本發(fā)明涉及納米藥物，具體涉及一種水溶性抗氧化納米片及其制備方法和在急性肝損傷中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、急性肝損傷(ali)是指在患者無慢性肝炎基礎(chǔ)上，由各種原因引起的肝細(xì)胞損傷。藥物誘導(dǎo)、缺血-再灌注損傷、自身免疫或病毒感染是急性肝損傷的主要原因。ali具有很高的發(fā)病率，嚴(yán)重影響著人民的健康，其快速且強(qiáng)大的破壞性常常危及患者生命。其中，超過50％的ali病例是由廣泛使用的解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥對乙酰氨基酚(apap)引起的，且發(fā)病率逐年增加。n-乙酰半胱氨酸(nac)是目前臨床上唯一批準(zhǔn)用于治療對乙酰氨基酚所誘導(dǎo)ali的藥物。然而，由于其靶向性差、生物利用度低、治療窗口狹窄以及副作用多，臨床療效并不理想。因此，迫切需要更有效的策略來預(yù)防和治療ali。

2、急性肝損傷的主要病理表現(xiàn)是肝功能及結(jié)構(gòu)的嚴(yán)重?fù)p害，源于肝細(xì)胞活性氧(ros)的猛烈爆發(fā)。在急性肝損傷過程中，線粒體是ros的主要來源，過量的ros損傷多種生物大分子，并導(dǎo)致線粒體功能和結(jié)構(gòu)的破壞，引起大量肝細(xì)胞死亡以及隨之而來的肝功能急劇下降。因此，能夠發(fā)揮線粒體保護(hù)作用的抗氧化劑在急性肝損傷的治療中極具應(yīng)用前景。由于肝臟結(jié)構(gòu)的特殊性，適宜尺寸的納米藥物能夠在不被腎臟直接清除的同時通過肝竇的開口(50-200nm)到達(dá)病變部位，避免了大量蓄積對健康組織帶來的損傷，也保證了藥效的良好發(fā)揮。納米藥物的安全性和靶向性是評價其能否應(yīng)用于臨床的重要指標(biāo)。然而，目前開發(fā)出來用于治療ali的大多數(shù)納米藥物由于其有限的生物利用度及潛在毒性極大地限制了在臨床上的轉(zhuǎn)化。

3、二維過渡金屬二硫化物(transition?metal?dichalcogenides)，由于其優(yōu)異的生物相容性和理化性質(zhì)，在近十年來被廣泛應(yīng)用于臨床植入、人工關(guān)節(jié)、支架和血管夾等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。特別是鉭元素、鎢元素和鉬元素具有多種的價態(tài)，因此氧化還原活性很強(qiáng)，使得硫化鉭、硫化鉬和硫化鎢等材料擁有強(qiáng)大的ros清除潛力，在ali的治療中具有很大的前景。但是二維過渡金屬二硫化物受限于粒徑或水溶性而無法靶向受損肝組織。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明要解決現(xiàn)有技術(shù)中二維過渡金屬二硫化物受限于粒徑或水溶性而無法靶向受損肝組織的技術(shù)問題，提供一種水溶性抗氧化納米片及其制備方法和在急性肝損傷中的應(yīng)用。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：

3、一種水溶性抗氧化納米片，其是采用二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)自組裝獲得的納米片。

4、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，所述二維過渡金屬二硫化物為硫化鉭、硫化鉬或硫化鎢；所述蛋白質(zhì)為血清白蛋白。

5、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，所述水溶性抗氧化納米片粒徑在50～200nm。

6、一種水溶性抗氧化納米片的制備方法，包括以下步驟：

7、將二維過渡金屬二硫化物粉末進(jìn)行剝離得到單層二維過渡金屬二硫化物，采用獲得的單層二維過渡金屬二硫化物與蛋白質(zhì)溶液在氬氣(ar)保護(hù)下室溫避光攪拌，進(jìn)行自組裝，得到所述水溶性抗氧化納米片。

8、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，所述剝離為液相剝離1周，所述二維過渡金屬二硫化物粉末在進(jìn)行剝離前需要進(jìn)行研磨，研磨時長為2～3h。

