發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及包含芐達(dá)明和抗真菌活性成分的組合的藥物組合物，所述的組合在治療真菌病中具有協(xié)同作用。發(fā)明背景屬于假絲酵母屬(candida)的真菌是全世界真菌感染的最常見原因之一。假絲酵母屬的許多種是它們的宿主，例如人類的無害共生體或內(nèi)共生體。屬于白假絲酵母(candidaalbicans)種和熱帶假絲酵母(candidatropicalis)種的真菌通常存在于口腔、胃腸道和陰道的粘膜上。然而，當(dāng)例如由于用抗生素長期治療或激素變化，粘膜的菌群被改變時，真菌可以異常繁殖并引起表淺感染，例如在口腔或陰道中，該感染稱為念珠菌病。在免疫抑制的人中，真菌甚至可能引起嚴(yán)重的全身感染，稱為念珠菌血癥，它們有時是致命的。目前由真菌引起的外陰陰道炎占陰道感染的約30-35％，且主要是由白假絲酵母真菌引起。外陰陰道炎伴隨陰道ph的變化，且主要癥狀是陰道和/或外陰劇烈瘙癢、滲出、炎癥和疼痛。典型地，治療是通過以乳膏劑、陰道栓劑和外用溶液的形式施用局部抗真菌藥。在嚴(yán)重和/或復(fù)發(fā)感染的情況下，口服抗真菌藥。pevaryltm是用于治療外陰陰道真菌病的市售乳膏劑，包含1％w/w的硝酸益康唑。益康唑是一種咪唑衍生物，具有廣譜抗真菌活性并且通常用于治療白假絲酵母真菌病。幾篇專利申請公開了可用于治療口腔和外陰陰道真菌病的活性成分的組合。wo96/26724公開了包含抗炎量的芐達(dá)明或其鹽、抗微生物有效量的抗微生物劑和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。us2009/0208558涉及抗真菌劑和上皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞粘附抑制劑在生產(chǎn)用于局部治療假絲酵母真菌病的組合藥物中的用途。大多數(shù)藥物組合顯示加和作用。然而，在一些情況下，組合顯示比加和作用更弱的作用或比加和作用更強(qiáng)的作用。這些組合分別稱為拮抗組合或協(xié)同組合。拮抗或協(xié)同作用是不可預(yù)期的并且是預(yù)料不到的實驗發(fā)現(xiàn)。然而，發(fā)現(xiàn)非常有效的活性劑組合(即，協(xié)同性混合物)存在挑戰(zhàn)。偶然性不是有效的路線，因為潛在藥劑組合的數(shù)量是驚人地巨大的。從機(jī)制的知識推導(dǎo)潛在組合的另一個正常發(fā)現(xiàn)策略的潛能也是有限的，因為活生物體的許多生物學(xué)終點受到多種途徑影響。這些途徑通常是未知的，且即使已知這些途徑，這些途徑相互作用產(chǎn)生生物學(xué)終效應(yīng)的方式通常是未知的。發(fā)明概述申請人面臨提供用于治療真菌病、與本領(lǐng)域已知的組合物相比具有改善的活性的藥物組合物的問題。申請人已發(fā)現(xiàn)，芐達(dá)明可以與衍生自咪唑的抗真菌活性成分聯(lián)合使用。特別地，申請人現(xiàn)在令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，芐達(dá)明與衍生自咪唑的抗真菌活性成分的組合在抑制屬于假絲酵母屬的真菌的生長中具有協(xié)同作用。因此，在第一個方面，本發(fā)明涉及包含芐達(dá)明和咪唑類抗真菌藥或其鹽的組合，以及至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物，該藥物組合物用于治療假絲酵母真菌病。有利地，根據(jù)本發(fā)明的組合物中的芐達(dá)明緩解外陰陰道瘙癢和疼痛。優(yōu)選地，所述的咪唑類抗真菌藥選自聯(lián)苯芐唑、布康唑、氯米達(dá)唑、克霉唑、氯康唑、益康唑、芬替康唑、酮康唑、異康唑、咪康唑、奈康唑、奧莫康唑、奧昔康唑、舍他康唑、硫康唑、噻康唑或它們的鹽。