本技術大體上有關包含基因療法載體(vector)抗原的耐受性免疫介導粒子，其與基因療法方案組合使用，以便降低對基因療法載體抗原和/或由所述載體表達的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的免疫原性。

背景技術：

1、基因遞送載體(例如逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒、腺病毒和腺相關病毒(aav)載體)設計和開發(fā)方面的進步使得基因療法成為多種疾病和病況的有吸引力的治療選擇，所述疾病和病況包括罕見和遺傳性基因病癥、自體免疫疾病、神經(jīng)退行性病況和癌癥?；虔煼ㄒ蕾囉诰幋a治療蛋白(如酶、細胞因子和抗體)的外源dna的載體介導的遞送。1-6基因療法的目標在于使得治療蛋白能夠持續(xù)組織特異性產(chǎn)生以獲得長期治療功效。

2、除了產(chǎn)生蛋白質(zhì)和酶以用于治療罕見和遺傳性基因病癥(例如血友病、龐培氏病(pompe?disease)、法布立病(fabry?disease)和黏多糖病)之外，基因療法載體還用于自體抗原和致耐受性細胞因子/趨化因子的組織特異性表達以用于治療自體免疫疾病、癌癥疫苗，以及產(chǎn)生抗腫瘤蛋白質(zhì)、細胞因子、趨化因子和抗體以用于治療癌癥3,4,7。此外，病毒載體(稱作溶瘤病毒)已經(jīng)工程改造以溶解腫瘤細胞且誘導抗腫瘤免疫反應從而用于治療癌癥8,9。

3、用于基因療法應用的正在使用中和當前處于開發(fā)中的基因療法載體通常為天然存在的逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒、腺病毒和aav的經(jīng)修飾和/或經(jīng)工程改造的版本10，文獻中還描述了若干合成載體11。為了實現(xiàn)持續(xù)的治療功效，必須定期再次施用病毒載體19,20。

4、基因療法載體以及自載體表達的治療蛋白的免疫原性對持續(xù)治療效益所需的周期性再次施用提出重大臨床挑戰(zhàn)，因為載體和載體產(chǎn)生的治療蛋白在施用之后均被快速清除。另外，可能得益于基因療法的相當大一部分患者對基因療法載體表現(xiàn)出預先存在的免疫性，使得其不適合進行治療12-14。無預先存在的中和抗體的患者還受載體和治療蛋白的免疫原性影響，因為初始載體施用會誘導對載體蛋白的免疫反應，所述免疫反應干擾持續(xù)治療效益所需的任何再次施用。

5、旨在預防病毒載體的免疫原性的當前策略依賴于同時施用具有顯著副作用(如感染風險增加和甚至死亡)的免疫抑制方案15。

技術實現(xiàn)思路

1、使用timp誘導對基因療法載體和由載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物耐受的抗原特異性t細胞，可潛在地克服與基因療法相關的免疫原性問題，使得能夠再次給藥且引起提高的治療功效。

2、本公開描述用于誘導對基因療法載體和由載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的抗原特異性耐受的組合物和方法。本文提供的組合物包含囊封抗原的帶負電荷載體粒子，其中所述抗原為一或多種基因療法載體抗原和/或其部分，或基因療法載體抗原或其部分的組合。在各種實施例中，抗原為由基因療法載體產(chǎn)生的治療蛋白和/或其部分或其一或多種抗原表位。在各種實施例中，載體(carrier)粒子包含聚合物且具有負ζ電位。在各種實施例中，聚合物為生物可降解聚合物。

3、在各種實施例中，粒子包含選自由以下組成的群組的聚合物：聚乙醇酸(pga)、聚乳酸(pla)、聚癸二酸(psa)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)、聚(乳酸-共-癸二酸)(plsa)、聚(乙醇酸-共-癸二酸)(pgsa)、聚丙烯硫醚、聚(己內(nèi)酯)、殼聚糖、多糖、或脂質(zhì)、聚苯乙烯、金剛石、脂質(zhì)體、peg、環(huán)葡聚糖、脂質(zhì)或金屬，如鐵(fe)、鋅(zn)、鎘(cd)、金或銀或其組合。

4、在各種實施例中，聚合物為共聚物。在各種實施例中，共聚物具有不同摩爾比的組成聚合物。在各種實施例中，摩爾比為25:75、30:70、35:65、40:60、45:55、50:50、55:45、60:40、65:35、70:30、75:25、80:20、81:19、82:18、83:17、84:16、85:15、86:14、87:13、88:12、89:11、90:10、91:9、92:8、93:7、94:6、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或100:0。

5、在各種實施例中，載體粒子包含聚(乳酸-共-乙醇酸)?(plga)。在各種實施例中，粒子包含約50:50、約80:20至約100:0聚乳酸:聚乙醇酸或約50:50、約80:20至約100:0聚乙醇酸:聚乳酸。在各種實施例中，粒子包含50:50聚乳酸:聚乙醇酸。在各種實施例中，粒子包含約25:75、30:70、35:65、40:60、45:55、50:50、55:45、60:40、65:35、70:30、75:25、80:20、81:19、82:18、83:17、84:16、85:15、86:14、87:13、88:12、89:11、90:10、91:9、92:8、93:7、94:6、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或100:0聚乳酸:聚乙醇酸，包括全部數(shù)值和位于這些數(shù)值之間的范圍。

