專利名稱：口服肽類藥品的制作方法
發(fā)明的背景發(fā)明的領域本發(fā)明涉及活性化合物分子結構中包括多個氨基酸和至少一個肽鍵的口服肽類藥品，及增加這種肽類活性化合物口服給藥時的生物利用度的方法。
相關技術的描述各種人類激素、神經(jīng)遞質和其它重要的生物化合物具有肽作為其分子結構的主要部分。很多疾病對患者體內(nèi)這些肽類化合物水平的升高產(chǎn)生正性應答反應。治療有效量的這種生物學上有關的肽可以各種方式給予患者。但是，如下面將進一步討論的，較佳的口服給藥對于這類活性化合物是很困難的。
例如，鮭降鈣素是降低鈣從骨中攝取的肽類激素。將其用于治療與骨有關的疾病和鈣代謝紊亂(如骨質疏松癥、Paget′s病、惡性腫瘤的高血鈣癥等)時，有幫助維持骨密度的作用。很多類型的降鈣素已被分離出來(人降鈣素、鮭降鈣素、鰻降鈣素、糜降鈣素(elkatonin)、豬降鈣素和雞降鈣素)。在各種降鈣素之間存在明顯的結構非同源性。例如，在構成人降鈣素的氨基酸和構成鮭降鈣素的氨基酸之間只有50％相同。盡管在分子結構有差異，鮭降鈣素仍可用于人上述降鈣素反應性疾病的治療。
現(xiàn)有技術中所用的肽類藥品常通過注射或經(jīng)鼻給藥。胰島素是常通過注射給藥的肽類藥品的一個例子。較好的口服給藥法易產(chǎn)生問題，因為肽類活性化合物對胃腸的降解非常敏感。例如，據(jù)信現(xiàn)有技術未報告過鮭降鈣素口服給藥時達到可重復的血濃度的能力。這是因為鮭降鈣素在胃腸道中缺乏足夠的穩(wěn)定性，且不易經(jīng)腸壁進入血液。然而，注射和經(jīng)鼻給藥顯然是不方便的，比起口服來，更多的患者感到不適。這種不方便和不適常導致病人實質上不配合治療。因此，本技術領域對于更有效、可重復的肽類藥品(如胰島素、鮭降鈣素和本文中更詳細討論的其它肽類)的口服給藥產(chǎn)生需求。
胃和腸的蛋白分解酶可降解肽，使其在吸收到血流中之前就失活。從胃蛋白酶(典型地具有酸性最適pH)的蛋白分解降解幸存的任何量的肽以后要面臨小腸的蛋白酶和胰臟分泌的酶(典型地具有中性至堿性的最適pH)。由諸如鮭降鈣素之類肽口服給藥所引起的具體困難涉及分子體積相當大及其所帶電荷的分布。這使鮭降鈣素更難滲透腸壁粘膜或經(jīng)腸道刷狀緣膜進入血液。這些外加的問題可進一步與有限的生物利用度有關。
發(fā)明的概述因此，本發(fā)明的一個目的是提供可靠地釋放肽類藥物(如生理活性肽藥物，如胰島素、鮭降鈣素、血管加壓素及本文討論的其它肽)的治療有效量的口服藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供增加這些肽的生物利用度的治療方法。
本發(fā)明的還有一個目的是提供口服鮭降鈣素治療與骨有關的疾病和鈣代謝紊亂的方法。
另一方面，本發(fā)明提供口服給藥的生理活性肽的藥物組合物，包含(A)治療有效量的所述活性肽；(B)至少一種藥學上可接受的pH降低劑；(C)至少一種有效地提高所述活性藥物生物利用度的吸收促進劑；和(D)將所述藥物組合物經(jīng)患者的胃有效轉運的抗酸保護賦形劑，它阻止所述活性肽和胃蛋白酶接觸；其中，所述藥物組合物中存在一定量的所述pH降低劑，其量為若所述組合物加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中，則足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
較佳的肽活性劑包括但不限于胰島素、血管加壓素、鮭降鈣素和下面討論的其它肽，特別是鮭降鈣素。
另一方面，本發(fā)明提供提高肽治療活性劑口服給藥的生物利用度的方法，所述方法包括將所述肽活性劑、及至少一種pH降低劑和至少一種吸收促進劑選擇性地釋放到患者的腸中，這是在所述肽活性劑、pH降低劑和至少一種吸收促進劑在能實質上阻止胃蛋白酶和所述肽接觸的抗酸性保護賦形劑的保護下通過所述患者的嘴和胃之后發(fā)生的。
其中所述pH降低劑和與其一起釋放的其它化合物釋放到所述腸道的量為如果加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
另一方面，本發(fā)明提供增加口服給藥鮭降鈣素的生物利用度的方法，所述方法包括將所述鮭降鈣素、及至少一種pH降低劑和至少一種吸收促進劑選擇性地釋放到患者的腸中，這是在所述鮭降鈣素、所述pH降低劑和所述吸收吸收促進劑在能實質上阻止胃蛋白酶和所述鮭降鈣素接觸的腸溶包衣的保護下通過所述患者的嘴和胃之后發(fā)生的。
其中所述降低pH的化合物被所述賦形劑釋放到所述腸道的量為如果加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
我們相信，通過同時保護肽類活性化合物免受(1)胃蛋白酶(它們典型地在酸性pH下活性最大)和(2)腸或胰蛋白酶(它們典型地在堿性至中性pH下活性最大)的蛋白分解，本發(fā)明減少了肽類活性化合物蛋白分解的降解可能性。
然后，我們相信，本發(fā)明促進肽類通過腸道刷狀緣膜進入血液的過程，并繼續(xù)保護肽類化合物免受蛋白分解的降解作用。
抗酸性保護賦形劑保護肽類活性劑免受胃內(nèi)酸激活的蛋白酶的作用。然后，大量的酸(肽類活性化合物與其混合)通過將pH降低到腸內(nèi)中性至堿性激活的蛋白酶(如luminal或消化蛋白酶和刷狀緣膜的蛋白酶)最適活性范圍以下而降低它們的活性。本發(fā)明的吸收促進劑可用于促進肽類藥物轉運通過腸粘膜層、通過刷狀緣膜和進入血液。
按照本發(fā)明，吸收促進劑和降低pH化合物的同時使用，與單用吸收促進劑或單用降低pH化合物相比，提供了對生物利用度的驚人的協(xié)同效應。比較表4(見下面)制劑Ⅰ(單用鮭降鈣素)、表3制劑Ⅰ(鮭降鈣素和降低pH化合物)和表4制劑Ⅱ(鮭降鈣素和吸收促進劑)與表4制劑Ⅲ(鮭降鈣素、降低pH化合物和吸收促進劑)。
本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將從下面發(fā)明的詳細描述中變得更明了。
發(fā)明的詳細描述按照本發(fā)明，對需要用肽類活性成分治療的患者以適當?shù)膭┝刻峁┧鼈兊目诜幬锝M合物，較佳為而不是必須為藥學工業(yè)上通常大小的片劑或膠囊劑。劑量和給藥次數(shù)在下面作更詳細的描述。可能受益的患者是罹患對含肽化合物濃度增高反應好的任何人。例如，按照本發(fā)明的口服鮭降鈣素可用于治療罹患鈣代謝紊亂或骨病的患者。例如，本發(fā)明可用口服降鈣素，特別是鮭降鈣素，治療骨質疏松癥、佩吉特(Paget′s)病、惡性腫瘤的高血鈣等。