更優(yōu)選地，所述的咪唑類抗真菌藥選自聯(lián)苯芐唑、布康唑、克霉唑、益康唑、芬替康唑、酮康唑、異康唑、咪康唑、奧莫康唑、舍他康唑、硫康唑、噻康唑或它們的鹽。甚至更優(yōu)選地，所述的咪唑類抗真菌藥選自布康唑、益康唑、芬替康唑、異康唑、咪康唑、硫康唑或其鹽。有利地，所述的咪唑類抗真菌藥是益康唑、咪康唑或它們的鹽。優(yōu)選地，所述的假絲酵母真菌病由白假絲酵母(candidaalbicans)、葡萄牙假絲酵母(candidalusitaniae)、熱帶假絲酵母(candidatropicalis)、光滑假絲酵母(candidaglabrata)、皺落假絲酵母(candida.rugosa)、近平滑假絲酵母(candidaparapsilosis)、熱帶假絲酵母或杜氏假絲酵母(candidadubliniensis)引起。更優(yōu)選地，所述的假絲酵母真菌病由白假絲酵母、葡萄牙假絲酵母或熱帶假絲酵母引起。更優(yōu)選地，所述的假絲酵母真菌病是粘膜念珠菌病、皮膚念珠菌病、甲癬、系統(tǒng)性念珠菌病、醫(yī)源性念珠菌病、尿布念珠菌病、腸念珠菌病或念珠菌龜頭炎。甚至更優(yōu)選地，所述粘膜念珠菌病是口腔或外陰陰道粘膜念珠菌病。附圖簡述圖1形象地顯示使用1％至0.03％重量/體積的乳膏劑，用瓊脂稀釋法在包含白假絲酵母菌株atcc10231的板上測試的實施例7的乳膏劑a至c的活性結(jié)果。圖2圖示在圖1的板上進(jìn)行的光密度測定法分析的結(jié)果。發(fā)明詳述在本說明書中，表述“協(xié)同作用”意指芐達(dá)明和咪唑類抗真菌藥的組合以低于芐達(dá)明和所述抗真菌咪唑類單獨用于相同菌株以獲得相同抑制作用的濃度總和的濃度抑制屬于假絲酵母屬的真菌菌株的生長。換句話說，協(xié)同作用意指芐達(dá)明和咪唑類抗真菌藥的組合有效產(chǎn)生超過在相同菌株中每種成分的加和作用的作用。在本申請中按照相對抑制濃度(fic)指數(shù)定義協(xié)同，該指數(shù)是每種組合中使用的個體藥物的fic的總和，如meletiadisj.等人在antimicrobialagentsandchemotherapy，2010年2月，第602-609頁中所述。在嚴(yán)格的科學(xué)和優(yōu)選的定義下，協(xié)同被定義為fic指數(shù)小于0.5，即，當(dāng)每種藥物如果單獨使用產(chǎn)生相同效果所需濃度(即，每種藥物的最小抑制濃度(mic))的四分之一或更低的組合產(chǎn)生50％抑制作用時。在該嚴(yán)格的定義下，0.5的fic指數(shù)定義了加和響應(yīng)。在用于本申請目的的更廣泛的定義下，協(xié)同有效的量被定義為fic指數(shù)小于1.0，即，當(dāng)每種藥物的mic的一半或更低的組合產(chǎn)生50％抑制作用時。在這種更廣泛的定義下，1.0的fic指數(shù)定義了加和響應(yīng)。在這種測試下，可以從芐達(dá)明和抗真菌咪唑類的各種組合在每種菌株中的劑量響應(yīng)曲線制備等效線圖，線下方的點表示協(xié)同，該線將芐達(dá)明為1的fic指數(shù)與抗真菌咪唑類為1的fic指數(shù)關(guān)聯(lián)起來。該標(biāo)準(zhǔn)允許確定所測試的組合的mic，以便提供得到協(xié)同混合物所需的每種成分的mic。確切的量將取決于例如特定的菌株。在本說明書和所附權(quán)利要求書中，表述“咪唑類抗真菌藥”表示在它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)中包含咪唑環(huán)的抗真菌活性成分。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包含含量0.001重量％重量至1重量％重量，更優(yōu)選0.05重量％至0.5重量％，甚至更優(yōu)選0.08重量％至0.2重量％的芐達(dá)明。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包含含量為0.01重量％至4重量％，更優(yōu)選0.1重量％至2重量％，甚至更優(yōu)選0.5重量％至1.5重量％的咪唑類抗真菌藥或其鹽。