一種治療手足口病的靈芝多糖復(fù)合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥保健食品技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種治療手足口病的靈芝多糖復(fù)合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]手足口病一般發(fā)生在3歲以下兒童，伴有低熱、腹痛、全身不適等前驅(qū)癥，口腔、咽、軟腭等會(huì)出現(xiàn)疼痛性水皰，而重癥病例常在發(fā)病1-5天出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎等臨床表現(xiàn)。腸道病毒71型是引起嬰幼兒手足口病主要病原體之一。到目前為止，臨床上還沒有十分有效的治療方案。
[0003]靈芝是珍貴的藥用真菌，具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、抗衰老等功效。靈芝酸是從靈芝中提取的三萜類化合物，在消炎抗菌、抗腫瘤以及抗HIV病毒和腸道病毒71型方面均有報(bào)道。靈芝多糖是靈芝中重要的活性成分，尚未見到靈芝多糖防治手足口病和抗腸道病毒71型的相關(guān)研究。
[0004]魚腥草為藥食兩用的植物，具有清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋等功能，其主要活性成分為黃酮類化合物和揮發(fā)油。連翹是我國臨床常用中藥之一，連翹屬植物主要含有萜類、木脂素類、黃酮類等化合物，具有抗菌消炎、抗病毒、抗內(nèi)毒素等作用。知母為百合科知母屬植物知母的干燥根莖，具有清熱瀉火，滋陰潤燥的功效，在臨床上可用于病毒性疾病的治療。
[0005]檢索關(guān)于靈芝在在治療手足口病和腸道病毒71型上的應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)相關(guān)專利有:中國專利申請?zhí)枮?01110162657.4靈芝酸Y在制備治療或預(yù)防腸道病毒71型感染藥物中的應(yīng)用，以及專利申請?zhí)?201110436439.5 靈芝酸 Lanosta-7,9(11 )24-trien-3-onel5 ,26-dihydroxy 在制備預(yù)防和 / 或治療腸道病毒 71 型感染藥物中的應(yīng)用。靈芝抗腸道病毒 71 型的專利主要集中在靈芝酸，尚未見到靈芝多糖復(fù)合物防治手足口病和抗腸道病毒71型的研究和專利。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]經(jīng)發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，以靈芝多糖復(fù)配中藥魚腥草、連翹以及知母提取物制備而成的復(fù)合物，能顯著起到防治手足口病和抗腸道病毒71型的作用。本發(fā)明的目的在于提供一種防治手足口病的靈芝多糖復(fù)合物及其制備方法。該復(fù)合物可進(jìn)一步制備成具有防治手足口病和腸道病毒71型功效的藥物或保健品，與臨床治療藥物配合食用，能起到顯著防治手足口病的功能，并可降低藥物的毒副作用。
[0007]本發(fā)明的目的，可通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
一種治療手足口病的靈芝多糖復(fù)合物，由以下重量份組分組成:靈芝多糖20-30份，魚腥草、連翹、知母復(fù)方中藥提取物3-5份，蔗糖5-10份，阿斯巴甜0.03-0.05份，香精0.03-0.08份，純凈水200-300份。
[0008]所述的靈芝多糖制備方法為: (1)靈芝子實(shí)體清洗2-3次，55-60°C烘干后超微粉碎，過80-100目篩，備用；
(2)將步驟(I)中制備的靈芝粉末，按重量與體積比g/mL為1:3-4加入95%乙醇，65-80°C回流l_2h去除脂溶性物質(zhì)，3000-4500 r/min離心10-15 min，收集濾渣，50-60°C烘干，超微粉碎過80-100目篩，備用；
(3)取步驟(2)得到的靈芝粉末，加入純凈水，其中靈芝粉末重量與純凈水體積比g/mL為1: 20-35，75-85° C下浸提2-4 h, 3000-4500 r/min離心15-25 min，取上清液備用，將離心的殘?jiān)M(jìn)行上述步驟提取2-3次，合并上清液；
(4)將步驟(3)上清液在55-65°C及轉(zhuǎn)速為50-80r/min下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將上清液濃縮為原來的1/10-1/5;
(5)將步驟(4)得到濃縮的上清液，按體積比加入3-4倍的95%乙醇，置于0-4°C中醇沉5-10 h,3000-4500 r/min離心15-25 min，沉淀物冷凍干燥后，粉碎過50-100目篩，得粉末備用；
(6)向步驟(5)所得制備的粉末加入純凈水進(jìn)行復(fù)溶，粉末重量與純凈水體積比g/mL為1:5-8，用Sevag法、聚酰胺法、三氯乙酸法、酶法中一種或幾種除蛋白3-5次，得到靈芝粗多糖溶液；