6、在各種實施例中，粒子具有負ζ電位。在各種實施例中，粒子的ζ電位為約-100?mv至約0?mv、約-100?mv至約-25?mv、約-100至約-30?mv、約-80?mv至約-30?mv、約-75?mv至約-30?mv、約-70?mv至約-30?mv、約-75至約-35?mv、約-70至約-25?mv、約-60?mv至約-30mv、約-60?mv至約-35?mv或約-50?mv至約-30?mv。在各種實施例中，ζ電位為約-25?mv、-30mv、-35?mv、-40?mv、-45?mv、-50?mv、-55?mv、-60?mv、-65?mv、-70?mv、-75?mv、-80?mv、-85mv、-90?mv、-95?mv或-100?mv，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子的負ζ電位在-30?mv至-80?mv之間。在各種實施例中，載體粒子的負ζ電位在-30?mv至-60?mv之間。在各種實施例中，負ζ電位通過載體粒子的表面官能化來實現(xiàn)。在各種實施例中，表面官能化為羧化。

7、在各種實施例中，載體粒子的大小或直徑在0.05?μm與約10?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑在0.1?μm與約10?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑在0.1?μm與約5?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑在0.1?μm與約3?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑在0.3?μm與約5?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約0.3?μm至約3?μm。在各種實施例中，載體粒子的直徑在約0.3?μm至約1?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑在約0.4?μm至約1?μm之間。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約100至10000?nm、約100至5000?nm、約100至3000?nm、約100至2000?nm、約100至1500?nm、約300至5000?nm、約300至3000?nm、約300至1000?nm、約300至800?nm、約400至800?nm或約200至700nm。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約50?nm、100?nm、200?nm、300?nm、400?nm、500?nm、600?nm、700?nm、800?nm、900?nm、1000?nm、1100?nm、1200?nm、1300?nm、1400?nm、1500?nm或2000?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，帶負電荷粒子的直徑在400?nm與800nm之間。在各種實施例中，帶負電荷粒子的直徑在350?nm與800?nm之間。

8、在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布。在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少90%粒子的直徑在0.05?μm與約10?μm之間、在0.1?μm與約10?μm之間、在0.1?μm與約5?μm之間、在0.1?μm與約3?μm之間、在0.3?μm與約5?μm之間、在0.3?μm至約3?μm之間，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少90%粒子的直徑為約100至10000?nm、約100至5000?nm、約100至3000?nm、約100至2000?nm、約300至5000?nm、約300至3000?nm、約300至1000?nm、約300至800?nm、約400至800?nm或約200至700?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約50?nm、100?nm、200?nm、300?nm、400?nm、500?nm、600?nm、700?nm、800?nm、900?nm、1000nm、1100?nm、1200?nm、1300?nm、1400?nm、1500?nm或2000?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少50%粒子的直徑在約0.05?μm與約10?μm之間、在約0.1?μm與約10?μm之間、在約0.1?μm與約5?μm之間、在約0.1?μm與約3?μm之間、在約0.3?μm與約5?μm之間和在約0.3?μm與約3?μm之間，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少50%粒子的直徑為約100至10000?nm、約100至5000?nm、約100至3000?nm、約100至2000?nm、約300至5000?nm、約300至3000?nm、約300至1000?nm、約300至800?nm、約400至800?nm或約200至700?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約50?nm、100?nm、200?nm、300?nm、400?nm、500?nm、600?nm、700?nm、800?nm、900?nm、1000?nm、1100?nm、1200?nm、1300?nm、1400?nm、1500?nm或2000?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。

9、在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少10%粒子的直徑在約0.05?μm與約10?μm之間、在約0.1?μm與約10?μm之間、在約0.1?μm與約5?μm之間、在約0.1?μm與約3?μm之間、在約0.3?μm與約5?μm之間和在約0.3?μm與約3?μm之間，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子具有均勻的尺寸分布，其中至少10%粒子的直徑為約100至10000?nm、約100至5000?nm、約100至3000?nm、約100至2000?nm、約300至5000?nm、約300至3000?nm、約300至1000?nm、約300至800?nm、約400至800?nm或約200至700?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，載體粒子的直徑為約50?nm、100?nm、200?nm、300?nm、400?nm、500?nm、600?nm、700?nm、800?nm、900?nm、1000?nm、1100?nm、1200?nm、1300?nm、1400?nm、1500?nm或2000?nm，包括其中所有數(shù)值和范圍。

10、在各種實施例中，粒子囊封抗原，其負ζ電位在-100?mv與0?mv之間，并且其中粒子的直徑在100與1000?nm之間。在各種實施例中，粒子囊封包含一或多種基因療法載體抗原、其部分或其組合的一或多種抗原，并且其中粒子的尺寸在400與800?nm之間，并且粒子的負ζ電位在-30?mv至-80?mv之間。

11、在各種實施例中，粒子囊封抗原，其負ζ電位在-100?mv與0?mv之間，并且其中粒子的直徑在100與1000?nm之間。在各種實施例中，粒子囊封包含一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的蛋白治療劑、其部分或組合的一或多種抗原，并且其中粒子的尺寸在400與800?nm之間，并且粒子的負ζ電位在-30?mv至-80?mv之間。

12、在各種實施例中，粒子囊封一或多種基因療法載體抗原、其部分或組合，和一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的蛋白治療劑、其部分或組合。在各種實施例中，抗原包含一或多種蛋白質(zhì)、肽或其抗原表位。

