專(zhuān)利名稱(chēng)：：類(lèi)血漿溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明一般地涉及水溶液領(lǐng)域，例如，用來(lái)灌注需要灌注的活實(shí)驗(yàn)對(duì)象并可充當(dāng)血漿的有效代用品的類(lèi)血漿溶液。本發(fā)明也涉及保存哺乳動(dòng)物類(lèi)供體生物器官的生物學(xué)完整性的方法(如灌注了本發(fā)明溶液的低溫保存實(shí)驗(yàn)對(duì)象器官與組織的優(yōu)異生物學(xué)完整性所示)，還涉及使部分放血或基本上完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象保持在比哺乳動(dòng)物通常保持的溫度低得多的溫度的方法。
背景技術(shù)：
：已知有兩種臨床應(yīng)用的器官保存方法(1)先灌注約5分鐘，隨后冷藏(2℃)，和(2)用含有白蛋白或血漿的溶液繼續(xù)灌注。用于先灌注隨后冷藏的溶液多數(shù)基于Collins等人(1969)(Lancet21219)和Sacks等人(1973)(Lancet11024)的溶液。Ross等人(1976，Transplantation21，498)比較了用各種溶液沖洗和貯藏72小時(shí)之后的狗腎保存。發(fā)現(xiàn)只有用高滲檸檬酸鹽(HC)溶液(部分地包含80mMK+，55mM草酸根，400mOsmol/kg，pH7.1)保存的腎才能在72小時(shí)后存活。Collins和Sacks溶液部分地含有115-126mMK+，290-430mOsmol/kg，pH7.0-7.3。Wall等人(1977)(Transplantation23210)報(bào)告了用一種部分地含有250mg右旋糖和15mEq磷酸鉀的溶液低溫保存人體肝臟長(zhǎng)達(dá)約4小時(shí)。Bishop&Ross(1978)(Transplantation25235)報(bào)告說(shuō)，腎功能在Ross等人(1976)(同上)的HC溶液中保存得最好，而在其它可得溶液中則不能。Fischer等人(1985)(Transplantation39122)發(fā)現(xiàn)一種用于低溫局部缺血貯藏的新保存溶液(部分地含有110mMNa+、115mMK+、400mOsmol/kg、溶劑D2O、110mMHEPES)在臨床使用時(shí)優(yōu)于其它溶液，包括Collins、Sacks和HC溶液。在用于連續(xù)器官灌注的溶液方面，Belzer等人(1985)(Transplantation39118)報(bào)告了一種當(dāng)對(duì)腎臟灌注48小時(shí)并貯藏24小時(shí)時(shí)能保存腎功能的新開(kāi)發(fā)溶液(部分地包含80mM葡糖酸鈉、22mEq/lK+、128mEq/lNa+、4.9mM腺苷、10mMHEPES、3.0mM谷胱甘肽、3.75％白蛋白，pH7.45)。Kallerhoff等人(1985)(Transplantation39485)考察了溫度對(duì)用兩種不同溶液連續(xù)灌注的器官pH的影響(Euro-Collins10mMNa+，115mMK+，198mM葡萄糖，406mOsmol/l，pH7.2，20℃；HTK15mMNa+，10mMK+，2.0mM色氨酸，180mM組胺酸，30mM甘露醇，310mOsmol/l，pH7.3，8℃)。在5℃～35℃之間的溫育溫度，HTK溶液與Euro-Collins溶液相比，總是使pH保持在更高的數(shù)值。Klebanoff&Phillips(1969)(Cryobiology6121)描述了用緩沖的Ringer′s乳酸鹽在7.1～16℃灌注的狗的低溫?zé)o血灌注。Segall等人(美國(guó)專(zhuān)利No.4,923,442)描述了一種能使實(shí)驗(yàn)對(duì)象及其器官保持在20℃以下溫度的血漿代用品，有四種不同溶液-一種基本溶液、一種心麻痹誘發(fā)溶液、一種心麻痹保持溶液和一種恢復(fù)溶液?；救芤汉猩頋舛鹊碾娊赓|(zhì)，大分子腫脹劑，在生理pH有效的常用生物緩沖劑，糖，和4～5mEq的K+。心麻痹誘發(fā)溶液的K+濃度為25～45mEq；心麻痹保持溶液的K+濃度為15～45mEq；恢復(fù)溶液的K+濃度為6～10mEq。Segall等人(美國(guó)專(zhuān)利No.5,130,230)進(jìn)一步描述了這個(gè)四溶液體系，其中恢復(fù)溶液含0～10mEqK+。發(fā)明概要本發(fā)明涉及一種適合于使部分放血或基本上完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象在常溫或比哺乳動(dòng)物通常保持的溫度低得多的溫度、一般低于37～38℃且高于-2℃?；畹膯我蝗芤旱氖褂梅椒ǎ撊芤喊瑏喩硭胶?或生理水平的K+和Mg++；生理Na+、Ca++、Cl-；大分子腫脹劑；有機(jī)羧酸或其鹽；和糖。本發(fā)明的溶液可在正常體溫作為血漿增容劑使用。本發(fā)明的溶液也可用來(lái)使灌注實(shí)驗(yàn)對(duì)象和/或其器官在暴露于顯著低溫條件期間和之后保持生命或生物學(xué)完整性。本發(fā)明溶液也可以用來(lái)使溫度適中的實(shí)驗(yàn)對(duì)象在氧濃度增加到高達(dá)100％O2的加壓環(huán)境中保持足以使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血液成分能充分恢復(fù)的時(shí)間。按照本發(fā)明的溶液可用來(lái)灌注哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象并使之冷卻到比該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的正常溫度低得多的溫度。該溶液可以用來(lái)使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象在顯著低溫下保持長(zhǎng)的時(shí)間，通常超過(guò)1小時(shí)，此后該實(shí)驗(yàn)對(duì)象可恢復(fù)原樣而無(wú)明顯的持久不良效應(yīng)。本發(fā)明溶液的一個(gè)重要特性是，不需要多種溶液就能將其有效地施用于一種實(shí)驗(yàn)對(duì)象，達(dá)到哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血液替代或低溫保持之目的。本發(fā)明的溶液可以在血漿增容或血液替代的所有階段使用。本發(fā)明溶液的另一個(gè)重要特性是在所有給藥步驟均有亞生理量的K+這一特色。這個(gè)要求降低了高鉀血誘發(fā)心力旺盛而導(dǎo)致靈長(zhǎng)目和人體輸血的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明溶液的另一個(gè)重要特性是不存在常用的生物緩沖劑。本發(fā)明溶液中常用生物緩沖劑的不存在，賦與了使這種溶液能定期加熱消毒而不會(huì)發(fā)生溶液成分降解的重要醫(yī)療優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的溶液要求存在一種有機(jī)羧酸、其鹽或短鏈酯。這種有機(jī)羧酸、其鹽或酯是本發(fā)明溶液當(dāng)用于哺乳動(dòng)物中時(shí)能保持生物學(xué)上適用的pH范圍的動(dòng)態(tài)緩沖體系的一種成分。本發(fā)明的溶液要求存在一種足以保持生理滲透壓的大分子腫脹劑。本發(fā)明溶液中使用的大分子腫脹劑可以是蛋白或淀粉。本發(fā)明溶液的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，它可以用于哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象血液替代的所有階段，從該實(shí)驗(yàn)對(duì)象血液的最初洗出直至全部或基本上全部循環(huán)血液的充分替代。本發(fā)明的一個(gè)特色是它可以用來(lái)保持無(wú)血哺乳動(dòng)物，也可用來(lái)保持用血液重新灌注期間的哺乳動(dòng)物。較好實(shí)施方案的詳細(xì)描述必須注意的是，這里和所附的權(quán)利要求書(shū)中使用的單數(shù)形式“一種”、“一個(gè)”和“這種”包括復(fù)數(shù)參照物，除非上下文另有明確的專(zhuān)指。因此，例如，“一種配方”的提法包括不同配方的混合物，“這種處理方法”的提法包括對(duì)技術(shù)熟練人員已知的等效步驟和方法的稱(chēng)謂，等等。除非另有定義，否則這里使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)的含義均與本發(fā)明所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員通常理解的相同。盡管類(lèi)似或等效于這里所述的任何方法和材料都可以用于本發(fā)明的實(shí)施或試驗(yàn)，但現(xiàn)在描述的是較好的方法和材料。這里提到的所有出版物均列為本文的參考文獻(xiàn)，以說(shuō)明和公開(kāi)引用該文獻(xiàn)所涉及的具體信息。靈長(zhǎng)目的紅血細(xì)胞含有高濃度的鉀離子(K+)。當(dāng)靈長(zhǎng)目血液貯存時(shí)(從血庫(kù)得到的血液實(shí)際上都是這種情況)，甚至紅血細(xì)胞的低水平溶解一般也導(dǎo)致高濃度鉀離子。這是由于鉀離子從溶解的靈長(zhǎng)目紅血細(xì)胞內(nèi)部釋放到這些細(xì)胞周?chē)难獫{中。因此，當(dāng)輸血時(shí)血液將是高鉀血的。如果把血液輸給有足夠循環(huán)血液的患者，由于高濃度鉀離子被稀釋?zhuān)岣叩拟浰綍?huì)被擴(kuò)散。然而，如果靈長(zhǎng)目血液轉(zhuǎn)輸?shù)矫绹?guó)專(zhuān)利4,924,442中所述類(lèi)型、含有高濃度鉀的維持溶液中，則問(wèn)題就更嚴(yán)重。這種轉(zhuǎn)輸血液中的鉀離子濃度將不會(huì)被稀釋到安全水平。結(jié)果，心力不足可能發(fā)生，而且確實(shí)經(jīng)常發(fā)生。高鉀血也與燒傷、事故、外科、化療及其它身體創(chuàng)傷造成的組織損壞有關(guān)。先有技術(shù)指出，器官低溫保存要求存在高濃度鉀離子才能維持組織完整性。按照本發(fā)明的溶液含有亞生理量的鉀。因此，這種溶液能稀釋貯存的轉(zhuǎn)輸血液中的鉀離子濃度。結(jié)果，可以更容易地控制高濃度鉀離子和由此引起的潛在心律失常和心力不足。含有亞生理量鉀的溶液也可用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血液替換和低溫保持。所謂“亞生理量鉀”系指0～5mEq/lK+(0～5mM)，較好是2～3mEq/lK+(2～3mM)。本發(fā)明的溶液包含一種當(dāng)放在水溶液中時(shí)可用來(lái)灌注需要灌注的實(shí)驗(yàn)對(duì)象的材料混合物。雖然這些材料可以作為一種在加熱滅菌之前向其中加水的干混合物提供，但這種溶液較好以無(wú)菌水溶液的形式提供。本發(fā)明的溶液可以作為一種單一溶液用于取出和更換實(shí)驗(yàn)對(duì)象血液或冷卻實(shí)驗(yàn)對(duì)象的步驟的所有階段。這樣的階段包括正常體溫的血液稀釋或血漿增容，低體溫的血液更換和交換，顯著低體溫的血液替代，和實(shí)驗(yàn)對(duì)象升溫?！暗腕w溫”定義為比37-38℃正常體溫低4～5℃。換言之，低溫狀況可認(rèn)為始于約32-35℃的體溫?！