專利名稱：神經(jīng)損傷修復(fù)制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物制劑，尤其涉及一種應(yīng)用于神經(jīng)損傷修復(fù)手術(shù)中的生物制劑。
傳統(tǒng)觀念認(rèn)為中樞神經(jīng)細(xì)胞不能再生，脊髓損傷導(dǎo)致的神經(jīng)功能障礙是不可逆的，如外傷性截癱至今仍是醫(yī)學(xué)界急待解決的難題。近年來，隨著基礎(chǔ)研究的近展及新技術(shù)的應(yīng)用，這一傳統(tǒng)觀念發(fā)生了變化，自80年代以來神經(jīng)組織移植進(jìn)入高潮。目前，胎腦、脊髓組織移植通常采用三種方法1、將移植物直接放入脊髓損傷的實(shí)質(zhì)中；2、將脊髓斷端壞死部分先行切除，清除破碎組織，將移植物通過健康的脊髓部位注射到斷端區(qū)，使移植物充分固定；3、將移植物注射到脊髓斷端的空隙中，然后用蜘網(wǎng)膜和硬腦膜包繞和覆蓋，或同時做大網(wǎng)膜移植；當(dāng)移植物為細(xì)胞懸液時則采用多點(diǎn)注射的方法。對外周神經(jīng)的斷裂損傷則一般采用顯微外科縫合。
脊髓損傷后的幾種神經(jīng)組織移植方法存在以下幾點(diǎn)不足1、移植組織塊中心部分的缺血，缺氧壞死。
2、神經(jīng)組織移植時易帶入大量非神經(jīng)細(xì)胞，過渡增殖的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，易形成斷端囊腔及瘢痕，使神經(jīng)軸突再生時越過斷面接通脊髓形成了障礙。
3、近年來以大網(wǎng)膜包裹移植物，以求使得局部血循環(huán)得到改善，但患者承受的痛苦大，需要從腹腔剪取大網(wǎng)膜，增加手術(shù)復(fù)雜性。
4、脊髓嚴(yán)重挫滅、缺損時，移植物注射在兩斷端，期待新生的神經(jīng)軸突越過2-3cm的缺損區(qū)向另一斷端生長，接通斷裂的脊髓并重建功能是困難的。外周神經(jīng)損傷后，手術(shù)中縫合處理有以下不足1、縫線做為一種異物是不被吸收的，對吻合口的異物刺激是長久的。
2、馬尾神經(jīng)缺乏結(jié)締組織不易縫合，吻合難度大，過多的操作必然會加重吻合口兩斷端的損傷。
3、由于縫線的作用會造成吻合口兩側(cè)的缺血改變，引起局部血循環(huán)障礙。
本發(fā)明的目的是提供一種簡單、易行，能夠促進(jìn)神經(jīng)再生，促進(jìn)微血管新生的脊髓及外周神經(jīng)損傷修復(fù)制劑。
纖維蛋白原在纖維蛋白酶的作用下形成纖維蛋白，而纖維蛋白纖維互相交織而構(gòu)成網(wǎng)狀物，網(wǎng)隙中可充滿神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)，此結(jié)構(gòu)在神經(jīng)損傷修復(fù)中可將神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)局限在神經(jīng)損傷部位，并緩釋作用，從而促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的生長、分化、促進(jìn)神經(jīng)再生，促進(jìn)微血管新生，達(dá)到修復(fù)神經(jīng)的目的。
本發(fā)明就是基于這樣的原理而設(shè)計(jì)的。由于脊髓、馬尾及其它張力較高的外周神經(jīng)損傷后修復(fù)條件及方法不同，為臨床使用方便，盡可能節(jié)約制劑，降低成本，本發(fā)明的神經(jīng)損傷修復(fù)制劑可分為A、B、C三種產(chǎn)品。
一、神經(jīng)損傷修復(fù)制劑A制劑A應(yīng)用于各種原因造成的脊髓損傷的修復(fù)，神經(jīng)細(xì)胞移植，脊髓重建。該制劑由二部分組成，即部分I、部分II，部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原5-10毫克；部分II由下列組分組成每8.0毫升伊格氏(Eagle＇s)MEM培養(yǎng)液配以0.025摩爾/升CaCl2水溶液0.3-0.5毫升神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-20000生物活性單位(BU)運(yùn)動神經(jīng)生長因子(MNGF) 4-16生物活性單位(BU)纖維蛋白酶(Thrombin)200-500國際單位(IU)為了增強(qiáng)制劑使用時的抗纖溶作用，該制劑部分I中還可包括抑肽酶，其量為每毫升0.05摩爾/升PH為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液配以抑肽酶2000-3000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。抑肽酶可使纖維蛋白凝膠塊抗溶時間延長，使該制劑更好地達(dá)到緩釋作用。
本制劑各組分均為無菌分裝，4℃以下貯存?zhèn)溆?。其使用方法為a、將組成試劑的各組分放入37℃的溫箱中保溫15-30分鐘；b、將部分I各組分混勻制成纖維蛋白原溶液，將部分II各組分混勻制成纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液；c、冰浴下取12-16周水囊引產(chǎn)胎兒脊髓，分離胸、腰段，用纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液制備細(xì)胞懸液，使之成為6-7×106-7細(xì)胞/毫升；d、將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中，然后放入37℃的培養(yǎng)箱中孵育30-60分鐘；e、將細(xì)胞懸液移入試管中，按照細(xì)胞懸液與纖維蛋白原溶液2.5-3.5/1(ml\ml)的比例，加入預(yù)先保溫至37℃的纖維蛋白原溶液，混合均勻；f、靜置2-3分鐘，待其凝膠化后，加入人工腦脊液，使形成的細(xì)胞凝塊完全浸于人工腦脊液中，密封試管口，置37℃保溫箱中備用。
