下劑量是指為使90%~100%小鼠翻正反射 不消失的戊巴比妥鈉的最大劑量，取小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照、地西泮陽性 對(duì)照(3mg/kg)、本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊(本發(fā)明組)低劑量(0.225g/kg)、中劑量(0.45g/ kg)、高劑量(0.9g/kg)，共5組，灌胃容積20ml/kg，空白對(duì)照組生理鹽水灌胃，每天1次，連續(xù) 5天。末次給藥60min后各組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉域下催眠劑量，記錄30min內(nèi)入睡小鼠 數(shù)(翻正反射消失達(dá)lmin以上）。
[0105] 2.1.4本發(fā)明組合物對(duì)咖啡因興奮小鼠鎮(zhèn)靜催眠的影響
[0106] 取小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照、咖啡因?qū)φ眨?0mg/kg)、地西泮對(duì)照 (3mg/kg)、本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊(本發(fā)明組)低劑量(0.225g/kg)、中劑量(0.45g/kg)、 高劑量(〇.9g/kg)共6組，灌胃容積20ml/kg，空白對(duì)照組生理鹽水灌胃，每日一次，連續(xù)4日。 于第4日灌胃40min后，各組小鼠均腹腔注射咖啡因（20mg/kg，生理鹽水配制），隔20min采用 小鼠自主活動(dòng)儀依次記錄小鼠放入箱適應(yīng)lmin后5min內(nèi)的站立次數(shù)和活動(dòng)次數(shù)，重復(fù)上次 實(shí)驗(yàn)3次，取平均值。測(cè)完后立即將測(cè)完小鼠均腹腔注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)，記錄注射戊 巴比妥鈉后至小鼠翻正反射消失時(shí)間作為入睡潛伏期，并觀察記錄翻正反射消失至覺醒的 時(shí)間作為持續(xù)睡眠時(shí)間。
[0107] 2.2本發(fā)明組合物急性毒性實(shí)驗(yàn)
[0108]取小鼠20只，禁食14小時(shí)后，灌胃給予實(shí)施例1制備的膠囊67.5 % (最大濃度），一 次0.4ml/10g(最大體積），一日2次，日給藥量50g，折合生藥63.45g/kg/d，觀察當(dāng)日，并連續(xù) 觀察14日，詳細(xì)記錄小鼠死亡以及攝食、活動(dòng)、體重、皮毛、飲水、眼睛、精神狀態(tài)、糞便等反 應(yīng)情況和出現(xiàn)的毒性反應(yīng)。
[0109] 2、試驗(yàn)結(jié)果
[0110] 2.1本發(fā)明組合物對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜催眠效果的影響結(jié)果 Com] 表1的結(jié)果顯示，地西泮組、本發(fā)明組的中、高劑量組活動(dòng)次數(shù)較空白對(duì)照組顯著 減少(P〈〇.05、p〈0.001、P〈0.01);地西泮組、本發(fā)明組的低劑量組站立次數(shù)間比較均無顯著 性差異，本發(fā)明組的中、高劑量組站立次數(shù)比空白對(duì)照組顯著減少(P〈〇.01、p〈0.001)。表明 本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊的中、高劑量不僅對(duì)小鼠活動(dòng)次數(shù)明顯減少，而且對(duì)小鼠站立次 數(shù)明顯減少，有鎮(zhèn)靜作用。
[0112] 表1本發(fā)明組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響（_x±s，n = 10)
[0115] 注：與空白對(duì)照組比較:*P〈0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001。
[0116] 表2結(jié)果顯示:地西泮組入睡潛伏期較空白對(duì)照組顯著縮短(P〈0.001);地西泮、本 發(fā)明組中劑量組持續(xù)睡眠時(shí)間較空白對(duì)照組顯著延長(zhǎng)(P〈〇.001、p〈0.01)。表明本發(fā)明實(shí)施 例1制備的膠囊的中劑量組有延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉催眠劑量的催眠作用。