帮@著低體溫”定義為恰好低于凝固點(diǎn)(-2℃)至約10℃的體溫。因此，這里使用的“低體溫”(hypothermicbodytemperature)或“低溫”(hypothermia)這一術(shù)語(yǔ)包含約-2～3℃至約32～35℃的體溫。本發(fā)明的溶液不包括常用生物緩沖劑。所謂“常用緩沖劑”系指一種在離體溶液中使pH保持在一個(gè)特定范圍的化合物。所謂“常用生物緩沖劑”系指一種在無(wú)細(xì)胞體系中使pH保持在7～8的生物學(xué)范圍的化合物。常用生物緩沖劑的實(shí)例包括N-2-羥基乙基哌嗪-N′-2-羥基丙磺酸(HEPES)，3-(N-嗎啉代)丙磺酸(MOPS)，2-([2-羥基-1，1-二(羥甲基)乙基]氨基)乙磺酸(TES)，3-[N-三(羥甲基)甲胺基]-2-羥基乙基]-1-哌嗪丙磺酸(EPPS)，三(羥甲基)氨基甲烷(THAM)，和三(羥甲基)甲胺基甲烷(TRIS)。常用生物緩沖劑獨(dú)立于正常生物過(guò)程而發(fā)揮作用，例如，常用緩沖劑在活體中不被代謝，而且在無(wú)細(xì)胞體系中最強(qiáng)。本發(fā)明的溶液使用正常生物成分來(lái)保持活體生物pH，即一個(gè)稱(chēng)為“動(dòng)態(tài)緩沖體系”的概念。這個(gè)動(dòng)態(tài)緩沖體系概念基于本發(fā)明者的如下發(fā)現(xiàn)在活體中能被代謝、在生物范圍內(nèi)無(wú)固有緩沖能力的化合物，如乳酸鹽、與其它溶液成分相互作用而在動(dòng)物體內(nèi)保持生物學(xué)上適當(dāng)?shù)膒H，甚至在低體溫和基本上無(wú)血狀況下也能如此。本發(fā)明的動(dòng)態(tài)緩沖體系部分地依賴(lài)于氧合作用和二氧化碳(CO2)脫除；而且允許有但不一定要有附加碳酸氫鹽(NaHCO3)。本發(fā)明的動(dòng)態(tài)緩沖劑沒(méi)有或基本上沒(méi)有能力充當(dāng)生物系統(tǒng)以外的緩沖劑，即一種動(dòng)態(tài)緩沖劑能在活體生物范圍內(nèi)但不能在無(wú)細(xì)胞環(huán)境中保持pH。本發(fā)明動(dòng)態(tài)緩沖劑的一種成分包括一種羧酸、其鹽或酯。所謂羧酸、其鹽或酯系指其一般結(jié)構(gòu)式為RCOOX的化合物，式中R是烷基、鏈烯基或芳基，支鏈或直鏈的，含有1～30個(gè)碳，這些碳上可以有取代基，且較好是構(gòu)成乳酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙酮酸鹽或其它生物代謝物的碳鏈的碳鏈之一；X是氫或鈉或其它能在氧位置上連接的生物學(xué)上可兼容離子取代基，或者是含有1～4個(gè)碳的短直鏈或支鏈烷基，如-CH3、-CH2CH3。如表1中所示，一種典型的常用緩沖溶液(25mMTRIS)的初始pH約7.7，添加多達(dá)0.12ml1.25MHCl溶液時(shí)保持7.2以上的pH。反之，HLB溶液(初始pH7.7)的pH當(dāng)添加約0.01ml1.25MHCl溶液時(shí)下降到7.2以下。當(dāng)使用本發(fā)明溶液作為低溫血液代用品時(shí)，向熱滅菌溶液(HL溶液)中添加醫(yī)藥級(jí)無(wú)菌NaHCO3。這種含有NaHCO3的溶液稱(chēng)為HLB溶液。HLB溶液在無(wú)細(xì)胞體系中相對(duì)于常用生物緩沖劑而言的緩沖能力見(jiàn)表1。在有氧合作用的活體條件下，在1.6～36.1℃這一范圍的溫度，HLB溶液顯然能使pH保持在7.3以上(表2和3)。當(dāng)本發(fā)明的溶液在正常體溫作為血漿增容劑使用時(shí)，無(wú)需添加NaHCO3就能使活體pH保持在生物學(xué)范圍。本發(fā)明溶液中常用生物緩沖劑的不存在，賦與了使該溶液能定期熱滅菌的重要醫(yī)療優(yōu)點(diǎn)。一般地說(shuō)，醫(yī)用溶液較好是在用于患者之前定期進(jìn)行熱滅菌。這里使用的“定期熱滅菌”或“熱滅菌”這一術(shù)語(yǔ)系指涉及在壓力下在15分鐘內(nèi)把一種溶液加熱到120℃的過(guò)程，即使熱和壓力條件保持一段足夠的時(shí)間，以殺死所有或基本上所有細(xì)菌并使溶液中的所有或基本上所有病毒失活。這種步驟通常是在高壓釜中進(jìn)行的，因而也稱(chēng)為“高壓滅菌法”。熱滅菌的目的是要?dú)缛芤褐锌赡艽嬖诘膫魅緞?。傳染劑已知可耐受高達(dá)100℃的溫度。技術(shù)上一般認(rèn)為，在壓力下，使一種溶液加熱到120℃保持約15分鐘就足以保證無(wú)菌。本發(fā)明者知道的所有移植物或血液代用品溶液都不能耐受定期熱滅菌。已知的是，對(duì)pH7.0以上的溶液進(jìn)行熱滅菌會(huì)導(dǎo)致其它溶液成分的大量降解。反之，本發(fā)明的溶液被設(shè)計(jì)得可進(jìn)行熱滅菌，且其它溶液成分如糖的降解微不足道。HL溶液在使用前進(jìn)行熱滅菌。當(dāng)希望添加NaHCO3以形成HLB溶液時(shí)，NaHCO3是作為一種商業(yè)上可得的無(wú)菌1M溶液添加到無(wú)菌HL溶液中的。一般來(lái)說(shuō)，每升HL溶液添加5ml1MNaHCO3溶液形成1LHLB溶液。然而，可以添加更多的NaHCO3。本發(fā)明的HLB溶液或其緩沖有機(jī)酸和鹽，也可以用來(lái)支持培養(yǎng)的離體組織和細(xì)胞。這種溶液的動(dòng)態(tài)緩沖體系能使培養(yǎng)的組織和細(xì)胞保持在適當(dāng)?shù)纳飌H。我們已經(jīng)證明，向培養(yǎng)的細(xì)胞中添加乳酸鹽和碳酸氫鹽足以支持正常的細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)。本發(fā)明的溶液包括一種有機(jī)羧酸或其鹽。“有機(jī)羧酸或其鹽”這一術(shù)語(yǔ)包括能被哺乳動(dòng)物代謝的任何一種羧酸或羧酸衍生物。適合用于本發(fā)明溶液的羧酸和羧酸鹽實(shí)例包括乳酸鹽和乳酸鈉，檸檬酸鹽和檸檬酸鈉，葡糖酸鹽和葡糖酸鈉，丙酮酸鹽和丙酮酸鈉，琥珀酸鹽和琥珀酸鈉，以及乙酸鹽和乙酸鈉。在以下說(shuō)明HLB溶液使用的實(shí)例中，采用乳酸鈉。當(dāng)進(jìn)行活體代謝時(shí)，乳酸鹽有助于保持碳酸氫鹽水平，因而起到本發(fā)明溶液動(dòng)態(tài)緩沖體系中一種能保持活體生物pH的成分的作用。為了進(jìn)一步描述本發(fā)明，按照本發(fā)明的混合物將作為一種水溶液來(lái)討論。從本發(fā)明的以下描述，可望將使具有本門(mén)技術(shù)一般技能的人員能提供干混合物形式的混合物，并能對(duì)氯化鈉和有機(jī)鈉鹽的數(shù)量進(jìn)行必要的調(diào)整，以容納可以作為按照本發(fā)明的干混合物的稀釋劑使用的正常鹽水溶液中發(fā)現(xiàn)的氯化鈉數(shù)量。有機(jī)鈉鹽的數(shù)量是以這樣一種方式計(jì)算的要考慮實(shí)驗(yàn)對(duì)象血液中存在的鈉離子濃度，以及向其中添加干成分的任何一種溶液的氯化鈉濃度。添加的數(shù)量要使得從該有機(jī)鈉鹽得到鈉離子濃度足以使該溶液中的鈉離子濃度達(dá)到生理上正常的血漿的鈉離子濃度。因此，當(dāng)考慮到從有機(jī)鈉鹽和氯化鈉得到的鈉離子的數(shù)量或濃度時(shí)，該溶液中的鈉離子濃度大約就是生理上正常的血漿中發(fā)現(xiàn)的鈉離子濃度。這種溶液也包括一定濃度的鈣、鈉和鎂離子，它們處于血漿中所述離子的正常生理濃度范圍之內(nèi)。一般地說(shuō)，這些離子所希望的濃度是從溶解的鈣、鈉、鎂氯化物鹽得到的，而且鈉的情況下，是從也在溶液中的溶解有機(jī)鈉鹽得到的。鈉離子濃度較好是在70mM～約160mM的范圍內(nèi)，更好的是在約130～150mM的范圍內(nèi)。鈣離子濃度在約0.5mM～4.0mM的范圍內(nèi)，更好的是在約2.0mM～2.5mM的范圍內(nèi)。鎂離子濃度在0～10mM的范圍內(nèi)，更好的是在約0.3mM～0.45mM的范圍內(nèi)。重要的是，在按照本發(fā)明的溶液中不包括過(guò)量的鎂離子，因?yàn)楦邼舛孺V離子會(huì)對(duì)心臟收縮活動(dòng)的強(qiáng)度產(chǎn)生不良影響。在本發(fā)明的較好實(shí)施方案中，該溶液含有亞生理量的Mg++。氯離子濃度在70mM～160mM的范圍內(nèi)，較好在110～125mMCl-的范圍內(nèi)。該溶液也包括一定量的簡(jiǎn)單己糖如葡萄糖、果糖和半乳糖，其中較好的是葡萄糖。在本發(fā)明的較好實(shí)施方案中，使用的是己糖，而且可以使用糖的混合物。一般來(lái)說(shuō)，糖的濃度是在2mM～10mM的范圍內(nèi)，葡萄糖的濃度較好是5mM。往往理想的是提高己糖的濃度，以期降低實(shí)驗(yàn)對(duì)象組織中的體液滯留量。因此，如有必要可將己糖的范圍擴(kuò)大到高達(dá)約50mM，以防止或限制受處理的實(shí)驗(yàn)對(duì)象發(fā)生水腫。腫脹劑由這樣的分子組成其尺寸足以防止它們因穿過(guò)毛細(xì)管床窗口進(jìn)入軀體組織間質(zhì)空間進(jìn)行循環(huán)而損失。作為一組，腫脹劑的實(shí)例是血漿增容劑。人體血清白蛋白是一種用來(lái)增大血漿體積的血漿蛋白。也已知有多糖類(lèi)，一般表征為可用來(lái)作為血漿增容劑的葡聚糖聚合物。一般來(lái)說(shuō)，較好的是，多糖是非抗原性的。Hetastarch(McGaw，Inc.)是一種從幾乎完全由支鏈淀粉組成、在α(1-4)連接的葡萄糖單元中引進(jìn)了羥乙基醚基團(tuán)的蠟狀淀粉衍生的人造膠體。6％(重量)Hetastarch溶液的膠體性質(zhì)接近于人體血清白蛋白的膠體性質(zhì)。其它多糖衍生物也可以適合用作按照本發(fā)明的溶液中的腫脹劑，其中包括羥甲基α(1-4)或(1-6)聚合物。環(huán)糊精類(lèi)是適用的腫脹劑?？梢允褂肈-葡萄糖聚合物。例如，葡聚糖，即a(1-6)鍵連接為主的D-葡萄糖，可以作為本發(fā)明溶液中的腫脹劑使用。較好是分子量范圍為30,000～50,000道爾頓(D)的葡聚糖等多糖。最好的是分子量約40,000D的葡聚糖40。高分子量多糖，例如分子量約70,000D的葡聚糖70，一般不太可取，因?yàn)樗鼈冊(cè)龃罅四z體溶液的粘度，因而損害了高流動(dòng)速度。然而，對(duì)于一些用途來(lái)說(shuō)，高分子量葡聚糖溶液之所以更可取，就在于它們能更有效地防止組織溶脹，因?yàn)樗鼈儚拿?xì)管漏出的速度較低。因此，這樣的高分子量葡聚糖溶液尤其適用于在高壓氧張力下治療腦局部缺血，也可用于有效控制腦水腫。在這樣的情況下，可能理想的是使用較高分子量多糖，例如分子量范圍50,000～70,000D的葡聚糖。當(dāng)在按照本發(fā)明的溶液中使用葡聚糖40時(shí)，使用大約8％(重量)葡聚糖40，或每升水約80克(80g/l)。按照本發(fā)明的血液代用品的摩爾濃度范圍為約290～330mM，較好的是摩爾濃度為約300mM。最好的是最終摩爾濃度為約298mM。這種多糖濃度(加上鈉、鈣、鎂的氯化物鹽，有機(jī)鈉鹽的有機(jī)離子，和以上討論的己糖)足以達(dá)到接近于正常人體血清的膠體滲透壓，即約28mmHg。這種溶液可以在正常體溫下與氧或高壓氧配合，或者有或無(wú)高壓氧，作為一種循環(huán)溶液用于手術(shù)期間的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。這種溶液也可以在實(shí)驗(yàn)對(duì)象的體溫下降得顯著低于實(shí)驗(yàn)對(duì)象的正常溫度的手術(shù)期間，作為一種循環(huán)溶液用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象。