專利名稱：1－蓋基－α－D－吡喃葡萄糖苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的制備方法。
薄荷醇以其所伴的特殊清涼感的薄荷香味而廣泛地作藥用、食用、牙粉、其它口含清涼劑等。然而，薄荷醇因其升華性而具有隨時間的推移而薄荷香味減少等問題。而且，因為難溶于水，以往都是將固體顆粒直接混合或用乳化劑混懸后加以使用，或必須用乙醇等有機溶劑溶解后使用等方法。
為了克服這些問題，有人提出使用薄荷醇配糖物(特公昭51-105)，該薄荷醇配糖物具有在薄荷醇上加成低聚糖的結(jié)構(gòu)，其水溶性高、本身并不顯示薄荷醇特有的香味，但經(jīng)各種糖酶或酸等水解，分離成薄荷醇和糖，則出現(xiàn)伴隨薄荷醇特有的清涼感的薄荷香味(Agric.Biol.Chem.第43卷，第307頁(1979)；《香料》，No.130,79,(1981))。
這樣的薄荷醇配糖物是水溶性的，且無升華性，因此無須象薄荷醇那樣密封保管，而且是極穩(wěn)定的物質(zhì)，任意放置也完全不發(fā)生變化。此外，通過適當?shù)卣{(diào)節(jié)其分解速度，薄荷醇特有的清涼感和藥理作用也可呈持續(xù)性的或短暫的。
這些薄荷醇配糖物在各種食物及口含清涼劑、香煙的香味改良劑方面，可用作清涼劑的持續(xù)、穩(wěn)定化劑。實際上，特開昭62-161716號公報中揭示了在牙膏組合物上的應用，特開平6-329528號公報中揭示了在使清涼感持續(xù)長時間的化妝品上的應用，而特開平5-219929號公報中揭示了在香煙香味改良劑上的應用。
關(guān)于薄荷醇配糖物的制備方法，在特公昭51-105號公報上揭示了從葡萄糖和薄荷醇制備葡糖苷的有機合成方法，及用乙酰葡萄糖和溴乙酰葡萄糖的有機合成方法。在上述Agric.Biol.Chem.，第43卷，第101頁(1979)和《香料》No.130,79(1981)中，報告了將基四乙酰-β-吡喃葡萄糖苷異構(gòu)化為α型、合成1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的方法以及各種薄荷醇配糖物的有機合成方法。
然而，這些方法使用昂貴的催化劑且需要多步反應工序等，因此造價高。而且，為了將所得的薄荷醇配糖物使用于食物，出于安全，必須完全除去有機合成試劑。
因此，本發(fā)明者在無須高價催化劑和多步反應工序且可得到安全性高的薄荷醇配糖物的制備方法上進行了刻意研究，發(fā)現(xiàn)以蔗糖和麥芽糖等為底物、以薄荷醇為糖接受體、用α-葡糖苷酶進行酶促反應的制備薄荷醇配糖物的方法(特開平9-224693)。該發(fā)明可以一步反應工序制備配糖物且無需對人體有害的有機合成試劑，是一個好的方法，但相對于所使用的薄荷醇，薄荷醇配糖物的收率在不添加表面活性劑的情況下約為5％(換算成摩爾)，在添加表面活性劑的情況下約為9％，存在收率低的問題，達不到實用化的目的。
因此，本發(fā)明的目的是提供無須使用高價催化劑和多步反應工序而以高收率制備薄荷醇配糖物1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的方法。
本發(fā)明者進而反復進行銳意研究的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)黃單孢菌屬、Stenotrophomonas屬和節(jié)細菌屬細菌具有薄荷醇配糖化能力，利用這些具有配糖化能力的微生物，與使用α-葡糖苷酶的制備方法相比，可制備極多量的薄荷醇配糖物，從而完成了本發(fā)明。利用微生物的高收率制備薄荷醇配糖物的方法是迄今未知的全新的制備方法。
薄荷醇有4種立體異構(gòu)體及各有3種旋光異構(gòu)體，共計存在12種異構(gòu)體，但在本發(fā)明中，薄荷醇指具有香味的一種薄荷醇，而薄荷醇配糖物指1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷。
