本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領域，具體地，涉及能快速使用，具有迅速止血、粘合和封閉創(chuàng)面作用的白芨膠自組裝納米微粒及其制備方法和應用。

背景技術(shù)：

過度失血是事故和戰(zhàn)傷致死的主要原因，也是外科手術(shù)治療過程中致死的主要原因之一，控制失血是手術(shù)、急救和野外創(chuàng)傷護理的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。不幸的是，來自各種原因的出血(流血)是非常見的，日常生活和工作中的意外受傷出血(流血)、外科手術(shù)中的創(chuàng)傷出血(流血)、來自戰(zhàn)爭的受傷出血(流血)等，如不能控制及時控制，則將有可能造成巨大損失甚至死亡。因此，止血日益成為醫(yī)學界研究熱點。常規(guī)的止血方法有人工擠壓、燒灼術(shù)和傷口縫合但這些方法有時并不能有效止血，而延長了止血時間。目前臨床上，在皮膚創(chuàng)傷和脾、腎等軟組織器官損傷及手術(shù)的出血治療中，大都采用天然衍生可降解止血材料，主要有明膠海綿、氧化纖維素、微纖維膠原粉末、纖維蛋白膠，膠原海綿等。而這些止血產(chǎn)品，在止血效果、止血時間、創(chuàng)面愈合、生物相容性等方面都存在一定的不足。如明膠和膠原的組織黏附力較差，兩者的止血功能均依賴于足量的血小板和凝血因子，故應用受到限制。血纖蛋白原和凝血酶產(chǎn)品不僅來源少，而且可能會傳播肝炎。動物纖維蛋白膠產(chǎn)品雖然具有來源廣泛、價格低廉、避免人類傳染病等優(yōu)點，但亦存在以下問題：①環(huán)境穩(wěn)定性差，需要低溫貯存；②使用不便，需要一定的準備時間；③功能單一，不能用作藥物載體，如在腫瘤切除術(shù)中不能用作局部化療的載體等；④來自動物的血纖維蛋白膠其生物相容性差；⑤而且血纖維蛋白膠源自血液，不能排除導致病毒感染的可能。因此，如何使用新技術(shù)、新材料，優(yōu)化制備工藝，研制一種具有生物安全性、生物相容性，且有較強的止血功能的新型止血材料，實現(xiàn)止血材料的多功能性，便成為當前亟待研究和探索的重要課題。

白芨為蘭科植物白芨bletilastriata(thunb.)reichb.f.的干燥塊莖，具有收斂止血，清熱利濕，消腫生肌等功效。臨床上常用于咳血吐血、外傷瘡瘍、宮頸糜爛及消化道潰瘍等癥。白芨中含有大量的白芨膠，白芨膠又稱白芨多糖、白芨甘露聚糖(bletillaglucomannan)，為白芨塊莖經(jīng)水提所得的一種雜多糖?，F(xiàn)代研究表明，白芨膠是白芨止血的活性成分。白芨膠是由4分子甘露糖和1分子葡萄糖組成的葡萄糖配甘露聚糖，是一種理想的天然止血材料。白芨在我國作為收斂、止血藥已有幾千年的歷史；在止血領域，白芨膠因為其優(yōu)良的止血、組織黏附、抗感染、促進傷口愈合等功能和良好的生物相容性和生物降解性，將成為止血材料中的佼佼者。天然多糖白芨膠本身具有無毒、安全、收斂、止血、延緩皮膚衰老、增稠、懸浮、保濕和助乳化等功能；可促進血液循環(huán)、改善皮膚營養(yǎng)狀況、治療和防止皮膚凍瘡、皸裂、防止皺紋等，且無副反應和毒性。

然而白芨膠的分子量跨度很大，在分布在20~2500kda之間都有，雖然都有止血的作用，但大分子量的白芨多糖相對活性低，穩(wěn)定性也低，并且難以被人體吸收，通常用于體外止血。如何提高白芨膠的止血效果，發(fā)揮白芨膠的止血能力，值得研究。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有止血產(chǎn)品的不足，發(fā)揮白芨膠的止血、成膜、生物相容性、生物可降解性及藥物載體的多重功能，提供一種白芨膠自組裝納米微粒。

