專利名稱：治療神經(jīng)和神經(jīng)精神障礙的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類取代的胺、藥用組合物和治療神經(jīng)和神經(jīng)精神障礙的藥物。
突觸傳遞是一種細(xì)胞通訊的復(fù)雜形式，它包括在前和后突觸神經(jīng)元中的一大列特異性結(jié)構(gòu)。高親和力神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是位于前突觸末梢和周圍神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞上的這類成分(Kanner和Schuldiner，CRCCritical Reviews in Biochemistry，22，1032(1987))。轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將神經(jīng)遞質(zhì)和突觸隔離開來，從而調(diào)整突觸中神經(jīng)遞質(zhì)的濃度，同時在其存在期間，一起影響突觸傳遞的大小。進(jìn)一步講，通過阻止遞質(zhì)向周圍突觸擴(kuò)散，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白維持了突觸傳遞的保真性。最后，通過隔離已釋放的遞質(zhì)進(jìn)入前突觸末梢，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白使遞質(zhì)可重復(fù)利用。
神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)依賴于細(xì)胞外鈉和跨膜電壓差，在強(qiáng)神經(jīng)元發(fā)射情況下，例如在癲癇發(fā)作期間，轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可起相反作用，以鈣非依賴性非胞吐(exocytotic)模式釋放神經(jīng)遞質(zhì)(Attwell et al.，Neuron，11，401-407(1993))。所以神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的藥理學(xué)調(diào)整提供了改善突觸活性的方法，從而提供了神經(jīng)和精神失調(diào)的治療方法。
甘氨酸在哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中是一重要的神經(jīng)遞質(zhì)，其功能為既可抑制又可興奮突觸。通過神經(jīng)系統(tǒng)，可作用于神經(jīng)系統(tǒng)的中樞和周邊部分。甘氨酸的這些不同功能被兩種不同類型的受體所介導(dǎo)，其中的每一種與不同種類的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相關(guān)。甘氨酸的抑制作用被甘氨酸受體所介導(dǎo)，該受體對可引起驚撅的生物堿士的寧敏感，所以被稱為“士的寧敏感型”。這樣的受體含有內(nèi)在氯化物通道，當(dāng)甘氨酸與受體結(jié)合時，該通道即開放；通過增加氯化物的傳導(dǎo)，可增加動作電位的發(fā)射閾值。已發(fā)現(xiàn)在脊髓和腦干中士的寧敏感型甘氨酸受體非常豐富，可提高該受體活性的藥理活性物質(zhì)能在這些區(qū)域增加神經(jīng)傳遞的抑制。
通過調(diào)整谷氨酸鹽的作用，甘氨酸可激活傳遞，主要激活的神經(jīng)遞質(zhì)位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。見Johnson和Ascher，Nature，325，529-531(1 987)；Fletcher et al.，Glycine Transmission，(Otterson and Storm-Mathisen，eds.1990)，pp，193-219。特別是，甘氨酸是稱為N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體的谷氨酸受體類的專性協(xié)同激動劑。NMDA受體的激活可增加鈉和鈣的傳導(dǎo)，使神經(jīng)元去極化，從而增加發(fā)射動作電位的可能性。NMDA受體廣泛分布于腦中，尤其在大腦皮質(zhì)和海馬結(jié)構(gòu)中具有高密度。
分子克隆已經(jīng)揭示在哺乳動物腦中存在兩類甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，稱為GlyT-1和GlyT-2。發(fā)現(xiàn)GlyT-1在前腦中豐富，其分布與谷氨酸能通道和NMDA受體相關(guān)(Smith，et al.，Neuron，8，927-935(1992))。分子克隆進(jìn)一步揭示GlyT-1存在三種變型，稱為GlyT-1a、GlyT-1b和GlyT-1c(Kim，et al.，Molecular Pharmacology，45，608-617(1994))，其中之每一種在腦和周邊組織中都有其特殊的分布。這些變型以不同的剪接和外顯子用法出現(xiàn)，其N-端基區(qū)域不同。相反，發(fā)現(xiàn)GlyT-2在腦干和脊髓中豐富，其分布與士的寧敏感型甘氨酸受體密切相關(guān)(Liu etal.，J.Biological Chemistry，268，22802-22808(1993)；Jursky和Nelson，J.Neurochemistry，64，1026-1033(1995))。這些數(shù)據(jù)與以下發(fā)現(xiàn)相符合通過調(diào)節(jié)甘氨酸的突觸水平，GlyT-1和GlyT-2可分別選擇性地影響NMDA受體和士的寧敏感型甘氨酸受體的活性。
所以可期望抑制或激活甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的化合物將改變受體的功能，為各種疾病狀態(tài)提供治療方法。例如，可利用GlyT-2的抑制以便通過提高甘氨酸的突觸水平來降低具有士的寧敏感型甘氨酸受體的神經(jīng)元活性，從而降低脊髓中與疼痛相關(guān)(如感受傷害的)的信號的傳遞，已經(jīng)證明它由這些受體所介導(dǎo)(Yaksh，Pain，37，111-123(1989))。另外，通過在脊髓中士的寧敏感型甘氨酸受體提高甘氨酸能傳遞的抑制可用來降低肌肉活動過強(qiáng)，可用于治療與增強(qiáng)的肌肉收縮有關(guān)的疾病或狀態(tài)，如痙攣狀態(tài)、肌陣攣和癲癇(Truong et al.，Movement Disorders，3，77-87(1988)；Becker，F(xiàn)ASEB J.，4，2767-2774(1990))。通過調(diào)整甘氨酸受體可治療與下列有關(guān)的痙攣狀態(tài)癲癇、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷、多發(fā)性硬化癥、脊髓損傷、肌張力障礙和其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病和損傷的狀態(tài)。
NMDA受體主要與記憶和學(xué)習(xí)有關(guān)(Rison和Stanton，Neurosci.Biobehav.Rev.，19,533-552(1 995)；Danysz et al.，Behavioral Pharmacol.，6，455-474(1995))；另外，降低NMDA介導(dǎo)的神經(jīng)傳遞的功能似乎是精神分裂癥癥狀的基礎(chǔ)或有助于精神分裂癥的癥狀(Olney and Farber，Archives General Psychiatry，52，998-1007(1996))。因而，抑制GlyT-1從而提高NMDA受體的甘氨酸活性的活性物質(zhì)可用作新的抗精神病和抗癡呆藥物，治療其它認(rèn)知過程受損害的疾病，如注意力缺乏障礙和有機(jī)腦綜合征。相反，NMDA受體的過度激活與一些疾病狀態(tài)有關(guān)，特別在與中風(fēng)和可能的神經(jīng)變性性疾病有關(guān)的神經(jīng)元死亡中的疾病狀態(tài)有關(guān)，如Alzheimer’s疾病、多發(fā)性梗塞癡呆、AIDS癡呆、Huntington氏疾病、Parkinson氏疾病、肌萎縮性側(cè)索硬化或其它神經(jīng)元細(xì)胞死亡發(fā)生的狀態(tài)，如中風(fēng)或腦創(chuàng)傷(Coyle&Puttfarcken，Science，262，689-695(1993)；Lipton和Rosenberg，New Engl.J.of Medicine，330，613-622(1993)；Choi，Neuron，1，623-634(1998))。所以，提高GlyT-1活性的藥理活性物質(zhì)能導(dǎo)致NMDA受體的甘氨酸激活降低，該活性可用于治療這些和與之相關(guān)的疾病狀態(tài)。相同的，直接阻斷NMDA受體上的甘氨酸位點(diǎn)的藥物也可用于治療這些和與之相關(guān)的疾病狀態(tài)。
本發(fā)明概述根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)鑒定可抑制通過GlyT-1或GlyT-2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的一類化合物，或者抑制該轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物的前體，即前體藥物，或者制備抑制該轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物的合成中間體。所以，本發(fā)明提供一類下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中(1)X為氮或碳，當(dāng)X為氮時R2不存在；(2)R2(a)為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氰基、(C2-C7)鏈烷酰基、氨基羰基、(C1-C6)烷基氨基羰基或其中每一個烷基分別獨(dú)立為C1到C6的二烷基氨基羰基，(b)包括(其中R1不是氨基亞乙基、-O-R8或-S-R8*)羥基、氟、氯、溴或(C2-C7)鏈烷酰氧基，(c)與相鄰的來自R1、Rxb或Ryb之一的碳或氮形成雙鍵或(d)為由R2b連接到X上的R2a。
(2i)Rx為Rxb連接到X上的Rxa；(2ii)Ry為Ryb連接到X上的Rya；(2iii)Rxa、Rya和R2a獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或含有選自包括氧、硫和氮的0-2個雜原子的5-7元非芳香環(huán)，其中(a)芳基為苯基或萘基，(b)雜芳基包括五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中雜芳基為芳香的并含有選自包括氧、硫和氮的雜原子，而其余的環(huán)原子為碳。
(c)Rxa、Rya和R2a的每一個可獨(dú)立地為Rq、RrO-或RsS-其中之一所取代，其中Rq、Rr和Rs的每一個獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或5-7元非芳香環(huán)，這些環(huán)的結(jié)構(gòu)如Rxa所定義，和(d)Rxa、Rya、R2a、Rq、Rr和Rs可另外為選自下列基團(tuán)的一個或多個取代基所取代氟、氯、溴、硝基、羥基、氰基、三氟甲基、具有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺?；⒔饎偼榛?、(C1-C12)烷基、(C1-C12)鏈烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、其中每一個烷基獨(dú)立地為C1-C6的二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷?；?、(C2-C7)鏈烷?；趸?、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺酰基、用多至三個(C1-C6)烷基獨(dú)立取代的脒基、或用二個氧與芳環(huán)或雜芳環(huán)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代，其中(i)Rxa、Rya和R2a的取代可在Rxa、Rya和R2a兩個之間結(jié)合形成第二個橋接，包括(1)(C1-C2)烷基或鏈烯基，它可用一個或多個(C1-C6)烷基獨(dú)立取代，(2)硫，(3)氧，(4)氨基，它可用一個(C1-C6)烷基取代氫，(5)羰基，(6)-CH2C(＝O)-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(7)-C(＝O)-O-，(8)-CH2-O-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(9)-C(＝O)N(R24)，其中R24為氫或(C1-C6)烷基，(10)-CH2-NH-，它可用多至三個(C1-C6)烷基取代氫，或(11)-CH＝N-，它可用(C1-C6)烷基取代氫，或其中Rxa、Rya和R2a中的二個直接以單鍵連接；(2iv)Rxb和R2b獨(dú)立為單鍵或(C1-C2)亞烷基；(2v)Ryb為單鍵、氧雜、(C1-C2)亞烷基、亞乙基或-CH＝(其中雙鏈與X連接)、硫雜、亞甲氧基或亞甲硫基、或-N(R6)或-CH2-N(R6*)-，其中R6和R6*為氫或(C1-C6)烷基，其中當(dāng)X為氮時，X不與其它雜原子相連；(3)R1包括直鏈(C2-C3)脂肪族基團(tuán)；當(dāng)X為碳時，為＝N-O-(亞乙基)，其中未配對雙鍵與X連接；(當(dāng)X為碳時，Ryb不包括與X連接的雜原子)，為-O-R8或-S-R8*其中R8或R8*為亞乙基或亞乙烯基并且O或S與X相連接；(當(dāng)X為碳時，Ryb不包括與X連接的雜原子)，為氨基亞乙基其中氨基與X相連接的氨基其中R1可被至多一個羥基、至多一個(C1-C6)烷氧基或至多一個(C2-C7)鏈烷酰氧基、至多二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基、至多一個氧基基、至多一個(C1-C6)亞烷基所取代，前提為所述羥基、烷氧基、鏈烷酰氧基或氧基基取代基不與與氮或氧相連的碳相連；其中R1的烷基或亞烷基取代基可連接形成3-7元非芳香環(huán)；和其中如果X為氮，X以單鍵與R1相連接，連接R1與氮的R1的端基碳是飽和的；(4)R3(a)為氫、(C1-C6)烷基或苯基或其中烷基為C1-C6的苯基烷基并且該苯基可用上述Rxa的芳基或雜芳基所定義的相同的取代基所取代，(b)為-R12Z(Rxx)(Ryy)(R11)，其中R12與N結(jié)合，Z獨(dú)立的與X相同，Rxx獨(dú)立的與Rx相同，Ryy獨(dú)立的與Ry相同，R11獨(dú)立的與R2相同，R12獨(dú)立的與R1相同，或(c)與R4共同形成如下C環(huán) 其中當(dāng)C環(huán)存在時，R4*為氫；(5)n為0或1，并且當(dāng)n為1時，R3*為(C1-C6)烷基(與之相連接的氮帶正電荷)或氧(形成N-氧化物)，X為碳；(5’)Q與所述環(huán)上氮和帶有R5的環(huán)上碳共同形成C環(huán)，其中C環(huán)為3-8元環(huán)、被3-6元螺環(huán)取代的3-8元環(huán)或與5-6元環(huán)稠合的3-8元環(huán)，其中缺少所述環(huán)上氮的稠合環(huán)可以為芳環(huán)或雜芳環(huán)，其中對每一個C環(huán)的組成環(huán)而言具有選自氧、硫或氮的多至二個雜原子，包括所述氮和其余的碳，其前提為所述環(huán)原子包括所述氮正是季氮，其前提為在飽和環(huán)中，至少二個插入碳原子將環(huán)上氮原子與環(huán)上其它雜原子分隔開來其中C環(huán)的碳和氮環(huán)原子可以用選自下列的取代基取代(C1-C6)烷基、(C2-C6)亞鏈烯基、氰基、硝基、三氟甲基、(C2-C7)烷氧基羰基、(C1-C6)亞烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、氧基、羥基羰基、如Rxa所定義的芳基或如Rxa定義的雜芳基，其前提為被亞烷基、羥基羰基或氧基所取代的環(huán)上原子為碳，進(jìn)一步的前提為被羥基或烷氧基所取代的環(huán)上原子與環(huán)上其它雜原子被至少二個插入碳原子分離開來；(6)R4和R4*獨(dú)立為氫或(C1-C6)烷基或R4和R4*其中之一可以為(C1-C6)羥基烷基；和(7)R5為(CO)NR13R14、(CO)OR15、(CO)SR16、(SO2)NR17R18、(PO)(OR19)(OR20)、(CR22)(OR23)(OR24)、CN或四唑-5-基，其中R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19和R20分別獨(dú)立為氫、可能包括(C3-C8)環(huán)烷基的(C1-C8)烷基(其中與R15的氧或與R16的硫連接的碳沒有超過二級支鏈)、(C2-C6)羥基烷基、氨基烷基(其中烷基為C2-C6，氨基可能被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基所取代)、芳基烷基(其中烷基為C1-C6)、雜芳基烷基(其中烷基為C1-C6)、芳基或雜芳基，R22為氫或OR25，R23、R24和R25為(C1-C6)烷基、苯基、芐基、乙酰基或，當(dāng)R22為氫時，R23和R24的烷基可以結(jié)合成包括1，3-二氧戊環(huán)或1，3-二氧六環(huán)其中所述芳基為苯基或萘基，雜芳基為五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中所述雜芳基為芳香基并含有選自包括氧、硫和氮的雜原子，而剩余環(huán)上原子為碳；其中芳基、雜芳基、雜芳基烷基的芳基或芳基烷基或雜芳基可以被選自包括下列的取代基[優(yōu)選多至三個]所取代氟、氯、溴、硝基、氰基、羥基、三氟甲基、可有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺?；?、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C1-C6)烷基胺、其中每一個烷基為獨(dú)立的C1-C6的二烷基胺、氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷酰基、(C2-C7)鏈烷酰氧基、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、可被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基N-取代的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺酰基、可被多至三個(C1-C6)烷基取代的脒基、或用二個氧與芳環(huán)或雜芳環(huán)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代；和其中R13和R14可與氮一起形成含有選自氧和硫的另外一個雜原子的5-7元環(huán)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，Q環(huán)為4-8元環(huán)，它包括所述環(huán)上氮原子，而其它剩余環(huán)上原子為碳。
優(yōu)選，(A)至少Rxa、Rya和R2a之一被下列取代基所取代氟、氯、溴、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基、(C3-C8)烷基、Rq、RrO-、RsS-，(B)R3為氫、(C1-C6)烷基或苯基或其中烷基為C1-C6的苯基烷基，該苯基也可被Rxa的芳基或雜芳基所定義的相同取代基所取代，或(C)Rxa、Rya和R2a的環(huán)結(jié)構(gòu)，包括其取代基，否則包括至少二個共同含有15-20個環(huán)原子的芳香環(huán)結(jié)構(gòu)。優(yōu)選(C)條下結(jié)構(gòu)的例子包括A45、A53、A56、A57、A60-5、A73-74、A78-81、A86-89、A93-96、A99、A100、A102、A105-106、A108-109、A116、A122-123和A176。優(yōu)選，至少Rxa、Rya和R2a之一被氟、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基或(C3-C8)烷基取代。優(yōu)選Rxa、Rya和R2a被Rq、RrO-或RsS-所取代。優(yōu)選，至少Rxa、Rya和R2a之一的芳基或雜芳基為苯基。優(yōu)選，Ryb和為氧雜、亞甲氧基、硫雜、亞甲硫雜。優(yōu)選，Ryb為氧雜或硫雜。優(yōu)選，R5為(CO)NR13R14、(CO)OR15或(CO)SR16。
在一個實(shí)施方案中，R15為(C2-C6)烷基、(C2-C4)羥基烷基、苯基、其中烷基為C1-C3的苯基烷基或其中烷基為C2-C6和氨基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C3)烷基取代的氨基烷基。其中苯基或苯基烷基的苯基可如上所述被取代。優(yōu)選，n為0。優(yōu)選，R15為氫。優(yōu)選R4為氫、甲基或羥甲基，R4*為氫。優(yōu)選，至少Rxa、Rya和R2a之一為雜芳基，它包括二唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、硫羥基、二嗪基、三嗪基、苯并唑基、苯并二唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、benzoxolyl、benzothiolyl、喹啉基、異喹啉基、苯并二嗪基、苯并三嗪基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吲哚基、異吲哚基或嘧啶基。優(yōu)選，R1為-O-R8或-S-R8*。優(yōu)選，Rxa、Rya和R2a中二個之間的第二個鍵接((2iii)(d)(i.)部分的)為L并滿足下式 其中A和B分別為Rxa和Rya的芳基或雜芳基。優(yōu)選，Rxa-Rxb、Rya-Ryb與X形成 其中Y為以單鍵或雙鍵與R1連接的碳或與R1連接的氮，其中R21(i.)形成連接Rx和Ry的二個芳基或雜芳基的單鍵，(ii.)為(C1-C2)亞烷基或亞鏈烯基，(iii.)為硫或(iv.)為氧，其中Rx和Ry可如前所述被取代。優(yōu)選R21為CH2CH2或CH＝CH。優(yōu)選，Rxa、Rya、R2a、Rq、Rr或Rs的亞烷二氧基取代基如下 或 其中亞烷二氧基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C3)烷基所取代。
在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，Rxa和Rya一起可被多至六個取代基所取代，R2a、Rq、Rr和R3中的每一個可被多至三個取代基所取代，其中Rq、Rr或Rs中每一個的存在都被認(rèn)為是Rxa、Rya和R2a的分別的環(huán)結(jié)構(gòu)的取代基。優(yōu)選，R3的苯基被多至三個取代基所取代。優(yōu)選，本化合物為旋光純對映體(例如，至少約80％ee，優(yōu)選至少約90％ee，更優(yōu)選至少約95％ee)。優(yōu)選，本化合物為含有藥學(xué)上可接受賦形劑的藥用組合物的一部分。優(yōu)選，本組合物中的化合物以有效量存在以用于(1)治療或預(yù)防精神分裂癥，(2)提高治療或預(yù)防癡呆癥，(3)治療或預(yù)防癲癇，(4)治療或預(yù)防痙攣狀態(tài)，(5)治療或預(yù)防肌肉痙攣，(6)治療或預(yù)防疼痛，(7)預(yù)防中風(fēng)后神經(jīng)細(xì)胞死亡，(8)預(yù)防患神經(jīng)變性疾病的動物的神經(jīng)細(xì)胞死亡，(9)治療或預(yù)防心境障礙如抑郁癥，(10)增強(qiáng)記憶或?qū)W習(xí)能力，或(11)治療或預(yù)防學(xué)習(xí)障礙。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了下述方法(1)治療或預(yù)防精神分裂癥，包括給予精神分裂癥患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(2)治療或預(yù)防癡呆癥，包括給予癡呆癥患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(3)治療或預(yù)防癲癇，包括給予癲癇患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(4)治療或預(yù)防痙攣狀態(tài)，包括給予痙攣狀態(tài)患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(5)治療或預(yù)防肌肉痙攣，包括給予肌肉痙攣患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(6)治療或預(yù)防疼痛，包括給予疼痛患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(7)預(yù)防中風(fēng)后神經(jīng)細(xì)胞死亡，包括給予神經(jīng)細(xì)胞死亡患者預(yù)防有效量的化合物，(8)預(yù)防患神經(jīng)變性疾病的動物的神經(jīng)細(xì)胞死亡，(9)治療或預(yù)防心境障礙如抑郁癥，(10)增強(qiáng)記憶或?qū)W習(xí)能力，或(11)治療或預(yù)防學(xué)習(xí)障礙，包括給予所述治療、預(yù)防或增強(qiáng)有效量的式XI化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中其取代基如上所定義，但R25不同于R1，在于它可以為直鏈C4脂肪族基團(tuán)。優(yōu)選，治療或預(yù)防的痙攣狀態(tài)與癲癇、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷、多發(fā)性硬化癥、脊髓創(chuàng)傷或肌張力障礙有關(guān)。優(yōu)選，治療或預(yù)防的神經(jīng)變性性疾病為Alzheimer氏疾病、多梗塞性癡呆、AIDS癡呆、Parkinson氏疾病、Huntington氏疾病、肌萎縮性側(cè)索硬化或中風(fēng)或頭部創(chuàng)傷(如可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞死亡)。
