陽離子脂質(zhì)疫苗組合物和使用方法
【專利說明】陽離子脂質(zhì)疫苗組合物和使用方法
[0001]相關申請的交叉引用
本申請要求在35 USC § 119(e)下的于2012年6月15日提交的美國臨時申請系列號61/660，172的利益，其整體公開通過引用并入本文。
[0002]政府權(quán)利
導致本發(fā)明的部分工作是在國立衛(wèi)生研究院CRADA N0.2644下提供的美國政府支持下實施的。因此，美國政府在本發(fā)明中并且對本發(fā)明具有某些權(quán)利。
[0003]電子提交的材料通過引用并入通過引用以其整體并入的是計算機可讀的序列表，與此同時提交并且識別如下:一個3，228比特ASCII (文本)文件，命名為“225611_ST25.txt”，創(chuàng)建于2013年6月12日。
技術(shù)領域
[0004]在全世界對于患者，發(fā)展安全并有效的人用免疫療法和治療用疫苗保持重要的醫(yī)學需求。典型地，疫苗組合物包含刺激靶向免疫應答的抗原。然而，一些發(fā)展的疫苗是無效的，因為它們在廣泛的哺乳動物群體中是免疫應答的弱刺激物。例如，疫苗組合物中的抗原可在哺乳動物中是較差免疫原性的。此外，一些疫苗不可有效地將抗原遞送至哺乳動物免疫系統(tǒng)中的抗原呈遞細胞(“APC”)。
[0005]骨髓源抑制細胞(Myeloid-derivedsuppressor cells，MDSC)是早期髓樣前體(early myeloid progenitors)的異質(zhì)群體，其具有抑制患者適應性免疫應答的能力，諸如通過⑶4+和⑶8+ T細胞介導的應答。已知MDSC分泌免疫抑制細胞因子并誘導調(diào)節(jié)性T細胞發(fā)展。此外，MDSC通過促炎細胞因子誘導并且在傳染性和炎性病理狀況中發(fā)現(xiàn)其數(shù)量增加。
[0006]MDSC在荷瘤小鼠的血液、骨髓和次級淋巴器官中積累并且它們在腫瘤微環(huán)境中的存在已暗示在促進腫瘤相關的免疫抑制中具有成因作用。重要地，已報道腫瘤抗原特異性T-細胞耐受是腫瘤逃逸的關鍵要素。此外，已發(fā)現(xiàn)MDSC在大多數(shù)癌癥患者中存在。在產(chǎn)業(yè)中正在進行重要研究以鑒定抑制免疫抑制細胞(例如，MDSC和調(diào)節(jié)性T-細胞)的方法，作為改善T-細胞應答以攻擊和殺死感染細胞的方法。目前在產(chǎn)業(yè)中的實踐集中于探索封閉并抑制相關免疫抑制因子的封閉抗體的用途。諸如人類抗體Ipilimumab的疫苗可用于封閉細胞毒性T-淋巴細胞相關抗原-4 (CTLA-4)，已知其作為治療黑色素瘤的治療性疫苗在調(diào)節(jié)免疫應答中發(fā)揮作用。
[0007]發(fā)明背景和概述
疫苗同樣典型地包含試圖提高疫苗組合物中抗原效力的佐劑。例如，典型地使用諸如油包水乳狀液、礬(例如，鋁鹽)和其它化學品的佐劑以提高在哺乳動物中的抗原應答。除傳統(tǒng)的佐劑以外，可使用具有內(nèi)在免疫效果的其它佐劑(例如，流感病毒體和Chiron’ sMF59)。然而，這些佐劑同樣是不期望的，因為來自動物模型(根據(jù)HSV和流感疫苗的臨床試驗報告)的證據(jù)暗示它們在動物中僅僅提高中和抗體的產(chǎn)生而不是提高T-細胞應答。
[0008]因此，存在對新型疫苗組合物的需求，其為了在哺乳動物中刺激免疫應答通過抗原呈遞細胞有效遞送抗原或促進抗原攝取，以及在哺乳動物中抑制免疫抑制細胞以改善免疫應答。此外，在哺乳動物中刺激細胞介導的免疫應答的新的并且有效的方法，可能通過在疫苗組合物中與治療因子一同包含安全并有效的免疫學修飾劑(“immunologicmodifier”)(“免疫調(diào)諧劑”(“immunomodulator”))實現(xiàn)，是同樣非常期望的。因此，本公開提供了疫苗組合物和使用所述組合物的方法，其展示了期望的特點并提供了改善在哺乳動物中減少免疫抑制細胞群并增加免疫應答的相關優(yōu)勢。
[0009]本公開提供疫苗組合物，其包含至少一種佐劑和至少一種治療因子。本公開同樣提供了使用疫苗組合物在哺乳動物中減少免疫抑制細胞群的方法、在哺乳動物中增加免疫應答的方法和在哺乳動物中治療疾病的方法。
[0010]根據(jù)本公開的疫苗組合物和方法提供了相比本領域其它組合物和方法的若干優(yōu)勢。第一，所述疫苗組合物包含佐劑，其在哺乳動物中提高、引導或促進合適的免疫應答的免疫調(diào)諧劑。如果免疫調(diào)諧劑包含在疫苗組合物中，其具有有效加強哺乳動物對抗原的免疫應答的潛力。例如，免疫調(diào)諧劑可有利地實現(xiàn)以下中一項或多項:(I)改善在APC中的抗原遞送和/或加工，(2)誘導免疫調(diào)諧性細胞因子的產(chǎn)生，其有利于對所述抗原的免疫應答的發(fā)展，因此促進細胞介導的免疫力，包括細胞毒性T-淋巴細胞(“CTL”)，(3)減少有效疫苗所需的免疫接種的數(shù)量或抗原量，(4)增加疫苗抗原的生物或免疫半衰期，和(5)通過抑制免疫抑制因子克服對抗原的免疫耐受。在一些實施方案中，在疫苗組合物中可以使用基于陽離子脂質(zhì)的佐劑強化免疫修飾的佐劑并且可以引起更優(yōu)的T-細胞和抗體免疫應答。
