防治非酒精性脂肪肝病的含化合物k強(qiáng)化的紅參濃縮物的藥物組合物和保健功能食品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的包含化合物Κ強(qiáng)化的紅參濃 縮物作為有效成分之藥物組合物以及用于預(yù)防和改善非酒精性脂肪肝疾病的包含化合物Κ 強(qiáng)化的紅參濃縮物作為有效成分之保健功能食品。
【背景技術(shù)】
[0002] 人參（Panax ginseng C. A. Mayer)是屬于人參（Araliaceau ginseng)屬的植物， 并且在中國(guó)從公元前就已用于藥物，從三國(guó)時(shí)期就已用于貿(mào)易和藥物，并且至今被廣泛用 作多個(gè)領(lǐng)域的藥草或保健功能食品。
[0003] 人參包含約3 %至5%的被稱為人參皂苷的次皂苷（prosaponin)，人參皂苷是人 參的代表性生理活性物質(zhì)并且報(bào)道了約33種人參皂苷。由于人參的人參皂苷與聚合物的 構(gòu)成組分連接，在攝取后它不容易被吸收到體內(nèi)，因此通過(guò)棲息在腸內(nèi)的微生物來(lái)消化，然 后被吸收到體內(nèi)。也就是說(shuō)，其中與人參皂苷結(jié)合的葡萄糖被消化的人參皂苷形式最終被 吸收到體內(nèi)，每種人參皂苷表現(xiàn)出各不相同的生理活性。
[0004] 同時(shí)，20-0- β -D-吡喃葡萄糖基-20 (S)-原人參二醇（以下稱為化合物K)是一種 基于原人參二醇（protopanaxadiol，PPD)的阜苷，其中葡萄糖與在糖苷配基20位上的碳結(jié) 合，并且是通過(guò)腸道細(xì)菌由人參阜苷Rbl、Rc、Rb2產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化物（convertant) (Hasegawa， Η等，Planta Medica，62 :453-457 (1996))。化合物K以對(duì)癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移具有抑制 作用、抗衰老、抗過(guò)敏和免疫增強(qiáng)功能而著稱，但本身不包含在人參或紅參中，而是可作為 由腸道細(xì)菌在體內(nèi)的代謝產(chǎn)品而獲得。但是，據(jù)報(bào)道，由于腸道細(xì)菌的種類和代謝能力因 人而異，所以吸收和效力取決于個(gè)體而存在差別（Hasegawa，Η等，Planta Medica，63(5): 436-440(1997))〇
[0005] 作為用于將人參阜苷轉(zhuǎn)化成化合物Κ的方法，熱處理（Kitagawa等，Yakugaku Zasshi.，103 :612-622(1983) ;Kwon 等，J. Chromatography A.，921 :335-339(2001) ;Park， Food Ind. Nutr.，9 :23-27 (2004))，酸處理（Han 等，Planta medica.，44 :146-149 (1982)， Bae 等，Arch Pharm Res. 27(1) :61-67(2004))，喊處理（Chen 等，Chem. Pharm. Bull. 35 : 1653-1655(1987) ;Im 等，Kor J Ginseng Sci. 19 :291-294(1995)),有機(jī)合成（Anufriev 等，Carbohydr Res. 304 :179-182(1997))，通過(guò)微生物的酶的轉(zhuǎn)化方法等都是本領(lǐng)域已知 的。在這些方法中，可認(rèn)為通過(guò)使用酶的酶轉(zhuǎn)化法是最有效的人參皂苷轉(zhuǎn)化法，原因是它可 通過(guò)特異性地對(duì)底物起作用而選擇性地轉(zhuǎn)化底物，同時(shí)幾乎不形成反應(yīng)副產(chǎn)物，它可在相 對(duì)安全的條件下進(jìn)行反應(yīng)，它顯示出高效率等。
[0006] 此外，如作為本發(fā)明的前期研究的韓國(guó)專利公開(kāi)No. 10-2013-0085970中呈現(xiàn)的， 已經(jīng)報(bào)道了化合物K強(qiáng)化的人參濃縮物的最佳制備方法，其中通過(guò)使用酶轉(zhuǎn)化法強(qiáng)化了化 合物K。
[0007] 肝臟負(fù)責(zé)解毒功能，也負(fù)責(zé)碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等（主要養(yǎng)分）的合成、代 謝、儲(chǔ)存和重新分布代謝過(guò)程，并且具有通過(guò)這樣的過(guò)程保持身體代謝內(nèi)穩(wěn)態(tài)的功能。但 是，肝功能可被多種原因損害，例如病毒、炎癥、重度飲酒、藥物、過(guò)勞等。
[0008] 作為被視為損害肝功能的主要原因和肝臟病癥的癥狀，可以提及脂肪肝，由于近 來(lái)的西方化飲食生活習(xí)慣、飲酒和壓力等的影響其頻率在增加。可以說(shuō)，脂肪肝是由于飲酒 或過(guò)度攝入脂肪以及壓力等的影響中性脂肪在肝臟中過(guò)度積累（肝臟重量的5%或更多） 的癥狀。脂肪肝可保持為不發(fā)展成任何病癥并且不對(duì)健康造成很大影響的狀態(tài)，但由于其 可發(fā)展成諸如肝臟炎癥和肝硬化等的疾病，所以它需要持續(xù)的護(hù)理和管理。
[0009] 脂肪肝疾病分為由于過(guò)度攝入酒精的酒精性脂肪肝疾病和不是由于過(guò)度攝入酒 精的非酒精性脂肪肝疾?。╪on-alchoholic fatty liver disease，NAFLD)。
[0010] 非酒精性脂肪肝疾病是一種其中中性脂肪在肝臟中積累（與飲酒無(wú)關(guān)）的病癥， 并且意指一系列的病癥組，其包括僅僅是脂肪在肝臟過(guò)度積累的單純脂肪變性、伴隨壞死 的非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepattis，NASH)、肝細(xì)胞的纖維化和炎癥 以及其進(jìn)一步發(fā)展形式的肝硬化（liver cirrhosis，LC)。
