本發(fā)明屬于新型納米材料制備，具體涉及一種靶向肝臟且改善脂肪肝的自組裝納米材料及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

2、納米材料，特別是金屬有機(jī)框架(mof)材料，近年來在靶向藥物傳遞系統(tǒng)中受到了廣泛關(guān)注。這些材料的優(yōu)點(diǎn)包括較大的比表面積、可調(diào)的孔結(jié)構(gòu)以及良好的生物相容性，使其成為理想的藥物載體。mof材料目前的研究進(jìn)展主要集中在靶向功能性、控釋性能及成像與治療方面。通過對mof材料的表面進(jìn)行修飾，可以引入特定的靶向配體(如抗體、肽鏈等)，使得這些材料能夠識別并結(jié)合到特定的細(xì)胞或組織上，以實(shí)現(xiàn)其靶向功能性。另外，mof材料可以設(shè)計(jì)為響應(yīng)特定的生理環(huán)境(如ph值、溫度、酶活性等)，實(shí)現(xiàn)藥物的控制釋放，從而提高治療效果并降低副作用，發(fā)揮其控釋性能。還有一些mof材料具有熒光成像的能力，可以用于實(shí)時(shí)監(jiān)測藥物在體內(nèi)的分布和釋放情況。

3、然而，雖然mof材料在靶向器官方面已經(jīng)顯示出一定的潛力，但如何提高靶向效率，減少對健康細(xì)胞的影響仍然是當(dāng)今的研究熱點(diǎn)，仍需大量研究以克服現(xiàn)有的挑戰(zhàn)并實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用。

4、肝移植(lt)為終末期肝病患者提供了唯一有效的治療方案。目前供肝來源短缺很大程度上限制了肝移植的發(fā)展。雖然活體肝移植擴(kuò)大了肝臟來源，但是尸體供肝來源仍然占據(jù)供肝的絕大多數(shù)。由于供體短缺，肝臟捐贈標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)擴(kuò)大，包括脂肪肝和老年肝。有學(xué)者提出邊緣供者或擴(kuò)大標(biāo)準(zhǔn)供者(extended?criteria?donor，ecd)的概念。以往嚴(yán)格的供者入選標(biāo)準(zhǔn)雖然能夠保障受者安全，但也排除了很多實(shí)際上可以使用的供肝。擴(kuò)大ecd移植的使用可以增加供體供應(yīng)并緩解需求缺口。而ecd供肝使用不當(dāng)可能會增加移植物功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)，如術(shù)后移植肝原發(fā)性無功能(primary?nonfunction，pnf)、肝移植術(shù)后早期肝功能不全(early?allograft?dysfunctional，ead)。因此，合理使用ecd供肝是目前研究焦點(diǎn)之一。ecd供肝的主要危險(xiǎn)因素包括脂肪肝、攜帶乙型肝炎或丙型肝炎、高齡供者、腦死亡供者呼吸循環(huán)不穩(wěn)定、惡性腫瘤供者、冷缺血時(shí)間延長的供體肝臟等。而目前隨著全球脂肪肝發(fā)病率的增加，接受脂肪肝作為非標(biāo)準(zhǔn)供體器官的可能性也大幅增加，供肝脂肪變性(大泡性脂肪變性＞30％)在尸體供肝和活體供肝中分別占30％和20％。

5、在評估ecd脂肪供肝時(shí)需要考慮脂肪變性程度，這可能會影響移植結(jié)果。傳統(tǒng)上，根據(jù)脂肪細(xì)胞浸潤的百分比進(jìn)行分級，肝臟脂肪變性可分為輕度(大泡性脂肪變性＜30％)、中度(大泡性脂肪變性30％～60％)和重度(大泡性脂肪變性＞60％)。脂肪變性會增加供體肝臟的缺血再灌注損傷(iri)，特別是對于存在中度至重度脂肪變性的捐贈肝臟，這些肝臟對缺血-再灌注損傷過程非常敏感，這極大地影響了受者的預(yù)后。輕度脂肪變性供肝目前普遍認(rèn)為與肝移植術(shù)后預(yù)后無明顯不良影響；中度脂肪變性供肝與移植器官的存活和ead有關(guān)；重度脂肪變性供肝會明顯增加pnf發(fā)生率。大多數(shù)中心使用輕度脂肪變性供肝，并認(rèn)為重度脂肪變性是絕對的使用禁忌癥，而對于脂肪變性程度為中度的供肝最佳使用存在爭議。減輕肝臟的脂肪變性程度則有益于減輕缺血再灌注損傷，從而改善受者預(yù)后，并且對于擴(kuò)大供體池、減少合適器官的廢棄以及降低等待名單死亡率也至關(guān)重要。