本發(fā)明同時提供所述白芨膠自組裝納米微粒的制備方法。

本發(fā)明還提供所述白芨膠自組裝納米微粒的應用。

本發(fā)明的上述目的通過如下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：

一種白芨膠納米微粒的制備方法，包括如下步驟：

s1.將分子量分布在20~150kda的白芨膠干粉溶于水中，制成水溶液，加入0.01~0.10%第一交聯(lián)劑，控制溶液至30~50℃，在300～800轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌20~60分鐘后將其傾倒入至液體石蠟中，攪拌，再加入1～10％的分散劑，在1000～3000轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌2~8小時進行乳化，得到乳化液；

s2.往s1.所得乳化液中加入0.5~5.0%的第二交聯(lián)劑，混勻后置于30~50℃水浴中進行交聯(lián)8~12小時，交聯(lián)完成后冷卻至室溫，于0℃冷凝，進行過濾，得到交聯(lián)產(chǎn)物；

s3.交聯(lián)產(chǎn)物用丙酮洗滌至丙酮表面無漂浮油斑，即得凝膠狀半透明納米微粒；依次以70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇對凝膠狀半透明納米微粒進行脫水，即得固態(tài)納米微球；

s4.將固態(tài)納米微球在10~40℃下真空干燥，得到所述白芨膠納米微粒；

s1.中，溶液與液體石蠟的體積比為1:10~20。

通過上述方法制備得到的白芨膠納米微粒呈球形或類球形，且具有比較光潔的表面以及很好的規(guī)整度，大多形態(tài)比較均勻完整，粒徑分布為50~300nm。該納米微粒具有良好的穩(wěn)定性，并具有高的止血活性，而且能夠被人體吸收，可作為外科手術(shù)的止血藥物。

優(yōu)選地，s1.中，所述水溶液中白芨膠的濃度為5~20質(zhì)量%。

優(yōu)選地，s1.中，所述分散劑選自司盤80、吐溫80或泊洛沙姆。

優(yōu)選地，所述第一交聯(lián)劑及第二交聯(lián)劑獨立選自戊二醛、甲醛、乙醛、n,n-亞甲基-雙丙烯酰胺、乙二胺、已二胺、二(甲基)丙烯酸己二醇酯、乙二醇雙縮水甘油醚、丙二醇雙縮水甘油醚、丁二醇雙縮水甘油醚、表氯醇、聚乙二醇、海澡酸鈉中的一種或幾種。

優(yōu)選地，s1.中，所述白芨膠干粉通過如下方法制備得到：

s5.將干燥的白芨塊莖粉碎成5~10目的塊料，加純化水浸泡，塊料與純化水的質(zhì)量比為1:15～30，浸泡時間為0.5h~2h，浸泡溫度為室溫，然后加熱回流提取1~3h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液；濾渣重復上述浸泡、提取和過濾1~3次，分次收集并合并濾液，得到第一濾液；

s6.將s5.的第一濾液，在50~100℃減壓濃縮，濃縮成有效成分葡配甘露聚糖的含量為15～95％的濃縮液；

s7.向s6.的濃縮液中加入乙醇濃度為70~95%的乙醇溶液，攪拌，使乙醇濃度達到20~30%，醇沉，過濾，棄去沉淀，得到第二濾液；

s8.向第二濾液中，加入乙醇濃度為95%的乙醇溶液或無水乙醇，攪拌，使乙醇濃度達到75~80%，醇沉，過濾，收集沉淀，并用乙醇濃度為95%的乙醇溶液或無水乙醇洗滌沉淀，洗滌后沉淀冷凍干燥或減壓真空干燥，干燥溫度為40~60℃；制得所述白芨膠干粉。

采用上述方法，能獲得得到分子量在20~150kda的白芨膠。

一種上述方法制得的白芨膠納米微粒。

所述白芨膠納米微粒在制備組織止血、組織封口和/或組織粘合的產(chǎn)品中的應用。

優(yōu)選地，所述組織為體內(nèi)組織。

優(yōu)選地，所述白芨膠納米微粒在制備外科手術(shù)過程中止血材料的應用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

本發(fā)明制備的白芨膠納米微粒，比普通的白芨膠對組織黏附性更好、成膠性更強、止血性能更好，既具有高分子微球類止血材料的特點（分子篩及提供凝血表面），又充分融合了白芨多糖材料本身的優(yōu)勢（收斂、止血），從而顯著提高止血效果，易在創(chuàng)面形成薄層，發(fā)揮白芨膠的成膜功能，對術(shù)后組織創(chuàng)面起粘合和封閉作用。