所使用的微生物是具有使薄荷醇配糖化能力的微生物，并無特別限定。在麥芽糖、蔗糖、糊精、淀粉等溶液中加入薄荷醇，在其中加入微生物菌體進行反應后，用TLC、HPLC等檢出配糖物的有無，可容易地查出具有使薄荷醇配糖化能力的微生物。這樣的具有使薄荷醇配糖化能力的微生物可列舉如黃單孢菌屬、Stenotrophomonas屬和節(jié)細菌屬細菌。這些屬的細菌可從財團法人發(fā)酵研究所、財團法人物理化學研究所等細菌分讓機構(gòu)容易地得到。此外，本發(fā)明者從土壤中分離、鑒定的微生物甘藍黑腐病黃單孢菌(Xanthomonas campestris)WU9701(FERM BP-6578)、Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)也具有高的配糖化能力，這些微生物也可使用。這些菌株在國立生命科學和人體技術(shù)研究所以上述編號保藏。特別是黃單孢菌屬，是應用于食品制造的增粘多糖黃原膠的生產(chǎn)菌，從安全的觀點來看，使用該屬菌較好。
所用微生物的形態(tài)，除了活菌體、凍干菌體、經(jīng)紫外線等照射失去增殖能力的死菌體、菌體破碎液之外，也可使用將該微生物的活菌體固定在褐藻酸、聚丙烯酰胺、玻璃珠、殼聚糖等載體上的固定化菌體、菌體破碎液以及從菌體破碎液制成的粗制酶、將粗制酶固定于載體上的固定化酶。
薄荷醇配糖物合成中，反應系統(tǒng)可以是在加了薄荷醇的糖類溶液中加入菌體或粗制酶進行配糖化反應的方法，也可用通常用于微生物的培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體，在此培養(yǎng)基中加入薄荷醇等糖類，使微生物的培養(yǎng)和薄荷醇的配糖化同時進行。而且，也可在薄荷醇和微生物的混合液中少量多次添加糖類，使配糖化連續(xù)進行。
本發(fā)明的薄荷醇配糖物合成中使用的糖類可適當?shù)厥褂名溠刻?、糊精、可溶性淀粉、蔗糖等，作為?gòu)成糖，可適當?shù)厥褂煤咸烟堑奈镔|(zhì)。
本發(fā)明的反應中，可將薄荷醇溶解在適當溶劑中供反應用。此處所用的有機溶劑可用己烷、乙酸乙酯、乙醚、油脂等與水不相溶的溶劑，丙酮、乙醇等與水相混合的溶劑，或它們的組合。必要時，可添加表面活性劑進行反應。
反應生成物基葡糖苷可從反應系統(tǒng)中分離精制，但也可將反應液不經(jīng)處理或濃縮干燥后使用。
用本發(fā)明的方法制備的1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷及含此化合物的混合物可廣泛地用作安全穩(wěn)定的薄荷醇制劑，或在口中緩慢分解產(chǎn)生薄荷醇特有清涼感的食品材料、化妝材料、香煙等嗜好品的香料、防蟲材料、防菌材料等。
所得的反應生成物1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷作為糖接受體，在具有糖轉(zhuǎn)移活性的酶的作用下，在基葡糖苷的葡萄糖殘基上再加若干個糖，提高水溶性和酸、酶、熱分解性，這是采用現(xiàn)有的糖轉(zhuǎn)移酶技術(shù)容易達到的。例如，由本發(fā)明所得的1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷作為糖接受體，在糊精或淀粉等存在下，在環(huán)糊精葡糖轉(zhuǎn)移酶(CGTase)作用下，可制得在1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的葡萄糖殘基上再有若干個葡萄糖α-1,4結(jié)合的化合物。
下面列舉實施例對本發(fā)明作更詳細的說明，但這并不限制本發(fā)明技術(shù)的范圍。
實施例1用各種微生物制備薄荷醇的配糖物在含有1M麥芽糖的10mM檸檬酸-磷酸緩沖液(pH7.0)10ml中，加入1-薄荷醇50mg，在其中加入各種微生物的凍干菌體50mg，以180rpm振蕩及30℃溫度下反應24小時。反應結(jié)束后，用薄層色譜法(TLC)檢測薄荷醇配糖物。其結(jié)果見表1。
表1 薄荷醇配糖物的檢測結(jié)果
表中的簡稱IFO為財團法人發(fā)醇研究所，JCM為財團法人物理化學研究所，ATCC為美國典型培養(yǎng)物保藏中心。
如上面的表1所示，黃單孢菌屬、Stenotrophomonas屬、節(jié)細菌屬和醇母屬微生物具有薄荷醇配糖化能力。
