本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及環(huán)狀rnacircddb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、骨骼肌是維持人體進(jìn)行自主運(yùn)動和保持姿勢的器官，能夠作為體內(nèi)最大的蛋白質(zhì)儲備庫。骨骼肌通過影響蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)的信號通路改變蛋白質(zhì)合成與降解的速率，不斷調(diào)整其質(zhì)量和功能以適應(yīng)生理和病理性刺激。然而，在一些病理性刺激下，骨骼肌中的蛋白降解速率大于蛋白合成速率，進(jìn)而會導(dǎo)致肌肉萎縮的發(fā)生。肌肉萎縮的主要病理特征為橫紋肌營養(yǎng)失調(diào)，肌纖維橫截面積顯著減小或消失。另外，肌肉萎縮會導(dǎo)致患者肌肉力量下降或殘疾，嚴(yán)重時會導(dǎo)致死亡的發(fā)生，這對于患者的預(yù)后十分不利。同時，包括慢性全身性疾病、心力衰竭、廢用、衰老、去神經(jīng)支配和肌肉內(nèi)在疾病等多種病因通常伴隨著肌肉萎縮的發(fā)生。因此提高肌肉的力量以及維持肌纖維橫截面積的大小是預(yù)防肌肉萎縮發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。盡管在全球范圍內(nèi)肌肉萎縮對于患者的生活質(zhì)量產(chǎn)生相當(dāng)大的后果，但除了康復(fù)和營養(yǎng)療法之外，幾乎沒有有效的治療藥物。因此，尋找肌肉萎縮治療的有效靶點(diǎn)對于治療肌肉萎縮有著重要的醫(yī)學(xué)價值。

2、真核生物中，基因組轉(zhuǎn)錄出來的rna大約有2％能夠翻譯蛋白質(zhì)，超過70％是非編碼rna。顧名思義，非編碼rna是不翻譯蛋白質(zhì)的rna，其中主要包括微小rna、長鏈非編碼rna和環(huán)狀rna。非編碼rna通過在轉(zhuǎn)錄、rna加工、翻譯水平以及表觀遺傳水平來調(diào)節(jié)基因表達(dá)。因此，非編碼rna參與多種生物學(xué)功能的調(diào)節(jié)。其能夠通過與蛋白復(fù)合體相互作用，修飾染色質(zhì)，進(jìn)而調(diào)節(jié)生物體的生長發(fā)育，也能夠參與調(diào)控氧化應(yīng)激介導(dǎo)的基因以及血管平滑肌細(xì)胞的增殖與遷移。另外，在癌癥、糖尿病、線粒體損傷和慢性腎病等疾病患者中，非編碼rna均被發(fā)現(xiàn)表達(dá)異常。因此，非編碼rna在人體多種疾病中具有重要的作用。

3、環(huán)狀rna是一類不含有5'帽子結(jié)構(gòu)和3'末端poly(a)尾巴的閉合環(huán)狀非編碼rna，因此具有不受rna外切酶影響和不易降解的特點(diǎn)。它們由反向剪接事件產(chǎn)生。近年來，在包括真菌、原生生物、植物、蠕蟲、魚類、昆蟲和哺乳動物的真核生物中，利用高通量rna測序(rna-seq)和環(huán)狀rna特異性生物信息學(xué)算法已鑒定出數(shù)千個環(huán)狀rna，并發(fā)現(xiàn)它們具有組織特異的表達(dá)模式。在糖尿病、心血管疾病、慢性炎癥性疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究中已經(jīng)證明環(huán)狀rna具有重要的調(diào)節(jié)作用。

4、然而，目前環(huán)狀rna對于在骨骼肌領(lǐng)域的功能研究主要集中在骨骼肌增殖和分化，在骨骼肌肌肉萎縮中并未見相關(guān)報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的環(huán)狀rna?circddb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用，所述環(huán)狀rnacircddb1可以作為防治肌肉萎縮的靶點(diǎn)，通過抑制所述環(huán)狀rnacircddb1在機(jī)體中的表達(dá)，可以有效改善機(jī)體的肌肉萎縮。

2、本發(fā)明提供了環(huán)狀rnacircddb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。

3、本發(fā)明還提供了抑制環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的試劑在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。

4、優(yōu)選的，所述試劑包括敲除或敲低所述環(huán)狀rnacircddb1的生物材料。

5、優(yōu)選的，所述試劑包括干擾所述環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的核酸、核酸構(gòu)建體和病毒顆粒中的一種或多種。

