專利名稱：動物飼料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含天然存在的物質(zhì)的新組合物，這些物質(zhì)是非致病性活微生物、酶(消化酶)、具有非毒性性能的有機酸和細菌素，它們對動物和人的消化作用有多重共生效果并保持腸內(nèi)正常的細菌區(qū)系平衡。該組合物還能阻止現(xiàn)有的感染并使失調(diào)的細菌區(qū)系恢復(fù)到正常情況。這已經(jīng)過對大量動物和人的試驗通過他們自身的抑菌和殺菌效果而得到了證實。此外，該新組合物還意外地以這種方式作用于胃中和腸內(nèi)飼料，即飼料被分解成更容易消化的碎片如肽和氨基酸。這最有益于全部利用含能量和其它營養(yǎng)成分的飼料。該組合物還能意外地減少豬肉中的脂肪和膽固醇。該組合物還能意外地增強免疫防御系統(tǒng)。
現(xiàn)在應(yīng)用很多種不同的產(chǎn)品處理動物如豬、小豬、母豬、雞、蝦等以防止胃中和大腸、小腸內(nèi)細菌感染。最常用的產(chǎn)品是各種抗生素，通常將它們與飼料混合并在整個飼養(yǎng)過程中喂給動物。還有例如豬的急性感染通常也用抗生素治療。
有時應(yīng)用益生素代替穩(wěn)定腸內(nèi)微生物區(qū)系的抗生素和促生長物質(zhì)。現(xiàn)有益生素的效果尚有問題，所以由于它們?nèi)狈πЧ蛐Ч疃荒苷J為它們是抗生素的良好替代物。
益生素的效果和作用方式取決于微生物的類別。有些產(chǎn)品只包括酶，例如可商購的Bio-Feed Plus(基于糖酶)。有些產(chǎn)品基于芽孢桿菌菌株，而有些產(chǎn)品包括各種乳桿菌(lactobacilli)、鏈球菌或革蘭氏陽性菌的芽孢。
所有益生素的共同之處在于，通常以如此方式生產(chǎn)以致它們呈純化的形式，即它們產(chǎn)生的天然酶和有機酸都被洗掉了，而且將它們喂給動物時，效果的起點或處于零水平或被延遲，這取決于a)差的或無定居現(xiàn)象，b)微生物在胃的酸部分中被破壞，c)延遲產(chǎn)生酶和有機酸而太遲地提供促生長效果，d)不生產(chǎn)活微生物必需的乳酸。因此，缺乏一定的功效。
動物如豬以及雞、家禽和河蝦的胃和腸內(nèi)致病性細菌感染對飼養(yǎng)者和消費者來說是個大問題。即使養(yǎng)殖者設(shè)法保持飼養(yǎng)場中很高的衛(wèi)生標準，但就是可能的話也很難避免這類感染，且很難避免小豬斷奶時嚴重的腹瀉，這種腹瀉的發(fā)作依賴于腸內(nèi)天然大腸桿菌(E-coli)和乳酸之間的關(guān)系中的免疫因素。頻繁使用抗生素以對抗感染已成為嚴重的問題，因為這樣會形成例如沙門氏菌(salmonella)菌株的抗性。這些細菌有幾種已變成對很多抗生素抗性的，結(jié)果是盡管用抗生素治療，但動物也會死去。一旦致病性細菌已引起失調(diào)，則動物因其消化飼料的能力降低而不能以正常方式增加體重。除了給飼養(yǎng)者造成明顯的經(jīng)濟損失外，肉的質(zhì)量通常也降低因而存在明顯的危險性即肉的消費者可能受感染。
對細菌感染相當敏感的一組動物是小豬，它們往往會因母豬而受感染。當將它們在斷奶時與母豬分開時，它們就開始吃固體飼料，通常會引起嚴重的腸問題。這類問題常常嚴重到使一些小豬死去。感染也給飼養(yǎng)者造成重大的經(jīng)濟問題，不僅因為一些小豬將死去，還因為受感染的動物飼養(yǎng)時間變得太長。有病的小豬的這類問題嚴重性因國家而異。在歐洲約有15-30％的動物受感染，但在熱帶國家中該數(shù)字相當高，例如高達40％。
飼養(yǎng)適于煎烤的雛雞是另一類重大問題。禽類中沙門氏菌和彎曲桿菌(campylobacter)的感染極為常見，給飼養(yǎng)者造成很大的經(jīng)濟損失并能引起雞肉消費者嚴重到致命的感染。適于煎烤的雛雞和下蛋母雞中的沙門氏菌感染會在全世界發(fā)展成控制不了的程度，因為沙門氏菌可形成對各種抗生素的高度抗性。
一旦動物被致病性細菌感染，就很難或者甚至不可能用現(xiàn)在市場上可得到的抗生素和益生素治療動物。
河蝦的養(yǎng)殖也經(jīng)歷重大的問題，這取決于細菌感染的水、池中被未食用飼料、排泄物和化學(xué)物質(zhì)污染的底層。所有這些環(huán)境因素和污染因素會增大河蝦中致病性感染的危險性，這就給飼養(yǎng)者造成重大的經(jīng)濟缺陷。引起高達100％死亡率的最常見致病性細菌之一是各種弧菌(vibrio)細菌。
從環(huán)境和污染角度考慮飼養(yǎng)雛雞、下蛋母雞和豬存在重大問題，所以急需減少氨散發(fā)量。從地面上糞便中散發(fā)的氨對動物有很大毒性，并且會增大感染的危險性，增大死亡率和減弱生長能力。
理論上，解決上述感染問題、不用抗生素的促生長以及改善生態(tài)學(xué)問題的可能最佳方法是尋找一種方法以防止致病性細菌粘附在粘膜表面，或?qū)σ言馐芗毦鷧^(qū)系失調(diào)的動物來說，是尋找恢復(fù)正常細菌區(qū)系的方法，這種方法中通過應(yīng)用具有多重共生效果的天然“調(diào)制物(cocktail)”的組合物而使動物死亡率減小并提高生長速度，該組合物包括活微生物、它的固有消化酶、它的固有有機酸和它的固有細菌素，它們具有快速的作用起始點因此能增強免疫防御系統(tǒng)。此外，該產(chǎn)品應(yīng)包括由活微生物在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酶、有機酸和細菌素。對被認為有效的有益生菌劑來說，要求酶、有機酸和細菌素(它們是來自活微生物的代謝物質(zhì))的多重共生作用的快速作用起始點。
