本發(fā)明涉及一種應(yīng)用于代替或補充淚液，濕潤眼球，無淚液患者；治療病毒性或細(xì)菌性結(jié)膜炎、角膜炎；并預(yù)防和治療角膜或結(jié)膜潰瘍；具體涉及人工淚液及其制備方法。

背景技術(shù)：

眼睛干燥癥及細(xì)菌性、病毒性等眼睛疾病以及角膜潰瘍是眼睛常見疾病，尤其目前環(huán)境污染和眼睛使用不衛(wèi)生習(xí)慣、造成發(fā)生細(xì)菌性、病毒性結(jié)膜炎、角膜炎、潰瘍、淚道炎主要原因，角膜潰瘍是造成失明主要疾病。

角膜是眼球最前面的一層透明的薄膜，經(jīng)常暴露在空氣里，接觸病菌機(jī)會多。常因異物等外傷，角膜異物剔除后損傷以及沙眼及其并發(fā)癥、內(nèi)翻倒睫刺傷角膜，細(xì)菌、病毒或真菌乘機(jī)而入，引起感染而發(fā)生此外，如病毒、結(jié)核引起的變態(tài)反應(yīng)、維生素A缺乏、面癱及眼瞼疤痕致眼瞼閉合不良均可引起角膜潰瘍。得病初期，眼睛有明顯的刺激癥狀，怕光、流淚、眼痛、角膜上出現(xiàn)灰白色小點或片狀浸潤；嚴(yán)重時上述癥狀更加明顯，睜不開眼，眼痛難忍，視力減退。球結(jié)膜呈紫紅色充血，越靠近角膜越嚴(yán)重，角膜表面可見灰白色壞死組織脫落，形成潰瘍。如果細(xì)菌毒性強(qiáng)，合并慢性淚囊炎或全身抵抗力減低時，潰瘍向四周或深層蔓延，形成前房積膿，甚至引起角膜穿孔，使視力遭到嚴(yán)重的損害。綠膿桿菌性角膜潰瘍，常在1-2天內(nèi)造成角膜穿孔，后果十分嚴(yán)重。而霉菌性角膜潰瘍，開始癥狀較輕，潰瘍面不規(guī)則，呈灰白色，前房常有積膿現(xiàn)象。

引起角膜炎癥的病因及其復(fù)雜，外傷與感染，是引起角膜炎最常見的原因；患者免疫力低下造成眼睛結(jié)膜、角膜等粘膜環(huán)境變化，因此對于使用眼睛抗菌材料有選擇性，既要具有抗菌作用，又不能破壞菌群和酸堿平衡。

一般角膜潰瘍以常見為細(xì)菌性、病毒性、真菌性等微生物感染：

1、細(xì)菌性角膜潰瘍較多見﹐是嚴(yán)重的化膿性角膜潰瘍。常見匐行性角膜潰瘍和綠膿桿菌性角膜潰瘍。前者多伴有前房積膿又稱前房積膿性角膜潰瘍。

2、起病快﹑疼痛劇烈且視力急劇下降﹐伴有大量黃綠色黏性分泌物。角膜病變?yōu)榛尹S色浸潤﹐略隆起﹐其周圍水腫﹐很快形成圓形﹑環(huán)形角膜潰瘍﹐伴有前房積膿﹐2～3天即可擴(kuò)展至全角膜并穿孔。最后形成眼內(nèi)炎或角膜葡萄腫(即部分或全角膜膨隆)而致失明。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明涉及應(yīng)用于代替或補充淚液，濕潤眼球，無淚液患者，治療病毒性或細(xì)菌性結(jié)膜炎、角膜炎，并預(yù)防和治療角膜或結(jié)膜潰瘍；具體涉及人工淚液及其制備方法。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)一種人工淚液，其權(quán)利特征在于：它是由以下各原料及其質(zhì)量分?jǐn)?shù)組成為：

溶菌酶 1%--4%

黃原膠 0.01%--1%

水溶性羥丙基殼聚糖 0.1%--4%

葡萄柚種子提取物 0.005%--0.05%

氯化鈉 0.8%--1.0%

氯化鉀 0.010%--0.02%

氯化鈣 0.035%--0.055%

注射用水 余量。

一種所述的人工淚液的制備方法，按如下步驟制備：

步驟1）將水溶性海藻酸鈉置于注射用水中充分浸泡溶脹，直至完全溶解，得到液體?，備用；

步驟2）將電解質(zhì)直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟3）將溶菌酶直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟4）將葡萄柚種子提取物直接溶解于注射用水中得液體④，備用；