在另外的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供合成本發(fā)明化合物的方法，包括A)使下式之一化合物，1) 其中L1為親核取代離去基團(tuán)，與下式化合物反應(yīng)
2) B)使下式化合物1) 與下式化合物反應(yīng)2) 其中L2為親核取代離去基團(tuán)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法，包括A)將下式化合物1) 用下式化合物還原烷基化，
2) 其中R1*與R1的不同之處在于它沒有作為所述醛羰基部分的碳，或B)將下式化合物1) 用下式化合物還原烷基化2) 在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法，它包括將RdNH2用下式化合物還原烷基化 其中Rd和Rc獨(dú)立的與Rx的定義的相同，并且其中R27與R1定義相同，但它不包括氮、氧或硫并且也不包括任何與上述羰基共軛的雙鍵。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法，它包括使RfOH或Rf*SH與下式化合物反應(yīng) 分別形成醚或硫醚，其中Rf或Rf*獨(dú)立的與Rx所定義的相同，其中R27與R1定義相同，但它不包括氮、氧或硫并且也不包括任何與上述L5-取代碳相結(jié)合的原子上的雙鍵，其中L5為親核取代離去基團(tuán)。
權(quán)利要求28的方法，還包括通過下列步驟合成下式化合物 將下式的羥基 用其它親核取代離去基團(tuán)取代。優(yōu)選，本方法包括使下式化合物 在膦化合物存在下與偶氮二羧酸酯反應(yīng)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法，它包括使ReM與下式化合物反應(yīng) 形成下式化合物 其中，Re獨(dú)立的與Rx的定義相同，其中M為含金屬取代基，所以ReM為有機(jī)金屬試劑。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了合成本發(fā)明化合物的方法，它包括使下式化合物脫水 形成下式化合物 其中C*(叔碳用相鄰的“*”標(biāo)示)與相鄰的碳形成雙鍵，R28*和R28與R1定義相同，但是R28*和R28不包括雜原子。
在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明的化合物的合成方法，該方法包括使下式的化合物還原 其中C*與相鄰的碳形成雙鍵，Rc獨(dú)立與Rx的定義相同，形成下式的化合物 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供可以用于合成本發(fā)明化合物的化合物的合成方法，該方法包括用下式的化合物 及用下式的化合物 其中，L3為親核取代離去基團(tuán)，來合成下式的化合物 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物的合成方法，該方法包括使下式的化合物 與Ar-Q反應(yīng)，其中Ar為被一個吸電子基團(tuán)取代的芳基或被吸電子基團(tuán)取代的雜芳基，其中Q為鹵(優(yōu)選為氟或氯)，形成 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供可以用于合成本發(fā)明化合物的化合物的合成方法，該方法包括通過使下式的化合物 與RdNHSO2Ar反應(yīng)合成式X化合物 該方法可以進(jìn)一步包括將式X化合物轉(zhuǎn)化為 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供可以用于合成本發(fā)明化合物的化合物的合成方法，該方法包括使下式的化合物 與下式的化合物反應(yīng) 形成下式的化合物 在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供可以用于合成本發(fā)明化合物的化合物的合成方法，該方法包括合成下式的化合物 所述合成包括下式化合物的酮的還原 附圖簡述

圖1描述可以用于合成本發(fā)明化合物的數(shù)種反應(yīng)。
圖2描述制備本發(fā)明化合物所用的代表性合成反應(yīng)。
圖3說明另外的制備本發(fā)明化合物所用的代表性合成反應(yīng)。
圖4說明另外的制備本發(fā)明化合物所用的代表性合成反應(yīng)。
定義下列術(shù)語具有下面定義的意義·賦形劑賦形劑為適合胃腸外、經(jīng)腸(如口服或吸入)或局部使用的藥學(xué)上可接受的有機(jī)或無機(jī)載體物質(zhì)，它們不與所述的活性組合物起不利的反應(yīng)。適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的載體包括(但不限于)水、鹽溶液、醇、阿拉伯膠、芐醇、明膠、碳水化合物如乳糖、直鏈淀粉或淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、硅酸、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。
·有效量臨床醫(yī)生認(rèn)為“有效量”的意義包括達(dá)到下列作用的有效量(1)減少、改善或消除一種或多種待治療疾病的癥狀，(2)減少與待治療疾病的治療相關(guān)的藥理變化，或(3)預(yù)防或減少疾病的發(fā)生頻率。
·神經(jīng)元細(xì)胞死亡的預(yù)防如果在給予本發(fā)明的化合物后預(yù)期產(chǎn)生細(xì)胞死亡量的減少，那么神經(jīng)元細(xì)胞死亡被“預(yù)防”。
·氧代取代所謂作為“取代基”的氧代指“＝O”取代。
詳述盡管本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以認(rèn)識到另外的流程，但是本發(fā)明的化合物一般可以根據(jù)下列合成流程之一制備。
反應(yīng)1
在反應(yīng)1或反應(yīng)2中，L1和L2為良好的親核取代離去基團(tuán)，例如鹵化物，特別是溴化物、甲苯磺酸酯、溴苯磺酸酯(對-溴苯磺酸酯)等。該反應(yīng)優(yōu)選在堿例如碳酸鉀或叔胺如二異丙基乙胺存在下進(jìn)行。當(dāng)所述離去基團(tuán)為鹵化物時，該反應(yīng)優(yōu)選在碘化物鹽例如碘化鉀存在下進(jìn)行。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑包括例如甲醇、二氧六環(huán)、乙腈或二甲基甲酰胺。反應(yīng)1優(yōu)選在約50-約100℃溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。反應(yīng)2優(yōu)選在約15-約40℃溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。避免更高的溫度可以幫助減少另外的烷基化產(chǎn)物的形成。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以認(rèn)識到反應(yīng)2使用無環(huán)C的化合物進(jìn)行。
反應(yīng)3 反應(yīng)4 在反應(yīng)3中，R1*符合R1的定義，除了不存在在起始原料中作為醛基團(tuán)一部分的碳。通過幾個已知的方法可完成反應(yīng)3或反應(yīng)4的還原烷基化(例如，見“Reductive Alkylation，”W.S.Emerson in OrganicReactions，Vol.4，John Wiley&Sons，1948，p.174 et seq.)，它包括在催化劑如鈀炭存在下與氫反應(yīng)，當(dāng)易于催化氫化的基團(tuán)存在時，與氰基硼氫化鈉反應(yīng)或與三乙酰氧基硼氫化鈉反應(yīng)。可以認(rèn)識到在該反應(yīng)中形成中間體Schiff氏堿，將其還原形成鍵?？梢苑蛛x中間體Schiff氏堿，然后在獨(dú)立的反應(yīng)中還原。溶劑選擇可以隨各種因素變化，例如原料的溶解性、溶劑有利于脫水反應(yīng)形成Schiff氏堿的程度以及溶劑在還原過程中的適用性。用催化氫化還原Schiff氏堿的適合的溶劑包括乙醇。用硼氫化物還原Schiff氏堿的適合的溶劑包括醇性溶劑，例如甲醇或乙醇。在某些情況下，在促進(jìn)形成被還原的Schiff氏堿的脫水反應(yīng)的過程中，可以使用干燥過程。此類干燥過程包括在選擇的條件下回流去除作為共沸物的水，或使用分子篩或其它的干燥試劑。適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)溫度包括從約20℃至所使用的溶劑的回流溫度。
在反應(yīng)5中，如圖1所示，Rc獨(dú)立與Rx定義相同。如用下列的反應(yīng)13(與反應(yīng)1相似)的方法可以合成原料I反應(yīng)13 其中R27與R1定義相同，但是它不包括氮、氧或硫，不包括與上述的羰基共軛的任何雙鍵，且其中L3為良好的親核取代離去基團(tuán)如鹵化物，特別是溴化物、甲苯磺酸酯、溴代苯磺酸酯(對-溴代苯磺酸酯)等。在如圖1所示的反應(yīng)5中，在進(jìn)行如反應(yīng)3和反應(yīng)4所述還原烷基化的條件下，使Rd-NH2與I反應(yīng)得到II。Rd獨(dú)立與Rx定義相同?；蛘?，在反應(yīng)1所述的條件下，通過反應(yīng)18使Rd-NH2與VIII反應(yīng)可以合成II。
在如圖1所示的反應(yīng)6中，Re獨(dú)立與Rx定義相同。在反應(yīng)6中，使I與有機(jī)金屬試劑例如芳基鋰或芳基或芳烷基Grignard試劑反應(yīng)形成III，如在Cary和Sundberg的Advanced Organic Chemistry(Part 2，Plenum，New York，1977，第170-180頁)的第5.1.2節(jié)中所述并在此引用作為參考。在下面將就化合物A32的合成對該反應(yīng)進(jìn)行更詳細(xì)描述(實(shí)施例5A的步驟2)。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以理解在某些其中R5包括酯的情況下，可以使有機(jī)金屬試劑與所述酯基團(tuán)反應(yīng)，在所述產(chǎn)物產(chǎn)率太低的情況下，可以改變?nèi)軇⒂袡C(jī)金屬試劑或所述酯取代基。
在如圖1所示的反應(yīng)7中，使III經(jīng)歷適于脫水的條件形成IV的雙鍵。此類條件為如H.Weiland(Ber.45484 et seq.(1912))所述的條件，其中將III與乙酸酐一起回流。例如，所述雙鍵與R27的相鄰的碳原子形成。雙鍵一般在這樣的定向的條件下形成，其中Rc和Re為芳基或雜芳基，R27的相鄰的碳為飽和的且不完全被取代，但是根據(jù)Rc、Re和R27的組成其它的定向也是可能的。
在如圖1所述的反應(yīng)8中，例如用還原碳-碳雙鍵的任何已知的方法，例如在適當(dāng)?shù)臍浠呋瘎┐嬖谙碌拇呋瘹浠?，可以使IV還原形成V。該方法的實(shí)例在以下化合物A4中描述(實(shí)施例10)。
在如圖1所示的反應(yīng)9中，如在?；呋瘎├?-二甲基氨基吡啶存在下，用乙酸酐使III酰化。在該情況下，R3不能為氫，盡管在反應(yīng)9后，通過用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)掩蔽氮，在該位上可以恢復(fù)氫取代基。
在如圖1所示的反應(yīng)10中，I的酮部分可以被還原，例如用選擇性還原酮的多種已知方法之一，例如與三-叔-丁氧基氫化鋁鋰。該方法的實(shí)例在下面的化合物A31的制備中被描述(實(shí)施例8A步驟1)。
在如圖1所示的反應(yīng)11中，通過使VII與例如亞硫酰氯或亞硫酰溴反應(yīng)，可以使VII的羥基被離去基團(tuán)L5取代，其中所述離去基團(tuán)為例如氯或溴。該方法的實(shí)例在下面的化合物A31的制備中被描述(實(shí)施例8A步驟2)。
在如圖1所示的反應(yīng)12中，Rf獨(dú)立地與Rx定義相同。在堿例如碳酸鉀或氫化鈉存在下，使VIII與RfOH反應(yīng)。或者，通過使VIII與RfOH反應(yīng)可以合成IX的含硫類似物。該方法的實(shí)例在下面的化合物A31的制備中被描述(實(shí)施例8A步驟3)。在單一反應(yīng)釜中，如通過Mitzunobu反應(yīng)(如在實(shí)施例8C步驟1和8D步驟2中所述)，可以進(jìn)行反應(yīng)11和12的轉(zhuǎn)化?；蛘撸梢允筕II直接與芳基鹵化物或氯化物，優(yōu)選芳基氟或芳基氯反應(yīng)形成IX，如美國專利5166437和5362886所述。可以理解在該反應(yīng)中使用的芳基鹵化物一般具有利于該反應(yīng)的吸電子基團(tuán)，例如在對位的三氟甲基或硝基。1-氟萘也適合該反應(yīng)，因?yàn)榕c氟取代環(huán)稠合的環(huán)為吸電子基團(tuán)。
在反應(yīng)19中，如實(shí)施例8C步驟1中所述，使VII與RdNHSO2Ar反應(yīng)產(chǎn)生X。在反應(yīng)20中，如實(shí)施例8C步驟2中所述，將X轉(zhuǎn)化為II。
可以使用多種其它的熟知的合成路線。例如，通過相應(yīng)的酯的水解可以形成酸。通過伯、仲或叔胺的烷基化可以形成胺衍生物。多種含有雙鍵的化合物可以被還原形成相應(yīng)的單鍵。通過已知的方法，一般可以由相應(yīng)叔氮形成本發(fā)明的N-氧化物化合物。
在某些情況下，可以修改上述的化學(xué)方法，例如通過使用保護(hù)基團(tuán)以阻止因?yàn)榛钚曰鶊F(tuán)如插入雜環(huán)或作為取代基連接的活性基團(tuán)的副反應(yīng)。
也可以通過在上述常規(guī)的化學(xué)方法中引入固相合成技術(shù)制備本發(fā)明的化合物。例如，R13、R15、R16、R17和R20為代表官能化的樹脂或與官能化的樹脂連接的適當(dāng)選擇的連接物的殘基(不是氫)。所述連接物和由R5代表的官能基團(tuán)在上述反應(yīng)使用的條件下應(yīng)該是穩(wěn)定的。然后可以從所述樹脂或連接物上裂解其中R13、R15、R16、R17和R20為氫的本發(fā)明的化合物，而留下完整的分子。例如，Zuckermann等(J.Am.Chem.Soc.，114，10646-10647，(1992))和Spellmeyer等(WO95/04072)描述使用自動合成儀進(jìn)行的固相合成類胨[寡(N-取代的甘氨酸)]。在相似的條件下，在N，N’-二異丙基碳二亞胺存在下，用溴代乙酸進(jìn)行Rink酰胺聚苯乙烯樹脂的酰化反應(yīng)，接著用N-取代的胺置換溴(反應(yīng)2)，然后裂解可以得到N-取代的甘氨酰胺(R13和R14為氫)。
用在此所述的反應(yīng)，包括酯的水解、胺的烷基化或氫化反應(yīng)，合成本發(fā)明的下列化合物 化合物Al2為用反應(yīng)I合成A9的雙烷基化副產(chǎn)物。
可以制備插入＝N-O-的本發(fā)明的化合物，例如可以通過用O-(2-鹵代乙基)鏈烷酮肟(可以通過鏈烷酮與羥胺縮合制備)使胺(例如肌氨酸或甘氨酸)烷基化，接著進(jìn)行O-烷基化(例如用1，2-二鹵代乙烷)制備。
可以認(rèn)識到在此所述的這些化合物的許多鹽的形式是可以得到的，并且適合用于本發(fā)明中或本發(fā)明化合物的合成中。本發(fā)明認(rèn)為在存在立體異構(gòu)體的情況下，一種異構(gòu)體可能比另一種異構(gòu)體更有活性，在此情況下需要分離特定的異構(gòu)體形式。當(dāng)然，本發(fā)明包括這兩種特定的立體異構(gòu)體和外消旋混合物。如在此所述，使用化學(xué)方法，也可以使用例如商業(yè)可得到的、旋光純的原料(或用對映選擇反應(yīng)制備)合成本發(fā)明化合物的旋光純的形式?？梢哉J(rèn)識到此類旋光純的化合物包括在本發(fā)明中。對映體過量(“ee”)可以用純化技術(shù)例如結(jié)晶或在手性載體上的層析來提高。對映體過量也可以用多種分析技術(shù)包括NMR、旋光度測定和適當(dāng)?shù)膶游黾夹g(shù)來定量。
另外，相關(guān)的化合物在兩篇與其母申請同時遞交的美國專利申請中描述，該申請為美國專利序列號08/655912(Docket No.317743-106，Ognyanov等)、美國專利序列號08/655847(Docket No.317743-107，Ognyanov等)、美國專利序列號08/807682(PHARMACEUTICAL FORTREATMENT OF NEUROPSYCHIATRIC AND NEUROLOGICALDISORDERS，Docket No.317743-106A，Ognyanov等)和美國專利序列號08/807681(PHARMACEUTICAL FOR TREATING OFNEUROLOGICAL AND NEUROPSYCYCHIATRIC DISORDERS，DocketNo.317743-107A，Ognyanov等)。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，至少下列一種情況適用如果R15為氫，R1為亞丙基，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)Rx和Ry不是對-氟代苯基，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；如果R15為氫，R1為亞乙基或X-R1為亞丙-1-烯基，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-、(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；如果R5為C(O)NH2，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，(8)R1不是亞乙基，或(9)R3和R4形成環(huán)Q；如果R13為氫，R14為(3，4-二氫-2H-1-苯并吡喃-4-基)亞甲基，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是乙基，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；和如果R2為苯基、對-甲基苯基或?qū)?甲氧基苯基，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)Rx和Ry的芳基不被對-甲基苯基或?qū)?甲氧基苯基取代，(2)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(3)Rx和Ry之一包括雜芳基，(4)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(5)R1不是氨基亞乙基、OR8或SR8*，(6)n為1，或(7)R3和R4形成環(huán)Q。
在所述方法的一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，特別是在治療或預(yù)防癲癇或痙攣狀態(tài)或增強(qiáng)記憶時，該化合物與上述(f)段相符。
甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因和它們各自的基因產(chǎn)物負(fù)責(zé)甘氨酸由突觸間隙重?cái)z取進(jìn)入前突觸神經(jīng)末梢或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，因此終止甘氨酸的作用。神經(jīng)性疾病或與甘氨酸受體活性的不適當(dāng)?shù)目刂朴嘘P(guān)的紊亂或可以用調(diào)節(jié)甘氨酸受體活性的治療藥物治療的疾病包括痙攣狀態(tài)(Becker，F(xiàn)ASEB Journal，4，2767-2774(1990))和疼痛的感知(Yaksh，Pain，37，111-123(1989))。另外，甘氨酸可以與N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體相互作用，而該受體與學(xué)習(xí)和記憶疾病和某些臨床疾病例如癲癇、Alzheimer氏病以及其它與識別相關(guān)的疾病和精神分裂癥有關(guān)(見Rison和Stanton，Neurosci.Biobehav.Rev.，19，533-552(1995)；Danysz等，Behavioral Pharmacol.，6,455-474(1995))。
抑制GlyT-1介導(dǎo)的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物可增加NMDA受體上的甘氨酸濃度，在其它的位置中，這些受體位于前腦。這種濃度的增加可以提高NMDA受體的活性，因此可以減輕精神分裂癥并增強(qiáng)認(rèn)識功能。另外，與NMDA受體的甘氨酸受體組分直接相互作用的化合物分別與GlyT-1活性的抑制或增強(qiáng)引起的細(xì)胞外甘氨酸的增加或降低的可利用性具有相同或相似的作用(見例如Pitkanen等，Eur.J.Pharmacol.，253，125-129(1994)；Thiels等.，Neuroscience，46，501-509(1992)；Kreschmer和Schmidt，J.Neurosci.，16，1561-1569(1996))。抑制GlyT-2介導(dǎo)的甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物可以增加主要位于腦干和脊髓的受體上的甘氨酸的濃度，其中甘氨酸作為突觸傳遞的抑制劑。這些化合物對癲癇、疼痛和痙攣狀態(tài)、肌痙攣和其它的此類疾病有效(如見Becker，F(xiàn)ASEB J.，4，2767-2774(1990)和Yaksh，Pain，37，111-123(1989))。
本發(fā)明的化合物例如可以經(jīng)下列方式給藥經(jīng)口、舌下、直腸、鼻內(nèi)、陰道、局部(包括使用貼劑或其它的透皮傳遞裝置)、經(jīng)肺途徑的氣霧劑或胃腸外包括例如肌內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、動脈內(nèi)、靜脈內(nèi)或鞘內(nèi)?？梢酝ㄟ^階段性或連續(xù)釋放泵的方式給藥。本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)給藥或與標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)實(shí)踐中的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑混合給藥。經(jīng)口方式給藥時，本發(fā)明的化合物可以以片劑、膠囊劑、錠劑、咀嚼膠、糖錠、粉劑、糖漿、酏劑、水溶液以及懸浮液等形式使用。在為片劑的情況下，使用的載體包括乳糖、檸檬酸鈉和磷酸鹽。各種崩解劑例如淀粉以及潤滑劑例如硬脂酸鎂和滑石粉常常用于片劑中。若為口服給藥的膠囊劑形式時，有用的稀釋劑為乳糖和高分子量聚乙二醇。如果需要，可以加入部分甜味劑和/或矯味劑。胃腸外給藥時，通常制備本發(fā)明化合物的無菌溶液，可以對這些溶液的pH進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整和緩沖。靜脈使用時，應(yīng)該控制溶質(zhì)的總濃度以使所述制劑等滲。若經(jīng)眼給藥時，可以用本領(lǐng)域已知的眼傳遞系統(tǒng)例如涂藥器或眼點(diǎn)滴器傳遞軟膏或可滴用的液體。這些組合物可以包括粘性模擬物質(zhì)(mucomimetics)如透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、羥丙基甲基纖維素或聚乙烯醇，防腐劑如山梨酸、EDTA或芐基氯化鉻，以及常用量的稀釋劑和/或載體。對于肺部給藥，應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)南♂寗┖?或載體以便于形成氣溶膠。
本發(fā)明化合物的栓劑形式可用于陰道、尿道和直腸給藥。這樣的栓劑通常由室溫時為固態(tài)但在體溫下可融化的物質(zhì)的混合物所構(gòu)成。通常用于構(gòu)成此類載體的物質(zhì)包括可可油、含甘油明膠、氫化植物油、不同分子量的聚乙烯乙二醇與聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。關(guān)于栓劑劑型的進(jìn)一步的討論可參見Remington’s Pharmaceutical Science，16th Ed.，Mack Publishing，Easton，PA，1980，pp.1530-1533。相似的凝膠或乳油可用于陰道、尿道和直腸給藥。
對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，大量的給藥載體將是熟知的，包括但不限于緩釋制劑、質(zhì)脂體制劑和聚合基質(zhì)。
本發(fā)明所使用的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的例子包括那些衍生自無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸的鹽以及衍生自有機(jī)酸如酒石酸、乙酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、苯甲酸、乙醇酸、葡糖酸、琥珀酸、對-甲苯磺酸和芳香基磺酸的鹽。本發(fā)明所使用的藥學(xué)上可接受的堿加成鹽的例子包括那些衍生自非毒性金屬如鈉或鉀的鹽、銨鹽和有機(jī)胺鹽如三乙胺鹽。大量的適當(dāng)?shù)纳鲜鳆}是普通技術(shù)人員所熟知的。
