舌狀蜈蚣藻提取物在制備改善記憶功能藥品或保健食品中應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于海洋生物資源綜合開發(fā)利用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及蜈蚣藻提取物的制備 方法及其在改善學(xué)習(xí)記憶功能藥品或保健食品方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生活條件的改善和科技的發(fā)展，人們對改善記憶功能和防治癡呆的保健食品 的需求越來越旺盛。經(jīng)查詢，在我國規(guī)定的27類保健食品中，2003年12月12日之后經(jīng)國 家食品藥品監(jiān)督管理局審批的具有輔助改善記憶功能的保健食品有90種，在國產(chǎn)5293種 保健食品中所占比例很小，這類產(chǎn)品十分具有開發(fā)前景。
[0003] 研宄認(rèn)為，中樞膽堿能系統(tǒng)與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系密切，乙酰膽堿（aCetylCh 〇line，ACh) 是促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)遞質(zhì)，M膽堿能突觸為記憶的基礎(chǔ)。ACh是中樞膽堿能系統(tǒng)中重要的 神經(jīng)遞質(zhì)之一，其主要功能是維持意識的清醒，促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶的改善。ACh是由膽堿、乙酰 輔酶A等在膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（choline, acety. transfertase，ChAT)的催化下合成，由A乙 酰膽堿酯酶（ChE)分解，其活力變化可間接反映腦內(nèi)Ach的代謝情況。
[0004] 具有增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶功能的化學(xué)藥品有乙酰膽堿酯酶抑制劑他克林，吡拉西坦、尼 莫地平等，長期服用具有一定的毒副作用。因此，開發(fā)有效成分源于食品和藥食同源中藥的 保健食品，輔助化學(xué)藥品使用可減少藥物劑量，降低毒副作用；單獨(dú)服用可用于輕癥患者， 可長期服用。
[0005] 廣闊的海洋占地球面積的70%以上，蘊(yùn)藏著豐富的生物資源。隨著陸地生態(tài)資源 的匱乏，天然藥物開發(fā)的持續(xù)發(fā)展，對海洋資源開發(fā)利用的呼聲日益高漲。海藻作為海洋生 物資源的重要組成部分，大量文獻(xiàn)表明很多海藻成分具有良好的抗腫瘤、抗病毒、抗真菌、 抗細(xì)菌、免疫增強(qiáng)或抑制、抗氧化、防治腦心血管疾病、抑制某些靶酶等生物活性。
[0006] 舌狀蜈蟻藻（Grateloupia livida(Harv) ? Yamada)是紅藻門、真紅藻綱，隱絲藻 目、海膜科、蜈蚣藻屬的一種海水藻類植物，主要分布于海南和廣東沿海。在潮汕地區(qū)，作 為一種藥食兩用的藻類植物，舌狀蜈蚣藻常被用于治療咽喉腫痛、腹痛腹瀉、濕熱痢疾等疾 病，具有很高的藥用保健價值。
[0007] 盡管舌狀蜈蚣藻的資源豐富，來源廣泛，并且有一定的生物活性，但目前國內(nèi)外對 它應(yīng)用方面的研宄還不多見，尤其是關(guān)于舌狀蜈蚣藻提取物改善學(xué)習(xí)記憶功能的作用尚屬 空白。本申請首次公開了舌狀蜈蚣藻提取物在改善學(xué)習(xí)記憶功能和抗癡呆的作用，希望為 舌狀蜈蚣藻的應(yīng)用開辟更廣闊的空間。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供蜈蚣藻提取物在制備改善記憶功能的藥品或保健食品中 的應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0009] 本發(fā)明對蜈蚣藻提取物的制備方法及其在改善記憶功能的作用及機(jī)制進(jìn)行了深 入研宄，首次發(fā)現(xiàn)舌狀蜈蚣藻提取物具有改善記憶功能的作用；
[0010] 所述的蜈蚣藻提取物是從紅藻門、真紅藻綱，隱絲藻目、海膜科、蜈蚣藻屬舌狀蜈 蚣藻中提取的熱水提取物，其制備方法為：將舌狀蜈蚣藻用稀酸浸泡10~60分鐘，然后濾 去稀酸溶液，并用清水洗至pH為5~7,然后加入10~40倍量蒸餾水加熱提取1~3小 時，溫度控制在80~100°C，得提取液；將所述提取液經(jīng)過濾或離心后，得到清液，清液采用 噴霧干燥得到蜈蚣藻提取物固體粉末，或，將清液減壓濃縮，濃縮液采用噴霧干燥得到蜈蚣 藻提取物固體粉末。