上述全部操作，在嚴(yán)格無菌條件下進(jìn)行，引產(chǎn)胎兒應(yīng)在產(chǎn)后一小時內(nèi)應(yīng)用，制成的神經(jīng)細(xì)胞凝塊應(yīng)在2-4小時移植。移植術(shù)應(yīng)依據(jù)各種檢查結(jié)果，初步判斷脊髓損傷程度及所需移植細(xì)胞塊的大小，據(jù)此制備相應(yīng)的細(xì)胞懸液，制成臨床手術(shù)中所需要的移植細(xì)胞塊。
由于在使用時，該制劑部分I可用接受手術(shù)的病人的自身血漿所替代，因此該制劑還可僅包括部分II各組分。這種制劑的使用方法與上述使用方法相同，只不過將纖維蛋白原溶液的配制步驟，改為病人血漿的制備步驟(步驟b)，將細(xì)胞懸液與纖維蛋白原溶液的混和配制步驟(步驟e)改為細(xì)胞懸液與血漿的混和配制步驟即可。
二、神經(jīng)損傷修復(fù)制劑B制劑B用于張力不大的外周神經(jīng)、馬尾神經(jīng)斷裂時用于粘合神經(jīng)。該制劑B由二部分組成，即部分I、部分II，部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原75-150毫克；部分II由下列組分組成每毫升0.025摩爾/升CaCl2生理鹽水配以纖維蛋白酶300-800國際單位(IU)神經(jīng)生長因子2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子 5000-10000生物活性單位(BU)與制劑A相同，該制劑部分I中也可包括抑肽酶，其量為每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液配以抑肽酶2000-3000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
本制劑各組分均為無菌分裝，4℃以下貯存?zhèn)溆?。其使用方法為a、將組成制劑的各組分放入37℃溫箱內(nèi)保溫15-30分鐘；b、將部分I各組分混勻制成纖維蛋白原溶液，將部分II各組分混勻制成纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液。
使用時以微量進(jìn)樣器或注射器分別取等量的纖維蛋白原溶液、纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液，同時滴加在對好的吻合口周圍，靜置約2分鐘后，可見凝塊自然形成，吻合口粘合牢固。
如同制劑A一樣，由于在使用時該制劑部分I也可用接受手術(shù)的病人的自身血漿所替代，因此，該制劑B也可僅包括部分II各組分。不含部分I的制劑B的使用方法與含部分I的制劑B的使用方法相同，只不過將纖維蛋白原溶液的配制步驟(步驟b)，改為病人血漿的制備步驟，使用時，用血漿與纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液等量同時滴加在對好的吻合口周圍即可。
三、神經(jīng)損傷修復(fù)制劑C制劑C適用于各種原因所致神經(jīng)損傷局部，或神經(jīng)斷裂縫合后吻合口局部使用。該制劑由二部分組成，即部分I、部分II，部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原5～10毫克。
部分II由下列組分組成每毫升生理鹽水配以纖維蛋白酶 100～200國際單位(IU)神經(jīng)生長因子 2000～4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子5000～10000生物活性單位(BU)
如同制劑A、B一樣，該制劑C部分I中也還可包括抑肽酶，其量也為每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液配以抑肽酶2000～3000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
本制劑各組分均為無菌分裝，4℃以下貯存?zhèn)溆?。其使用方法為a.將組成制劑的各組分放入37℃溫箱內(nèi)保溫15～30分鐘；b.將部分I各組分混勻制成纖維蛋白原溶液，將部分II各組分混勻制成纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液。
使用時，用微量進(jìn)樣器或注射器吸取纖維蛋白原溶液及纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液等量同時加在已暴露的神經(jīng)損傷部位或神經(jīng)縫合吻合口部位，靜置2分鐘左右，待形成纖維蛋白膠后，常規(guī)縫合組織皮膚即可。
如同制劑A、B一樣，由于在使用時，該制劑也可用接受手術(shù)的病人自身血漿替代，因此，該制劑C也可僅包括部分II各組分。不含部分I的制劑c的使用方法與含部分I的制劑c的使用方法相同，只不過將纖維蛋白原溶液的配制步驟(步驟b)改為病人血漿的制備步驟，用血漿與纖維蛋白酶神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)液等量同時滴加在神經(jīng)損傷部位即可。