醫(yī)師和其它健康專家可以根據(jù)患者的體重、年齡和身體狀況選擇適當(dāng)?shù)膭┝亢椭委煼桨?。劑量一般選擇為維持本發(fā)明化合物的血清水平范圍在約0.01μg/cc到約1000μg/cc之間，優(yōu)選在約0.1μg/cc到約100μg/cc之間。對于胃腸外給藥，給藥可選擇的優(yōu)選量為從約0.001mg/kg到約10mg/kg(可選擇，從約0.01mg/kg到約10mg/kg)，更優(yōu)選從約0.01mg/kg到約1mg/kg(從約0.1mg/kg到約1mg/kg)。對于口服給藥，可選擇的優(yōu)選給藥量為從約0.001mg/kg到約10mg/kg(從約0.1mg/kg到約10mg/kg)，更優(yōu)選從約0.01mg/kg到約1mg/kg(從約0.1mg/kg到約1mg/kg)。對于栓劑形式給藥，可選擇的優(yōu)選給藥量為從約0.1mg/kg到約10mg/kg，更優(yōu)選從約0.1mg/kg到約1mg/kg。
在用于抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)活性測定時，已經(jīng)轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞(優(yōu)選為得自鶉成纖維細(xì)胞的QT-6細(xì)胞)以表達(dá)三種已知的人GlyT-1的變異體，即GlyT-1a、GlyT-1b或GlyT-1c之一或人GlyT-2。這些GlyT-1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的序列由Kim等述于Molec.Pharm.45608-617，1994，除編碼GlyT-1a N-末端的序列僅是由相應(yīng)的大鼠序列推出的外。還沒有證實(shí)編碼N-末端蛋白序列與Kim等推出的相符。人GlyT-2的序列由Albert等述于美國專利申請08/700013(1996年8月20日遞交，在此引入作參考)中。適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體包括pRc/CMV(Invitrogen)、Zap表達(dá)載體(Stratagene Cloning Systems，LaJolla，CA；此后稱“Stratagene”)、pBk/CMV或pBk/RSV載體(Stratagene)、BluescriptII SK+/-Phagemid載體(Stratagene)、LacSwitch(Stratagene)、pMAM和pMAM neo(Clontech)等。適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體能夠培養(yǎng)在適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞，優(yōu)選非-哺乳動物宿主細(xì)胞(可以為真核細(xì)胞、真菌或原核細(xì)胞)中的GlyT DNA的表達(dá)。此類優(yōu)選的宿主細(xì)胞包括兩棲類、鳥類、真菌類、昆蟲類和節(jié)肢動物細(xì)胞。
如上所討論，本發(fā)明的化合物具有多種藥理作用。這些化合物的相對效能可以用多種方法評價，這些方法包括·比較通過GlyT-1和GlyT-2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的活性。該試驗(yàn)可以鑒定化合物(a)可以更有效地對抗GlyT-1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，因此在治療或預(yù)防精神分裂癥、增強(qiáng)認(rèn)識、增加記憶中更有用或(b)更有效對抗GlyT-2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，因此在治療或預(yù)防癲癇、疼痛、痙攣狀態(tài)或肌痙攣時更有用。
·檢測與NMDA受體的結(jié)合。該試驗(yàn)確定在該位點(diǎn)是否有充分的結(jié)合、是拮抗活性還是激動活性以保證該結(jié)合的藥理作用的進(jìn)一步檢測。
·檢測這些化合物增加或減小初級神經(jīng)元組織培養(yǎng)物中鈣通量的活性。增加鈣通量的受試化合物或者(a)對NMDA受體具有極小或無拮抗活性，因此不應(yīng)該通過GlyT-1轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制影響甘氨酸活性的效力，或者(b)如果與用作比較的GlyT-1抑制劑相比觀察到增加顯著，并與NMDA受體有極小的直接作用，那么該化合物為受體激動劑。在為上述之一的情況下，該試驗(yàn)證實(shí)具有治療或預(yù)防精神分裂癥、增強(qiáng)認(rèn)識或增加記憶的活性。相反，降低鈣通量的受試化合物具有多余的作用，其中受體的拮抗劑活性超過化合物通過抑制甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)而增加甘氨酸活性的活性。在這種情況下，該試驗(yàn)證實(shí)具有下列活性即限制或預(yù)防中風(fēng)或其它局部缺血-誘導(dǎo)的疾病后產(chǎn)生的細(xì)胞破壞和細(xì)胞死亡或限制或與預(yù)防神經(jīng)變性性疾病有關(guān)的細(xì)胞破壞。
在此所述的治療或預(yù)防所有動物的方法優(yōu)選適用于哺乳動物，最優(yōu)選人。
下列實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但是不在任何方面限制其范圍。
實(shí)施例1 N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸乙酯(化合物A26)的合成于氬氣環(huán)境，攪拌下，將5.95g(20.7mmol)4-溴代-1，1-二苯基-1-丁烯(根據(jù)F.A.Ali等所述，J.Med.Chem.，28653-660，1985制備)、4.71g(33.7mmol)甘氨酸乙酯鹽酸鹽(Aldrich，Milwaukee，WI)、11.62g(84mmol)碳酸鉀和1.06g(6.38mmol)碘化鉀的50ml乙腈混合液回流7小時。過濾該反應(yīng)混合物，蒸除溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到3.70g(產(chǎn)率58％)的N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸乙酯(化合物A26)，為油狀物。產(chǎn)物的NMR為1HNMR(CDCl3，300MHz)7.60-7.00(m，10H)，6.09(t，1H)，4.16(q，2H)，3.35(s，2H)，2.71(t，2H)，2.32(dt，2H)，1.25(t，3H)，13CNMR(CDCl3，75MHz)172.29，143.25，142.37，139.82，129.72，128.13，128.04，127.97，127.13，126.92，126.88，126.68，60.56，50.73，49.32，30.33，14.14。
實(shí)施例2根據(jù)反應(yīng)1的另外的合成方法如下用反應(yīng)1合成另外的化合物化合物試劑氨基酸或前體溶劑收率A11 B X 27％A21 C X 35％A77 E X 9％A94 E X 47％A11 1 A X 70％A12 4 E X 7％A14 2 D X 15％A18 6 E X 50％A23 5 E X 26％A24 3 D Y 20％A43 8 F X 12％A52 9 F X 28％A57 10 F X 31％A67 11 F X 10％A71 12 E X 28％A75 13 F X 73％A77 14 F X 36％A85 15 F X 86％A87 16 F X 59％A90 17 E X 16％A95 17 F X 65％A96 17 E X 50％A104 15 E X 62％A106 18 F X 65％A121 19 E X 3％A12219EX40％A12319FX72％A13020EX6％A13221FX90％A13421EX67％A1706 FX72％A48 22FX87％A50 23FX81％A53 24FX76％A59 25FX77％A61 26FX91％A63 27FX91％A70 28FX89％A73 29FX86％A74 30FX76％A78 31FX49％A80 32FX66％A82 33FX38％A83 33EX25％A88 34FX55％A89 35FX75％A99 36FX56％A10037FX67％A11138FX34％A11739FX58％A11840FX89％A12041FX62％A12542FX46％A12643EX57％A12744EX5％A12844EX53％A12944FX66％A13845FX48％A14046FX69％A14147FX51％A14248FX67％A14349FX61％A14550FX98％A15551FX70％A15652FX65％A15853FX59％A15954FX85％A16055FX87％A17156FX88％A17357FX81％A17758FX84％A17858FX60％A17959FX68％A18024GX85％試劑1)4-溴代-1，1-二苯基-1-丁烯(根據(jù)F.A.Ali等，J.Med.Chem.，28653-660，1985所述制備)；2)1，1’-(4-氯代亞丁基)雙(4-氟代苯)(Acros Organics，Pittsburgh，PA)；3)二苯甲基2-溴代乙基醚(根據(jù)M.R.Pavia等，J.Med.Chem.354238-4248，1992所述制備)；4)9-芴基乙醇對-甲苯硫酸酯[由LiAlH4還原9-芴乙酸甲酯(Aldrich)為2-(9-芴基)乙醇，接著甲苯磺?；苽鋆；5)4-溴代-2，2-二苯基丁腈(Aldrich)；6)3-雙(4-氟代苯基)丙醇對-甲苯硫酸酯[由用氯代雙(4-氟代苯基)甲烷(Aldrich)使丙二酸二乙酯(Aldrich)烷基化，接著水解并脫羧基，用LiAlH4還原一羧酸，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；7)10-(3-溴代-2-羥丙基)酚噻嗪[基本根據(jù)英國專利800635所述制備]；8)3-三(4-氟代苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由用4，4’，4”-三氟三苯甲基溴(TCI America，Portland，OR)使丙二酸二乙酯(Aldrich)烷基化，接著水解并脫羧基，用LiAlH4還原一羧酸，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；9)3-環(huán)己基-3-苯基丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦?；宜狨サ膬?nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與環(huán)己基苯基酮(Aldrich)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺酰化制備]；10)3-三(4-甲氧基苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由用4，4’，4”-三甲氧基三苯甲基氯(Aldrich)使丙二酸二乙酯(Aldrich)烷基化，接著水解并脫羧基，用LiAlH4還原一羧酸，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；11)3-雙(3-氟代苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦?；宜狨サ膬?nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與3，3’-二氟代二苯酮(Aldrich)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；12)3，5-二苯基戊醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦酰基乙酸酯的內(nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與3-苯基苯基乙基酮(Pfaltz & Bauer ChemicalsCatalog，Waterbury，CT)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；13)3-雙(4-苯氧基苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦酰基乙酸酯的內(nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與4，4’-二苯氧基二苯酮(Lancaster，Windham，NH)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；14)3-雙(4-聯(lián)苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦?；宜狨サ膬?nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與4-苯甲?；?lián)苯(Aldrich)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；15)3-(4-叔丁基苯基-3-苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦?；宜狨サ膬?nèi)鎓鈉鹽與4-叔丁基二苯酮(Aldrich)進(jìn)行Horner-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；16)3，3，3-三(4-氯代苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由LiAlH4還原3，3，3-三(4-氯代丙酸)(Aldrich)，接著使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；17)3-(2-萘基-3-苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦酰基乙酸酯的內(nèi)鎓鈉鹽與2-苯甲?；?Aldrich)進(jìn)行Homer-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；18)3，3，3-三苯基丙醇對甲苯磺酸酯[由LiAlH4還原3，3，3-三苯基丙酸(Aldrich)，接著使形成的醇甲苯磺酰化制備]；19)3-(4-苯基苯基)-3-苯基丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦酰基乙酸酯的內(nèi)鎓鈉鹽與4-苯甲?；?lián)苯(Aldrich)進(jìn)行Homer-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；20)1，2-二苯基丁-1，4-二醇對甲苯磺酸酯[用溴代乙酸乙酯(Aldrich)使脫氧苯偶姻C-烷基化，接著用LiAlH4還原中間體β-酮酯，使形成的二醇甲苯磺?；苽鋆；21)3-苯基-3-(4-三氟甲基苯基)丙醇對甲苯磺酸酯[由使三乙基膦?；宜狨サ膬?nèi)鎓鈉鹽與4-(三氟甲基)二苯酮(Aldrich)進(jìn)行Homer-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和酯中間體的催化氫化，LiAlH4還原，使形成的醇甲苯磺?；苽鋆；22)3-氯-1-(4-叔丁基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[由與U.S.專利5281624相似的方法，通過用1.0M硼烷-四氫呋喃配合物(“BTC”，Aldrich)使3-氯-4’-氟代苯基乙基酮(Aldrich)還原，接著用4-叔丁基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(偶氮二羧酸二乙酯(“DEAD”)、Ph3P，見實(shí)施例8C步驟1)制備]；23)3-氯-1-(2-甲基-5-吡啶基氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮(Aldrich)還原，接著用5-羥基-2-甲基吡啶(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；24)3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-苯基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；25)3-氯-1-(4-叔辛基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-叔丁基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；26)(R)-(+)-3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用4-苯基苯酚(Aldrich)使(R)-(+)-3-氯-1-苯基-1-丙醇(Aldrich)進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)(如見U.S.專利5068432)(在圖3反應(yīng)27中說明)制備]；制備化合物A61，其[α]D25為+54.9°(c5.28，CHCl3)；27)(S)-(-)-3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用4-苯基苯酚(見美國專利5068432)使(S)-(-)-3-氯-1-苯基-1-丙醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；28)3-氯-1-(4-叔丁基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-叔丁基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；29)3-氯-1-{4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯氧基}-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-[4-三氟甲基)苯氧基]苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；30)3-氯-1-[4-(苯氧基)苯氧基]-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-苯氧基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；31)3-氯-1-[4-(4-溴代苯基)苯氧基]-1-(4-氟代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-(4-溴代苯基)苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；32)3-氯-1-[4-(4-氰基苯基)苯氧基]-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4’-羥基-4-聯(lián)苯基腈(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；33)3-氯-1-(3-三氟甲基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-三氟甲基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；34)3-氯-1-(2-萘基氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用2-萘酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；35)3-氯-1-(1-萘基氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用1-萘酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；36)3-氯-1-(4-甲基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用對-甲酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；37)3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-苯基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；38)3-氯-1-(4-氨基磺?；窖趸?-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-羥基苯磺酰胺)，(TCI America，Portland，OR)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；39)3-氯-1-(4-硝基苯氧基)-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-硝基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；40)3-氯-1-(4-硝基-3-三氟甲基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-硝基-3-三氟甲基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；41)3-氯-1-(4-氰基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-氰基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；42)3-氯-1-苯氧基-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；43)3-氯-1-(4-三氟甲基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-三氟甲基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；44)3-氯-1-[(4-三氟甲氧基)苯氧基]-1-苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-(三氟甲氧基)苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；45)3-氯-1-(4-三氟甲基苯氧基)-1-(2，4-二甲氧基)苯基丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代-2’，4’-二甲氧基苯基乙基酮還原(Maybridge Chemical Co.Ltd.，Comwall，UK)，接著用4-三氟甲基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；46)3-氯-1-(3，4-亞甲二氧基苯氧基)-1-(4-氯代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3，4’-二氯代苯基乙基酮(Aldrich)還原，接著用芝麻酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；47)3-氯-1-苯氧基-1-(4-溴代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使4-溴代-β-氯代苯基乙基酮(Lancaster)還原，接著用苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；48)3-氯-1-(4-三氟甲基苯氧基)-1-(4-溴代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使4-溴代-β-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-三氟甲基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；49)3-氯-1-(4-甲氧基苯氧基)-1-(4-氯代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3，4’-二氯代苯基乙基酮還原，接著用4-甲氧基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；50)3-氯-1-(4-氰基苯氧基)-1-(4-氯代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3，4’-二氯代苯基乙基酮還原，接著用4-氰基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；51)3-氯-1-(4-氯代苯氧基)-1-(4-溴代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使4-溴代-β-氯代苯基乙基酮還原，接著用4-氯代苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；52)3-氯-1-苯氧基-1-(4-氯代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3，4’-二氯代苯基乙基酮還原，接著用苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；53)3-氯-1-(4-甲氧基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-甲氧基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；54)3-氯-1-苯氧基-1-(4-氟代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；55)3-氯-1-(4-三氟甲基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[由用1.0M BTC使3-氯代-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-三氟甲基苯酚使產(chǎn)生的醇進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備]；56)(R)-(+)-3-氯-1-(4-硝基苯氧基)-1-苯基丙烷[由用4-硝基苯酚使(R)-(+)-3-氯-1-苯基-1-丙醇(Aldrich)進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)(如見U.S.