本發(fā)明的第一個方面涉及動物飼料添加劑或組合物，特征在于，它包括下列活微生物中的至少三種、且優(yōu)選七種a)戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)b)乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)c)粉狀畢赤酵母(Picia farinosa)d)布魯塞爾德克酵母(Dekkera bruxellensis)e)芽孢桿菌(Bacilli)f)鏈球菌(Streptococci)g)葡萄球菌(Staphylococci)本發(fā)明的組合物特征在于，它包括的酶“消化酶”表現(xiàn)出多種水解活性，例如h)蛋白酶，如胰蛋白酶樣的和肽酶樣的活性i)糖分解酶，如淀粉酶樣的和纖維素酶樣的活性j)脂解酶，如三酰甘油酶樣的活性k)過氧化物酶，如過氧化氫酶樣的活性l)轉(zhuǎn)移酶，如?；D(zhuǎn)移酶樣的活性它的特征還在于它包括至少三種下列有機酸m)乳酸n)乙酸o)丁二酸它的特征還在于它包括下列細菌素q)片球菌素A、乳鏈菌肽、片球菌素AcH、乳酸片球菌PAC1.0任選與本來可能已知的動物飼料一起。本文有時會稱微生物的混合物為“貯存培養(yǎng)物”。本發(fā)明的一種優(yōu)選的動物飼料包括約8～15％水，約15～30％總的蛋白質(zhì)，約0.5～5％總的脂質(zhì)，約5～20％纖維，約8～20％灰分(礦物質(zhì))，約30～50％可溶性不含氮的物質(zhì)，約6×104～3×109個活戊糖片球菌/克，約1×103～1×107個活乳酸片球菌/克、約2×103～1×108個粉狀畢赤酵母/克、約2×103～2×108個布魯塞爾德克酵母/克，約2×103～4×108個鏈球菌/克，約8×102～6×107個芽孢桿菌/克，約6×104～6×107個葡萄球菌，約0.2％～5％乳酸，約0.1～3％乙酸，約0.01～2％丁二酸，并且它優(yōu)選具有約2～15MJ/kg干重的能量含量。
上述微生物、酶、有機酸和細菌素優(yōu)選具有下列性能1)耐胃酸2)耐熱高達70℃的最大值3)能被造粒4)在淡水和鹽水中保持穩(wěn)定5)對動物和人無毒6)防止感染7)消除感染8)促進生長9)良好的定居作用10)殺菌效果11)增強免疫效果12)減少糞便中的氨和尿中的脲。
本發(fā)明提供了新的動物飼料組合物，它既對帶有正常細菌區(qū)系的動物而且可能更重要的是還對帶有致病性細菌區(qū)系的動物具有預(yù)料不到的效果。
下面將更詳細地描述的本發(fā)明的新動物飼料組合物包括作為其基本成分的下列物質(zhì)，即片球菌、芽孢桿菌、鏈球菌和葡萄球菌、酵母細胞(真菌)、水解酶或消化酶、有機酸和細菌素。
還不十分清楚本發(fā)明的新動物飼料組合物在動物中的作用機制，但現(xiàn)在假定，按競爭性排斥概念，本發(fā)明的活微生物與致病性細菌相競爭以恢復(fù)正常的平衡和保護正常的細菌區(qū)系。
有機酸將降低嗉囊(對于雛雞和下蛋母雞)以及大腸和小腸內(nèi)的pH，并使致病性細菌難以生長。乳酸還將通過裂解殺傷致病性細菌。當用于動物和人時，活微生物和乳酸都將通過它們的共生作用刺激免疫防御系統(tǒng)。
在嗉囊(用于雛雞)、胃和腸內(nèi)，已存在于動物飼料組合物中的消化酶將作用于飼料而將它分解成更易吸收的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段和氨基酸，于是改善動物飼料的含能量和其它營養(yǎng)成分的總利用率。不管怎樣，結(jié)果將是有細菌問題的動物將能恢復(fù)正常的(胃)腸平衡。另一個效果是，從腸道的消化吸收能力將會增大，于是可減少飼料中的死有機物質(zhì)，這可導(dǎo)致減少有害的氨和脲的生成。最重要的結(jié)果在于，動物的免疫防御系統(tǒng)將大為改善并能有效地對抗正在發(fā)生的感染和/或感染性侵入物。
用本發(fā)明的組合物喂養(yǎng)動物的一個效果在于，它恢復(fù)/維持正常的細菌區(qū)系而不會引起任何其它問題。另一個效果在于，該組合物能在保持腸內(nèi)高含量有益健康的細菌時防止感染而不會引起其它問題。
本發(fā)明的動物飼料組合物進一步的效果在于，它能消除細菌以及改善動物飼料的含能量和其它營養(yǎng)成分的總利用率。上面定義的動物飼料組合物能成功地與任意慣常的動物飼料一起使用且它不會被胃中的酸條件破壞。
此外，已存在于本發(fā)明組合物中的酶、有機酸和細菌素能提高活微生物的定居速度以便使它們繼續(xù)生產(chǎn)快速復(fù)制活微生物所需的更多的酶、有機酸和細菌素。
由活微生物生產(chǎn)的細菌素至少具有兩種不同的作用a)生產(chǎn)它們以便保護活微生物而防可殺傷它們的其它細菌侵害，以及b)它們自身具有抗細菌效果。
本發(fā)明的貯存培養(yǎng)物和動物飼料組合物、它的應(yīng)用和有益的效果將在下述非限制性實施例中被進一步闡述。
實施例1-動物飼料的制備“貯存培養(yǎng)物”的制備1．將12kg含上述微生物的土壤與30kg米糠、1kg大豆粉和14升水混合。將混合物加熱到50℃達12小時。12小時后將溫度降到35℃并在此溫度下將混合物保持48小時。
將該“貯存培養(yǎng)物”干燥至約6％并準備用于制備動物飼料組合物。動物飼料組合物的制備1．將500kg米糠與1.4kg上述貯存培養(yǎng)物混合。加入水以提高濕含量至35％。2．將該混合物攤鋪成10～15cm的一層，蓋上塑料膜以防水的蒸發(fā)。8天后完成發(fā)酵。3．揭去塑料膜并將產(chǎn)物干燥至約7～9％。然后該產(chǎn)物可供直接應(yīng)用或包裝以供后續(xù)應(yīng)用，例如包于紙袋中。
分析水含量 8.1％總的蛋白質(zhì) 22.7％總的脂質(zhì)3.1％纖維11.7％灰分(礦物質(zhì))14.6％可溶性不含氮的物質(zhì) 39.8％活微生物的量2×105-3×109能量含量11.4MJ/kg干重該產(chǎn)物的應(yīng)用實施例1．小豬-防止斷奶時腹瀉和其它感染本研究的目的是要研究將1％本發(fā)明的組合物與普通飼料混合后在斷奶日(第24天)開始和當小豬平均重量為20kg時結(jié)束試驗。
