專利名稱：一種膽固醇生物合成抑制劑與一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑的聯(lián)合的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于降低血漿膽固醇水平的由一種膽固醇生物合成抑制劑與一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑組成的組合物;還涉及使用該組合物防治動脈粥樣硬化的一種方法。
血漿中膽固醇水平已被肯定與某些和出現(xiàn)冠心病有聯(lián)系的監(jiān)床癥狀有關(guān)。人類和動物體內(nèi)總體膽固醇自穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)包括膽固醇生物合成調(diào)節(jié)、膽酸生物合成調(diào)節(jié)以及含膽固醇的血漿脂蛋白的分解。肝臟是膽固醇生物合成和分解最主要的器官，所以，其對血漿膽固醇水平起著決定性的作用。肝臟是合成和分泌極低密度脂蛋白(VL-DL)的場所，而VLDL在血液循環(huán)中可進(jìn)一步代謝為低密度脂蛋白(LDL)。在血漿中LDL是主要的攜帶膽固醇的脂蛋白，其濃度的增加與動脈粥樣硬化的增加有關(guān)。
決定膽固醇體內(nèi)平衡的另一重要因素是膽固醇在小腸中的吸收。人們每天要從食物(西方人食物)中吸收300～500膽固醇，此外每天還有600～1000mg膽固醇從小腸通過。后一部分膽固醇是膽汁的一種成分，從肝中分泌。膽固醇的吸收過程復(fù)雜而多樣化。已有報道，腸道內(nèi)約50%總膽固醇被腸內(nèi)壁的細(xì)胞(即腸細(xì)胞)所吸收。該膽固醇既包括來自食物的又包括來自膽汁或肝中合成的。腸細(xì)胞新吸收的大部分膽固醇在?；o酶A-?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)作用下酯化。隨后這些膽固醇酯與甘油三脂及其它成分(磷脂類、載脂蛋白類)一起包裝成為另一類脂蛋白-乳糜微粒。
乳糜微粒被腸細(xì)胞分泌進(jìn)入淋巴，然后由淋巴入血。實際上腸中吸收的所有膽固醇均通過此路徑運至肝臟。無論采用何種手段，當(dāng)膽固醇在腸中的吸收減少，運至肝臟的膽固醇也會減少。這種作用的結(jié)果是肝中脂蛋白(VLDL)生成減少，血漿膽固醇(主要是LDL)的肝清除率增加。這樣，抑制腸膽固醇吸收的最終結(jié)果是降低血漿膽固醇水平。
β-內(nèi)酰胺，如公開在PCP/US92/05972的化合物(3R-4S)-1.4-雙-(4-甲氧苯基)-3-(3-苯丙基)-2-吖丁啶酮是一種有效的膽固醇腸吸收抑制劑，可以降低多種動物，如倉鼠、大鼠、兔、猴的血漿膽固醇水平。
3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)還原酶(Ec1.1.1.34)抑制劑對膽固醇生物合成的抑制作用已被證明是降低血漿膽固醇(Witzum，1989)和減少動脈粥樣硬化的有效方法。已有證明對高脂血病人用一種HMGCoA，還原酶抑制劑和一種膽酸多價螯合劑合并治療比這兩種藥中任何一種單用更為有效(111ingworth，1988)。
我們已意外地發(fā)現(xiàn)，一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑和HMGCoA還原酶抑制劑洛瓦斯汀(Lovastctin，商品名MEVACOR)合并用于喂食的狗、恒河猴以及喂膽固醇的倉鼠、兔，比起單用其中一種藥物能更多地降低血漿膽固醇。這些發(fā)現(xiàn)之所以出乎意料是因為單獨使用HMGCoA還原酶抑制劑并不能降低倉鼠和猴的血漿膽固醇水平。
本發(fā)明涉及一種降低血漿膽固醇水平的方法，包括對需要進(jìn)行這種治療的哺乳動物使用有效量的一種膽固醇生物合成抑制劑和β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑組合物。本發(fā)明還涉及一種防治動脈粥樣硬化的方法，包括對需要進(jìn)行治療的哺乳動物使用有效量的一種膽固醇生物合成抑制劑和β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑組合物。即本發(fā)明涉及一種-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑與一種膽固醇生物合成抑制劑聯(lián)合使用(也可以說，膽固醇生物合成抑制劑與β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑聯(lián)合使用)以防治動脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇水平。