[0011] 近來(lái)，不僅在很多西方國(guó)家，而且在韓國(guó)，非酒精性脂肪肝疾病的發(fā)病率正在 增加，這與成人和兒童肥胖的增加有關(guān)，報(bào)道稱發(fā)病率在發(fā)達(dá)國(guó)家為總?cè)丝诘募s20%至 30%，但是在各國(guó)之間有差異。
[0012] 近來(lái)，非酒精性脂肪肝疾病被認(rèn)為是代謝綜合征（例如肥胖、高血壓、II型糖尿 病、基于胰島素抗性的脂質(zhì)代謝紊亂）的一種類型。非酒精性脂肪肝疾病可以是簡(jiǎn)單的脂 沉積癥，但存在的問(wèn)題是在患有非酒精性脂肪肝疾病的患者中約10%至20%發(fā)生非酒精 性脂肪肝炎癥，并且約9%至25%的患者發(fā)展成肝硬化。
[0013] 通?？赏ㄟ^(guò)適當(dāng)?shù)財(cái)z入營(yíng)養(yǎng)素并調(diào)節(jié)相關(guān)的代謝紊亂來(lái)治愈非酒精性脂肪肝疾 病，但在忽視的情況下，預(yù)后會(huì)變差。因此，為了防止非酒精性脂肪肝疾病發(fā)展成肝硬化，應(yīng) 當(dāng)防止脂肪在肝臟中積累，但情況是，除了降低熱量攝入或增加熱量消耗的方法外，沒(méi)有別 的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014] [技術(shù)問(wèn)題]
[0015] 在所述的情況下，作為本發(fā)明的發(fā)明人試圖提供一種可預(yù)防和治療非酒精性脂肪 肝疾病的組合物的結(jié)果，制備了來(lái)自人參的化合物K強(qiáng)化的紅參濃縮物，并且確定包含其 的用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的組合物在通過(guò)動(dòng)物測(cè)試中的高脂飲食引起的脂 肪肝疾病中具有抑制肝臟中脂肪積累的作用，并因此完成了本發(fā)明。
[0016] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的藥物組 合物，其包含化合物K強(qiáng)化的紅參濃縮物作為有效成分。
[0017] 本發(fā)明的另一個(gè)目的也是提供一種用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的保健 功能食品，其包含化合物K強(qiáng)化的紅參濃縮物。
[0018] [技術(shù)方案]
[0019] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的藥物組 合物，其包含化合物K強(qiáng)化的紅參濃縮物作為有效成分。
[0020] 本發(fā)明提供了用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的保健功能食品，其包含化合 物K強(qiáng)化的紅參濃縮物。
[0021] [有益效果]
[0022] 本發(fā)明具有提供用于預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝疾病的藥物組合物和保健功能 食品的效果，其包含化合物Κ(其安全性通過(guò)僅用水和乙醇提取而增加）強(qiáng)化的紅參濃縮 物，并且所述組合物可提供通過(guò)降低血液和肝臟組織中中性脂質(zhì)（neutral lipid，TG)的含 量來(lái)抑制非酒精性脂肪肝疾病的效果。
【附圖說(shuō)明】
[0023] 圖1表示用于通過(guò)酶轉(zhuǎn)化技術(shù)制備化合物K強(qiáng)化的紅參濃縮物的過(guò)程。
[0024] 圖2a和2b表示正常飲食（Normal Diet，ND)對(duì)照、高脂飲食（High-Fat Diet， HFD)對(duì)照、高脂飲食+水飛薊素治療組（HFD+sily)以及高脂飲食+根據(jù)本發(fā)明各種濃度的 化合物K強(qiáng)化的人參濃縮物的治療組（HFD+G X100、GX250、Gx500)之實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織病理學(xué) 變化。圖2a分別表示油紅0(0il Red 0)染色后的拍攝結(jié)果。圖2b分別表示蘇木精-伊 紅染色（hematoxylin-eosin stain)后的拍攝結(jié)果。
[0025] 圖3表示根據(jù)施用正常飲食（ND)對(duì)照、高脂飲食（HFD)對(duì)照、高脂飲食（HFD) +水 飛薊素，以及施用高脂飲食（HFD) +根據(jù)本發(fā)明各種濃度的化合物K強(qiáng)化的人參濃縮物，在 體內(nèi)脂肪肝動(dòng)物模型中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生化指標(biāo)中中性脂質(zhì)的變化。
[0026] 正常飲食（ND)相對(duì)于高脂飲食（HFD)廣p < 0· 05, 〃 p < 0· 01/高脂飲食（HFD) 相對(duì)于高脂飲食+樣品（HFD+樣品）：#p < 0· 05, ##p < 0· 01。
[0027] 圖4表示根據(jù)施用正常飲食（ND)對(duì)照、高脂飲食（HFD)對(duì)照、高脂飲食（HFD) +水 飛薊素，以及施用高脂飲食（HFD) +根據(jù)本發(fā)明各種濃度的化合物K強(qiáng)化的人參濃縮物，在 體內(nèi)脂肪肝動(dòng)物模型中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝臟組織中中性脂質(zhì)的含量變化。
[0028] ND 相對(duì)于 HFD :* p < 0· 05, ** p < 0· 01/HFD 相對(duì)于 HFD+ 樣品：#p < 0· 05, < 0. 01ο
[0029] 圖5表示與肝臟組織中脂質(zhì)代謝相關(guān)的蛋白（SREBP-lc、LXR、FAS和ACC)的基因