13、本文還涵蓋一種組合物，其包含囊封一或多種基因療法載體抗原、其部分或組合的脂質(zhì)體。

14、在另一實施例中，本公開提供一種組合物，其包含囊封由基因療法載體產(chǎn)生的治療蛋白和/或其部分的脂質(zhì)體。

15、在各種實施例中，脂質(zhì)體帶負電荷。在各種實施例中，脂質(zhì)體具有負ζ電位。在各種實施例中，負ζ電位在-100?mv至0?mv之間。在各種實施例中，帶負電荷的脂質(zhì)體的ζ電位為約-100?mv至約0?mv、約-100?mv至約-25?mv、約-100至約-30?mv、約-80?mv至約-30?mv、約-75?mv至約-30?mv、約-70?mv至約-30?mv、約-75至約-35?mv、約-70至約-25?mv、約-60?mv至約-30?mv、約-60?mv至約-35?mv或約-50?mv至約-30?mv。在各種實施例中，ζ電位為約-25mv、-30?mv、-35?mv、-40?mv、-45?mv、-50?mv、-55?mv、-60?mv、-65?mv、-70?mv、-75?mv、-80mv、-85?mv、-90?mv、-95?mv或-100?mv，包括其中所有數(shù)值和范圍。在各種實施例中，脂質(zhì)體的負ζ電位在-30?mv至-80?mv之間。在各種實施例中，脂質(zhì)體的負ζ電位在-30?mv至-60?mv之間。

16、在各種實施例中，脂質(zhì)體在100-1000?nm之間、或在300-800?nm之間或在400-800nm之間。在各種實施例中，脂質(zhì)體為約100?nm、約200?nm、約300?nm、約400?nm、約500?nm、約600?nm、約700?nm、約800?nm、約900?nm或約1000?nm。

17、在各種實施例中，抗原包含基因療法載體抗原或其一或多個部分。在各種實施例中，基因療法載體為病毒載體。在各種實施例中，病毒載體選自由以下組成的群組：腺病毒、腺相關病毒(aav)、單純皰疹病毒、乙型肝炎病毒、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、甲病毒、黃病毒、彈狀病毒、麻疹病毒、新城雞瘟病毒(newcastle?disease?virus)、柯薩奇病毒(coxsackievirus)、輸血傳播病毒、指環(huán)病毒、人類乳頭狀瘤病毒、痘病毒、痘苗病毒、經(jīng)修飾的安卡拉病毒(modified?ankara?virus)、水泡性口炎病毒、小核糖核酸病毒、煙草花葉病毒、豇豆花葉病毒、豇豆褪綠斑駁病毒、酸漿花葉病毒、紅三葉草壞死花葉病毒、馬鈴薯x病毒、豇豆花葉病毒屬、雞貧血病毒或黃瓜花葉病毒。在各種實施例中，病毒為溶瘤病毒。在各種實施例中，病毒為嵌合病毒、合成病毒、花葉病毒或假型病毒。

18、在各種實施例中，粒子囊封抗原，其中抗原為一或多種aav載體、其部分或組合。在各種實施例中，aav選自由以下組成的群組：aav-1、aav-2、aav-3、aav-4、aav-5、aav-6、aav-7、aav-8、aav-9、aav-10、aav-12、anc80、合成aav、其組合或經(jīng)工程改造的版本。在各種實施例中，抗原為一或多種aav衣殼蛋白。在各種實施例中，aav衣殼蛋白為vp-1、vp-2和vp-3。

19、在各種實施例中，基因療法載體為細菌、噬菌體、酵母、胞泌體或紅細胞。

20、在各種實施例中，基因療法載體用于治療癌癥、自體免疫疾病、過敏癥、心血管疾病、代謝疾病、糖尿病、酶缺乏癥、蛋白質(zhì)缺乏癥、囊腫性纖維化、血液病癥、β-地中海貧血癥、鐮狀細胞疾病、a型血友病、b型血友病、溶酶體貯積病、法布立病、高雪氏病(gaucherdisease)、龐培氏病、尼曼-匹克二氏病(niemann-pick?disease)、泰-薩二氏病(tay-sachsdisease)、黃斑變性、粘多糖病、靜脈栓塞、馮威里氏病(von?willebrand?disease)、暴發(fā)性紫癜、生長激素缺乏癥、神經(jīng)節(jié)苷脂貯積癥、堿性低磷酸酶癥、膽固醇酯貯積病、高尿酸血癥、杜興氏肌營養(yǎng)不良(duchenne?muscular?dystrophy)、亨廷頓氏舞蹈癥(huntington'sdisease)、帕金森氏癥(parkinson's)、阿爾茨海默氏癥(alzheimer's?disease)、無脈絡膜癥、斯特格氏病(stargardt?disease)、巴登氏病(batten?disease)、脊髓小腦性共濟失調(diào)、als、額顳葉變性、鳥氨酸氨甲?；D(zhuǎn)移酶缺乏癥、色素性視網(wǎng)膜炎、rpe-65突變相關病、大皰性表皮松解、隱性營養(yǎng)不良型大皰性表皮松解、脊髓性肌萎縮、苯丙酮尿癥(pku)、x性聯(lián)肌小管肌病、克果-納杰氏綜合征(crigler-najjar?syndrome)、兒茶酚胺敏感性多形性室性心動過速、1型糖原貯積病、α-甘露糖苷貯積癥、脆弱x染色體綜合征、精氨酸酶缺乏癥、x性聯(lián)慢性肉芽腫病、腺苷脫氨酶缺乏癥、萊伯氏先天性黑蒙(leber's?congenitalamaurosis)、脂蛋白脂肪酶缺乏癥、大腦型腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、異染性腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、范康尼氏貧血癥(fanconi?anemia)、全色盲、硬皮病、成骨不全癥、冠狀動脈疾病、酪氨酸血癥、外周神經(jīng)病變、視神經(jīng)病變、冠狀動脈疾病、呼吸道合胞病毒(rsv)介導的下呼吸道疾病、達農(nóng)病(danon?disease)、嚴重白細胞粘附缺陷、丙酮酸激酶缺乏癥、恰克-馬利-杜斯氏病(charcot?marie?tooth?disease)、偉-爾二氏綜合征(wiskott?aldrich?syndrome)、α-突觸核蛋白tau蛋白病變、心肌缺血引發(fā)的難治性絞痛、i型肌強直性營養(yǎng)不良、跛行、外周動脈疾病、甲基丙二酸血癥、蔗糖酶-異麥芽糖酶缺乏癥、b型尼曼-匹克二氏病(niemann-pick?type?b?disease)、α1-pi缺乏癥、遺傳性血管水腫、血纖維蛋白原缺乏癥、因子viia缺乏癥、因子x缺乏癥、因子xi缺乏癥、因子xii缺乏癥、蛋白c缺乏癥、抗凝血酶iii缺乏癥、mpsi、mps?ii、mps?iii、mps?iv、mps?vi、mps?vii、mps?ix、鈣化/骨化病癥、enpp1缺乏癥、enpp3缺乏癥、abcc6缺乏癥、芳香族l-氨基酸脫羧酶缺乏癥、天使綜合征(angelman?syndrome)、高苯丙氨酸血癥、癡呆和雷特氏綜合征(rett?syndrome)和尤塞氏綜合征(ushersyndrome)。