6、非酒精性脂肪性肝病(nafld)發(fā)病和進(jìn)展的機(jī)制尚未完全闡明，目前已證實(shí)氧化應(yīng)激損傷、膽固醇代謝、胰島素抵抗、甲狀腺功能減退等均與nafld的發(fā)病與進(jìn)展有關(guān)。另外2022年國際知名學(xué)者發(fā)現(xiàn)了一種肝細(xì)胞膜表面的單跨膜蛋白——asgr1，該蛋白僅表達(dá)在肝細(xì)胞膜表面，且對下游lxrα具有抑制作用，后者已證實(shí)具有明確地促進(jìn)胞內(nèi)膽固醇排出的作用。抑制asgr1有利于促進(jìn)膽固醇排泄降低脂質(zhì)水平從而改善脂肪肝。甲狀腺激素在脂肪肝的發(fā)展中扮演著重要角色，其對脂肪肝的作用復(fù)雜，涉及多個(gè)代謝途徑。甲狀腺激素可以增強(qiáng)脂肪酸的氧化，降低肝臟內(nèi)脂肪的積累，它還可以改善胰島素敏感性，減少肝臟對葡萄糖的過度生產(chǎn)。甲狀腺激素還具有一定的抗炎特性，這有助于減輕與脂肪肝相關(guān)的肝臟炎癥。

7、雖然目前有多種靶向肝臟的納米材料，如專利cn114569743a公開了一種肝特異性的基因編輯納米藥物。但是以mof為載體的靶向肝臟的納米材料鮮有報(bào)道，且將mof、腎上腺激素和asgr1復(fù)合靶向肝臟、改善脂肪肝的納米材料更未有報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種靶向肝臟且改善脂肪肝的自組裝納米材料及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明提供的自組裝納米材料能夠靶向肝臟、清除活性氧、減輕氧化應(yīng)激，從而減輕肝臟脂肪變性的程度，具有靶向性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)清晰、比表面積和孔隙率高、易于化學(xué)功能化等特點(diǎn)。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

3、本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供一種靶向肝臟且改善脂肪肝的自組裝納米材料，包括：金屬有機(jī)框架(mof)，聚集在金屬有機(jī)框架內(nèi)的甲狀腺激素以及修飾在金屬有機(jī)框架表面的asgr1抗體。

4、本發(fā)明以mof為載體，在納米載體表面修飾了anti-asgr1，使得自組裝納米材料可以精準(zhǔn)靶向至肝細(xì)胞膜表面，抑制asgr1從而促進(jìn)膽固醇排泄降低脂質(zhì)水平。另外，mof材料內(nèi)聚集了甲狀腺激素，自組裝納米材料在到達(dá)肝臟后甲狀腺激素緩慢精準(zhǔn)釋放，通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、激活甲狀腺激素受體β以及促進(jìn)自噬等機(jī)制，有效減輕肝臟脂肪變性，能夠高效發(fā)揮其作用且避免了過量甲狀腺激素的副作用。同時(shí)，mof本身具有清除活性氧，減輕肝臟細(xì)胞損傷的作用。綜上，本發(fā)明通過mof、甲狀腺激素以及asgr1抗體形成的自組裝納米材料，具有精準(zhǔn)靶向、緩釋、大比表面積、結(jié)構(gòu)清晰、孔隙率高、易于化學(xué)功能化等優(yōu)點(diǎn)，且便于保存。

5、本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供一種上述的靶向肝臟且改善脂肪肝的自組裝納米材料的制備方法，包括：

6、將金屬有機(jī)框架和甲狀腺激素溶于水中，攪拌反應(yīng)，得到前體材料；

7、將所述前體材料和asgr1抗體溶于水中，0-5℃下攪拌反應(yīng)，得到靶向肝臟且改善脂肪肝的自組裝納米材料。

8、本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供一種上述的自組裝納米材料或上述的制備方法制備的自組裝納米材料在制備治療脂肪肝藥物中的應(yīng)用。

9、本發(fā)明的有益效果為：

10、本發(fā)明通過mof、甲狀腺激素以及asgr1抗體形成的自組裝納米材料，以mof為納米載體。mof材料具有良好的保存性，同時(shí)mof材料能有效清除細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間質(zhì)的活性氧(ros)，將其催化分解為水和氧氣，減少ros的濃度，減輕ros對肝臟細(xì)胞的損傷。mof納米載體內(nèi)聚集了甲狀腺激素，待自組裝納米材料靶向至肝臟后精準(zhǔn)釋放甲狀腺激素，高效發(fā)揮甲狀腺激素減輕脂肪肝程度的作用，且有效避免了甲狀腺激素對全身其他臟器的毒副作用。mof納米載體表面修飾了asgr1抗體，該抗體可將自組裝納米材料精準(zhǔn)靶向到肝細(xì)胞膜表面，且asgr1抗體能夠有效抑制肝細(xì)胞膜表面的asgr1。asgr1已被證實(shí)抑制下游的lxrα等多種通路，后者的通路具有促進(jìn)膽固醇排出細(xì)胞的作用。本發(fā)明的自組裝納米材料可以有效促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇的排出。

11、本發(fā)明提供的自組裝納米材料的合成過程簡單，用時(shí)少，原料廉價(jià)易得，成本低，具有普適性，易于規(guī)?；a(chǎn)。