專利5068432)制備]；制備化合物A171，其[α]D25為+19.7°(c 5.18，CHCl3)；57)(S)-(-)-3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[用類似于U.S.專利5068432的方法，用(+)二異松蒎烷基氯化硼(Aldrich)使3-氯-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-苯基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的(R)-(+)-3-氯-1-(4-氟代苯基)-1-丙醇{[α]D25+22.1°(c 8.07，CHCl3)}進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備，其[α]D25-46.3°(c 2.49，CHCl3)]；制備化合物A173，其[α]D25-25.8°(c 3.03，CHCl3)]；58)(R)-(+)-3-氯-1-(4-苯基苯氧基)-1-(4-氟代苯基)丙烷[用類似于U.S.專利5068432的方法，用(-)二異松蒎烷基氯化硼(diisopinocampheylboron chloride)(Aldrich)使3-氯-4’-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-苯基苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的(S)-(-)-3-氯-1-(4-氟代苯基)-1-丙醇{[α]D25-22.2°(c 2.37，CHCl3)}進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備，[α]D25+46.6°(c 2.73，CHCl3)]；制備化合物A177，[α]D25+26.8°(c 3.10，CHCl3)]；制備化合物A178，其[α]D25+20.0°(c3.13，CHCl3)；59)(R)-(+)-3-氯-1-[4-(1-金剛烷基)苯氧基]-1-(4-氟代苯基)丙烷[用類似于U.S.專利5068432的方法，用(-)二異松蒎烷基氯化硼(Aldrich)使3-氯-4-氟代苯基乙基酮還原，接著用4-(1-金剛烷基)苯酚(Aldrich)使產(chǎn)生的(S)-(-)-3-氯-1-(4-氟代苯基)-1-丙醇{[α]D25-22.2°(c 2.37，CHCl3)}進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(DEAD，Ph3P)制備，其[α]D25+24.3°(c 2.19，CHCl3)]；制備化合物A179，其[α]D25+17.8°(c 2.98，CHCl3)]。
氨基酸或氨基酸前體A)L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Fluka，Ronkonkoma，NY)；B)D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)；C)肌氨酸甲酯鹽酸鹽(Lancaster，Windham，NH)；D)甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)；E)甘氨酸乙酯鹽酸鹽(Aldrich)；F)肌氨酸乙酯鹽酸鹽(Aldrich)；和G)甲基氨基乙醛縮二甲醇(Aldrich)。
溶劑X)乙腈；Y)甲醇。
A61的合成見圖3(反應(yīng)28)說明。
實(shí)施例3 N-[(3，3，-二苯基)丙基]甘氨酸乙酯(化合物A22)于室溫下，將2.132g(10.1mmol)3，3-二苯基丙胺(Aldrich，Milwaukee，WI)加至0.853g(5.1lmmol)溴代乙酸乙酯(Aldrich)和2.7g(19.57mmol)碳酸鉀的14ml乙腈溶液的混合物中。于氬氣環(huán)境下，將該混合物攪拌18小時。過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫得到1.05g(產(chǎn)率69％)N-[(3，3-二苯基)丙基]甘氨酸乙酯(化合物A22)，為油狀物。產(chǎn)物的NMR為1H NMR(CDCl3，300MHz)7.40-7.10(m，10H)，4.14(q，2H)，4.03(t，1H)，3.33(s，2H)，2.56(t，2H)，2.24(dt，2H)，1.22(t，3H)；13CNMR(CDCl3，75MHz)172.44，144.66，128.43，127.75，126.15，60.63，50.93，48.80，47.92，35.85，14.17。也從硅膠柱上分離到0.019g的A28。
實(shí)施例4利用反應(yīng)2的另外的合成如下用反應(yīng)2合成下列另外的化合物化合物原料胺試劑溶劑收率A51 A X 27％A67 B Y 89％A10 9 B Y 77％A13 8 B Y 95％A15 6 B Y 96％A17 3 B X 14％A19 1 C X 69％A20 2 E X 57％A21 1 B X 55％A30 1 H X 42％A33 1 D X 20％A34 1 G X 7％A35 1 F X 18％
A365BX80％A374BX77％A381EX70％A391IX10％A401JX3％A108 10 BX9％A150 2KX56％A157 1LX30％A162 1KX36％A165 1MX59％A166 1NX51％A167 1OX50％A172 1PX46％原料胺1)氟西汀[N-甲基-3-(對-三氟甲基苯氧基)-3-苯基丙胺鹽酸鹽]，(Sigma，St.Louis)；2)3，3-二苯基丙胺(Aldrich)；3)愈苯丙胺鹽酸鹽[(±)-γ-(2-甲氧基苯氧基)-N-甲基-苯丙胺鹽酸鹽]；(RBI，Natick，MA)；4)1，2-二苯基-3-甲基-4-(甲氨基)-2-丁醇鹽酸鹽，(Sigma-AldrichLibrary of Rare Chemicals)；5)d-Norpropoxyphene(1，2-二苯基-3-甲基-4-甲氨基-2-丁基丙酸酯馬來酸鹽)，(Sigma)；6)Maprotyline鹽酸鹽[N-甲基-9，10-橋亞乙基蒽-9(10H)-丙胺鹽酸鹽]，(Sigma)；7)去甲替林鹽酸鹽{3-(10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]亞環(huán)庚-5-烯基)-N-甲基-1-丙胺鹽酸鹽}，(Sigma)；8)地昔帕明(desipiramine)鹽酸鹽{10，11-二氫-N-甲基-5H-二苯并[b，f]氮雜-5-丙胺鹽酸鹽}，(Sigma)；9)普多替林鹽酸鹽{N-甲基-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-5-丙胺鹽酸鹽]，(Sigma)；10)3-(1-萘基)-3-苯基丙胺[使二乙基氰基甲基膦酸酯的內(nèi)鎓鈉鹽(Aldrich)與α-苯甲?；?Pfaltz & Bauer，Waterbury，CT)進(jìn)行Homer-Emmons反應(yīng)，接著進(jìn)行α，β-不飽和腈中間體的催化氫化制備]。
試劑A)溴代乙酸甲酯(Aldrich)；B)溴代乙酸乙酯(Aldrich)；C)溴代乙酸丙酯(Aldrch)；D)溴代乙酸苯酯(Aldrich)；E)2-溴代乙酰胺(Aldrich)；F)2-氯代-N，N-二乙基乙酰胺(Aldrich)；G)N-乙基氯代乙酰胺(Lancaster)；H)溴代乙腈(Aldrich)；I)4-(溴代甲磺酰基)嗎啉，(Sigma-Aldrich Library of Rare Chemicals)；J)二乙基氯代甲基膦酸酯(Aldrich)；K)2-溴代乙酸芐酯(Aldrich)；L)溴代乙酸對硝基苯酯，(Lancaster)；M)氯代乙酸辛酯，(Sigma-Aldrich Library of RareChemicals)；N)溴代乙酸異丙酯(Aldrich)；O)溴代乙酸正丁酯(Pfatz& Bauer)，Waterbury，CT)；P)溴代乙酸叔丁酯(Aldrich)。
溶劑X)乙腈；Y)乙醇。
實(shí)施例5A N-{[3-羥基-3-苯基-3-(噻吩-2-基)]丙基}肌氨酸乙酯(化合物A32)的合成步驟1N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯于回流、攪拌下，將3.37g(20mmol)3-氯苯基乙基酮(Aldrich)(3.07g，20mmol)肌氨酸乙酯鹽酸鹽、3.32g(20ml)碘化鉀和2.5g碳酸鉀的140ml乙腈中的混合物加熱2小時(見反應(yīng)13，圖2)。過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑。將殘留物溶于二氯甲烷中，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑得到N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯，為黃色油狀物，將其不經(jīng)純化用于步驟2。
步驟2于-78℃，將2-噻吩基鋰[通過于-78℃下，將1ml丁基鋰(2.5M的四氫呋喃溶液)加至在10ml四氫呋喃中的0.21g(2.5mmol)噻吩中產(chǎn)生]滴加至0.623g(2.5mmol)的N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯(得自步驟1)的30ml四氫呋喃溶液中(見反應(yīng)14，圖2)。于-78℃攪拌1小時并于20℃攪拌1小時后，通過于0℃加入20ml 10％氫氧化銨溶液驟冷該反應(yīng)物。用二氯甲烷萃取該混合物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用16％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.43g(產(chǎn)率52％)N-{[3-羥基-3-苯基-3-(噻吩-2-基)]丙基}肌氨酸乙酯(化合物A32)，為米色固體。
實(shí)施例5B N-{[3-羥基-3-苯基-3-(呋喃-2-基)]丙基}肌氨酸乙酯(化合物A161)的合成基本用實(shí)施例5A所述方法(用2-呋喃基鋰代替2-噻吩基鋰)，合成N-{[3-羥基-3-苯基-3-(呋喃-2-基)]丙基}肌氨酸乙酯(產(chǎn)率14％)。
實(shí)施例6 N-[3-苯基-3-(噻吩-2-基)-丙烯基]肌氨酸乙酯(化合物A41)的合成將N-{[3-羥基-3-苯基-3-(噻吩-2-基)]丙基}肌氨酸乙酯(由實(shí)施例5獲得的化合物32)0.118g(0.354mmol)溶于2ml甲酸中。于110℃將該溶液加熱0.5小時(見反應(yīng)19，圖2)。濃縮深紅色反應(yīng)混合物，使殘留物分配于水和二氯甲烷之間。用二氯甲烷萃取水相，經(jīng)硫酸鈉干燥二氯甲烷溶液。蒸發(fā)溶劑后，殘留物經(jīng)制備性TLC純化，用1∶3乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到0.091g(82％)N-[3-苯基-3-(噻吩-2-基)-2-丙烯基]肌氨酸乙酯(化合物A41)，為深紅色油狀物。
實(shí)施例7 N-[3-苯基-3-(噻吩-2-基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A42)的合成將0.055g(0.174mmol)N-[3-苯基-3-(噻吩-2-基)-2-丙烯基]肌氨酸乙酯(由實(shí)施例6獲得的化合物41)在2ml乙醇中用0.055g 10％Pd/C氫化。于室溫、40psi下將氫化過程進(jìn)行16小時(見反應(yīng)20，圖2)。濾除催化劑后，濃縮該溶液，殘留物經(jīng)制備性TLC純化，用1∶2乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到0.012g(22％)N-[3-苯基-3-(噻吩-2-基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A42)，為黃色油狀物。
實(shí)施例8A N-[(3-苯基-3-苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A31)的合成步驟1N-[(3-羥基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯于-78℃，將2.40ml LiAl(t-BuO)3[三叔丁氧基氫化鋁鋰(Aldrich)(1M THF溶液)]加至0.593g(2.28mmol)N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯(實(shí)施例5A步驟1)的10ml四氫呋喃溶液中(見反應(yīng)15，圖2)。于-78℃攪拌1小時并于室溫下攪拌1小時后，通過于0℃加入10ml 10％氯化銨溶液驟冷該反應(yīng)物，通過硅藻土過濾。用二氯甲烷萃取該混合物，經(jīng)硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑得到N-[(3-羥基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯，為黃色油狀物，將其不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一個步驟。
步驟2N-[(3-氯代-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯將步驟1的黃色油狀物溶于20ml氯仿中，加入1ml SOCl2，于回流下將該混合物加熱2小時(見反應(yīng)16，圖2)。加入碎冰后，用飽和的碳酸鉀溶液中和該反應(yīng)混合物，用二氯甲烷萃取。蒸發(fā)合并的萃取物，殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC層析純化，用20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.165gN-[(3-氯代-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯(兩步產(chǎn)率為26％)。
步驟3N-[(3-苯基-3-苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A31)于室溫下，將0.075g(0.278mmol)N-[(3-氯代-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯(得自步驟2)的3ml無水二甲基甲酰胺溶液加至苯酚鈉(將0.022g 60％NaH的礦物油液加至0.054g苯酚的2ml二甲基甲酰胺溶液中產(chǎn)生)溶液中(見反應(yīng)17，圖2)。于室溫下，將該反應(yīng)混合物攪拌30小時，真空蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC純化，用35％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.014g(產(chǎn)率15％)N-[(3-苯基-3-苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A31)，為黃色油狀物。
實(shí)施例8B用實(shí)施例8A方法進(jìn)行另外的合成根據(jù)以上實(shí)施例8A(步驟3)所述，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯使4-甲氧基苯酚(Aldrich)烷基化制備化合物A164，產(chǎn)率5％。
根據(jù)以上實(shí)施例8A(步驟3)所述，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯使苯硫酚(Aldrich)烷基化制備化合物A119，產(chǎn)率62％。
根據(jù)以上實(shí)施例8A(步驟3)所述，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯使4-(三氟甲基)苯硫酚(Lancaster)烷基化制備化合物A115，產(chǎn)率93％。
根據(jù)以上實(shí)施例8A(步驟3)所述，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯使4-叔丁基苯硫酚(Lancaster)烷基化制備化合物A68，產(chǎn)率5％。
實(shí)施例8C N-[3-苯基-3-(苯基氨基丙基]肌氨酸乙酯(化合物A47)的合成步驟1N-[3-苯基-3-(對甲苯磺酰苯胺基)丙基]肌氨酸乙酯于氮?dú)猸h(huán)境、攪拌并在冰浴冷卻下，將0.465g(2.67mmol)偶氮二羧酸二乙酯(“DEAD”，Aldrich)滴加至0.511g(2.03mmol)N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯(得自實(shí)施例8A步驟1)、0.571g(2.3lmmol)對甲苯磺酰胺(TCI America，Portland，OR)和0.712g(2.71mmol)三苯膦的2ml無水四氫呋喃溶液中。于室溫下，將該混合物攪拌4小時，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠層析，用25％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.730g(產(chǎn)率74％)N-[3-苯基-3-(對甲苯磺酰苯胺基)丙基]肌氨酸乙酯。1H NMR(CDCl3，300MHz)7.58(d，2H)，7.40-6.90(m，10H)，6.62(d，2H)，5.55(t，1H)，4.14(q，2H)，3.20(s，2H)，2.60-2.20(m，2H)，2.39(s，3H)，2.33(s，3H)，2.20-1.80(m，2H)，1.12(t，3H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)170.74，142.90，138.33，138.08，134.88，132.78，129.14，128.60，128.36，128.28，127.93，127.79，127.46，60.51，60.26，58.57，53.93，42.16，30.60，21.36，14.12。
步驟2N-[3-苯基-3-(苯基氨基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A47)于氮?dú)猸h(huán)境、攪拌并在冰浴冷卻下，用1小時將0.284g(0.6mmol)N-[3-苯基-3-(對甲苯磺酰苯胺基)丙基]肌氨酸乙酯(得自步驟1)的3ml無水乙二醇二甲醚溶液滴加至萘基鈉(sodium naphthalenide)[由0.545g(5.04mmol)萘和0.110g(5.16mmol)鈉制備]的8ml無水乙二醇二甲醚溶液中。于室溫下，將該混合物攪拌1小時，用冰驟冷，用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠層析，用25％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.092g(產(chǎn)率47％)N-[3-苯基-3-(苯基氨基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A47)。1H NMR(CDCl3，300MHz)7.50-7.00(m，7H)，6.70-6.40(m，3H)，5.75(br.s，1 H)，4.47(t，1H)，4.18(q，2H)，3.24(s，2H)，2.57(t，2H)，2.37(s，3H)，2.10-1.70(m，2H)，1.18(t，3H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)170.73，147.82，143.89，128.87，128.43，126.69，126.26，116.57，113.17，60.47，58.53，57.92，54.47，42.32，35.19，14.18。
實(shí)施例8D[R]-(+)-N-[3-苯基-3-(4-叔丁基苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A55)的合成{[α]D25+18.6°(c 7.84，CHCl3)}步驟1[S]-(-)-N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯{[α]D25-35°(c4.88，CHCl3)}；在實(shí)施例1所述條件下，用[R]-(+)-3-氯代-1-苯基-1-丙醇(Aldrich)使肌氨酸乙酯烷基化制備，產(chǎn)率72％。見反應(yīng)23，圖3。
步驟2[R]-(+)-N-[3-苯基-3-(4-叔丁基苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯用4-叔丁基苯酚(Aldrich)使[S]-(-)-N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯(得自步驟1)進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(類似于實(shí)施例8C步驟1)制備，產(chǎn)率41％，[α]D25+18.6°(c 7.84，CHCl3)。見反應(yīng)24，圖3。
實(shí)施例8E[R]-(+)-N-[3-苯基-3-(4-苯基苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A61){[α]D25+22.3°(c 8.1，CHCl3)}的合成根據(jù)實(shí)施例2所述，合成[α]D25為+54.9°(c 5.28，CHCl3)的化合物A61。
步驟1[S]-(-)-N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯用類似于U.S.專利5068432的方法，用(-)二異松蒎烷基氯化硼(Aldrich)使N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]肌氨酸乙酯(得自實(shí)施例5A步驟1)還原制備，產(chǎn)率12％；[α]D25-24.6°(c 3.63，CHCl3)(見反應(yīng)25，圖3)。根據(jù)實(shí)施例8D(步驟1)所述，合成[S]-(-)-N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯，其[α]D25-35°(c 4.88，CHCl3)。見反應(yīng)23，圖3。
步驟2[R]-(+)-N-[3-苯基-3-(4-苯基苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A61)用4-苯基苯酚(Aldrich)使[S]-(-)-N-(3-羥基-3-苯基丙基)肌氨酸乙酯(得自步驟1)進(jìn)行Mitzunobu反應(yīng)(類似于實(shí)施例8C步驟1)制備，產(chǎn)率22％，其[α]D25+22.3°(c 8.1，CHCl3)。見反應(yīng)26，圖3。
實(shí)施例9A N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-N-乙基甘氨酸乙酯(化合物A16)的合成于室溫、氬氣環(huán)境下，將0.158g(0.5mmol)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸乙酯(化合物A26)、0.234(2.1mmol)溴代乙烷、0.281g(2mmol)碳酸鉀和0.068g(0.4mmol)碘化鉀的混合物攪拌20小時。過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.112g(66％)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-N-乙基甘氨酸乙酯(化合物A16)，為油狀物。NMR譜1H NMR(CDCl3，300MHz)7.60-7.00(m，10H)，6.09(t，1H)，4.13(q，2H)，3.27(s，2H)，2.72(t，2H)，2.61(q，2H)，2.28(dt，2H)，1.23(t，3H)，1.01(t，3H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)171.77，142.96，142.86，140.33，130.09，128.49，128.35，127.48，127.27，127.19，60.58，54.90，53.98，48.20，28.19，14.57，12.70.
