本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物及包含該藥物組合物的藥物制劑和應用。

背景技術(shù)：

1、骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，oa)屬于中醫(yī)“痹證”范疇，是一種因風、寒、濕邪等因素引起的以關(guān)節(jié)疼痛、腫脹和功能障礙為主要表現(xiàn)的慢性疾病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計數(shù)據(jù)，全球約有3.5億oa的確診病例，其中近60％為老年人，隨著人口老齡化的加劇，其患病率呈逐年上升趨勢。中醫(yī)藥作為我國傳統(tǒng)醫(yī)學的重要組成部分，對于oa的治療具有獨特的優(yōu)勢，科學的方劑組成和制劑形式是中醫(yī)藥現(xiàn)代化應用與發(fā)展的關(guān)鍵內(nèi)容。

2、本技術(shù)發(fā)明人根據(jù)多年臨證經(jīng)驗和基礎研究，基于中醫(yī)藥理論和現(xiàn)代藥理學研究，擬定舒筋活絡復方組合物，前期研究表明該舒筋活絡復方組合物對調(diào)控oa滑膜成纖維細胞(fibroblast-like?synoviocytes，flss)的增殖、凋亡和遷移以及抑制炎癥因子的釋放均有顯著作用(參見中國專利文獻cn111920849a)。

3、川芎是舒筋活絡方的君藥，具有活血祛瘀、行氣止痛的作用，臨床除用于心血管疾病和婦科疾病的治療外，在關(guān)節(jié)疾病的治療中也應用甚廣(參見文獻管詠梅,蔣成,臧振中,等.川芎揮發(fā)油化學成分、藥理作用及臨床應用研究進展[j].中成藥,2024,46(03):873-880.梁旗,張來賓,呂潔麗.川芎的化學成分和藥理作用研究進展[j].新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報,2024,41(03):275-285.)。川芎嗪(tmp)是川芎的主要有效成分，常被選用于含川芎的復方制劑的主要質(zhì)控標準(參見文獻王偉.高效液相色譜法測定復方川芎膠囊中川芎嗪含量的方法分析[j].臨床合理用藥雜志,2012,5(23):123.)?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)川芎嗪具有鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)和免疫調(diào)節(jié)等作用，能夠抑制il-1β、tnf-α等多種炎性因子的釋放，對先天免疫中tlr4/myd88/nf-κb炎癥途徑有抑制作用(參見文獻趙君利,程菊,陳建軍,等.川芎嗪類衍生物藥理活性的研究進展[j].華西藥學雜志,2023,38(03):340-344.唐艷,張莉,劉海紅.川芎嗪抑制tlr4/myd88/nf-κb信號通路減輕子宮內(nèi)膜異位癥大鼠炎癥反應[j].免疫學雜志,2023,39(06):469-477.)，但tmp具有擴張血管、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)、增強免疫等作用。課題組前期研究亦發(fā)現(xiàn)川芎嗪能明顯降低骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液中no、前列腺素e2水平，對減輕骨性關(guān)節(jié)炎的炎癥有一定作用(參見文獻謝平金，等.川芎嗪干預早期膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨ⅱ型膠原纖維α1基因與血管內(nèi)皮生長因子mrna及mir20b的表達[j].中國組織工程研究,2018,22(12):1846-1851.)，為了提高川芎嗪對骨關(guān)節(jié)炎的治療效果，改善oa患者的生活質(zhì)量，有必要開發(fā)一種新的治療oa的藥物組合物和藥物制劑。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、因此，本發(fā)明的目的在于提高川芎嗪對骨關(guān)節(jié)炎的治療效果，從而提供一種藥物組合物及包含該藥物組合物的藥物制劑和應用。

2、為此，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，包括川芎嗪納米顆粒和舒筋活絡復方組合物，所述川芎嗪納米顆粒包括載體和負載于載體內(nèi)的川芎嗪，所述舒筋活絡復方組合物包括如下重量份的原料藥：川芎20-40份、青風藤20-40份、羌活10-30份、白芷10-35份、蘇木5-25份、艾葉10-30份、當歸5-20份、紅花5-20份、乳香5-20份、沒藥5-20份、細辛5-20份、川斷5-25份、骨碎補5-25份、伸筋草5-25份、透骨草5-25份、牛膝5-25份。

3、進一步的，在所述藥物組合物中，川芎嗪納米顆粒提供的川芎嗪的質(zhì)量與舒筋活絡復方組合物提供的川芎嗪的質(zhì)量之比為1:0.1～50。

4、進一步的，所述舒筋活絡復方組合物中川芎嗪的含量為0.1-10μg/mg；和/或，所述川芎嗪納米顆粒中川芎嗪的含量為25-500μg/mg；和/或，藥物組合物中川芎嗪的含量為500-1500μg/ml。

