一種具有抗血栓和抗心肌缺血作用的制備物的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物研究開發(fā)領(lǐng)域，涉及一種藥物物質(zhì)，特別涉及一種具有抗血栓和 抗心肌缺血作用的藥物物質(zhì)的制備物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 血栓形成和血栓栓塞兩種病理過程所引起的疾病，臨床上稱為血栓性疾病，血栓 性疾病嚴(yán)重威脅人類生命健康，其發(fā)病率高且有漸增之勢，是當(dāng)代醫(yī)藥研究的重點(diǎn)。目前上 市的大多數(shù)藥物對血栓性疾病有一定的副作用，可導(dǎo)致出血、血小板減少等;心肌梗死是心 血管疾患的常見病、多發(fā)病之一，急性發(fā)作時(shí)死亡率較高，在醫(yī)學(xué)界引起了廣泛的重視。心 肌缺血(myocardial ischemia)是心臟的血液灌注減少，導(dǎo)致心臟的供氧減少，心肌能量代 謝異常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)，目前呈現(xiàn)多發(fā)趨勢，市場藥物繁雜并有一 定副作用。中藥憑借其多成分、多靶點(diǎn)的優(yōu)勢，更具有發(fā)展前景。
[0003] 油茶餅柏作為油茶同屬及其同屬相關(guān)植物煉油后的糟柏一直未被合理利用，造成 嚴(yán)重的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)油茶及同屬植物中含有酚類、萜類、生物堿類等具 有多種生物活性的化學(xué)成分。本發(fā)明將油茶餅柏中各有效組分采用大孔吸附樹脂進(jìn)行富集 純化，并進(jìn)行藥物組合，得到抗血栓和抗心肌缺血藥用物質(zhì)，從而推進(jìn)藥物的研發(fā)創(chuàng)新。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗血栓和抗心肌缺血活性的藥物物質(zhì)，本發(fā)明的 另一個(gè)目的在于提供其制備方法，本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供其質(zhì)量檢測及控制方法， 本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供油茶的一種新用途。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 本發(fā)明藥物物質(zhì)組合主要由酚類、生物堿類、萜類等組成，可由化學(xué)合成、制備，天 然藥物提取制備組合制成;本發(fā)明藥物物質(zhì)組合可由如下1組藥用植物及其代用品種，包括 其藥用部位及非藥用部位，藥材及其飲片組合制成。
[0007] 組1油茶(茶籽樹、油茶樹、白花茶）同屬植物原植物、加工品（包括油茶各部位及各 部位處理后的油茶餅柏)及提取制備物:油茶(原變種、植物油茶）、單籽油茶(變種）、高州油 茶、狹葉油茶、茶梅、越南油茶、小葉油茶、浙江紅花油茶、廣寧紅花油茶及華南油茶等。
[0008] 本發(fā)明藥物物質(zhì)優(yōu)選為以下原料藥制成：
[0009] 油茶餅柏
[0010] 本發(fā)明藥物物質(zhì)制備方法包括如下步驟：
[0011] 步驟1:選取上述原料藥；
[0012] 步驟2:提??；
[0013] 步驟3:大孔吸附樹脂純化
[0014] 上述步驟2中，將原料藥用水或5 % -90 %乙醇回流提取2-5次，每次提取0.5-3小 時(shí)。
[0015] 上述步驟3中，將步驟2所得提取物加水分散溶解，使水溶液濃度為0.001-0.50g/ mL，水溶液通過弱極性或非極性大孔吸附樹脂，吸附流速為0.5-10BV/h，樹脂柱徑高比為1: (2-15)，上樣液濃度為0.001-0.50g/mL，收集上樣流出液，然后水洗脫1-8BV，洗脫流速為 0.5-10BV/h，收集洗脫液，合并上樣流出液與水洗脫液，回收溶劑，減壓干燥，即得有效組分 1(萜類和酚類等）；5-50%乙醇洗脫1-108￥，洗脫流速為0.5-108￥/11，收集洗脫液，回收溶 劑，減壓干燥，即得有效組分2(萜類、酚類、生物堿類等）；50%-90%乙醇洗脫1-10BV，洗脫 流速為0.5-10BV/h，收集洗脫液，回收溶劑，減壓干燥，即得有效組分3(萜類、酚類、生物堿 類等）。
[0016] 以上所述的有效組分1(萜類和酚類）中制備物總萜含量占上樣總萜比例達(dá)5%_ 60%、總酚含量達(dá)5%-50%;所述的有效組分2(萜類、酚類、生物堿類）中制備物總酚含量占 上樣總酚達(dá)5-50%、總萜含量占上樣總萜比例達(dá)1-40%、總生物堿占上樣總生物堿達(dá)5%-60%;所述的有效組分3(萜類、酚類、生物堿類）中制備物總酚含量占上樣總酚達(dá)10-70%、 總萜含量占上樣總萜比例達(dá)10-70%、總生物堿占上樣總生物堿達(dá)10%_80%。