結(jié)果 對比組 試驗組小豬的數(shù)量 188178開始時平均大小 24.04天22.24天開始時平均重量 6.78kg 6.15kg結(jié)束時平均重量 15.60kg15.07kg結(jié)束時平均大小 64.04天58.24天平均試驗期 40.00天36.00天平均生長增重 8.82kg 8.92kg平均生長速度/天 0.221kg0.248kg沙門氏菌感染的日期(天) 35 40受感染的小豬數(shù)量 73 52用諾氟沙星(Norfloxazine)注射處理的日期(天) 36 無飼料中加入諾氟沙星和新霉素時的日期(天) 37 無死率率，小豬數(shù) 42(58％) 5(10％)結(jié)論按照依賴于沙門氏菌感染的方案不能圓滿地完成該試驗。
對比組中感染上沙門氏菌的73頭小豬病得很歷害，雖然用抗生素處理但有42頭在數(shù)天內(nèi)死去。在第64天，獸醫(yī)決定殺死所有這188頭小豬。
與對比組的小豬相比，用本發(fā)明的組合物處理的試驗組小豬感染延遲。輕度的感染和腹瀉，在未應(yīng)用任何抗生素注射以及未將抗生素混入飼料的試驗組中只有5頭死去。
與慣常的應(yīng)用抗生素相比，本組合物還清楚地表現(xiàn)出更好的預(yù)防沙門氏菌感染以及消滅沙門氏菌的結(jié)果。2. 小豬-感染的預(yù)防本研究的目的在于調(diào)查與普通飼料混合的0.5％(5kg組合物/噸飼料)始于第24天且當小豬重達15kg時停止試驗對小豬的效果。結(jié)果對比組 試驗組小豬的數(shù)量 143 133總重量 975kg954kg斷奶時的平均重量 6.82kg 7.17kg斷奶時的平均大小 25.42天 24.08天結(jié)束時的總重量 2131.5kg 1961kg結(jié)束時的活小豬總數(shù) 128 130死亡率，小豬的數(shù)量 15(10.49％) 3(2.26％)結(jié)束時的平均重量 16.65kg 15.08kg結(jié)束時的平均大小 66.19天 60.78天平均試驗期 40.77天 36.76天平均生長增重 9.83kg 7.91kg平均生長速度/天0.245kg 0.215kgADG241.06克 215.76克FCR1.56 1.77FC/kg 14.0515.96結(jié)論對比組增重更多，但基本上是由于它們大4天，且在那4天期間小豬生長速度快得多。
對比組中斷奶時腹瀉的頻率較大。在試驗組中根本沒有腹瀉的記錄。
對比組中的死亡率遠遠高于試驗組。高死亡率依賴于對比組中嚴重的大腸桿菌感染，它是在斷奶期過后發(fā)生的。試驗組中大腸桿菌感染的程度較輕。
本組合物0.5％的用量太小，但足以保護以防感染，卻不足以增高生長速度。3. 母豬本研究的目的在于調(diào)查1％本發(fā)明的組合物與普通飼料混合后喂給產(chǎn)仔前4周以及直到斷奶時的母豬的效果。結(jié)果對比組 試驗組母豬數(shù)量54 57小豬數(shù)量554567死產(chǎn)的小豬 21(3.79％) 13(2.29％)產(chǎn)仔母豬數(shù)量5(0.90％) 10(1.76％)不健全的小豬總數(shù)7(1.26％) 12(2.12％)小而且不健全的小豬 33(5.96％) 35(6.17％)生長良好的小豬 521(94.04％) 532(93.83％)平均出生重量1.45kg 1.48kg平均每胎產(chǎn)下的小豬數(shù)9.65 9.33斷奶的母豬 51 55斷奶時的死亡率 51(9.79％) 26(4.89％)斷奶的小豬 470506斷奶時的平均重量7.04kg 7.26kg斷奶時的平均大小27.57天27.59天斷奶的小豬/母豬 9.22 9.20結(jié)論試驗組中母豬產(chǎn)下的小豬平均重量要高30(2％)克。對比組中的死亡率(9.79％)與試驗組中的(4.89％)比較，相差51％。
試驗組中的小豬斷奶時的平均重量比對比組重220克(3.1％)，當它們進入斷奶期時這一點很重要。
獸醫(yī)認為，對比組中死亡率更高的原因基于小豬體質(zhì)更弱以及更嚴重的腹瀉。第28天后的4～7天之間它們還會再生殖。當產(chǎn)仔前4周和產(chǎn)仔后4周對母豬應(yīng)用本組合物時，該組合物可增強免疫防御系統(tǒng)，這通過更濃的奶以及保護小豬而防感染得以清楚地表明。4．母豬-母豬的健康狀況和斷奶前的死亡率。
本研究的目的在于調(diào)查1.5％本組合物(60g/天/頭母豬)同普通飼料混合后的效果與母豬的健康狀況和斷奶前的死亡率比較。結(jié)果產(chǎn)仔時 對比組 試驗組母豬數(shù) 10 10生下后成活的小豬總數(shù)102 95平均出生重量1.29kg 1.48kg每胎平均產(chǎn)仔總數(shù)11.1 10.0每胎平均產(chǎn)下的豬數(shù)量10.2 9.5每胎平均死產(chǎn)的豬數(shù)量0.5 0.2死產(chǎn)小豬的％4.5 2.0平均每胎產(chǎn)仔的母豬數(shù)0.4 0.3產(chǎn)仔母豬的％3.6 3.0斷奶時斷奶的母豬數(shù)10 10斷奶的小豬總數(shù) 86.0 94.0每胎斷奶的豬8.6 9.4斷奶前的死亡率 15.7％ 1.1％斷奶時平均重量 6.05kg 6.33kg斷奶時平均大小 21.4天 21.8天結(jié)論產(chǎn)仔時，試驗組中的平均重量比對比組高190克或15％，認為該值很大。
對比組中斷奶前的死亡率為15.7％，它與斷奶時嚴重的腹瀉有關(guān)。試驗組中斷奶前的死亡率為1.1％。這肯定是本發(fā)明的組合物直接作用的結(jié)果，本組合物使母豬相當健康且奶中含更多的免疫球蛋白，它是小豬必需的并能保護小豬以防感染。
斷奶時平均重量的差值為280克或5％，這也相當大。5. 豬血液分析和一般分析值。
本試驗是由Japan Food Research Laboratories與YamaguchiUniversity Agriculture Department合作進行的。