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物用于局部應(yīng)用。優(yōu)選地，將根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物制備成適合的劑型，例如乳膏劑、軟膏劑、洗劑、凝膠劑、泡沫劑、陰道栓劑、延長釋放陰道栓劑、陰道灌洗劑或外用溶液。更優(yōu)選地，所述的劑型是乳膏劑、軟膏劑、洗劑、陰道灌洗劑或外用溶液。甚至更優(yōu)選地，所述的劑型是乳膏劑或陰道灌洗劑。藥學(xué)上可接受的賦形劑可以選自軟化劑、增稠劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、表面活性劑、緩沖劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽、乳化劑等。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包含一種或多種具有6至9的hlb的乳化劑和一種或多種具有大于9至12的hlb的乳化劑。本發(fā)明中可用的具有6至9的hlb的乳化劑是，例如，鯨蠟硬脂醇、鯨蠟硬脂醇聚醚-20、聚甘油-3-二異硬脂酸酯、山梨坦硬脂酸酯和蔗糖椰油酸酯的混合物、peg-4二月桂酸酯、甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯、月桂醇聚醚-2、月桂醇聚醚-3、peg-8二油酸酯、聚甘油-5-二油酸、硬脂酰乳酸鈉、山梨坦月桂酸酯、月桂酰聚乙二醇-6甘油酯、peg-40山梨坦過油酸酯、聚甘油-3硬脂酸酯、聚甘油-2月桂酸酯。本發(fā)明中可用的具有從高于9至12的hlb的乳化劑是，例如，月桂醇聚醚-4、peg-7甘油椰油酸酯、peg-20杏仁甘油酯、聚甘油-3棕櫚酸酯、peg-25氫化蓖麻油、硬脂酰胺、甘油硬脂酸酯peg-100硬脂酸酯的混合物、聚山梨酯85、peg-7橄欖酸酯(olivate)、鯨蠟硬脂葡萄糖苷、鯨蠟硬脂橄欖酸酯、甘油單硬脂酸酯、聚甘油-10二異硬脂酸酯、聚山梨酯85、聚甘油-5油酸酯、peg-8油酸酯、甘油硬脂酸檸檬酸酯、peg-7甘油椰油酸酯、聚甘油-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯。具有高于9至12的hlb的特別優(yōu)選的乳化劑是tefose63，即peg-6和peg-32棕櫚酸硬脂酸酯和二醇硬脂酸酯的混合物，以及gelot64，即甘油單硬脂酸酯和peg-75硬脂酸酯的混合物，它們均由法國gattefossésas制造。具有6至9的hlb的特別優(yōu)選的乳化劑是labrafilm2130cs，即月桂酰聚氧乙烯-6甘油酯類的混合物，以及l(fā)abrafilm1944cs，即油?；垩跻蚁?6甘油酯類的混合物，它們兩者都是由法國gattefossésas制造。下面的實施例旨在進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。實施例實施例1-5中公開的測試的目的在于評估芐達(dá)明和咪唑-抗真菌藥的組合對屬于假絲酵母屬真菌菌株的體外殺真菌活性。實施例11.1真菌菌株的制備將儲存在-80℃的假絲酵母屬菌株融化并且在sda平板上劃線，然后進(jìn)行第二次傳代培養(yǎng)。然后，如下制備假絲酵母屬菌株懸浮液。將10ml鹽水放入具有5g玻璃珠的50mlfalcon試管中。將第二次傳代培養(yǎng)物的菌環(huán)量的菌落細(xì)胞轉(zhuǎn)移到鹽水中，并通過將接種環(huán)對試管的濕壁摩擦以逐出細(xì)胞而使其懸浮。然后使用機(jī)械搖動器振搖管3分鐘。根據(jù)0.5號mcfarland標(biāo)準(zhǔn)，使用鹽水將懸浮液中的細(xì)胞數(shù)從1.5x106調(diào)節(jié)至5.0x106個菌落形成單位(cfu)/ml，并在550nm處讀出光密度。