當(dāng)溫血?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)對(duì)象暴露于外科手術(shù)期間和低溫尸體器官供給過(guò)程中的低溫條件時(shí)，一般來(lái)說(shuō)理想的是把實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血液換成本發(fā)明的冷循環(huán)溶液，或用本發(fā)明的溶液循環(huán)一段時(shí)間，旨在灌注和保持該實(shí)驗(yàn)對(duì)象及其器官在手術(shù)期間原樣不變。本發(fā)明的溶液可以經(jīng)靜脈內(nèi)或經(jīng)動(dòng)脈內(nèi)施用于放置在氧濃度增大到高達(dá)100％氧的加壓氣氛下的溫度適中的實(shí)驗(yàn)對(duì)象，或施用于正在進(jìn)行手術(shù)的這樣一種實(shí)驗(yàn)對(duì)象，手術(shù)期間該對(duì)象的體溫下降得顯著低于該對(duì)象的正常溫度，且無(wú)論是否使用高壓氧。當(dāng)本發(fā)明溶液施用于該實(shí)驗(yàn)對(duì)象并通過(guò)該實(shí)驗(yàn)對(duì)象循環(huán)時(shí)，心麻劑等各種藥劑既可以對(duì)該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的循環(huán)系統(tǒng)直接給藥、對(duì)該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的心肌直接給藥，也可以添加到本發(fā)明的循環(huán)溶液中。添加這些成分是為了達(dá)到所希望的生理效應(yīng)，例如保持有規(guī)律的心臟收縮活動(dòng)，停止心臟纖維性顫動(dòng)，或完全抑制心肌的收縮活動(dòng)。心麻劑是使心肌收縮停止的材料，包括麻醉劑如利多卡因、普魯卡因和奴佛卡因，以及一價(jià)陽(yáng)離子如鉀離子，其濃度要足以達(dá)到心肌收縮抑制。足以達(dá)到這種效果的鉀離子濃度是一般超過(guò)15mM。實(shí)驗(yàn)對(duì)象(在用按照本發(fā)明的溶液保持該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的亞正常溫度或低溫保持期之后)的復(fù)蘇期間，該實(shí)驗(yàn)對(duì)象可以重新灌注按照本發(fā)明的溶液與該實(shí)驗(yàn)對(duì)象保留下來(lái)或從獻(xiàn)血者獲得的血液的混合物。隨著該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的體溫回升，要灌注全血，直至該實(shí)驗(yàn)對(duì)象達(dá)到可接受的血細(xì)胞比容，一般要超過(guò)約30％的血細(xì)胞比容。當(dāng)達(dá)到一種可接受的血細(xì)胞比容時(shí)，要中斷輸注，并在使用普通手術(shù)步驟縫合外科傷口之后使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象復(fù)蘇。一般地說(shuō)，按照本發(fā)明的溶液，(當(dāng)實(shí)驗(yàn)對(duì)象處于正常體溫時(shí))是利用靜脈內(nèi)管線(xiàn)給藥的，而對(duì)于冷卻的實(shí)驗(yàn)對(duì)象則使用泵送循環(huán)裝置如離心泵、滾柱式泵、蠕動(dòng)泵或其它已知且可得的泵給藥。這種循環(huán)裝置是通過(guò)用外科辦法插入適當(dāng)靜脈和動(dòng)脈的插管與實(shí)驗(yàn)對(duì)象連接的。當(dāng)該溶液對(duì)冷卻實(shí)驗(yàn)對(duì)象給藥時(shí)，一般是通過(guò)動(dòng)脈插管給藥，并通過(guò)靜脈插管從實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)取出和拋棄或貯存。這種溶液可用于各種各樣的外科嵌入和手術(shù)。它可用于纖弱的神經(jīng)外科，在這種情況下，清楚的外科區(qū)域至關(guān)重要，減少中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)可能是理想的，而且可以通過(guò)對(duì)核心溫度和/或腦溫度已大大降低的患者進(jìn)行這種手術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。這種溶液可用來(lái)使(已失去大量血液，例如已失去其血液的20％～98％的)實(shí)驗(yàn)對(duì)象在氧濃度提高到大氣氧分壓以上至高達(dá)100％氧的加壓環(huán)境中保持正常體溫。該實(shí)驗(yàn)對(duì)象保持在高氧濃度下，直至該實(shí)驗(yàn)對(duì)象能合成足夠的血液成分而在大氣壓力和氧濃度下支持生命。按照本發(fā)明的溶液可以用來(lái)使實(shí)驗(yàn)對(duì)象在受到創(chuàng)傷性致命傷之后保持在低于正常體溫的溫度和較低的代謝速度，直至可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)闹С中曰虺C正性外科手術(shù)。此外，這種溶液可以用來(lái)保持具有罕見(jiàn)血型或組織類(lèi)型的患者，直至能發(fā)現(xiàn)適當(dāng)?shù)钠ヅ涔w和能得到代用血液?jiǎn)卧蚱渌鞴?。今人驚訝的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有可能用按照本發(fā)明的溶液代替哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液，并使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象?；疃鵁o(wú)需向該實(shí)驗(yàn)對(duì)象重新輸血。當(dāng)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血細(xì)胞比容下降到10％以下時(shí)，便認(rèn)為替代了該哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液。如果向該實(shí)驗(yàn)對(duì)象提供O2，則血細(xì)胞比容可以低于10％，而如果是在高壓O2倉(cāng)內(nèi)，則血細(xì)胞比容可以大大低于10％。按照本發(fā)明的溶液當(dāng)然可以用來(lái)保持血細(xì)胞比容超過(guò)10％的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。替代哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液的手術(shù)步驟，可以讓哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的體溫保持在其基本正常溫度來(lái)進(jìn)行。此外，進(jìn)行這種步驟時(shí)可以使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象冷卻，并使該哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的體溫下降到其正常溫度以下。冷卻可以通過(guò)用冰浴、冰-鹽漿或冷卻毯使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象降溫來(lái)進(jìn)行。該實(shí)驗(yàn)對(duì)象還可以通過(guò)在給該實(shí)驗(yàn)對(duì)象輸血之前使按照本發(fā)明的溶液降溫來(lái)冷卻。在按照本發(fā)明更換哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液的步驟中，較好的是使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象降溫和用以下方法輸液用動(dòng)脈導(dǎo)管把該溶液輸入該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的循環(huán)系統(tǒng)中，而用靜脈導(dǎo)管取出該實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)的血液和灌注液。以這種方式取出實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液，是通過(guò)測(cè)定靜脈導(dǎo)管排出液的血細(xì)胞比容來(lái)確定的。當(dāng)該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部循環(huán)血液都取出時(shí)，就停止輸液。此外，更換實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基本上全部血液的步驟也可以借助于高壓O2來(lái)進(jìn)行。把該實(shí)驗(yàn)對(duì)象放在一個(gè)用20％以上濃度的氧、較好用100％氧加壓的高壓倉(cāng)內(nèi)。高壓倉(cāng)的壓力在這一步驟的大部分時(shí)間內(nèi)保持在比大氣壓高0.5磅/平方英寸至大約2倍大氣壓的壓力范圍內(nèi)。在一種實(shí)施方案中，這一步驟是把實(shí)驗(yàn)對(duì)象放在高壓倉(cāng)內(nèi)進(jìn)行的，用100％氧使高壓倉(cāng)壓力達(dá)到比常壓高約0.07～約2大氣壓(0.5～30磅/平方英寸[psi])。如有必要，在傷口縫合期間，可使高壓倉(cāng)的壓力降低到大氣壓。隨后使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象保持在高氧濃度的高壓倉(cāng)壓力。將該壓力逐漸降低到一個(gè)較低的壓力，但仍屬于高壓。較好的是，使該壓力在低于10psi至約5psi保持?jǐn)?shù)小時(shí)至若干天。隨后，再次使該壓力逐漸降低到1psi以下，較好降低到約0.5psi，并在這個(gè)壓力再保持長(zhǎng)達(dá)1天或更長(zhǎng)的一段時(shí)間。這種溶液也可以用來(lái)保持腦死亡剛發(fā)生后的器官供體對(duì)象的生理完整性?？梢允乖搶?duì)象降溫，取出該對(duì)象的血液，代之以一種保持在37℃以下的循環(huán)溶液，或同時(shí)循環(huán)按照本發(fā)明的冷溶液。通過(guò)這樣使用這種溶液，可以保持活器官的局部缺血。通過(guò)使按照本發(fā)明的冷溶液經(jīng)過(guò)處在低溫的供體對(duì)象循環(huán)系統(tǒng)循環(huán)，且該對(duì)象放置或不放置在高壓氧倉(cāng)內(nèi)，能使活器官保持較長(zhǎng)的時(shí)間，從而使一個(gè)供體能有效用于潛在移植受體的器官數(shù)目達(dá)到最大值。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)通過(guò)使用某些加合物尤其丙二醇和高濃度葡萄糖來(lái)增強(qiáng)該溶液，也許有可能使供體器官尤其供體心臟的溫度降低到水的冰點(diǎn)(0℃)以下，并使之以一種有用的狀態(tài)即一種能保持協(xié)調(diào)心臟收縮的狀態(tài)從冷凍中復(fù)原。