一種檢測猴體神經(jīng)毒力試驗的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測猴體神經(jīng)毒力試驗的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 許多減毒活疫苗均來源于對野生型病毒株進行的減毒改良，而野生型病毒株已知 具有神經(jīng)毒性。為了確保減毒活疫苗在免疫人體的過程中不出現(xiàn)殘留的神經(jīng)毒性，候選減 毒活疫苗的毒種（包括主種子批或工作種子批）需要進行臨床前神經(jīng)毒力試驗。由于減毒 活疫苗主要應(yīng)用于人類，因此候選減毒活疫苗的臨床前神經(jīng)毒力試驗主要選擇猴作為試驗 動物。
[0003] 在猴體神經(jīng)毒力試驗進行過程中，將受試藥物準確的注射到相應(yīng)的顱腦位置是整 個試驗的關(guān)鍵所在。然而，傳統(tǒng)顱腦給藥方法僅僅依靠腦定位儀定位或依靠臨床經(jīng)驗進行， 無法確定受試藥物是否準確注射到相應(yīng)的顱腦位置，很多時候只有在試驗后期，解剖后才 發(fā)現(xiàn)藥物的注射位置不準確，導(dǎo)致浪費大量人力物力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種檢測猴體神經(jīng)毒力試驗的方法。
[0005] 本發(fā)明檢測猴體神經(jīng)毒力試驗的方法，步驟如下：取給藥后的猴體，在給藥后第3 天、第6天和/或第9天，分別對猴腦的橫斷位、矢狀位及冠狀位進行磁共振掃描，閱讀圖 像，即可。
[0006] 優(yōu)選地，所述磁共振掃描采用的儀器是BrukerBioSpec7.OTMR的磁共振掃描 儀。
[0007] 優(yōu)選地，磁共振掃描的具體步驟是：選擇定位掃描序列，掃描區(qū)域位置選擇，得定 位掃描圖像；再根據(jù)定位圖像選擇T2加權(quán)序列并掃描，得掃描圖像；最后選擇Tl序列并復(fù) 制T2加權(quán)序列位置再進行掃描，得掃描圖像；最后保存所有上述掃描圖像。
[0008] 本發(fā)明檢測方法可以準確判斷猴體神經(jīng)毒力試驗中，藥物是否準確的注射到相應(yīng) 的顱腦位置，能夠在試驗早期發(fā)現(xiàn)藥物注射的準確性，便于后期試驗，節(jié)約成本。
[0009] 以下通過【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步的詳細描述，但并不限制本發(fā)明，本領(lǐng) 域技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變和變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本 發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。
【具體實施方式】
[0010] 1、材料
[0011] 1.1實驗動物
[0012] 種屬：恒河猴；
[0013] 等級：普通級；
[0014] 使用動物數(shù)量和性別：12只，雌雄各半；
[0015] 年齡：2~3歲；
[0016] 體重：購入時3. 10~4. 20kg，分組時3. 45~4. 55kg ;
[0017] 來源：成都格林豪斯生物科技有限公司，生產(chǎn)許可證號：SCXK(川）2011-013,實驗 動物質(zhì)量合格證編號：0022011 ;
[0018] 入室前檢疫：篩選出風(fēng)疹病毒抗體陰性的猴（風(fēng)疹病毒抗體由委托方自行檢測， 本機構(gòu)提供血清樣品），入室前一周內(nèi)進行猴結(jié)核分支桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、體外寄生 蟲、弓形體檢查，合格后引入；
[0019] 適應(yīng)期主要檢查內(nèi)容：動物一般狀態(tài)；體溫（肛溫）、攝食量、血液學(xué)、血生化、II導(dǎo) 聯(lián)心電圖、尿液各檢測2次；動物體重是否達到試驗要求的體重范圍，選取的12只猴均為健 康（雌性未孕）猴而納入正式試驗。