[0117] 表2本發(fā)明組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響Γχ士S，n = 10)
[0119] 注：與空白對(duì)照組比較:**p〈o · 〇 1，***p〈o · 〇〇 1。
[0120] 表3結(jié)果顯示，本發(fā)明組中劑量組和地西泮組小鼠入睡率分別為80 %和100%，與 正常對(duì)照組比較，均有顯著差異(P〈〇.05)，表明本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊中劑量可增加戊 巴比妥鈉域下催眠劑量小鼠的入睡數(shù)。
[0121] 表3本發(fā)明組合物對(duì)戊巴比妥鈉域下劑量小鼠催眠作用的影響(n = 10)
[0124] 注:與空白對(duì)照組比較:*P〈0 · 05。
[0125] 2.2本發(fā)明組合物對(duì)咖啡因興奮小鼠鎮(zhèn)靜催眠的影響結(jié)果
[0126] 本發(fā)明組合物對(duì)咖啡因興奮小鼠自主活動(dòng)的影響見表4,結(jié)果顯示，各組間小鼠活 動(dòng)次數(shù)無顯著性差異，本發(fā)明組的中劑量組小鼠的站立次數(shù)較空白對(duì)照組顯著減少（P〈 〇. 01 )，高劑量組小鼠的站立次數(shù)較空白對(duì)照組顯著減少(P〈〇. 〇〇1)。
[0127] 表4本發(fā)明組合物對(duì)咖啡因興奮小鼠自主活動(dòng)的影響nX±S.，n = 10)
[0129] 注：與空白對(duì)照組比較:**Ρ〈0 · 01，***P〈0 · 001。
[0130] 表5的結(jié)果顯示:咖啡因興奮組睡眠潛伏期顯著短于空白對(duì)照組(P〈0.05);咖啡因 興奮組持續(xù)睡眠時(shí)間比空白對(duì)照組明顯縮短(P〈〇.05)，地西泮和本發(fā)明組的中、高劑量組 持續(xù)睡眠時(shí)間顯著長(zhǎng)于咖啡因組(P〈〇.001)。表明本發(fā)明實(shí)施例1制備膠囊的中、高劑量組 明顯延長(zhǎng)咖啡因興奮小鼠睡眠時(shí)間。
[0131] 表5本發(fā)明組合物對(duì)咖啡因興奮小鼠睡眠時(shí)間的影響(X土s，n = 10)
[0133] 注：與咖啡因興奮組比較:*P〈〇 · 05，#P〈0 · 01，*#P〈0 · 001。
[0134] 綜上，本發(fā)明組合物可明顯減少正常小鼠活動(dòng)次數(shù)、延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉域上催 眠劑量睡眠時(shí)間，增加戊巴比妥鈉域下催眠劑量小鼠的入睡數(shù);而且能夠明顯延長(zhǎng)咖啡因 興奮小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間，具有鎮(zhèn)靜、催眠作用。
[0135] 2.3本發(fā)明組合物急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0136] 2.3.1動(dòng)物反應(yīng)情況
[0137] 實(shí)施例1制備的膠囊一日內(nèi)2次灌胃后小鼠無一例死亡;除活動(dòng)及精神狀態(tài)稍顯遲 鈍外，其攝食、飲水、皮毛、呼吸、眼睛、體重等狀況均未見異常。灌胃1小時(shí)后雌鼠2只及雄鼠 2只出現(xiàn)稀便反應(yīng)，6小時(shí)之后恢復(fù)正常。
[0138] 2.3.2主要臟器肉眼觀察
[0139] 第15天殺檢后肉眼觀察，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、胃、十二指腸、結(jié)腸、子 宮、卵巢或睪丸、附睪、前列腺-貯精囊等主要臟器顏色、形態(tài)、大小、軟硬度等均未見異常變 化。
[0140] 2.3.3相當(dāng)于成人日用量倍數(shù)
[0141 ]實(shí)施例1制備的膠囊按成人臨床日服量最大量2.4g，按成人60kg計(jì)算，臨床成人日 服量為0.04g/kg，折合生藥0.05076g/kg;小鼠能耐受的膠囊最大濃度為67.5%，最大體積 40ml/kg，一日內(nèi)2次灌胃給予小鼠，50g/kg/d，折合生藥63.45g/kg/d，相當(dāng)于臨床成人日服 量的1013倍。
[0142] 本發(fā)明膠囊折合生藥相當(dāng)于臨床成人用量倍數(shù)(成人按60kg計(jì)算）=小鼠日給藥 量/(成人日服量/60kg)
[0143] =67 · 5g/100ml*40ml/kg*2/[3 · 2g/60kg]
[0144] =1013(倍）。