薄層色譜法(TLC)采用硅膠板，用苯/甲醇(3∶1)展開后，噴以硫酸茴香醛，于160℃加熱1分鐘，進行薄荷醇配糖物的檢出。在本條件下，在Rf值為0.6-0.7附近檢出薄荷醇配糖物。
實施例2反應生成物的確認為了進行反應生成物的確認，用以下方法制備配糖物。將甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)用表2的培養(yǎng)基于30℃培養(yǎng)24小時，離心分離(10000g、30分鐘)，分離成培養(yǎng)上清液和菌體。所得的菌體用10mM檸檬酸-磷酸緩沖液(pH7.0)洗滌后，冷凍干燥，制成凍干菌體。
雖然使用了表2所示的培養(yǎng)基，但其它適用培養(yǎng)基也可以。
表2 培養(yǎng)基的組成薄荷醇 50g酵母提取物 2g胨 10gMgSO4-7H2O 1g蒸餾水 1LpH7.0在含有1M麥芽糖的10mM檸檬酸-磷酸緩沖液(pH7.0)10ml中，加入1-薄荷醇50mg，在其中加入上述凍干菌體50mg，以180rpm振蕩及30℃溫度下反應24小時。用乙酸乙酯萃取反應液。蒸去萃取液的溶劑后，溶解于正丁醇/2-丙醇/水(10∶5∶4)混合溶劑中，上硅膠柱(ヮコ-ゲル C200、φ25×400mm)、用同樣的溶劑洗脫，分取洗脫液。用TLC確認洗脫成分，選擇被確認為反應生成物的部分，蒸去溶劑后，再用己烷洗滌、干燥。所得的精制物(31.3mg)在TLC上顯示單一的點后，供13C-NMR分析。分析結(jié)果與用Agric.Biol.Chem.，第43卷，第307頁(1979年)記載的方法有機合成、精制所得的標準品1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的分析結(jié)果一致。其光譜見

圖1。
實施例3反應精制物的定量對于實施例1中在TLC上被確認較大生成物點的7株菌株甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)，甘藍黑腐病黃單孢菌IFO 13551，大豆斑疹病黃單孢菌IFO 13554，豌豆疫病黃單孢菌IFO 13556,Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579),Stenotrophomonas maltophilia JCM 1984及Stenotrophomonasmaltophilia JCM 1987，按Biosci.Biotech.Biochem.,60(11)，第1914-1915頁(1996年)記載的方法，用HPLC對反應液中生成的薄荷醇配糖物的量進行定量。定量結(jié)果，生成了15.9-35.8mg薄荷醇配糖物，收率按摩爾換算約為16-35％。此定量結(jié)果見表3。
表3薄荷醇配糖物的生成量
實施例4反應pH對薄荷醇配糖物生成量的影響為了研究反應pH對薄荷醇配糖物生成量的影響，在含1M麥芽糖的所定pH的10mM緩沖液(磷酸-檸檬酸緩沖液或硼酸-NaOH緩沖液)10ml中，加入1-薄荷醇50mg，在其中加入與實施例2同樣配制的甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，在180rpm往復振蕩下、于30℃反應24小時。反應結(jié)束后，用HPLC對合成的薄荷醇配糖物進行定量。
結(jié)果如圖2所示，在pH4-10時可見薄荷醇配糖物的生成，在pH8時為最大。這時，得到49.3mg薄荷醇配糖物，收率以摩爾換算，為44％。
實施例5用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)凍干菌體50mg代替甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，與實施例4同樣操作，對生成的薄荷醇配糖物進行定量。
結(jié)果如圖3所示，在pH4-10時可見薄荷醇配糖物的生成，在pH9時為最大。這時，得到45mg薄荷醇配糖物，收率以摩爾換算，為44％。
實施例6反應溫度對薄荷醇配糖物生成量的影響為了研究反應溫度對薄荷醇配糖物生成量的影響，在含1M麥芽糖的pH8的10mM硼酸-NaOH緩沖液10ml中，加入1-薄荷醇50mg或100mg，在其中加入與實施例2同樣配制的甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，在180rpm往復振蕩下、于所定的溫度下反應24小時。反應結(jié)束后，用HPLC對薄荷醇配糖物的生成量進行定量。