實(shí)施例9B用實(shí)施例9A的方法進(jìn)行另外的合成在實(shí)施例9A所述條件下，用碘甲烷處理化合物A150制備化合物A147，產(chǎn)率30％。
實(shí)施例1 0 N-[(4，4-二苯基)丁基]甘氨酸乙酯(化合物A4)的合成于室溫、40psi下，用0.072g 10％Pd/C在5ml乙醇中將0.072g(0.23nmo1)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸乙酯(化合物A26)氫化3小時。通過硅藻土從催化劑中過濾該混合物，蒸發(fā)溶劑，得到0.065g(產(chǎn)率90％)N-[(4，4-二苯基)丁基]甘氨酸乙酯(化合物A4)，為油狀物。產(chǎn)物的NMR譜為1H NMR(CDCl3，300MHz)7.40-7.10(m，10H)，4.17(q，2H)，3.89(t，1H)，3.34(s，2H)，2.61(t，2H)，2.08(dt，2H)，1.50-1.40(m，2H)，1.25(t，3H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)172.47，144.89，148.36，127.77，126.05，60.63，51.17，50.90，49.44，33.19，28.50，14.17。
實(shí)施例11-用實(shí)施例10的方法進(jìn)行另外的合成用10％鈀炭催化氫化化合物A2制備化合物A25，產(chǎn)率90％。
用10％鈀炭催化氫化化合物A16制備化合物A3，產(chǎn)率90％。
實(shí)施例12 N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸鹽酸鹽(化合物A27)的合成將3.4m1 1N氫氧化鈉加至0.093g(0.3mmol)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸乙酯(化合物A26)的2ml甲醇溶液中，于回流下加熱該混合物4小時。濃縮該反應(yīng)混合物至一半體積，用4N鹽酸酸化，用二氯甲烷萃取4次。干燥合并的萃取物并蒸發(fā)，得到0.100g(產(chǎn)率86％)的N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]甘氨酸鹽酸鹽(化合物A27)。產(chǎn)物的NMR譜1H NMR(CD3OD，300MHz)7.40-7.00(m，10H)，5.96(t，1H)，3.81(s，1H)，3.69(s，2H)，3.04(br.s，2H)，2.42(br.s，2H)；13C NMR(CD3OD，75MHz)166.78，145.86，145.82，141.73，139.34，129.42，128.42，127.96，127.41，127.35，127.02，121.97，121.87，52.28，26.43。
實(shí)施例13A用實(shí)施例12的方法進(jìn)行另外的合成用1N氫氧化鈉在甲醇中或用1N氫氧化鋰在乙醇中，于室溫下，水解相應(yīng)的酯，然后根據(jù)實(shí)施例12所述用鹽酸酸化，制備下列N-修飾的氨基酸，括號中列出原料酯、產(chǎn)率和(如果有的話)[α]D25
實(shí)施例13B N-甲基-N-[(1H-四唑-5-基)甲基]-3，3-二苯基丙胺鹽酸鹽(化合物Al46)合成步驟1于室溫下，將2.11g(10mmol)3，3-二苯基丙胺(Aldrich)(0.54g，4.54mmol)溴代乙腈(Aldrich)和2.5g碳酸鉀的5ml乙腈中的混合物攪拌16小時。用二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，用水洗滌，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到1.24g(產(chǎn)率50％)N-氰基甲基-3，3-二苯基丙胺，為油狀物，放置后固化。1HNMR(CDCl3，300MHz)7.45-7.10(m，10H)，4.05(t，1H)，3.50(s，2H)，2.67(t，2H)，2.23(dt，2H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)144.25，128.53，127.68，126.33，117.72，48.58，47.13，37.19，35.14。
步驟2于室溫下，將0.72g(2.9mmol)N-氰基甲基-3，3-二苯基丙胺(得自步驟1)、0.49g(3.4mmol)碘代甲烷以及1.6g碳酸鉀的5ml乙腈中的混合物攪拌16小時。用二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，用水洗滌，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.33g(產(chǎn)率43％)N-甲基-N-氰基甲基-3，3-二苯基丙胺，為油狀物，放置后固化。1H NMR((CDCl3，300 MHz)7.30-7.10(m，10H)，4.02(t，1H)，3.47(s，3H)，2.38(t，2H)，2.32(s，3H)，2.19(dt，2H)；步驟3于80℃、氬氣環(huán)境下，將0.132g(0.5mmol)N-甲基-N-氰基甲基-3，3-二苯基丙胺(得自步驟2)和O.1839(0.55mmol)疊氮基三丁基錫(Aldrich)的混合物攪拌16小時。將該反應(yīng)混合物懸浮于1M氯化氫的乙醚(Aldrich)溶液中，將沉淀的黃色蠟狀物經(jīng)制備性TLC純化，用10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脫，得到0.06g(產(chǎn)率35％)N-甲基-N-[(1H-四唑-5-基)甲基]-3,3-二苯基丙胺鹽酸鹽(化合物A146)，為白色粉末。1H NMR((DMSO-d6，300 MHz)7.30-7.16(m，10H)，4.11(s，2H)，3.97(t，1H)，2．60(br.s，2H)，2.45(s，3H)，2.36(br.s，2H)。
實(shí)施例13c用實(shí)施例13B的方法進(jìn)行另外的合成根據(jù)以上實(shí)施例13B(步驟3)所述，用疊氮基三丁基錫處理化合物A30制備化合物A133，產(chǎn)率11％。
實(shí)施例13D二甲基(乙氧基羰基甲基)[3-苯基-3-(4-三氟甲基苯氧基)丙基]碘化銨(化合物A148)的合成于回流下，將0.1529(0.38mmo1)N-[3-苯基-3-(4-三氟甲基苯氧基)丙基]肌氨酸乙酯(化合物A21)和0.2739(1.93mmo1)碘甲烷的2ml苯溶液加熱2小時，蒸發(fā)溶劑。殘留物用無水乙醚洗滌3次，真空干燥，得到0.1759(產(chǎn)率85％)二甲基(乙氧基羰基甲基)[3-苯基-3-(4-三氟甲基苯氧基)丙基]碘化銨(化合物A148)，為淡黃色吸濕性粉末。
實(shí)施例14-表達(dá)GlyT-1和GlyT-2的細(xì)胞的制備本實(shí)施例提出用于生長和轉(zhuǎn)染QT-6細(xì)胞的方法和材料。
由American Type Culture Collection(Accession No.ATCC CRL-1708)獲得QT-6細(xì)胞。用于生長QT-6的完全QT-6培養(yǎng)基為199培養(yǎng)基(Sigma Chemical Company，St.Louis，MO；此后稱“Sigma”)，補(bǔ)充有10％胰蛋白 磷酸鹽、5％胎牛血清(sigma)、1％青霉素-鏈霉素(Sigma)和1％無菌二甲基亞砜(DMSO，sigma)。生長或轉(zhuǎn)染QT-6細(xì)胞所需的其它溶液包括DNA/DEAE混合物4509μl TBS，450μl DEAE葡聚糖(Sigma)和100μl DNA(4μg)的TE溶液，其中DNA包括在適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體中的G1yT-1a、GlyT-1b、GlyT-1c或GlyT-2。使用的DNA如下所定義。
PBS標(biāo)準(zhǔn)磷酸鹽緩沖液，pH7.4，包括lmM CaCl2和1mMMgCl2，通過0.2μ濾膜無菌過濾。
TBS1ml溶液B，10ml溶液A，用蒸餾水加至100ml，濾膜除菌，于4℃儲存。
TE0.01M Tris，0.001M EDTA，pH8.0。
DEAE葡聚糖Sigma，#D-9885。在TBS中制備含有0.1％(1mg/ml)的DEAE葡聚糖的儲存液。將儲存液濾膜除菌并以每份1ml冷凍。
氯喹Sigma，# C-6628。在水中制備含有100mM氯喹的儲存液。將儲存液濾膜除菌并以每份0.5ml冷凍貯存。
儲存液A(10X)NaCl 8.00gKCl 0.38gNa2HPO40.20gTris堿3.00g用HCl將該溶液調(diào)至pH7.5，用蒸餾水加至100.0ml，濾膜除菌，于室溫下儲存。
儲存液B(100X)CaCl2·2H2O 1.5gMgCl2·6H2O 1.0g用蒸餾水將該溶液加至100ml，濾膜除菌，于室溫下儲存該溶液。
HBSS150mM NaCl，20mM HEPES，1mM CaCl2，10mM葡萄糖，5mM KCl，1mM MgCl2H2O，用NaOH調(diào)至pH 7.4。
用下列標(biāo)準(zhǔn)生長和傳代方法使細(xì)胞生長于225ml燒瓶中。為了傳代，用溫的HBSS將細(xì)胞洗滌兩次(每次5ml)。加入2ml 0.05％胰蛋白酶/EDTA溶液，旋轉(zhuǎn)該培養(yǎng)液，然后快速吸出胰蛋白酶/EDTA溶液。然后將該培養(yǎng)液孵育約2分鐘(至細(xì)胞浮起(lift off))，然后加入10mlQT-6培養(yǎng)液，旋轉(zhuǎn)燒瓶并彈其底部以進(jìn)一步懸浮細(xì)胞。取出細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至15ml圓錐形試管中，以1000xg離心10分鐘，再懸浮于10ml QT-6培養(yǎng)液中。取出樣品計(jì)數(shù)，然后用QT-6培養(yǎng)液進(jìn)一步稀釋至濃度為1×105細(xì)胞/ml，每225ml燒瓶的傳代細(xì)胞中加入65ml培養(yǎng)物。
用所制備的cDNA’s按如下進(jìn)行轉(zhuǎn)染使用的大鼠GlyT-2(rGlyT-2)無性系含有以Eco RI-HindIII片段克隆入pBluescript SK+(Stratagene)的rGlyT-2的整個序列(根據(jù)Liu等，J.Biol.Chem.268，22802-22808(1993)所述)。然后如下將GlyT-2亞克隆入pRc/RSV載體上用寡核苷酸5’GGGGGAAGCTTATGGATTGCAGTGCTCC3’作5’引物，用寡核苷酸5’GGGGGGGTACCCAACACCACTGTGCTCTG3’作3’引物，經(jīng)PCR擴(kuò)增相應(yīng)于rGlyT-2的208-702核苷酸的PCR片段。這樣在轉(zhuǎn)譯起始位點(diǎn)的上游立即產(chǎn)生了一個HindIII位點(diǎn)。將該片段(在3’端含有KpnI位點(diǎn)以及含有編碼rGlyT-2序列其余部分的Kpn 1-PvuII片段)克隆于先前用HindIII和Sma I在三部分聯(lián)結(jié)點(diǎn)消化的pBluescript SK+中。然后將由該無性系中得到的HindIII-Xba 1片段亞克隆于pRc/RSV載體上。產(chǎn)生的構(gòu)建物在pRc/RSV表達(dá)載體上含有rGlyT-2核酸的核苷酸208-2720。
使用的人GlyT-1a(hGlyT-1a)無性系含有得自以Hind III-Xba 1片段克隆于pRc/CMV載體(Invitrogen.San Diego.CA)上核苷酸位置183-2108的hGlyT-la序列(根據(jù)Kim等，Mol.Pharmacol，45，608-617，1994所述)。編碼GlyT-1a的該cDNA實(shí)際上含有大鼠的GlyT-1a序列的前17個核苷酸(相當(dāng)于前6個氨基酸)。為測定該區(qū)域的人GlyT-1a序列是否不同，使用由Gibco BRL(Gaithersburg，MD)提供的5’RACE體系，進(jìn)行cDNA快速擴(kuò)增由核苷酸1-212獲得hGlyT-1a的5’區(qū)域?；虻奶禺愋砸?’CCACATTGTAGTAGATGCCG3’，相當(dāng)于hGlyT-1a序列的核苷酸558-539，用于引發(fā)由人腦mRNA的cDNA合成，基因的特異性引物5’GCAAACTGGCCGAAGGAGAGCTCC3’，相當(dāng)于hGlyT-1a序列的核苷酸454-431，用于PCR擴(kuò)增。對GlyT-la的該5’區(qū)域測序證實(shí)編碼序列的前17個核苷酸在人和大鼠GlyT-1a中是相同的。
使用的人GlyT-1b(hGlyT-1b)無性系含有以HindIII-Xba I片段克隆于pRc/CMV載體上的核苷酸213-2274位置的hGlyT-1b序列(根據(jù)Kim等，Mol.Pharmaco1，45,608-617，1994所述)。
使用的人GlyT-1c(hGlyT-1c)無性系含有以HindIII-Xba I片段克隆于pRc/CMV載體(Invitrogen)上的核苷酸213-2336位置的hGlyT-1c序列(根據(jù)Kim等，Mol.Pharmacol，45，608-617，1994所述)。然后將來自該無性系的hGlyT-1c的HindIII-Xba片段亞克隆于pRc/RSV載體上。用GlyT-1c在pRc/RSV和pRc/CMV表達(dá)載體上進(jìn)行轉(zhuǎn)染試驗(yàn)。
轉(zhuǎn)染使用下列四天方法第一天，將QT-6細(xì)胞在100mm培養(yǎng)皿上，以10ml完全QT-6培養(yǎng)基1×106細(xì)胞的密度鋪板。
第二天，吸出培養(yǎng)液，用10ml PBS洗滌細(xì)胞，接著用10ml TBS洗滌。抽出TBS，然后向培養(yǎng)皿中加入DEAE/DNA混合液。在防護(hù)罩內(nèi)每5分鐘旋轉(zhuǎn)一次培養(yǎng)皿。30分鐘后，加入在QT-6培養(yǎng)基中的8ml 80μM的氯喹，于37℃、5％CO2中將培養(yǎng)物孵育2.5小時。然后吸出培養(yǎng)液，用完全QT-6培養(yǎng)液將細(xì)胞洗滌兩次，然后加入100ml完全QT-6培養(yǎng)液，將細(xì)胞放回孵育箱內(nèi)。
第三天，根據(jù)上述用胰蛋白酶/EDTA轉(zhuǎn)移細(xì)胞，并以約2×105細(xì)胞/孔加入96-孔測定培養(yǎng)板的孔中。
第四天，測定甘氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)(見實(shí)施例15)。
實(shí)施例15經(jīng)GlyT-1或Gly-2轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白測定轉(zhuǎn)運(yùn)本實(shí)施例說明用轉(zhuǎn)染孵育細(xì)胞測定甘氨酸攝取的方法。
將根據(jù)實(shí)施例14暫時轉(zhuǎn)染的GlyT-1生長細(xì)胞用HEPES緩沖液(HBS)洗滌三次。然后將細(xì)胞于37℃孵育10分鐘，然后加入含有50nM[3H]甘氨酸(17.5Ci/mmol)和或者(a)無潛力競爭劑，(b)10mM無放射活性的甘氨酸或(c)一定濃度的候選藥物溶液。使用一定濃度范圍的候選藥物，以得到數(shù)據(jù)計(jì)算產(chǎn)生50％效應(yīng)的濃度(即IC50，抑制甘氨酸攝取50％的藥物濃度)。然后將細(xì)胞于37℃再孵育10分鐘，此后吸出細(xì)胞，用冰冷的HBS洗滌三次。收獲細(xì)胞，向細(xì)胞中加入閃爍劑，將細(xì)胞振搖30分鐘，用閃爍計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)細(xì)胞的放射活性。根據(jù)進(jìn)行的測定，比較與候選藥物或不與候選藥物接觸的相同細(xì)胞的數(shù)據(jù)，和具有GlyT-1活性的細(xì)胞與具有GlyT-2活性的細(xì)胞的數(shù)據(jù)。
實(shí)施例16與NMDA受體結(jié)合測定本實(shí)施例說明測定化合物與NMDA受體上的甘氨酸位點(diǎn)相互作用的結(jié)合測定。
根據(jù)Grimwood等(Molecular Pharmacology，41，923-930(1992))和Yoneda等(J.Neurochem，62，102-112(1994))所述方法進(jìn)行[3H]甘氨酸與NMDA-甘氨酸位點(diǎn)的直接結(jié)合。
結(jié)合試驗(yàn)的膜的制備需要用一系列標(biāo)準(zhǔn)方法。除特別指明外，將組織和勻化物保持于冰上，并于4℃進(jìn)行離心。進(jìn)行勻化同時努力減小組織/勻化物溫度的升高。膜的制備包括下列步驟A.將4只大鼠處死并斬首；取出皮層和海馬。
B.在20份體積的0.32M蔗糖/5mM Tris-乙酸鹽(pH 7.4)中，用20沖的玻璃/聚四氟乙烯勻化器將組織勻化。
C.將組織以1000xg離心10分鐘。保留上清液。將沉積物再懸浮于小體積的緩沖液中并再次勻化。離心勻化的沉積物并與前面的上清液合并。
D.以40000xg離心合并的上清液30分鐘。棄去上清液。
E.將沉積物再懸浮于20份體積的5mM Tris-乙酸鹽(pH7.4)中。在冰上將懸浮液攪拌1小時。以40000xg離心該懸浮液30分鐘。棄去上清液，將沉積物冷凍至少24小時。
F.將步驟5獲得的沉積物再懸浮于含有0.1％皂甙(w/v，SigmaChemical Co.，St.Louis)的Tris-乙酸鹽(5mM，pH 7.4)緩沖液中至蛋白濃度為1mg/ml。于冰上放置20分鐘。以40000xg將懸浮液離心30分鐘。將沉積物再懸浮于不含皂甙的緩沖液中并再次離心。以10mg/ml濃度將沉積物再懸浮于Tris-乙酸鹽緩沖液中，并分份冷凍。
G.在第三天，取出一份膜，于冰上融化。用10ml Tris-乙酸鹽緩沖液稀釋，以40000xg離心30分鐘。重復(fù)洗滌步驟兩次，共洗滌三次。將最終沉積物以1mg/ml的濃度再懸浮于不含甘氨酸的Tris-乙酸鹽緩沖液中。
在含有150μg膜蛋白和50nM[3H]甘氨酸(0.5ml)的微量離心管中進(jìn)行結(jié)合試驗(yàn)。用1mM甘氨酸測定非-特異性結(jié)合。將藥物溶于測定緩沖液(50mM Tris-乙酸鹽，pH 7.4)或DMSO(終濃度為0.1％)中。將膜于冰上孵育30分鐘，用Whatman GF/B玻璃纖維濾膜過濾或離心(18000xg，20min)分離結(jié)合的放射配體和游離的放射配體。用冰冷的5mM Tris-乙酸鹽緩沖液將濾膜或沉積物快速洗滌三次。干燥濾膜并置于閃爍管中計(jì)數(shù)。將沉積物溶于脫氧膽酸/NaOH(0.1N)溶液中過夜，中和并用閃爍計(jì)數(shù)測定放射活性。
