一種索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領域，具體來說，涉及一種索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]索拉菲尼(sorafenib)是屬于二芳基脲類，臨床上用的是索拉非尼的甲苯磺酸鹽(商品名多吉美，Nexavar)，化學名為4-(4_3-[4-氣-3_( 二氣甲基)苯基]脈基苯氧基)-N2-甲基吡啶-2-羧酰胺-4-甲苯磺酸鹽，分子式為C21H16C1F3N403.C7Hs03S，分子量為637.03 g.mol1。其水溶性差，微溶于乙醇，溶于聚乙烯甘油400 (PEG400)。索拉菲尼可以靶向作用于腫瘤細胞及腫瘤血管上的多種絲氨酸/蘇氨酸激酶及受體酪氨酸激酶，同時發(fā)揮抗血管生成和抗腫瘤細胞增殖的雙重作用:索拉非尼一方面可以抑制受體酪氨酸激酶KIT和FLT-3以及Raf /MEK/ERK途徑中絲氨酸/蘇氨酸激酶，明顯抑制腫瘤細胞增生；另一方面，通過上游抑制受體酪氨酸激酶VEGFR和TOGFR，及下游抑制Raf /MEK/ERK途徑中絲氨酸/蘇氨酸激酶，明顯抑制腫瘤血管生成。因其良好的抗腫瘤作用，2007年10月歐盟藥品監(jiān)督管理局(EMEA)、2007年11月美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)和2008年6月我國食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)等相繼批準了索拉非尼用于治療不可手術(shù)的肝細胞癌。
[0003]作為目前臨床上唯一的劑型，索拉菲尼甲苯磺酸鹽片劑已廣泛應用于肝癌、腎癌等實體癌疾病治療，該劑型對實體腫瘤的抑制作用是有目共睹的，但是它仍然具有很多缺點:不僅價格昂貴、耐受性差、生物利用度較低，而且在應用過程中不良反應發(fā)生率高達80%，其中三級不良事件包括腹瀉(8%)、高血壓(2%)、手-足皮膚反應(8%)以及腹部疼痛(2%)。如何改善索拉菲尼的靶向性，持續(xù)、集中的發(fā)揮藥效，并提高生物利用度、降低全身毒副作用，是我們研究的重點。
[0004]固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles, SLN)是以固態(tài)的天然或合成的脂質(zhì)為載體制成的粒徑約為50-1000 nm的膠體給藥系統(tǒng)。由于納米微粒具有獨特的粒徑大小、表面電荷性質(zhì)以及可被修飾等特點，可在抗腫瘤方面發(fā)揮獨特的優(yōu)勢。納米粒具有EPR效應，可使載藥后的納米粒富集于腫瘤組織，提高抗腫瘤藥物靶向性，減少抗腫瘤藥物對正常組織細胞的殺傷，從而降低全身毒性。固體脂質(zhì)納米粒作為新型納米載體，可增加脂溶性藥物在水中溶解度，降低藥物在血液循環(huán)時刺激性，并由EPR效應富集在腫瘤組織，使藥物體內(nèi)緩慢釋放，提高藥物體內(nèi)生物利用度。
[0005]已有納米粒子技術(shù)研究:1)利用納米沉淀透析法制備葡聚糖-聚乳酸聚乙醇酸嵌段共聚物索拉菲尼納米微粒，研究結(jié)果表明其具有良好的緩釋和抑制腫瘤細胞生長的作用；2)利用高壓勻化法制備紫杉醇-索拉菲尼蛋白納米微粒，在抑制癌細胞生長的同時，相對于紫杉醇和索拉菲尼單體藥物，其毒副作用顯著降低；3)研制聚乙二醇單甲醚-外消旋聚乳酸嵌段共聚物納米微粒，該納米微粒具有細胞和分子水平雙重靶向和良好的緩控釋作用；4)分別用二氧化硅350及ph敏感的丙烯酸樹脂slOO制得索拉菲尼納米微粒，小鼠體內(nèi)實驗表明與索拉菲尼混懸液相比，索拉菲尼納米微粒可以明顯增高生物利用度，其中ph敏感的丙烯酸樹脂SlOO制得的索拉菲尼納米微粒生物利用度比二氧化硅350制得的納米微粒的更高。
[0006]和傳統(tǒng)納米載體如脂質(zhì)體、聚合物納米粒等相比，固體脂質(zhì)納米粒具有高生物相容性、高穩(wěn)定性的特點，是索拉菲尼的理想載體。有文獻報道，利用溶劑揮發(fā)法制備索拉菲尼固體脂質(zhì)納米微粒，在新西蘭兔體內(nèi)研究表明該納米微粒能明顯延長索拉菲尼在血液中滯留時間，從而具有緩釋作用。然而溶劑揮發(fā)法制備的固體脂質(zhì)納米粒很難完全除去有機溶劑，而殘留過多的有機溶劑很可能會對人體造成一定的傷害。
[0007]鑒于此，利用簡單可行的方法制備有機溶劑殘留少的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒具有重大的潛在市場價值，而且對研發(fā)新型索拉菲尼口服制劑亦有重要的理論意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供一種簡單可行并且有機溶劑殘留少的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒制備方法，使其在治療肝癌時具有良好的緩控釋作用，提高索拉菲尼生物利用度，從而降低毒副作用。
[0009]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
本發(fā)明首先公開了一種索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒，包括以下各組分:索拉菲尼、固態(tài)脂質(zhì)、脂溶性乳化劑、水溶性乳化劑和蒸餾水。
[0010]各組分的重量百分含量為:索拉菲尼0.03%-0.05%，固體脂質(zhì)0.5%-0.98%，脂溶性乳化劑0.25%-0.75%,水溶性乳化劑0.49%-0.98%,余量為蒸餾水。
[0011]其中，所述固體脂質(zhì)選自單硬脂酸甘油酯，硬脂酸，山崳酸甘油脂，三肉豆范酸甘油醋，葵酸甘油醋，鯨蠟醇棕擱酸醋，蜂蠟，二月桂酸甘油醋，十六醇中的任意一種或任意兩種按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為山崳酸甘油脂；