附圖說明

圖1為本發(fā)明制備的白芨膠納米微粒的形貌圖。

圖2為本發(fā)明制備的白芨膠納米微粒的粒徑分布圖。

具體實施方式

以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行闡述，然而本發(fā)明的保護范圍并非僅僅局限于以下實施例，實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。凡在本專利的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發(fā)明要求的保護范圍之內(nèi)。

實施例1

白芨膠的提取與分離：

（1）取干燥的白芨塊莖300g,粉碎成約8目的小塊，加純化水9000ml室溫浸泡2h，加熱回流提取2h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液；濾渣繼續(xù)加純化水9000ml室溫浸泡1h，加熱回流提取2h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液,合并2次提取濾液，得第一濾液約17200ml。

（2）將上述第一濾液，置于減壓真空濃縮裝置中，70℃減壓濃縮至稠狀，使其有效成分葡配甘露聚糖的含量約為30%，得濃縮液約400ml。

（3）向上述濃縮液中緩緩加入95%的乙醇溶液143ml，攪拌，使乙醇濃度達到約25%，醇沉，過濾，棄去沉淀，得到第二濾液約530ml。

（4）向上述第二濾液中，緩緩加入95%的乙醇溶液1760ml，攪拌，使乙醇濃度達到約80%，醇沉過夜，過濾，收集沉淀；并用95%的乙醇洗滌沉淀，洗滌沉淀次數(shù)為3次，每次250ml。將洗滌后的白芨膠沉淀置于真空干燥箱中減壓真空干燥，干燥溫度為50℃；制得白芨膠a80.2g。該白芨膠a的分子量分布在20~150kda。

白芨膠納米微粒的制備：

s1.將上述白芨膠a80.2g加入到800ml水溶液中，攪拌至完全溶解，形成白芨膠水溶液；升溫至40℃，滴加0.5%戊二醛溶液120ml,以600轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌30分鐘,將其傾倒入至9200ml液體石蠟中，攪拌，再加入184ml的司盤80，以1500轉(zhuǎn)/分鐘的速度高速攪拌4小時進行乳化，得到乳化液；

s2.取上述乳化液再加入30%戊二醛溶液276ml，攪拌30分鐘,使其分散均勻，置于40℃水浴中進行交聯(lián)自組裝8h,將產(chǎn)物冷卻至室溫，于0℃冷凝，取出，進行過濾,得到交聯(lián)產(chǎn)物；

s3.取交聯(lián)產(chǎn)物，用丙酮洗滌3次，每次900ml,至丙酮表面無漂浮油斑，即得凝膠狀半透明納米微粒；依次以900ml的70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇對凝膠狀半透明納米微粒進行脫水，即得固態(tài)納米微球；

s4.將固態(tài)納米微球置于真空干燥器中40℃溫度下真空干燥，得白色的所述白芨膠納米微粒a78.6g。

實施例2

白芨膠的提取與分離：

（1）取干燥的白芨塊莖600g,粉碎成約6目的小塊，加純化水12000ml室溫浸泡2h，加熱回流提取2h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液；濾渣繼續(xù)加純化水10000ml室溫浸泡1h，加熱回流提取1.5h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液,濾渣繼續(xù)加純化水10000ml室溫浸泡1h，加熱回流提取1h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液,合并3次提取濾液，得第一濾液約31200ml。

（2）將上述第一濾液，置于減壓真空濃縮裝置中，65℃減壓濃縮至稠狀，使其有效成分葡配甘露聚糖的含量約為25%，得濃縮液約950ml。

（3）向上述濃縮液中緩緩加入95%的乙醇溶液438ml，攪拌，使乙醇濃度達到約30%，醇沉，過濾，棄去沉淀，得到第二濾液約1290ml。

（4）向上述第二濾液中，緩緩加入95%的乙醇溶液2900ml，攪拌，使乙醇濃度達到約75%，醇沉過夜，過濾，收集沉淀；并用95%的乙醇洗滌沉淀，洗滌沉淀次數(shù)為3次，每次400ml。將洗滌后的白芨膠沉淀置于真空干燥箱中減壓真空干燥，干燥溫度為40℃；制得白芨膠b147.1g。該白芨膠b的分子量分布在20~150kda。