第三方面，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，由一種有效量的膽固醇生物合成抑制劑、一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑和一種藥物可接受的載體組成。此外，本發(fā)明還涉及一種藥盒，其內(nèi)的一個容器裝有一種有效量的膽固醇生物合成抑制劑于一種藥物可接受的載體中，另一個隔開的容器中裝有一種有效量的β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑于一種藥物可接受的載體中。
本發(fā)明在組合物中所用的膽固醇生物合成抑制劑包括HMGCoA還原酶抑制劑(如洛瓦斯汀、普瓦斯汀、氟瓦斯汀、西瓦斯汀和CI-981)、HMGCoA合成酶抑制劑(如L-659，699，即E，E-11-[3′R-(羥基甲基)-4′-氧-2′R-氧丁環(huán)烷基]-3，5，7R-三甲基-2，4-+-碳二烯酸)、角鯊烯合成抑制劑(如角鯊斯汀1)和角鯊烯環(huán)氧化酶抑制劑(如NB-598，即(E)-N-乙基-N-(6.6-二甲基-2-庚-4-炔基)-3-[(3，3′-雙噻吩-5-基)甲氧基]苯甲胺鹽酸鹽)。優(yōu)選的HMGCoA還原酶抑制劑是洛瓦斯汀、普瓦斯汀和西瓦斯汀(Lovaststin、Pravaststin、Simvastatin)β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑包括1992年7月21日申請(PCT/US92/05972)、1993.2.4公布(WO93/02048)的式Ⅰ中被鑒定的新化合物以及用于降膽固醇的PCT申請中的Ⅱ化合物。上述PCT專利申請的內(nèi)容在此作為參考，其中式Ⅰ、式Ⅱ化合物如下所示
其中，A是-CH＝CH-B;-C≡C-B;-(CH2)p-X-B，其中p是0、1或2，X是一個鍵、-NH-或-S(O)0-2-;雜芳基、苯并雜芳基、W-取代雜芳基或W-取代苯并雜芳基，雜芳基是從吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基、噻嗯基、噁唑基和呋喃基其中選擇，對于含氮雜芳基是其N-氧化物，W是在環(huán)碳原子上取代的1-3個取代基，取代基是從低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、烷氧基羰基烷氧基、(低級烷氧基亞胺基)低級烷基、低級烷基二?；⒌图壨榛〈牡图壨榛；?、烯丙氧基、-CF3、-OCF3、芐基、R14-芐基、芐氧基、R14-芐氧基、苯氧基、R14-苯氧基、二氧戊環(huán)基、NO2、-NR10R11、NR10R11(低級烷基)-、NR10R11(低級烷氧基)-、OH、鹵素、-NHC(O)OR5、-NHC(O)R5、R6O2SNH-、(R6O2S)2N-、-S(O)2NH2、-S(O)0-2R10、叔丁基二甲基硅烷氧基甲基、-C(O)R12和
中選擇，其中若有連接于取代的芳雜環(huán)氮原子上的取代基是從低級烷基、低級烷氧基、-C(O)OR5、-C(O)R5、OH、NR10R11(低級烷基)-、NR10R11(低級烷氧基)-、-S(O)2NH2和2-(三甲硅烷基)乙氧基甲基中選擇;
A還可以是-C(O)-B或-(CH2)k
其中K是1或2;
D是B′-(CH2)mC(O)-，其中m是1、2、3、4或5;
B′-(CH2)q，其中q是2、3、4、5或6;
B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-，其中Z是-O-、-C(O)-、亞苯基、-NR8-或-S(O)0-2-，e是1、2、3、4或5，r是1、2、3、4或5，但e與r的總數(shù)是1、2、3、4、5或6;
B′-(C2-C6亞烯基)-;B′(C4-C6亞二烯基)-;
B′-(cH2)t-Z-(C2-C6亞烯基)-，其中Z如上所定義，t是0、1、2或3，但t與亞烯烴鏈上的碳原子數(shù)總和為2、3、4、5或6;
B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中V是C3-C6亞環(huán)烷基，f是1、2、3、4或5，g是0、1、2、3、4或5，f與g總數(shù)是1、2、3、4、5或6;
B′(CH2)t-V-(C2-C6)亞烯基)-或B′-(C2-C6亞烯基)-V-(CH2)t-，其中V和t如上所述，t與亞烯烴鏈上的碳原子數(shù)總和為2、3、4、5或6;
B′-(CH2)a-Z-(CH2)b-V-(CH2)d-，其中Z和V如上所述，a、b、d各自為0、1、2、3、4、5或6，但a、b、d總和是0、1、2、3、4、5或6;
T-(CH2)s-，其中T是3-6個碳原子的環(huán)烷基，S是1、2、3、4、5或6;或萘甲基、雜芳基甲基或W-取代雜芳基甲基，雜芳基和W如上所述;