[0020] 1. 2主要試劑
[0021] 1.2.1 供試品
[0022] 名稱或代號：風(fēng)疹減毒活疫苗毒種RA27/3株主種子批，本機構(gòu)代號W0037 ;
[0023] 來源：北京民海生物科技有限公司；
[0024] 性狀：乳酪色疏松體；
[0025] 規(guī)格：復(fù)溶后0.5mL/瓶；
[0026] 病毒滴度：5.lLgCCID50/mL;
[0027] 批號：M22-201201 ;
[0028] 保存條件及注意事項：_70~_86°C ;
[0029] 有效期：復(fù)溶前長期有效，復(fù)溶后有效期1小時；
[0030] 保存地點：本機構(gòu)供試品管理部。
[0031] 1.2. 2 對照品
[0032] 名稱或代號：風(fēng)疹減毒活疫苗毒種RA27/3株主種子批對照品，本機構(gòu)代號W0037 對照；
[0033] 來源：北京民海生物科技有限公司；
[0034] 性狀：乳酪色疏松體；
[0035] 規(guī)格：復(fù)溶后0.5mL/瓶；
[0036] 批號：201201 ;
[0037] 保存條件及注意事項：_70~_86°C ;
[0038] 有效期：復(fù)溶前長期有效，復(fù)溶后有效期1小時；
[0039] 保存地點：本機構(gòu)供試品管理部。
[0040] 1. 2. 3其它主要試劑
[0041] 名稱：戊巴比妥鈉；
[0042]來源：Sigma 公司；
[0043] 性狀：白色粉末；
[0044] 規(guī)格：25g/瓶；
[0045] 批號：93ET2904K ;
[0046] 保存條件：常溫、密閉保存；
[0047] 有效期：至2015年08月；
[0048] 配制方法：臨用前用0. 9%氯化鈉注射液配制成所需濃度。配制后于2~25°C暫 存?zhèn)溆?，有效?個月；
[0049] 名稱或代號：滅菌注射用水；
[0050] 來源：四川科倫藥業(yè)股份有限公司；
[0051] 性狀：無色澄明液體；
[0052] 規(guī)格：500mL/瓶；
[0053] 批號：H13040604 ;
[0054] 保存條件及注意事項：室溫密閉保存；
[0055] 有效期：2015年03月；
[0056] 名稱：鹽酸利多卡因注射液
[0057] 來源：鄭州卓峰藥業(yè)有限公司
[0058] 性狀：無色澄明液體
[0059]規(guī)格：2mL/支
[0060] 含量：0?lg/f5mL
[0061]批號：12030413
[0062] 保存條件：常溫、密閉保存
[0063] 有效期：2014年02月
[0064] 配制方法：直接取用，當天有效
[0065] 名稱：鹽酸氯胺酮注射液
[0066] 來源：沈陽市獸藥廠
[0067] 性狀：無色澄明液體
[0068]規(guī)格：2mL :0? 3g/支
[0069] 含量：150mg/mL
[0070]批號：20110908;
[0071] 保存條件：常溫、密閉保存；
[0072] 有效期：2013年08月
[0073] 配制方法：直接取用，當天有效。
[0074] 1. 3主要溶液的配制
[0075]I. 3. 1供試品配制
[0076] 配制方法：用滅菌注射用水0. 5mL復(fù)溶；
[0077] 配制后標識方法：供試品的裝運盒以紅色標簽標識，并注明試驗編號、試驗物質(zhì)名 稱、體積、保存條件、有效期、責任人及配制日期；
[0078] 配制后暫存條件及效期：復(fù)溶后2_8°C保存，直接取用注射，在開瓶后1小時內(nèi)使 用。
[0079]1.3. 2對照品配制
[0080] 配制方法：用滅菌注射用水0? 5mL復(fù)溶；
[0081 ] 配制后標識方法：對照品的裝運盒以白色標簽標識，并注明試驗編號、試驗物質(zhì)名 稱、體積、保存條件、有效期、責任人及配制日期；
[0082] 配制后暫存條件及效期：復(fù)溶后2_8°C保存，直接取用注射，在開瓶后1小時內(nèi)使 用。
[0083] I. 4主要儀器
[0084]
[0085] 實施例1本發(fā)明檢測方法
[0086] (1)分別于給藥前和