本發(fā)明所用纖維蛋白原、纖維蛋白酶以及抑肽酶可用目前市場上已有產(chǎn)品，也可用常規(guī)方法制備。纖維蛋白原、纖維蛋白酶在本制劑中的作用如下纖維蛋白原在纖維蛋白酶作用下形成纖維蛋白，在顯微鏡下可見到纖維蛋白纖維互相交織構(gòu)成網(wǎng)狀物，網(wǎng)隙中可充以含有神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)的液體。如果作神經(jīng)細(xì)胞移植則在網(wǎng)隙中充滿神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)。在神經(jīng)損傷修復(fù)中，此結(jié)構(gòu)具有將神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)局限在神經(jīng)損傷部位的載體作用，并逐漸被組織吸收而達(dá)到緩釋作用，并且是移植神經(jīng)細(xì)胞的支架和良好的生長、分化環(huán)境，促進(jìn)神經(jīng)再生。
本發(fā)明中所用神經(jīng)生長因子(NGF)，堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、運(yùn)動神經(jīng)生長因子(MNGF)為已有產(chǎn)品，其均為具有生物活性的多肽因子，必須經(jīng)過嚴(yán)格的生物活性檢測，其比活性應(yīng)符合下列標(biāo)準(zhǔn)
各種因子在本發(fā)明制劑中的作用為1.神經(jīng)生長因子(NGF)促進(jìn)發(fā)育中的交感和感覺神經(jīng)元的分化和成熟。促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞分化，細(xì)胞內(nèi)RNA和蛋白質(zhì)合成增加，微絲、微管等細(xì)胞器也增加，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸羥化酶、多巴胺β-羥化酶以及膽堿乙酰化酶等遞質(zhì)合成酶的活性也增高，NGF可促進(jìn)神經(jīng)元損傷的修復(fù)。
2.堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)激活人體多種細(xì)胞，可促進(jìn)大多數(shù)來源于中胚葉及神經(jīng)外胚葉細(xì)胞增殖。生理作用廣泛，有明顯的神經(jīng)營養(yǎng)作用，促進(jìn)微血管新生，誘導(dǎo)血管趨向性走行，改善微循環(huán)，促進(jìn)損傷神經(jīng)組織的修復(fù)。
3.運(yùn)動神經(jīng)生長因子(MNGF)促進(jìn)脊髓前角運(yùn)動神經(jīng)元的生存、分化，促進(jìn)運(yùn)動神經(jīng)元損傷的修復(fù)。
本發(fā)明用目前發(fā)達(dá)國家沿用的神經(jīng)細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)，組織薄片及神經(jīng)節(jié)培養(yǎng)技術(shù)，從細(xì)胞生物學(xué)角度及亞細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)水平，進(jìn)行了多項(xiàng)離體實(shí)驗(yàn)研究。以傳統(tǒng)的雞胚尿囊膜法及制作動物神經(jīng)損傷模型，從功能及細(xì)胞組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行在體動物實(shí)驗(yàn)。各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均獲得一致陽性結(jié)果，證實(shí)了本組制劑具有如下功能1.促進(jìn)神經(jīng)再生。2.促進(jìn)毛細(xì)管新生。3.在纖維蛋白基質(zhì)上神經(jīng)細(xì)胞貼壁生長良好。4.神經(jīng)細(xì)胞在纖維蛋白形成的三維結(jié)構(gòu)中生長、分化良好。5.脊髓薄片及背根神經(jīng)節(jié)等神經(jīng)組織在纖維蛋白形成的三維結(jié)構(gòu)中成活、生長、分化良好。6.纖維蛋白膠對張力不高的神經(jīng)根、馬尾神經(jīng)具有粘合作用。7.神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)隨纖維蛋白膠逐漸被吸收而達(dá)到緩釋作用。8.所用制劑在不同種動物體內(nèi)及不同種動物來源的神經(jīng)細(xì)胞及神經(jīng)組織培養(yǎng)過程中未見到免疫排斥現(xiàn)象。9.離體及在體實(shí)驗(yàn)均證實(shí)所用制劑無毒性作用，對局部組織無刺激。
本發(fā)明制劑A已做臨床試驗(yàn)研究，分別選取新鮮骨折、陳舊性骨折病人，所選病人皆為完全性遲緩性癱，有不同程度的截癱平面，脊髓損傷缺損為2-5厘米。用本發(fā)明制劑A手術(shù)后1-2周，所有病人截癱平面以下皆出現(xiàn)不同程度的燒灼感、麻木，疼痛減輕。觸診肢體溫度較術(shù)前升高，足部出汗，截癱平面下降1-2脊髓神經(jīng)節(jié)段。術(shù)后三周有的病人雙膝腱、跟腱反射出現(xiàn)正常。術(shù)后二個月有的病人截癱平面以下，足趾位置覺恢復(fù)，能自行排大便，但力弱。所實(shí)驗(yàn)病例均未發(fā)生手術(shù)感染及其它合并癥，亦未發(fā)生移植物的排斥反應(yīng)，術(shù)后體溫在38℃以下，一般情況平穩(wěn)。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明制劑盒A在修復(fù)脊髓損傷中的應(yīng)用是可行的，其在治療截癱的脊髓重建手術(shù)中的應(yīng)用效果是良好的。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)1.為嚴(yán)重脊髓損傷缺損、神經(jīng)細(xì)胞移植提供了一種新的方法，具有促進(jìn)神經(jīng)再生、促進(jìn)微循環(huán)建立的作用，避免了過多的非神經(jīng)細(xì)胞的植入，從而達(dá)到脊髓重建的目的。