由于各種原因，鮭降鈣素是按照本發(fā)明使用的較佳的活性成分。例如，即使用于患病的人，它也提供甚至優(yōu)于人降鈣素的各種優(yōu)點。用鮭降鈣素代替入降鈣素治療人骨質疏松癥中提供的優(yōu)點有效力增加、鎮(zhèn)痛和半衰期延長。在治療中，鮭降鈣素比天然人降鈣素更有效，因為比起人降鈣素來，需要的劑量低。鮭和人降鈣素之間有實質上的非同源性，兩種降鈣素的氨基酸序列之間只有50％相同。
申請人發(fā)現(xiàn)，鮭降鈣素按本發(fā)明口服給藥時其生物利用度意想不到地比從其分子量所預料的要高。申請人發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的一個口服制劑中，鮭降鈣素的生物利用度明顯地超過申請人內(nèi)部比較試驗中的一個分子量可比的肽-甲狀旁腺素(甲狀旁腺素為34個氨基酸，鮭降鈣素為32個氨基酸)。
申請人不想受理論的束縛，相信本發(fā)明的藥物組合物克服了一系列不同和無關的對生物利用度的天然屏障。藥物組合物的各成分通過各自合適的機制起克服各種屏障的作用，在肽類活性成分的生物利用度上產(chǎn)生協(xié)同效應。如下面所述的，鮭降鈣素和其它肽類固有的理化性質使某些吸收促進劑比其它物質更有效地提高其生物利用度。
肽類活性化合物可口服給藥。按照本發(fā)明，胃蛋白酶(其中大多數(shù)在酸性pH范圍內(nèi)有活性)和腸或胰蛋白酶(其中大多數(shù)在中性至堿性pH范圍內(nèi)有活性)對肽的蛋白分解降解減弱。溶解促進劑幫助肽類活性劑通過腸上皮細胞屏障。
而且，不想受理論的束縛，顯然，按照本發(fā)明，在實質上阻止鮭降鈣素或其它活性肽和任何能使其降解的胃蛋白酶接觸的合適的抗酸保護性賦形劑的保護下，肽轉運通過胃。一旦本發(fā)明的藥物組合物通過胃進入堿性至中性pH占優(yōu)勢的腸區(qū)，在此處蛋白酶傾向于有堿性至中性最適pH，則腸溶衣或其它賦形劑釋放肽和酸(互相接近)。
據(jù)信該酸將腸道局部pH(此處釋放活性物質)降低到很多腸內(nèi)蛋白酶的最適范圍以下。這樣的pH降低減弱了腸內(nèi)蛋白酶的蛋白分解活性，從而對出于可能降解狀態(tài)的肽提供了保護。這些蛋白酶的活性被本發(fā)明提供的臨時性酸性環(huán)境所削弱。以提供足夠的酸使腸道局部pH暫時降低到5.5或更低為宜，4.7或更低較佳，3.5或更低則更佳。下面所述的碳酸氫鈉試驗(在題為“pH降低劑”一節(jié)中)指示所需的酸量。腸內(nèi)pH降低狀況持續(xù)的時間較佳為足以保護肽類藥物不受蛋白分解的降解作用直至至少部分肽類藥物有機會通過腸壁進入血流。對于鮭降鈣素來說，試驗證明，鮭降鈣素直接注入十二指腸、回腸或結腸，活性成分血濃度峰值的時間Tmax為5-15分鐘。降低蛋白酶活性的情況成功的同時，本發(fā)明的吸收促進劑協(xié)同地促進肽吸收達到血液中。
據(jù)信本發(fā)明達到提高生物利用度目標的機制借助于藥物組合物的活性成分盡可能同時釋放。為此，較佳的是與保護不受胃蛋白酶降解相一致地將腸溶衣的體積保持到盡可能低。從而，腸溶衣不見得干擾肽的釋放，或干擾其它成分在與肽非常接近的時間內(nèi)釋放。腸溶衣加入的重量通常應低于藥物組合物其余成分(即除了腸溶衣外組合物的其它成分)的30％。較佳的為低于20％，更佳的為相對于未包衣成分的重量所加的腸溶衣在10％-20％之間。
可以是溶解促進劑和/或轉運促進劑的吸收促進劑(下面作更詳細的描述)幫助肽類藥物從腸道轉運到血液，并可促進在腸內(nèi)pH降低和腸內(nèi)蛋白分解活性降低的時期該過程能更好地出現(xiàn)。很多表面活性劑可同時起溶解促進劑和轉運(攝取)促進劑的作用。不想受理論的束縛，相信促進溶解能提供(1)本發(fā)明的活性成分更同時釋放到腸道的含水部分，(2)肽更好地溶解或轉運通過沿腸壁的粘液層。一旦肽類活性成分到達腸壁，攝取促進劑則使其經(jīng)跨細胞或細胞旁轉運而更好地通過腸刷狀緣膜轉運進入血液。如下面更詳細討論的，很多較佳的化合物可提供這兩種功能。在那些情況下，利用這兩種功能的優(yōu)選實施例可通過僅加入一種外加化合物到藥物組合物中即可做到。在其它實施例中，分開的吸收促進劑可分別提供這兩種功能。
本發(fā)明的藥物組合物的每一種優(yōu)選成分分別討論如下。與只用單一pH降低劑和/或單一促進劑一樣，可合用多種pH降低劑或多種促進劑。某些優(yōu)選組合物也在下面討論。
肽類活性成分可受益于本發(fā)明的口服給藥的肽類活性成分包括生理學上有活性的、分子結構中有多個氨基酸及至少一個肽鍵的任何治療劑。本發(fā)明通過若干種機制抑制活性成分被蛋白酶降解，否則這些酶易裂解活性成分的一個或幾個肽鍵。分子結構還可包括其它取代基或變體。例如，鮭降鈣素(本發(fā)明中一種較佳的肽類活性劑)在其C-末端被酰胺化。按照本發(fā)明，不論人工制造的和天然的肽均可口服給藥。
本發(fā)明的肽類活性化合物包括(但不限于)胰島素、血管加壓素、降鈣素(不僅包括較佳的鮭降鈣素，而且包括其它降鈣素)。其它例子包括降鈣素基因相關性肽、甲狀旁腺素、促黃體素釋放因子、紅細胞生成素、組織纖溶酶原激活物、人生長因子、促腎上腺皮質激素、各種白細胞介素、腦啡肽等。很多其它肽是本領域已知的?？梢灶A想到，具有在胃腸道中可被裂解的肽鍵的任何藥物化合物均因本發(fā)明提供的這種降解的減少而受益于本發(fā)明的口服給藥法。
使用鮭降鈣素時，較佳為包含相當于全部藥物組合物總重量(除去腸溶包衣)的0.02-0.2％。鮭降鈣素有市售品(例如，購自BACHEM,Torrence,California)?；蛘撸捎靡阎椒ê铣?，其中有些簡單討論如下。根據(jù)對活性化合物所需的靶血濃度及其在本發(fā)明的口服給藥系統(tǒng)中的生物利用度(表8報告了幾種)，其它肽類活性劑應以較高或較低的濃度存在。
用本領域的化學或重組合成技術，可制備鮭降鈣素的前體。其它酰胺化的肽類活性劑的前體可按類似的方法進行制備。相信重組生產(chǎn)價格昂貴。用同樣是本領域已知的酰胺化反應將前體轉化為活性鮭降鈣素。例如，美國專利4,708,934和歐洲專利公開公報0308067和0382403中所述的酶促酰胺化反應。對于前體和催化前體向鮭降鈣素轉化的酶來說，重組制備是較佳的。這樣的重組制備在Biotechmology,Vol.11(1993)pp.64-70中加以討論，該文進一步描述了前體向酰胺化產(chǎn)物的轉化。該文所報告的重組產(chǎn)物與天然鮭降鈣素和用溶液和固相肽化學合成制得的鮭降鈣素相同。