B′是萘基、雜芳基或W-取代雜芳基，其中，雜芳基如上定義或者是
R是氫、氟、C1-C15烷基、C2-C15烯基、C2-C15炔基或B-(CH2)h-，其中h是0、1、2或3;
R1、R2和R3是分別從H和W中選擇，當(dāng)W是鹵素時，應(yīng)是鄰位或間位鹵代;或者當(dāng)R1是氫時，R2和R3鹵代與它們所連接的相鄰的碳原子一起形成一個二氧戊環(huán);
R1′、R2′和R3′是分別從H和W中選擇;或當(dāng)R1′是氫時，R2′和R3′與它們所連接的相鄰碳原子一起形成一個二氧戊環(huán);
其中n是0、1、2或3、茚滿基、苯并呋喃基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基、四氫萘基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基或喹啉基;
R5是低級烷基、苯基、R14-苯基、芐基或R14-芐基;
R6OH、低級烷基、苯基、芐基、R14-苯基或R14-芐基;
R7是低級烷基、低級烷氧基、OH、鹵素、-NR10R11、-NHC(O)OR5、-NHC(O)R5、NO2、-CN、-N3、-SH、-S(O)0-2-(低級烷基)、-COOR9、-COOR10R11、-COR12、苯氧基、芐氧基、-OCF3或叔丁基二甲基硅烷氧基，n是2或3，每個R7基可以相同或不同;
R8是H、低級烷基、苯基取代低級烷基或-C(O)R9;
R9是H、低級烷基、苯基或苯基取代低級烷基;
R10和R11可分別從H、低級烷基中選擇;
R12是H、OH、烷氧基、苯氧基、芐氧基、
、-NR1011、低級烷基、苯基或R14-苯基;
R13是-O-、-CH2-、-NH-或-N(低級烷基)-;及R14是1-3個基團(tuán)，分別選自低級烷基、低級烷氧基、-COOH、NO2、-NR10R11、OH或鹵素;或一種其藥物可接受的鹽。
其中R20是苯基、W-取代苯基、萘基、W-取代萘基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基、雜芳基、W-取代雜芳基、苯并雜芳基和W-取代苯并雜芳基，雜芳基如上所定義;
R21、R22和R23各自獨立從H或R20中選擇;
W是1-3個取代基，可從前述所定義基團(tuán)中獨立選擇;
E、F和G可以分別是一個鍵、C3-C6亞環(huán)烷基、C1-C10亞烷基、C2-C10亞烯基、C2-C10亞炔基、被一個或一個以上取代基取代的亞烷基、亞烯基或亞炔基鏈，取代基可以分別是苯基、W-取代苯基、雜芳基和W-取代雜芳基，雜芳基如上定義;還可以是中間被一個或一個以上-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR8、-C(O)-、C3-C6亞環(huán)烷基、亞苯基、W-取代亞苯基、二價雜芳基和W-取代的二價雜芳基隔開的亞烷基、亞烯基和亞炔基鏈;或者是被一個或一個以上的苯基、W-取代苯基、雜芳基、W-取代雜芳基取代的上述被隔開的亞烷基、亞烯基和亞炔基;或者R21-E和R22-F其中之一從鹵素、OH、低級烷氧基、-OC(O)R5、-NR10R11、-SH或-S(低級烷基)中選擇;
其中R5、R6和R8-R14如上定義;
當(dāng)G是一個鍵時，R23不是H，當(dāng)R23是W-取代苯基時，W不是對位鹵代基;
或者是一種藥物可接受的鹽。
優(yōu)選的式Ⅰ化合物中R是H。另一組優(yōu)選的式Ⅰ化合物中，其中D是B′-(CH2)q-，B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-，B′-(C2-C6亞烯基)-，或B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中B′、Z、V、q、e、r、f和g如前所述。第三組優(yōu)選的式Ⅰ化合物中，其中R4是苯基、R7取代的苯基或茚滿基。還有一組優(yōu)選的式Ⅰ化合物中，其中A是-(CH2)p-X-B，X、B、p如前所述。
特別優(yōu)選的式Ⅰ化合物中，D是B′-(CH2)q-，其中B′是苯基，q是3或4;B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-，其中B′是對氟苯基或?qū)籽醣交?，e是零，Z是-O-，r是2;B′-(C2-C6亞烯基)-，B′是3-苯基-1-丙烯基;或者B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中B′是苯基、f是1，V是亞環(huán)丙基，g是0。另一特別優(yōu)選的式Ⅰ化合物中A是-(CH2)p-X-B，其中p是0，X是一個鍵。式Ⅰ化合物中，R1、R2和R3最好從H、OH、-NO2、低級烷氧基、烷氧基取代的烷氧基、低級烷基取代的低級烷基二?；㈤g位鹵代基、NR10R11(低級烷氧基)-、烯丙氧基、苯氧基、烷氧基羰基烷氧基和-C(O)R12。式Ⅰ化合物中R1和R3是H并且R2在對位更好。