所述固體脂質(zhì)選自單硬脂酸甘油酯，硬脂酸，山崳酸甘油脂中的任意一種或任意兩種按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為山崳酸甘油脂；
所述脂溶性乳化劑選自大豆卵磷脂，蛋黃卵磷脂或二者按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為大豆卵磷脂；
所述水溶性乳化劑選自脂肪酸山梨坦類，聚山梨酯類，聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物類，聚氧乙烯脂肪酸酯類，聚氧乙烯脂肪醇醚類中的任意一種或者兩種以上按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物類；最優(yōu)選為泊洛沙姆188。
[0012]本發(fā)明還公開了一種索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒制備方法，包括以下步驟:
步驟一，精密稱取處方量的各組分，將索拉菲尼先溶于少量有機溶劑中，再與固態(tài)脂質(zhì)和脂溶性乳化劑混合，加熱熔融，得到油相；
步驟二，將水溶性乳化劑加入蒸餾水中，并加熱到同油相相同的溫度，形成水相；
步驟三，將水相倒入油相，經(jīng)高速剪切、超聲破碎后，既得索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒。
[0013]其中，步驟一所述有機溶劑選自無水乙醇、甲醇、二甲基亞砜或二氯甲烷中任意一種或兩種以上按照任意比例組成的混合物；優(yōu)選為無水乙醇。
[0014]步驟一、二所述油相和水相的溫度為85°C。
[0015]步驟三所述高速剪切的轉(zhuǎn)速為11000轉(zhuǎn)，剪切時間為3min ;超聲破碎功率為300w，超聲時間為3min。
[0016]本發(fā)明所制得的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒平均包封率為89.87%，粒徑為77.16nm。
[0017]本發(fā)明中所述脂溶性乳化劑、固態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑、有機溶劑的不同種類及其不同用量對索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑、多分散系數(shù)(PDI)、包封率起重要影響作用。其中，索拉菲尼與山崳酸甘油脂、大豆卵磷脂、無水乙醇、泊洛沙姆188制備的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒質(zhì)量評價較好；優(yōu)選的，5mg索拉菲尼，lOOmg單硬脂酸甘油醋，25mg卵磷脂、0.5ml無水乙醇、50mg泊洛沙姆188所制得的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑為77.16nm，PDI為0.28，zeta電位為-18.1，包封率為89.87%，質(zhì)量評價最好。
[0018]改變脂溶性乳化劑、固態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑的種類或用量或者采用不同的制備方法，對制得的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒的粒徑、分散系數(shù)、包封率均會有顯著影響。例如，在其他條件均一致的情況下，僅改變脂溶性乳化劑的用量，用量分別為75mg、50mg、25mg時，所制得的索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒的質(zhì)量評價存在明顯差異，平均粒徑為55.14 一一
77.16nm，多分散系數(shù)(PDI)為0.28——0.47，zeta電位為-9.74---18.1，包封率為51.41——89.87% ;其中，脂溶性乳化劑用量為25mg時，平均粒徑為77.16nm，PDI為0.28，zeta電位為-18.1，包封率為89.87%。質(zhì)量評價最好。同時用溶劑揮發(fā)法和本發(fā)明制備方法制備索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒，對各自的最優(yōu)處方制得的納米粒進行評價結(jié)果為，溶劑揮發(fā)法制得的固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑為100.9nm，PDI為0.31，zeta電位為-13.4，包封率為77.91%，故本發(fā)明制備方法更優(yōu)于溶劑揮發(fā)法制備索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒。
[0019]本發(fā)明索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒體內(nèi)代謝、分布和肝靶向性研究:
2組SD大鼠(n=5)分別單劑量口服給與索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒和索拉菲尼混懸液后，分別于時間點 0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、24、34、48、58、7211取0.5ml 血液。血漿樣品采用Agilent 1260 HPLC測定各時間點索拉菲尼含量。大鼠體內(nèi)索拉菲尼混懸液和同濃度索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒微粒的口服索拉菲尼固體脂質(zhì)納米粒的血藥濃度均高于口服混懸液的濃度。索拉菲尼混懸液的生物利用度為29.14mg/L*h，