例如，用谷胱甘肽-S-轉移酶在大腸桿菌中制備甘氨酸延伸的鮭降鈣素前體，為一可溶性熔融蛋白，可進行較佳的鮭降鈣素(rsCT)的制備。除了在C末端(此處，鮭降鈣素以-pro-NH2為末端，而前體以-pro-gly為末端)外，甘氨酸延伸的前體具有和活性鮭降鈣素相同的分子結構。上述出版物中所述的一種α-酰胺化酶催化前體向鮭降鈣素轉化。該酶以重組制備為佳，例如，如上面所引的生物技術論文所述，在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中進行制備。其它酰胺化肽的前體可以類似的方法進行制備。不需要酰胺化或其他外加官能團的肽也可以類似的方法進行制備。其他肽類活性劑為市售品或可用本領域已知的方法進行制備。
pH降低劑與每次鮭降鈣素給藥同時給予的降低pH的化合物的總量最好應該是這樣的量當其釋放到腸道中時，足以將腸道局部pH降低到該處所見蛋白酶的最適pH之下。所需要的量必然隨幾個因素而異，這些因素包括所用的pH降低劑的類型(下面討論)和一定的pH降低劑所提供的質子當量。實際上，提供好的生物利用度所需要的量是這樣的當它加到0.1M碳酸氫鈉溶液10ml中時，將該碳酸氫鈉溶液的pH降低到不大于5.5，較佳為不大于4.7，最佳為不大于3.5。在上述試驗中，某些實施例中可用降低ph到約2.8的足量的酸。在本發(fā)明的藥物組合物中以使用至少300mg pH降低劑為宜，至少400mg pH降低劑則更佳。上述選擇量指兩種或兩種以上這樣pH降低劑合用時其總的合用量?？诜苿┎粦喈斄康娜魏螇A，當其與降低pH的化合物一起釋放時，會阻止上述碳酸氫鈉試驗的pH降低到5.5或更低。
本發(fā)明的pH降低劑可以是在胃腸道內(nèi)無毒、能釋出氫離子(傳統(tǒng)的酸)或從局部環(huán)境引起較高的氫離子含量的任何藥學上可接受的化合物。它還可以是這些化合物的任何合并使用。較好的是，至少一種本發(fā)明所用的pH降低劑其pKa值不大于4.2，更好的是不大于3.0。還要好的是，在室溫下pH降低劑在水中的溶解度至少為30g/100ml水。
可引起較高氫離子含量的化合物有例如氯化鋁和氯化鋅。藥學上可接受的傳統(tǒng)酸包括(但不限于)氨基酸的酸式鹽(如氨基酸鹽酸鹽)或其衍生物。它們的例子有乙酰谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甜菜堿、肉堿、肌肽、瓜氨酸、肌酸、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、羥賴氨酸、羥脯氨酸、亞牛黃酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲基組氨酸、正亮氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、肌氨酸、絲氨酸、牛黃酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈氨酸的酸式鹽。
有用的降低pH化合物的其它例子包括羧酸，如乙酰水楊酸、乙酸、抗壞血酸、檸檬酸、富馬酸、葡糖醛酸、戊二酸、甘油酸、甘氨膽汁酸、乙醛酸、異檸檬酸、異戊酸、乳酸、馬來酸、草酰乙酸、草酰琥珀酸、丙酸、丙酮酸、琥珀酸、酒石酸、戊酸等。
在本領域中可能不常叫做“酸”但按照本發(fā)明可能是有用的其它有用的pH降低劑是磷酸酯類(如果糖-1,6-二磷酸、葡萄糖-1,6-二磷酸、磷酸甘油酸和二磷酸甘油酸)。CARBOPOL(商標，BF Goodrich)和polycarbophil之類聚合物也可用于降低pH。
在上述碳酸氫鈉試驗中能達到不大于5.5的所需pH水平的任何pH降低劑的組合均可試驗。一個優(yōu)選實施方案利用選自檸檬酸、酒石酸和氨基酸酸式鹽的一種酸作為藥物組合物的pH降低劑。
當鮭降鈣素是肽類活性劑時，pH降低劑與鮭降鈣素的一定比例被證明是特別有效的。pH降低劑與鮭降鈣素的重量比以超過200∶1為宜，較好為800∶1，最好為2000∶1。
吸收促進劑吸收促進劑以構成相當于藥物組合物總重量(除了腸溶包衣外)0.1-20.1％的量為宜。較佳的吸收促進劑為兼具溶解促進劑和攝取促進劑作用的表面活性劑。一般說來，“溶解促進劑”改善本發(fā)明的成分溶解于它們原來要釋放于其中的水性環(huán)境的能力或溶解到沿腸壁的粘液層的親脂性環(huán)境中的能力，或二者兼有?！稗D運(攝取)促進劑”(它們常常是用作溶解促進劑的同樣的表面活性劑)是有利于肽類藥物通過腸壁的那些化合物。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，一種或一種以上吸收促進劑可能只起一種功能(如溶解性)，或一種或一種以上吸收促進劑只能起其它功能(如攝取)。也可能有幾種化合物的混合物，其中一些化合物改善溶解性，一些化合物改善攝取和/或一些化合物二者兼具。本發(fā)明者不想受理論的束縛，相信攝取促進劑可通過以下機制起作用(1)增加腸細胞膜外疏水區(qū)域的無序化，使跨細胞轉運增加；(2)瀝濾膜蛋白，導致跨細胞轉運增加；或(3)增寬細胞間的孔徑以增加細胞旁的轉運。
相信表面活性劑作為溶解促進劑和攝取促進劑都是有用的。例如，去污劑在以下方面有用(1)將所有活性成分很快溶解到它們原來要釋放的水性環(huán)境中；(2)增加本發(fā)明的成分，特別是肽類活性藥物的親脂性，幫助其進入和通過腸粘液；(3)增強通常是極性的肽類活性劑通過刷狀緣膜上皮細胞屏障的能力；(4)如上所述，增加跨細胞或細胞旁轉運。
當表面活性劑用作吸收促進劑時，它們以自由流動粉末為宜，以便在制造過程中有利于混合和裝入膠囊。由于鮭降鈣素和其它肽的固有特性(如它們的等電點、分子量、氨基酸組成等)，某些表面活性劑與某些肽相互作用得最好。事實上，有些表面活性劑可與鮭降鈣素的荷電部分不合需要地相互作用，阻止其吸收，從而不合需要地導致生物利用度降低。當試圖增加鮭降鈣素或其它肽的生物利用度時，用作吸收促進劑的任何表面活性劑宜選自如下物質組成的組(ⅰ)陰離子表面活性劑，它們是膽甾醇衍生物(如膽汁酸)；(ⅱ)陽離子表面，活性劑(如?；鈮A類、磷脂類等)，(ⅲ)非離子型表面活性劑，和(ⅳ)陰離子型表面活性劑(特別是具有線性烴區(qū)域的陰離子型表面活性劑)和負電荷中和劑的混合物。負電荷中和劑包括(但不限于)?；鈮A類、氯化鯨蠟基吡啶鎓等。較佳的是吸收促進劑溶于酸性pH，特別是在3.0-5.0范圍內(nèi)。