式Ⅰ中R7最好從低級烷基、低級烷氧基、鹵素、-OCF3、低級烷硫基、-NR10R11、-CN、OH、和-COR12。選擇式Ⅰ化合物中更好的是n是1并且R7在對位。
一種優(yōu)選的β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑是(3R-4S)-1，4-雙-(4-甲氧苯基)-3-(3-苯丙基)-2-吖丁啶酮。
本發(fā)明的組合物降低血漿膽固醇水平的作用在以下實驗過程中得以證實。在該實驗中，β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑為(3R-4S)-1，4-雙-(4-甲氧基苯基)-3-(3-苯丙基)-2-吖丁啶酮(下文稱為化合物A)，該HMGCoA還原酶抑制劑是洛瓦斯汀。
實施例1化合物A和洛瓦斯汀并用對喂膽固醇地鼠的降膽固醇作用。
方法雄性敘利亞金黃地鼠(Charles River實驗室提供，Wilmington，MA)體重在100-125g，實驗前喂食Wayne嚙齒類食料。實驗第一天將動物分組，每組4-6只，喂食Purina Chow＃5001飼料并補(bǔ)充0.5%體重的膽固醇(Research Diets公司，New Brunswick，NJ)。從第一天起灌胃給化合物A3mg/kg和洛瓦斯汀10mg/kg(溶于0.2ml玉米油中)，每日一次，給藥7天。實驗第7天斷頭處死動物，取血，收集于含乙二胺四乙酸(EDTA)的試管中，在4℃低速離心制備血漿。
用改良的膽固醇氧化酶法(AllainetalClin.Chem.20，1974，P.470～5)測定不禁食動物血漿膽固醇水平，測定所用試劑從Wako純化學(xué)品有限公司(大阪，日本)出品的試劑盒得到。將用于測定總膽固醇的10μl血清加入1ml0.15M的tris緩沖液(三羥甲基氨基甲烷緩沖液)，pH7.0，含0.1%對氯苯酚、0.13U/ml膽固醇氧化酶、0.13U/ml膽固醇酯水解酶、2.4U/ml過氧化酶和0.015%4-氨基安替比林。反應(yīng)在37℃進(jìn)行10分鐘，與膽固醇標(biāo)準(zhǔn)品對照，所得產(chǎn)物經(jīng)紅色氫醌染色的吸收在505nm處分光光度法測定。
結(jié)論喂食含0.5%膽固醇食料的地鼠7天后血漿膽固醇含量增加二倍，增加的主要是VLDL和LDL(Schnitzer-PotokoffefalCompBiochem.Physiol.，99A，1991，P665-70)。給予化合物A3mg/kg/日可降低血漿膽固醇15%，而給洛瓦斯汀10mg/kg/日沒有作用(表1)。當(dāng)化合物和洛瓦斯汀聯(lián)合給藥，發(fā)現(xiàn)可降低血漿膽固醇31%，比起兩藥單用有顯著性的區(qū)別(表1)
表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(X±SX)。A組與對照相比，ap＜0.05。聯(lián)合用藥組與分別單用化合物A或洛瓦斯汀組相比，abp＜0.05。
實施例2化合物A與洛瓦斯汀并用對喂食膽固醇的兔的降膽固醇作用。
方法將體重為2.4-2.6kg的雄性新西蘭白兔用含1%膽固醇、6%花生油食物喂養(yǎng)一周激發(fā)，除去血漿膽固醇水平高于或低于平均值超過一個標(biāo)準(zhǔn)差的兔子，將兔分為4組，每組8只，4組兔血漿膽固醇含量基本相等。給兔喂食含0.5%膽固醇、6%花生油的食物，第一組單獨喂食物，另三組分別加0.03%化合物A，0.015%洛瓦斯汀、或0.03%化合物A和0.15%洛瓦斯汀。每周取不禁食血清樣品，共四周，血清膽固醇水平的測定方法同實施例1。
結(jié)果在一周喂食1%膽固醇、6%花生油的實驗中，使實驗兔血清膽固醇含量平均約1000mg/dl(見表2)。在四周的研究期間4組兔消耗食物和體重增長大致相同?；衔顰劑量按食物的0.03%為14mg/kg/日，洛瓦斯汀為食量的0.015%，劑量為7mg/kg/日。對照組血清膽固醇含量繼續(xù)上升，從1015mg/dl升至第4周時間點的1358mg/dl(見表2)。單用化合物A組在第4周比起第0周血清膽固醇下降29%，而單用洛瓦斯汀組4周內(nèi)下降33%，但這些下降經(jīng)方差分析(ANOVA)均無統(tǒng)計學(xué)意義。在所有的時間點，化合物A與洛瓦斯汀并用組的血漿膽固醇降低均具有顯著性差異，與第0周相比，第4周下降了61%(見表2)。比起對照組，4周內(nèi)用藥組血清膽固醇含量相應(yīng)的下降值均十分明顯，化合物A組下降47%，洛瓦斯汀組下降51%，化合物A與洛瓦斯汀并用組下降72%。