步驟5）將制備液體?與液體?、液體?、液體④混合后充分?jǐn)嚢杈鶆虻脧?fù)合液體⑤；

步驟6）將復(fù)合液體⑤加注射用水至足量，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笤儆昧姿徕c鹽緩沖劑調(diào)節(jié)PH至6-7，得到人工淚液中間品；

將步驟6）所得的人工淚液中間品經(jīng)抽濾，精濾，通過無菌灌裝得成品。

通過上述的制備方法，將其制備成一種等滲的滅菌的，無色透明的粘稠狀人工淚液，主要應(yīng)用于無淚液患者或干燥性角膜炎、結(jié)膜炎；用于治療病毒性或細(xì)菌性結(jié)膜炎、角膜炎。預(yù)防和治療角膜或結(jié)膜潰瘍；還可以在眼睛粘膜壁形成一種保護(hù)膜對潰瘍面促進(jìn)愈合作用;調(diào)節(jié)眼睛菌群平衡作用。

一種所述的人工淚液，人工淚液主要成分中含有：黃原膠 ，是一種經(jīng)發(fā)酵生產(chǎn)的一種微生物胞外雜多糖，相對分子質(zhì)量為2×106~2×107。黃原膠的基本結(jié)構(gòu)是由重復(fù)的五糖單元組成，此單元由2個D-葡萄糖、2個D-甘露糖和1個D-葡糖醛酸組成。黃原膠分子的一級結(jié)構(gòu)是由β-1,4鍵連接的D-葡萄糖基主鏈與三糖單位側(cè)鏈組成，其側(cè)鏈由D-甘露糖和D-葡糖醛酸交替連接而成；它的二級結(jié)構(gòu)是側(cè)鏈通過氫鍵反向纏繞主鏈形成的雙螺旋或多螺旋結(jié)構(gòu)；三級結(jié)構(gòu)是二級結(jié)構(gòu)通過非共價鍵組成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具體結(jié)構(gòu)如下：

黃原膠是一種安全的生物多聚糖，無抑制生長作用，對眼和皮膚無任何刺激性。黃原膠寡糖在抑菌、抗病毒、植物誘抗、抗氧化等方面的生物活性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)黃原膠寡糖能抑制真菌生長,而對細(xì)菌則沒有抑制作用。

黃原膠于1969年得到美國食品藥品管理局(FDA)的批準(zhǔn)認(rèn)證，1975年被美國國家處方集（NF）收載，于2010年收入中國藥典。

綜合作用機(jī)理如下：

1、促角膜膜潰瘍面愈合作用：黃原膠-殼聚糖控釋溶膠液能夠促進(jìn)上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長。黃原膠和殼聚糖混合制備的滴眼液可保護(hù)角膜上皮細(xì)胞并加速細(xì)胞再生 選在不影響組織正常愈合的情況下，有效地促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

2、止血、止痛、消炎、抗菌作用：人工淚液中含有黃原膠-殼聚糖控釋溶膠液具有止血效果。對于出血性潰瘍性結(jié)膜炎具有明顯止血作用，形成一種溶膠膜，使眼睛粘膜黏膜與外界細(xì)菌、病毒隔離從而阻止致病原微生物生長，起到物理性生物屏障作用。黃原膠降解產(chǎn)生寡糖具有抑菌、抗病毒。

3、調(diào)節(jié)眼睛菌群平衡作用：產(chǎn)品中含有葡萄柚種子提取物來自于水果葡萄柚中提取一種殺菌（或抑菌）“水果殺菌因子”。這種“水果殺菌因子”一方面具有抑制致病微生物生長；另一方面具有促進(jìn)有益菌生長。黃原膠寡糖也能有效地促進(jìn)眼道有益菌成倍地增殖 ,且具有清除羥自由基、抗病毒及免疫調(diào)節(jié)等活性。黃原膠本身不具有清除自由基功能, 但當(dāng)黃原膠被降解到某種程度后,形成的寡糖具有清除羥自由基的功能其中 ,以酶解時間為 200 min , 黏度為 40 mPa·s 時形。因此具有調(diào)節(jié)眼道菌群平衡作用。

4、濕潤眼睛：人工淚液就是一種調(diào)節(jié)生態(tài)平衡、眼道菌群，酸堿平衡的外用等滲制品，它能迅速自動調(diào)節(jié)眼道內(nèi)的酸堿及菌群平衡，促進(jìn)眼睛粘膜其組織的活性氧的吸收，能迅速于眼睛黏膜表面形成生物膜覆蓋于眼睛黏膜表面，從而減少黏膜表面細(xì)胞水分流失，達(dá)到保濕效果。加上產(chǎn)品本身是一種等滲制品，從而保證細(xì)胞內(nèi)外生物流體膜環(huán)境平衡。