21、在各種實施例中，自體免疫性疾病選自由以下組成的群組：多發(fā)性硬化癥、艾迪森氏病(addison's?disease)、強直性脊椎炎、禿頭癥、骨關節(jié)炎、銀屑病性關節(jié)炎、硬皮病、i型糖尿病、類風濕性關節(jié)炎、甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、雷諾氏綜合征(reynaud'ssyndrome)、白塞氏綜合征(behcet's?syndrome)、舍格倫氏綜合征(sjorgen's?syndrome)、自體免疫葡萄膜炎、伊頓-藍伯疾病(eaton?lambert's?disease)、自體免疫心肌炎、炎癥性腸病、肌肉萎縮性側(cè)索硬化(als)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、視神經(jīng)脊髓炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、血栓性血小板減少性紫癜、膜性腎病變、大皰性類天皰瘡、尋常型天皰瘡、重癥肌無力、乳糜瀉、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病(crohn's?disease)、結(jié)節(jié)性紅斑、腎小球腎炎、古巴士德氏綜合征(goodpasture's?syndrome)、肉芽腫病、格雷夫氏病(grave's?disease)、格-巴二氏綜合征(guillain-barre?syndrome)、橋本氏疾病(hashimoto?disease)、溶血性貧血、川崎病(kawasaki?disease)、混合型結(jié)締組織疾病、多病灶性運動神經(jīng)病變、外周膽汁性肝硬化、多血管炎重疊綜合征、1型硬皮病、硬化性膽管炎、僵人綜合征、高安氏動脈炎(takayasu?arteritis)、白癜風或韋格納肉芽腫病(wegeners?granulomatosis)。

22、在各種實施例中，過敏為食物過敏。在各種實施例中，過敏為環(huán)境過敏。在各種實施例中，食物過敏是花生過敏、樹堅果過敏、乳過敏、蛋過敏、魚過敏、小麥過敏、芹菜過敏或桃子過敏。在各種實施例中，環(huán)境過敏是花粉過敏、粉塵過敏、寵物皮屑過敏或霉菌過敏。在各種實施例中，寵物過敏是貓過敏或狗過敏。

23、在各種實施例中，基因療法載體用于治療癌癥。在各種實施例中，癌癥選自由以下組成的群組：腦癌、皮膚癌、眼癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、食管癌、頭頸癌、子宮頸癌、肝癌、結(jié)腸癌、骨癌、子宮癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌、口腔癌、甲狀腺癌、腎癌、睪丸癌、白血病、淋巴瘤、黑色素瘤和間皮瘤。

24、在各種實施例中，由基因療法載體產(chǎn)生的治療劑為蛋白質(zhì)、多肽或肽。在各種實施例中，蛋白質(zhì)為細胞因子、趨化因子、激素、生長因子、酶或抗體。