數(shù)值表示每組8只兔的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。與對照組相對，aP＜0.05;對每個用藥組，經(jīng)方差分析，與第0周相比，bP＜0.05。
實施例3化合物A與洛瓦斯汀并用對喂食無膽固醇食物的恒河猴的降膽固醇作用方法20只體重在4.4-8.5kg的恒河猴(17只雄性，3只雌性)喂食含5%玉米油的無脂肪猴飼料(＃50 38-7)2周。四組猴(每組5只)血清膽固醇含量及體重大致相等。繼續(xù)給實驗猴喂食含5%玉米油的無脂肪飼料，對照組僅喂食，另三組分別加入化合物A3mg/kg/日、20mg/kg/日洛瓦斯汀、或化合物A(3mg/kg/日)及洛瓦斯汀(20mg/kg/日)。每周取空腹時血清樣，共三周。按實驗1所述方法測得血清膽固醇含量。對血清膽固醇含量的改變用方差分析和Dunnett t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，p＜0.05的概率可被認(rèn)為具有顯著性差異。
結(jié)論在三周的研究期間內(nèi)，喂食含5%玉米油的無脂肪飼料的對照組猴血清膽固醇保持恒定水平(見表3)。在三周內(nèi)，分別用化合物A3mg/kg/日和用洛瓦斯汀20mg/kg/日的猴血清膽固醇僅有輕微下降，但這種改變與第三周的對照組相比沒有顯著性差異?；衔顰與洛瓦斯汀并用的組在所有的時間點上比兩種藥單用的組血清膽固醇都有極顯著下降，在第三周達(dá)到下降25%(見表3)。
數(shù)據(jù)表示每組5只猴的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤與對照組相比，p＜0.05。
實施例4化合物A與洛瓦斯汀并用對喂食飼料狗的降膽固醇作用方法
15只雄性比格狗分成三組，每組5只，具有相同的血清膽固醇含量和體重。給三組狗喂食含麥芽糊精的Purina狗飼料(＃5006)。并分別加入0.0234%化合物A或0.0234%洛瓦斯汀或化合物A(0.0234%)與洛瓦斯汀(0.0234%)，共喂7日。在0、3和7日取血清樣，用實驗1所述方法測血清總膽固醇含量。用方差分析確定統(tǒng)計學(xué)差別，p＜0.05的既率可認(rèn)為具有顯著性差異。
結(jié)論喂食含0.0234%化合物A(5mg/kg/日)或含0.0234%洛瓦斯汀(5mg/kg/日)飼料的狗在第3天和第7天血清膽固醇含量與基準(zhǔn)含量(第0天)相比，沒有改變(見表4)。用化合物A(5mg/kg/日)加洛瓦斯汀(5mg/kg/日)的實驗組血清膽固醇含量在第7天與第0天的基準(zhǔn)相比，下降33%(見表4)。合并用藥組血清膽固醇含量在第7日比起單用藥的任一組也有明顯降低(見表4)。
數(shù)據(jù)表示每組5只狗的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。
與第0天相比，aP＜0.05。
與第7天任一單用化合物A或洛瓦斯汀組相比，bP＜0.05。
本發(fā)明涉及使用兩種成分的組合物的治療方法，這兩種成分可同時或先后服用，或?qū)⒛懝檀忌锖铣梢种苿┘唉?內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑在一種藥物可接受的載體中制成一種藥物組合物服用。該組合物的成分可以任何方便的口服或不經(jīng)腸道服用的劑型分別或一起服用，這些劑型可以是膠囊、片劑、粉劑、扁囊劑、混懸劑或溶液?？捎梅奖愕乃幬镔x形劑和添加劑用便利的技術(shù)制備制劑。這些藥物可用的賦形劑、添加劑包括無毒的適合的填充料、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤滑劑、香味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑等。
由一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑組成的有代表性配方已公開在前述的PCT/US92/05972中，一種含膽固醇生物合成抑制劑的代表性配方在技術(shù)上也是眾所周知的。人們期望這兩種活性成分可作為一種組合物服用。公開在上述PCT申請的劑型借助技術(shù)熟練者的知識可容易地改良。
本發(fā)明用于降血清膽固醇的組合物中的化合物每日劑量如下膽固醇生物合成抑制劑的典型劑量是哺乳動物每日每公斤體重0.1-80mg，可一次或分次服用，通常一日一或二次;β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑的典型劑量是哺乳動物每日每公斤體重0.1-10mg，一次或多次劑型。所服用的組合物中任何成分的準(zhǔn)確用量在臨床實際中根據(jù)所用化合物的效力、病人的年齡、體重、身體狀況和病人對藥的敏感性等來確定。