一個實施得很好的特佳結合是將均在酸性pH溶解的陽離子型表面活性劑和陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物混合。
特別好的結合是酸溶性膽汁酸與陽離子型表面活性劑。?；鈮A和蔗糖酯是一種好的結合。單獨使用一種特殊的吸收促進劑時，以陽離子型表面活性劑為宜。?；鈮A類(如月桂酰肉堿)、磷脂類和膽汁酸類是特別好的吸收促進劑，特別是?；鈮A。在同樣的實施方案中也使用陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物。這些選擇的目的是避免與肽類藥物相互作用，這會干擾肽類藥物吸收到血液中。
為了減少副作用發(fā)生的可能性，用作本發(fā)明的吸收促進劑的較佳的去污劑可以是可生物降解的或可重吸收的(例如，在生物學上可再循環(huán)的化合物，如膽汁酸類、磷脂類和/或?；鈮A類)，較佳的是可生物降解的。?；鈮A類在促進細胞旁轉運上被認為特別有用。當膽汁酸(或其它缺乏線性烴的陰離子型去污劑)與陽離子型去污劑合用時，鮭降鈣素較好地轉運到腸壁中或通過腸壁。
較佳的吸收促進劑包括(a)水楊酸鹽，如水楊酸鈉、3-甲氧基水楊酸鹽、5-甲氧基水楊酸鹽和高香草酸鹽；(b)膽汁酸，如牛黃膽酸、牛黃去氧膽酸、去氧膽酸、膽酸、乙醇酸、石膽酸鹽、鵝膽酸、熊去氧膽酸、熊膽酸、去氫膽酸、梭鏈孢酸等；(c)非離子型表面活性劑，如聚氧乙烯醚類(如Brij 36T、Brij 52、Brij56、Brij 76、Brij 96、Texaphor A6、Texaphor A14、Texaphor A60等)、對叔辛基酚聚氧乙烯類(Triton-45、Triton-100、Triton-114、Triton-305等)、壬基芐氧基聚氧乙烯類(如Igepal CO系列)、聚氧乙烯脫水山梨醇酯類(如吐溫20、吐溫80等)；(d)陰離子型表面活性劑，如二辛基磺基琥珀酸鈉；(e)溶血磷脂類，如溶血卵磷脂和溶血磷脂酰乙醇胺；(f)?；鈮A類，?；憠A類和?；被犷?，如月桂?；鈮A、肉豆蔻?；鈮A、棕櫚?；鈮A、月桂?；憠A、肉豆蔻?；憠A、棕櫚?；憠A、十六烷基賴氨酸、N-?；奖彼帷-?；拾彼岬?；(g)水溶性磷脂類，如二庚?；字Ｄ憠A，二辛基磷脂酰膽堿等；(h)中等鏈長的甘油酯，它們是含中等鏈長脂肪酸(辛酸、癸酸和月桂酸)的甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯的混合物；(i)乙二胺四乙酸；(i)陽離子型表面活性劑，如氯化鯨蠟基吡啶鎓；(k)聚乙二醇的脂肪酸衍生物，如Labrasol,Labrafac等；和(1)烷基糖化物，如月桂基麥芽糖苷、月桂?；崽?、肉豆蔻?；崽恰⒆貦磅；崽堑?。
不想受理論的束縛，在某些實施例中包括陽離子交換劑(如去污劑)，通過其它可能的機制增加溶解度。特別是，它們可能阻止鮭降鈣素或其它肽類活性劑與粘液的結合。較佳的陽離子交換劑包括氯化魚精蛋白或其它聚陽離子。
其它任選的成分較好的是水溶性屏障將pH降低劑與抗酸保護性賦形劑分開。在下面的一些實施例中，為了提供這一屏障而使用常規(guī)的藥物膠囊。很多水溶性屏障在本領域是已知的，包括(但不限于)羥丙基甲基纖維素和常規(guī)的藥用明膠。
在一些優(yōu)選的實施方案中，包括另一個肽(如白蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、其它動植物蛋白質等)以減少非特異性吸附(如肽與腸粘液屏障的結合)，從而降低該昂貴的肽類活性劑的必須濃度。這種肽如果加入的話，以藥物組合物總重量(除了保護性賦形劑之外)的1.0-10.0％為宜。較好的是，該第二種肽不是生理活性肽，更好的是食用肽，如大豆肽等。不想受理論的束縛，該第二種肽還可能作為蛋白酶清除劑，令人滿意地與肽類活性劑競爭與蛋白酶的相互作用，從而也可提高生物利用度。該第二種肽還可幫助活性化合物通過肝臟。
本發(fā)明的所有藥物組合物還可任意地包括通常知道大小和數(shù)量的普通的藥用稀釋劑、glycants、潤滑劑、明膠膠囊、防腐劑、著色劑等。
保護性賦形劑保護鮭降鈣素不被胃蛋白酶破壞然后本身溶解以使本發(fā)明的其它成分可在腸中釋放的任何屏障或賦形劑都是合適的。很多這樣的腸溶包衣是本領域中已知的，按照本發(fā)明是有用的。其例子包括乙酸鄰苯二甲酸纖維素、琥珀酸羥丙基甲基乙基纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、羧基甲基乙基纖維素和甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物。在一些實施例中，活性肽、吸收促進劑(如溶解促進劑和/或攝取促進劑)和降低pH的化合物包含在足夠粘的保護性糖漿中，使本發(fā)明的成分受保護地通過胃。
在本發(fā)明的其余成分裝入膠囊后，可將例如保護肽類藥物不受胃蛋白酶破壞的合適的腸溶包衣加在膠囊上。在其它實施方案中，將腸溶包衣包在片劑外面或包在活性成分顆粒的外表面，然后壓成片劑，或裝入膠囊，膠囊本身再被覆腸溶包衣。
非常令人滿意的是，本發(fā)明的所有成分盡可能同時從載體或賦形劑中釋放并溶于腸內(nèi)環(huán)境。較佳的是，賦形劑或載體在小腸內(nèi)釋放活性成分，在此促進跨細胞或細胞旁轉運的攝取促進劑比同樣的攝取促進劑如果在后面的結腸釋放可能較少引起不良的副作用。但是，要強調的是，我們相信本發(fā)明在結腸與在小腸同樣地有效。除了上面討論的賦形劑或載體外，本領域中已知許多這樣的物質。合乎需要的是(特別在如何使本發(fā)明的各種成分同時釋放上達到最適程度)使腸溶包衣保持低量。較好的是，加到藥物組合物其余部分中的腸溶包衣的量不大于30％重量(“其余部分”為除了腸溶包衣本身外的藥物組合物)。更好的是，加少于20％，特別是未包衣組合物的重量的12％-20％。較好的腸溶包衣應該是足以持續(xù)2小時阻止本發(fā)明的藥物組合物在0.1N HCl中崩解，然后能使藥物組合物在每分鐘旋轉100轉的溶解浴中在pH增加至6.3后，其所有內(nèi)容物完全釋放。
其它選擇pH降低劑與吸收促進劑的重量比以3∶1至20∶1為宜，較佳為4∶1-12∶1，最佳為5∶1-10∶1。一定的藥物組合物中，所有pH降低劑的總量和所有吸收促進劑的總量包括在上述較佳的比例中。例如，如果藥物組合物包括兩種pH降低劑和三種吸收促進劑，上述比例在兩種pH降低劑的合并總量和所有三種吸收促進劑的合并總量的基礎上進行計算。