結(jié)果如圖4所示，在反應溫度為25-50℃時，可見薄荷醇配糖物的生成，在加入1-薄荷醇50mg的情況下，35℃以上收率為100％，所加入的薄荷醇全部配糖化。在加入100mg的情況下，在反應溫度為40℃時，配糖物的生成量最大，這時生成154.7mg配糖物，收率以摩爾換算，為75.8％。
實施例7用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)凍干菌體50mg代替甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，用pH7的檸檬酸-磷酸緩沖液代替pH8的硼酸-NaOH緩沖液，與實施例6同樣操作，對生成的薄荷醇配糖物進行定量。
結(jié)果如圖5所示，在反應溫度為20-50℃時可見薄荷醇配糖物的生成，35-40℃為最適。在反應溫度為40℃時，生成50mg薄荷醇配糖物，收率以摩爾換算，為49％。
實施例8麥芽糖濃度對薄荷醇配糖物生成量的影響為了研究作為糖供體的麥芽糖的濃度對薄荷醇配糖物生成量的影響，在含所定濃度麥芽糖的pH8的10mM硼酸-NaOH緩沖液10ml中，加入1-薄荷醇100mg，在其中加入與實施例2同樣配制的甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERMBP-6578)凍干菌體50mg，在180rpm往復振蕩下、于40℃反應24小時。反應結(jié)束后，用HPLC對薄荷醇配糖物的生成量進行定量。
結(jié)果如圖6所示，在麥芽糖的濃度為0.1-1.8M時，可見薄荷醇配糖物的生成，麥芽糖濃度在0.4-1.2M時，得到140mg以上配糖物，麥芽糖濃度在1M時配糖物生成量最大，得到154mg配糖(收率以摩爾換算，約為75％)。
實施例9用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)凍干菌體50mg代替甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，用pH7的檸檬酸-磷酸緩沖液，與實施例8同樣操作，對生成的薄荷醇配糖物進行定量。
結(jié)果如圖7所示，在麥芽糖的濃度為0.2-1.0M時，可見薄荷醇配糖物的生成，在此范圍內(nèi)，薄荷醇配糖物的收率完全無變化，得到29-34mg薄荷醇配糖物。
實施例10薄荷醇加入量對薄荷醇配糖物生成量的影響為了研究薄荷醇加入量對薄荷醇配糖物生成量的影響，在含1M麥芽糖的pH8的10mM硼酸-NaOH緩沖液10ml中，加入所定量的1-薄荷醇，在其中加入與實施例2同樣配制的甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，在180rpm往復振蕩下、于40℃反應24小時。反應結(jié)束后，用HPLC對薄荷醇配糖物的生成量進行定量。
結(jié)果如圖8所示，在薄荷醇加入量為50mg-1563mg時，可見薄荷醇配糖物的生成，在加入薄荷醇100mg時，生成的薄荷醇配糖物量最大，在此以上即使添加薄荷醇也未見配糖物的生成量增加。所得配糖物的收率在薄荷醇添加量為50mg時達到100％，在添加該量以上的薄荷醇時收率緩緩降低。
實施例11反應時間對薄荷醇配糖物生成量的影響為了研究反應時間對薄荷醇配糖物生成量的影響，在含1M麥芽糖的pH8的10mM硼酸-NaOH緩沖液10ml中，加入100mg 1-薄荷醇，在其中加入與實施例2同樣配制的甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)凍干菌體50mg，在180rpm往復振蕩下、于40℃反應5-72小時。用HPLC對薄荷醇配糖物的經(jīng)時生成量進行定量。
結(jié)果如圖9所示，在反應開始后0.5小時，可見薄荷醇配糖物的生成，其量經(jīng)時性增加，在反應開始后48小時全部薄荷醇配糖化。