總結(jié)本試驗得知本發(fā)明的組合物具有有益效果如下肉(紅色肌肉/脂肪85/15％ 對比動物 試驗組水含量63.4％ 64.1％蛋白質(zhì)18.5％ 19.5％脂肪 16.8％ 15.1％膽固醇50.0mg 44.4mgPh5.7 5.8結(jié)論用本發(fā)明的組合物飼養(yǎng)供屠宰的豬，在最后3個月大為降低膽固醇和脂肪含量，認為這對消費者很有益。該現(xiàn)象的原因取決于綴合的膽汁酸酶，這些酶是在該組合物生產(chǎn)期間產(chǎn)生的以及從喂給豬時組合物中的活微生物產(chǎn)生的。參見表1。6．供屠宰的豬-預(yù)測腹瀉和減少的飼養(yǎng)時間。
本研究的組織者是Prozyme AB,Uppsala,Sweden，協(xié)同theSwedish University of Agriculture Sciences,Department of AnimalBreeding and Genetics；Animal Health Services,Uppsala,Sweden andFarmek Slaughter-House,Uppsala,Sweden.
試驗組和對比組各包括27頭動物。試驗組的平均起始重量為32.6kg，而對比組平均為32.2kg。
各組中的豬都喂給相同量的飼料，但試驗組中的動物飼料含0.75％本發(fā)明的飼料添加劑。對所有動物都每周檢查一次體重。結(jié)果試驗組，27頭動物達到最終體重需要耗用共計5950kg飼料，即每頭豬平均220.4kg飼料。屠宰第一頭豬是在第62天，而最后一頭豬是在第154天。達到最終體重共需2456天，即平均94.3天/頭。FCR為3.03。參見下表1。試驗期間該組動物都不需藥物治療。試驗組中未觀察到副作用或異常行為。對比組，27頭動物達到最終體重需要耗用共計7335kg飼料，即每頭豬平均271.7kg飼料。屠宰第一頭豬是在第76天，而最后一頭豬是在第154天。達到最終體重共需3043天，即平均112.7天/頭。FCR為3.76。參見下表1。本組中有7頭動物因胃病而需藥物治療。
表1數(shù)據(jù) 試驗組對比組動物總數(shù) 2727開始時體重 32.6+13/-16kg 32.3+11/-17kg結(jié)束時體重 105.2+8/-3kg 104.5+5/-6kg飼料總量 5950kg7335kg平均每頭豬的飼料 220.4kg 271.7kg總天數(shù) 2546天3043天平均每頭豬的天數(shù) 94.3天112.7天FCR3.03 3.76結(jié)束時日期(天)/豬的數(shù)量/最終體重 62/3/103-105 …76/6/103-110 76/2/103-10884/2/104-105 84/3/104-10591/5/103-106 91/2/104-10598/2/103-106 98/5/103-108105/4/103-109 105/2/103-105112/1/103 112/2/103-104…119/1/105
126/2/102-112 126/3/105-109…133/1/104147/1/104 147/3/98-107154/1/105 154/3/105-1067．適合于煎烤的雛雞-沙門氏菌的預(yù)防本研究是由Spelderholt DLO Institute for Animal Science andHealth Agriculture Research Department DLO-NL P.P.Box 15 7360AA Beekbergen,the Netherlands完成的。沙門氏菌侵襲適于煎烤的雛雞在第14天用104cfu嬰兒沙門氏菌(Salmonella infantis)NaI經(jīng)口逐只感染8欄適于煎烤的雛雞，并在其它組中每欄放置5只標記的接種雞以模擬自然感染。在第14天已用5×107cfu嬰兒沙門氏菌NaI經(jīng)口感染接種的雞。通過取糞便樣分析感染前或放置接種的雞之前受試驗雞的沙門氏菌狀態(tài)。在取樣的日子里(感染后1周)，每欄中宰殺5只適于煎烤的雛雞并估測盲腸中沙門氏菌的量。飼料飼料中包括作為促生長劑的50mg/kg桿菌肽鋅和作為coccidiostat的3mg/kg鹵夫酮。預(yù)備好整個試驗期間的飼料并允許“隨意”進食。在造粒前向飼料中摻入本發(fā)明的飼料添加劑(基于干重的1％)。造粒溫度是70℃。微生物學(xué)在感染7天后，從每欄隨機挑出6只雞(每組共48只雞)并宰殺。取出盲腸并進行表面滅菌后，在無菌下取其內(nèi)含物樣本。將樣本放在含20ppm Nalidex acid的“Brilliant Green Agar”(Oxoid CM 329)上而估測嬰兒沙門氏菌NaI的cfu數(shù)。將用“Buffered Peptone Water”(Oxoid CM 509)稀釋10倍的盲腸內(nèi)含物進行培養(yǎng)并在富集后置于BGA瓊脂上。統(tǒng)計結(jié)果將結(jié)果用學(xué)生t檢驗法進行分析。結(jié)果和討論正如所料，用很高劑量的沙門氏菌(5×107)確實達到了對接種雞的感染，數(shù)天后沙門氏菌陽性雞的量處于可接受的水平即約為70％。
兩個試驗組雛雞的盲腸內(nèi)含物中沙門氏菌cfu的平均數(shù)明顯低于它的對比組(P＜0.01)。
表2中給出了得自盲腸內(nèi)含物中各個cfu數(shù)的結(jié)果。表中指示了具有一定沙門氏菌cfu水平的雛雞數(shù)。從這些結(jié)果可計算感染因子(IF)和保護因子(PF)。IF是在特定組中全部雞的每克盲腸內(nèi)含物中沙門氏菌數(shù)的幾何平均值。用對比組的IF值除以試驗組的IF值，即可從IF值求得PF。表2．每克盲腸內(nèi)含物中具有一定數(shù)量沙門氏菌cfu的雛雞數(shù)，IF(感染因子)和PF(保護因子)第1周經(jīng)口感染每克盲腸內(nèi)含物的沙門氏菌數(shù)n0 10 102103104105106107＞108IF對比組 40 0 0 1610 1291 14.7試驗組 40 10 3 0717 64 23.6PF: 1.3第2周經(jīng)接種雞感染每克盲腸內(nèi)含物的沙門氏菌數(shù)n0 10 102103104105106107＞108IF對比組 40 2 0 0331411 2 55.3試驗組 40 20 0 3126 61 12.5PF: 2.1在取樣日期(感染后1周)，試驗組中不含沙門氏菌的雛雞數(shù)多于對比組(表3)。