較佳的是，pH降低劑、肽類活性劑和吸收促進劑(無論每一類是單種或多種化合物)均勻地分散于藥物組合物中。在一個實施方案中，藥物組合物包含顆粒，該顆粒包括有肽類活性劑、pH降低劑和吸收促進劑均勻分散于其中的藥用粘合劑。較佳的顆粒也可由被均勻的有機酸層包圍的酸性芯、一層促進劑和一層被有機酸外層包圍的肽所組成。顆?？蓮囊环N水性混合物制得，該混合物由諸如聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素的藥用粘合劑和本發(fā)明的pH降低劑、吸收促進劑和肽類活性劑一起組成。
制造方法本發(fā)明較佳的藥物組合物包括填充了0.25mg鮭降鈣素、400mg顆粒狀檸檬酸(例如購自Archer Daniels Midland Corp.)、50mg牛黃去氧膽酸(例如購自SIGMA)和50mg月桂酰肉堿(SIGMA)的00號明膠膠囊。
所有成分最終都填入明膠膠囊，它們以粉末狀為佳，可以任何順序加入粘合劑中。因此，使粘合劑流動約5分鐘，直至粉末完全混合于其中。再將混合好的粉末裝進明膠膠囊的大端。然后加膠囊的另一端。再將膠囊咬合。在包衣設備(如Vector LDCS 20/30 Laboratory Development Coating System(購自Vector Corp.,Marion,Iowa))中可加500個或更多個這樣的膠囊。
腸溶包衣溶液配制如下稱量500g EUDRAGIT L30 D-55(一種具有甲基丙烯酸甲酯的甲基丙烯酸共聚物，購自ROHM Tech Inc.,Maidan,Mass.)。加入411g蒸餾水，15g檸檬酸三乙酯和38g滑石粉。此包衣的量足以將約500個00號膠囊進行包衣。
將膠囊稱重，加到包衣機的滾筒中。啟動機器，使圓筒(裝有膠囊)以24-28rpm旋轉。噴霧口的溫度以約45℃為宜。出口溫度以約30℃為宜。未包衣的膠囊的溫度以約25℃為宜。氣流約為38呎3/分鐘。
然后將連接機器的管子插入如上所制備的包衣溶液中，啟動泵，將溶液送入包衣設備中，進行自動包衣?？稍谌魏螘r候停機將膠囊稱重以測定包衣量是否足夠。通常進行60分鐘包衣。然后關泵約5分鐘，機器仍在轉動，幫助包衣后的膠囊干燥。然后可關機。膠囊包衣是完成了，但建議通風干燥約2天。
由于本發(fā)明提高了生物利用度，因此本發(fā)明藥物制劑中昂貴的鮭降鈣素可保持相當?shù)偷臐舛?。具體的制劑例在下面的實施例中闡述。
患者的治療選用鮭降鈣素作為活性成分治療骨質疏松癥時，建議周期性給藥。鮭降鈣素在給人皮下給藥后代謝很快，半衰期僅20-40分鐘。但是，盡管血濃度快速降低，它對骨質疏松癥的有益效應持續(xù)時間卻長得多，可持續(xù)24小時以上。在以常規(guī)劑量注射鮭降鈣素后2小時以上，通常就沒有可測出的血濃度。因此，較好的是一個劑量周期性給藥，每周約5天。鮭降鈣素皮下給藥(100 IU)常導致血清峰濃度為約250 pcg/ml。鮭降鈣素鼻內(nèi)給藥(200 IU)證明在低至10 pcg/ml的峰濃度對骨質疏松癥有效。一些患者報告在高的峰濃度(如200 pcg/ml或以上)時有胃腸不適。因此，鮭降鈣素血清峰值在10-150 pcg/ml之間較好，在10-50 pcg/ml之間則更好。血清濃度可用本領域已知的放射免疫測定技術進行測定。住院醫(yī)師可監(jiān)測患者的反應、鮭降鈣素的血濃度或骨病的代表性標志(如尿中的pyridinoline或deoxypyridinoline)，特別是在治療的開始階段(1-6個月)。然后可略改變劑量以說明個體的代謝和反應的意義。
僅用每個膠囊100-1000微克的鮭降鈣素，較好為100-400微克，特別好為1-200微克之間，按照本發(fā)明可達到的生物利用度使口服鮭降鈣素可以上述較佳的濃度水平進入血液。
較好的是，每次給藥用一個膠囊，因為一個膠囊能最好地使多肽、pH降低劑和吸收促進劑同時釋放。這是合乎需要的，因為當酸在接近多肽釋放的時間釋放時，能夠最好地減少不合要求的對多肽的蛋白分解攻擊。將本發(fā)明的所有成分作為一個丸或膠囊來給藥，可最好地達到接近同時釋放。然而，本發(fā)明還包括例如可將需要量的酸和促進劑分在可同時給藥的兩個或兩個以上膠囊中，從而共同提供必需量的所有成分。本文所用的“藥物組合物”包括適合于對患者進行特定給藥的完全的劑量，不管它是否再分開，只要它是基本上同時給藥的即可。
下面闡述通過改變某些參數(shù)對生物利用度顯示作用的一系列表格。
除了本文關于人的研究外，由于人和動物模型中所用的動物之間的差異，各成分的量可與本申請所要求保護的量不同。
表1緩沖液pH對大鼠十二指腸鮭降鈣素吸收的影響
*緩沖液pH方法將雌性Wister大鼠(250-275g)(每個制劑3只)用氯胺酮和賽拉嗪麻醉，然后作頸動脈插管。將插管與三通閥相接，通過此閥取血樣和代之以生理鹽水。在腹腔作中線切開，將0.5ml制劑直接注射到暴露的十二指腸。通過混合不同量的等摩爾濃度檸檬酸和檸檬酸鈉來調節(jié)制劑的pH。在給予該制劑前或給予后5、15、30、60和120分鐘時取血(0.5ml)。將血樣于2600g離心10分鐘，所得的血漿上清液儲存于-20℃。用競爭性放射免疫測定法測定血漿中降鈣素的濃度。從以降鈣素血漿濃度作為時間的函數(shù)所作的點得到的曲線下的面積計算出絕對生物利用度(即相當于降鈣素靜脈注射劑量)。
結果和討論當緩沖液的pH從5(配方Ⅰ)降低到4(配方Ⅱ)時，絕對生物利用度從0.02％至0.1％增加至5倍。當pH降低到3(配方Ⅲ)時，絕對生物利用度再增加6.4倍。當pH降低到2時，降鈣素的生物利用度增加很少。當緩沖液的pH從5降低到3時，降鈣素的生物利用度總共增加至32倍。
表2檸檬酸濃度對大鼠十二指腸吸收鮭降鈣素的生物利用度的影響
方法按對表Ⅰ的注釋中所描述的方法，將在總體積0.5ml中含一定量牛黃去氧膽酸和2種不同量檸檬酸的制劑注射到麻醉大鼠十二指腸中。制劑中包括甘露醇作為測量細胞旁轉運的標志。如上所述，在不同的時間取血樣分析降鈣素。
結果和討論在9.6mg檸檬酸存在下(Ⅰ)所給的鮭降鈣素的生物利用度是0.25％，而在48mg檸檬酸存在下(Ⅱ)鮭降鈣素的生物利用度是2.43％。在一定量牛黃去氧膽酸的存在下，當配方中檸檬酸的量僅增加5倍時，鮭降鈣素的生物利用度卻增加近10倍。
表3在檸檬酸存在下促進劑對大鼠十二指腸中鮭降鈣素吸收的影響
方法按對表Ⅰ的注釋中所描述的方法，將在總體積0.5ml中含檸檬酸、降鈣素和各類促進劑的制劑注射到麻醉大鼠十二指腸中。制劑中包括甘露醇作為測量細胞旁轉運的標志。如上所述，在不同的時間取血樣分析降鈣素。