一般來說，為了對需要這種治療的哺乳動物降低血漿膽固醇，本發(fā)明組合物中的化合物可以如下劑量范圍用于病人HMGCoA還原酶抑制劑用量為每劑約10-40mg，每日1-2次，每日總量約10-30mg，其它膽固醇生物合成抑制劑用量為每劑約1-1000mg，每日1-2次，每日給藥總量約為1mg-2g，β-內(nèi)酰胺膽固醇生物合成抑制劑每劑約1-1000mg，每日1-4次。如果組合物中不同成分分別服用，每種成分每日給藥次數(shù)不需相同，如一種成分的作用時間長得多，服用次數(shù)就少。
由于本發(fā)明涉及活性成分的聯(lián)合應(yīng)用降低血漿膽固醇水平，所述活性成分可分別服用，因此要發(fā)明也涉及不同藥物成分在一個藥盒中的組合。即一個藥盒內(nèi)含兩種不同單元，組合在一起，有膽固醇生物合成抑制劑藥物合劑和β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑藥物合劑。藥盒中最好包括有不同成分的使用說明，尤其當(dāng)不同成分必須使用不同劑型或以不同的給藥間隔服用(如口服劑型和非腸道使用劑型)。
權(quán)利要求
1.一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑在制造一種與膽固醇生物合成抑制劑聯(lián)合以防治動脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇含量的藥劑方面的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用途，其中該β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑的結(jié)構(gòu)式為
其中A是-CH＝CH-B;-C≡C-B;-(CH2)p-X-B，其中p是0、1或2，X是一個鍵、-NH-或-S(O)0-2-;雜芳基、苯并雜芳基、W-取代雜芳基或W-取代苯并雜芳基，雜芳基是從吡咯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、咪唑基、噻唑基、吡唑基、噻嗯基、噁唑基和呋喃基中選擇，對于含氮雜芳基是其N-氧化物，W是在環(huán)碳原子上取代的1-3個取代基，取代基是從低級烷基、羥基低級烷基、低級烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、烷氧基羰基烷氧基、(低級烷氧基亞胺基)低級烷基、低級烷基二酰基、低級烷基取代的低級烷基二?；⑾┍趸?、-CF3、-OCF3、芐基、R14-芐基、芐氧基、R14-芐氧基、苯氧基、R14-苯氧基、二氧戊環(huán)基、NO2、-NR10R11、NR10R11(低級烷基)-、NR10R11(低級烷氧基)-、OH、鹵素、-NHC(O)OR5、-NHC(O)R5、R6O2SNH-、(R6O2S)2N-、-S(O)2NH2、-S(O)0-2R10、叔丁基二甲基硅烷氧基甲基、-C(O)R12和-CH2-N
R13中選擇，其中若有連接于取代的芳雜環(huán)氮原子上的取代基是從低級烷基、低級烷氧基、-C(O)OR5、-C(O)R5、OH、NR10R11(低級烷基)-、NR10R11(低級烷氧基)-、-S(O)2NH2和2-(三甲硅烷基)乙氧基甲基中選擇;-C(O)-B;或-(CH2)k
其中K是1或2D是B′-(CH2)mC(O)-，其中m是1、2、3、4或5B′-(CH2)q-，其中q是2、3、4、5或6B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-，其中Z是-O-、-C(O)-、亞苯基、-NR8-或-S(O)0-2，e是1、2、3、4或5，r是1、2、3、4或5，但e與r總和為1、2、3、4、5或6;B′-(C2-C6亞烯基)-;B′-(C4-C6亞二烯基)-;B′-(CH2)t-Z-(C2-C6亞烯基)-，其中Z如上所定義，t是0、1、2或3，但t與亞烯烴鏈上的碳原子數(shù)總和為2、3、4、5或6;B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中V是C3-C6亞環(huán)烷基，f是1、2、3、4或5，g是0、1、2、3、4或5，f與g總數(shù)是1、2、3、4、5或6;B′(CH2)t-V-(C2-C6亞烯基)-或B′-(C2-C6亞烯基)-V-(CH2)t-，其中V和t如上所述，t與亞烯烴鏈上的碳原子數(shù)總和為2、3、4、5或6;B′-(CH2)a-Z-(CH2)b-V-(CH2)d-，Z和V如上所述，a、b、d分別為0、1、2、3、4、5或6，但a、b、d總和是0、1、2、3、4、5或6;T-(CH2)8-，其中T是3-6個碳原子的環(huán)烷基，s是1、2、3、4、5或6;或萘甲基、雜芳基甲基或W-取代雜芳基甲基，其中雜芳基和W如上所述;
