本發(fā)明屬于藥物制劑技術領域，特別涉及一種含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)及其制備方法與應用。

背景技術：

透皮給藥系統(tǒng)是指在皮膚表面給藥，使藥物以恒定速率或接近恒定速率通過皮膚進入體循環(huán)，產生全身或局部給藥治療的新劑型。其優(yōu)點體現(xiàn)在：與口服藥系統(tǒng)相比，避免藥物的異味，降低新陳代謝和肝臟的首過效應，藥物吸收不受消化道內ph、食物、時間等因素的影響；與皮下注射藥相比克服因吸收過快產生血液濃度過高而引起的不良反應，可自我管理、持續(xù)控制給藥速度、靈活給藥，同時改善病人對藥的依賴性和提高藥物的生物利用率。因此透皮給藥系統(tǒng)是目前藥物制劑技術領域研究的熱點。

脂質體同時具有親水性和疏水性，醇質體是一種新型的具有囊泡結構的經皮給藥載體，由磷脂、膽固醇、乙醇、水組成，即在普通脂質體的配方中添加高濃度醇，其透皮機制也不同于普通脂質體。它不僅有高效包封和良好的透皮性能，而且能有效的攜帶藥物分子穿透角質層甚至到達皮膚更深層，是一種高效的透皮載體。透明質酸是人體表皮層及真皮層的主要基質之一，具有良好的生物相容性，改善皮膚營養(yǎng)代謝，理想的保濕因子，在保濕的同時又是良好的透皮吸收促進劑；能夠促進纖維細胞的增殖，促進皮膚傷口的修復、減少疤痕，增強免疫力等。

目前，中國公開文本cn105078928a公開了尼索地平醇質體控釋貼劑及其制備方法，所述的醇質體是在脂質體的基礎上添加高濃度的醇，而高濃度的醇有脫脂作用，可致局部皮膚干燥，同時藥物在皮內儲留時間短，難以持續(xù)發(fā)揮療效。中國公開文本cn102085198a公開了通過皮膚施用舒芬太尼的透皮給藥系統(tǒng)；中國公開文本cn105168187a公開了一種透皮給藥系統(tǒng)，是將藥液和藥物細粉混合，涂布到水凝膠貼上，形成透皮給藥系統(tǒng)；中國公開文本cn105816443a公開了一種治療糖尿病的glp-1緩控釋駐極體透皮給藥系統(tǒng)，駐極體層、背襯層、含藥壓敏膠層和控釋膜層形成一貯存庫貼劑。這些公開提供的均為透皮給藥系統(tǒng)，在很大程度上避免了首過效應、消化道反應不良等弊端，同時提高了生物利用度。

迄今為止，含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備方法及其作為藥物轉運載體在局部皮膚外用給藥中的應用尚未見報道。

技術實現(xiàn)要素：

為了克服上述現(xiàn)有技術的缺點與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備方法。該方法以醇脂質體為透皮給藥的載體，在合成過程中添加透明質酸，能顯著提高藥物的經皮滲透性，使藥物在長時間內維持高血藥濃度，保證藥效的持續(xù)發(fā)揮，可減少副反應、給藥次數(shù)，方便患者的自我管理。

本發(fā)明另一目的在于提供上述方法制備的含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

本發(fā)明再一目的在于提供上述含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥載體在外用制劑、化妝品等領域中的應用，特別是作為藥物轉運載體在局部皮膚外用給藥中的應用。

本發(fā)明的目的通過下述方案實現(xiàn)：

一種含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備方法，具體包括以下步驟：

(1)按質量百分比稱取原料：大豆卵磷脂1％～5％、膽固醇0.1％～1％、透明質酸0.5％～1.5％、無水乙醇20％～50％、透皮藥物0.1％～1.5％、水余量；

(2)將大豆卵磷脂、膽固醇、透明質酸、透皮藥物溶解于無水乙醇中，加熱至30～37℃使其溶解得混合溶液；

(3)將步驟(2)中得到的混合溶液在攪拌條件下加入蒸餾水，加入完畢后繼續(xù)攪拌0.5～1.5h，然后冷卻至室溫即得含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

