芫花素在制備與透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶抑制劑，該抑制劑主要成分為芫花 素。
【背景技術(shù)】
[0002] 透明質(zhì)酸酶（Hyaluronidase)亦稱擴散因子，是透明質(zhì)酸的水解酶，主要存在 于皮膚、關(guān)節(jié)、韌帶、眼睛中，參與人體的許多病理生理活動，如胚胎發(fā)生、血管形成、血管 重建、免疫逃逸及腫瘤進展，且透明質(zhì)酸酶與過敏及炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。因此，透明質(zhì)酸 酶抑制劑在諸多領(lǐng)域中均有應(yīng)用。如專利CN 101304724 A利用透明質(zhì)酸酶與炎癥的關(guān) 系，將相關(guān)抑制劑用于皮膚過敏的緩解治療。近年來，透明質(zhì)酸酶被發(fā)現(xiàn)與多種炎癥相 關(guān)的疾病密切相關(guān)。如發(fā)現(xiàn)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清中，低分子量透明質(zhì)酸濃度要 高于正常人血清中的濃度[Yoshiko，S·，et al. Quantitative measurement of serum hyaluronic acid molecular weight in rheumatoid arthritis patients and the role of hyaluronidase[J]. International journal of rheumatic diseases，2011，14 : 313-319]，而小分子透明質(zhì)酸主要來源于透明質(zhì)酸酶對大分子的透明質(zhì)酸的降解作用。因 此，對透明質(zhì)酸酶進行抑制可作為一條緩解或治療炎癥相關(guān)疾病的途徑。目前，開發(fā)的有效 的天然產(chǎn)物透明質(zhì)酸酶抑制劑并不多，已公開的有專利CN 103635200 A，CN 101822689 A， CN101313913 A 等。
[0003] 彈性蛋白酶（Elastase)是以水解不溶性彈性硬蛋白為特征的蛋白水解酶，主要 存在于動物胰臟、皮膚、主動脈、血小板、白血球中。人白細胞彈性蛋白酶（HLE)也稱為人 嗜中性粒細胞彈性蛋白酶（HNE)，是一種堿性絲氨酸蛋白酶，存在于人多形核白細胞的嗜 苯胺藍粒中。人體生理功能正常時，彈性蛋白酶及其生理抑制劑維持平衡狀態(tài)，HNE對宿 主細胞具有防御作用；當(dāng)人體出現(xiàn)炎癥時，平衡被打破，HNE持續(xù)在活躍狀態(tài)，對人體組 織造成傷害，進而導(dǎo)致器官損害和功能障礙。彈性蛋白酶活性的過度不僅會破壞自身的 組織結(jié)構(gòu)，而且還可減弱機體的免疫功能。據(jù)報道，HNE可通過分解激肽釋放酶原使激肽 釋放酶具有活性，或引起中性粒細胞誘導(dǎo)炎癥因子IL-8產(chǎn)生增多，從而使炎癥反應(yīng)過度 放大。HNE還可以增強細菌、病毒及癌細胞與普通細胞之間的黏附性，促進微生物的侵襲 和轉(zhuǎn)移以及腫瘤細胞的增殖[Vijay A.et al. Human leukocyte elastase counteracts matrix metalloproteinase-7induced apoptosis resistance of tumor cells. Cancer letters[J], 2008, 268 :331-339]〇
[0004]芫花為瑞香科（Thymelaeaceae)植物芫花（Daphne genkwa sied. etZucc)的干燥 花蕾，為中國藥典收載。具有瀉水逐飲，行氣通脈，解毒消腫的功效，臨床主要用于水腫脹 滿，胸腹積水，痰飲積聚，氣逆喘咳，二便不利；外治疥癬禿瘡，凍瘡。分布于長江流域以南各 省區(qū)及山東、河南、陜西等地。芫花、芫花條、芫花根及了哥王中主要含有芫花素等黃酮類成 分。
[0005] 目前，尚未見有關(guān)于芫花作為透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶抑制劑的文獻報道或 專利。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶抑制劑及其在制備透 明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所引起的相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明以芫花素為載體，以透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶的抑制活性為指標(biāo)，確 定了芫花素對透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶的抑制作用，從而完成了本發(fā)明。
[0008] 因此，本申請?zhí)峁┮韵掳l(fā)明：
[0009] 一種透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶抑制劑，其特征為主要含有芫花素；
[0010] 所述的芫花素來源優(yōu)選芫花、芫花根、芫花條、了哥王；
[0011] 所述的芫花素，其特征為用于制備透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所引起 的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用；