[0011] 所述蜈蚣藻提取物的制備方法中，稀酸浸泡時所用的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸或稀 醋酸，其pH范圍為pH 1~4。
[0012] 蜈蚣藻提取物通過提高乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性，抑制乙酰膽堿酯酶活性，從而提高 中樞神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿的含量，改善記憶功能。
[0013] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點：
[0014] 1.使用效果好。實驗結(jié)果表明蜈蚣藻提取物能夠調(diào)控中樞神經(jīng)系統(tǒng)與學(xué)習(xí)記憶相 關(guān)的關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的含量，通過抑制乙酰膽堿酯酶活性和提高乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的 活性，保持中樞神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿高含量，從而改善學(xué)習(xí)記憶功能，作用機(jī)制明確，使用效 果好。
[0015] 2.安全性高，可長期限服用。蜈蚣藻在我國潮汕地區(qū)被稱為佛祖菜，為食用海藻， 本發(fā)明采用熱水提取方法獲得蜈蚣藻提取物，與民間食用方法類似，具有較高的安全性。
【具體實施方式】
[0016] 以下通過【具體實施方式】對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明。這里想要指出的是，下面的具 體實施方式僅用來說明本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員在理解本發(fā)明精神的前提下，可以根據(jù)本
技術(shù)領(lǐng)域的現(xiàn)有技術(shù)和公知知識對本發(fā)明進(jìn)行相應(yīng)變換，這些技術(shù)方案均落入本發(fā)明的范 圍之內(nèi)。
[0017] 實施例1舌狀蜈蚣藻提取物的制備
[0018] 將100g干燥舌狀蜈蚣藻，加10倍質(zhì)量0. 01mol/L的稀鹽酸浸泡處理30min，之后 將稀酸液倒出，并用自來水清洗至清洗液為中性，然后加入3L蒸餾水，在100°C提取3小時。 300目篩絹過濾除去藻渣，濾液用硅藻土助濾。將所得濾液濃縮，然后將該濃縮物噴霧干燥 得到28g的舌狀蜈蚣藻提取物。
[0019] 實施例2長葉蜈蟻藻（Grateloupia filicina)提取物的制備
[0020] 將100g干燥長葉蜈蚣藻加10倍質(zhì)量的0. 01mol/L的稀醋酸浸泡處理30min，之 后將稀酸液倒出，并用自來水清洗至清洗液為中性，然后加入3L蒸餾水，在KKTC提取3小 時。300目篩絹過濾除去藻渣，濾液經(jīng)4000rpm離心，收集上清液并濃縮，然后將該濃縮物噴 霧干燥得到32g的長葉蜈蚣藻提取物。
[0021] 實施例3 :舌狀蜈蚣藻提取物的改善記憶功能
[0022] 本發(fā)明以行為學(xué)和腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶為指標(biāo)，對蜈蚣藻提取物 的改善記憶功能進(jìn)行了深入研宄。
[0023] 實驗動物為3周齡雌性昆明種小鼠（二級），體重為18~22g。在試驗前，小鼠自 由獲取飼料和水一周以適應(yīng)實驗室環(huán)境。
[0024] 材料：實施例1中制備的舌狀蜈蚣藻提取物以及實施例2中制備的長葉蜈蚣藻提 取物。實驗中分別標(biāo)記為GL(舌狀蜈蚣藻提取物）和GF(長葉蜈蚣藻提取物）。