5、進一步的，所述載體包括外泌體、脂質(zhì)體或聚合載體材料；

6、優(yōu)選的，所述脂質(zhì)體的制備原料包括磷脂和膽固醇；更優(yōu)選的，所述磷脂包括卵磷脂、1,2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(dspc)、1,2-二月桂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dlpe)、1,2-二油?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(dopc)、1,2-二油?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dope)、1,2-二油?；?3-三甲基銨-丙烷(dotap)、1,2-二月桂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dlpe)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-n-[氨基(聚乙二醇)](dspe-peg)、1,2-二棕櫚?；?rac-甘油甲氧基聚乙二醇(dpg-peg)、1,2-二硬脂?；?rac-甘油基-3-甲基聚氧乙烯(dsg-peg)、1,2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油基-3-甲基聚氧乙烯(dmg-peg)中的一種或者多種。

7、進一步的，聚合載體材料包括聚乳酸(pla)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(plga)、殼聚糖、聚己內(nèi)酯(pcl)、聚乙二醇(peg)修飾材料、海藻酸鈉、明膠、聚甲基丙烯酸甲酯、硅膠納米微球中的一種或者多種。其中聚乙二醇修飾材料包括peg-pla、peg-pcl、peg-plga等材料。

8、優(yōu)選的，所述外泌體為所述外泌體的來源為外周血、尿液、唾液、腦脊液、間充質(zhì)干細胞或牛奶。

9、本發(fā)明還提供了上述任一所述的藥物組合物的制備方法，將含川芎嗪納米顆粒的液體與含舒筋活絡復方組合物的液體混合后制得。

10、可選的，所述含川芎嗪納米顆粒的液體中川芎嗪的濃度為500-3000μg/ml；

11、可選的，所述含舒筋活絡復方組合物的液體中川芎嗪的濃度為100-2000μg/ml；

12、可選的，含川芎嗪納米顆粒的液體與含舒筋活絡復方組合物的液體的體積比為1:20～20:1。

13、進一步的，所述舒筋活絡復方組合物的制備方法包括按照選定的重量份數(shù)稱取川芎、青風藤、羌活、白芷、蘇木、艾葉、當歸、紅花、乳香、沒藥、細辛、川斷、骨碎補、伸筋草、透骨草和牛膝，混合后按常規(guī)提取方法提取或者分別按常規(guī)提取方法提取后混合，即得；

14、可選的，所述常規(guī)提取方法包括浸漬提取、煎煮提取、回流提取、滲漉提取、超聲提取和水蒸氣蒸餾中的一種或幾種；

15、可選的，在所述常規(guī)提取方法提取之后還包括對得到的提取物進行精制純化處理的步驟；所述精制純化處理包括水提醇沉、萃取、硅膠色譜柱分離和大孔樹脂柱分離中的一種或幾種。

16、進一步的，所述舒筋活絡復方組合物的制備方法包括如下步驟：

17、s1、水提步驟：取各原料藥經(jīng)水提取1-5次后，濃縮，得到水提液，其中，每次水提取使用水的質(zhì)量為原料藥質(zhì)量的8倍量以上；每次水提的時間為大于等于1.5小時；水提溫度為80-100℃；

18、s2、醇沉步驟：將水提取液與70-90％的醇溶液混合，經(jīng)醇沉，收集醇提液，其中，醇溶液的體積為濃縮后所得水提液體積的5倍量以上；所述醇沉時間為大于等于48小時。

19、優(yōu)選的，醇溶液為乙醇溶液、甲醇溶液中的一種或者多種。

20、優(yōu)選的，所述水提步驟中，水提取次數(shù)為1.5-2.5次，每次水提使用水的質(zhì)量為原料藥質(zhì)量的10-12倍量，每次水提的時間為2-2.5小時，所述醇沉步驟中，使用80％-88％的乙醇溶液進行醇沉，乙醇溶液的體積為濃縮后水提液體積的5-6倍量，所述醇沉時間為48-60小時。

21、優(yōu)選的，s1步驟和s2步驟之后均包括濃縮步驟。醇溶液的體積為濃縮后水提液體積的5-6倍量。可選的，s1步驟經(jīng)濃縮得到相對密度為1.05-1.15的水提液，s2步驟經(jīng)濃縮得到相對密度為1.16-1.25的精制液。

22、進一步的，所述川芎嗪納米顆粒的制備方法包括，制備空白載體，以空白載體和含川芎嗪的溶液為原料按常規(guī)載藥方法進行載藥，即得；

23、可選的，空白載體和川芎嗪的質(zhì)量比為1～10：1；

24、可選的，含川芎嗪的溶液的濃度為0.01-50mg/ml；

25、可選的，含川芎嗪的溶液的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、甘油、石油醚、乙腈、氯仿、水、生理鹽水、pbs、dmso、peg、丙二醇、乙酸鈉緩沖液、二氯甲烷、正丁醇、異丙醇、四氫呋喃、乙醚、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基乙酰胺(dmac)、甲苯、環(huán)己烷中的一種或者多種；

26、可選的，所述常規(guī)載藥方法包括超聲法、電穿孔法、溶劑揮發(fā)法、雙乳化法、納米沉淀法、噴霧干燥法、冷凍干燥法、離子凝膠法、自組裝法、高壓均質(zhì)法、熱熔擠出法中的一種或者多種；