[0011]第二，本公開中的疫苗組合物包含治療因子諸如細胞因子，其作為組合可以在哺乳動物中減少免疫抑制細胞群，這可以改善哺乳動物針對疾病的免疫應答。當前鑒定對抑制免疫抑制細胞諸如MDSC和T-調(diào)節(jié)細胞的方法的研究使用復雜的封閉抗體。因此，施用包含治療因子諸如細胞因子的強化疫苗組合物可以更容易對患者施用并改善免疫應答，特別是在腫瘤中。
[0012]第三，包含治療因子的本公開的疫苗組合物可以在有或沒有疾病特異性抗原的情況下引起MDSC減少，因此通過促進抗原特異性T-細胞的自然激活，同時減少免疫抑制細胞群產(chǎn)生對治療疾病諸如癌癥的獨特并且強有力的方法。包含治療因子的所述疫苗組合物引起更優(yōu)的疾病特異性免疫應答的產(chǎn)生，這在當佐劑或治療因子單獨與抗原制備時均沒有觀察到。
[0013]最后，治療因子，當與陽離子脂質(zhì)佐劑組合以形成疫苗組合物時，在哺乳動物的免疫應答中產(chǎn)生獨特的協(xié)同改善。治療因子(例如，GM-CSF)與其它佐劑(例如，不完全Freund’s佐劑(IFA)或抗-⑶40+IFA)的組合不會在免疫應答中產(chǎn)生相似的協(xié)同改善。因此，陽離子脂質(zhì)佐劑和治療因子的組合特異地并且顯著地在免疫應答中產(chǎn)生協(xié)同改善，這不能使用其它常用佐劑復制。
[0014]以下編號的實施方案是可理解的并且是非限制性的:
1.疫苗組合物，其包含佐劑和治療因子。
[0015]2.第I項的疫苗組合物，其中所述佐劑是免疫調(diào)諧劑。
[0016]3.第I項或第2項的疫苗組合物，其中所述佐劑是陽離子脂質(zhì)。
[0017]4.第3項的疫苗組合物，其中所述陽離子脂質(zhì)是純化的。
[0018]5.第3項或第4項的疫苗組合物，其中所述陽離子脂質(zhì)選自D0TAP、D0TMA、DOEPC及其組合。
[0019]6.第3至5項中任一項的疫苗組合物，其中所述陽離子脂質(zhì)是D0TAP。
[0020]7.第3至5項中任一項的疫苗組合物，其中所述陽離子脂質(zhì)是D0MTA。
[0021]8.第3至5項中任一項的疫苗組合物，其中所述陽離子脂質(zhì)是D0EPC。
[0022]9.第I項或第2項的疫苗組合物，其中所述佐劑是陽離子脂質(zhì)的對映異構(gòu)體。
[0023]10.第9項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是純化的。
[0024]11.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-DOTAP或S-D0TAP。
[0025]12.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-D0TAP。
[0026]13.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是S-D0TAP。
[0027]14.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-DOTMA或S-D0TMA。
[0028]15.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-D0TMA。
[0029]16.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是S-D0TMA。
[0030]17.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-DOEPC或S-D0EPC。
[0031]18.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是R-D0EPC。
[0032]19.第9項或第10項的疫苗組合物，其中所述對映異構(gòu)體是S-D0EPC。
[0033]20.第I至19項中任一項的疫苗組合物，其中所述治療因子選自白介素1-18、干細胞因子、堿性 FGF、EGF、G-CSF、GM-CSF、FLK-2 配體、HILDA、MIP-1 a、TGF-β、TGF-α、M-CSF、IFN-γ、IFN-α、IFN-β、可溶性 CD23、LIF 及其組合。
[0034]21.第I至19項中任一項的疫苗組合物，其中所述治療因子是細胞因子。
[0035]22.第20項的疫苗組合物，其中所述細胞因子是GM-CSF。
[0036]23.第I至19項中任一項的疫苗組合物，其中所述治療因子是免疫細胞生長因子。
[0037]24.第I至23項中任一項的疫苗組合物，其中所述組合物進一步包含一種或多種抗原。
[0038]25.第24項的免疫組合物，其中一種或多種抗原是基于蛋白質(zhì)的抗原。
[0039]26.第24項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原是基于肽的抗原。