結果和討論在無促進劑時，降鈣素的絕對生物利用度是0.69％。包含水溶性磷脂(配方Ⅶ)則使生物利用度增加4.3倍，至2.97％。最有效的促進劑是糖酯類(配方Ⅴ)，在糖酯類中，降鈣素的生物利用度是5.83％。使用膽汁酸和陽離子型去污劑(配方Ⅲ)、非離子型去污劑(配方Ⅳ)和酰基肉堿(配方Ⅵ)，導致從3.03％至4.53％的中等度生物利用度。比起在配方中只有檸檬酸、無促進劑存在所觀察到的，在各類促進劑存在下降鈣素生物利用度的差異甚微。
表4在各種添加劑存在下月桂酰肉堿對大鼠十二指腸中鮭降鈣素吸收的影響
方法按對表Ⅰ的注釋中所描述的方法，將在總體積0.5ml中含月桂酰肉堿、降鈣素和各類其它化合物的制劑注射到麻醉大鼠十二指腸中。如上所述，在不同的時間取血樣分析降鈣素。
結果和討論在無檸檬酸和任何促進劑時(配方Ⅰ)，降鈣素的絕對生物利用度是0.096％。在5mg氯化月桂酰肉堿存在下(配方Ⅱ)，生物利用度增加1.8倍，至0.17％。當檸檬酸和月桂酰肉堿同時包括在內(nèi)時(配方Ⅲ)，生物利用度再增加27倍，至4.53％。月桂酰肉堿的量減少5倍而檸檬酸的量不變(配方Ⅳ)，并不明顯地降低鮭降鈣素的生物利用度。配方Ⅲ中加入5mg二庚?；字Ｄ憠A產(chǎn)生配方Ⅴ，輕度增加生物利用度(1.4倍)。用25mg牛血清白蛋白代替檸檬酸(配方Ⅵ)，則將生物利用度從4.53％(配方Ⅲ)降低到0.42％。這些結果一起表明，在諸如檸檬酸這樣的pH降低劑和諸如月桂酰肉堿這樣的促進劑之間存在協(xié)同效應。
表5配方對大鼠十二指腸鮭降鈣素吸收的影響
方法將改良的血管入口(插管)經(jīng)手術植入雄性小獵兔犬的十二指腸、回腸和結腸。將人口的中隔/儲液體植入皮下，用作降鈣素制劑的給藥部位。在將降鈣素制劑給清醒犬前后，將入口用2ml無降鈣素的制劑沖洗。在給降鈣素前t=30、15和0分鐘，及給藥后5、10、20、30、40、50、60分鐘和此后每15分鐘，共2小時，通過腿靜脈血管插管采血(2ml)。將血樣于2600g離心10分鐘，所得的血漿上清液儲存于-20℃。用競爭性放射免疫測定法測定血漿中降鈣素的濃度。從以降鈣素血漿濃度作為時間的函數(shù)所作的點得到的曲線下的面積計算出絕對生物利用度(即相當于降鈣素靜脈注射劑量)。
結果和討論在水中給藥(Ⅰ)的降鈣素的絕對生物利用度是0.015％。在192mg檸檬酸存在下(Ⅱ)，降鈣素的生物利用度增加25倍。在制劑中加入20mg牛黃去氧膽酸(Ⅲ)在絕對生物利用度上又產(chǎn)生2.2倍增加，至0.81％。降低pH的化合物檸檬酸和促進劑牛黃去氧膽酸的合并使用，在鮭降鈣素的絕對生物利用度上產(chǎn)生總共54倍的增加。
表6劑型和配方對狗口服鮭降鈣素的絕對生物利用度的影響
方法以所標示的配方充填淀粉和明膠膠囊，在包衣鍋中用鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素50(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)(增量1％)或Eudragit L 30 D-55(Ⅳ)(增量10％)包衣60分鐘。用“網(wǎng)藍法”(basket method)在溶解浴中測定膠囊在0.1N鹽酸中的穩(wěn)定性。每種標示的膠囊至少給2只狗口服，如前所述，采血、分析鮭降鈣素。
結果與100mg檸檬酸和100mg牛黃去氧膽酸混合并在淀粉膠囊(Ⅰ)中給藥的10mg鮭降鈣素的生物利用度是0.07％。當同樣的配方在明膠膠囊(Ⅱ)中給狗給藥時，鮭降鈣素的生物利用度提高到0.26％。檸檬酸量增加6倍、鮭降鈣素量減少50％，導致降鈣素生物利用度提高約3倍。
當腸溶包衣從鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素50改為Euragit L 30 D-55(一種甲基丙烯酸酯聚合物)而配方保持相同(Ⅳ)時，鮭降鈣素的生物利用度從0.62％提高到1.48％。腸溶包衣從鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素50改為EuragitL 30D-55導致膠囊在0.1N HCl中的穩(wěn)定性增加。這種穩(wěn)定性的增加導致在狗的血液中降鈣素水平的峰值出現(xiàn)在較晚的時間點上。膠囊Ⅰ、Ⅱ和Ⅱ在HCl中不穩(wěn)定，提示這些膠囊在狗的胃中可能打開了，而膠囊Ⅳ的穩(wěn)定性改善，提示它在狗的胃中是完全穩(wěn)定的，而在狗的腸中才打開。這表明，最小限度一定量的腸溶包衣是較適宜的。同時，太多的包衣可延緩降鈣素的釋放至其它重要成分(如酸和去污劑)的釋放之后。腸溶包衣以加到未包衣的藥劑量的5-15％為宜。
表7人口服降鈣素(10.5mg)的藥物代謝動力學
方法用138mg檸檬酸、105mg牛黃去氧膽酸和10.5mg鮭降鈣素充填淀粉膠囊。將膠囊在包衣鍋內(nèi)用鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素50包衣20分鐘，儲存于4℃。在研究日的早上，給禁食后的受試者服用1個膠囊，用一杯橙汁送服。在服用膠囊前15分鐘和服用降鈣素膠囊后指定的時間取血。用競爭性放射免疫試驗測定降鈣素的血濃度。從血漿降鈣素濃度作為時間的函數(shù)所得的曲線下的面積計算絕對生物利用度(即相當于靜脈注射降鈣素的劑量)。
結果只給人服用10mg鮭降鈣素，無可檢出的降鈣素血清水平。但是，當服用如表7所述的本發(fā)明組合物時，在攝入膠囊后30和60分鐘之間，血液中檢出降鈣素的水平最高。血液中降鈣素的最高濃度是70-497pg/ml。在t=30分鐘時，5個個體的降鈣素平均峰濃度為173pg/ml。絕對生物利用度為0.02-0.06％，群體平均值為0.03％。
表8在大鼠試驗中檸檬酸和月桂酰肉堿對血管加壓素、降鈣素和胰島素的生物利用度
方法如對表1的注釋中所述，將由〔arg8〕-血管加壓素、重組鮭降鈣素或人胰島素和所指明的添加劑組成的總體積為0.5ml的制劑注射到麻醉大鼠的十二指腸中。如前所述，在不同的時間取血樣，進行分析。
結果和討論在無任何添加劑的情況下，十二指腸內(nèi)注射〔arg8〕-血管加壓素的生物利用度是0.38％。制劑中加入檸檬酸和月桂酰肉堿，則生物利用度增加到8.1％。在無酸和促進劑存在的情況下，降鈣素的生物利用度是0.096％，低于未配方的血管加壓素。但是，制劑中包括檸檬酸和月桂酰肉堿時，絕對生物利用度增加50倍，至4.53％。在無檸檬酸時，人胰島素甚至不能溶于水。在檸檬酸的存在下，所有肽均易溶解，人胰島素十二指腸給藥的絕對生物利用度為0.07％。制劑中包括月桂酰肉堿時，胰島素的絕對生物利用度增加10倍。這些結果表明，未配方的肽其生物利用度最多為0.38％，而加入有機酸(如檸檬酸)和促進劑(如月桂酰肉堿)則肽的生物利用度增加到高達8.1％。表9人口服降鈣素(0.82mg)的藥物代謝動力學