為了進(jìn)行計數(shù)，使用鹽水制備連續(xù)1:10稀釋液，以獲得懸浮液的10-4和10-5的稀釋液。將100μl的每種稀釋液樣品鋪板，并在37℃下培養(yǎng)48h。通過視覺檢查計數(shù)菌落數(shù)，并且發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度在期望的范圍內(nèi)。1.2瓊脂稀釋法該方法與r.moody等人，“invitroactivitiesofmiconazole，miconazolenitrateandketoconazolealoneandcombinedwithrifampinagainstcandidaspp.andtorulopsisglabratarecoveredfromcancerpatients.”，antimicrobialagentsandchemotherapy:1980，17，871-875所公開的方法類似。1.2.1活性成分溶液的制備使用標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿(92mm直徑×16mm高)。傾倒瓊脂后，讓板冷卻，然后立即使用。(a)如下文所述制備用于計算活性成分的mic的溶液。將硝酸益康唑和硝酸咪康唑各自溶于100％二甲基亞砜(dmso)至濃度為每毫升5.0mg的活性藥物。然后，在dmso中制備連續(xù)1：2稀釋液，至濃度為5.0mg/ml－0.078mg/ml。將0.250ml的硝酸益康唑溶液或硝酸咪康唑溶液各自加到24.75ml(按1:100稀釋)融化的沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂(difcolaboratoires，detroit，mich)中，混合，并且傾入標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿中，至最終濃度為50μg/ml－0.78μg/ml。將芐達(dá)明溶于水至12.5mg/ml的濃度。然后，在水中制備連續(xù)1：2稀釋液，至濃度為12.5mg/ml－1.56mg/ml。將1ml芐達(dá)明的各溶液加到24ml(按1:25稀釋)融化的沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂中，混合，傾入標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿中，至最終濃度為0.5mg/ml－0.0625mg/ml。作為陽性對照，來自1600μg/ml儲備溶液的兩性霉素b在dmso中被稀釋至具有50μg/ml－6.25μg/ml的濃度的溶液。將這些溶液在沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂中以1:100稀釋，混合并傾入標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿中，至最終濃度為0.5μg/ml－0.0625μg/ml。在本實驗中包括水、dmso和水+dmso的陰性對照。(b)為了進(jìn)行協(xié)同研究，在dmso中制備具有2.5mg/ml－0.098mg/ml濃度的益康唑和咪康唑硝酸鹽的另外的溶液，如第1.2.1(a)段中所公開的制備連續(xù)1:2稀釋液。此外，在水中制備具有6.25mg/ml－1.56mg/ml的濃度的芐達(dá)明的另外的溶液，如第1.2.1(a)段中所公開的制備連續(xù)1:2稀釋液。此外，將濃度為6.25mg/ml的芐達(dá)明溶液用水按1:1.43稀釋，得到具有4.37mg/ml的濃度的芐達(dá)明溶液。