[0145] 本發(fā)明實(shí)施例1制備的膠囊測(cè)不出LD5Q。最大給藥量試驗(yàn)表明，以小鼠能耐受的最 大濃度、最大體積的膠囊一日內(nèi)2次灌胃給予，相當(dāng)于成人臨床用藥量的1013倍，未引起動(dòng) 物死亡，未見明顯毒性反應(yīng)，表明本發(fā)明組合物毒性較小。
[0146] 試驗(yàn)例2不同組方組合物的睡眠效果試驗(yàn)
[0147] 1、試驗(yàn)方法
[0148] 1.1不同組方的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)
[0149] 按照實(shí)施例1的方法分別將不同組方組合物制備膠囊(其中，賦形劑為藥用淀粉）：
[0150] A組：鹿茸血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+賦形劑 300mg;
[0151] B組：鹿茸血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+玄參提 取物60mg+酸率仁提取物60mg+地黃提取物20mg+刺五加提取物25mg+燈芯草提取物100mg+ 賦形劑35mg;
[0152] C組:鹿茸血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+夜交藤 提取物60mg+麥芽提取物60mg+蓮子心提取物20mg+白芍提取物25mg+郁金提取物100mg+賦 形劑35mg;
[0153] D組：鹿茸血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+黃芪提 取物60mg+黨參提取物60mg+當(dāng)歸提取物20mg+炙甘草提取物25mg+陳皮提取物100mg+賦形 劑35mg;
[0154] E組:鹿鸞血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6l0mg+大豆卵磷脂50mg+柏子仁 提取物60mg+麥冬提取物60mg+川芎提取物20mg+益智仁提取物25mg+半夏提取物100mg+賦 形劑35mg;
[0155] F組:鹿鸞血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6l0mg+大豆卵磷脂50mg+五味子 提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物60mg+茯苓提取物20mg+酸棗仁提取物25mg+百合提取物100mg+賦 形劑35mg;
[0156] G組:鹿鸞血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6l0mg+大豆卵磷脂50mg+五味子 提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物60mg+地黃提取物20mg+天麻提取物25mg+百合提取物100mg+賦形 劑35mg;
[0157] Η組：鹿茸血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+刺五加 提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物60mg+茯苓提取物20mg+天麻提取物25mg+百合提取物100mg+賦形 劑35mg;
[0158] I組:鹿鸞血粉30mg+ γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6l0mg+大豆卵磷脂50mg+五味子 提取物60mg+丹參提取物60mg+茯苓提取物20mg+天麻提取物25mg+百合提取物100mg+賦形 劑35mg;
[0159] 本發(fā)明組：鹿茸血粉30mg+y-氨基丁酸粉10mg+維生素 B610mg+大豆卵磷脂50mg+ 五味子提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物60mg+茯苓提取物20mg+天麻提取物25mg+百合提取物100mg +賦形劑35mg;
[0160] 進(jìn)行各組對(duì)小鼠自主活動(dòng)影響的實(shí)驗(yàn)研究:本方法通過直接觀察動(dòng)物自主活動(dòng)的 自動(dòng)計(jì)數(shù)法得以實(shí)現(xiàn)。取小鼠220只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照、A組、B組、C組、D組、E組、 F組、G組、Η組、I組、本發(fā)明組共11組，均采用中劑量組;灌胃容積20ml/kg，空白對(duì)照組生理 鹽水灌胃，每日一次，連續(xù)8日。于第7天給藥60min后，采用小鼠自主活動(dòng)儀記錄小鼠放入箱 適應(yīng)lmin后，記錄5min內(nèi)的站立次數(shù)和活動(dòng)次數(shù)。重復(fù)上次實(shí)驗(yàn)3次，取平均值。比較各組小 鼠活自主活動(dòng)數(shù)。