6、優(yōu)選的，所述核酸包括shrna或sirna，所述shrna的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

7、所述sirna包括si-circddb1-1或si-circddb1-2；所述si-circddb1-1由seq?idno.5所示的正義鏈和seq?id?no.6所示的反義鏈組成；所述si-circddb1-2由seq?id?no.7所示的正義鏈和seq?id?no.8所示的反義鏈組成。

8、優(yōu)選的，所述核酸構(gòu)建體包括干擾病毒載體，所述干擾病毒載體中含有seq?idno.1所示的shrna。

9、優(yōu)選的，所述干擾病毒載體中的初始載體包括腺病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體或慢病毒載體。

10、優(yōu)選的，所述干擾病毒載體包括penn-sh-circddb1，所述penn-sh-circddb1的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。

11、本發(fā)明還提供了一種防治肌肉萎縮的藥物，所述藥物包括抑制環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的試劑和藥學(xué)上可接受的輔料。

12、優(yōu)選的，所述試劑包括干擾所述環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的核酸、核酸構(gòu)建體和病毒顆粒中的一種或多種；

13、所述核酸包括shrna或sirna，所述shrna的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

14、所述sirna包括si-circddb1-1或si-circddb1-2；所述si-circddb1-1由seq?idno.5所示的正義鏈和seq?id?no.6所示的反義鏈組成；所述si-circddb1-2由seq?id?no.7所示的正義鏈和seq?id?no.8所示的反義鏈組成；

15、所述核酸構(gòu)建體包括干擾病毒載體，所述干擾病毒載體中含有seq?id?no.1所示的shrna。

16、有益效果：

17、本發(fā)明提供了環(huán)狀rnacircddb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。具體的，本發(fā)明還提供了抑制環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的試劑在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述環(huán)狀rnacircddb1可以作為防治肌肉萎縮的靶點(diǎn)，通過抑制所述環(huán)狀rnacircddb1在機(jī)體中的表達(dá)，可以有效改善機(jī)體肌肉萎縮的情況。通過試驗證明，所述環(huán)狀rnacircddb1的抑制在實(shí)驗動物水平上能夠改善血管緊張素ii、去神經(jīng)以及固定誘導(dǎo)的肌肉萎縮，改善血管緊張素ii注入小鼠的肌肉力量，提高多種因素誘導(dǎo)的肌肉萎縮模型小鼠的腓腸肌重量，增大多種因素誘導(dǎo)的肌肉萎縮模型小鼠的肌纖維橫截面積。

技術(shù)特征：

1.環(huán)狀rnacircddb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。

2.抑制環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的試劑在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑包括敲除或敲低所述環(huán)狀rnacircddb1的生物材料。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑包括干擾所述環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的核酸、核酸構(gòu)建體和病毒顆粒中的一種或多種。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核酸包括shrna或sirna，所述shrna的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核酸構(gòu)建體包括干擾病毒載體，所述干擾病毒載體中含有seq?id?no.1所示的shrna。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述干擾病毒載體中的初始載體包括腺病毒載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體或慢病毒載體。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述干擾病毒載體包括penn-sh-circddb1，所述penn-sh-circddb1的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。

9.一種防治肌肉萎縮的藥物，其特征在于，所述藥物包括抑制環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的試劑和藥學(xué)上可接受的輔料。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物，其特征在于，所述試劑包括干擾所述環(huán)狀rnacircddb1表達(dá)的核酸、核酸構(gòu)建體和病毒顆粒中的一種或多種；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及環(huán)狀RNAcircDdb1作為靶點(diǎn)在制備防治肌肉萎縮的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述環(huán)狀RNAcircDdb1可以作為防治肌肉萎縮的靶點(diǎn)，通過抑制所述環(huán)狀RNAcircDdb1在機(jī)體中的表達(dá)，可以有效改善機(jī)體肌肉萎縮的情況。通過試驗證明，所述環(huán)狀RNA?circDdb1的抑制在能夠改善血管緊張素II、去神經(jīng)以及固定誘導(dǎo)的肌肉萎縮，改善血管緊張素II注入小鼠的肌肉力量，提高多種因素誘導(dǎo)的肌肉萎縮模型小鼠的腓腸肌重量，增大多種因素誘導(dǎo)的肌肉萎縮模型小鼠的肌纖維橫截面積。

技術(shù)研發(fā)人員：肖俊杰,李進(jìn),何濤,楊婷婷,王思琪,聶秋蒙
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30