然后將0.250ml的益康唑或咪康唑硝酸鹽的各溶液和1ml的芐達(dá)明的各溶液加到23.750ml融化的沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂(difcolaboratoires，detroit，mich)中，混合，傾入標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿中，由此得到25μg/ml－0.098μg/ml益康唑或咪康唑的終濃度和0.25mg/ml－0.0625mg/ml和0.175mg/ml的芐達(dá)明的終濃度。1.2.2易感性測試(a)為了計算mic，給按照第1.2.1(a)段中所述制備的每個標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿的表面接種如第1.1段中所述制備的假絲酵母屬菌株懸浮液的4個斑點(20μl接種體積)。將接種到含有兩性霉素b的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿上的測試懸液用作陽性對照。將接種到不含藥物但含有水、dmso和水+dmso的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿上的測試懸浮液用作陰性對照。將所有培養(yǎng)皿在35℃下培養(yǎng)48h。(b)為了進(jìn)行協(xié)同研究，給如第1.2.1(b)段中所述制備的每個培養(yǎng)皿的表面接種如第1.1段中所述制備的假絲酵母屬菌株懸浮液的四個斑點(20μl接種體積)，并在35℃下培養(yǎng)48小時。1.3肉湯稀釋法用于肉湯稀釋法的方法與“eucastdefinitivedocumentedef7.1:methodforthedeterminationofbrothdilutionmicsofantifungalagentsforfermentativeyeasts”(clinmicrobiolinfect2008；14:398-408)中所公開的方法類似。1.3.1活性成分溶液的制備(a)如下文所述制備用于計算活性成分的mic的溶液。將硝酸益康唑和硝酸咪康唑各自溶于100％二甲基亞砜(dmso)至濃度為每毫升10.0mg活性藥物。然后，在dmso中制備連續(xù)1：2稀釋液，至濃度為10.0mg/ml－0.078mg/ml。將這些溶液在不含nahco3的包含2％葡萄糖、3-(n-嗎啉代)丙磺酸(mops，來自sigma)的rpmi-1640(來自lifetechnologies)中進(jìn)一步按照1:100稀釋至終濃度為100μg/ml－0.78μg/ml。將硝酸克霉唑溶于100％二甲基亞砜(dmso)至濃度為每毫升1.250mg活性藥物。然后，在dmso中制備連續(xù)1：2稀釋液至濃度為1.250mg/ml－0.0196mg/ml。將這些溶液在不含nahco3的包含2％葡萄糖、3-(n-嗎啉代)丙磺酸(mops，來自sigma)的rpmi-1640(來自lifetechnologies)中進(jìn)一步按1:100稀釋至終濃度為12.50μg/ml－0.196μg/ml。將硝酸氟康唑溶于100％二甲基亞砜(dmso)至濃度為每毫升5.0mg活性藥物。然后，在dmso中制備連續(xù)1：2稀釋液至濃度為5.0mg/ml－0.3125mg/ml。將這些溶液在不含nahco3的包含2％葡萄糖、3-(n-嗎啉代)丙磺酸(mops，來自sigma)的rpmi-1640(來自lifetechnologies)中進(jìn)一步按1:100稀釋至終濃度為50μg/ml－3.125μg/ml。將芐達(dá)明溶于水中至25mg/ml的濃度。然后，在水中制備連續(xù)1:2的稀釋液至濃度為25mg/ml－3.125mg/ml。將1ml的各溶液加到24ml(1:25稀釋)的不含nahco3的包含2％葡萄糖、3-(n-嗎啉代)丙磺酸(mops，來自sigma)的rpmi-1640(來自lifetechnologies)中至終濃度為1mg/ml－0.125mg/ml。作為陽性對照，來自1600μg/ml儲備溶液的兩性霉素b在dmso中被稀釋至具有200μg/ml－50μg/ml的濃度的溶液。