比較例用α-葡糖苷酶制備薄荷醇配糖物在含有1M麥芽糖的10mM檸檬酸-磷酸緩沖液(pH7.0)10ml中，加入薄荷醇50mg，在其中加入來自酵母的α-葡糖苷酶(Biozyme Labotatory Limited制，英國)20單位或100單位，于30℃反應24小時，制成薄荷醇配糖物，α-葡糖苷酶的效價以37℃、1分鐘內(nèi)使1微摩爾麥芽糖水解的酶量作為1個單位。反應結(jié)束后，用HPLC對生成的配糖物進行定量，結(jié)果見表4。
表4薄荷醇配糖物的定量結(jié)果
*摩爾換算收率=生成的薄荷醇配糖物摩爾數(shù)/使用的薄荷醇摩爾數(shù)在加入20單位α-葡糖苷酶的情況下，生成4.8mg薄荷醇配糖物，其收率非常低，按摩爾換算為4.7％。而且，將加入的酶量提高5倍，為100單位，配糖物的生成量反而降低。
實施例12用從微生物菌體制成的粗制酶制備配糖物將甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)在表2的培養(yǎng)基中于30℃培養(yǎng)24小時，用離心分離法(4℃、10000g、30分鐘)從30ml培養(yǎng)液中分離得到菌體。所得的菌體用10mM檸檬酸-磷酸緩沖液(pH7.0)洗滌兩次后，懸浮于10mM檸檬酸-磷酸緩沖液10ml中，以1分鐘的間隔進行10次超聲波處理(20kHz、200W、2分鐘)，將細胞破碎。所得的菌體破碎液通過離心分離(4℃、15000g、30分鐘)分離成上清液和殘渣，以上清液作為粗制酶用于配糖物的制備。在粗制酶液(約10ml)中加入1M麥芽糖和薄荷醇50mg，于40℃反應24小時，用HPLC將生成的配糖物定量。
薄荷醇配糖物的生成量為89.3mg，摩爾換算收率為88.2％。其結(jié)果見表5。
表5用粗制酶制備薄荷醇配糖物
由此看來，本發(fā)明中使用從具有薄荷醇配糖化能力的微生物所得的酶也可以高收率制備配糖物。
該酶的酶學分類和底物特異性等酶學特性不明確，但與比較例中所用的來自酵母的α-葡糖苷酶相比，配糖物的收率極高，因此認定是與來自酵母的α-葡糖苷酶不同的酶。
實施例13薄荷醇配糖物的合成中糖供體種類的影響與實施例12同樣地制備甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)粗制酶。在此菌體的粗制酶液10ml中加入各種糖1g和薄荷醇50mg，于30℃反應24小時，測定生成的薄荷醇配糖物的量。結(jié)果如表6所示，在使用麥芽糖、可溶性淀粉、蔗糖的情況下，生成了配糖物，但在使用葡萄糖的情況下未生成配糖物。
表6糖的種類與薄荷醇配糖物的生成量
>*相對比系將使用麥芽糖的反應中的生成量作為100％。實施例14 口香糖的配制按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制口香糖。
膠基質(zhì)20.0％砂糖 55.0麥芽糖14.0葡萄糖10.4香料 0.1薄荷醇配糖物 0.5實施例15 小點心的制備按照如下處方，用實施例5中所得的薄荷醇配糖物，按常規(guī)方法試制小點心。
砂糖75.0％乳糖19.5精制水 4.3香料0.5脂肪酸甘油酯0.2薄荷醇配糖物0.5實施例16 冰淇淋的制備按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制冰淇淋。
奶油(脂肪部分45％) 25.0％牛奶(脂肪部分3.7％) 35.0脫脂奶粉24.3砂糖10.2玉米糖漿4.7穩(wěn)定劑 0.3薄荷醇配糖物0.5實施例17 巧克力的制備按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制巧克力。
可可粒15.0％全脂奶粉 25.0椰子脂18.0砂糖 41.0乳化劑0.3香料 0.1薄荷醇配糖物 0.6實施例18 清涼飲料的配制按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制清涼飲料。
果糖葡萄糖液5.0％砂糖4.0酸味料 1.2香料0.3精制水 89.0薄荷醇配糖物0.5實施例19 牙膏的配制按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制牙膏。
十二烷基硫酸鈉1.0％氫氧化鋁 35.0硅酸酐15.0糖精鈉0.2山梨醇0.5香料 0.7精制水47.1薄荷醇配糖物 0.5實施例20 漱口水的配制按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制漱口水。