25、在各種實施例中，抗體為單克隆抗體。在各種實施例中，抗體為重組單克隆抗體。在各種實施例中，抗體選自由以下組成的群組：抗體-蛋白質(zhì)融合物、免疫粘附素、單特異性抗體、雙特異性抗體、三特異性抗體。在各種實施例中，抗體選自由以下組成的群組：抗體片段、抗原結(jié)合片段(fab)、單鏈可變片段(scfv)。在各種實施例中，抗體為單結(jié)構域抗體。在各種實施例中，抗體為iga、igd、ige、igm和/或其變體。在各種實施例中，抗體靶向il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-12p70、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-27b、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、ccl1、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl6、ccl7、ccl8、ccl9、ccl10、ccl11、ccl12、ccl14、ccl15、ccl16、ccl17、ccl18、ccl19、ccl20、ccl21、ccl22、ccl23、ccl24、ccl25、ccl26、ccl27、ccl28、cxcl1、cxcl2(mcp-1)、cxcl3?(mip-1α、cxcl4?(mip-1β、cxcl5?(rantes)、cxcl6、cxcl7、cxcl8、cxcl9、cxcl10、cxcl11、cxcl12、cxcl13、cxcl14、cxcl15、cxcl16、cxcl17、gm-csf、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、tnf-α、tnf-a、tnf-β、tgf-β1、tgf-β2、tgf-β3、lt-β、4-1bbl、april、gitrl、light、ox40l、tall-1、trail、tweak、trance、cd1c、cd2、cd3、cd4、cd5、cd8、cd9、cd10、cd11b、cd11c、cd14、cd15、cd16、cd18、cd19、cd20、cd21、cd22、cd23、cd24、taci、cd25、cd27、cd28、cd30、cd30l、cd31、cd32、cd32b、cd34、cd33、cd38、cd39、cd40、cd40-l、cd41b、cd42a、cd42b、cd43、cd44、cd45、cd45ra、cd47、cd45ra、cd45ro、cd48、cd52、cd55、cd56、cd58、cd61、cd66b、cd69、cd70、cd72、cd79、cd68、cd84、cd86、cd93、cd94、cd95、cracc、blame、bcma、cd103、cd107、cd112、cd120a、cd120b、cd123、cd125、cd127、cd134、cd135、cd140a、cd141、cd154、cd155、cd160、cd161、cd163、cd172a、xcr1、cd203c、cd204、cd206、cd207、cd226、cd244、cd267、cd268、cd269、cd355、cd358、crth2、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、kir2dl1、kir2dl2、kir2dl3、kir2dl5a、kir2dl5b、kir3dl1、kir3dl2、kir3dl3、kir3dl4、kir2ds1、kir2ds2、kir2ds3、kir2ds4、kir2ds5、dap12、kir3ds、nkp44、nkp46、tcr、bcr、整合素、fcβεri、mhc-i、mhc-ii、il-1r、il-2rα、il-2rβ、il-2rγ、il-3rα、csf2rb、il-4r、il-5rα、csf2rb、il-6rα、gp130、il-7rα、il-9r、il-10r、il-12rβ1、il-12rβ2、il-13rα1、il-13rα2、il-15rα、il-21r、il-23r、il-27rα、il-31rα、osmr、csf-1r、細胞表面il-15、il-10rα、il-10rβ、il-20rα、il-20rβ、il-22rα1、il-22rα2、il-22rβ、il-28ra、pd-1、pd-1h、btla、ctla-4、pd-l1、pd-l2、2b4、b7-1、b7-2、b7-h1、b7-h4、b7-dc、dr3、light、lair、ltα1β2、ltβr、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、lag-3、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、ccr1、ccr2、ccr3、ccr4、ccr5、ccr6、ccr7、ccr8、ccr9、ccr10、ccr11、cxcr1、cxcr2、cxcr3、cxcr4、cxcr5、cxcr6、cxcr7、clecl9a、dc-sign、igsf4a、siglec、egfr、pdgfr、vegfr、fap、α-sma、fas、fas-l、fc、icam-1、icam-2、icam-3、icam-4、icam-5、pecam-1、mica、micb、ul16、ulbp1、ulbp2、ilbp3、ulbp4、ulbp5、ulbp6、mult1、rae1α、β、γ、δ和ε、h60a、h60b、h60c、gpr15、st2和/或其組合。整合素包括α1、α2、αiib、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αd、αe、αl、αm、αv、αx、β1、β2、β3、β4、β5、β6、β7、β8和/或其組合。tcr包括α、β、γ、δ、ε、ζ鏈和/或其組合。

26、在各種實施例中，抗體靶向一或多種免疫細胞。在各種實施例中，免疫細胞為t細胞、b細胞、nk細胞、nk-t細胞、單核細胞、巨噬細胞、嗜中性粒細胞、粒細胞、樹突狀細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、th1細胞、th2a細胞、treg細胞、tr1細胞和breg細胞。

27、在各種實施例中，抗體選自由以下組成的群組：阿昔單抗(abciximab)、阿達木單抗(adalimumab)、阿侖單抗(alemtuzumab)、阿維魯單抗(avelumab)、阿替利珠單抗(atezolizumab)、巴利昔單抗(basiliximab)、貝伐單抗(bevacizumab)、貝茨羅特斯單抗(bezlotoxumab)、博納吐單抗(blinatumomab)、康納單抗(canakinumab)、賽妥珠單抗(certolizumab)、西妥昔單抗(cetuximab)、達利珠單抗(daclizumab)、地諾單抗(denosumab)、度伐魯單抗(durvalumab)、艾法珠單抗(efalizumab)、艾美賽珠單抗(emicizumab)、艾托奇單抗(etokimab)、戈利木單抗(golimumab)、伊派利單抗(ipilimumab)、依奇珠單抗(ixekizumab)、英利昔單抗(infliximab)、那他珠單抗(natalizumab)、納武單抗(nivolumab)、奧拉單抗(olaratumab)、奧馬珠單抗(omalizumab)、奧法木單抗(ofatumumab)、帕利珠單抗(palivizumab)、帕尼單抗(panitumumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、利妥昔單抗(rituximab)、托珠單抗(tocilizumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、曲美木單抗(tremelimumab)、蘇金單抗(secukinumab)、烏司奴單抗(ustekinumab)和維多珠單抗(vedolizumab)。

28、在各種實施例中，由載體產(chǎn)生的治療劑為細胞因子或趨化因子。在各種實施例中，細胞因子和趨化因子選自由以下組成的群組：il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-12p70、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-27b、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、ccl1、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl6、ccl7、ccl8、ccl9、ccl10、ccl11、ccl12、ccl14、ccl15、ccl16、ccl17、ccl18、ccl19、ccl20、ccl21、ccl22、ccl23、ccl24、ccl25、ccl26、ccl27、ccl28、cxcl1、cxcl2?(mcp-1)、cxcl3?(mip-1α、cxcl4(mip-1β、cxcl5?(rantes)、cxcl6、cxcl7、cxcl8、cxcl9、cxcl10、cxcl11、cxcl12、cxcl13、cxcl14、cxcl15、cxcl16、cxcl17、gm-csf、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、tnf-α、tnf-a、tnf-b、tgf-β1、tgf-β2、tgf-β3、lt-β、4-1bbl、april、gitrl、light、ox40l、tall-1、trail、tweak和trance。