將這些溶液在不含nahco3的包含2％葡萄糖、3-(n-嗎啉代)丙磺酸(mops，來自sigma)的rpmi-1640(來自lifetechnologies)中進(jìn)一步按1:100稀釋至終濃度為2μg/ml－0.5μg/ml。在本實驗中包括水、dmso和水+dmso的陰性對照。(b)為了進(jìn)行協(xié)同研究，如第1.3.1(a)段中所述，在rpmi-1640中國制備了具有濃度為100μg/ml－0.049μg/ml的硝酸益康唑、硝酸咪康唑、硝酸克霉唑和硝酸氟康唑的其它溶液。此外，如第1.3.1(a)段中所公開的，在rpmi-1640中制備了具有濃度為1mg/ml－0.25mg/ml的芐達(dá)明的其它溶液。此外，用rpmi-1640將濃度為1mg/ml的芐達(dá)明溶液進(jìn)一步按1:1.43稀釋至濃度為0.7mg/ml。1.3.2易感性測試使用包含具有標(biāo)稱容量約為300μl/孔的孔的微量稀釋板。使如第1.1段中所述制備的假絲酵母屬菌株懸浮液在沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基sda(oxoid)上生長。將菌落在磷酸鹽緩沖鹽水(pbs)中稀釋，并使用mcfarland0.5標(biāo)準(zhǔn)將懸浮液調(diào)節(jié)至約1-5x105cfu/ml，并在550nm處讀取光密度。通過將來自假絲酵母屬菌株的第二次傳代培養(yǎng)的單一菌落懸浮以獲得類似于0.5mcfarland標(biāo)準(zhǔn)的光密度(約1-5x105cfu/ml)來制備標(biāo)準(zhǔn)接種物。(a)為了計算mic，制備微量稀釋板，其在每個孔中包含100μl如第1.3.1(a)段中所述得到的活性成分的每種溶液。然后給所述孔接種100μl如上文所公開獲得的包含1-5x105cfu/ml的假絲酵母屬菌株懸浮液。在每個孔中，最終的接種密度和活性成分的最終濃度是所用的一半(即最終接種密度為0.5-2.5x105cfu/ml，益康唑和咪康唑的濃度為50μg/ml－0.39μg/ml，克霉唑的濃度為6.25μg/ml－0.098μg/ml，氟康唑的濃度為50μg/ml－3.125μg/ml，且芐達(dá)明的濃度為0.5mg/ml－0.0625mg/ml)。將包含100μl兩性霉素b的接種了100μl相同的假絲酵母屬懸浮液的孔用作陽性對照。將包含100μl水、dmso和水+dmso和接種了100μl相同的假絲酵母屬懸浮液的無菌不含藥物的培養(yǎng)基的孔用作陰性對照。將微量稀釋板在35℃下培養(yǎng)48小時。(b)為進(jìn)行協(xié)同研究，制備在每個孔中包含50μl的益康唑和咪康唑的每種溶液以及50μl如第1.3.1(b)段中所公開得到的芐達(dá)明的每種溶液的微量稀釋板。然后，用100μl的1-5x105cfu/ml假絲酵母屬懸浮液接種所述孔。在每個孔中，最終的接種密度是所用的一半(即0.5-2.5x105cfu/ml)，且活性成分的終濃度是所用的四分之一(即，益康唑和咪康唑的濃度為25μg/ml－0.098μg/ml，克霉唑的濃度為0.78μg/ml－0.049μg/ml，氟康唑濃度為25μg/ml－3.125μg/ml，且芐達(dá)明的濃度為0.25mg/ml－0.0625mg/ml和0.175mg/ml)。將微量稀釋板在35℃下培養(yǎng)48小時。1.4mic的計算產(chǎn)生對某種假絲酵母屬菌株的生長完全抑制的最低藥物濃度被認(rèn)為是對該菌株的最小抑制濃度(mic)。使用第1.2段中所公開的瓊脂稀釋法得到對葡萄牙假絲酵母34449的mic值。使用第1.3段中所公開的肉湯稀釋法得到了對白假絲酵母mya-427、熱帶假絲酵母750、白假絲酵母10231和白假絲酵母mya-574氟康唑抗性的mic值。硝酸益康唑、硝酸咪康唑、硝酸克霉唑、硝酸氟康唑和芐達(dá)明對所測試的假絲酵母屬菌株的mic值公開在下表1中。表1用作陰性對照的水、dmso和水+dmso顯示沒有抑制作用(n/a)。