[0161] 1.2不同組方的組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響
[0162] 在戊巴比妥鈉催眠基礎(chǔ)上，觀察受試物能否延長(zhǎng)睡眠時(shí)間，若睡眠時(shí)間延長(zhǎng)，則表 明受試物與戊巴比妥鈉有協(xié)同作用。正式實(shí)驗(yàn)前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定戊巴比妥鈉域上催眠 劑量為50mg/kg，戊巴比妥鈉閾上劑量為使小鼠100 %入睡，但又不使睡眠時(shí)間過長(zhǎng)的劑量， 將1.1中測(cè)完自主活動(dòng)的小鼠于第8天給藥60min后，各組小鼠均腹腔注射戊巴比妥鈉50mg/ kg，睡眠以翻正反射消失為指標(biāo)，以動(dòng)物背向下姿勢(shì)保持30s以上者，判斷為翻正反射消失， 記錄注射戊巴比妥鈉后至小鼠翻正反射消失時(shí)間，作為入睡潛伏期，并觀察記錄翻正反射 消失至覺醒的時(shí)間作為持續(xù)睡眠時(shí)間。比較各組對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間 的影響(―X土 s，n=10)。
[0163] 2、試驗(yàn)結(jié)果
[0164] 2.1不同組方的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響
[0165] 表6的結(jié)果顯示，A組、E組活動(dòng)次數(shù)與空白對(duì)照差異不顯著(P>0.05);B-D、F-I組及 本發(fā)明組活動(dòng)次數(shù)較空白對(duì)照組顯著減少(P〈〇.01);而且本發(fā)明組活動(dòng)次數(shù)較B-D、F-I組 顯著減少(P〈〇.001)。站立次數(shù)空白對(duì)照組與A-Ι組間比較均無顯著性差異;本發(fā)明組站立 次數(shù)較空白對(duì)照組顯著減少(P〈〇.01)，表明本發(fā)明組的組合物有更好的鎮(zhèn)靜作用。
[0166] 表6不同組方的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響Γχ 士s，n = 10)
[0169] 與空白對(duì)照組比較:*P>0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001。
[0170] 2.2不同組方的組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響
[0171] 表7的結(jié)果顯示:A-Ι組及本發(fā)明組入睡潛伏期較空白對(duì)照組均無顯著變化;但B-I 組及本發(fā)明組持續(xù)睡眠時(shí)間較空白對(duì)照組顯著延長(zhǎng)(P〈〇. 01、P〈〇. 001)。表明B-I組及本發(fā) 明組均有延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉催眠劑量的催眠作用；同時(shí)，本發(fā)明組較B-I組的持續(xù)睡眠時(shí) 間更長(zhǎng)(P〈0.001)，有著極顯著的延長(zhǎng)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的作用。
[0172] 表7不同組方的組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響rX±s， n = 10)
[0175] 注：與空白對(duì)照組比較:**P〈0 · 01，***P〈0 · 001。
[0176] 以上結(jié)果表明，在鹿茸血粉、γ -氨基丁酸粉、維生素 B6、大豆卵磷脂基礎(chǔ)上添加五 味子提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物、天麻提取物、百合提取物，具有更顯著的減少正常小 鼠活動(dòng)次數(shù)、延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間的作用。證明，鹿茸血粉、γ-氨基 丁酸粉、維生素 Β6、大豆卵磷脂與五味子提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物、天麻提取物、百 合提取物之間具有明顯的協(xié)同增效作用。
[0177] 試驗(yàn)例3本發(fā)明組合物的用量篩選試驗(yàn)
[0178] 1、試驗(yàn)方法
[0179] 按照實(shí)施例1的方法分別將不同用量配比的組合物制備膠囊（賦形劑為藥用淀 粉)：