此外，通過(guò)使用按照本發(fā)明的、有這類(lèi)加合物的溶液，還有可能使完好無(wú)損的哺乳動(dòng)物供體對(duì)象的溫度降低到水的冰點(diǎn)(0℃)以下，并使之以一種能保持協(xié)調(diào)心臟收縮的狀態(tài)從冷凍中復(fù)原。相信也能使其它器官系統(tǒng)保持高度的生物完整性，即一種能保持生命的生理狀態(tài)。加入該溶液的加合物包括低分子量脂族多醇。較好是二醇，例如乙二醇、丙二醇和丁二醇。這些二醇中，特別好的是丙二醇?？赡苓m合作為器官和器官供體對(duì)象0℃以下低溫保存的加合物的其它多醇是低分子量聚乙二醇。本發(fā)明的這一方面較好的是，這種加合物添加到該溶液中的最終濃度范圍為約0.2M～1M。具體地說(shuō)，關(guān)于丙二醇，較好的范圍是0.2M～0.6M。約0.4M丙二醇的濃度是最好的。較好的是1，2-丙二醇作為按照本發(fā)明用于低溫器官和供體保存的溶液的加合物，盡管可以使用1，3-丙二醇?？捎糜谄鞴俸推鞴俟w對(duì)象0℃以下保存的溶液中的葡萄糖濃度范圍是約0.6M～約1.4M。較好的濃度是約1M葡萄糖?？捎糜谄鞴俸推鞴俟w組織低溫和0℃以下保存的溶液中的另一種加合物是氧化三甲胺(TMAO)?？梢蕴砑拥揭陨蟿偯枋龅娜芤褐械腡MAO的最終濃度范圍為0.2M～7M。這種含有TMAO的溶液當(dāng)輸注到供體對(duì)象中時(shí)導(dǎo)致改善該對(duì)象的組織的生物完整性，其證據(jù)是這些組織優(yōu)異的解剖保存。以下實(shí)例旨在說(shuō)明本發(fā)明及其使用，本發(fā)明者無(wú)意用它們來(lái)限制本發(fā)明。實(shí)例提出以下實(shí)例是為了向那些有本門(mén)技術(shù)一般技能的人員提供關(guān)于如何進(jìn)行本發(fā)明的合成的完整公開(kāi)與描述，無(wú)意限制本發(fā)明者視為其發(fā)明的范圍。已經(jīng)盡了努力來(lái)確保所使用數(shù)值(如數(shù)量、溫度等)的精確度，但一些實(shí)驗(yàn)誤差和偏差應(yīng)予以考慮。除非另有所指，否則份即為按重量計(jì)的份，分子量為重均分子量，溫度用攝氏度表示，壓力是大氣壓或接近于大氣壓。實(shí)例1溶液制備制備10L溶液A。向一適當(dāng)容器中添加80g/l(或10L800g)無(wú)熱原葡聚糖40(Pharmachem或Pharmacia)。添加去離子水，使體積達(dá)到6～9升。通過(guò)搖蕩使該葡聚糖40完全溶解?？梢园慈魏雾樞蛱砑酉铝谐煞?，要使每一種成分在添加下一種成分之前完全溶解?？梢詮幕瘜W(xué)品供應(yīng)商店得到下列試劑；在本實(shí)例中，所列的試劑是從Sigma公司得到的NaCl(5.2g/l)，CaCl2(0.29g/l)，MgCl2(0.40g/l)，葡萄糖.(0.9g/l)，Tris(3.03g/l)，和葡糖酸鈉(6.54g/l)。其次，通過(guò)滴加0.25MHCl，同時(shí)搖蕩和用pH計(jì)監(jiān)測(cè)，在室溫使該溶液達(dá)到pH7.80。然后進(jìn)一步添加去離子水，使該溶液達(dá)到其所希望的最終體積(即10L)。最后，通過(guò)一個(gè)0.24μ過(guò)濾器(Gelman，Whatman，或理想地可以使用Pall過(guò)濾器單元)，將該溶液泵送到無(wú)菌容器或袋中。這種瓶裝并加蓋的溶液貯存在冰上，直至使用。然后，這種溶液可以在適合于制備無(wú)菌IV溶液的容器中，在適當(dāng)條件下凍干之后，制備成無(wú)菌干粉。制備溶液HL。為了制備50L溶液L(BioTimeHextendTM-乳酸鹽)，把3.0kg高分子量Hetastarch(HES)添加到25L水中。添加足夠的NaCl，使最終NaCl濃度達(dá)到6.72g/l。攪拌該溶液，直至HES和NaCl全部溶解。如有必要，可將該溶液加熱到50℃。使總體積達(dá)到45L，添加下列成分，并攪拌直至完全溶解CaCl2·2H2O18.5g；MgCl2·6H2O4.5g；KCl11.0g；葡萄糖45.0g；和4.03ml60％(重量)乳酸鈉溶液。使該溶液達(dá)到50L的體積。過(guò)濾該溶液，以除去不溶解的物質(zhì)，并放進(jìn)可高壓滅菌的容器中，在一臺(tái)高壓滅菌器中，在15分鐘內(nèi)加熱到120℃的溫度。溶液HLB。向每升熱滅菌的HL溶液中添加5ml1M醫(yī)藥級(jí)NaHCO3無(wú)菌溶液，形成HLB溶液(BioTimeHextendTM-乳酸鹽-碳酸氫鹽)。溶液L。溶液L的制備如以上對(duì)HL溶液所述，但不添加Hetastarch(HES)。實(shí)例2大田鼠在冰冷換血1小時(shí)后復(fù)蘇1只大約1月齡的41g雌性大田鼠(Mesocricetusauratus)肌內(nèi)注射0.04mlVetalar，即一種100mg/ml的氯胺酮麻醉劑溶液。把該動(dòng)物埋在碎冰中降溫，直至其直腸溫度是10℃。把該動(dòng)物從碎冰中取出，腹側(cè)朝上放置在一張?zhí)刂频氖中g(shù)臺(tái)上，其擺放位置要使得能在外科手術(shù)期間通過(guò)一臺(tái)立體顯微鏡觀察到該動(dòng)物的特定部位。將其四肢牢牢固定，給該動(dòng)物配備心電圖引線(xiàn)和直腸遙測(cè)溫度計(jì)探針。在右腹股溝區(qū)做一個(gè)切口，用充滿(mǎn)溶液A的特制微套管先插入右股骨靜脈，然后插入右股骨動(dòng)脈。插套管之后，通過(guò)靜脈套管給該動(dòng)物注射0.02ml肝素(1000U/ml)在溶液A中的溶液，然后加蓋。在右股骨動(dòng)脈插管之后，把該套管連接到與安裝在外科手術(shù)臺(tái)上的活塞相連的無(wú)菌塑料管的路厄注射器類(lèi)端段。該活塞與另一個(gè)管套連接，后者又連接到一個(gè)通過(guò)滾柱式泵頭部的更寬、更厚、更順從的管段。這個(gè)更寬的管段的末端包含一根用于從貯液槽中汲取液體的管子。這根在本文中稱(chēng)為“吸管”(pick-up)的用于從貯液槽中汲取液體的管子配備有一個(gè)18號(hào)皮下注射針頭的路厄注射器末端。這根“吸管”覆蓋了用小橡膠“O”型環(huán)固定的血液過(guò)濾材料。該“吸管”插入一個(gè)溶液A的貯液槽中，該溶液包含在一根埋在碎冰中的離心管中。向該溶液(15ml)中添加0.06ml1MKCl，得到一種約4mMKCl的摩爾濃度。這根管線(xiàn)用活塞封閉，以防止血液倒流進(jìn)動(dòng)脈套管中。該大田鼠周?chē)焉纤楸?，降溫?℃。然后向該活塞中注入0.2ml1MKCl，打開(kāi)活塞，使注入的溶液能流進(jìn)與動(dòng)脈套管連接的管線(xiàn)中，并從這里流進(jìn)該動(dòng)物的股骨動(dòng)脈中。該大田鼠的心動(dòng)停止。讓該動(dòng)物進(jìn)一步冷卻，并通過(guò)動(dòng)脈套管輸注8ml溶液A4mMKCl。從靜脈套管收集含有該大田鼠大部分血液的排出液。在血細(xì)胞比容降低到5以下之后，使?jié)L柱式泵關(guān)閉67分鐘。然后，通過(guò)動(dòng)脈套管給大田鼠輸注8ml無(wú)KCl的溶液A，然后輸注8ml用心臟穿刺法從其它大田鼠取出的、加了肝素的血液。從靜脈套管收集等量的排出液。在血細(xì)胞比容超過(guò)40％之后，停止全血輸注，取出套管。該大田鼠用一盞臺(tái)燈升溫，直至它對(duì)刺激有反應(yīng)。取下套管，把結(jié)扎的血管打開(kāi)，縫合切口。進(jìn)一步使體溫繼續(xù)回升。該動(dòng)物完全復(fù)蘇，實(shí)驗(yàn)后繼續(xù)活數(shù)周。實(shí)例3零度以下貯藏之后的心臟保存一只斷食(過(guò)夜)的40g雌性大田鼠肌內(nèi)注射0.02ml氯胺酮麻醉劑(100mg/ml)。將該大田鼠埋入碎冰中，直至它的體溫降低到+14℃。然后，把它放在一張手術(shù)臺(tái)上，裝上心電圖引線(xiàn)和直腸溫度探針。用外科手術(shù)法使頸動(dòng)脈和頸靜脈暴露出來(lái)，同時(shí)使該動(dòng)物的體溫保持在10～14℃之間，把套管插入動(dòng)脈和靜脈中。把動(dòng)脈套管接到與一臺(tái)蠕動(dòng)泵連接的管子上。這段管子充滿(mǎn)溶液A，此外還含有20mMKCl。靜脈套管封口，直至用碎冰和設(shè)定在-1.0℃的控溫手術(shù)臺(tái)使該動(dòng)物的體溫降至5℃。該動(dòng)物當(dāng)體溫降低到10℃以下時(shí)自己停止呼吸。啟動(dòng)100％O2呼吸作用。在5℃時(shí)去掉靜脈套管封口，以約0.3ml/分的流量率向動(dòng)脈中泵入3.5ml溶液A。然后，灌注4.5ml由下列組成的低溫保護(hù)溶液溶液A，外加4mMKCl、1.0M葡萄糖、4％丙二醇(即1.8g葡萄糖＋0.4g丙二醇/10ml溶液)。輸液期間，收集靜脈排出液。輸液期間使該動(dòng)物的溫度逐漸降低到0℃。輸液開(kāi)始后使呼吸中斷5分鐘。此時(shí)，已取出該實(shí)驗(yàn)對(duì)象血液體積的30％以上。心臟繼續(xù)跳動(dòng)，直至它最終停止。在輸注上一段所述的低溫保護(hù)溶液之后，把該動(dòng)物放在一種0℃以下的NaCl濃漿狀(0.6M)溶液中，將其放在冷凍機(jī)中過(guò)夜。該冷凍機(jī)溫度保持在平均-5℃。在該動(dòng)物放進(jìn)冷凍機(jī)中之后15分鐘，它的直腸溫度從0℃下降到-1.0℃。12小時(shí)后，該動(dòng)物的直腸溫度是-2.5℃。然后，在一臺(tái)Quasar商用廚房微波爐中，使用7秒脈沖并設(shè)定在升溫檔上，使該動(dòng)物升溫至約2.5℃的溫度。脈沖發(fā)生間隔1分鐘。需要18次脈沖才能使該動(dòng)物解凍。再次把該動(dòng)物放在外科手術(shù)臺(tái)上，裝上心電圖引線(xiàn)和直腸遙測(cè)溫度計(jì)探針。以大約0.2ml/分的流量率，向頸動(dòng)脈中輸注3.5ml溶液A。使該動(dòng)物的體溫保持在5℃以下。然后給該大田鼠輸注全血，逐漸升溫。在輸注2ml血液且該動(dòng)物的溫度爬升至13℃之后，檢測(cè)到有節(jié)律的心電圖信號(hào)。隨著繼續(xù)輸注和升溫，信號(hào)幅度增大，其頻率也增加。在輸注5.5ml血液且該動(dòng)物的溫度達(dá)到25℃之后，打開(kāi)該動(dòng)物的胸腔，觀察到其心臟不斷跳動(dòng)。實(shí)例4高壓倉(cāng)內(nèi)血液的合成溶液代用品一只事先斷食過(guò)夜的40g大田鼠肌內(nèi)注射0.03ml氯胺酮(100mg/ml)。把該大田鼠放在碎冰中，直至它的體溫下降到15℃以下。把該大田鼠從碎冰中取出，腹側(cè)朝上放在一個(gè)控溫手術(shù)臺(tái)上，定位在一臺(tái)立體顯微鏡下以便進(jìn)行微型外科手術(shù)。使該大田鼠的溫度保持在12～15℃。在右腹股溝區(qū)做一個(gè)切口，使右股骨靜脈和動(dòng)脈暴露出來(lái)。給股骨靜脈插上套管，注入0.1ml肝素(1000U/ml)，將該套管封口以防止出血。然后給右股骨動(dòng)脈插上套管，并將此套管直接連接到充滿(mǎn)溶液A的導(dǎo)管上。該導(dǎo)管穿過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)泵的頭部。灌注少量(約0.3ml)該溶液，以保持該動(dòng)脈套管缺血。靜脈套管和動(dòng)脈套管都用外科縫線(xiàn)固定到該動(dòng)物上。將動(dòng)脈套管封口，把該動(dòng)物移到高壓氧(HBO)倉(cāng)內(nèi)的手術(shù)臺(tái)上。把溫度探針插進(jìn)直腸中。