表3．沙門氏菌陰性雞的盲腸樣本的沙門氏菌分析n=40 經(jīng)口接種雞對比組試驗組對比組試驗組第1周 0 101 20結(jié)論給適于煎烤的雛雞施用本發(fā)明的組合物大大有助于及早排除沙門氏菌。作用效果的快速起始點取決于包含在組合物中的活微生物、酶、有機酸和細菌素的多重共生作用。結(jié)果清楚地表明了本組合物消除沙門氏菌對雛雞感染的效能。8．適于煎烤的雛雞-促生長作用本研究的目的在于比較將1％本發(fā)明的組合物混合不含抗生素的飼料(試驗組)與含抗生素的普通飼料(對比組)喂給待宰殺的一天大小、供煎烤的雛雞的情況。本研究是由Chaiyaree Farm Co.,Ltd.panatNikhom,Thailand完成的。結(jié)果對比組 試驗組雞的數(shù)量10 200 10 200雞的大小一天大小一天大小結(jié)束時的大小46天46天試驗期間應(yīng)用的藥物-Mintervit 第1天 第1天-IB A3 第2天 第2天-Tylan 第3天 第2天-Permasol 第6天 第9天-ND Clone 第10天 第8天-IBD Blen 第14天 第13天-Tvlosin S.P. 第17天 無-Post-Vaccine 第18天 第15天-Chlor-Erv第28天 第28天-Triane 第40天 第40天死掉的雞數(shù)量在第1周 82只 57只在第2周 115只106只在第3周 69只 50只在第4周 33只 27只在第5周 43只 33只在第6周 118只42只在第7周 325只45只總計785只360只被拿走的病雞和瘦弱的雞對比組 試驗組第1周 10只 26只第2周 24只 20只第3周 26只 6只第4周 18只 0只第5周 16只 0只第6周 26只 1只第7周 111只89只總計231只142只死雞和病雞的總數(shù)(只)第1周 92(0.90％) 83(0.81％)第2周 139(1.36％) 126(1.24％)第3周 95(0.93％) 56(0.55％)第4周 51(0.50％) 27(0.26％)第5周 59(0.58％) 33(0.32％)第6周 144(1.41％) 43(0.42％)第7周 436(4.27％) 134(1.31％)總計1016(9.96％)502(4.92％)活雞 91849698總kg17,698.431 19,846.96平均重量 1.93kg 2.05kg總共消耗的飼料kg36.195 40.489FCR 2.052.04結(jié)論通過由Chaiyaree Farm Co.,Ltd.管理很好控制這類試驗。在宰殺前6天雞得到最后的抗生素以及對比組中的雞患腹瀉、體重下降而且總死亡率高。
在最后的一周當禁用抗生素時雞體重下降且死亡率增高，這對飼養(yǎng)者來說是待克服的重大問題。在最后一周存在再次感染沙門氏菌和彎曲桿菌的風(fēng)險，這就會有損飼養(yǎng)者的整個生意。
死亡率的差別很大，而且試驗組中的雞更重。
從經(jīng)濟角度來看，120克/只雞的差別加之更多的活雞，差別是相當大的。9．適于煎烤的雛雞-成本效益研究背景知識泰國的SUNEK FOO LTD.,Saraburi是一家向日本出口適于煎烤的雛雞的公司。它屬于該行業(yè)中泰國的前10家公司。
出口供煎烤的雛雞的各家公司都必須遵守有關(guān)肉中殘余的抗生素、化學(xué)物質(zhì)和任何致病性細菌的很嚴格的規(guī)則。
該公司的加工生產(chǎn)能力為60000只雛雞/天或約1900萬只雛雞/年。這意味著他們需要以高度專業(yè)化的方式飼養(yǎng)雛雞以獲得最大利潤以及同他們的日本消費者建立良好的關(guān)系。SUNEK有試驗作為抗生素替代物的“益生素”用于促生長以及消除肉中沙門氏菌污染的長期經(jīng)驗。迄今他們未發(fā)現(xiàn)任何種類能滿足所有這些標準的可商購的益生素。
我們可描述應(yīng)用本發(fā)明的組合物的試驗條件如下標準每組包括10000只一天大小的雞，關(guān)在相距約50米遠的2個不同房子里。
對比組和試驗組應(yīng)提供同種不含抗生素的飼料以及同一標準的治療方案。應(yīng)安排同樣多的工人看護這兩個組。應(yīng)供給試驗組中的雞0.5％(kg/l噸顆粒飼料)與顆粒飼料混合的該組合物。在第44～46天于Saraburi省他們自己的宰殺廠內(nèi)將雞宰殺。結(jié)果試驗組 對比組1天大小的雞數(shù)量 10 600 10 000死亡率在第1周 119(1.12％) 180(1.80％)在第2周 131(1.24％) 203(2.03％)在第3周 112(1.06％) 172(1.72％)在第4周 115(1.09％) 138(1.38％)在第5周 97(0.92％) 211(2.11％)在第6周 171(1.61％) 186(1.86％)在第7周 134(1.26％) 78(0.78％)總計 879(8.29％) 1168(11.68％)Rem在第7周對試驗組總共為4天而對比組中為3天。飼料消耗量第1周 1,500kg 1,350kg第2周 3,060kg 2,850kg第3周 5,070kg 4,770kg第4周 7,140kg 6,540kg第5周 7,950kg 7,830kg第6周 9,570kg 9,930kg第7周 4,080kg 2,160kg總計 38,370kg35,430kgRem在第7周對試驗組總共為4天而對比組中為3天。治療方案試驗組 對比組第1天 IB疫苗 IB疫苗第1～3天泰洛星(Tylosin) 泰洛星第10天 ND疫苗 ND疫苗第14天 IBD疫苗 IBD疫苗第15天 Amcolistine Amcolistine第22天 四霉素 四霉素第29天 四霉素 四霉素第35天 諾氟沙星諾氟沙星總體重 18,700kg16,000kg宰殺的雞數(shù)量9,721只 8,832只總共消耗的飼料38,370kg35,430kgFCR 2.052.21每只雞平均重量 1.92kg 1.81kg成本效益分析支出試驗組 對比組1天大小的雞 4,240USD4,000USD藥物 636USD 600USD飼料 9,669USD8,928USD試驗樣本 191.84USD 0USD勞動力 212USD 200USD總計 14,834.68USD13,728.36USD收入總計20,196USD 17,280USD總的凈收入5,261.32USD 3,551.64USD每只雞凈收入0.496USD 0.356USD討論該試驗已由SUNEK FOOD LTD.100％完成和控制。Biofeed的職員每周一次地視察該飼養(yǎng)場以采集數(shù)據(jù)并檢查雞的健康狀況。