用[3H]二氯犬尿烯酸(DCKA)進(jìn)行NMDA-甘氨酸位點(diǎn)第二結(jié)合試驗(yàn)，并根據(jù)上述制備膜(見Yoneda等，J.Neurochem，60，634-645(1993))。根據(jù)上述[3H]甘氨酸進(jìn)行結(jié)合試驗(yàn)，但是用[3H]DCKA標(biāo)記甘氨酸位點(diǎn)。[3H]DCKA的終濃度為10nM，測定在冰上進(jìn)行10分鐘。
通過測定[3H]MK-801(dizocilpine)配體與所述位點(diǎn)的親和力的間接測定進(jìn)行NMDA-甘氨酸位點(diǎn)的第三結(jié)合試驗(yàn)(見Palmer和Burns，J.Neurochem.，62，187-196(1994))。用上述相同的方法制備試驗(yàn)的膜。該結(jié)合測定可以分別檢測拮抗劑和激動劑。
根據(jù)下述進(jìn)行第三結(jié)合試驗(yàn)以鑒定拮抗劑將100μg膜與谷氨酸鹽(10μM)和甘氨酸(200nM)以及各種濃度的待測配體一起加至96-孔培養(yǎng)板的孔中。通過加入5nM[3H]MK-801(23.9Ci/mmol)(與NMDA受體相關(guān)的離子通道結(jié)合)開始測定。測定的終體積為200μl。于室溫下將該測定進(jìn)行1小時。用TOMTEC收獲器過濾分離結(jié)合的放射活性和游離的放射活性。拮抗劑的活性由待測配體的濃度增加而與NMDA受體相關(guān)的放射活性降低來表明。
通過進(jìn)行如上試驗(yàn)作第三結(jié)合試驗(yàn)鑒定激動劑，但是甘氨酸的濃度為200nM。激動劑的活性由待測配體的濃度增加而與NMDA受體相關(guān)的放射活性增加來表明。
實(shí)施例17鈣通量測定本實(shí)施例說明在初級神經(jīng)元細(xì)胞中測定鈣通量的方法。
用初級神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行鈣通量測定，所述神經(jīng)元細(xì)胞由胎鼠皮層(用需要無菌解剖儀器、顯微鏡和特定培養(yǎng)液的標(biāo)準(zhǔn)方法和技術(shù)從懷孕大鼠解剖)制備。使用Lu等(Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA，88，6289-6292(1991))所述方法的改良方法。
用下列配方預(yù)先制備特定的培養(yǎng)液組分來源(目錄#)終濃度D-葡萄糖Sigma(G-7021) 0.6％轉(zhuǎn)鐵蛋白Sigma(T-2252) 100μg/ml胰島素 Sigma(I-5500) 25μg/ml黃體酮 Sigma(P-6149) 20nM1，4-丁二胺 Sigma(P-7505) 60μM硒 Sigma(S-5261) 30nMpen-strepΔGIBCO(15070-014) 0.5U-0.5μg/mlL-谷氨酰胺*GIBCO(25030-16)146mg/mlMEM° GIBCO(11095或11090)500ml/lΔpen-strep5000U/ml青霉素和5000μg/ml鏈霉素*只有當(dāng)使用無L-谷氨酰胺的MEM時才加入°分別含有L-谷氨酰胺或不含有L-谷氨酰胺在開始解剖前，用聚賴氨酸(100μg/ml，37℃至少30分鐘)處理組織培養(yǎng)板，并用蒸餾水洗滌三次。而且，將含有兩套無菌粗解剖器具(剪刀和鑷子)以及數(shù)套精細(xì)解剖器具的金屬盤高壓滅菌。將剪刀和鑷子置于盛有70％乙醇的滅菌燒杯中并放在解剖桌上。將盛有冷磷酸鹽緩沖液(PBS)的培養(yǎng)皿置于解剖位置旁邊的冰上。
將懷孕大鼠(到達(dá)時為E15或16，得自Hilltop Lab Animals(Scottdale，PA)，解剖時為E17或18)置于二氧化碳/干冰箱內(nèi)至神志喪失。取出大鼠，用大頭針別住背，用70％乙醇對解剖部位擦洗，切開皮膚，取出目的部位。用第二把剪刀切開，取出在囊中的產(chǎn)前幼畜。將囊結(jié)置于冷的PBS中，然后轉(zhuǎn)移至無菌防護(hù)罩中。
從囊中取出產(chǎn)前幼畜并處死。然后去除頭顱，小心移出大腦，置于含有冷PBS的干凈的培養(yǎng)皿中。此時，需要解剖顯微鏡進(jìn)行。將大腦反轉(zhuǎn)，以使皮層與培養(yǎng)皿接觸，取出解剖器和皮層之間的組織(紋狀體和其它的腦部分)。從皮層切下海馬和嗅球。然后反轉(zhuǎn)該組織，用鑷子去除腦膜。將其余的組織(皮層)置于含有特定培養(yǎng)基的小培養(yǎng)皿內(nèi)。
用解剖刀剁碎組織，然后用燒邊的玻璃吸管研磨。然后將剁碎、研磨的組織轉(zhuǎn)移至無菌塑料管中，并繼續(xù)用帶有細(xì)開口的玻璃吸管研磨。在適當(dāng)?shù)挠?jì)數(shù)室內(nèi)對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。將細(xì)胞以約40000細(xì)胞/孔置于96-孔培養(yǎng)板的100μl特定培養(yǎng)液中，以200000細(xì)胞/孔置于24-孔培養(yǎng)板的500μl特定培養(yǎng)液中，以400000細(xì)胞/孔置于12-孔培養(yǎng)板的1ml特定培養(yǎng)液中，以1.5×108細(xì)胞/35mm的培養(yǎng)皿的1.5ml中，以10×108細(xì)胞/100mm的培養(yǎng)皿的10ml中。為抑制神經(jīng)膠質(zhì)生長，用100μM5-氟-2-脫氧尿苷(FDUR，Sigma(F-0503))或50/μM尿苷(Sigma(F-3003))和50μMFDUR處理培養(yǎng)物。
使用于標(biāo)準(zhǔn)鈣通量測定的皮層培養(yǎng)物于24-孔培養(yǎng)板上在上述特定的培養(yǎng)基中生長7天，并通過交換一半的培養(yǎng)基，用含有培養(yǎng)基(10％熱滅活的胎牛血清，0.6％葡萄糖的MEM溶液)的血清補(bǔ)料一次。體外孵育12天后使用培養(yǎng)物。用HCSS(即HEPES緩沖控制鹽液，含有120mM NaCl、5.4mM KCl、1.8mM CaCl2、25mM HEPES和15mM葡萄糖，用HPLC水配制，用NaOH(也用HPLC水配制)調(diào)節(jié)pH 7.4)將培養(yǎng)物洗滌三次。在第三次洗滌時，將培養(yǎng)物于37℃孵育20-30分鐘。
在HCSS中制備含有45Ca++(5000 dpm/ml)和受試或?qū)φ账幬锏娜芤骸＞驮诩尤肷鲜?5Ca++溶液前，將培養(yǎng)物用HCSS洗滌兩次，每孔加入250μl45Ca++溶液，一次一個培養(yǎng)板。于室溫下，將培養(yǎng)物孵育10分鐘，用HCSS洗滌三次，每孔加入1ml閃爍液體，接著振搖至少15分鐘。在閃爍計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)保留的放射活性。
實(shí)施例18-N-(3-氰基-3，3-二苯基)丙基-2-哌啶羧酸甲酯(化合物B9)的合成于氬氣環(huán)境下，將0.3g(1mmol)4-溴代-2，2-二苯基丁腈(Aldrich，Milwaukee，WI)、0.359g(2mmol)2-哌啶酸甲酯乙酸鹽(Aldrich)、0.553g(4mmol)碳酸鉀和0.166g(1mmol)碘化鉀的5ml乙腈中的混合液回流20小時。過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.173g(產(chǎn)率48％)N-(3-氰基-3，3-二苯基)丙基-2-哌啶羧酸甲酯(化合物B9)，為油狀物。產(chǎn)物的NMR光譜為1H NMR(CDCl3，300MHz)7.50-7.20(m，10H)，3.58(s，3H)，3.10-3.00(m，2H)，2.70-2.50(m，3H)，2.50-2.35(m，1H)，2.25-2.10(m，1H)，1.90-1.50(m，4H)，1.40-1.20(m，2H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)173.59，140.00，139.00，128.71，127.72，126.58，126.46，121.73，103.85，65.09，52.88，51.47，50.92，49.70，36.35，29.27，24.82，22.27。
實(shí)施例19使用反應(yīng)1的另外的合成用反應(yīng)1合成如下另外的化合物化合物試劑氨基酸溶劑產(chǎn)率B1A 1 X 70％B2E 1 X 28％B3B 2 Y 13％B4B 1 X 57％B6 C3Z24％B7 C1Z48％B8 D1X77％B11D4X61％B12B3X43％B13B4X39％B14C5Z63％B17F1X65％試劑A)1，1’-(4-氯亞丁基)雙(4-氟代苯)(Acros Organics，Pittsburgh，PA)；B)4-溴-1，1-二苯基-1-丁烯[根據(jù)F.A.Ali等，J.Med.Chem.，28653-660，1985所述制備]；C)二苯甲基2-溴代乙基醚[根據(jù)M.R.Pavia等，J.Med.Chem，354238-4248，1992所述制備]；D)3，3-二苯基丙基甲苯磺酸酯[用LiAlH4使3，3-二苯基丙酸(Aldrich)還原為3，3-二苯基丙醇，接著進(jìn)行甲苯磺?；苽鋆；E)9-芴基乙基甲苯磺酸酯[用LiAlH4使9-芴乙酸甲酯(Aldrich)還原為2-(9-芴基)乙醇，接著進(jìn)行甲苯磺?；苽鋆；F)3，3-雙(4-氟苯基)丙基甲苯磺酸酯[用氯代雙(4-氟苯基)甲烷(Aldrich)使丙二酸二乙酯(Aldrich)烷基化，接著進(jìn)行水解和去羧基、LiAlH4還原一羧酸并使形成的醇苯磺?；苽鋆。
氨基酸1)2-哌啶酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)；2)(S-(-)-2-氮雜環(huán)丁烷羧酸甲酯鹽酸鹽[根據(jù)M.A.Brook等，Synthesis，p.201，1983所述通用方法，在甲醇中用氯代三甲基硅烷(Aldrich)使S-(-)-2-氮雜環(huán)丁烷羧酸(Aldrich)甲基化制備]；3)L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)；4)(±)-反式-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-2-羧酸甲酯鹽酸鹽[根據(jù)M.A.Brook等，Synthesis，201，1983所述通用方法，在甲醇中用氯代三甲基硅烷(Aldrich)使(±)-反式-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-2-羧酸(Aldrich)甲基化制備]；5)吲哚-2-羧酸甲酯鹽酸鹽[根據(jù)M.A.Brook等，Synthesis，201，1983所述通用方法，在甲醇中用氯代三甲基硅烷(Aldrich)使吲哚-2-羧酸(Aldrich)甲基化制備]。
溶劑X)乙腈；Y)二氧六環(huán)；Z)甲醇實(shí)施例20A N-[(3，3-二苯基-3-羥基)丙基]-2-哌啶酸甲酯(化合物B18)的合成步驟1N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]-2-哌啶酸甲酯于回流、攪拌下，將3.37g(20mmol)3-氯代苯基乙基酮(Aldrich)、3.59g(20mmol)2-哌啶酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)、3.32g(20mmol)碘化鉀和2.5g碳酸鉀的140ml乙腈中的混合物加熱2小時(反應(yīng)29，圖4)。過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑，將殘留物溶于二氯甲烷中，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑得到N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]-2-哌啶酸甲酯，為黃色油狀物，不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
步驟2于-78℃，將0.21ml苯基鋰(1.8M環(huán)己烷-乙醚溶液，Aldrich)滴加至0.101g(0.367mmol)N-[(3-氧基-3-苯基)丙基]-2-哌啶酸甲酯(得自步驟1)的5ml四氫呋喃溶液中(反應(yīng)30，圖4)。于-78℃攪拌0.5小時，于20℃攪拌0.5小時后，于0℃加入5ml10％氯化銨溶液驟冷該反應(yīng)物。用二氯甲烷萃取該反應(yīng)物，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)制備性TLC純化，用40％乙酸乙酯的己烷溶液展開，得到0.072g(產(chǎn)率56％)N-[(3，3-二苯基-3-羥基)丙基]-2-哌啶酸甲酯(化合物B18)，為淡黃色油狀物。
實(shí)施例20B N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B30)步驟1根據(jù)實(shí)施例20A(步驟1)所述方法，用3-氯代-4’-氟苯基乙基酮(Aldrich)使2-哌啶酸甲酯烷基化制備N-[3-(4-氟代苯基)-3-氧基丙基](2-哌啶酸)甲酯，產(chǎn)率為92％。
步驟2N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B30)于氮?dú)猸h(huán)境、攪拌下，將7ml(2mmol)4-氯代苯基碘化鎂的0.28M乙醚溶液[由1-氯代-4-碘代苯(Aldrich)和鎂制備]滴加至冰冷的0.605g(2mmol)N-[3-(4-氟代苯基)-3-氧基丙基](2-哌啶酸)甲酯(得自步驟1)的12ml無水乙醚溶液中。于室溫下，將該混合物攪拌16小時，傾至碎冰中，用二氯甲烷萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)萃取物，濃縮，殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC純化，用25％乙酸乙酯的己烷溶液展開，得到0.037g(產(chǎn)率4.5％)N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B30)。
用類似于步驟2的方法，使N-(3-氧基-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)甲酯[類似于實(shí)施例20A步驟1的方法，由2-哌啶酸乙酯(Aldrich)合成]與4-氯代苯基碘化鎂反應(yīng)制備化合物B21，產(chǎn)率4％。
實(shí)施例20C N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B20)的合成于回流下，將0.035g(0.086mmol)N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)-3-羥丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B30)的1ml 99％甲酸溶液加熱0.5小時。真空濃縮該混合物，殘留物溶于乙酸乙酯中，用飽和的碳酸氫鈉和鹽水洗滌，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC純化，用5％乙醚的二氯甲烷溶液展開得到0.018g(產(chǎn)率54％)N-[3-(4-氯代苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B20)。
實(shí)施例21A N-[3-苯基-3-(p-三氟甲基苯氧基)丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B16)的合成步驟1于-78℃，將0.70ml三-叔丁氧基氫化鋁鋰(Aldrich)(1M THF溶液)加至0.190g(0.69mmol)N-[(3-氧基-3-苯基丙基](2-哌啶酸)甲酯(實(shí)施例20A步驟1制備)的10ml THF溶液中(反應(yīng)31，圖4)。于-78℃攪拌0.5小時，于室溫下攪拌20小時后，于0℃加入10ml 10％氯化銨溶液驟冷該反應(yīng)物，過濾并用二氯甲烷萃取。蒸發(fā)溶劑后，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.171g(產(chǎn)率89％)N-[(3-羥基-3-苯基)丙基](2-哌啶酸)甲酯，為淡黃色油狀物。
步驟2向冰冷的2.27g(8.2mmol)N-[(3-羥基-3-苯基)丙基](2-哌啶酸)甲酯(得自步驟1)的10ml無水二氯甲烷溶液中滴加4ml(51mmol)亞硫酰氯，于回流下將該混合物加熱1小時(反應(yīng)32，圖4)。加入碎冰后，用飽和的碳酸鉀溶液中和該反應(yīng)混合物，用二氯甲烷萃取。蒸發(fā)合并的萃取物，殘留物經(jīng)硅膠柱層析，用20％乙醚的己烷溶液洗脫，得到1.45g(產(chǎn)率60％)N-[(3-氯代-3-苯基)丙基](2-哌啶酸)甲酯，為油狀物。
步驟3于室溫下，將0.082g(0.28mmol)N-[(3-氯代-3-苯基)丙基](2-哌啶酸)甲酯(得自步驟2)的1ml無水二甲基甲酰胺溶液加至4-三氟甲基苯酚鈉的2ml無水二甲基甲酰胺溶液中(反應(yīng)33，圖4)。通過向0.165g(1mmol)α，α，α-三氟-對-甲酚(Aldrich)的2ml二甲基甲酰胺溶液中加入0.040g 60％的氫化鈉的礦物油溶液產(chǎn)生4-三氟甲基苯酚鈉。于室溫下，將該反應(yīng)混合物攪拌30小時，真空蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)制備性TLC純化，用30％乙酸乙酯的己烷溶液展開，得到0.079g(產(chǎn)率68％)N-[3-苯基-3-(對-三氟甲基苯氧基)丙基](2-哌啶酸)甲酯(化合物B16)，為淡黃色油狀物。
實(shí)施例21B用實(shí)施例21A的方法進(jìn)行另外的合成根據(jù)以上實(shí)施例21A(步驟3)所述方法，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)乙酯使4-三氟甲基苯酚(Aldrich)烷基化制備化合物B23，產(chǎn)率6.5％。
根據(jù)以上實(shí)施例21A(步驟3)所述方法，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)乙酯使苯酚(Aldrich)烷基化制備化合物B24，產(chǎn)率4％。
根據(jù)以上實(shí)施例21A(步驟3)所述方法，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)乙酯使4-甲氧基苯酚(Aldrich)烷基化制備化合物B25，產(chǎn)率8％。