5.緩解眼睛干澀：黃原膠-殼聚糖控釋溶膠液是典型的假塑性流體。黃原膠在剪切力作用下, 黏度急劇下降, 剪切速度越高黏度下降越大 ;當(dāng)剪切作用消失時, 黏度瞬間恢復(fù)到最大。當(dāng)受到剪切作用時 ,連接主、側(cè)鏈的氫鍵被破其原因分子形成了不規(guī)則的線團(tuán)狀, 黏度下降;在剪切作用消失時 , 分子又恢復(fù)了原來的結(jié)構(gòu)。黃原膠用作滴眼液助劑時功效顯著 ,可以預(yù)防和治療視網(wǎng)膜炎和脈絡(luò)膜炎等多種眼科疾病 。眼球快速眨動使滴眼液黏度減小 ,藥物快速分散并與患部充分接觸 ;停止眨動時 ,黏度增加使滴眼液不易流動 ,延長藥物作用時間。。結(jié)果表明, 這人工淚液液可保護(hù)角膜細(xì)細(xì)胞排列紊亂有緩解作用胞并對眼睛干澀引起緩解作用。

本發(fā)明的有益效果是：通過上述的制備工藝和方法制造出的人工淚液，是對人體無毒性、無刺激性、無致敏反應(yīng)且具有止痛、抗菌、止血、促進(jìn)眼睛粘膜潰瘍面快速愈合，治療角膜潰瘍、、清潔眼睛，大大減少了患者痛苦提高生活質(zhì)量，尤其有效治療角膜潰瘍和治療無淚液癥及緩解眼睛干澀癥技術(shù)領(lǐng)域一項空白。

本產(chǎn)品的理化性能指標(biāo)符合《中華人民共和國藥典》關(guān)于對人工淚液產(chǎn)品的相關(guān)的要求。

具體實施方式

下面結(jié)合實例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的方法和有益效果。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該清楚，本實施例是用于對本發(fā)明的解釋和說明，并不限定本發(fā)明所要保護(hù)的范圍。

實施例1

原料配比：

溶菌酶 1%

黃原膠 0.01%

水溶性羥丙基殼聚糖 0.2%

葡萄柚種子提取物 0.005%

氯化鈉 0.85%

氯化鉀 0.02%

氯化鈣 0.5%

注射用水 余量（補足100%）。

人工淚液的制備方法，按如下步驟制備：

步驟1）將水溶性海藻酸鈉置于注射用水中充分浸泡溶脹，直至完全溶解，得到液體?，備用；

步驟2）將電解質(zhì)直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟3）將溶菌酶直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟4）將葡萄柚種子提取物直接溶解于注射用水中得液體④，備用；

步驟5）將制備液體?與液體?、液體?、液體④混合后充分?jǐn)嚢杈鶆虻脧?fù)合液體⑤；

步驟6）將復(fù)合液體⑤加注射用水至足量，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笤儆昧姿徕c鹽緩沖劑調(diào)節(jié)PH至6-7，得到人工淚液中間品；

將步驟6）所得的人工淚液粗品經(jīng)抽濾，精濾，通過無菌灌裝得成品。

實施例2

原料配比：

溶菌酶 2%

黃原膠 0.04%

水溶性羥丙基殼聚糖 0.2%

葡萄柚種子提取物 0.01%

氯化鈉 0.9%

氯化鉀 0.01%

氯化鈣 0.4%

注射用水 余量（補足100%）

人工淚液的制備方法，按如下步驟制備：

步驟1）將水溶性海藻酸鈉置于注射用水中充分浸泡溶脹，直至完全溶解，得到液體?，備用；

步驟2）將電解質(zhì)直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟3）將溶菌酶直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟4）將葡萄柚種子提取物直接溶解于注射用水中得液體④，備用；

步驟5）將制備液體?與液體?、液體?、液體④混合后充分?jǐn)嚢杈鶆虻脧?fù)合液體⑤；

步驟6）將復(fù)合液體⑤加注射用水至足量，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笤儆昧姿徕c鹽緩沖劑調(diào)節(jié)PH至6-7，得到人工淚液中間品；