白芨膠納米微粒的制備：

s1.將上述白芨膠b147.1g加入到1500ml水溶液中，攪拌至完全溶解，形成白芨膠水溶液；升溫至50℃，滴加1.0%戊二醛溶液100ml,以500轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌40分鐘,將其傾倒入至16000ml液體石蠟中，攪拌，再加入184ml的吐溫80，以2000轉(zhuǎn)/分鐘的速度高速攪拌5小時進行乳化，得到乳化液；

s2.取上述乳化液再加入30%戊二醛溶液550ml，攪拌30分鐘,使其分散均勻，置于40℃水浴中進行交聯(lián)自組裝10h,將產(chǎn)物冷卻至室溫，于0℃冷凝，取出，進行過濾,得到交聯(lián)產(chǎn)物；

s3.取交聯(lián)產(chǎn)物，用丙酮洗滌3次，每次1000ml,至丙酮表面無漂浮油斑，即得凝膠狀半透明納米微粒；依次以1000ml的70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇對凝膠狀半透明納米微粒進行脫水，即得固態(tài)納米微球；

s4.將固態(tài)納米微球置于真空干燥器中40℃溫度下真空干燥，得白色的所述白芨膠納米微粒b142.3g。

實施例3

白芨膠的提取與分離：

（1）取干燥的白芨塊莖300g,粉碎成約5目的小塊，加純化水6000ml室溫浸泡2h，加熱回流提取2h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液；濾渣繼續(xù)加純化水4500ml室溫浸泡1h，加熱回流提取1.5h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液,濾渣繼續(xù)加純化水4500ml室溫浸泡0.5h，加熱回流提取1.0h，40目濾網(wǎng)過濾，收集濾液,合并2次提取濾液，得第一濾液約14100ml。

（2）將上述第一濾液，置于減壓真空濃縮裝置中，75℃減壓濃縮至稠狀，使其有效成分葡配甘露聚糖的含量約為28%，得濃縮液約430ml。

（3）向上述濃縮液中緩緩加入95%的乙醇溶液162ml，攪拌，使乙醇濃度達到約26%，醇沉，過濾，棄去沉淀，得到第二濾液約560ml。

（4）向上述第二濾液中，緩緩加入95%的乙醇溶液1420ml，攪拌，使乙醇濃度達到約76%，醇沉過夜，過濾，收集沉淀；并用95%的乙醇洗滌沉淀，洗滌沉淀次數(shù)為3次，每次250ml。將洗滌后的白芨膠沉淀置于真空干燥箱中減壓真空干燥，干燥溫度為50℃；制得白芨膠c79.5g。該白芨膠c的分子量分布在20~150kda。

白芨膠納米微粒的制備：

s1.將上述白芨膠c79.5g加入到750ml水溶液中，攪拌至完全溶解，形成白芨膠水溶液；升溫至45℃，滴加1.0%戊二醛溶液80ml,以800轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌30分鐘,將其傾倒入至8300ml液體石蠟中，攪拌，再加入170ml的司盤80，以1800轉(zhuǎn)/分鐘的速度高速攪拌5小時進行乳化，得到乳化液；

s2.取上述乳化液再加入30%戊二醛溶液250ml，攪拌40分鐘,使其分散均勻，置于45℃水浴中進行交聯(lián)自組裝10h,將產(chǎn)物冷卻至室溫，于0℃冷凝，取出，進行過濾,得到交聯(lián)產(chǎn)物；

s3.取交聯(lián)產(chǎn)物，用丙酮洗滌3次，每次800ml,至丙酮表面無漂浮油斑，即得凝膠狀半透明納米微粒；依次以800ml的70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇對凝膠狀半透明納米微粒進行脫水，即得固態(tài)納米微球；

s4.將固態(tài)納米微球置于真空干燥器中40℃溫度下真空干燥，得白色的所述白芨膠納米微粒c77.4g。

白芨膠納米微粒理化性能分析

白芨膠具有良好的生物相容性和生物可降解性,近年來，在創(chuàng)面修復材料的研制和開發(fā)中顯示了其廣闊的應用前景。本發(fā)明制備的白芨膠納米微粒在傷口愈合的作用中具有獨特的優(yōu)勢。本實驗以白芨膠（葡配甘露聚糖）為原料制備的白芨膠自組裝納米微粒,對該白芨膠納米微粒敷料的外觀、表面結(jié)構(gòu)、微球的粒徑、含水率、溶脹率、固密度、ph值、熾灼殘渣等理化性能進行了檢測和分析。