[0040]27.第24至26項中任一項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原選自癌抗原、病毒抗原、細菌抗原和致病性抗原。
[0041]28.第24至26項中任一項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原是癌抗原。
[0042]29.第24至26項中任一項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原是病毒抗原。
[0043]30.第24至26項中任一項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原是細菌抗原。
[0044]31.第24至26項中任一項的疫苗組合物，其中一種或多種抗原是致病性抗原。
[0045]32.第31項的疫苗組合物，其中所述致病性抗原是合成或重組抗原。
[0046]33.第24至32項中任一項的疫苗組合物，其中至少一種抗原是HPV蛋白質(zhì)或肽。
[0047]34.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中至少一種抗原包含選自RAHYNIVTF(SEQ.1D.NO:1)、GQAEPDRAHYNIVTF (SEQ.1D.NO: 2)、KSSGQAEPDRAHYNIVTF (SEQ.1D.NO: 3)、YMLDLQPETT (SEQ.1D.NO: 4)、KSSYMLDLQPETT (SEQ.1D.NO: 5)、MHGDTPTLHEYMLDLQPETT (SEQ.1D.NO: 6)、LLMGTLGIVCPICSQKP (SEQ.1D.NO: 7)、KVPRNQDffL (SEQ.1D.NO: 8) ^ SYVDFFVffL (SEQ.1D.NO: 9)、KYICNSSCM (SEQ.1D.NO:10) ^ KSSKVPRNQDffL (SEQ.1D.NO: 11)、KSSMHGDTPTLHEYMLDLQPETT (SEQ.1D.NO: 12)和 KSSLLMGTLGIVCPICSQKP (SEQ.1D.NO: 13)的序列。
[0048]35.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中至少一種抗原包含選自gplOO(KVPRNQDWL [SEQ.1D.N0.8])、TRP2 (SYVDFFVWL [SEQ.1D.N0.9])和 p53 (KYICNSSCM[SEQ.1D.N0.10])及其組合的序列。
[0049]36.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含一個或多個gplOO序列(KVPRNQDWL [SEQ.1D.N0.8])和 TRP2 序列(SYVDFFVWL [SEQ.1D.N0.9])。
[0050]37.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列RAHYNIVTF(SEQ.1D.NO:1)。
[0051]38.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列GQAEPDRAHYNIVTF (SEQ.1D.NO: 2)。
[0052]39.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列KSSGQAEPDRAHYNIVTF (SEQ.1D.NO: 3)。
[0053]40.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列YMLDLQPETT(SEQ.1D.NO: 4)。
[0054]41.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列KSSYMLDLQPETT(SEQ.1D.NO: 5)。
[0055]42.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列MHGDTPTLHEYMLDLQPETT (SEQ.1D.NO: 6)。
[0056]43.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列LLMGTLGIVCPICSQKP (SEQ.1D.NO: 7)。
[0057]44.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列KVPRNQDWL(SEQ.1D.NO: 8)。
[0058]45.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列SYVDFFVWL(SEQ.1D.NO: 9)。
[0059]46.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列KYICNSSCM(SEQ.1D.NO: 10)。
[0060]47.第24至33項中任一項的疫苗組合物，其中所述抗原包含序列KSSK