29、在各種實施例中，蛋白為選自由以下組成的群組的激素：腎上腺素、褪黑激素、去甲腎上腺素(noradrenaline)、正腎上腺素(norepinephrine)、三碘甲狀腺素、甲狀腺素、多巴胺、前列腺素、白三烯、前列腺環(huán)素、血栓素、淀粉素、抗穆勒氏管激素(anti-müllerianhormone)、脂聯(lián)素、促腎上腺皮質(zhì)激素、血管緊張素原、血管緊張素、抗利尿激素、升壓素、精氨酸升壓素、降鈣素、膽囊收縮素、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素、皮質(zhì)抑素、腦啡肽、內(nèi)皮素、促紅細胞生成素、促卵泡激素、甘丙肽、胃抑肽、胃泌素、胃饑餓素、胰高血糖素、胰高血糖素樣肽1、促性腺素釋放激素、生長釋放激素、鐵調(diào)素(hepcidin)、人類絨毛膜促性腺素、人類胎盤催乳素、生長激素、抑制素、胰島素、胰島素樣生長因子、瘦素、促脂素、促黃體激素、促黑素細胞激素、胃動素、食欲素、骨鈣素、催產(chǎn)素、胰多肽、甲狀旁腺素、垂體腺苷酸環(huán)化酶活化肽、泌乳素、泌乳素釋放激素、松弛素、腎素、胰泌素、生長抑素、血小板生成素、促甲狀腺激素、促甲狀腺素釋放激素、血管活性腸肽、鳥苷蛋白、尿鳥苷素、睪固酮、脫氫表雄固酮、雄固烯二酮、二氫睪固酮、醛固酮、雌二醇、雌酮、雌三醇、皮質(zhì)醇、孕酮、骨化三醇和骨化二醇。

30、在各種實施例中，蛋白為選自由以下組成的群組的生長因子：腎上腺髓質(zhì)素、血管生成素、自分泌運動性因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子、白血病抑制因子、集落刺激因子、巨噬細胞集落刺激因子、粒細胞集落刺激因子、粒細胞巨噬細胞集落刺激因子、表皮生長因子、ephrin?a1、ephrin?a2、ephrin?a3、ephrin?a4、ephrin?a5、ephrin?b1、ephrinb2、ephrin?b3、促紅細胞生成素、成纖維細胞生長因子、成纖維細胞生長因子1、成纖維細胞生長因子2、成纖維細胞生長因子3、成纖維細胞生長因子4、成纖維細胞生長因子5、成纖維細胞生長因子6、成纖維細胞生長因子7、成纖維細胞生長因子8、成纖維細胞生長因子9、成纖維細胞生長因子10、成纖維細胞生長因子11、成纖維細胞生長因子12、成纖維細胞生長因子13、成纖維細胞生長因子14、成纖維細胞生長因子15、成纖維細胞生長因子16、成纖維細胞生長因子17、成纖維細胞生長因子18、成纖維細胞生長因子19、成纖維細胞生長因子20、成纖維細胞生長因子21、成纖維細胞生長因子22、成纖維細胞生長因子23、胎牛促體素、神經(jīng)膠質(zhì)細胞系衍生神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)營養(yǎng)素、珀瑟芬(persephin)、青蒿琥酯、生長分化因子-9、肝細胞生長因子、肝細胞瘤衍生生長因子、胰島素樣生長因子-1、胰島素樣生長因子-2、角質(zhì)細胞生長因子、遷移刺激因子、巨噬細胞刺激蛋白、肌肉抑制素、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4、腦衍生神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)蛋白-3、神經(jīng)營養(yǎng)蛋白-4、胎盤生長因子、血小板衍生生長因子、腎酶、t細胞生長因子、血小板生成素、轉(zhuǎn)化生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子α、轉(zhuǎn)化生長因子β、腫瘤壞死因子-α或血管內(nèi)皮生長因子。在各種實施例中，細胞因子選自由以下組成的群組：雜項造血素、epo、tpo、flt-3l、scf、m-csf和msp。

31、在各種實施例中，蛋白為選自由以下組成的群組的溶栓劑：組織纖維蛋白溶酶原活化因子、鏈激酶、尿激酶、阿尼普酶(anistreplase)、瑞替普酶(reteplase)、卡比奇激酶(kabikikinase)、替奈普酶(tenecteplase)和洛激酶(rokinase)。

32、在各種實施例中，由載體產(chǎn)生的治療劑為酶。在各種實施例中，酶選自由以下組成的群組：基因編輯核酸酶、大范圍核酸酶、歸巢核酸內(nèi)切酶、鋅指核酸酶、轉(zhuǎn)錄活化因子樣效應物核酸酶(talen)、crispr相關核酸酶和crispr-cas9。

33、在各種實施例中，cas蛋白質(zhì)選自由以下組成的群組：cas?3、cas8a、cas5、cas8b、cas8c、cas?9、cas10d、cse1、cse2、csy1、csy2、csy3、gsu0054、cas10、csm2、cmr5、cas10、csx11、csx10、csf1、cas9、csn2、cas4、cas12、cas12a、cas12b、cas12c、cas12d、cas12e、cas12f、cas14、c2c10、cas12g、cas12h、cas12i、cas12k、c2cr4、c2cr8、c2cr9、cas13、cas13a、cas13b、cas13c、cas13d。在各種實施例中，talen為基于foki、基于pvuii、基于i-tevi、基于ianii、基于i-onui或基于muth的talen。在各種實施例中，酶為選自由以下組成的群組的核酸酶：laglidadg?(大范圍核酸酶)、giy-yig、his-cys盒、h-n-h、pd-(d/e)-xk、vrs樣、megatal。