根據(jù)以上實(shí)施例21A(步驟3)所述方法，用N-(3-氯代-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)乙酯使苯硫酚(Aldrich)烷基化制備化合物B29，產(chǎn)率12％。
實(shí)施例21C N-[3-(4-氯代苯氧基)-3-苯基丙基](2-哌啶酸)乙酯(化合物B22)的合成于氮?dú)猸h(huán)境、攪拌并用冰浴冷卻下，將0.133g(0.76mmol)偶氮二羧酸二乙酯(Aldrich)滴加至0.142g(0.51mmol)N-(3-羥基-3-苯基丙基)(2-哌啶酸)甲酯(得自實(shí)施例21A步驟1)、0.083g(0.64mmol)對-氯代苯酚(Aldrich)和0.197g(0.75mmol)三苯膦的5ml無水四氫呋喃溶液中。于室溫下，將該混合物攪拌4小時，蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)制備性硅膠TLC純化，用30％乙酸乙酯的己烷溶液展開，得到0.09g(產(chǎn)率46％)N-[3-(4-氯代苯氧基)-3-苯基丙基](2-哌啶酸)乙酯(化合物B22)(見反應(yīng)34，圖4)。
實(shí)施例22 N-(4，4-二苯基)丁基-2-哌啶羧酸甲酯(化合物B10)的合成于室溫、40psi下，用0.030g 10％Pd/C，在5ml乙醇中，將0.040g(0.11mmol)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-2-哌啶羧酸甲酯(化合物B4)氫化4小時。通過硅藻土過濾從催化劑中分離混合物，蒸發(fā)溶劑，得到0.028g(產(chǎn)率70％)N-(4，4-二苯基)丁基-2-哌啶羧酸甲酯(化合物B10)，為油狀物。產(chǎn)物的NMR光譜為1HNMR(CDCl3，300MHz)7.40-7.10(m，10H)，3.88(t，1H)，3.65(s，3H)，3.10-2.90(m，2H)，2.60-2.45(m，1H)，2.35-2.20(m，1H)，2.10-1.90(m，3H)，1.85-1.10(m，8H)；13C NMR(CDCl3，75MHz)174.57，145.36，145.23，128.66，128.12，128.10，126.34，126.33，65.66，56.81，51.78，51.44，50.78，33.81，29.88，25.53，25.39，22.92。
實(shí)施例23 N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷羧酸鹽酸鹽(化合物B15)的合成向0.050g(0.3mmol)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷羧酸甲酯(化合物B3)的2.4ml乙醇溶液中加入1.2ml 1N氫氧化鋰，于室溫下將該混合物攪拌20小時。將該反應(yīng)混合物濃縮至一半體積，用4N鹽酸酸化，用二氯甲烷萃取4次。干燥合并的萃取物，蒸發(fā)得到0.041g(產(chǎn)率80％)N-[(4，4-二苯基)丁-3-烯基]-L-2-氮雜環(huán)丁烷羧酸鹽酸鹽(化合物B1 5)。1H NMR(CD3OD，300MHz)7.50-7.00(m，10H)，6.08(t，1H)，4.62(t，1H)，4.00-3.75(m，3H)，3.30-3.20(m，1H)，2.75-2.55(m，1H)，2.50-2.30(m，3H)。
通過相應(yīng)的酯化合物B14水解制備化合物B5。
通過相應(yīng)的酯化合物B23水解制備化合物B19。
盡管我們描述了本發(fā)明并強(qiáng)調(diào)優(yōu)選的實(shí)施方案，但是對本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言很明顯可以使用在優(yōu)選的設(shè)備和方法上的修改，并且可以按不是在此所特別描述的內(nèi)容來實(shí)施本發(fā)明。因此，本發(fā)明包括下列權(quán)利要求書所定義的本發(fā)明宗旨和范圍內(nèi)的所有修改。
權(quán)利要求
1. 下式分化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中(1)X為氮或碳，當(dāng)X為氮時R2不存在；(2)R2(a)為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氰基、(C2-C7)鏈烷?；?、氨基羰基、(C1-C6)烷基氨基羰基或其中每一個烷基分別獨(dú)立地為C1到C6的二烷基氨基羰基，(b)包括(其中R1不是氨基亞乙基、-O-R8或-S-R8*)羥基、氟、氯、溴或(C2-C7)鏈烷酰氧基，(c)與相鄰的來自R1、Rxb或Ryb之一的碳或氮形成雙鍵或(d)為由R2b連接到X上的R2a。(2i)Rx為Rxb連接到X上的Rxa；(2ii)Ry為Ryb連接到X上的Rya；(2iii)Rxa、Rya和R2a獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或具有選自包括氧、硫和氮的0-2個雜原子的5-7元非芳香環(huán)。其中(a)芳基為苯基或萘基，(b)雜芳基包括五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中所述雜芳基為芳香的并含有選自包括氧、硫和氮的雜原子，而其余的環(huán)原子為碳，(c)Rxa、Rya和R2a的每一個可獨(dú)立地為Rq、RrO-或RsS-其中之一所取代，其中Rq、Rr和Rs中的每一個獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或5-7元非芳香環(huán)，上述環(huán)的結(jié)構(gòu)如Rxa所定義，和(d)Rxa、Rya、R2a、Rq、Rr和Rs可另外為選自下列的一個或多個取代基所取代氟、氯、溴、硝基、羥基、氰基、三氟甲基、具有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺?；?、金剛烷基、(C1-C12)烷基、(C1-C12)鏈烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、其中每一個烷基獨(dú)立地為C1-C6的二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷酰基、(C2-C7)鏈烷?；趸?、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺?；?、用多至三個(C1-C6)烷基獨(dú)立取代的脒基、或用二個氧與所述芳環(huán)或雜芳環(huán)結(jié)構(gòu)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代，其中(i)Rxa、Rya和R2a的取代可在Rxa、Rya和R2a的兩個之間結(jié)合形成第二個橋接，包括(1)(C1-C2)烷基或鏈烯基，它可用一個或多個(C1-C6)烷基獨(dú)立地取代，(2)硫，(3)氧，(4)氨基，它可用一個(C1-C6)烷基取代氫，(5)羰基，(6)-CH2C(＝O)-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(7)-C(＝O)-O-，(8)-CH2-O-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(9)-C(＝O)N(R24)，其中R24為氫或(C1-C6)烷基，(10)-CH2-NH-，它可用多至三個(C1-C6)烷基取代氫，或(11)-CH＝N-，它可用(C1-C6)烷基取代氫，或其中Rxa、Rya和R2a中的二個直接以單鍵連接；(2iv)Rxb和R2b獨(dú)立地為單鍵或(C1-C2)亞烷基；(2v)Ryb為單鍵、氧雜、(C1-C2)亞烷基、亞乙基或-CH＝(其中所述雙鍵與X連接)、硫雜、亞甲氧基或亞甲硫基、或-N(R6)或-CH2-N(R6*)-，其中R6和R6*為氫或(C1-C6)烷基，其中當(dāng)X為氮時，X不與其它雜原子相連；(3)R1包括直鏈(C2-C3)脂肪族基團(tuán)；當(dāng)X為碳時，為＝N-O-(亞乙基)，其中未配對雙鍵與X連接；(當(dāng)X為碳，Ryb不包括與X連接的雜原子時)，其中R8或R8*為亞乙基或亞乙烯基的-O-R8或-S-R8*并且O或S與X相連接；(當(dāng)X為碳，Ryb不包括與X連接的雜原子時)，其中所述氨基與X相連接的氨基亞乙基其中R1可被至多一個羥基、至多一個(C1-C6)烷氧基或至多一個(C2-C7)鏈烷酰氧基、至多二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基、至多一個氧代基、至多一個(C1-C6)亞烷基所取代，前提為所述羥基、烷氧基、鏈烷酰氧基或氧代取代基不與與氮或氧相連的碳相連；其中R1的烷基或亞烷基取代基可連接形成3-7元非芳香環(huán)；和其中如果X為氮，X以單鍵與R1相連接，連接R1與氮的R1的端基碳是飽和的；(4)R3(a)為氫、(C1-C6)烷基或苯基或其中所述烷基為C1-C6的苯基烷基并且該苯基可用上述Rxa的芳基或雜芳基所定義的相同的取代基所取代。(b)為-R12Z(Rxx)(Ryy)(R11)，其中R12與N結(jié)合，Z獨(dú)立地與X相同，Rxx獨(dú)立地與Rx相同，Ryy獨(dú)立地與Ry相同，R11獨(dú)立地與R2相同，R12獨(dú)立地與R1相同，或(c)與R4共同形成如下C環(huán) 其中當(dāng)C環(huán)存在時，R4*為氫；(5)n為0或1，并且當(dāng)n為1時，R3*為(C1-C6)烷基(與之相連接的氮帶正電荷)或氧(形成N-氧化物)，X為碳；(5’)Q與所述環(huán)上氮和帶有R5的環(huán)上碳共同形成C環(huán)，其中C環(huán)為3-8元環(huán)、被3-6元螺環(huán)取代的3-8元環(huán)或與5-6元環(huán)稠合的3-8元環(huán)，其中缺少所述環(huán)上氮的稠合環(huán)可以為芳環(huán)或雜芳環(huán)，其中對每一個C環(huán)的組成環(huán)而言，具有選自氧、硫或氮的多至二個雜原子，包括所述氮和其余碳，其前提為環(huán)上原子包括所述氮正是季氮，其前提為在飽和環(huán)中，至少二個插入碳原子將環(huán)上氮原子與環(huán)上其它雜原子分隔開來其中C環(huán)的碳和氮環(huán)原子可以用選自下列的取代基取代(C1-C6)烷基、(C2-C6)亞鏈烯基、氰基、硝基、三氟甲基、(C2-C7)烷氧基羰基、(C1-C6)亞烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、氧代基、羥基羰基、如Rxa所定義的芳基或如Rxa所定義的雜芳基，其前提為被亞烷基、羥基羰基或氧代基所取代的環(huán)上原子為碳，進(jìn)一步的前提為被羥基或烷氧基所取代的環(huán)上原子與環(huán)上其它雜原子被至少二個插入碳原子分離開來；(6)R4和R4*獨(dú)立為氫或(C1-C6)烷基或R4和R4*之一可以為(C1-C6)羥基烷基；和(7)R5為(CO)NR13R14、(CO)OR15、(CO)SR16、(SO2)NR17R18、(PO)(OR19)(OR20)、(CR22)(OR23)(OR24)、CN或四唑-5-基，其中R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19和R20分別獨(dú)立為氫、可包括(C3-C8)環(huán)烷基的(C1-C8)烷基(其中與R15的氧或與R16的硫連接的碳沒有超過二級支鏈)、(C2-C6)羥基烷基、氨基烷基(其中烷基為C2-C6，氨基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基所取代)、芳基烷基(其中烷基為C1-C6)、雜芳基烷基(其中烷基為C1-C6)、芳基或雜芳基，R22為氫或OR25，R23、R24和R25為(C1-C6)烷基、苯基、芐基、乙?；?，當(dāng)R22為氫時，R23和R24的烷基可以結(jié)合成包括1，3-二氧戊環(huán)或1，3-二氧六環(huán)其中所述芳基為苯基或萘基，所述雜芳基為五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中所述雜芳基為芳香基并含有選自包括氧、硫和氮的雜原子，而剩余環(huán)上原子為碳；其中所述芳基、雜芳基、芳基烷基的芳基或雜芳基烷基的雜芳基可以被選自下列的取代基所取代氟、氯、溴、硝基、氰基、羥基、三氟甲基、可有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺?；?C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C1-C6)烷基胺、每一個烷基為獨(dú)立的C1-C6的二烷基胺、氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷?；?C2-C7)鏈烷?；趸?、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、可被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基N-取代的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺?；⒖杀欢嘀寥齻€(C1-C6)烷基取代的脒基或用二個氧與芳環(huán)或雜芳環(huán)結(jié)構(gòu)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代；其中R13和R14可與氮一起形成含有選自氧和硫的另外一個雜原子的5-7元環(huán)，其中如果R15為氫，R1為亞丙基，那么至少下列情況之一適用(1)Rx和Ry不是對-氟代苯基，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；如果R15為氫，R1為亞乙基或X-R1為亞丙-1-烯基，那么至少下列情況之一適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；如果R5為C(O)NH2，那么至少下列情況之一適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是氫，(7)n為1，(8)R1不是亞乙基，或(9)R3和R4形成環(huán)Q；如果R13為氫，R14為(3，4-二氫-2H-1-苯并吡喃-4-基)亞甲基，那么至少一種情況[優(yōu)選至少兩種情況，更優(yōu)選至少三種情況]適用(1)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(2)Rx和Ry之一包括雜芳基，(3)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(4)R2為RxaRxb-，(5)R2*不是氫，(6)R3不是乙基，(7)n為1，或(8)R3和R4形成環(huán)Q；和如果R2為苯基、對-甲基苯基或?qū)?甲氧基苯基，那么至少下列一種情況適用(1)Rx和Ry的芳基不被對-甲基苯基或?qū)?甲氧基苯基取代，(2)至少Rx和Ry之一的芳基被不同于氫的基團(tuán)取代，(3)Rx和Ry之一包括雜芳基，(4)Ry為芳烷基、雜芳烷基、芳氧基、雜芳氧基、芳基甲氧基、雜芳基甲氧基、芳硫基、雜芳硫基、芳甲硫基、雜芳基甲硫基、Ar-N(R6)-或Ar-CH2-N(R6*)-，(5)R1不是氨基亞乙基、OR8或SR8*，(6)n為1，或(7)R3和R4形成環(huán)Q。
2. 權(quán)利要求1的化合物，所述環(huán)Q為包括所說明的環(huán)氮并且其余的環(huán)原子為碳的4-8元環(huán)。
3. 權(quán)利要求1的化合物，其中(A)至少Rxa、Rya和R2a之一被下列取代基所取代氟、氯、溴、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基、(C3-C8)烷基、Rq、RrO-、RsS-，(B)R3為氫、(C1-C6)烷基或苯基或其中所述烷基為C1-C6的苯基烷基，該苯基可被以上Rxa的芳基或雜芳基所定義的相同取代基所取代，或(C)Rxa、Rya和R2a的環(huán)結(jié)構(gòu)，包括其取代基，否則包括至少二個共同含有15-20個環(huán)原子的芳香環(huán)結(jié)構(gòu)。
4. 權(quán)利要求3的化合物，其中至少Rxa、Rya和R2a之一被下列取代基所取代氟、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基、氰基或(C3-C8)烷基。
5. 權(quán)利要求1的化合物，其中至少Rxa、Rya和R2a之一被Rq、RrO-或RsS-取代。
6. 權(quán)利要求1的化合物，其中至少Rxa、Rya和R2a之一的芳基或雜芳基為苯基。
7. 權(quán)利要求1的化合物，其中Ryb為氧雜、亞甲氧基、硫雜、亞甲基硫雜。
8. 權(quán)利要求的化合物，其中Ryb為氧雜或硫雜。
9. 權(quán)利要求1的化合物，其中R5為(CO)NR13R14、(CO)OR15或(CO)SR16。
10. 權(quán)利要求9的化合物，其中R15為(C2-C6)烷基、(C2-C4)羥基烷基、苯基、其中所述烷基為C1-C3的苯基烷基或所述烷基為C2-C6和所述氨基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C3)烷基取代的氨基烷基，其中所述苯基或苯基烷基的苯基可被取代。
11. 權(quán)利要求9的化合物，其中R15為氫。
12. 權(quán)利要求1的化合物，其中R4為氫、甲基或羥甲基，R4*為氫。
13. 權(quán)利要求1的化合物，其中至少Rxa、Rya和R2a之一為雜芳基，它包括二唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、硫羥基(thiolyl)、二嗪基、三嗪基、苯并唑基、苯并二唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、benzoxolyl、benzothiolyl、喹啉基、異喹啉基、苯并二嗪基、苯并三嗪基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吲哚基、異吲哚基或嘧啶基。
14. 權(quán)利要求1的化合物，其中R1為-O-R8或-S-R8*。
15. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述Rxa、Rya和R2a中兩個之間的第二鍵接為L并滿足下式 其中A和B分別為Rxa和Rya的芳基或雜芳基。