(7)向步驟(6)得到的靈芝粗多糖溶液，按體積與重量比L/g為1:15-20使用AB-8樹脂，20-25°C條件下50-80 r/min振蕩3_4 h進(jìn)行脫色，得到的多糖溶液；
(8)將步驟(7)得到的多糖溶液裝入透析袋，截留分子量10000以上，蒸餾水透析16-20h，每4 h換一次蒸餾水；
(9)取步驟(8)得到的多糖溶液經(jīng)DEADSephadex A_25離子交換柱進(jìn)行洗脫，洗脫得到的組分再經(jīng)Sephadex G-200葡聚糖凝膠柱，收集單一洗脫峰溶液，冷凍干燥后，粉碎過50-100目篩，得到靈芝純多糖粉末，備用。
[0009]所述香精包括香草香精、奶油香精、蘋果香精、葡萄香精、香蕉香精中的一種或幾種。
[0010]所述的魚腥草、連翹、知母復(fù)方中藥提取物制備方法為:
(1)魚腥草、連翹、知母分別清洗2-3次，55-60°C烘干后超微粉碎，過80-100目篩，備用；
(2)取步驟(I)制備的魚腥草粉末，按重量與體積比g/mL為1:3-5加入質(zhì)量濃度為70%-80%的乙醇溶液，微波-超聲波協(xié)同輔助提取10-20min，過濾;將濾渣按上述步驟重復(fù)提取2-3次，合并濾液，于3000-4000 r/min條件下離心10-20 min，取上清液，在45-55° C條件下濃縮至浸膏狀，冷凍干燥后粉碎過50-80目篩，得魚腥草提取物；
(3)取步驟(I)制備的連翹粉末，按重量與體積比g/mL為1:3-4加入質(zhì)量濃度為70%-80%的乙醇溶液，微波-超聲波協(xié)同輔助提取10-15min，過濾;將濾渣按上述步驟重復(fù)提取2-3次，合并濾液，于3000-4000 r/min條件下離心10-20 min，取上清液，在45-55° C條件下濃縮至浸膏狀，冷凍干燥后粉碎過50-80目篩，得連翹提取物；
(4)取步驟(I)制備的知母粉末，按重量與體積比g/mL為1:4-6加入質(zhì)量濃度為70%-80%的乙醇溶液，微波-超聲波協(xié)同輔助提取15-20 min，過濾;將濾渣按上述步驟重復(fù)提取2-3次，合并濾液，于3000-4000 r/min條件下離心10-20 min，取上清液，在45-55° C條件下濃縮至浸膏狀，冷凍干燥后粉碎過50-80目篩，得知母提取物；
(5)取步驟(2)魚腥草提取物、步驟(3)連翹提取物、步驟(4)知母提取物粉末，按照重量比2:1:1混勻制得中藥復(fù)方提取物。
[0011 ] 一種治療手足口病的靈芝多糖復(fù)合物的制備方法，包括如下:
(1)按照配方，取靈芝純多糖，與魚腥草、連翹以及知母中藥復(fù)方提取物混合，再加入蔗糖、香精、阿斯巴甜、純凈水，攪拌20-30 min制得復(fù)合口服液的原溶液；調(diào)節(jié)溶液pH值為
6.9-7.5;
(2)將步驟(I)得到的溶液靜置2-4h，取上清液經(jīng)中空纖維膜超濾設(shè)備超濾，得口服液；
(3)將步驟(2)調(diào)配好的口服液趁熱用灌裝、鎖蓋，經(jīng)水浴殺菌并檢驗(yàn)合格后即成為產(chǎn)品O
[0012]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:靈芝純多糖與魚腥草、連翹、知母復(fù)方中藥提取物，經(jīng)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，具有很強(qiáng)的抗腸道病毒71型的效果。尚未見到靈芝多糖復(fù)合物抗腸道病毒71型和防治手足口病的相關(guān)研究。該工藝操作簡便，成本價(jià)格低，安全可靠，適合工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0013]圖1靈芝多糖復(fù)合物體外抗腸道病毒71型試驗(yàn)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0014]實(shí)施例1
一種治療手足口病的靈芝多糖復(fù)合物，由以下重量份組分組成:靈芝多糖20份，魚腥草、連翹、知母復(fù)方中藥提取物3份，蔗糖5份，阿斯巴甜0.03份，香精0.03份，純凈水200份。
[0015]所述的靈芝多糖制備方法為:
(1)靈芝子實(shí)體清洗2次，55°C烘干后超微粉碎，過80目篩，備用；
(2)將步驟(I)中制備的靈芝粉末，按重量與體積比g/mL為1:3加入95%乙醇，65°C回流Ih去除脂溶性物質(zhì)，3000 r/min離心1min，收集濾渣，50°C烘干，超微粉碎過80目篩，備用；
(3)取步驟(2)得到的靈芝粉末，加入純凈水，其中靈芝粉末重量與純凈水體積比g/mL為1:20，75°C下浸提2 h，3000 r/min離心15 min，取上清液備用，將離心的殘?jiān)M(jìn)行上述步驟提取2次，合并上清液；
(4)將步驟(3)上清液在55°C及轉(zhuǎn)速為50r/min下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將上清液濃縮為原來的1/10;
(5)將步驟(4)得到濃縮的上清液，按體積比加入3倍的95%乙醇，置于0°C中醇沉5h，3000r/min離心15min，沉淀物冷凍干燥后，粉碎過50目篩，得粉末備用；
(6)向步驟(