34、在各種實施例中，酶選自由以下組成的群組：伊米苷酶(imiglucerase)、他利苷酶α?(taliglucerase?alfa)、維拉苷酶α?(velaglucerase?alfa)、β-葡萄糖腦苷脂酶、阿糖腦苷酶(alglucerase)、阿加糖酶β?(agalsidase?beta)、阿加糖酶α?(agalsidase?alpha)、賽貝利酶α?(sebelipase?alpha)、α-l-艾杜糖醛酸酶(alpha-l-iduronidase)、人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(human?iduronate-2-sulfatase)、n-磺基葡萄糖胺磺基水解酶、埃洛磺酶α(elosulfase?alpha)、加硫酶(galsulfase)、α-葡萄糖苷酶(gaa)、人類α甘露糖苷酶、因子viii、因子ix、β-半乳糖苷酶、精氨酸酶、營養(yǎng)不良性肌強直蛋白質(zhì)激酶、鳥氨酸氨甲?；D(zhuǎn)移酶、nadph氧化酶、nadh脫氫酶4、腺苷脫氨酶、脂蛋白脂肪酶、β-葡萄糖腦苷脂酶、肌微管素、芳基硫酸酯酶a、dopa脫羧酶、基質(zhì)金屬肽酶1、延胡索酰乙酰乙酸水解酶、苯丙氨酸羥化酶、丙酮酸激酶、膽色素原脫氨酶、堿性磷酸酶、蔗糖酶-異麥芽糖酶、酸性鞘磷脂酶、硫酸乙酰肝素硫酸酯酶、n-乙酰半乳糖胺-6-硫酸酯酶、n-乙酰半乳糖胺-4-硫酸酯酶、α-1蛋白酶抑制劑、1-酯酶抑制劑、血纖維蛋白原、因子viia、因子x、因子xi、因子xii、蛋白c、抗凝血酶iii、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶3和芳香族l-氨基酸脫羧酶。

35、在各種實施例中，酶為蛋白酶。在各種實施例中，蛋白酶為天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶、絲氨酸蛋白酶和/或蘇氨酸蛋白酶。在各種實施例中，蛋白酶選自由以下組成的群組：adam1、adam2、adam7、adam8、adam9、adam10、adam11、adam12、adam15、adam17、adam18、adam19、adaam20、adam21、adam22、adam23、adam28、adam29、adam30、adam33、肝素酶、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27和mmp28。

36、在各種實施例中，由載體產(chǎn)生的治療劑為蛋白。在各種實施例中，蛋白選自由以下組成的群組：光可活化通道視紫蛋白、腫瘤蛋白53、hiv?gag蛋白、脆弱x染色體智力遲鈍蛋白、β血球蛋白、成纖維細胞生長因子4、人類生長因子、韋-爾二氏綜合征(wisckottaldrich?syndrome)蛋白、存活運動神經(jīng)元蛋白1、存活運動神經(jīng)元蛋白2、視網(wǎng)膜色素上皮(rpe)?65、血管內(nèi)皮生長因子(vegf)、rab護航蛋白(rep)?1、腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良蛋白、范康尼氏貧血互補群a蛋白、atp結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白、膠原蛋白vii?(col7)蛋白、i型膠原蛋白、iii型和v型膠原蛋白、β2整合素、溶酶體相關膜蛋白、肌萎縮蛋白、微型肌萎縮蛋白、胰島素樣生長因子、t細胞免疫調(diào)節(jié)因子1/atp酶h+傳輸v0亞基a3胰腺和十二指腸同源盒1、mafbzip轉(zhuǎn)錄因子a、囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)蛋白、atp結(jié)合盒子族c成員6、atp結(jié)合盒子族a成員4、血管內(nèi)皮生長因子a、絲氨酸蛋白酶抑制劑家族a成員1、顆粒蛋白前體、微管相關蛋白tau、c9或f72蛋白和間隙連接b2。

37、本公開提供使用timp囊封抗原來誘導抗原特異性免疫耐受性的方法，所述方法包含向受試者施用包含囊封抗原的帶負電荷粒子的組合物，其中抗原為一或多種基因療法載體抗原和/或一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物、其部分或其組合。在各種實施例中，抗原為一或多種基因療法載體抗原、其部分或其組合和/或由載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)、其部分或組合。在各種實施例中，向有需要的受試者施用囊封一或多種抗原的timp誘導抗原特異性耐受性。

38、還提供一種在有需要的受試者中誘導耐受性的方法，所述方法包含向受試者施用包含如本文所描述的脂質(zhì)體的組合物。

39、在各種實施例中，向受試者施用與囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp組合的囊封一或多種基因療法載體抗原的timp。施用與囊封由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp組合的囊封基因療法載體抗原的timp誘導對基因療法載體抗原和由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物兩者的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，在向受試者施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之前、同時或之后向受試者施用囊封一或多種基因療法載體抗原的timp。

40、在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之前5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之前1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之前1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之前一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

41、在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之后5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之后1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的timp在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的timp之后一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

42、在各種實施例中，timp經(jīng)靜脈內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)或經(jīng)口施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之前、同時或之后施用。

43、在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之前5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之前1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之前1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之前一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

44、在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之后5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之后1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，timp在施用基因療法載體之后一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