2.對于馬尾等張力不大的斷裂神經(jīng)可以直接用本制劑粘合而不必縫合，易操作、手術(shù)時間短，對局部組織無損傷，不引起組織缺血和異物反應(yīng)。
3.對于需要縫合的神經(jīng)吻合口，使用本制劑將神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)及促進(jìn)血管生長物質(zhì)固定在吻合口處，可達(dá)到緩釋作用，促進(jìn)神經(jīng)再生及微循環(huán)建立。
4.制劑可被組織吸收。
5.所用主要成分均為正常人體存在物質(zhì)，無急、慢毒性、無免疫排斥。
實(shí)施例一一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(A)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液4毫升纖維蛋白原 20毫克部分II由下列組分組成伊格氏(Eagle＇s)MEM培養(yǎng)液 8毫升0.025摩爾/升CaCl2水溶液 0.3毫升神經(jīng)生長因子 2000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子 5000生物活性單位(BU)運(yùn)動神經(jīng)生長因子4生物活性單位(BU)纖維蛋白酶200國際單位(IU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例二與實(shí)施例一相同，只是部分I中還包括抑肽酶8000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例三與實(shí)施例一相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
實(shí)施例四一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(A)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液4毫升纖維蛋白原40毫克部分II由下列組分組成伊格氏(Eagle＇s)MEM培養(yǎng)液 8毫升0.025摩爾/升CaCl2水溶液 0.5毫升神經(jīng)生長因子4000生物活性單位(BU)
堿性成纖維細(xì)胞生長因子20000生物活性單位(BU)運(yùn)動神經(jīng)生長因子 16生物活性單位(BU)纖維蛋白酶 500國際單位(IU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例五與實(shí)施例四相同，只是部分I中還包括抑肽酶12000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例六與實(shí)施例四相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
實(shí)施例七一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(B)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液2毫升纖維蛋白原 150毫克部分II由下列組分組成0.025摩爾/升CaCl2水溶液 2毫升纖維蛋白酶 600國際單位(IU)神經(jīng)生長因子 4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子10000生物活性單位(BU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例八與實(shí)施例七相同，只是部分I中還包括抑肽酶4000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例九與實(shí)施例七相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
實(shí)施例十一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(B)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲胺基甲烷生理鹽水緩沖液 2毫升纖維蛋白原300毫克部分II由下列組分組成0.025摩爾/升CaCl2水溶液 2毫升纖維蛋白酶 1600國際單位(IU)神經(jīng)生長因子8000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子 20000生物活性單位(BU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例十一與實(shí)施例十相同，只是部分I中還包括抑肽酶4000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例十二與實(shí)施例十相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
實(shí)施例十三一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(C)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液 2毫升纖維蛋白原 10毫克部分II由下列組分組成生理鹽水 2毫升纖維蛋白酶 200國際單位(IU)神經(jīng)生長因子 4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子10000生物活性單位(BU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例十四與實(shí)施例十二相同，只是部分I中還包括抑肽酶4000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例十五與實(shí)施例十二相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