1.5協(xié)同作用用在第1.2段中公開的瓊脂稀釋法，評估了芐達(dá)明和硝酸益康唑在沙氏葡萄糖培養(yǎng)基瓊脂中對葡萄牙假絲酵母34449的殺真菌活性。根據(jù)meletiadisj.等人在antimicrobialagentsandchemotherapy，2010年2月，第602-609頁中所述，通過計算相對抑制濃度(fic)評估了包含芐達(dá)明和硝酸益康唑的組合的協(xié)同作用。fic值比較了包含芐達(dá)明和硝酸益康唑的組合的抗真菌活性與單獨測試的活性成分各自的抗真菌活性。使用下列等式計算了包含芐達(dá)明和硝酸益康唑的組合對每種假絲酵母屬菌株的fic值(fic[組合b+e])：fic[組合b+e]＝fic[b]+fic[e]其中：fic[b]是芐達(dá)明對特定假絲酵母屬菌株的相對抑制濃度，其被計算為在亞-mic量的益康唑的存在下芐達(dá)明的mic(mic(b+e))與單獨的芐達(dá)明的mic(mic(b))之間的比值，如下：fic[e]是益康唑?qū)μ囟俳z酵母菌株的相對抑制濃度，其被計算為在亞-mic量的芐達(dá)明的存在下益康唑的mic(mic(e+b))與單獨的益康唑的mic(mic(e))之間的比值，如下：根據(jù)meletiadisj.等人，antimicrobialagentsandchemotherapy，2010年2月，第602-609頁所述，將協(xié)同定義為低于0.5的fic。表2在上表中，字母“g”表示觀察到了葡萄牙假絲酵母34449的生長。使用上文公開的等式計算了芐達(dá)明和硝酸益康唑的組合的fic(fic[組合b+e])：fic[b]＝0.125/0.5＝0.25fic[e]＝0.098/1.56＝0.0628fic[組合b+e]＝0.0628+0.25＝0.3128上述結(jié)果證實，當(dāng)活性成分芐達(dá)明和硝酸益康唑在亞-mic濃度下聯(lián)用時，觀察到了對葡萄牙假絲酵母34449的協(xié)同殺真菌活性。下列實施例2－5概括了對于其它假絲酵母屬菌株得到的結(jié)果。實施例2用第1.3段中公開的肉湯稀釋方法，評估了芐達(dá)明和硝酸益康唑或硝酸咪康唑在rpmi-1640中對白假絲酵母mya-427的殺真菌活性。將結(jié)果概括在表3中。表3g＝觀察到了生長上述數(shù)據(jù)清楚地表明，與芐達(dá)明的組合使得硝酸益康唑的mic從表1中所示的25μg/ml降低至1.56μg/ml，并且硝酸咪康唑的mic從表1中所示的25μg/ml降低至0.78μg/ml。實施例3用第1.3段中公開的肉湯稀釋方法，評估了芐達(dá)明和硝酸益康唑或硝酸咪康唑在rpmi-1640中對熱帶假絲酵母750的殺真菌活性。將結(jié)果概括在表4中。表4g＝觀察到了生長上述數(shù)據(jù)清楚地表明，與芐達(dá)明的組合使得硝酸益康唑的mic從表1中所示的12.5μg/ml降低至1.56μg/ml，并且硝酸咪康唑的mic從表1中所示的6.25μg/ml降低至0.78μg/ml。實施例3a用第1.3段中公開的肉湯稀釋方法，評估了芐達(dá)明和硝酸克霉唑或硝酸氟康唑在rpmi-1640中對熱帶假絲酵母750的殺真菌活性。將結(jié)果概括在表4a中。表4ag＝觀察到了生長上述數(shù)據(jù)清楚地表明，與芐達(dá)明的組合使得硝酸克霉唑的mic從表1中所示的6.25μg/ml降至0.098μg/ml，并且硝酸氟康唑的mic從表1中所示的50μg/ml降低至6.25μg/ml。使用上文公開的等式計算的芐達(dá)明和硝酸克霉唑的組合的fic(fic[組合b+c])結(jié)果為0.37。使用上文公開的等式計算的芐達(dá)明和硝酸氟康唑的組合的fic(fic[組合b+f])結(jié)果為0.48。實施例4用第1.3段中公開的肉湯稀釋方法，評估了芐達(dá)明和硝酸益康唑或硝酸咪康唑在rpmi-1640中對白假絲酵母10231的殺真菌活性。將結(jié)果概括在表5中。