步驟(1)所述的按質量比稱取原料優(yōu)選為：大豆卵磷脂2.0％、膽固醇0.5％、透明質酸1.0％、無水乙醇30％、透皮藥物1.0％、水余量；

步驟(1)中所述的透明質酸為分子量范圍400000～1800000的小分子透明質酸；

步驟(1)中所述的透皮藥物為鹽酸阿霉素、米諾地爾等；

步驟(3)中所述的攪拌是指攪拌速度為200～500r/min；

一種由上述方法制備得到的含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

上述的含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)，由于體系穩(wěn)定、透皮效率高，有利于攜帶藥物進入皮膚深層并促進藥物經皮吸收，在外用制劑、化妝品等領域中具有很廣泛的應用。

本發(fā)明的機理為：

本發(fā)明在醇脂質體的基礎上添加透明質酸，通過穿透細胞進入、經細胞間隙穿透、經皮膚附件管道開口處進入毛囊，提高其靶向性和促進皮膚透皮吸收；以醇脂質體為透皮給藥的載體，將需透皮的藥物包封于醇脂質體中，提高藥物的經皮滲透性，有利于藥物吸收進入體循環(huán)，從而發(fā)揮局部治療或全身治療作用，且具有靶向毛囊的優(yōu)勢。與現(xiàn)有技術相比較，功效成分的皮膚通過率倍量增加，藥物用量極大的減少，充分發(fā)揮了藥物各組分的藥效作用，方便了醫(yī)者對患者的便捷治療，具有廣闊的臨床應用前景。

本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術，具有如下的優(yōu)點及有益效果：

(1)透明質酸是人體表皮層及真皮層的主要基質之一，具有良好的生物相容性，改善皮膚營養(yǎng)代謝，理想的保濕因子，在保濕的同時又是良好的透皮吸收促進劑；

(2)透明質酸能夠促進纖維細胞的增殖，促進皮膚傷口的修復、減少疤痕，增強免疫力等；

(3)醇脂質體為透皮給藥的載體可避免肝首過效應明顯、生物利用度低等弊端；

(4)醇脂質體透皮給藥系統(tǒng)可有效避免腸胃炎、腹瀉、胃腸道出血等消化道不良反應；

(5)給藥次數(shù)少、給藥劑量可自我管理；

(6)含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)能顯著提高藥物的經皮滲透速率，使血液中的藥物濃度達到治療濃度，從而快速發(fā)揮藥效；

(7)本發(fā)明透皮給藥系統(tǒng)物理以及化學穩(wěn)定性良好，制備的條件容易滿足，使用方便，滿足臨床用藥要求，具有很好的實用價值。

附圖說明

圖1為實施例1制備得到的樣品采用franz透皮擴散儀測得的不同時間下通過鼠皮的累積透藥量。

圖2為實施例2制備得到的醇脂質體-透明質酸-鹽酸阿霉素的粒徑大小與分布。

圖3為實施例1制備得到的樣品對小鼠胚胎成纖維細胞(3t3細胞)的細胞毒性。

圖4為實施例1制備得到的樣品對小鼠b16黑色素瘤細胞的抗腫瘤效果圖。

具體實施方式

下面結合實施例和附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。

下列實施例中所用材料均可從商業(yè)渠道獲得。為了更好的說明本發(fā)明的透皮給藥系統(tǒng)透皮效果，實施例中用鹽酸阿霉素、米諾地爾等藥。

實施例1：含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備

(1)按質量百分比稱取原料：大豆卵磷脂2.0％、膽固醇0.5％、透明質酸(分子量400000～1800000)1％、30％無水乙醇、水相余量、鹽酸阿霉素1％。

(2)將大豆卵磷脂、膽固醇、透明質酸、鹽酸阿霉素溶解于無水乙醇中，30℃水浴鍋加熱使其完全溶解。

(3)隨后置于磁力攪拌器上，在30℃、300r·min^-1的密閉條件下攪拌，將蒸餾水注入步驟(2)所得溶液中，注完后繼續(xù)攪拌1.0h，冷卻至室溫，即得含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

實施例2：含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備

(1)按質量百分比稱取原料：大豆卵磷脂5.0％、膽固醇1.0％、透明質酸1.5％、無水乙醇30％、水相余量、鹽酸阿霉素1.5％。

(2)將大豆卵磷脂、膽固醇、透明質酸、鹽酸阿霉素溶解于無水乙醇中，30℃水浴鍋加熱使其完全溶解。

(3)隨后置于磁力攪拌器上，在30℃、300r·min^-1的密閉條件下攪拌，將蒸餾水注入醇溶液中，注完后繼續(xù)攪拌1.0h，冷卻至室溫，即得含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