[0012] 所述的芫花素，其特征為可與藥學(xué)上可接受的載體混合，用于制備透明質(zhì)酸酶或/ 和彈性蛋白酶分泌增加所引起的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用；
[0013] 所述的芫花素，其特征為可單獨或與其它中藥或中藥提取物或中藥有效部位或化 學(xué)成分或輔料共同制備的藥物組合物，用于制備透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所 引起的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用；
[0014] 所述的彈透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所引起的過敏、炎癥為鼻炎、類 風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸癌、皮炎、胃潰瘍；
[0015] 所述在制備透明質(zhì)酸酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所引起的過敏、炎癥、癌癥藥 物的應(yīng)用，其特征在于所述的芫花素或藥物組合物可制備成口服制劑、注射劑、吸入制劑或 外用制劑。
[0016] 下面通過實施例對本發(fā)明進一步描述，但本發(fā)明并不限于實施例所述的范圍。
【具體實施方式】
[0017] 本發(fā)明中的彈性蛋白酶來源于豬胰腺，其底物為N-Methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pr 〇-Val p_nitroanilide〇
[0018] 本發(fā)明中的透明質(zhì)酸酶底物為透明質(zhì)酸鈉。
[0019] 實施例1.芫花素對彈性蛋白酶活性的抑制作用
[0020] 取EP管，加80ul酶液后，加入450ul純凈水，混合均勻，加入50ul配制好的芫花 素溶液，混合均勻，置于37°C水浴鍋中，孵育20分鐘。隨后加入70ul彈性蛋白酶底物，于 37°C水浴鍋中，孵育90分鐘。取出，吸取200ul，測定0D405值，計算抑制率（見表1)。
[0021] 實施例2.芫花素對透明質(zhì)酸酶活性抑制實驗
[0022] 取EP管，加150ul緩沖液（醋酸-醋酸鈉，PH5. 0)，再加入IOOul透明質(zhì)酸酶液， 混合后加入20ul適當(dāng)濃度芫花素及80ul純水，再加入150ul底物后50°C孵育2h。取出， 加入IOOul鐵氰化鉀溶液及IOOul碳酸氫鈉溶液，沸水浴5min后，測定0D405值，計算抑制 率（見表1)。
[0023] 由表1可見，芫花素對透明質(zhì)酸酶、彈性蛋白酶具有一定的抑制作用。
[0024] 表1.芫花素對彈性蛋白酶及透明質(zhì)酸酶的抑制作用
[0025]
【主權(quán)項】
1. 一種彈性蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶抑制劑，其由芫花素組成。
2. 權(quán)利要求1所述的芫花素來源優(yōu)選芫花、芫花根、芫花條、了哥王。
3. 權(quán)利要求1所述的芫花素，其特征為用于制備彈性蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶分泌增 加所引起的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用。
4. 權(quán)利要求1所述的芫花素，其特征為可與藥學(xué)上可接受的載體混合，用于制備彈性 蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶分泌增加所引起的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用。
5. 權(quán)利要求1所述的芫花素，其特征為可單獨或與其它中藥或中藥提取物或中藥有效 部位或化學(xué)成分或輔料共同制備的藥物組合物，用于制備彈性蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶分 泌增加所引起的過敏、炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用。
6. 權(quán)利要求3、4、5中所述的彈性蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶分泌增加所引起的過敏、炎 癥為鼻炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸癌、皮炎、胃潰瘍。
7. 權(quán)利要求3、4、5所述在制備彈性蛋白酶或/和透明質(zhì)酸酶分泌增加所引起的過敏、 炎癥、癌癥藥物的應(yīng)用，其特征在于所述的芫花素或藥物組合物可制備成口服制劑、注射 劑、吸入制劑或外用制劑。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種透明質(zhì)酸酶抑制劑或/和彈性蛋白酶抑制劑，其由芫花素組成，該抑制劑可單獨或與其他中藥或中藥提取物或中藥有效部位或化學(xué)成分或藥學(xué)上可接受載體混合，用于制備與透明質(zhì)酸蛋白酶或/和彈性蛋白酶分泌增加所引起的相關(guān)疾病的藥物。
【IPC分類】A61P29-00, A61P37-08, A61P1-04, A61P19-02, A61P17-00, A61P35-00, A61K31-352, A61P11-02
【公開號】CN104606182
【申請?zhí)枴緾N201510014404
【發(fā)明人】張春鳳
【申請人】中國藥科大學(xué)
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年1月7日