發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及用于治療由乙型肝炎病毒(hbv)和丁型肝炎病毒(hdv)引起的感染，特別是乙型和丁型肝炎的新型組合物。該組合物包含如下物質(zhì)的組合：作為hbv/hdv進入抑制劑的藥劑，和核苷酸/核苷類似物(nuc)或免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素。
發(fā)明背景
與乙型肝炎病毒相關(guān)的流行病學(xué)和醫(yī)學(xué)問題
乙型肝炎是由hbv引起的潛在的危及生命的肝臟感染。全球約有20億人被hbv感染，而超過3.5億人患有慢性肝臟感染(who資料頁，2008)。
慢性乙型肝炎(chb)是嚴重的全球公共衛(wèi)生問題。hbv相關(guān)性慢性肝病每年造成120萬人死亡，導(dǎo)致全世界第十大死因(lavanchy，2004)。沒有適當?shù)闹委?，長期感染的15-25％將由于慢性肝病的嚴重和致命并發(fā)癥而過早死亡(cdc資料頁，2006)。實際上，只有相對較小比例的受影響患者接受藥物治療。
與丁型肝炎病毒相關(guān)的流行病學(xué)和醫(yī)學(xué)問題
長期hbv感染的約5％具有hdv共感染(taylor，2006)。hdv是一種小的rna病毒，需要hbv的輔助功能用于病毒體裝配和繁殖，并利用hbv包膜進行病毒釋放和感染新細胞。針對hbv的免疫也可以防止hdv感染。與單獨的hbv感染相比，hdv的存在與肝臟疾病的更嚴重和快速的進展相關(guān)。在hbv/hdv共感染中，肝硬化和癌癥發(fā)生早10-15年，共感染個體的5年死亡率是hbv單感染的兩倍(德國hbv感染預(yù)防、診斷和治療指南，2007)。
hdv共感染患者的治療選擇非常有限。只有干擾素在一小部分患者中表現(xiàn)出一定程度的療效，其中有約25％的病毒學(xué)和生物化學(xué)響應(yīng)。針對hbv的抗病毒藥物對hdv無效(taylor，2006)。
治療目的
存在關(guān)于hbv感染的數(shù)個國家級指南，并且歐洲肝臟研究協(xié)會(easl)臨床實踐指南最近已公布(“肝病學(xué)雜志”，2009年)。根據(jù)該指南，乙型肝炎治療的目標是通過防止疾病進展為肝硬化、終末期肝病、肝癌和死亡而提高生活質(zhì)量和生存質(zhì)量。治療的理想終點是伴有或不伴有抗hbs的血清轉(zhuǎn)換的持續(xù)乙型肝炎病毒s抗原(hbsag)損失。這與chb的活動的完全和明確的緩解和改善的長期結(jié)果有關(guān)。然而，這一目標只能在少數(shù)可用治療的患者中實現(xiàn)。因此，對于乙型肝炎病毒e抗原(hbeag)陽性患者來說，持久的hbeag血清轉(zhuǎn)換是下一個最理想的目標；在不能實現(xiàn)hbeag血清轉(zhuǎn)換的hbeag陽性患者或hbeag陰性患者中，維持不可檢測的dna水平是下一個最理想的目標。
hbv病毒
乙型肝炎病毒(hbv)是小型包膜dna病毒，通過在受感染肝細胞的細胞質(zhì)中的前基因組rna轉(zhuǎn)錄物的逆轉(zhuǎn)錄來復(fù)制其基因組。它們分為家族肝炎病毒科(hepadnaviridae)，且適應(yīng)哺乳動物(靈長類動物和嚙齒動物)和鳥類，導(dǎo)致急性和持續(xù)性感染。由hbv易感細胞系heparg和基于原代人肝細胞(phh)和樹鼩(tupaiabelangeri)初級肝細胞的系統(tǒng)的研究顯示，病毒感染性可以分配到三種病毒包膜蛋白中的兩種中的不同亞結(jié)構(gòu)域。三種hbv包膜蛋白稱為l(大)、m(中)和s(小)。它們形成蛋白質(zhì)性質(zhì)的外部病毒殼，其被嵌入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(er)衍生的脂質(zhì)雙層中。它們的編碼mrna起源于一個開放閱讀框架。由于它們的三個起始密碼子是同相(inphase)的，它們共享c末端226個氨基酸長的s-結(jié)構(gòu)域，其通過四個推定的跨膜螺旋(tm結(jié)構(gòu)域)將蛋白質(zhì)錨定在脂質(zhì)雙層中。s蛋白驅(qū)動顆粒形成，因此在病毒組裝中起重要作用。s結(jié)構(gòu)域進一步被證明參與病毒入侵。與s結(jié)構(gòu)域的n末端連接，m和l蛋白具有兩個親水性延伸，一個為55個氨基酸，根據(jù)基因型，另一個為108個(基因型d)、118個(基因型e和g)或119個(基因型a，b，c，f，h)氨基酸，分別稱為前s2(m)和前-s1(l)。所有肝炎病毒的l蛋白均含有n-肉豆蔻酰轉(zhuǎn)移酶的識別基序，因此經(jīng)歷該修飾。l中缺乏典型的分泌信號，導(dǎo)致其前s結(jié)構(gòu)域的初始細胞質(zhì)取向。合成后，肉豆蔻?；约皌m螺旋向er膜中的納入，l的前s結(jié)構(gòu)域穿過脂質(zhì)雙層，允許其部分在顆粒外部變得可及。在病毒粒子中，l、m和s蛋白的化學(xué)計量比為約1:1:4，而分泌更多的非感染性亞病毒顆粒(svp)幾乎僅包含s蛋白和僅有痕量的l蛋白。