實施例3：含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的制備

(1)按質量百分比稱取原料：大豆卵磷脂3.0％、膽固醇0.8％、透明質酸1％、無水乙醇30％、水相余量、鹽酸阿霉素1.0％。

(2)將大豆卵磷脂、膽固醇、透明質酸、鹽酸阿霉素、溶解于無水乙醇中，30℃水浴鍋加熱使其完全溶解。

(3)隨后置于磁力攪拌器上，在30℃、300r·min^-1的密閉條件下攪拌，將蒸餾水注入醇溶液中，注完后繼續(xù)攪拌1.0h，冷卻至室溫，即得含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)。

實施例4：含有透明質酸的醇脂質體的透皮給藥系統(tǒng)的體外皮膚滲透性測試

對實施例1制備得到的樣品采用franz透皮擴散儀進行體外皮膚滲透性試驗，結果見圖1所示，具體操作如下：小鼠一只，戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉后，放血處死小鼠，并用電剃刀除去腹部鼠毛，取下已去毛的鼠皮。用沾有生理鹽水的脫脂棉除去皮下脂肪，備用。取已經備好的小鼠皮膚固定在franz擴散池中，透皮擴散有效面積約為2.92cm²，接收池體積約為12ml，使液面與皮膚內層緊密接觸，接受液為pbs(ph7.4)，體積12ml。整個實驗過程恒溫(37+0.2)℃，300r/min攪拌。

用移液槍取實施例1制備好的樣品3ml加于上層供應室中，并用保鮮膜密封，同時覆蓋一層錫箔紙避光。在規(guī)定時間(0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、16.0、18.0、24.0h)抽取接受液2.0ml，并立即補充同溫接受液2.0ml，得到透有藥物的接受液，4℃冰箱保存。透有樣品的接受液經過濾紙過濾和pbs液稀釋后，用uv-2550紫外分光光度計測定染料的吸收值，通過計算(計算方法是本領域公知)得樣品隨時間變化透過皮膚的累積量，以及透過皮膚的最大值。結果如圖1所示，含有透明質酸的醇脂質體載鹽酸阿霉素可透過皮膚，與醇脂質體載鹽酸阿霉素、無水乙醇載鹽酸阿霉素、水載鹽酸阿霉素相比較，透皮效率高且透過皮膚的藥物累積量最大。同時從2h開始，鼠皮內側顏色有由無色變?yōu)闉榧t色化，接受液pbs的顏色也會由無色變?yōu)槲⒓t色，與鹽酸阿霉素的顏色保持了一致，說明了含有透明質酸的醇脂質體載鹽酸阿霉素能夠透過皮膚，同時與其他組相比較，該試驗組透皮效率高、透過皮膚的藥物累積量最大。

實施例5：含有透明質酸的醇脂質體的粒徑大小與分布

對實施例2制備得到的樣品，利用激光粒度儀測定粒度大小和分布，結果顯示醇脂質體、醇脂質體-鹽酸阿霉素-透明質酸、醇脂質體-透明質酸平均粒徑為1000nm。如圖2所示，平均粒徑較小，容易穿透皮膚屏障，攜帶藥物進入皮膚深層并促進藥物經皮吸收。

實施例6：含有透明質酸的醇脂質體的細胞毒性和抗腫瘤效果測定

對實施例1制備得到的樣品進行細胞毒性和抗腫瘤效果測定，結果分別如圖3、圖4所示。具體操作如下：將實施例1制備得到的樣品配置成不同濃度1:30、1:20、1:10、1:3、1:2，利用小鼠胚胎成纖維細胞(3t3細胞)進行細胞毒性測定，結果如圖3顯示，根據(jù)實施例1制備得到的樣品對正常細胞毒性很低；利用b16黑色素瘤細胞進行抗腫瘤效果測定，結果如圖4顯示，根據(jù)實施例1制備得到的樣品對腫瘤細胞具有很好的抗腫瘤效果，可見醇脂質體攜藥已進入皮膚深層并促進藥物的經皮吸收。

上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內。