SUNEK決定對兩個組應(yīng)用相同標準的醫(yī)療方案以獲得可比的試驗結(jié)果。結(jié)論這兩組在各方面的差別都很明顯。對比組中的死亡率為11.68％，與試驗組中的8.29％相比相差29％，這肯定在統(tǒng)計意義上差別很大。試驗組中的FCR為2.05，與對比組中的2.21比較相差7％以上，必定也認為差別較大。
然而，最重要的是成本效益分析清楚地表明，如果取消第3天后抗生素的應(yīng)用(因為這種抗生素處理只是預(yù)防性的)那么應(yīng)用本發(fā)明的組合物的效益和差別將會更大。不過，至于每只雞的凈收益，試驗組中為12.41銖/只而對比組中為8.89銖/只，相差40％。
本組合物和其它種類的微生物產(chǎn)品的差別相當大的原因基于該事實，即本組合物可歸類為完美的“生物系統(tǒng)”，它從一開始就包含所有必需的組分如活微生物、有機酸、酶和細菌素。它們一起可保證嗉囊中達到良好的早期定居而且酶對嗉囊中的飼料產(chǎn)生直接影響。
有機酸首先將會降低pH并使環(huán)境不利于致病性細菌，以及尤其是a)可即時產(chǎn)生抑菌效果的乳酸和b)活微生物的總體免疫增強效果一起構(gòu)成確保雞處于健康狀態(tài)所需的條件。
當含活微生物的產(chǎn)品應(yīng)用于雞時，很重要的是有益效果直接始于嗉囊中且在胃的酸部分中活微生物的損傷最小，因為雞的消化機制差因而營養(yǎng)攝取少。
本組合物一開始就起作用，而慣常的益生素卻作用很緩慢，因為它們在起作用前必須開始產(chǎn)生它們自己的代謝物。
當應(yīng)用本組合物時上述作用方式是良好的凈收益水平的原因。
我們還可補充，當應(yīng)用本組合物時雞中沙門氏菌和彎曲桿菌感染的危險性降低了，這通常是世界性的重大問題。
還值得指出的是，與對比組相比，從試驗組散發(fā)的氨味減少了。10．河蝦和對蝦養(yǎng)殖于池中的對蝦很易受細菌感染。一旦出現(xiàn)感染，則池中所有的河蝦或?qū)ξr都會死掉。為了將感染的危險性減至最小，應(yīng)用濃度約為20克/Sqm的本發(fā)明組合物，將它均勻地撒在空池底面。本組合物在第7～10天期間起作用，而在這段時間之后致病性微生物的濃度被減小到以后不會危害河蝦/對蝦的量。
在儲備后期幼蟲之后，每周兩次地以2kg/1600Sqm的量應(yīng)用本發(fā)明的組合物。此外，每天將還與顆粒飼料混合的1％本組合物的細粉(60目)喂給河蝦。結(jié)論池中的河蝦用本組合物以及飼料添加劑處理后在100天內(nèi)長到可收獲的大小，而對比組平均為120～150天。產(chǎn)量要高得多且能保護蝦以抗各種感染如弧菌屬(Vibrio)細菌、病毒如黃頭(yellow head)病毒和白點病毒(White Spot Virus)。11．河蝦-弧菌感染。
在2個有弧菌感染的池中都采集糞便樣本。培養(yǎng)后糞便中弧菌的量為2×106cfu/克。在一個池中一周兩次地用3kg本組合物處理池水達2周。顆粒飼料也以1kg組合物/100kg顆粒飼料的比例混有本組合物。另一個池完全未處理。
2周后，從兩個池中采集蝦糞便并進行培養(yǎng)。結(jié)果未作任何處理的對比池糞便中含8×106cfu/克的弧菌，而用本發(fā)明的組合物處理的池中為2×103cfu弧菌/克糞便。12．貓和狗讓一些病態(tài)的和健康的貓、小貓和狗每天食用本發(fā)明的組合物達6個月以上。有消化問題的動物在數(shù)天內(nèi)已轉(zhuǎn)變成健康狀態(tài)，而健康的動物則保持良好狀態(tài)，結(jié)果排出正常的糞便，利于健康狀況且從動物散發(fā)更少的氣味。13．馬50匹待訓(xùn)練成奔馬的馬患有腸病，結(jié)果大便較稀，體重下降，營養(yǎng)不足，毛皮變差且整個健康狀況很差。喂給它們60克/天量的本發(fā)明飼料添加劑達2周。2周后將用量提高到180克/天。將該飼料添加劑與普通飼料混合以便馬能整天食用。結(jié)果3天后糞便就已變成正常顏色和正常大小。4周后馬開始增重且毛皮狀況和整個健康狀況都得到了改善。從那時起就又可以正常方式訓(xùn)練馬了。14．環(huán)境的改善由于大量飼養(yǎng)，所以從供煎烤的雛雞、下蛋的母雞和豬飼養(yǎng)場散發(fā)的氣味是嚴重的問題而且是嚴重的污染問題。當應(yīng)用本發(fā)明的組合物作飼料添加劑達6個月以上后，則飼養(yǎng)場的氣味減少了，這可容易地從氨味的減小而檢測。應(yīng)用本發(fā)明的組合物1個月后飼養(yǎng)場的狀況就急劇變化了。15．動物尿的分解在一個100米長、6米寬和5米深的特定容器中裝填2米深的一層鋸木屑。將50噸尿撒在鋸木屑層上，并以5kg/40Sqm的量加入本發(fā)明組合物。5小時后用鼓風(fēng)機吹入空氣而機械地攪起上表的1米層。沒有氣味的水溶液被濾過該鋸木屑層。該沒有氣味的水含小于100ppm的游離氮和硫化氫污染物。每天可分解50噸尿達18個月。18個月后必須用新鮮的鋸木屑替換1米深的上層鋸木屑。這種分解尿的方法很好，可避免環(huán)境問題。