該動(dòng)脈套管連接到一根導(dǎo)管上，該導(dǎo)管穿過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)泵連接到一個(gè)貯液槽中。該導(dǎo)管和貯液槽充滿(mǎn)含有4mMKCl的溶液A。去掉靜脈套管上的封口，關(guān)閉高壓氧倉(cāng)，加壓。啟動(dòng)該蠕動(dòng)泵，給該動(dòng)物輸液，置換其大部分血液。讓這種血液作為靜脈排出液從該動(dòng)物體內(nèi)排出。最終倉(cāng)壓是比常壓高1.5atm，保持恒定。該動(dòng)物的輸液流量率是大約0.3ml/分。利用使該大田鼠定位在高壓氧倉(cāng)內(nèi)的控溫手術(shù)臺(tái)，使該大田鼠保持在14～16℃之間。在輸液期間的這一段時(shí)間內(nèi)，始終保持心臟活動(dòng)和呼吸。在向該大田鼠輸注15ml額外含有4mMKCl的溶液A來(lái)置換血液之后，使高壓氧倉(cāng)逐漸減壓。然后打開(kāi)高壓氧倉(cāng)，采集血細(xì)胞比容樣品。血細(xì)胞比容是5％。將靜脈套管和動(dòng)脈套管封口，關(guān)閉高壓氧倉(cāng)，并增壓至常壓以上1.5atm。該動(dòng)物在取出其血液之后4小時(shí)內(nèi)，在高壓氧倉(cāng)內(nèi)繼續(xù)自行呼吸。在此時(shí)間之后，使高壓氧倉(cāng)逐漸減壓。與此同時(shí)，使該動(dòng)物冷卻至12℃。打開(kāi)高壓氧倉(cāng)，把該動(dòng)物移到另一張手術(shù)臺(tái)上。把冰放在該動(dòng)物身上，以0.2ml/分的流量率給該動(dòng)物輸注全血，并讓溶液作為靜脈排出液排出。在輸注1ml血液之后，去掉冰。該大田鼠的體溫在4℃。然后使該動(dòng)物逐漸升溫，同時(shí)通過(guò)連續(xù)輸血使血細(xì)胞比容上升。在1ml血液返回體內(nèi)之后啟動(dòng)人工呼吸。該動(dòng)物的心臟從未停止過(guò)節(jié)律性跳動(dòng)。在21℃，該動(dòng)物穩(wěn)定地自行呼吸。停止人工呼吸，繼續(xù)升溫和輸血，直至該動(dòng)物的溫度達(dá)到25℃。血細(xì)胞比容實(shí)測(cè)為40％。停止輸血，取下套管，結(jié)扎血管，縫合外科切口。手術(shù)后一小時(shí)，該動(dòng)物變得非?；钴S和機(jī)敏。實(shí)驗(yàn)后四小時(shí)，該動(dòng)物開(kāi)始飲食。上述手術(shù)完成后24小時(shí)，就姿態(tài)和行為而言，它顯得完全正常，而且在實(shí)驗(yàn)之后繼續(xù)活數(shù)周。實(shí)例5大田鼠的冰冷血液替代一只大約1月齡的46g大田鼠肌內(nèi)注射0.02mlVetalar(一種100mg/ml氯胺酮溶液)。該動(dòng)物用碎冰包圍，直至其直腸溫度為約12℃。然后，把該動(dòng)物從碎冰中取出，腹側(cè)朝上放在一張專(zhuān)為使該動(dòng)物保持冷卻而設(shè)計(jì)的手術(shù)臺(tái)上，置于一臺(tái)立體顯微鏡之下。固定其四肢，給該動(dòng)物裝上心電圖引線(xiàn)和直腸遙測(cè)溫度計(jì)探針。在右腹股溝區(qū)做一個(gè)切口，把一根套管插入右股骨靜脈，通過(guò)該套管給該動(dòng)物注入0.02ml肝素溶液(250U/ml)，然后將該套管封口。然后，給右股骨動(dòng)脈插入套管。該套管連接到一個(gè)有路厄注射器尖端的塑料管段上，該導(dǎo)管通過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)式滾柱泵連接到一個(gè)盛放含0.05M葡萄糖的溶液A的貯液槽。該導(dǎo)管的末端插一個(gè)18G皮下注射針頭，在針頭中心部位用一個(gè)橡膠“O”型環(huán)固定一種網(wǎng)狀血液濾料。啟動(dòng)泵，使貯液槽中的流體通過(guò)導(dǎo)管泵送到該動(dòng)物的股骨動(dòng)脈中。當(dāng)該動(dòng)物的溫度下降到9℃以下時(shí)，開(kāi)始用100％氧換氣(每分鐘吸20次)。讓該動(dòng)物進(jìn)一步冷卻到直腸溫度為4℃，將0.1ml0.2MKCl注入插進(jìn)股骨靜脈的24G血管導(dǎo)管(angiocath)中。這種注射使心臟停搏，心電圖信號(hào)消失。啟動(dòng)泵，使溶液A以大約0.2ml/分輸注到動(dòng)脈中，同時(shí)收集靜脈排出液。在輸液期間，該動(dòng)物的溫度下降到1℃左右。在給該動(dòng)物輸注4ml溶液之后，將泵關(guān)閉，把該動(dòng)物埋在碎冰中，使循環(huán)停止2小時(shí)。然后給該動(dòng)物輸注約7ml全血(從其它大田鼠血液供體采集)，同時(shí)用一盞臺(tái)燈使該動(dòng)物逐漸升溫。輸血期間收集靜脈排出液。靜脈排出液的收集體積與泵入動(dòng)脈的體積相同。在10℃，在該動(dòng)物保持心臟停搏3小時(shí)11分鐘之后，當(dāng)監(jiān)測(cè)心電圖信號(hào)時(shí)首次觀察到心臟跳動(dòng)。然后，開(kāi)始用100％氧給該動(dòng)物換氣(每分鐘吸6次)。隨著該動(dòng)物進(jìn)一步升溫和心臟搏動(dòng)變得更強(qiáng)、更快，使換氣速度增加到約每分鐘吸15次。當(dāng)該動(dòng)物的溫度達(dá)到28℃以上時(shí)，該動(dòng)物開(kāi)始自行呼吸并能做出反應(yīng)。停止輸血(血細(xì)胞比容讀數(shù)為44％)，取下套管，縫合外科切口。這只大田鼠在實(shí)驗(yàn)后又顯然正常健康地活了很多周。實(shí)例6冰冷大田鼠心臟搏動(dòng)的恢復(fù)一只斷食(過(guò)夜)的45g雌性大田鼠肌內(nèi)注射0.03ml氯胺酮麻醉劑(100mg/ml)。該大田鼠埋入碎冰中，直至其體溫降低到大約14℃。然后把該動(dòng)物放在一張外科手術(shù)臺(tái)上，裝上心電圖引線(xiàn)和直腸溫度探針。利用立體顯微鏡，用外科手術(shù)法使頸動(dòng)脈和頸靜脈暴露出來(lái)。使該動(dòng)物的體溫保持在10～14℃之間。把套管插入頸動(dòng)脈和頸靜脈中。把動(dòng)脈套管連接到一根導(dǎo)管上，該導(dǎo)管通過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)泵連接到一個(gè)含有低溫保護(hù)溶液的貯液槽，該溶液由額外含有11mMKCl、1.0M葡萄糖和4％丙二醇的溶液A組成。靜脈套管初始時(shí)封口，直至該動(dòng)物的體溫利用碎冰和設(shè)定在-1.0℃附近的調(diào)溫手術(shù)臺(tái)降低到5℃。隨著保溫下降到10℃以下，該動(dòng)物停止自行呼吸。此時(shí)，用100％氧以大約每分鐘吸15次的速度給該動(dòng)物換氣。當(dāng)該動(dòng)物的溫度下降到5℃時(shí)，去掉靜脈封口，啟動(dòng)泵，使流量率為約0.20ml/分。21分鐘后該動(dòng)物的心臟停止搏動(dòng)，輸液開(kāi)始后5分鐘停止通氣。輸液期間，血液作為靜脈排出液收集。給該動(dòng)物灌注大約4ml低溫保護(hù)溶液A。然后，該動(dòng)物用溫度為-2.0℃的鹽-冰漿狀物包圍起來(lái)。把盛放該漿狀物和動(dòng)物的容器放進(jìn)一個(gè)設(shè)定在-5.0℃的控溫浴內(nèi)。清晨(動(dòng)物放進(jìn)該冷卻浴中之后18小時(shí))該動(dòng)物的直腸溫度逐漸降低到-3.4℃。將該容器從冷卻浴中取出。漿狀物凍成固體。用冰冷水使之融化。當(dāng)去掉“漿狀物”時(shí)，該動(dòng)物給人以冷凍的感覺(jué)。然后把該動(dòng)物放進(jìn)一臺(tái)廚房用微波爐中。把微波爐設(shè)定在7秒升溫?fù)跎?。?0分鐘的時(shí)間內(nèi)，使該動(dòng)物暴露于大約20個(gè)7秒加熱周期。這使該動(dòng)物解凍，并使其直腸溫度上升至約2℃。再次把該動(dòng)物放在手術(shù)臺(tái)上，向該動(dòng)物的頸動(dòng)脈中輸注溶液A。這種低溫保護(hù)溶液以靜脈排出物形式收集。以0.15ml/分的流量率向該動(dòng)物輸注約3ml溶液A。然后以相同的流量率輸注從大田鼠血液供體采集的血液。在向該大田鼠的動(dòng)脈中輸注2ml血液之后，用一盞臺(tái)燈使該大田鼠緩緩升溫。隨著繼續(xù)輸血和升溫，該動(dòng)物的溫度上升到15℃以上，記錄到強(qiáng)的節(jié)律性心電圖信號(hào)。當(dāng)做外科胸廓切開(kāi)術(shù)時(shí)，可以觀察到實(shí)際的心搏。實(shí)例7在高壓氧倉(cāng)中作為血液代用品的合成溶液一只(斷食過(guò)夜的)43g雌性大田鼠肌內(nèi)注射0.02ml氯胺酮(100mg/ml)。把該大田鼠放在碎冰中，直至其體溫下降到約14℃。然后把該大田鼠腹側(cè)朝上放在一張控溫手術(shù)臺(tái)上，定位于一臺(tái)立體顯微鏡下，以便進(jìn)行顯微外科手術(shù)。使該大田鼠的溫度保持在12～15℃之間。在右腹股溝區(qū)做一個(gè)切口之后，使右膠骨靜脈和動(dòng)脈暴露出來(lái)。給該股骨靜脈插入套管，注入0.1ml肝素(250U/ml)，將套管末端封閉以防止出血。然后，給右股骨動(dòng)脈插入套管，把該套管連接到導(dǎo)管上，該導(dǎo)管通過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)泵連接到一個(gè)充滿(mǎn)溶液A的貯液槽中。灌注少量(即0.2ml)該溶液，以保持動(dòng)脈管線(xiàn)中沒(méi)有血液。把靜脈套管和動(dòng)脈套管固定在動(dòng)物身上。將動(dòng)脈套管封口，把該動(dòng)物轉(zhuǎn)移到高壓氧倉(cāng)的調(diào)溫臺(tái)上。使該動(dòng)物的直腸實(shí)測(cè)溫度保持在13～18℃之間。使該大田鼠保持在這一溫度范圍的目的是要保持該動(dòng)物的低活動(dòng)，同時(shí)確保該動(dòng)物能自行呼吸并能對(duì)刺激做出反射性反應(yīng)。把動(dòng)脈套管連接到導(dǎo)管上，該導(dǎo)管在高壓氧倉(cāng)外面通過(guò)一臺(tái)蠕動(dòng)泵連接到一個(gè)(在高壓氧倉(cāng)里面)含有溶液A和2.5mMKCl的貯液槽中。去掉靜脈套管的封口，啟動(dòng)泵，使流量率為約0.2ml/分。隨著該溶液輸注到該動(dòng)物體內(nèi)，收集靜脈排出物(血液)。將高壓氧倉(cāng)迅速關(guān)閉，并逐漸加壓至20～24psi(100％氧)。在加壓下輸液大約1小時(shí)后，用大約1小時(shí)的時(shí)間使高壓氧倉(cāng)逐漸減壓。停止輸液。共約13ml溶液輸注到該動(dòng)物體內(nèi)。在為測(cè)定血細(xì)胞比容而采集靜脈排出物樣品之后，給這些套管封口。再次把該動(dòng)物放在外科手術(shù)臺(tái)上，拔出套管，縫合傷口。在此期間該動(dòng)物顯示出某種非常微小的反射性活動(dòng)，盡管該動(dòng)物有少許血液和呼吸室內(nèi)空氣。迅速將該動(dòng)物放進(jìn)高壓氧倉(cāng)內(nèi)的一個(gè)盒中，使高壓氧倉(cāng)逐漸加壓至大約20psi。在倉(cāng)內(nèi)放置食物和水供該大田鼠飲食。用一盞加熱燈使高壓氧倉(cāng)和動(dòng)物升溫。(用1小時(shí)時(shí)間)使倉(cāng)內(nèi)的壓力逐漸降低至5psi。在一小時(shí)內(nèi)該動(dòng)物的活動(dòng)增加，此后便變得十分活躍。