已經(jīng)在l、m和s蛋白內(nèi)鑒定了病毒附著、特異性受體結(jié)合或融合的關(guān)鍵要素。發(fā)現(xiàn)l的肉豆蔻?；瘜τ诓《靖腥臼菑娭菩缘?6,16)。然而，n末端肉豆蔻酸部分在抑制活性中的要求在某種程度上是可變的。通過其它疏水飽和和不飽和脂肪酸部分或甚至通過膽固醇代替肉豆蔻酸允許根據(jù)相對疏水性調(diào)節(jié)特異活性。因此，親脂性本身且不是特定的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)似乎在該分子的這部分中起關(guān)鍵作用。
在殘基1至78的n末端前s1序列內(nèi)的5個氨基酸的連續(xù)缺失消除了hbv感染性。相比之下，前s2結(jié)構(gòu)域的大多數(shù)部分對于感染而言是非必要的。使用hdv，這些結(jié)果得到確認，表明這兩種病毒共有非常相似的進入模式。進一步發(fā)現(xiàn)，作為hbvl蛋白或s蛋白的一部分的s結(jié)構(gòu)域是病毒包膜的主要成分，是感染性所需的。在由殘基1至78組成的前s1感染性決定簇內(nèi)鑒定出兩個可分離且不同的功能：一個與通過用肝細胞特異性受體的肽干擾的抑制活性相關(guān)，另一個涉及氨基酸49至78且尚不知曉。
目前的hbv療法
用于治療慢性hbv感染的批準藥物屬于兩類：抗病毒劑和免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素。
目前可用的所有hbv抗病毒藥物均屬于核苷/核苷酸類似物(nuc)類別，并作為聚合酶抑制劑。最近批準的恩替卡韋和替諾福韋被認為優(yōu)于其它批準的藥物(拉米夫定，阿德福韋酯和替比夫定)，這歸因于治療原初患者的較高效力以及對于抗性的較高遺傳屏障。目前，所有經(jīng)批準的抗hbv藥物都表現(xiàn)出良好的安全性。
所有這些產(chǎn)品阻止病毒復(fù)制并導(dǎo)致血漿病毒dna的快速降低。患者也可能從肝臟組織學(xué)的改善中獲益。然而，hbv治療的最終目標，hbsag血清轉(zhuǎn)換，在兩年后只有4％的替諾福韋患者實現(xiàn)，而其它藥物(德國hbv感染診斷和診治指南，2007年)甚至更低。此外，70％的拉米夫定治療患者在治療5年后對藥物產(chǎn)生耐藥性。對于阿德福韋來說，耐藥性發(fā)展較慢，18％的患者在4年后出現(xiàn)耐藥。對于恩替卡韋，這一數(shù)字在對原初患者進行6年的治療中為1.5％。然而，對于核苷/核苷酸類似物的耐藥性的大批患者將在未來幾年內(nèi)積累，尤其是隨著以前用拉米夫定治療的患者發(fā)展出對恩替卡韋的較高水平的耐藥性。逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑不阻止在原初肝細胞中建立cccdna(共價閉合的環(huán)狀dna)。
干擾素-α(infa)作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，其作用模式復(fù)雜且尚不完全了解，其涉及激活免疫系統(tǒng)以消除感染的肝細胞。幾種制劑以每周兩次或三次的5-10mg單位的通常劑量進行銷售。可獲得的還有具有皮下貯庫延遲釋放的聚乙二醇化形式，其允許以更加患者友好的方式應(yīng)用，每周僅一次。所有干擾素治療均通過皮下注射給藥。干擾素治療慢性乙型肝炎的主要缺點是中度功效(治療48周后，總體hbsag血清學(xué)轉(zhuǎn)換率約3-6％，不可檢測的hbvdna約20％，取決于hbv基因型：lau等，2005；fink等，2006)和顯著副作用的組合。這些可能包括細胞因子綜合征，嚴重抑郁癥和自殺，并且由相當一部分患者群體所經(jīng)歷。干擾素是在hbv/hdv共感染中顯示一些治療效果的唯一治療方法。然而，在該群體中的療效相當有限，只有25％表現(xiàn)出持續(xù)的病毒學(xué)和生物化學(xué)反應(yīng)(采訪德國漢諾威醫(yī)學(xué)院的h.wedemeyer博士)。
因此，目前用于慢性乙型肝炎的療法極少引起血清學(xué)治愈，因此通常需要用hbv聚合酶抑制劑進行長期治療。缺乏用于大多數(shù)丁型肝炎患者的有效治療方法。
hbv/hdv進入抑制劑