1材料與方法

1.1實驗儀器和材料

掃描電子顯微鏡(日立x-650型)；phs-204數(shù)字式精密酸度計(武漢儀器儀表研究所)。el204型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；uv-8000雙光束紫外分光光度計(ultravioletspectrophotometric，上海元析儀器有限公司)；gwj-4型智能粒徑檢測儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2白芨膠納米微粒

上述實施例1～3制備的白芨膠納米微粒a、b、c。

1.3白芨膠納米微粒的理化性能檢測方法

1.3.1材料的外觀:在自然光下肉眼觀察白芨膠納米微粒敷料外觀。

1.3.2微球粒徑:取適量白芨膠納米微粒加至超純水中，磁力攪拌器使其分散均勻后，放入激光粒度分析儀中測定微球的直徑及粒徑分布。

1.3.3微球形態(tài):取少許粉末樣品撒于樣品蓋上，噴金，然后在高壓條件下成像，用掃描電鏡觀察。

1.3.4含水率：取數(shù)個規(guī)格相同且干燥恒重的稱量瓶，分別稱其重量記為wn，分別加入適量的微球后稱其重量，記為w(其中微球重為w-wn)，移至105℃烘箱中干燥4h，取出，置干燥器中冷卻30min，迅速稱定重量(w')，再置105℃烘箱中干燥0.5h，取出，置干燥器中冷卻30min，迅速稱定重量(w')，2次恒重之差不超過0.3mg，按下式計算微球的含水率。則含水率的計算公式為(1)：

含水率(%)=[(w-w')/(w-wn)]×100%………………………………(1)

1.3.5溶脹率：精密稱取干燥的白芨膠納米微粒適量(wd)分散于5ml試管中，加入4ml磷酸鹽緩沖溶液(0.2m，ph6.8)溶解，漩渦振蕩5min，置于室溫12h以上直至達到溶脹平衡，離心，棄去上清液，用濾紙將微球表面的水分吸干，精密稱重溶脹后的微球(wn)，按下式計算溶脹率(sr%),則溶脹率的計算公式為(2)：

sr(%)=[(wn-wd)/wd]×100%………………………………………(2)

1.3.6固密度：測定白芨膠納米微粒粉末固密度方法，將白芨膠納米微粒的粉末填充于小塑料瓶(5ml)中，從一定高度(約14mm)按規(guī)定次數(shù)(20次)落下，利用落下的撞擊力使粉末裝緊，并不斷加入白芨膠納米微粒粉末，直至填滿且溢出瓶口，刮去多余粉末，準確測定粉末重量及塑料瓶內(nèi)容積，將粉重和容積相比即得粉末的固密度。

1.3.7ph值測定：取白芨膠納米微粒粉末0.5g置入10ml蒸餾水中,37℃下浸提24h,制備白芨膠納米微粒粉末浸提液。測定其浸提液的ph值,作為白芨膠納米微粒粉末的ph值。

1.3.8熾灼殘渣：取白芨膠納米微粒粉末2g,按照《中華人民共和國藥典》的方法測定。

2結(jié)果

2.1白芨膠納米微粒粉的外觀及微觀形貌表征：經(jīng)上述實施例制備工藝制備的白芨膠納米微粒粉外觀為類白色或淡黃色的微球粉末,電鏡掃描，微球表面呈光滑球形，大部分表面光滑，分布均勻，無明顯粘連。實施例1制備的白芨膠納米微粒的形貌如圖1所示。實施例2、實施例3制備的白芨膠納米微粒形貌與實施例1一致。

2.2白芨膠納米微粒粉的粒徑：用粒度分析儀測得所制備的微球粒徑的分布范圍是50～250nm。實施例1制備的白芨膠納米微粒，粒徑分布在100～200nm范圍內(nèi)的微球占總數(shù)的86.9%，微球粒徑分布較均勻。具體如圖2所示。

2.3白芨膠納米微粒粉的含水率：在相同的相對濕度和時間條件下，白芨膠納米微粒a、b、c的含水率分別為13.20%、13.51%、13.35%。

2.4白芨膠納米微粒粉的溶脹率：在ph6.8的溶液中微球12h以上直至達到溶脹平衡，白芨膠納米微粒a、b、c的溶脹率分別為305.89%、306.50%、304.62%。