16. 權(quán)利要求14的化合物，其中Rxa-Rxb、Rya-Ryb與X形成 其中Y為以單鍵或雙鍵與R1連接的碳或與R1連接的氮，其中R21(i.)形成連接Rx和Ry的二個芳基或雜芳基環(huán)的單鍵，(ii.)為(C1-C2)亞烷基或亞鏈烯基，(iii.)為硫或(iv.)為氧，其中Rx和Ry可如前所述被取代。
17. 權(quán)利要求16的化合物，其中R21為CH2CH2或CH＝CH。
18. 權(quán)利要求1的化合物，其中Rxa、Rya或R2a的亞烷二氧基取代基如下 或 其中所述亞烷二氧基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C3)烷基所取代。
19. 權(quán)利要求1的化合物，其中Rxa和Rya一起可被多至六個取代基所取代，R2a、Rq、Rr和Rs中的每一個可被多至三個取代基所取代，其中Rq、Rr或Rs中每一個的存在都被認(rèn)為是Rxa、Rya和R2a的分別的環(huán)結(jié)構(gòu)的取代基。
20. 權(quán)利要求1的化合物，其中R3的苯基被多至三個取代基所取代。
21. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19或R20的芳基、雜芳基、芳基烷基的芳基或雜芳基烷基的雜芳基可被多至三個取代基取代。
22. 權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物為旋光純對映體。
23. 含有權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥用組合物。
24. 權(quán)利要求23的藥用組合物，其中權(quán)利要求1的化合物以有效量存在以用于(1)治療或預(yù)防精神分裂癥，(2)提高治療或預(yù)防癡呆癥，(3)治療或預(yù)防癲癇，(4)治療或預(yù)防痙攣狀態(tài)，(5)治療或預(yù)防肌痙攣，(6)治療或預(yù)防疼痛，(7)預(yù)防中風(fēng)后神經(jīng)細(xì)胞死亡，(8)預(yù)防患神經(jīng)變性性疾病的動物的神經(jīng)細(xì)胞死亡，(9)治療或預(yù)防心境障礙如抑郁癥，(10)增強(qiáng)記憶或?qū)W習(xí)能力，或(11)治療或預(yù)防學(xué)習(xí)障礙。
25. 用于下列目的方法(1)治療或預(yù)防精神分裂癥，包括給予精神分裂癥患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(2)治療或預(yù)防癡呆癥，包括給予癡呆癥患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(3)治療或預(yù)防癲癇，包括給予癲癇患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(4)治療或預(yù)防痙攣狀態(tài)，包括給予痙攣狀態(tài)患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(5)治療或預(yù)防肌痙攣，包括給予肌痙攣患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(6)治療或預(yù)防疼痛，包括給予疼痛患者治療或預(yù)防有效量的化合物，(7)預(yù)防中風(fēng)后神經(jīng)細(xì)胞死亡，包括給予神經(jīng)細(xì)胞死亡患者預(yù)防有效量的化合物，(8)預(yù)防患神經(jīng)變性性疾病的動物的神經(jīng)細(xì)胞死亡，(9)治療或預(yù)防心境障礙，(10)增強(qiáng)記憶或?qū)W習(xí)能力，或(11)治療或預(yù)防學(xué)習(xí)障礙，該方法包括給予所述治療、預(yù)防或增強(qiáng)有效量的下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中(1)X為氮或碳，當(dāng)X為氮時R2不存在；(2)R2(a)為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、氰基、(C2-C7)鏈烷?；?、氨基羰基、(C1-C6)烷基氨基羰基或其中每一個烷基分別獨(dú)立為C1到C6的二烷基氨基羰基，(b)包括(其中R1不是氨基亞乙基、-O-R8或-S-R8*)羥基、氟、氯、溴或(C2-C7)鏈烷酰氧基，(c)與相鄰的來自R1、Rxb或Ryb之一的碳或氮形成雙鍵或(d)為由R2b連接到X上的R2a。(2i)Rx為Rxb連接到X上的Rxa；(2ii)Ry為Ryb連接到X上的Rya；(2iii)Rxa、Rya和R2a獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或具有選自氧、硫和氮的0-2個雜原子的5-7元非芳香環(huán)，其中(a)芳基為苯基或萘基，(b)雜芳基包括五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中所述雜芳基為芳香的并含有選自氧、硫和氮的雜原子，而其余的環(huán)原子為碳，(c)Rxa、Rya和R2a的每一個可獨(dú)立地為Rq、RrO-或RsS-之一所取代，其中Rq、Rr和Rs中的每一個獨(dú)立地為芳基、雜芳基、金剛烷基或5-7元非芳香環(huán)，上述環(huán)的結(jié)構(gòu)如Rxa所定義，和(d)Rxa、Rya、R2a、Rq、Rr和Rs可另外為選自下列的一個或多個取代基所取代氟、氯、溴、硝基、羥基、氰基、三氟甲基、具有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺?；?、金剛烷基、(C1-C12)烷基、(C1-C12)鏈烯基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、其中每一個烷基獨(dú)立地為C1-C6的二烷基氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷?；?、(C2-C7)鏈烷?；趸?、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺?；⒖捎枚嘀寥齻€(C1-C6)烷基獨(dú)立取代的脒基、或用二個氧與所述芳環(huán)或雜芳環(huán)結(jié)構(gòu)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代，其中(i)Rxa、Rya和R2a的取代基可在Rxa、Rya和R2a中的兩個之間結(jié)合形成第二個橋接，包括(1)(C1-C2)烷基或鏈烯基，它可用一個或多個(C1-C6)烷基獨(dú)立取代，(2)硫，(3)氧，(4)氨基，它可用一個(C1-C6)烷基取代氫，(5)羰基，(6)-CH2C(＝O)-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(7)-C(＝O)-O-，(8)-CH2-O-，它可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代氫，(9)-C(＝O)N(R24)，其中R24為氫或(C1-C6)烷基，(10)-CH2-NH-，它可用多至三個(C1-C6)烷基取代氫，或(11)-CH＝N-，它可用(C1-C6)烷基取代氫，或其中Rxa、Rya和R2a的二個直接以單鍵連接；(2iv)Rxb和R2b獨(dú)立為單鍵或(C1-C2)亞烷基；(2v)Ryb為單鍵、氧雜、(C1-C2)亞烷基、亞乙基或-CH＝(其中所述雙鍵與X連接)、硫雜、亞甲氧基或亞甲硫基、或-N(R6)或-CH2-N(R6*)-，其中R6和R6*為氫或(C1-C6)烷基，其中當(dāng)X為氮時X不與其它雜原子相連；(3)R1包括直鏈(C2-C3)脂肪族基團(tuán)；當(dāng)X為碳時，為＝N-O-(亞乙基)，其中未配對雙鍵與X連接；(當(dāng)X為碳，Ryb不包括與X連接的雜原子時)，其中R8或R8*為亞乙基或亞乙烯基的-O-R8或-S-R8*并且O或S與X相連接；(當(dāng)X為碳，Ryb不包括與X連接的雜原子時)，其中所述氨基與X相連接的氨基亞乙基其中R1可被至多一個羥基、至多一個(C1-C6)烷氧基或至多一個(C2-C7)鏈烷酰氧基、至多二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基、至多一個氧代基、至多一個(C1-C6)亞烷基所取代，前提為所述羥基、烷氧基、鏈烷酰氧基或氧代基取代基不與與氮或氧相連的碳相連；其中R1的烷基或亞烷基取代基可連接形成3-7元非芳香環(huán)；和其中如果X為氮，X以單鍵與R1相連接，連接R1與氮的R1的端基碳是飽和的；(4)R3(a)為氫、(C1-C6)烷基、或苯基或其中烷基為C1-C6的苯基烷基并且該苯基可用上述Rxa的芳基或雜芳基所定義的相同的取代基所取代，(b)為-R12Z(Rxx)(Ryy)(R11)，其中R12與N結(jié)合，Z獨(dú)立與X相同，Rxx獨(dú)立與Rx相同，Ryy獨(dú)立與Ry相同，R11獨(dú)立與R2相同，R12獨(dú)立與R1相同，或(c)與R4共同形成如下C環(huán) 其中當(dāng)C環(huán)存在時，R4*為氫；(5)n為0或1，并且當(dāng)n為1時，R3*為(C1-C6)烷基(與之相連接的氮帶正電荷)或氧(形成N-氧化物)，X為碳；(5’)Q與所述環(huán)上氮和帶有R5的環(huán)上碳共同形成C環(huán)，其中C環(huán)為3-8元環(huán)、被3-6元螺環(huán)取代的3-8元環(huán)、或與5-6元環(huán)稠合的3-8元環(huán)，其中缺少所述環(huán)上氮的稠合環(huán)可以為芳環(huán)或雜芳環(huán)，其中對每一個C環(huán)的組成環(huán)而言，具有選自氧、硫或氮的多至二個雜原子，包括所述氮和其余碳，其前提為環(huán)上原子包括所述氮正是季氮，其前提為在飽和環(huán)中，至少二個插入碳原子將環(huán)上氮原子與環(huán)上其它雜原子分隔開來其中C環(huán)的碳和氮環(huán)原子可以用選自下列的取代基取代(C1-C6)烷基、(C2-C6)亞鏈烯基、氰基、硝基、三氟甲基、(C2-C7)烷氧基羰基、(C1-C6)亞烷基、羥基、(C1-C6)烷氧基、氧代基、羥基羰基、如Rxa所定義的芳基或如Rxa定義的雜芳基，其前提為被亞烷基、羥基羰基或氧代基所取代的環(huán)上原子為碳，進(jìn)一步的前提為被羥基或烷氧基所取代的環(huán)上原子與環(huán)上其它雜原子被至少二個插入碳原子分離開來；(6)R4和R4*獨(dú)立為氫或(C1-C6)烷基或R4和R4*之一可以為(C1-C6)羥基烷基；和(7)R5為(CO)NR13R14、(CO)OR15、(CO)SR16、(SO2)NR17R18、(PO)(OR19)(OR20)、(CR22)(OR23)(OR24)、CN或四唑-5-基，其中R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19和R20分別獨(dú)立為氫、可包括(C3-C8)環(huán)烷基的(C1-C8)烷基(其中與R15的氧或與R16的硫連接的碳沒有超過二級支鏈)、(C2-C6)羥基烷基、氨基烷基(其中所述烷基為C2-C6，所述氨基可被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基所取代)、芳基烷基(其中所述烷基為C1-C6)、雜芳基烷基(其中所述烷基為C1-C6)、芳基或雜芳基，R22為氫或OR25，R23、R24和R25為(C1-C6)烷基、苯基、芐基、乙?；?，當(dāng)R22為氫時，R23和R24的烷基可以結(jié)合成包括1，3-二氧戊環(huán)或1，3-二氧六環(huán)其中所述芳基為苯基或萘基，所述雜芳基為五元環(huán)、六元環(huán)、與五元環(huán)稠合的六元環(huán)、與六元環(huán)稠合的五元環(huán)或與六元環(huán)稠合的六元環(huán)，其中所述雜芳基為芳香基并含有選自氧、硫和氮的雜原子，而剩余環(huán)上原子為碳；其中所述芳基、雜芳基、芳基烷基的芳基或雜芳基烷基的雜芳基可以被選自下列的取代基所取代氟、氯、溴、硝基、氰基、羥基、三氟甲基、可有多至二個獨(dú)立的(C1-C6)N-烷基取代基的氨基磺酰基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C1-C6)烷基胺、每一個烷基為獨(dú)立的C1-C6的二烷基胺、氨基、(C1-C6)烷氧基、(C2-C7)鏈烷?；?C2-C7)鏈烷?；趸?、三氟甲氧基、羥基羰基、(C2-C7)烷氧基羰基、可被多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基N-取代的氨基羰基、(C1-C6)烷基磺?；⒖杀欢嘀寥齻€(C1-C6)烷基取代的脒基、或用二個氧與芳環(huán)或雜芳環(huán)結(jié)構(gòu)上相鄰位置鍵合的亞甲二氧基或亞乙二氧基，該亞甲二氧基或亞乙二氧基可用多至二個獨(dú)立的(C1-C6)烷基取代；和其中R13和R14可與氮一起形成含有選自氧和硫的另外一個雜原子的5-7元環(huán)。
26. 權(quán)利要求25的方法，其中所述痙攣狀態(tài)與癲癇、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷、多發(fā)性硬化癥、脊髓創(chuàng)傷或肌張力障礙有關(guān)。
27. 權(quán)利要求26的方法，其中所述神經(jīng)變性性疾病為Alzheimer氏疾病、多梗塞性癡呆、AIDS癡呆、Parkinson氏疾病、Huntington氏疾病、肌萎縮性側(cè)索硬化或中風(fēng)或頭部創(chuàng)傷。
28. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括A)使下式化合物1) 其中L1為親核取代離去基團(tuán)，與下式化合物反應(yīng)2) 或B)使下式化合物1) 與下式化合物反應(yīng)2) 其中L2為親核取代離去基團(tuán)。
29. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括A)將下式化合物1) 用下式化合物還原烷基化，2) 其中R1*與R1不同之處在于它沒有作為所述醛羰基一部分的碳，或B)將下式化合物1) 用下式化合物還原烷基化2)
30. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括將RdNH2用下式化合物還原烷基化 其中Rd和Rc獨(dú)立與Rx所定義的相同，并且其中R27與R1定義相同，但它不包括氮、氧或硫并且也不包括任何與上述羰基共軛的雙鍵。
31. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括使RfOH或Rf*SH與下式化合物反應(yīng) 分別形成醚或硫醚，其中Rc、Rf或Rf*獨(dú)立與Rx所定義的相同，其中R27與R1定義相同，但它不包括氮、氧或硫并且也不包括任何與上述L5-取代碳相結(jié)合的原子上的雙鍵，其中L5為親核取代離去基團(tuán)。
32. 權(quán)利要求31的方法，還包括通過下列步驟合成下式化合物 將下式化合物的羥基 用其它親核取代離去基團(tuán)取代。
33. 權(quán)利要求32的方法，該方法包括使下式化合物 在膦化合物存在下與偶氮二羧酸酯反應(yīng)。
34. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括使ReM與下式化合物反應(yīng) 形成下式化合物 其中，Re和Rc獨(dú)立與Rx的定義相同，其中M為含金屬取代基，所以ReM為有機(jī)金屬試劑，其中R27與R1定義相同，但是它包括氮、氧或硫，且不包括任何與上述羰基共軛的任何雙鍵。
35. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括將下式化合物脫水 形成下式化合物 其中C*與相鄰的碳形成雙鍵，Re和Rc獨(dú)立與Rx的定義相同，R28和R28*與R1定義相同，但是R28和R28*不包括氮、氧或硫。
36. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括使下式的化合物還原 其中C*與相鄰的碳形成雙鍵，Rc獨(dú)立與Rx的定義相同，形成下式的化合物 其中Rc獨(dú)立與Rx定義相同，R28和R28*與R1定義相同，但是R28和R28*不包括氮、氧或硫。
37. 合成可以用于合成權(quán)利要求1的化合物的化合物的方法，該方法包括合成下式的化合物 其中Rc獨(dú)立與Rx定義相同，所述合成包括使下式的化合物 與下式化合物反應(yīng) 其中R27與R1定義相同，但是它不包括氮、氧或硫，且不包括任何與上述羰基共軛的雙鍵，其中L3為親核取代離去基團(tuán)。
38. 合成權(quán)利要求1的化合物的方法，該方法包括使下式的化合物 其中Rc獨(dú)立與Rx定義相同，與Ar-Q反應(yīng)，其中Ar為被一個吸電子基團(tuán)取代的芳基或被吸電子基團(tuán)取代的雜芳基，其中Q為氟或氯，形成 其中R28與R1定義相同，但是R28不包括氮、氧或硫。
39. 合成可以用于合成權(quán)利要求1的化合物的化合物的方法，該方法包括通過下列步驟合成式X化合物 使下式的化合物 與RdNHSO2Ar反應(yīng)，其中Rc和Rd獨(dú)立與Rx相同，Ar為芳基或雜芳基，其中R28與R1定義相同，但是R28不包括氮、氧或硫。
40. 權(quán)利要求39的方法進(jìn)一步包括將式X化合物轉(zhuǎn)化為
41. 合成用于合成權(quán)利要求1的化合物的化合物的方法，該方法包括使下式的化合物 與下式的化合物反應(yīng) 其中L4為親核取代離去基團(tuán)，Rc獨(dú)立與Rx相同，R28與R1定義相同，但是R28不包括氮、氧或硫，形成下式的化合物
42. 合成可以用于合成權(quán)利要求1的化合物的化合物的方法，該方法包括合成下式的化合物 其中Rc獨(dú)立與Rx相同，R27與R1定義相同，但R27不包括氮、氧或硫且R27不包括任何在與上述羥基取代的碳結(jié)合的原子上的雙鍵，所述合成包括下式化合物的酮的還原
全文摘要
本發(fā)明提供含有式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的用于治療神經(jīng)和神經(jīng)精神障礙的藥物。
文檔編號A61K31/445GK1327383SQ97196821
公開日2001年12月19日 申請日期1997年5月29日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月31日
發(fā)明者V·I·奧格亞諾, L·博登, S·C·貝爾, J·張 申請人:阿列里克斯神經(jīng)科學(xué)公司