最近已經(jīng)描述了一個新類別的抗hbv和hdv分子，病毒進入抑制劑。其假定的抗病毒作用機制是以高度特異性，高度穩(wěn)定地結(jié)合到位于分化的肝細胞的基底側(cè)膜的na+-?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(ntcp)，一種鈉/膽汁酸共轉(zhuǎn)運蛋白(也稱為肝膽汁酸轉(zhuǎn)運蛋白(lbat))。ntcp結(jié)合導(dǎo)致病毒和細胞膜的生產(chǎn)性融合被破壞，從而防止細胞的感染。這種獨特的作用機制允許解決兩個最重要的醫(yī)療需求，即長期的hbv消除以及針對丁型肝炎(或丁型肝炎(delta))病毒(hdv)的抗病毒活性。
病毒進入抑制劑衍生自大(l)hbv表面蛋白的n末端結(jié)構(gòu)域，前s1。hbv/hdv進入抑制劑的一個實例是衍生自大(l)hbv表面蛋白的前s1結(jié)構(gòu)域的線性47-氨基酸化學(xué)合成的肽(商品名為myrcludexb)，其由天然產(chǎn)生的l氨基酸組成，具有n-末端肉豆蔻酰部分和c-末端羧酰胺。
聯(lián)合治療
在醫(yī)療界，在有限的治療療程后，人們針對hbsag損失的聯(lián)合治療有很大的興趣。然而，在hbv和hdv感染中使用干擾素與核苷/核苷酸的組合試驗的結(jié)果目前令人失望。因此，將聚乙二醇化的干擾素-α與核苷類似物拉米夫定組合不會產(chǎn)生功效的增加(lau等，2005)。
總而言之，對hbv和hdv感染和所導(dǎo)致的疾病的進一步療法的需求尚未被滿足。特別地，這樣的療法應(yīng)針對hbsag損失，利用或不利用向抗hbs抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換，這是最接近完全治愈的效果。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)：hbv/hdv前s1進入抑制劑與核苷酸/核苷類似物或免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素的組合導(dǎo)致丁型肝炎中的hdvrna和/或乙型和丁型肝炎中的hbsag的降低或喪失。本發(fā)明提供了對于hbv/hdv感染、乙型或丁型肝炎或慢性乙型或丁型肝炎的新型聯(lián)合療法。
一方面，提供了包含na+-?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(ntcp)的抑制劑和選自核苷酸類似物、核苷類似物和免疫調(diào)節(jié)劑的其它活性成分的合并物或組合物。合并物或組合物可以包含多于一種其它活性成分。組合物還可以包含藥學(xué)上可接受的賦形劑，載體等。
ntcp抑制劑可以是小分子或前s1肽抑制劑，其中前s1肽抑制劑包含hbv病毒的前s1肽或其功能片段。可以例如基于其結(jié)合ntcp、抑制ntcp或抑制hbv/hdv細胞進入的能力來評估片段的功能性。優(yōu)選的ntcp抑制劑是前s1肽抑制劑。
hbv病毒可能是任何hbv病毒，例如乙型肝炎病毒株α1、hbv株lsh、土撥鼠hbv、絨毛猴hbv(wmhbv)、hbv亞型ad、adr、adw、adyw、ar或ayw或hbv基因型a至h。
前s1肽抑制劑可以至少包含hbv病毒的前s1肽的氨基酸2至9和/或11至15。或者，前s1肽抑制劑可以至少包含hbv病毒的前s1肽的氨基酸9至15或11至15。前s1肽抑制劑可包含hbv病毒的前s1肽的氨基酸2至48或2至21或由其組成。
示例性的前s1肽抑制劑包含hbv前-s1共有序列的位置2和48之間的氨基酸序列：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafransnnpdwdfnpnkdhwpeankvg
(seqidno:12),或
hbv前-s1基因型c序列的2至48位的氨基酸序列：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeanqvg
(seqidno:14),或
hbv前-s1基因型c序列的2至48位的氨基酸序列，其中第46位具有氨基酸取代(gin(q)→lys(k))：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeankvg
(seqidno:13),或
hbv前-s1基因型d序列的2至48位的氨基酸序列：
gqnlstsnplgffpdhqldpafrantanpdwdfnpnkdtwpdankvg(seqidno:5)。
前s1肽抑制劑可以在n末端被疏水部分修飾。疏水部分修飾可以通過?；缬萌舛罐Ⅴ；蛴仓＿M行?；?/p>