表5g＝觀察到了生長上述數(shù)據(jù)清楚地表明，與芐達(dá)明的組合使得硝酸益康唑的mic從表1中所示的25μg/ml降低至3.125μg/ml，并且硝酸咪康唑的mic從表1中所示的6.25μg/ml降至1.56μg/ml。實施例5用第1.3段中公開的肉湯稀釋方法，評估了芐達(dá)明和硝酸益康唑或硝酸咪康唑在rpmi-1640中對耐氟康唑的白假絲酵母mya-574的殺真菌活性。將結(jié)果概括在表6中。表6g＝觀察到了生長上述數(shù)據(jù)清楚地表明，與芐達(dá)明的組合使得硝酸益康唑的mic從表1中所示的25μg/ml降低至12.5μg/ml，并且咪康唑硝酸鹽的mic從表1中所示的50μg/ml的降低至12.5μg/ml。此外，當(dāng)與益康唑組合時，芐達(dá)明的mic從表1中所示的0.5mg/ml降低至0.125mg/ml，并且當(dāng)與咪康唑組合時，降低至0.0625mg/ml。實施例6下表7顯示了三個根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物的制劑，其呈用于局部應(yīng)用的乳膏劑形式。所有值都以相對于制劑總含量的重量百分比表示。表7miglyol812：辛酸/癸酸三甘油酯(sasololefin&surfactantsgmbh，德國compritol888ato：山萮酸甘油酯(gattefossésas，法國)gelot64：單硬脂酸甘油酯和peg-75硬脂酸酯的混合物-hlb10(gattefossésas，法國)tefose63：peg-6和peg-32棕櫚硬脂酸酯/硬脂酸乙二醇酯-hlb10(gattefossésas，法國)labrafilm1944cs：油?；垩跻蚁?6甘油酯-hlb9(gattefossésas，法國)labrafilm2130cs：月桂?；垡叶?6甘油酯-hlb9(gattefossésas，法國)測試了乳膏制劑f1用于評估施用8小時后活性成分的釋放。franz擴(kuò)散池實驗用于分析鹽酸芐達(dá)明通過基底膜的體外透皮通量率。franz擴(kuò)散池是用于測量透皮通量率的常見和眾所周知的方法。一般性franz池方法描述在franz，t.j.，percutaneousabsorption:ontherelevanceofinvitrodata.jinvestderm，64:190-195(1975)中。以下是本實施例中使用的方法。使用具有0.45μm的孔隙的再生纖維素膜。在使用前用nacl0.9％重量/體積溶液調(diào)節(jié)該膜，目的在于從孔中除去空氣。膜與產(chǎn)品的接觸面積為0.6cm2。使接收室在37℃下恒溫。將1克乳膏制劑1施用于供體室中的膜上。在8小時期間每小時取出0.3mlnacl0.9％重量/體積接收溶液，并用新鮮溶液替換。使用hplc方法分析收集的樣品。將結(jié)果報告為相對于時間每單位面積釋放的活性成分的累積量。將測試結(jié)果概括在下表8中。表8進(jìn)度(h)活性成分的釋放(μg/cm2)0015.4028.00310.13412.04513.41614.90716.50817.40實施例7與乳膏劑(僅包含1％硝酸益康唑的市售乳膏劑)(乳膏劑b)和安慰劑(乳膏劑c)的活性相比，測試了包含表7的乳膏劑f1的相同成分的本發(fā)明的乳膏制劑(乳膏劑a)的抗假絲酵母活性。白假絲酵母菌株atcc10231用于研究乳膏劑a－c的抗真菌特性，特別進(jìn)一步證實芐達(dá)明的存在對益康唑的殺真菌活性具有影響。為此目的，根據(jù)asterholm等人(actadermvenereol2010；90:239–245)建立了瓊脂稀釋測定法，從而可以測試所述乳膏劑。由于技術(shù)需要，所述乳膏劑必須在瓊脂中稀釋，使得最終乳膏劑濃度在0.03％－1％(w/v)的范圍內(nèi)。如附圖1和附圖2中所報道的，所述板的目視檢查和光密度測定分析確認(rèn)，芐達(dá)明的存在增加了益康唑的殺真菌活性。實際上，光密度測定分析的數(shù)據(jù)表明，四分之一濃度的乳膏劑a足以獲得類似于使用乳膏劑b觀察到的生長減少。當(dāng)前第1頁12