27、可選的，在所述常規(guī)載藥方法進行載藥之后還包括對得到的混合液進行純化處理的步驟；所述純化處理方法包括離心法、超濾法、透析法、凝膠過濾、層析法、透析聯(lián)合凍干法、沉淀-重懸法、磁性分離法、膜過濾法、洗滌-離心法中的一種或多種。

28、本發(fā)明還提供了一種藥物制劑，包括上述任一所述的藥物組合物或者上述任一所述的制備方法所制得的藥物組合物，以及任選地一種或多種藥學上可接受的載體；

29、可選的，所述藥物制劑為凝膠劑、乳霜劑、軟膏劑、貼膏劑、乳劑或者混懸劑；

30、可選的，所述藥學上可接受的載體選自藥學上可接受的溶劑、水溶性基質(zhì)、油溶性基質(zhì)、促滲劑、保濕劑、增溶劑、抗氧劑、防腐劑、ph調(diào)節(jié)劑、乳化劑、增稠劑中的至少一種或者多種。

31、例如但不局限于硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、石蠟、液體石蠟、白凡士林、羊毛脂、十六醇、十八醇、司盤系列、蜂蠟、動植物油脂、甘油、山梨醇、聚乙二醇、吐溫系列、十二烷基硫酸鈉、二甲基亞砜、三乙醇胺、羧甲基纖維素鈉、透明質(zhì)酸鈉、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯比咯烷酮、聚乙烯酸脂、卡波姆、黃原膠、羧甲基纖維素中的一種或者多種。

32、上述任一所述的藥物組合物或者上述任一所述的制備方法所制得的藥物組合物或者所述的藥物制劑在制備預防或治療骨關(guān)節(jié)疾病的藥物中的應用。

33、進一步的，所述骨關(guān)節(jié)疾病為骨性關(guān)節(jié)炎、外傷性關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、痛風性關(guān)節(jié)炎、滑膜炎、滑囊炎、頸椎病、腰椎病、肩周炎和骨質(zhì)增生中的至少一種。

34、本發(fā)明技術(shù)方案，具有如下優(yōu)點：

35、1、本發(fā)明提供的一種藥物組合物，包括川芎嗪納米顆粒和舒筋活絡復方組合物，所述川芎嗪納米顆粒包括載體和負載于載體內(nèi)的川芎嗪，所述舒筋活絡復方組合物包括如下重量份的原料藥：川芎20-40份、青風藤20-40份、羌活10-30份、白芷10-35份、蘇木5-25份、艾葉10-30份、當歸5-20份、紅花5-20份、乳香5-20份、沒藥5-20份、細辛5-20份、川斷5-25份、骨碎補5-25份、伸筋草5-25份、透骨草5-25份、牛膝5-25份。通過川芎嗪納米顆粒和舒筋活絡復方組合物聯(lián)合使用，發(fā)揮協(xié)同增效作用，顯著提高了對oa的治療作用。此外，兩者聯(lián)合使用在減輕滑膜炎癥和修復軟骨細胞凋亡以及減輕疼痛相關(guān)生物指標方面均表現(xiàn)出顯著療效，這對于改善oa患者的生活質(zhì)量具有重要意義。

36、2、本發(fā)明提供的一種藥物組合物，所述載體包括外泌體、脂質(zhì)體或聚合載體材料，優(yōu)選外泌體，外泌體是一種具有良好生物相容性和靶向性的納米級載體，能夠攜帶多種生物活性分子，通過細胞膜與靶細胞融合，將其中包封的中藥單體直接精準的遞送至病變部位，可以有效保護藥物成分免受體內(nèi)環(huán)境的降解，提高藥物的穩(wěn)定性，還減少了對健康組織的副作用，更優(yōu)選是采用間充質(zhì)干細胞外泌體作為載體時，tmp包封入間充質(zhì)干細胞外泌體載體，形成納米級藥物顆粒，能夠更好地提高對oa的治療作用。此外，采用間充質(zhì)干細胞外泌體作為載體，還能夠提高川芎嗪納米顆粒的載藥量和包封率。

37、3、本發(fā)明提供的藥物制劑，后續(xù)可以根據(jù)實際應用將本發(fā)明的中藥組合物制備成各種劑型，可以為外用，例如可以但不局限于凝膠劑、乳霜劑、軟膏劑、貼膏劑、乳劑或者混懸劑等各種劑型。應用于本研究的藥物制劑可用作推拿介質(zhì)，將規(guī)范的推拿手法與現(xiàn)代技術(shù)相結(jié)合，形成了一套高效的藥物遞送體系。在推拿過程中，充分發(fā)揮機械刺激和藥物遞送的協(xié)同作用，使藥物能夠更有效地滲透到患處，提升局部藥物濃度，增強治療效果，為推拿療法的藥物遞送提供了一種創(chuàng)新的解決方案。為了全面評估這種“傳統(tǒng)與現(xiàn)代”結(jié)合的標準化治療方案對oa的治療作用，考慮到關(guān)節(jié)軟骨和滑膜在oa病理進程中的重要角色，本技術(shù)發(fā)明人通過對各組治療效果的比較和分子機制的進一步剖析，完善“舒筋活絡”推拿法的應用。