2.5白芨膠納米微粒粉的固密度：白芨膠納米微粒a、b、c的固密度值分別是0.36/cm³、0.37/cm³、0.35g/cm³。

2.6白芨膠納米微粒粉的ph值：白芨膠納米微粒a、b、c的ph值分別為5.98、6.05、6.03。

2.7白芨膠納米微粒粉的熾灼殘渣：白芨膠納米微粒a、b、c的熾灼殘渣分別為0.32%、0.29%、0.33%。

白芨膠納米微粒粉止血效果試驗

本實驗考察了白芨膠納米微粒粉對家兔體內(nèi)出血模型的止血時間，以驗證白芨膠納米微粒粉的止血作用。

1材料和方法

1.1材料

白芨膠納米微粒粉：白芨膠納米微粒a、b、c；樣品分別用具有細小噴孔的軟塑料瓶分裝。健康家兔，雌雄均用，體重2.5～3.okg，(由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供)；戊巴比妥鈉(南方醫(yī)科大學動物實驗中心)；云南白藥(云南白藥集團股份有限公司)；普通紗布、可溶性止血紗布和膠原蛋白海綿，均由市場購得；白芨粉末：白芨塊莖粉碎研磨得到。

1.2試驗方法

1.2.1止血實驗

戊巴比妥鈉按30mg/kg體重于兔耳靜脈緩慢注入，麻醉動物。腹部剪毛，消毒鋪巾后，沿右側(cè)肋緣下6cm切口，深度先至皮膚全層，再切開腹肌至腹膜層，提起腹膜，剪開進入腹腔。從肋緣下找到肝臟，并暴露肝臟。在其平坦面，用15號手術(shù)刀片沿肝臟長軸先后劃出長1cm，深1mm的兩條對稱性傷口，創(chuàng)面出血活躍。10s后兩側(cè)傷口按隨機化原則分別敷云南白藥或白芨粉末或白芨膠納米微粒粉100mg，觀察創(chuàng)面出血情況，每隔3~5s觀察一次，傷口停止出血的時間為止血時間；若2min內(nèi)未再出血，即認為止血成功，記錄止血時間，并觀察止血制劑與創(chuàng)面的粘合情況。

1.2.2統(tǒng)計學方法

采用spss10.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，組間比較行配對t檢驗p值<0.05為有統(tǒng)計學意義。

1.3出血時間(bleedingtime，bt)

白芨膠納米微粒a粉組bt為0.75±0.13min，白芨膠納米微粒b粉組bt為0.94±0.12min，白芨膠納米微粒c粉組bt為0.83±0.11min，云南白藥對照組bt為3.33±0.37min。白芨粉末對照組bt為4.12±0.39min。經(jīng)統(tǒng)計學分析，白芨膠納米微粒粉組與兩個對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。同時，白芨膠納米微粒粉與創(chuàng)面黏附良好，能有效地密封出血創(chuàng)面在止血操作中，先用紗布吸干出血后，再用白芨膠納米微粒覆蓋滲血創(chuàng)面可以起到良好的止血作用。

2結(jié)果和討論

白芨膠納米微粒粉具有明顯的止血作用，主要作用表現(xiàn)在以下幾個方面：首先白芨膠納米微粒粉對組織表面有較強的粘附性，特別是粘附在出血周圍的組織，吸收血液后體積縮小，對創(chuàng)面形成壓迫作用，阻止進一步出血；吸收血液中的水分后使血液粘稠，減少血液的流動性促進止血；白芨膠納米微粒粉吸水后形成水凝膠，水凝膠分子中的羥基能和纖維蛋白原分子形成氫鍵，促進纖維蛋白的交鏈，加速止血，這也是白芨膠納米微粒加速血液凝固減少出血量和縮短出血時間的主要作用機制。云南白藥吸收血液后使血液變粘稠，但對創(chuàng)面的粘合性不強。云南白藥、白芨粉的止血作用不如白芨膠納米微粒粉理想。結(jié)論：白芨膠納米微粒粉是一種新型的可降解生物材料，具有肯定的止血作用。在分子水平上白芨膠納米微粒粉能增強纖維蛋白原的凝固性，縮短凝血酶時間；在大體水平上白芨膠納米微粒粉對組織表面具有較強的粘附性，壓迫創(chuàng)面止血，吸收血液中的水分使血液粘稠，促進凝血，達到縮短止血時間和減少出血量的作用。