實(shí)施例十六一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑(C)，該制劑由兩部分組成，即部分I、部分II，部分I由下列組分組成
0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液 2毫升纖維蛋白原20毫克部分II由下列組分組成生理鹽水 2毫升纖維蛋白酶 400國際單位(IU)神經(jīng)生長因子 8000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子20000生物活性單位(BU)該制劑各種組分均為無菌分裝。
實(shí)施例十七與實(shí)施例十六相同，只是部分I中還包括抑肽酶6000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
實(shí)施例十八與實(shí)施例十六相同，只是該制劑只包括部分II，而不包括部分I。
權(quán)利要求
1.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由二部分組成，即部分I、部分II，所述部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原5～10毫克；所述部分II由下列組分組成每8.0毫升伊格氏(Eagle′s)MEM培養(yǎng)液配以0.025摩爾/升CaCl2水溶液0.3-0.5毫升神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-20000生物活性單位(BU)運(yùn)動神經(jīng)生長因子(MNGF) 4-16生物活性單位(BU)纖維蛋白酶(Thrombin)200-500國際單位(IU)所述各種組分均為無菌分裝。
2.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由下列組分組成每8.0毫升伊格氏(Eagle′s)MEM培養(yǎng)液配以0.025摩爾/升CaCl2水溶液0.3-0.5毫升神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-20000生物活性單位(BU)運(yùn)動神經(jīng)生長因子(MNGF) 4-16生物活性單位(BU)纖維蛋白酶(Thrombin)200-500國際單位(IU)所述各種組分均為無菌分裝。
3.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由二部分組成，即部分I、部分II，所述部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原75～150毫克；所述部分II由下列組分組成每毫升0.025摩爾/升CaCl2生理鹽水配以纖維蛋白酶(Thrombin) 300-800國際單位(IU)神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF) 5000-10000生物活性單位(BU)所述各種組分均為無菌分裝。
4.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由下列組分組成，每毫升0.025摩爾/升CaCl2生理鹽水配以纖維蛋白酶(Thrombin) 300-800國際單位(IU)神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-10000生物活性單位(BU)所述各種組分均為無菌分裝。
5.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由二部分組成，即部分I、部分II，所述部分I包括下列組分每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以纖維蛋白原5～10毫克；所述部分II由下列組分組成每毫升生理鹽水配以纖維蛋白酶(Thrombin)100-200國際單位(IU)神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-10000生物活性單位(BU)所述各種組分均為無菌分裝。
6.一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于它由下列組分組成，每毫升生理鹽水配以纖維蛋白酶(Thrombin)100-200國際單位(IU)神經(jīng)生長因子(NGF) 2000-4000生物活性單位(BU)堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)5000-10000生物活性單位(BU)所述各種組分均為無菌分裝。
7.如權(quán)利要求1或3或5所述的神經(jīng)損傷修復(fù)制劑，其特征在于所述部分I還包括抑肽酶，其量為每毫升0.05摩爾/升PH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷(Tris)生理鹽水緩沖液配以抑肽酶2000～3000胰蛋白酶標(biāo)定單位(TIU)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種神經(jīng)損傷修復(fù)制劑。它主要包括纖維蛋白原、0.05摩爾/升pH值為7.4的三羥甲基胺基甲烷生理鹽水緩沖液、纖維蛋白酶、伊格氏(Eagle's)MEM培養(yǎng)液、0.025摩爾/升CaCl
文檔編號A61K38/18GK1144693SQ96106458
公開日1997年3月12日 申請日期1996年8月8日 優(yōu)先權(quán)日1996年8月8日
發(fā)明者陳素蘭 申請人:陳素蘭