十二烷基硫酸鈉1.5％甘油 10.0乙醇 5.0糖精鈉0.2香料 0.5精制水82.3薄荷醇配糖物 0.5實施例21 化妝水的配制按照如下處方，用實施例6中所得的薄荷醇配糖物按常規(guī)方法試制化妝水。
乙醇 30.0％1-薄荷醇 0.1乳化劑 0.5精制水 68.9薄荷醇配糖物 0.5按照本發(fā)明的方法，不必象以往的有機合成法那樣使用昂貴的催化劑和采用多步驟工序，而且與采用α-葡糖苷酶的制備方法相比，為使以極高的收率制備1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷成為可能而提供廉價的薄荷醇配糖物。
圖1為實施例中生成的1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的13C-NMR譜。
圖2顯示用甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)干燥菌體時反應pH與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖3顯示用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)干燥菌體時反應pH與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖4顯示用甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)干燥菌體時反應溫度與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖5顯示用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)干燥菌體時反應溫度與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖6顯示用甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)干燥菌體時麥芽糖濃度與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖7顯示用Stenotrophomonas maltophilia D1(FERM BP-6579)干燥菌體時麥芽糖濃度與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖8顯示用甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)干燥菌體時薄荷醇加入量與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
圖9顯示用甘藍黑腐病黃單孢菌WU9701(FERM BP-6578)干燥菌體時反應時間與1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷生成量的關(guān)系。
權(quán)利要求
1．1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的制備方法，其特征在于在糖類存在下，使具有1-薄荷醇配糖化能力的微生物作用于1-薄荷醇。
2．如權(quán)利要求1所述的1-基-α-D-吡喃葡萄糖苷的制備方法，其中使用的微生物是選自黃單孢菌屬、Stenotrophomonas屬和節(jié)細菌屬的細菌。
全文摘要
本發(fā)明提供不必使用昂貴的催化劑和采用多步驟工序、而以高收率制備薄荷醇配糖物1－基－α－D－吡喃葡萄糖苷的方法,即在糖類的存在下,使具有1－薄荷醇配糖化能力的微生物作用于1－薄荷醇。
文檔編號A61K8/99GK1220315SQ9812304
公開日1999年6月23日 申請日期1998年11月30日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月29日
發(fā)明者宇佐美昭次, 桐村光太郎, 中川博之, 土橋幸生, 吉山正章, 志村進, 伊東禧男 申請人:羅蒂株式會社