B′是萘基、雜芳基或W-取代雜芳基、其中，雜芳基如上定義或者是
R是氫、氟、C1-C15烷基、C2-C15烯基、C2-C15炔基或B-(CH2)h，其中h是0、1、2或3;R1、R2和R3是分別從H和W中選擇，當(dāng)W是鹵素時，應(yīng)是鄰位鹵代或間位鹵代;或當(dāng)R1是氫時，R2和R3與它們所連接的相鄰碳原子一起形成一個二氧戊環(huán);R1′、R2′和R3′是分別從H和W中選擇;或當(dāng)R1′是氫時，R2′和R3′與它們所連接的相鄰碳原子一起形成一個二氧戊環(huán);
其中n是0、1、2或3、茚滿基、苯并呋喃基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基、四氫萘基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基或喹啉基;R5是低級烷基、苯基、R14-苯基、芐基或R14-芐基;R6OH、低級烷基、苯基、芐基、R14-苯基或R14-芐基;R7是低級烷基、低級烷氧基、OH、鹵素、-NR10R11、-NHC(O)OR5、-NHC(O)R5、NO2、-CN、-N3、-SH、-S(O)0-2-(低級烷基)、-COOR9、-CONR10R11、-COR12、苯氧基、芐氧基、-OCF3或叔丁基二甲基硅烷氧基，n是2或3，每個R7基可以相同或不同;R8是H、低級烷基、苯基取代低級烷基或-C(O)R9;R9是H、低級烷基、苯基或苯基取代低級烷基;R10和R11是分別從H、低級烷基中選擇;R12是H、OH、烷氧基、苯氧基、芐氧基、
、低級烷基、苯基或R14-苯基;R13是-O-、-CH2-、-NH-或-N(低級烷基)-;及R14是1-3個基團(tuán)，分別選自低級烷基、低級烷氧基、-COOH、NO2、-NR10R11、OH或鹵素;或者是一種其藥物可接受的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其中該-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2所定義，其中R是H;D是B′-(CH2)q-、B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-、B′-(C2-C6亞烷基)-或B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中B′、Z、V、q、e、r、f和g如權(quán)利要求2所定義;R4是苯基、R7-取代苯基或茚滿基，R7是低級烷基、低級烷氧基、鹵素、-OCF3、低級烷硫基、-NR10R11、-CN、OH或-COR12，其中R10、R11和R12如權(quán)利要求2所定義;及A 是-(CH2)o-X-B，其中X、B和P如權(quán)利要求2所定義。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中該β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2所述，其中D是B′-(CH2)q-，其中B′是苯基，q是3或4;B′-(CH2)e-Z-(CH2)r-，其中B′是對氟苯基可對甲氧基苯基，t是0，z是-O-，r是2;B′-(C2-C6亞烯基)，-B′是3-苯基-1-丙烯基;或B′-(CH2)f-V-(CH2)g-，其中B′是苯基，f是1，V是亞環(huán)丙基，g是0;A是-(CH2)p-X-B，其中p是0，X是一個鍵，B如權(quán)利要求2定義;R1、R2和R3從H、OH、-NO2、低級烷氧基、烷氧基烷氧基、低級烷基取代低級烷二?；㈤g位鹵代基、NR10R11(低級烷氧基)-、烯丙氧基、苯氧基、烷氧基羰基烷氧基和-C(O)R12，其中R10、R11和R12如權(quán)利要求2定義;R4是(R7)h-取代苯基、其中n是1，R7是低級烷基、低級烷氧基、鹵素、-OCF8、低級烷硫基、-NR10R11、-CN、OH或-COR12，其中R10R11和R12如權(quán)利要求2定義。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其中該β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑是(3R-4R)-1，4-雙-(4-甲氧基苯基)-3-(3-苯丙基)-2-吖丁啶酮。