將步驟6）所得的人工淚液粗品經(jīng)抽濾，精濾，通過無菌灌裝得成品。

實施例3

原料配比：

溶菌酶 2,5%

黃原膠 0.1%

水溶性羥丙基殼聚糖 0.5%

葡萄柚種子提取物 0.05%

氯化鈉 1%

氯化鉀 0.03%

氯化鈣 0.2%

注射用水 余量（補足100%）

人工淚液的制備方法，按如下步驟制備：

步驟1）將水溶性海藻酸鈉置于注射用水中充分浸泡溶脹，直至完全溶解，得到液體?，備用；

步驟2）將電解質(zhì)直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟3）將溶菌酶直接溶解于注射用水中得液體?，備用；

步驟4）將葡萄柚種子提取物直接溶解于注射用水中得液體④，備用；

步驟5）將制備液體?與液體?、液體?、液體④混合后充分?jǐn)嚢杈鶆虻脧?fù)合液體⑤；

步驟6）將復(fù)合液體⑤加注射用水至足量，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笤儆昧姿徕c鹽緩沖劑調(diào)節(jié)PH至6-7，得到人工淚液中間品；

將步驟6）所得的人工淚液粗品經(jīng)抽濾，精濾，通過無菌灌裝得成品。

臨床應(yīng)用

分析人工淚液在角膜潰瘍治療中的效果；

病例選擇：角膜潰瘍患者共 178 例 178 眼；81例81眼作為對照組，接受以那他霉素及氟康唑為主的傳統(tǒng)抗方案治療； 97 例 97 眼 作為治療組，在傳統(tǒng)治療方案基礎(chǔ)上加用人工淚液治療；對比分析兩種治療方法的效果。

方法

對照組采取傳統(tǒng)治療方案，即靜脈滴注氟康唑 注射液 0.2ｇ/ｄ；氟康唑滴眼液及那他霉素滴眼液點眼，開始1次/h，1星期后逐漸減為每2小時1次，潰瘍明顯控制后再減至４次/d；利福平滴眼液 ４ 次/d；不含人工淚液的氧氟沙星眼膏（２次/d）；對癥予散瞳孔、潰瘍面壞死組 織刮除、降眼壓、熱敷及維生素類支持治療。

治療組在對照組的治療方案上加用10ml／瓶人工淚液滴眼液點眼，４次/d。

療效判定標(biāo)準(zhǔn)：

治愈：紅痛癥狀消失，角膜潰瘍愈合，熒光素染色陰性，前房積膿消失。

好轉(zhuǎn)：紅痛癥狀 減輕，角膜潰瘍面積減小1/3以上，前房積膿減少或消失， 因經(jīng)濟(jì)或其它原因未堅持治療者。

無效：治療時間大于2星期，紅痛癥狀無改善，角膜潰瘍繼續(xù)擴(kuò)大、穿孔，前房積膿加重。

結(jié)果

治療組97例，平均治療時間14.15±4.23ｄ，治愈90 例，治愈率92.8%；好轉(zhuǎn)5 例，占5.2%；有效率97.9%；無效2例，占2.1%。 無效病例2例中，1例為糖尿病患者，1例前房積膿繼發(fā)難以控制的青光眼，最后均行眼球摘除術(shù)；治療組最終視力＞0.3者50例50眼，占51.5%。

對照組81例，平均治療時間17.26±6.23d，治愈69 例，治愈率85.2%；好轉(zhuǎn)7例，占8.6%；有效率93.8%；無效5例， 占6.2%。 無效者5例中3例入院 時已潰瘍穿孔伴前房積膿，1例繼發(fā)青光眼后出現(xiàn)前房積 膿，1例感染未得到控制，經(jīng)穿透性角膜移植治愈。對照組最終視力＞0.3者32例32眼，占39.5％。 兩組的好轉(zhuǎn)病例均因為家庭經(jīng)濟(jì)困難或其它原因未能堅持治療而出院，出院后，治療組2例失訪，對照組3例失訪，未失訪病 例均門診定期復(fù)查，最終治愈。

治療組的平均住院時間短于對照組，治愈率及有效率高于對照組。 治療組最終視力＞0.3者高于對照組。

經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，兩組的平均住院時間、治愈率、有 效率及最終視力差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），治療組的平均住院時間短于對照組，治愈率及有效率高于對照組，最終視力好于對照組。

人工淚液可促進(jìn)角膜潰瘍愈合，提高治愈率，減少角膜瘢痕形成。人工淚液應(yīng)用在于機(jī)體的各種組織中，具有促進(jìn)生長減輕炎癥、保護(hù)細(xì)胞免受毒素侵害等特殊的生理功能。