[0180] 本發(fā)明組:鹿茸血粉30mg+Y-氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+ 五味子提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物60mg+茯苓提取物20mg+天麻提取物25mg+百合提取物100mg +賦形劑35mg;
[0181] 1組：鹿鸞血粉30mg+γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+五味 子提取物50mg+遠(yuǎn)志提取物50mg+茯苓提取物25mg+天麻提取物50mg+百合提取物100mg+賦 形劑25mg;
[0182] 2組：鹿茸血粉30mg+y-氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+五味 子提取物20mg+遠(yuǎn)志提取物25mg+茯苓提取物100mg+天麻提取物60mg+百合提取物60mg+賦 形劑35mg;
[0183] 3組：鹿鸞血粉30mg+γ -氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+五味 子提取物60mg+遠(yuǎn)志提取物20mg+茯苓提取物60mg+天麻提取物100mg+百合提取物25mg+賦 形劑35mg;
[0184] 4組：鹿茸血粉30mg+y-氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+五味 子提取物35mg+遠(yuǎn)志提取物100mg+茯苓提取物10mg+天麻提取物70mg+百合提取物50mg+賦 形劑35mg;
[0185] 5組：鹿茸血粉30mg+y-氨基丁酸粉10mg+維生素 B6 10mg+大豆卵磷脂50mg+五味 子提取物l〇〇mg+遠(yuǎn)志提取物50mg+茯苓提取物70mg+天麻提取物20mg+百合提取物25mg+賦 形劑35mg。
[0186] 按照試驗(yàn)例2的方法進(jìn)行不同用量的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)影響的實(shí)驗(yàn)，以及對(duì) 戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響試驗(yàn)。
[0187] 2、試驗(yàn)結(jié)果
[0188] 2.1不同用量的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響
[0189] 表8的結(jié)果顯示，1-5組的活動(dòng)次數(shù)較空白對(duì)照組顯著減少(P〈0.01)，而本發(fā)明組 活動(dòng)次數(shù)較空白對(duì)照組極顯著減少(P〈〇.001)。站立次數(shù)空白對(duì)照組與1-5組間比較均無顯 著性差異，而本發(fā)明組站立次數(shù)較空白對(duì)照組明顯減少(P〈〇.01)，表明本發(fā)明組的組合物 有更好的鎮(zhèn)靜作用。
[0190] 表8不同用量的組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響ΓΧ±δ，η = 10)
[0193] 與空白對(duì)照組比較:*P>0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001。
[0194] 2.2不同用量的組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響
[0195] 表9的結(jié)果顯示：1-5組及本發(fā)明組的入睡潛伏期較空白對(duì)照組均無顯著變化;但 1 -5組及本發(fā)明組的持續(xù)睡眠時(shí)間較空白對(duì)照組顯著延長(zhǎng)(P〈0.01、P〈0.001)。表明1 -5組及 本發(fā)明組均有延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉催眠劑量的催眠作用；同時(shí)本發(fā)明組較1-5組的持續(xù)睡 眠時(shí)間更長(zhǎng)(P〈〇.001)，有著極顯著的延長(zhǎng)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的作用。
[0196] 表9不同用量的組合物對(duì)戊巴比妥鈉域上劑量小鼠催眠睡眠時(shí)間的影響rX±s， n = 10)
[0199] 注：與空白對(duì)照組比較:**P〈〇 · 〇 1，***P〈〇 · 〇〇 1。