類似地，本發(fā)明的添加劑還可用于降解消化污泥，而所得產(chǎn)物又可用作肥料和堆肥。16．用于人-急性細菌感染10位患有由細菌感染而引起的急性腸問題的人3次/天地服用3克本發(fā)明的組合物達1～3天。結(jié)果6位患者在12小時內(nèi)就不再感到疼痛和不舒服，未腹瀉。4位在24小時后就變成正常狀況。17．有營養(yǎng)問題的病人癌癥患者一般存在消化問題，他們不能以正常方式消化食物，說明他們的營養(yǎng)吸收很差，這對免疫防御系統(tǒng)的作用來說是個大問題。5位住院的癌癥患者嚴重降低體重且處于較差的狀況，每天5克地讓他們服用與飲用水混合的本發(fā)明組合物。結(jié)果6天后，大便稀的問題消失了，第2周體重略有增加。食欲好轉(zhuǎn)，且在4周后患者大幅度增重而且大體上健康狀況有改善。18．應(yīng)用不含酶、有機酸和細菌素的本發(fā)明組合物的對比試驗下列研究的目的在于調(diào)查本發(fā)明的組合物中是否需要酶、有機酸和細菌素。對適于煎烤的雛雞進行評價，并應(yīng)用生長速度和死亡率作為分析方法。1．用水洗滌按本生產(chǎn)方法發(fā)酵的產(chǎn)物，濾過一很細的網(wǎng)以便將酶、有機酸和細菌素與米糠和活微生物分開。用水洗滌殘余物。
水相中檢測不出可檢測量的活有機體而且在米糠和殘余活微生物中檢測不出可檢測量的有機酸和酶。2．用水洗滌按本生產(chǎn)方法發(fā)酵的產(chǎn)物，濾過一層網(wǎng)以便將活微生物、酶、有機酸和細菌素與米糠分開。3．下列試驗是用1天大小的雛雞進行的，在第45天結(jié)束試驗，每組中有1000雞，如前述應(yīng)用的那樣應(yīng)用計算的相同量的微生物，即在普通飼料中加入1％，見表4表4組 生長速度死亡率％平均重量1．對比組(無本發(fā)明的添加劑) 1.90kg 10.75％2．本發(fā)明的組合物。
2.10kg 4.63％3．本發(fā)明的組合物(無酶、有機酸和細菌素) 1.94kg 8.40％4．水相(只有酶、有機酸和細菌素) 1.90kg 9.10％5．水相(只有微生物，無酶、有機酸和細菌素)1.96kg 8.50％6．水相(含活微生物、酶、有機酸和細菌素) 2,15kg 4,15％結(jié)論是在相同的試驗場和相同的時間進行這些試驗的。雞數(shù)量(每組中1000只)多到足以評價結(jié)果。
上述結(jié)果清楚地表明，達到快速起始點要求組合本發(fā)明的活微生物、酶、有機酸和細菌素，這樣已導(dǎo)致試驗組2和6中的生長速度比對比組1和其它組高。試驗組6的結(jié)果略微比組2好，可這樣解釋當該水溶液與普通飲用水混合后，則所有的雞獲得本組合物的方式比獲得與顆粒飼料混合的本組合物更好和更容易。喂食本組合物3個月后豬的血液分析表5對比組TG TC PL FFAGLmg/dlmg/dlmg/dlμmol/lmg/dl92.02.28 76.6 89.9 128.3157130.992.03.07 28.7 98.0 138.021699.092.03.17 43.6 96.0 137.025585.392.04.06 20.2 66.0 101.198 100.092.04.15 84.0 85.9 114.1153164.792.04.24 35.1 92.9 141.3110115.292.05.20 35.1 89.9 96.7 21279.4表6對比組TG TC PL FFAGLmg/dlmg/dlmg/dlμmol/lmg/dl92.02.28 53.2 77.8 107.6192138.792.03.07 --- --- --- ------92.03.17 26.6 85.9 127.2475106.492.04.06 22.3 70.7 93.5 137107.492.04.15 18.1 80.8 110.990 164.792.04.24 29.8 71.7 103.3129139.292.05.20 14.9 62.1 75.0 47 74.0TG三酰甘油TC總的膽固醇PL磷脂F(xiàn)FA游離脂肪酸GL葡萄糖19．新鮮糞的腐爛將新鮮豬糞分成如下5個試驗組1．對比組2．與0.5％、1％、1.5％和2％本發(fā)明的組合物混合。
然后測定pH和氨。
在加入本組合物3小時前測定漿狀物中的pH。
在前3周中每隔2天用鼓風(fēng)機供給空氣。糞便中的pH
離糞便表面約5cm處空氣中的氨(ppm
在試驗組中2小時內(nèi)就開始腐爛。2周后試驗組的氣味比對比組減小了。氨是用Drager Gas Detector Pump accuro 21/31測定的。對比組中的糞便氣味在第0天特別大而且在第21天也強烈。試驗組中的氣味在第21天更呈酸(乳酸)味且辨識不出豬的氣味。
本試驗清楚地表明本組合物具有減少氨的生成和減小散發(fā)的性能。它還清楚地證實了從環(huán)境角度考慮保持更低pH的能力特別重要。由于低的pH以及氨散發(fā)少，所以應(yīng)用本組合物處理新鮮糞便可減小有關(guān)糞便的環(huán)境問題。20．陳糞的腐爛將3周的陳豬糞分成如下兩個試驗組1．對比組2．與1％本發(fā)明的組合物混合。
然后測定pH和氨。
將“陳”糞與水混合至總的水含量約為60％。
在加入本組合物3小時前測定漿狀物中的pH。在前2周中每天用鼓風(fēng)機供給空氣。結(jié)果小時 pH 氨對比組 實驗組1％ 對比組 試驗組1％
22．活微生物的耐溫性。
加熱本組合物的目的在于調(diào)查代謝活性。在10分鐘內(nèi)將本組合物加熱到100℃。然后將本組合物與水和糖混合并監(jiān)測二氧化碳(carbon oxide)的生成。
6小時后可清楚的辯認出糖的發(fā)酵，而2周后所有的糖都已發(fā)酵且可檢測到生成乳酸(pactic acid)、乙酸和乙醇。
結(jié)果表明，盡管溫度很高，但該微生物仍具有產(chǎn)生酶和有機酸的代謝活性。
權(quán)利要求
1．用于非反芻動物的非反芻動物飼料添加劑，特征在于它包括下列微生物中的至少三種a)戊糖片球菌，b)乳酸片球菌，c)粉狀畢赤酵母，d)布魯塞爾德克酵母，e)芽孢桿菌，f)鏈球菌，以及g)葡萄球菌。