方法用473mg檸檬酸、75mg牛黃去氧膽酸、75mg月桂酰肉堿和0.82mg鮭降鈣素充填明膠膠囊。將膠囊在包衣鍋中用Eudragit L30-D55包衣60分鐘，并儲存于4℃。在試驗日的早晨給禁食后的受試者服用1個膠囊，用一杯橙汁送服。在服用膠囊前15分鐘和服用降鈣素膠囊后指定的時間取血。用競爭性放射免疫試驗測定降鈣素的血濃度。從血漿降鈣素濃度作為時間的函數(shù)所得的曲線下的面積計算絕對生物利用度(即相當于靜脈注射降鈣素的劑量)。
結果個體攝入膠囊后50-180分鐘之間血液中測出最高水平降鈣素。血液中降鈣素的最高濃度在211-623pg/ml之間。5個個體的降鈣素平均峰濃度(Cmax)為411pg/ml，比治療目標血漿水平約高5-10倍。絕對生物利用度為0.14-0.68％，群體均值為0.38％。這些結果表明，與表7所得的結果相比，通過用明膠膠囊代替淀粉膠囊，用Eudragit L30-D55代替鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素作為腸溶包衣，通過增加檸檬酸的量和在制劑中加入月桂酰肉堿，雖然肽的含量減少約10倍，但鮭降鈣素的生物利用度提高10倍。
雖然就特定的實施方案對本發(fā)明進行了描述，但很多其它變動和修改及其它用途對于本領域技術人員來說將會變得十分明了。因此，本發(fā)明并不限于本說明書的具體揭示，而只是被權利要求所限定。
權利要求
1．生理活性肽口服給藥用的藥物組合物，包含(A)治療有效量的所述活性肽；(B)至少一種藥學上可接受的pH降低劑；(C)至少一種有效地提高所述活性藥物生物利用度的吸收促進劑；和(D)將所述藥物組合物經(jīng)患者的胃有效轉運的抗酸保護賦形劑，它阻止所述活性肽和胃蛋白酶接觸；其中，所述藥物組合物中存在一定量的所述pH降低劑，其量為若所述組合物加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中，則足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
2．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，存在一定量的所述pH降低劑，其量為若所述組合物加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中，則足以使所述溶液的pH降低到不高于3.5。
3．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述保護賦形劑的存在重量為不大于所述藥物組合物余量的30％。
4．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述腸溶包衣的存在重量為不大于所述藥物組合物余量的20％。
5．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述腸溶包衣的存在重量為所述藥物組合物余量的10％-20％之間。
6．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述保護賦形劑足以阻止所述藥物組合物在2小時內(nèi)在0.1N HCl中崩解，還使所述組合物在100轉/分的溶解浴中在pH升高到6.3后所述藥物組合物的所有含量都在30分鐘內(nèi)完全釋放。
7．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述吸收促進劑是表面活性劑。
8．如權利要求7所述的藥物組合物，其中，所述表面活性劑是可吸收或可生物降解的。
9．如權利要求8所述的藥物組合物，其中，所述表面活性劑選自酰基肉堿、磷脂和膽汁酸。
10．如權利要求9所述的藥物組合物，其中，所述促進劑是?；鈮A。
11．如權利要求10所述的藥物組合物，其中進一步包括蔗糖酯。
12．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述吸收促進劑是選自以下物質的表面活性劑(ⅰ)陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物，(ⅱ)帶負電的中和劑和陰離子型表面活性劑的混合物，(ⅲ)非離子型表面活性劑，和(ⅳ)陽離子型表面活性劑。
13．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述吸收促進劑選自陽離子型表面活性劑和陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物組成的組。
14．如權利要求1所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物包括至少兩種吸收促進劑，一種是陽離子型表面活性劑，另一種是陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物。
15．如權利要求14所述的藥物組合物，其中，所述陰離子型表面活性劑是酸溶性膽酸。
16．如權利要求1所述的藥物組合物，其中進一步包括能有效地提高所述肽類活性劑的生物利用度的一定量的第二種肽。
17．如權利要求1所述的藥物組合物，其中進一步包括將所述pH降低劑與所述保護賦形劑分開的水溶性載體。
18．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述組合物包括至少一種pKa值不高于4.2的pH降低劑。
19．如權利要求1所述的藥物組合物，其中至少一種pH降低劑在室溫下水中的溶解度為至少30g/100升水。
20．如權利要求1所述的藥物組合物，其中除了所述腸溶包衣外的所有成分是均勻分散的。
21．如權利要求20所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物包含含有藥用粘合劑和均勻分散在所述粘合劑中的所述pH降低劑、所述吸收促進劑和所述肽類活性劑的顆粒。
22．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物是固體劑型，其中所述pH降低劑與所述吸收促進劑的重量比在3∶1和20∶1之間。