[0200] 以上結(jié)果表明，在鹿茸血粉、γ -氨基丁酸粉、維生素 B6、大豆卵磷脂基礎(chǔ)上添加特 定用量的五味子提取物、遠(yuǎn)志提取物、茯苓提取物、天麻提取物和百合提取物，具有更顯著 的減少正常小鼠活動(dòng)次數(shù)、延長(zhǎng)小鼠戊巴比妥鈉域上催眠劑量睡眠時(shí)間的作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種改善睡眠障礙的組合物，其特征在于，包括以下各組分：鹿茸血粉、γ-氨基丁 酸、維生素 B6和大豆卵磷脂。2. 按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，各組分的重量份為：鹿茸血粉10-40份、 γ-氨基丁酸5-20份、維生素 B6 5-20份、大豆卵磷脂20-70份； 優(yōu)選的，各組分的重量份為:鹿茸血粉30份、γ-氨基丁酸10份、維生素 B6 10份、大豆卵 磷脂50份。3. -種改善睡眠障礙的組合物，其特征在于，包括以下各組分：鹿茸血粉、γ-氨基丁 酸、維生素 Β6、大豆卵磷脂、五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓； 各組分的重量份為:鹿茸血粉10-40份、γ-氨基丁酸5-20份、維生素 B6 5-20份、大豆卵 磷脂20-70份、五味子20-100份、天麻20-100份、百合25-100份、遠(yuǎn)志20-100份、茯苓25-100 份； 優(yōu)選的，各組分的重量份為:鹿茸血粉30份、γ-氨基丁酸10份、維生素 B6 10份、大豆卵 磷脂50份、五味子60份、天麻25份、百合100份、遠(yuǎn)志60份、茯苓20份。4. 一種改善睡眠障礙的組合物，其特征在于，包括以下各組分：鹿茸血粉、γ-氨基丁 酸、維生素 Β6、大豆卵磷脂、五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提 取物。5. 按照權(quán)利要求4所述的組合物，其特征在于，各組分的重量份為：鹿茸血粉10-40份、 γ -氨基丁酸5-20份、維生素 B6 5-20份、大豆卵磷脂20-70份、五味子提取物20-100份、天麻 提取物20-100份、百合提取物25-100份、遠(yuǎn)志提取物20-100份、茯苓提取物25-100份； 優(yōu)選的，各組分的重量份為:鹿茸血粉30份、γ-氨基丁酸10份、維生素 B6 10份、大豆卵 磷脂50份、五味子提取物60份、天麻提取物25份、百合提取物100份、遠(yuǎn)志提取物60份、茯苓 提取物20份。6. -種制備權(quán)利要求1或2所述組合物的方法，其特征在于，包括以下步驟:將鹿茸血粉 粉碎過篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 B6和大豆卵磷脂混合均勻，即得。7. -種制備權(quán)利要求3所述組合物的方法，其特征在于，包括以下步驟:將鹿茸血粉、五 味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓分別粉碎過篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 B6和大豆卵磷脂 混合均勻，即得。8. -種制備權(quán)利要求4或5所述組合物的方法，其特征在于，包括以下步驟：（1)分別制 備五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物；（2)將鹿茸血粉粉碎 過篩，然后與γ-氨基丁酸、維生素 Β6、大豆卵磷脂、五味子提取物、天麻提取物、百合提取 物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物混合均勻，即得； 其中，步驟（1)所述五味子提取物、天麻提取物、百合提取物、遠(yuǎn)志提取物和茯苓提取物 的制備包括:將五味子、天麻、百合、遠(yuǎn)志和茯苓分別粉碎過篩，加水煎煮，取濾液;將濾液濃 縮成浸膏，干燥，粉碎，即得。9. 權(quán)利要求1至5任何一項(xiàng)所述組合物在制備改善睡眠障礙的藥物中的應(yīng)用。10. 按照權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑型為口服制劑，包括:散劑、 片劑、沖劑、丸劑、乳劑、顆粒劑或膠囊劑中的任意一種;優(yōu)選為膠囊劑。
【文檔編號(hào)】A61K36/8988GK105902569SQ201610363059
【公開日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年5月26日
【發(fā)明人】陳巍, 賈冬舒, 秦鳳賢, 胡鐵軍, 王晶, 朱彤, 李忠敬
【申請(qǐng)人】吉林省中韓動(dòng)物科學(xué)研究院