6.一種膽固醇生物合成抑制劑的應(yīng)用，用它制造一種與β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑并用的藥劑以防治動脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇水平的藥劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述用途，其中該膽固醇生物合成抑制劑從HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成抑制劑及角鯊烯環(huán)氧化酶抑制劑中選擇。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述用途，其中該膽固醇生物合成抑制劑從洛瓦斯汀、普瓦斯汀、氟瓦斯汀、西瓦斯汀、CI-981、L-659、699、角鯊斯汀1和NB-598中選擇。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利所述的用途，其中該膽固醇生物合成抑制劑如權(quán)利要求7或8指定。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一權(quán)利所述的用途，其中該β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2-5中任一權(quán)利規(guī)定。
11.一種用于防治動脈粥樣硬化或用于降低血漿膽固醇水平的藥物組合物，由一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑、一種膽固醇生物合成抑制劑和一種藥物可用的載體組成。
12.一種根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其中該膽固醇生物合成抑制劑如權(quán)利要求7或8規(guī)定。
13.一種根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的藥物組合物，其中該β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2-5所定義。
14.一種制備根據(jù)權(quán)利要求11-13中任一權(quán)利所述的藥物組合物的方法，包括將一種膽固醇生物合成抑制劑與一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑與一種藥物可用的載體混合。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的一種方法，其特征為將權(quán)利要求7或8所定義的一種膽固醇生物合成抑制劑、權(quán)利要求2-5中任一權(quán)利要求所定義的一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑與一種藥物可用的載體混合。
16.一種在一個包裝中由分隔的容器組成的藥盒，用以防治動脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇水平的藥物成分包括在一個容器裝有一種有效量的膽固醇生物合成抑制劑于一種藥物可用的載體中，第二個容器裝有一種有效量的β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑于一種藥物可用的載體中。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的藥盒，其中一個容器中的有效量的膽固醇生物合成抑制劑如權(quán)利要求7或8所定義，存在于一種藥物可用的載體中，第二個容器中有效量的β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2-5中任一權(quán)利所定義，存在于一種藥物可用的載體中。
18.一種防治動脈粥樣硬化或降低血漿膽固醇水平的方法，其特征為給需要這種治療的哺乳動物同時或先后使用有效量的膽固醇生物合成抑制劑及β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑。
19.一種根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中膽固醇生物合成抑制劑如權(quán)利要求7或8所定義。
20.一種根據(jù)權(quán)利要求16或17所述的方法，其中β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑如權(quán)利要求2-5中任一權(quán)利所定義。
全文摘要
本發(fā)明公開了降低血漿膽固醇水平和防治動脈粥樣硬化的方法，包括并用有效量的一種膽固醇生物合成抑制劑和一種β-內(nèi)酰胺膽固醇吸收抑制劑，本發(fā)明還公開了以上方法中有用的藥物組合物及藥盒。
文檔編號A61K45/06GK1095591SQ9311266
公開日1994年11月30日 申請日期1993年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月23日
發(fā)明者H·R·戴維斯 申請人:先靈公司