將該動(dòng)物在5psi的倉(cāng)內(nèi)保持約16小時(shí)。然后使壓力逐漸降低至0.5psi(100％氧)，并在該壓力保持24小時(shí)。然后將該動(dòng)物從倉(cāng)中取出，放進(jìn)一個(gè)正常的籠中。實(shí)驗(yàn)后很多周，該動(dòng)物繼續(xù)顯示出完全正常。實(shí)例8使用有氯化鉀增強(qiáng)的溶液A代替靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的血液在本實(shí)例中，一只橄狒種(Papioanubis)的8kg幼年雄性狒狒肌內(nèi)注射60mg氯胺酮。將一根22G×英寸導(dǎo)管插入右頭側(cè)靜脈中，靜脈內(nèi)注射3ml2.5％噴妥撒(pentothal)。然后給該動(dòng)物裝配一根氣管內(nèi)導(dǎo)管，放置在一張外科手術(shù)臺(tái)上，并通入Flether在100％O2中的一種0.7～2.5％混合物，以能觀察到該動(dòng)物的活動(dòng)為準(zhǔn)。雙眼涂上用于保護(hù)的lacrylube。換氣器設(shè)定在18次呼吸/分鐘(bpm)，其沖程體積是240ml，吸氣/呼氣比是37％。氣道壓力保持在大約10mmHg，通過(guò)在一臺(tái)陰極射線(xiàn)管(CRT)或長(zhǎng)條記錄紙記錄儀上考察氣道壓力蹤跡，校驗(yàn)每次呼吸輸送的體積。用計(jì)算機(jī)在線(xiàn)監(jiān)測(cè)氣道壓力。給該動(dòng)物剃毛，開(kāi)始進(jìn)行靜脈內(nèi)生理乳酸鹽滴注。流量率為1～3ml/分，以能觀察到該動(dòng)物動(dòng)脈血壓的速率為準(zhǔn)。進(jìn)行土霉素給藥。體外回路由一臺(tái)血液氧合器、血液貯槽和泵組成，構(gòu)建該回路時(shí)在盡可能靠近該動(dòng)物的地方增加一個(gè)次級(jí)在線(xiàn)熱交換器。它進(jìn)一步配備一個(gè)外部冰水槽。這個(gè)冰水槽有一臺(tái)泵，以便給該氧合器的內(nèi)裝熱交換器和次級(jí)熱交換器供應(yīng)循環(huán)冰水。與血液或血液代用品接觸的管道全部是無(wú)菌的。氧合器液槽和回路灌裝2升溶液A。KCl(4ml2.0M)添加到氧合器液槽和旁通回路的2L溶液A中，得到KCl濃度為4mM。一根用于監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓力的5FNIH導(dǎo)管插入左臂動(dòng)脈中。此導(dǎo)管上接一個(gè)三通閥(以便能在整個(gè)手術(shù)步驟期間每10-60分鐘采集一次動(dòng)脈血樣)。測(cè)定每個(gè)樣品中的血液氣體、pH、K+和血細(xì)胞比容，在一些情況下也要測(cè)定電解質(zhì)和酶。將此導(dǎo)管連到一個(gè)壓力換能器上。該換能器與一臺(tái)計(jì)算機(jī)連接，以監(jiān)測(cè)中樞動(dòng)脈壓力(CAP)。其它溫度和壓力參數(shù)也用同一臺(tái)計(jì)算機(jī)進(jìn)行在線(xiàn)測(cè)定。把一根6FNIH導(dǎo)管插入左臂靜脈的末梢分支中，使得能用計(jì)算機(jī)監(jiān)測(cè)中樞靜脈壓力(CVP)。執(zhí)行胸廓切開(kāi)術(shù)，把一根6F冠狀導(dǎo)管插入左心房，以監(jiān)測(cè)左心房壓力。把一根10F動(dòng)脈套管插左股骨動(dòng)脈中，并把一根16F靜脈套管插入左股骨靜脈中。靜脈內(nèi)引進(jìn)甲潑尼松龍(80mg)。插入一根食管導(dǎo)管，給藥3mlMaalox。該食管導(dǎo)管裝上一個(gè)熱敏電阻探針，用于記錄深食管溫度。由于廣泛的外科手術(shù)步驟，要讓狒狒麻醉約5小時(shí)。在裝上心電圖引線(xiàn)之后，把該動(dòng)物放進(jìn)一個(gè)網(wǎng)狀懸?guī)?，墜入一個(gè)保溫冰盒中。然后把它埋入碎冰中。在碎冰中降溫1小時(shí)6分鐘后，體溫下降到23℃。以6ml/hr的速度開(kāi)始硝普鹽(25mg硝普化鈉在500ml5％右旋糖水溶液中的溶液)輸注。17分鐘后溫度已下降至21℃，此時(shí)對(duì)該動(dòng)物實(shí)施分流術(shù)。與此同時(shí)，以靜脈排出物形式，從該狒狒取出200ml全血。松開(kāi)那些使猴子的循環(huán)系統(tǒng)與旁通回路隔離的夾子，使2L添加了2ml2MKCl(最終濃度為2mMKCl)的溶液A能替代該動(dòng)物的血液。此后，通過(guò)15ml2MKCl的靜脈內(nèi)給藥，使其心臟停搏。使血液-血液代用品混合物作為靜脈排出物不斷排出，直至4L溶液A(其中添加了22ml2MKCl)置換了循環(huán)溶液。低溫血液替代50分鐘后，該靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的溫度已下降至3℃。經(jīng)由該動(dòng)物的流動(dòng)顯然是良好的，肺動(dòng)脈楔壓隨股骨動(dòng)脈輸液而升高的趨勢(shì)微不足道。這種增大流量的原因，以及相當(dāng)快的溫度下降步伐，可能與硝普鹽的使用有關(guān)，而且也可能與降溫期間麻醉劑用量相當(dāng)節(jié)省有關(guān)，這導(dǎo)致該動(dòng)物在被降溫時(shí)仍然較為活躍。在血液替代之后，使該動(dòng)物循環(huán)停頓1小時(shí)40分鐘。在停頓期結(jié)束時(shí)，把2L冰冷溶液A加進(jìn)該回路中，替換作為靜脈排出物排出的2L。記錄到的最低體溫是2.8℃。然后開(kāi)始重新升溫。升溫13分鐘后，該動(dòng)物的體溫達(dá)到10℃，向該回路中添加800ml血液-血液代用品的1∶3混合物、然后添加450ml1∶1混合物、最后添加約1L全血，以置換溶液A。在血液引進(jìn)該動(dòng)物后，立即檢測(cè)血細(xì)胞比容。在此后的1小時(shí)22分鐘內(nèi)，靜脈內(nèi)引進(jìn)40mlNaHCO3。開(kāi)始進(jìn)行機(jī)械換氣，并以30ml/hr的速度實(shí)施多巴胺滴注(200mg的250ml溶液)。也向靜脈內(nèi)注射CaCl2(50mg)。大約1小時(shí)后體溫上升至接近于正常，此時(shí)使該動(dòng)物脫離旁通，并實(shí)施全血滴注。該動(dòng)物的血液氣體和血壓均穩(wěn)定在正常范圍內(nèi)。一小時(shí)后，取下套管。由于在胸廓切開(kāi)術(shù)之后該動(dòng)物已被插入導(dǎo)管，因而決定不做該動(dòng)物長(zhǎng)期后外科管理的嘗試，因?yàn)橛性谥委煗撛谛厍桓腥镜耐瑫r(shí)限制野性狒狒活動(dòng)的行為問(wèn)題。當(dāng)在又過(guò)一小時(shí)后停止換氣時(shí)，該動(dòng)物顯示出瀕臨死亡的痛苦掙扎，逐漸進(jìn)入心臟停搏狀態(tài)。由于這只猴子的血壓和血液氣體已經(jīng)穩(wěn)定，因而顯而易見(jiàn)，該動(dòng)物在10℃以下(深食管溫度)血液替代2小時(shí)30分鐘后有生存潛力。實(shí)例9無(wú)增強(qiáng)的溶液A用于靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物血液替代在本實(shí)例中，一只橄狒種(Papioanubis)的8kg幼年雄性狒狒被降溫并在10℃以下血液替代1小時(shí)22分鐘。在降溫和換血之前，將一根4F60cmSwan-Ganz箭頭楔形導(dǎo)管通過(guò)右股骨靜脈插入肺動(dòng)脈。這使得無(wú)需做胸廓切開(kāi)術(shù)就能測(cè)量肺動(dòng)脈楔壓。使該動(dòng)物保持麻醉狀態(tài)，當(dāng)溫度下降到28℃時(shí)使用硝普鹽，這改善了經(jīng)由旁通(分流)回路的流動(dòng)。盡管整個(gè)手術(shù)步驟進(jìn)展順序，但在升溫期間引進(jìn)檸檬酸鹽化血液之后靜脈內(nèi)注射50mg氯化鈣造成了大血塊形成和實(shí)驗(yàn)終止。此時(shí)心血管系統(tǒng)中沒(méi)有肝素。步驟。給狒狒肌內(nèi)注射70mg氯胺酮。將一根22G×英寸導(dǎo)管插入左頭側(cè)靜脈，并向靜脈內(nèi)注射3ml2.5％噴妥撒。然后給這只無(wú)尾猿裝上氣管內(nèi)導(dǎo)管，移到X-射線(xiàn)室。把它放在一張X-射線(xiàn)臺(tái)上，用異熒烷(Flether)在100％O2中的1％混合物換氣，并把一根4F60cm箭頭楔形導(dǎo)管通過(guò)右股骨靜脈植入肺動(dòng)脈中。換氣器設(shè)定在20bpm，其沖程體積為200ml，吸氣/呼氣比是37％。氣道壓力保持在大約10mmHg，通過(guò)在一臺(tái)陰極射線(xiàn)管(CRT)或長(zhǎng)條記錄紙記錄儀上考察氣道壓力蹤跡，校驗(yàn)每次呼吸輸送的體積。氣道壓力用計(jì)算機(jī)進(jìn)行在線(xiàn)監(jiān)測(cè)。給該動(dòng)物剃毛，開(kāi)始進(jìn)行靜脈內(nèi)1～3ml/分生理乳酸鹽滴注，滴注速度以能觀察到該動(dòng)物的動(dòng)脈血壓為準(zhǔn)。體外循環(huán)回路如上一個(gè)實(shí)例中所述。氧合器液槽和回路灌注2L溶液A。將一根20G體液比重計(jì)導(dǎo)管插入右股骨靜脈中，使得能進(jìn)行計(jì)算機(jī)化的中樞靜脈壓力(CVP)監(jiān)測(cè)。管線(xiàn)上裝配一個(gè)三通閥，使得能采樣。右臂動(dòng)脈插入一根20G體液比重計(jì)導(dǎo)管，用于監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓力。此導(dǎo)管上連接一個(gè)三通閥(使得能在整個(gè)手術(shù)步驟期間每10～60分鐘采集一次動(dòng)脈血樣)。測(cè)定每個(gè)樣品中的血液氣體、pH、K+和血細(xì)胞比容，在一些情況下也測(cè)定電解質(zhì)和酶。該導(dǎo)管連接到一臺(tái)壓力換能器上。該換能器與一臺(tái)計(jì)算機(jī)連接，以監(jiān)測(cè)中樞動(dòng)脈壓力(CAP)。其它溫度和壓力參數(shù)也用同一臺(tái)計(jì)算機(jī)在線(xiàn)測(cè)定。把一根14F靜脈套管插入左股骨靜脈，一根10F動(dòng)脈套管插入左股骨動(dòng)脈。在植入靜脈套管后，向靜脈內(nèi)注射2.6ml肝素。插入一根食管導(dǎo)管，給藥3mlMaalox。該食管導(dǎo)管配備一個(gè)熱敏電阻探針，用于記錄深食管溫度。靜脈內(nèi)引進(jìn)甲潑尼松龍(80mg)。雙眼涂上用于保護(hù)的lacrylube。當(dāng)該動(dòng)物達(dá)到輕度麻醉時(shí)，靜脈內(nèi)注入1ml噴妥撒。安裝心電圖引線(xiàn)，把該動(dòng)物放進(jìn)一個(gè)網(wǎng)狀懸?guī)?，墜入一個(gè)保溫冰盒中。然后把它埋入碎冰中。在碎冰中降溫29分鐘后，體溫下降至28℃。使該動(dòng)物保持輕度麻醉，當(dāng)體溫下降到30℃以下時(shí)撤去Flether。開(kāi)始硝普鹽(硝普化鈉-25mg在500ml5％右旋糖水溶液中的溶液)輸注，初始速度為20ml/hr，然后提高到40ml/hr。在隨后的20分鐘內(nèi)，隨著血壓和體溫的下降，硝普鹽滴注時(shí)續(xù)時(shí)斷。當(dāng)27分鐘后對(duì)該動(dòng)物進(jìn)行分流且體溫已下降到23℃時(shí)，最終停止輸注。此時(shí)，松開(kāi)那些使這只無(wú)尾猿的循環(huán)系統(tǒng)與旁通回路隔離的夾子，讓2L溶液A能替代該動(dòng)物的血液，使全血和稀釋血作為靜脈排出物排出，存放起來(lái)供復(fù)蘇用。