2．權(quán)利要求1的動物飼料添加劑，特征在于它包括所有活微生物a)～g)。
3．動物飼料添加劑，特征在于它還包括下列水解酶中的一種或多種h)蛋白酶，i)糖分解酶，j)脂解酶，k)過氧化物酶，以及l(fā))轉(zhuǎn)移酶。
4．權(quán)利要求3的動物飼料添加劑，特征在于所述蛋白酶包括具有胰蛋白酶樣的和肽酶樣的活性的酶，所述糖分解酶包括淀粉酶樣的和纖維素酶樣的活性，所述脂解酶包括三酰甘油酶樣的活性；k)所述過氧化物酶包括過氧化氫酶樣的活性，以及l(fā))所述轉(zhuǎn)移酶包括?；D(zhuǎn)移酶樣的活性。
5．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于它包括至少一種、且優(yōu)選為所有的下列有機酸乳酸、乙酸和丁二酸，或其等同物。
6．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于它包括至少兩種下列細菌素片球菌素A、乳鏈菌肽、片球菌素AcH和乳酸片球菌PAC1.0。
7．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于它還包括本來可能已知的動物飼料。
8．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于它包括約8～15％的水，約15～30％的總蛋白質(zhì)，約0.5～5％總的脂質(zhì)(liquids)，約5～20％纖維，約8～20％灰分(礦物質(zhì))，約30～50％可溶性不含氮的物質(zhì)，約6×104～3×109個活戊糖片球菌/克，約1×103～1×107個活乳酸片球菌/克，約2×103～108個粉狀畢赤酵母/克，約2×103～2×108個布魯塞爾德克酵母/克，約2×103～4×108個鏈球菌/克，約8×102～6×107個芽孢桿菌/克，約6×104～6×107個葡萄球菌，約0.2％～5％乳酸，約0.1％～3％乙酸，約0.01％～2％丁二酸。
9．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于它具有基于干重約為2～15MJ/kg的能量含量。
10．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑，特征在于所述微生物、酶、有機酸和細菌素具有至少一種、優(yōu)選所有下列性能1)耐胃酸，2)耐熱高達70℃的最大值，3)能被造粒，4)在淡水和鹽水中保持穩(wěn)定，5)對動物和人無毒，6)防止感染，7)消除或治療感染，8)促進生長，9)良好的定居作用，10)殺菌效果，以及11)增強免疫效果。
11．權(quán)利要求1～10中任一項的動物飼料添加劑，特征在于該動物是人。
12．前述權(quán)利要求中任一項的動物飼料添加劑在保持動物體內(nèi)正常細菌區(qū)系和恢復(fù)病理細菌區(qū)系方面的應(yīng)用。
13．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在提高從腸道的消化吸收方面的應(yīng)用。
14．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在改善動物中免疫防御系統(tǒng)方面的應(yīng)用。
15．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在防止斷奶時腹瀉和其它感染中的應(yīng)用。
16．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在減小斷奶前小豬的死亡率方面的應(yīng)用。
17．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在防止屠宰豬的腹瀉和縮短飼養(yǎng)時間方面的應(yīng)用。
18．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在防止或減少沙門氏菌和/或彎曲桿菌方面的應(yīng)用。
19．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在防止河蝦和對蝦中細菌感染方面的應(yīng)用。
20．權(quán)利要求18的動物飼料添加劑在防止河蝦中弧菌感染方面的應(yīng)用。
21．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在防止人體中急性細菌感染方面的應(yīng)用。
22．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑在減少動物中膽固醇和/或脂肪含量方面的應(yīng)用。
23．權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑或權(quán)利要求12～21中任一項的應(yīng)用，其中的動物是人。
24．包括權(quán)利要求1～11中任一項的動物飼料添加劑的動物飼料。
全文摘要
非反芻動物飼料添加劑,它包括下列微生物中的至少三種:a)戊糖生球菌(Pediococcus pentosaceus)、b)乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、c)粉狀畢赤酵母(Picia farinosa)、d)布魯塞爾德克酵母(Dekkera bruxellensis)、e)芽孢桿菌(Bacilli)、f)鏈球菌(Streptococci)和g)葡萄球菌(Staphylococci)。
文檔編號A61K35/74GK1225556SQ97192289
公開日1999年8月11日 申請日期1997年2月14日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月14日
發(fā)明者P·邦克, R·林德布洛姆, K·卡瓦施馬 申請人:生物飼料(泰國)有限公司