[0025] 實驗方法按照衛(wèi)生部《保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗方法》中"輔助改善記憶功 能檢驗方法"進(jìn)行。小鼠適應(yīng)1周后，將小鼠分為水迷宮、跳臺和避暗3項試驗，在試驗前對 動物進(jìn)行初篩，將保留的小鼠隨機(jī)分為正常對照組、舌狀蜈蚣藻提取物GL低劑量組、GL中 劑量組、GL高劑量組；長葉蜈蚣藻提取物GF低劑量組、GF中劑量組、GF高劑量組；每組12 只。蜈蚣藻提取物劑量設(shè)計，按每千克體重每日服用劑量設(shè)為低、中、高劑量組，分別為0. 2， 0. 4,0. 8g，將蜈蚣藻提取物分別溶于去離子水中，按0. lmL (每10g體重）給予灌胃，正常對 照組同時灌胃給予去離子水。連續(xù)給樣30d，然后進(jìn)行水迷宮和避暗實驗。行為學(xué)測試結(jié)束 之后，小鼠斷頭取腦，于冰浴中迅速剝離海馬組織，以預(yù)冷的生理鹽水制成10%組織勻漿。 按照試劑盒說明書操作，測定該組織的乙酰膽堿酯酶和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性。
[0026] 數(shù)據(jù)統(tǒng)計：避暗實驗中潛伏期和錯誤數(shù)、水迷宮實驗中到達(dá)終點所需時間和錯誤 數(shù)的數(shù)據(jù)用方差分析，組間比較用t檢驗，結(jié)果以平均值土標(biāo)準(zhǔn)差（M±SD)表示。
[0027] 實驗結(jié)果
[0028] 1)蜈蚣藻提取物對小鼠水迷宮實驗成績的影響
[0029] 連續(xù)給藥30天后，進(jìn)行水迷宮實驗，結(jié)果如表1所示。結(jié)果表明各實驗組到達(dá)終 點的動物數(shù)，與對照組相比較無顯著差異。不同給藥組小鼠到達(dá)終點所需時間以及錯誤次 數(shù)有明顯差異。舌狀蜈蚣藻提取物個劑量組到達(dá)終點時間以及錯誤次數(shù)均明顯優(yōu)于正常對 照組，而長葉蜈蚣藻提取物各劑量組與正常組比較沒有顯著差異。水迷宮實驗結(jié)果顯示舌 狀蜈蚣藻提取物能夠顯著提高小鼠水迷宮實驗成績，具有顯著改善小鼠記憶功能的作用， 而長葉蜈蚣藻提取物沒有提高記憶功能的作用。
[0030] 表1兩種蜈蚣藻提取物給藥30天對小鼠水迷宮實驗成績的影響
[0031]
【主權(quán)項】
1. 舌狀蜈蚣藻提取物在制備改善記憶功能藥品或保健食品中應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述蜈蚣藻提取物是通過下列方法制 備： (1) 將舌狀蜈蚣藻用稀酸浸泡10~60分鐘，然后濾去稀酸溶液，固體用清水洗至pH為 5~7,然后加入舌狀蜈蚣藻10~40倍質(zhì)量的蒸餾水加熱提取1~3小時，提取溫度控制 在80~KKTC，提取結(jié)束去除固體物質(zhì)得提取液； (2) 將所述提取液經(jīng)過濾或離心后，得到清液，清液采用噴霧干燥得到蜈蚣藻提取物固 體粉末；或，將清液減壓濃縮得濃縮液，濃縮液采用噴霧干燥得到蜈蚣藻提取物固體粉末。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述蜈蚣藻提取物的制備方法中，稀酸浸 泡時所用的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸或稀醋酸，其pH范圍為pH 1~4。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述的蜈蚣藻提取物具有抑制乙酰膽堿 酯酶活性和提高乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性的作用，從而提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿的含量， 改善記憶功能。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種舌狀蜈蚣藻提取物在制備改善記憶功能藥品或保健食品中的應(yīng)用。將舌狀蜈蚣藻通過稀酸浸泡處理，熱水提取、固液分離、濃縮、噴霧干燥等步驟得到固體粉末。舌狀蜈蚣藻提取物具有抑制乙酰膽堿酯酶活性和提高乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶活性的作用，提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿的含量，改善記憶功能。
【IPC分類】A61K36-02, A23L1-337, A61P25-00, A23L1-29
【公開號】CN104622915
【申請?zhí)枴緾N201510016041
【發(fā)明人】張全斌, 張文靜, 李曉紅, 金維華, 段德麟
【申請人】中國科學(xué)院海洋研究所
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2015年1月13日