此后，用靜脈內(nèi)給藥10ml2MKCl使其心臟停搏。血液-血液代用品混合物作為靜脈排出物不斷排出，直至4L溶液A替代了循環(huán)溶液。低溫血液替代39分鐘之后，該靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的溫度下降到4℃以下。經(jīng)由該動(dòng)物的流動(dòng)是快速的。容易測(cè)定的肺循環(huán)系統(tǒng)壓力表明該循環(huán)是良好的，而且楔壓導(dǎo)管安置狀況良好。在10℃以下血液替代50分鐘以后，記錄到的最低體溫是2.9℃。然后開(kāi)始重新升溫，升溫28分鐘后，該動(dòng)物的體溫達(dá)到10℃，向該回路中添加750ml全血，以替代溶液A。在給該動(dòng)物重新輸血之后8分鐘檢測(cè)血細(xì)胞比容。在隨后30分鐘內(nèi)，在該動(dòng)物升溫的同時(shí)，靜脈內(nèi)引進(jìn)10mlNaHCO3，也在靜脈內(nèi)引進(jìn)CaCl2(50mg)以及80mg甲潑尼松龍。在添加CaCl2的少數(shù)幾分鐘內(nèi)，出現(xiàn)了大血塊形成?？梢哉J(rèn)為，用檸檬酸鹽抗凝的血液之所以結(jié)塊是由于添加CaCl2的結(jié)果。然后停止實(shí)驗(yàn)。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，血液代用品通過(guò)該動(dòng)物和旁通回路的流量率顯然是高的，而左動(dòng)脈壓力仍保持可接受的低壓?？烧J(rèn)為對(duì)此結(jié)果有貢獻(xiàn)的因素是使用硝普鹽，以及在降溫過(guò)程期間保持輕度麻醉狀態(tài)。在血液重新引進(jìn)該動(dòng)物體內(nèi)之前將向其中添加1～2ml肝素。相信給這種重新引進(jìn)的血液加肝素將消除那種造成此次實(shí)驗(yàn)意外終止的大血塊形成。實(shí)例10用溶液HLB進(jìn)行狗的冰冷血液替代對(duì)一只25～30kg的狗進(jìn)行部分心肺分流。用表里冷卻法使狗的體溫降低到冰點(diǎn)附近(1～3℃)。用實(shí)例1中所述的溶液HLB低溫血液代用品更換該狗的血液。保留血液，用于體溫回升期間輸注。使該動(dòng)物的體溫降低到冰點(diǎn)附近(4℃以下)，然后重新升溫。用血液替換該血液代用品同時(shí)升溫，使該動(dòng)物復(fù)蘇。準(zhǔn)備。借助于右橈骨靜脈給該狗插入導(dǎo)管，靜脈內(nèi)注射噴妥撒，然后裝上氣管內(nèi)導(dǎo)管，用異熒烷(或Flether)在100％O2中的混合物換氣。以能觀察到該狗動(dòng)脈血壓的速度(約40ml/hr，靜脈內(nèi))開(kāi)始生理乳酸鹽滴注。把該狗放在一條用重復(fù)循環(huán)冰水冷卻的冷卻毯上。給右頸動(dòng)脈插上導(dǎo)管，使得能進(jìn)行血壓(CAP)監(jiān)測(cè)，并在管線(xiàn)上加一個(gè)三通閥，使得能在整個(gè)手術(shù)步驟期間每10～60分鐘采集一次動(dòng)脈血樣。插入一根用于收集尿液的foley導(dǎo)管，并在整個(gè)手術(shù)步驟期間測(cè)定尿液體積。通過(guò)右頸靜脈或右股骨靜脈植入一根雙腔7FSwanGanz楔形導(dǎo)管，使之通過(guò)右心室插入肺動(dòng)脈。利用遠(yuǎn)端管口測(cè)定肺楔壓(PAW)，用近端管口測(cè)定中樞靜脈壓力(CVP)。(如有必要，可用一根插入臂靜脈之一的導(dǎo)管測(cè)定CVP)。把左股動(dòng)脈和靜脈隔離開(kāi)，準(zhǔn)備插入套管。給該動(dòng)物注入肝素(約5,000U)。把一根Biomedicus靜脈返回式套管(15-19F)插入股靜脈中，一根Biomedicus動(dòng)脈套管(12-15F)插入膠動(dòng)脈中。每45分鐘測(cè)定一次活化(血液)凝塊時(shí)間(ACT)(直至血液替代)，調(diào)節(jié)肝素，使得它能保持400秒以上。把一套熱電偶附著在一根食管導(dǎo)管中間部位附近，將此裝置插入，使得該導(dǎo)管能進(jìn)入胃部。第二套熱電偶插入直腸。安裝心電圖引線(xiàn)。用靜脈內(nèi)注射法加80mgSolu-Delta-Cortef(Upjohn，獸醫(yī)用潑尼松龍琥珀酸鈉)。雙眼涂上土霉素(或Lacrylube)，并通過(guò)食管導(dǎo)管加入DiGel(或Maalox，20ml)。測(cè)量。測(cè)定每個(gè)血樣中的血液氣體、pH和血細(xì)胞比容，在一些情況下也測(cè)定電解質(zhì)、酶及其它化學(xué)性質(zhì)。監(jiān)測(cè)食管和直腸溫度以及動(dòng)脈流入和靜脈返回血液溫度。監(jiān)測(cè)CAP、PAW、CVP、心電圖和氣道壓力。溫度應(yīng)當(dāng)用數(shù)字顯示，并作為時(shí)間的函數(shù)儲(chǔ)存在一個(gè)計(jì)算機(jī)化的數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)中。壓力和心電圖應(yīng)顯示為實(shí)時(shí)波形或數(shù)值式數(shù)據(jù)，并存入計(jì)算機(jī)中。分流回路組成部分。該回路包括一臺(tái)Biomedicus離心式血泵和流量計(jì)，一臺(tái)有內(nèi)裝熱交換器的Terumo中空纖維膜氧合器，有過(guò)濾器的Shiley硬殼靜脈貯液槽，和放置在離該動(dòng)物盡可能近、有整體泡阱的次級(jí)熱交換器(Electromedics)。排液管段位于靠近靜脈液槽入口附近，末端接一個(gè)校驗(yàn)閥。這使得能進(jìn)行快速和高效率的血液/血液代用品交換。有一個(gè)動(dòng)-靜脈分路段，使得不依靠旁通時(shí)也能循環(huán)。這個(gè)靜脈液槽可以通過(guò)“快速啟閉”口從1L分液漏斗注入液體，也可以通過(guò)心臟切開(kāi)術(shù)切口之一從雙輸液袋注入液體。從氧合器到動(dòng)脈套管的動(dòng)脈管線(xiàn)和動(dòng)靜脈(A-V)分路由1/4″管構(gòu)成；靜脈返回管、排液管和泵頭管線(xiàn)由3/8″管構(gòu)成。在那些可能發(fā)生嚴(yán)重彎曲的管段，使用厚壁管或用“螺旋包扎”法把管子系緊?；颊呋芈肥请p重包裹的，整個(gè)回路(沒(méi)有工廠消毒的液槽、次極熱交換器和氧合器)分六個(gè)基本部分(泵頭、流量計(jì)部分、中心分流回路、漏斗、輸液管線(xiàn)和氣體過(guò)濾器管線(xiàn))用環(huán)氧乙烷氣體滅菌。分流回路支撐。使用從兩個(gè)10加倉(cāng)保溫液槽之一泵來(lái)的冰水冷卻氧合器和次級(jí)熱交換器。另一個(gè)液槽供應(yīng)冷卻毯。外科手術(shù)開(kāi)始時(shí)，讓冰水通過(guò)冷卻毯循環(huán)。在分流開(kāi)始時(shí)，讓室溫水通過(guò)回路熱交換器循環(huán)。通過(guò)向液槽中加冰使溫度緩慢降低，加冰量要足以保持食管溫度和血液流溫度之間7-10℃的溫差。在血液替代(即達(dá)到血細(xì)胞比容小于約4％)之后，開(kāi)始全冰水流動(dòng)。在體溫回升時(shí)，從液槽中去掉冰，啟動(dòng)加熱器。升溫液流的溫度通過(guò)加熱器恒溫器的手動(dòng)調(diào)節(jié)，限制到最高比靜脈返回溫度高10℃。氧合器供給無(wú)菌、過(guò)濾的100％O2。血液替代。該回路注入2L溶液L(實(shí)例1)，并通過(guò)動(dòng)靜脈分路重復(fù)循環(huán)，以確保溫度-氣體平衡。把套管連接到分流回路的動(dòng)脈管線(xiàn)和靜脈管線(xiàn)上，仍將這些管線(xiàn)夾緊。把冷卻毯裹在患者身上，對(duì)其進(jìn)行體表降溫，直至達(dá)到深食管溫度為35℃。去掉夾子，開(kāi)始用室溫(約25℃)的溶液L稀釋血液流進(jìn)行分流。冷卻開(kāi)始時(shí)，停止氣體麻醉，并給這只狗施用2.5％噴妥撤。使血液流逐漸冷卻，直至該動(dòng)物的食管溫度為20℃，此時(shí)夾緊液槽入口處的靜脈返回管線(xiàn)并從排液管段排液，同時(shí)灌注溶液L，使血液排出。在這種交換期間，向靜脈液槽中再添加2L溶液L，當(dāng)溶液L的水平下降到250ml時(shí)，分批添加大約6LHLB，直至血液全部排出(血細(xì)胞比容(HCT)低于2％，用肉眼觀察)。大約4L血液/血液代用品混合物收集在無(wú)菌瓶中，保留以備重新輸注。非常稀的血液混合物(約51/2L)拋棄。在已交換4L之后(即添加2L溶液L和2L溶液HLB之后)，通過(guò)次極熱交換器上的閥門(mén)注射20毫當(dāng)量(meq)KCl，使心臟停搏。在此交換期間，調(diào)節(jié)入流量，使得PAW保持在5mmHg以下，流出速率等于流入速率，即盡可能接近于等速率換血(isovolemia)。在交換結(jié)束時(shí)，最終液槽水平將是大約500ml，PAW低于5mmHg，CVP低于5mmHg。調(diào)節(jié)流量，使得能保持等速率換血(恒定的液槽水平和上述壓力水平，即PAW＜5mmHg，CVP＜5mmHg)。當(dāng)血液幾乎全部排出(HCT低于4％，用肉眼觀察)時(shí)，可以使冷卻液流降低到冰水溫度(給液槽加冰)，使這只狗迅速冷卻到其最低溫度。如果在冷輸注期間的任何時(shí)刻觀察到HCT上升，可以通過(guò)用以上所述方法與2～4L溶液HLB交換，使血液混合物排出。在整個(gè)手術(shù)步驟期間，采集動(dòng)脈血樣并監(jiān)測(cè)血液氣體、pH、HCT，在一些情況下還監(jiān)測(cè)電解質(zhì)及其它血液化學(xué)性質(zhì)。在換血冷卻約1～2小時(shí)后，該狗的溫度將是大約1～4℃，開(kāi)始重新升溫。通過(guò)去掉供液槽中的冰和用加熱器使其內(nèi)容物升溫進(jìn)而使毯子升溫，使這只狗的體溫回升。當(dāng)食管溫度達(dá)到15℃時(shí)，用4L有25g甘露醇的溶液L與溶液HLB交換，隨后與4L所收集的血液混合物交換。排出物將被拋棄。該動(dòng)物將被緩緩升溫，血液流溫差小于10℃，且從未超過(guò)40℃。心臟自發(fā)開(kāi)始起搏。當(dāng)該動(dòng)物的溫度(食管溫度和直腸溫度)達(dá)到約35℃時(shí)，生態(tài)參數(shù)達(dá)到穩(wěn)定，而且它能自我支持，可以撤去體外循環(huán)回路。實(shí)例11使冰冷血液替代的狗復(fù)蘇一只26.8kg雄性狗用戊巴比妥鈉麻醉，插入喉管。將其移至手術(shù)室，換氣，并插入靜脈導(dǎo)管、Foley導(dǎo)管、動(dòng)脈導(dǎo)管和Swan-Ganz導(dǎo)管，在靜脈內(nèi)注入肝素后，在其右股動(dòng)脈和靜脈上插入套管。插入食管導(dǎo)管，并注入抗酸劑。在食管和直腸內(nèi)安置溫度傳感器。靜脈內(nèi)注射甲潑尼松龍。把該動(dòng)物裹在一條冷卻毯中，開(kāi)始進(jìn)行體表冷卻。把該動(dòng)物的套管連接到一個(gè)分流回路，該回路包括一個(gè)渦流血泵、一個(gè)有內(nèi)裝熱交換器的氧合器，一個(gè)次級(jí)在線(xiàn)熱交換器，和一個(gè)能快速供給血液和血液代用品的漏斗。從該狗取出全血(225ml)，保存以備重新升溫。血液體積迅速被HLB溶液置換。把含有1.05LHLB溶液的分流回路向該動(dòng)物打開(kāi)，開(kāi)始進(jìn)行體內(nèi)冷卻。交換了33L血液代用品。到接近于冰點(diǎn)的時(shí)候，血細(xì)胞比容遠(yuǎn)低于1％。