[0017] 將以上所得藥物物質(zhì)混合后，加入常規(guī)輔料，或作為添加物制備任意常規(guī)劑型，按 常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、凝膠劑、緩 釋劑、口服液等，可應(yīng)用于藥品、健康品等中。
[0018] 以下對本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限 定本發(fā)明的范圍。
[0019] 實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明抗血栓作用 [0020](-)實(shí)驗(yàn)材料
[0021] 1.實(shí)驗(yàn)動物
[0022] SD大鼠，雄雌各半，體重190-220g。由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供。
[0023] 2.藥品與試劑
[0024]受試藥：油茶餅柏組合物(有效部位混合物）。試劑：角叉菜膠(批號:C1013-25g)， sigma公司；華法林鈉片（批號：4070161KR)，齊魯制藥有限公司；生理鹽水（批號： C13040602)，山東華魯制藥有限公司；水合氯醛(批號：20120720)，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限 公司。
[0025](二)實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果 [0026] 1.分組及給藥方式
[0027] 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)養(yǎng)一周后，隨即分成6組，每組8只，雌雄各半，即分別為空白組、模 型組、陽性藥組、組合物低劑量組、組合物中劑量組、組合物高劑量組;空白組和模型組給生 理鹽水，陽性藥組給金納多，低、中、高劑量藥組給組合物，低劑量按成人(60kg)每天1.2g的 用量，折算成大鼠為〇.12g/kg(l:6)、中劑量按成人(60kg)每天1.8g的用量，折算成大鼠為 0.18g/kg(l:6)、高劑量按成人(60kg)每天2.7g的用量，折算成大鼠為0.27g/kg(l:6)，金納 多制成濃度〇 . 833mg/mL，按照16.66mg/kg灌胃給藥，角叉菜膠用生理鹽水制成濃度IOmg/ mL，按照20mg/kg腹腔注射給藥。
[0028] 2.血栓模型試驗(yàn)
[0029]空白組和模型組灌胃蒸餾水，給藥組分別灌胃各組藥物，共7天，在第6天給藥后， 模型組和給藥組分別腹腔注射角叉菜膠造血栓模型，第7天給藥Ih后，大鼠測完黑尾之后以 10 %水合氯醛腹腔注射麻醉，測定大鼠黑尾長度，之后腹主動脈取血，置于檸檬酸鈉抗凝 管，4°C，3500r/min，離心15min，分離血漿，用放免法測定血漿中TXB 2和6-ket〇-PGFla含量。 [0030] 3.統(tǒng)劑方法
[0031]使用SPSS17.0統(tǒng)劑軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)誤表示。采用兩樣本t檢 驗(yàn)和非參數(shù)檢驗(yàn)(Mann-Whitney Test)進(jìn)行兩兩比較，采用單因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行多 組間比$父，組間差異米用LSD(方差齊)或者Games-Howell法(方差不齊）。
[0032] 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0033]表1油茶餅柏組合物血栓模型藥效結(jié)果
[0036](注:數(shù)據(jù)為均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差;**表示與模型組比較，P<0.01，有極顯著性差異;* 表示與模型組比較，P<〇.05,有顯著性差異產(chǎn)表示與空白組比較P>0.05,沒有顯著性差 異，#表示和模型組比較，P>〇.05沒有顯著差異）。
[0037](三)結(jié)論
[0038]由表1可知：模型對照組大鼠 TXB2值、TXB2/6-Ket〇-PGFU直及黑尾長度與空白對照 組有極顯著性差異(P<〇.01)，說明用角叉菜膠腹腔注射給藥造血栓模型成功；陽性藥組指 標(biāo)TXB2和模型組比較，P<0.05，有顯著性差異，陽性藥組指標(biāo)TXB2/6-Ket〇-PGF la&黑尾長 度