23．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物是固體劑型，其中所述pH降低劑與所述吸收促進劑的重量比在5∶1和10∶1之間。
24．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑選自檸檬酸、酒石酸和氨基酸的酸式鹽。
25．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑以不少于300mg的量存在。
26．如權利要求25所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑以不少于400mg的量存在。
27．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述肽類藥物為血管加壓素。
28．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述肽類藥物為鮭降鈣素。
29．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述肽類藥物為胰島素。
30．如權利要求1所述的藥物組合物，其中所述保護賦形劑為粘稠的保護性糖漿。
31．如權利要求1所述的藥物組合物，所述藥物組合物是鮭降鈣素口服給藥用的，包含(A)治療有效量的所述鮭降鈣素；(B)至少一種藥學上可接受的pH降低劑；(C)至少一種有效地提高所述鮭降鈣素的生物利用度的吸收促進劑；和(D)腸溶包衣；其中，所述藥物組合物中存在一定量的所述pH降低劑，其量為若所述組合物加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中，則足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5。
32．如權利要求31所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少200∶1。
33．如權利要求31所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少800∶1。
34．如權利要求31所述的藥物組合物，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少2000∶1。
35．如權利要求31所述的藥物組合物，其中所述組合物包括至少一種的pH降低劑，其pKa值不高于4.2，窒溫下在水中的溶解度為至少30g/100ml水。
36．如權利要求31所述的藥物組合物，其中水溶性載體將所述pH降低劑與所述腸溶包衣分開。
37．如權利要求31所述的藥物組合物，其中所述鮭降鈣素、所述pH降低劑和所述吸收促進劑都是均勻分散的。
38．如權利要求28所述的藥物組合物，其中所述腸溶包衣的重量不大于所述藥物組合物除去所述腸溶包衣后的余量的30％。
39．如權利要求1所述的鮭降鈣素口服給藥用的藥物組合物，包含(A)治療有效量的所述鮭降鈣素；(B)至少一種藥學上可接受的pH降低劑，其pKa值不高于4.2，在室溫下水中的溶解度不低于30mg/100ml水；(C)至少一種有效地提高所述鮭降鈣素生物利用度的吸收促進劑；和(D)以所述藥物組合物余量的10％-20％重量存在的腸溶包衣；(E)將所述pH降低劑與所述腸溶包衣分開的水溶性屏障；其中，所述藥物組合物中存在一定量的所述pH降低劑，其量為若所述組合物加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中，則足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5；且其中所述藥物組合物包含含有均勻分散在藥用粘合劑中的鮭降鈣素、所述pH降低劑、所述吸收促進劑的顆粒。
40．提高治療性肽活性劑口服給藥的生物利用度的方法，所述方法包括將所述肽活性劑與至少一種pH降低劑和至少一種吸收促進劑選擇性地釋放到患者的腸中，這是在所述肽活性劑、pH降低劑和吸收促進劑在能實質上阻止胃蛋白酶和所述肽接觸的抗酸性保護賦形劑的保護下通過所述患者的嘴和胃之后發(fā)生的；其中所述pH降低劑和與其一起釋放的其它化合物釋放到所述腸道的量為如果加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于5.5的量。
41．如權利要求40所述的方法，其中所述pH降低劑的量為如果所有成分加到0.1M碳酸氫鈉水溶液10ml中足以使所述溶液的pH降低到不高于3.5的量。
42．如權利要求40所述的方法，其中，所述保護賦形劑足以阻止其它成分在2小時內(nèi)在0.1M HCl中釋放，還使所述保護賦形劑和其它成分在100轉/分的溶解浴中在pH升高到6.3后所有成分都在30分鐘內(nèi)完全釋放。
43．如權利要求40所述的方法，其中，所述吸收促進劑選自陽離子型表面活性劑和陰離子型表面活性劑膽甾醇衍生物組成的組。
44．如權利要求40所述的方法，其中所述pH降低劑的pKa值不高于4.2，在室溫下水中的溶解度為至少30g/100ml水。
45．如權利要求40所述的方法，其中所述pH降低劑與所述吸收促進劑的重量比在3∶1和20∶1之間。
46．如權利要求1所述的方法，其中所述pH降低劑以不少于300mg的量存在。
47．如權利要求40所述的方法，其中所述肽活性劑為鮭降鈣素。
48．如權利要求47所述的方法，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少800∶1。
49．如權利要求47所述的方法，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少200∶1。
50．如權利要求47所述的方法，其中所述pH降低劑與所述鮭降鈣素的重量比為至少2000∶1。
全文摘要
借助抗酸性保護賦形劑將本發(fā)明的成分經(jīng)胃轉運、使肽定點釋放于腸的藥物組合物提高了肽類活性劑口服給藥的生物利用度。組合物包含吸收促進劑和能降低腸內(nèi)局部pH的足量的pH降低劑。所有成分與肽一起釋放到腸內(nèi)。
文檔編號A61K9/50GK1213282SQ97193029
公開日1999年4月7日 申請日期1997年3月14日 優(yōu)先權日1996年3月15日
發(fā)明者W·斯特恩, J·P·吉力干 申請人:尤尼金實驗室股份有限公司