該動(dòng)物的深食管溫度在4小時(shí)5分鐘內(nèi)達(dá)到10℃以下，記錄到的最低溫度為0.7℃(表2)。在低溫期之后，使該動(dòng)物升溫。當(dāng)體溫上升到10℃以上時(shí)，使前面收集的靜脈排出物和全血以及供體血液返回該回路中；血細(xì)胞比容隨溫度上升而上升。供給利多卡因和碳酸氫鹽，使心臟去纖顫(defribillated)，開(kāi)始換氣。當(dāng)血壓和體溫達(dá)到正常時(shí)，使該動(dòng)物脫離分流回路，注射精蛋白和呋喃苯胺酸。體溫回升后幾小時(shí)，該動(dòng)物神智清醒并能做出反應(yīng)。手術(shù)后該動(dòng)物依然存活，而且狀況良好。實(shí)例12使冰冷血液替代的狒狒復(fù)蘇一只橄狒種(Papioannubis)的24kg雄性狒狒先用肌內(nèi)注射氯胺酮和乙酰丙嗪，然后用靜脈內(nèi)注射噴妥撤，進(jìn)行麻醉。然后用巴夫龍(pancuroniumbromide)使之不動(dòng)。給它插入喉管，換氣，并插入靜脈導(dǎo)管、Foley導(dǎo)管和動(dòng)脈導(dǎo)管。把該動(dòng)物裹在一條冷卻毯中，開(kāi)始體表冷卻。在靜脈內(nèi)注入肝素后，給該狒狒的右膠骨動(dòng)脈和雙側(cè)股骨靜脈插入套管。在食管、直腸和腦部安置溫度傳感器。給該動(dòng)物配備心電圖(EKG)；體感喚醒潛力(SSEPs)和腦電圖(EEG)的測(cè)量?jī)x器。靜脈內(nèi)注射氟美松。把該動(dòng)物的套管連接到一個(gè)分流回路上，該回路包括一臺(tái)渦流血泵、一臺(tái)有內(nèi)裝熱交換器的氧合器，和一個(gè)能迅速供給血液和血液代用器的漏斗。從該狒狒中取出全血(300ml)，存放起來(lái)以備體溫回升之用。該體積迅速被300ml生理鹽水溶液置換。把含有2LPlasmalyte(可市購(gòu)的電解質(zhì)溶液)的分流回路向該動(dòng)物開(kāi)放，開(kāi)始體內(nèi)冷卻。在深食管溫度降低到13℃以下之后，向該回路中添加另外2L含12.5g甘露醇的Plasmalyte，置換血液和以前注入該回路中的Plasmalyte的混合物。把這種稀釋的血液保存起來(lái)，以備體溫回升時(shí)使用。此后立即添加10LHLB溶液，置換這種Plasmalyte。當(dāng)達(dá)到冰點(diǎn)時(shí)，血細(xì)胞比容遠(yuǎn)低于1％。當(dāng)該動(dòng)物達(dá)到大腦溫度為3.4℃和深食管溫度為2.8℃時(shí)，使血泵停止，并使該動(dòng)物在循環(huán)停止(停頓)的條件保持45分鐘。在此時(shí)期后，使循環(huán)恢復(fù)。在這段低溫期之后，向分流回路中添加4.2LHLB溶液，使該動(dòng)物升溫。當(dāng)體溫達(dá)到15℃時(shí)，向該回路中添加2LPlasmalyte以置換HLB溶液。向該回路中的Plasmalyte添加甘露醇(6.25g/l)。此外，讓前面收集的靜脈排出物和全血，以及供體血細(xì)胞和鮮凍血漿，返回到該回路中；該動(dòng)物的血細(xì)胞比容隨體溫上升而上升。向該回路中添加另外12.5g甘露醇。當(dāng)食管溫度和直腸溫度接近于正常時(shí)，心臟在升溫期間發(fā)生纖顫并開(kāi)始起搏。開(kāi)始換氣。當(dāng)血壓和體溫接近于正常時(shí)，給該動(dòng)物靜脈內(nèi)注射精蛋白，使之脫離分流系統(tǒng)，去掉其套管和導(dǎo)管，并縫合其切口。該動(dòng)物的深食管溫度在15℃以下3小時(shí)，在10℃以下2小時(shí)17分鐘，記錄到的最低溫度為2.8℃(表3)。次日清晨，該動(dòng)物能在籠內(nèi)坐直，揀食數(shù)枚香蕉，也能飲蘋(píng)果汁。它仍能健康存活，直至一周多以后為了進(jìn)行組織學(xué)評(píng)估而宰殺。表2冰冷血液替代的狗的復(fù)蘇<</tables>Te食管溫度；Tr直腸溫度；MAP平均動(dòng)脈壓力；HR心搏速度；PAW肺動(dòng)脈楔壓；CVP中樞靜脈壓力表3.冰冷血液替代的狒狒的復(fù)蘇Te食管溫度；Tr直腸溫度；Tb大腦溫度；MAP平均動(dòng)脈壓力；HR心搏速度；ICP顱內(nèi)壓力以上所述和在以下提出權(quán)利要求的本發(fā)明具體說(shuō)明了可用于許多手術(shù)步驟的新型溶液。具有本門(mén)技術(shù)普通技能的人員可以根據(jù)本說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求的陳述，對(duì)本發(fā)明做某些增補(bǔ)或改變，而不背離本發(fā)明所公開(kāi)的實(shí)質(zhì)。權(quán)利要求1.一種水基血液代用品溶液，其中所述溶液包括一種腫脹劑，且不包括大于5mMK+，也不包括常用生物緩沖劑。2.權(quán)利要求1的溶液進(jìn)一步包含Na+和一種有機(jī)羧酸、其鹽或酯。3.一種適合于作為血液代用品使用的溶液，包含0～5mMK+；濃度為生理濃度或亞生理濃度的Na+、Mg++、Ca++、Cl-；一種大分子腫脹劑；一種有機(jī)羧酸、其鹽或酯；和一種糖，其先決條件是所述溶液不包括大于5mMK+，且其進(jìn)一步先決條件是所述溶液不包括常用生物緩沖劑。4.權(quán)利要求3的溶液，其中K+以2～3mM的濃度范圍存在。5.權(quán)利要求3的溶液，其中Na+以130～150mM的濃度范圍存在。6.權(quán)利要求3的溶液，其中Mg++以0.20～0.45mM的濃度范圍存在。7.權(quán)利要求3的溶液，其中Ca++以2.0～2.5mM的濃度范圍存在。8.權(quán)利要求3的溶液，其中所述糖是一種簡(jiǎn)單己糖，選自由葡萄糖、果糖或半乳糖或其混合物組成的一組。9.權(quán)利要求3的溶液，其中所述有機(jī)酸、其鹽或酯由化學(xué)式RCOOX代表，式中R是一個(gè)烷基、鏈烯基或芳基，有一條含有1～30個(gè)碳的支鏈或直鏈，這些碳可以是有取代的；和X是一個(gè)氫或鈉或其它可以在這個(gè)氧位上連接的生物上可兼容離子取代基，或一個(gè)含有1～4個(gè)碳的短直鏈或支鏈烷基。10.權(quán)利要求9的溶液，其中所述有機(jī)羧酸選自由乳酸鹽、乙酸鹽、丙酮酸鹽或檸檬酸鹽組成的一組。11.權(quán)利要求3的溶液進(jìn)一步包含NaHCO3。12.在低溫條件下使部分放血或基本上完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象保活的方法，包括用一種包含大分子腫脹劑、Ca++且不含有常用生物緩沖劑的溶液置換血。13.權(quán)利要求12的方法進(jìn)一步包含葡萄糖。14.在低溫條件下使部分放血或基本上完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象保活的方法，包括用一種溶液置換血，該溶液的組成為0～5mMK+，濃度為生理水平或亞生理水平的Na+、Mg++、Ca++、Cl-，一種大分子腫脹劑，一種有機(jī)羧酸、其鹽或酯，一種糖，和NaHCO3，其先決條件是所述溶液不包括大于5mMK+，且其進(jìn)一步先決條件是所述溶液不包括常用生物緩沖劑。15.權(quán)利要求12的方法，其中所述溶液不合有K+。16.實(shí)驗(yàn)對(duì)象或所述實(shí)驗(yàn)對(duì)象的細(xì)胞、組織或器官的生物完整性的保持方法，包括給所述實(shí)驗(yàn)對(duì)象或所述實(shí)驗(yàn)對(duì)象的細(xì)胞、組織或器官輸注一種溶液，該溶液包含0～5mMK+，濃度為生理水平或亞生理水平的Na+、Mg++、Ca++、Cl-，一種大分子腫脹劑，一種有機(jī)羧酸或其鹽或酯，和一種糖，其先決條件是所述溶液不包括大于5mMK+，且其進(jìn)一步先決條件是所述溶液不包括常用生物緩沖劑。17.權(quán)利要求14的方法，其中所述溶液在無(wú)細(xì)胞體系中基本上沒(méi)有能力緩沖7～8范圍的pH。18.權(quán)利要求14的方法，其中所述溶液不包含從由HEPES、MOPS、TES、EPPS、THAM或TRIS組成的一組中選擇的緩沖劑。19.提供一種熱滅菌的血液代用品的方法，包括把一種溶液放進(jìn)一種可熱滅菌的容器中，該溶液的組成為0～5mMK+，濃度為生理水平或亞生理水平的Na+、Mg++、Ca++、Cl-，一種大分子腫脹劑，一種有機(jī)羧酸、其鹽或酯，和一種糖；和在壓力下使所述溶液的溫度上升一段足以殺滅該溶液中的全部或基本上全部細(xì)菌并使全部或基本上全部病毒失活的時(shí)間。20.權(quán)利要求17的方法，其中所述溶液的所述溫度是在壓力下上升至120℃，保持15分鐘。21.權(quán)利要求17的方法，其中所述溶液放在一臺(tái)高壓滅菌器中。22.權(quán)利要求17的方法，其中所述溶液是作為一種血液代用品或血漿增容劑輸注到實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)的。23.權(quán)利要求17的方法，其先決條件是所述溶液不包括大于5mMK+，且其進(jìn)一步先決條件是所述溶液不包括常用生物緩沖劑。24.給因其需要而做好循環(huán)輸注準(zhǔn)備的實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行輸注的方法，包括如下步驟使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的溫度降低到正常以下的溫度；使一種溶液在實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)循環(huán)，該溶液包含0～5mMK+，濃度為生理水平或亞生理水平的Na+、Mg++、Ca++、Cl-，一種大分子腫脹劑，一種有機(jī)羧酸或其鹽，一種糖，和NaHCO3；和隨后使血液返回該實(shí)驗(yàn)對(duì)象體內(nèi)。25.權(quán)利要求22的方法，其先決條件是所述溶液不包括大于5mMK+，且其進(jìn)一步先決條件是所述溶液不包括常用生物緩沖劑。26.權(quán)利要求22的方法，包括在使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象的溫度降低到正常以下的溫度之后把該實(shí)驗(yàn)對(duì)象放在一種高壓氧氣氛下的附加步驟，和進(jìn)一步包括使該實(shí)驗(yàn)對(duì)象能在一種高壓氧氣氛中再生正常血液水平的步驟。全文摘要公開(kāi)了包含下列成分的水溶液一種多糖腫脹劑，一種生理上兼容的緩沖劑，一種簡(jiǎn)單己糖，溶解的鈣、鈉和鎂氯化物鹽，和一種溶解的有機(jī)鈉鹽。這些溶液是血液的有效代用品，可以用來(lái)保存哺乳動(dòng)物供體生物的生物完整性，如輸注了此種溶液的實(shí)驗(yàn)對(duì)象的低溫保存器官和組織的優(yōu)異解剖學(xué)完整性所示。這些溶液可用于使部分放血或基本上完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象保持在正常溫度和大大低于哺乳動(dòng)物通常保持的溫度，而且可用于與低壓環(huán)境相結(jié)合，使這樣的部分放血或完全放血的實(shí)驗(yàn)對(duì)象保活而無(wú)需將血液輸回該實(shí)驗(yàn)對(duì)象。文檔編號(hào)A61K9/00GK1127476SQ9419280公開(kāi)日1996年7月24日申請(qǐng)日期1994年6月3日優(yōu)先權(quán)日1993年6月4日發(fā)明者P·E·西加爾,H·施特恩堡,H·D·懷茲,J·M·西加爾申請(qǐng)人:生物時(shí)間公司