9、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，所述蛋白質(zhì)溶液濃度為10mg/ml。

10、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，所述單層二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)溶液體積比為1：10。

11、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，攪拌自組裝時長為2～3h。

12、在上述技術(shù)方案中，優(yōu)選的是，

13、將二維過渡金屬二硫化物粉末進(jìn)行剝離后，于3000轉(zhuǎn)/分鐘、10分鐘的條件下離心后取上清；

14、得到所述水溶性抗氧化納米片進(jìn)行離心、蛋白質(zhì)溶液洗滌除去未反應(yīng)雜質(zhì)，離心參數(shù)為：13000轉(zhuǎn)/分鐘、10分鐘，洗滌次數(shù)為3次。

15、一種水溶性抗氧化納米片在制備治療急性肝損傷藥物中的應(yīng)用。

16、本發(fā)明的有益效果是：

17、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，是采用二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)自組裝制備得到的納米片，具有適宜的尺寸(圖1)和超強(qiáng)的抗氧化活性(圖2)。

18、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，能通過抑制氧化應(yīng)激，有效治療對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的急性肝損傷(圖3)。

19、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，能有效靶向受損肝組織，發(fā)揮治療作用(圖4)。

20、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，能降低線粒體ros(mtros)水平，恢復(fù)線粒體膜電位，減輕線粒體損傷(圖5)。

21、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，能顯著降低急性肝損傷過程中肝臟的炎癥因子水平，減少巨噬細(xì)胞的浸潤，緩解肝臟的過度炎癥反應(yīng)(圖6)。

22、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片，具有良好的生活相容性，在遠(yuǎn)超本發(fā)明給藥濃度下對人肝癌細(xì)胞(hepg2細(xì)胞)無毒(圖7)，且長期超高劑量給藥對正常小鼠的心、肝、脾、肺、腎均無影響(圖8)。

23、本發(fā)明提供的一種水溶性抗氧化納米片的制備方法，是采用簡單、綠色的合成方法、制備了具有高抗氧化活性的水溶性納米片，所采用的原料價格低廉易得。

技術(shù)特征：

1.一種水溶性抗氧化納米片，其特征在于，其是采用二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)自組裝獲得的納米片。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性抗氧化納米片，其特征在于，所述二維過渡金屬二硫化物為硫化鉭、硫化鉬或硫化鎢；所述蛋白質(zhì)為血清白蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性抗氧化納米片，其特征在于，所述水溶性抗氧化納米片粒徑在50～200nm。

4.一種權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，所述剝離為液相剝離1周，所述二維過渡金屬二硫化物粉末在進(jìn)行剝離前需要進(jìn)行研磨，研磨時長為2～3h。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，所述蛋白質(zhì)溶液濃度為10mg/ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，所述單層二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)溶液體積比為1：10。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，攪拌自組裝時長為2～3h。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其特征在于，

10.一種權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的水溶性抗氧化納米片在制備治療急性肝損傷藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種水溶性抗氧化納米片及其制備方法和在急性肝損傷中的應(yīng)用，涉及納米藥物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的水溶性抗氧化納米片，是采用二維過渡金屬二硫化物和蛋白質(zhì)自組裝獲得的，具有適宜的尺寸、良好的生活相容性和超強(qiáng)的抗氧化活性。本發(fā)明的水溶性抗氧化納米片，能通過抑制氧化應(yīng)激，有效治療對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的急性肝損傷；能有效靶向受損肝組織，發(fā)揮治療作用；能降低線粒體ROS水平，恢復(fù)線粒體膜電位，減輕線粒體損傷；能顯著降低急性肝損傷過程中肝臟的炎癥因子水平，減少巨噬細(xì)胞的浸潤，緩解肝臟的過度炎癥反應(yīng)。本發(fā)明的水溶性抗氧化納米片的制備方法，其是簡單、綠色的合成方法，原料價格低廉易得。

技術(shù)研發(fā)人員：艾可龍,黃瓊,齊維敏,趙天嬌,劉敏
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中南大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9