45、在各種實施例中，施用timp在有需要的受試者中誘導對基因療法載體抗原、其部分或其組合的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，施用timp在有需要的受試者中誘導對轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物、其部分或組合的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，施用timp在受試者中降低對基因療法載體和/或由載體表達的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的炎癥免疫反應。在各種實施例中，施用timp在受試者中降低對一或多種經(jīng)囊封的抗原的炎癥免疫反應。在各種實施例中，施用timp在有需要的受試者中降低對未囊封于粒子內(nèi)的一或多種抗原的炎癥反應。這類免疫調(diào)節(jié)反應在文獻中被稱為‘感染性耐受’。在各種實施例中，炎癥免疫反應為體液免疫反應和/或適應性免疫反應。在各種實施例中，免疫反應為抗體反應。在各種實施例中，抗體反應為iga、igg、ige或igm反應。在各種實施例中，抗體反應為中和抗體反應，例如形成針對基因療法載體抗原和/或由載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)的中和抗體。在各種實施例中，免疫反應為t細胞、b細胞、nk細胞單核細胞、巨噬細胞、嗜酸性粒細胞或嗜堿性粒細胞反應。在各種實施例中，免疫反應為對組織和/或器官的免疫浸潤降低。

46、在各種實施例中，施用timp在有需要的受試者中誘導抗原特異性免疫調(diào)節(jié)因子反應。在各種實施例中，施用timp在受試者中誘導調(diào)節(jié)性t細胞、b細胞、單核細胞和/或巨噬細胞。在各種實施例中，施用timp在受試者中誘導抗原特異性調(diào)節(jié)性t細胞(treg)、tr1、調(diào)節(jié)性巨噬細胞(mreg)和/或調(diào)節(jié)性b細胞(breg)細胞。

47、在各種實施例中，向受試者施用與囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體組合的囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體。施用與囊封由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體組合的囊封基因療法載體抗原的脂質(zhì)體誘導對基因療法載體抗原和由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物兩者的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，在向受試者施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之前、同時或之后向受試者施用囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體。

48、在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之前5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之前1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之前1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之前一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

49、在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之后5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之后1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，囊封一或多種基因療法載體抗原的脂質(zhì)體在施用囊封一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的脂質(zhì)體之后一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

50、在各種實施例中，脂質(zhì)體經(jīng)靜脈內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)或經(jīng)口施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之前、同時或之后施用。

51、在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之前5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之前1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之前1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之前一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

52、在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之后5、10、15、30、45或60分鐘施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、36、48、72或96小時施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之后1、2、3、4、5、6或7天施用。在各種實施例中，脂質(zhì)體在施用基因療法載體之后一周、兩周、三周、四周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月或12個月施用。

53、在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在有需要的受試者中誘導對基因療法載體抗原、其部分或其組合的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在有需要的受試者中誘導對轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物、其部分或組合的抗原特異性耐受性。在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在受試者中降低對基因療法載體和/或由載體表達的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的炎癥免疫反應。在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在受試者中降低對一或多種經(jīng)囊封的抗原的炎癥免疫反應。在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在有需要的受試者中降低對未囊封于粒子內(nèi)的一或多種抗原的炎癥反應。這類免疫調(diào)節(jié)反應在文獻中被稱為‘感染性耐受’。在各種實施例中，炎癥免疫反應為體液免疫反應和/或適應性免疫反應。在各種實施例中，免疫反應為抗體反應。在各種實施例中，抗體反應為iga、igg、ige或igm反應。在各種實施例中，抗體反應為中和抗體反應，例如形成針對基因療法載體抗原和/或由載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)的中和抗體。在各種實施例中，免疫反應為t細胞、b細胞、nk細胞單核細胞、巨噬細胞、嗜酸性粒細胞或嗜堿性粒細胞反應。

54、在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在有需要的受試者中誘導抗原特異性免疫調(diào)節(jié)因子反應。在各種實施例中，施用脂質(zhì)體在受試者中誘導調(diào)節(jié)性t細胞、b細胞、單核細胞和/或巨噬細胞。在各種實施例中，施用timp在受試者中誘導抗原特異性treg、tr1、mreg和/或breg細胞。

55、還涵蓋本文所描述的組合物，所述組合物包含囊封抗原的帶負電荷粒子，其中所述抗原為一或多種基因療法載體抗原和/或一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物、其部分或組合，用于在受試者中誘導耐受性。

56、本公開還提供包含囊封抗原的帶負電荷粒子的本文所描述組合物的用途，其中抗原為一或多種基因療法載體抗原和/或一或多種由基因療法載體產(chǎn)生的轉(zhuǎn)殖基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物、其部分或組合，其用于制備供在受試者中誘導耐受性用的藥物。

57、在各種實施例中，帶負電荷粒子為如本文所描述的timp或脂質(zhì)體。

58、應理解，本文所描述的每個特征或?qū)嵤├蚪M合為本發(fā)明的方面中的任一個的非限制性說明性實例，并且因此意謂可與本文所描述的任何其它特征或?qū)嵤├蚪M合進行組合。舉例來說，在用如“一個實施例”、“一些實施例”、“某些實施例”、“另外的實施例”、“特定示范性實施例”和/或“另一實施例”的語言描述特征的情況下，這些類型的實施例中的每個為特征的非限制性實例，所述特征打算與本文中所描述的任何其它特征或特征的組合進行組合而不必列出每一可能組合。這些特征或特征組合應用于本發(fā)明的方面中的任一個。在公開落入范圍內(nèi)的值的實例的情況下，考慮這些實例中的任一個作為范圍的可能的端點，考慮這些端點之間的任何和所有數(shù)值，并且設想具有上端點和下端點的任何和所有組合。

59、本文中的標題是為了方便讀者，并且并不打算為限制性的。根據(jù)實施方式和/或附圖和/或權利要求書，本發(fā)明的其它方面、實施例和變化形式將為顯而易見的。