優(yōu)選的前s1肽抑制劑具有氨基酸序列：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeankvg(seqidno:13),
其中該肽在n末端被肉豆蔻酰修飾。
優(yōu)選的前s1肽抑制劑是具有以下化學(xué)式的myrcludexb：
n-肉豆蔻酰-甘氨酰-l-蘇氨酰-l-天冬酰胺酰-l-亮氨酰-l-絲氨酰-l-纈氨酰-l-脯氨酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰-甘氨酰-l-苯丙氨酰-l-苯丙氨酰-l-脯氨酰-l-天冬氨酰-l-組氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-亮氨酰-l-天冬氨酰-l-脯氨酰-l-丙氨酰-l-苯丙氨酰-甘氨酰-l-丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-絲氨酰-l-天冬酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-天冬氨酰-l-色氨酰-l-天冬氨酰-l-苯丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-天冬酰胺酰-l-賴氨酰-l-天冬氨酰-l-組氨酰-l-色氨酰-l-脯氨酰-l-谷氨酰-l-丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-賴氨酰-l-纈氨酰-甘氨酰胺，乙酸鹽。
可以在c末端或其它地方修飾該前s1肽抑制劑以保護該肽免于降解。可用于此目的的示例性部分是d-氨基酸、環(huán)狀氨基酸、修飾的氨基酸、天然或合成聚合物如聚乙二醇(peg)。
以下，可將上述的ntcp抑制劑(包括前s1肽抑制劑)稱為抑制劑。該名稱包括本發(fā)明的所有ntcp抑制劑，優(yōu)選前s1肽抑制劑。
免疫調(diào)節(jié)劑可以是治療性疫苗、佐劑或干擾素，例如干擾素α(ifna)，例如干擾素α2a或干擾素α2b。組合物中的干擾素可以是聚乙二醇化的干擾素(peg-ifn)。
核苷類似物可以是拉米夫定、替比夫定或恩替卡韋。
核苷酸類似物可以是替諾福韋或阿德福韋。
以下將上述其它活性成分稱為其它活性成分或其它活性劑。該名稱包括本發(fā)明的所有核苷類似物、核苷酸類似物和免疫調(diào)節(jié)劑。
在本發(fā)明的合并物或組合物中可以使用兩種或更多種上述其它活性成分。
因此，提供包括以下成分的組合和組合物：
前s1肽抑制劑如myrcludexb和ifna或peg-ifna；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和拉米夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替比夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和恩替卡韋；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替諾福韋；或
前s1肽抑制劑如myrcludexb和阿德福韋。
合并物或組合物中myrcludexb的單位劑量可以為0.5mg至20mg，例如1mg，2mg，3mg，4mg，5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg，優(yōu)選2mg，5mg或10mg。
合并物或組合物中的干擾素或聚乙二醇化的干擾素的聯(lián)合劑量(unitedose)可以在10μg和300μg之間，例如10μg，30μg，50μg，70μg，90μg，100μg，120μg，130μg，140μg，150μg，160μg，170μg，180μg，190μg，200μg，210μg，220μg，230μg，240μg，250μg，260μg，270μg，280μg，290μg或300μg，優(yōu)選為180μg。
合并物或組合物中拉米夫定的單位劑量可以為10mg至100mg，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg，優(yōu)選100mg。
合并物或組合物中恩替卡韋的單位劑量可以為0.1mg至10mg，例如0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，7.0mg，8.0mg，9.0mg，10.0mg，優(yōu)選0.5mg或1.0mg。
合并物或組合物中替比夫定的單位劑量可以為100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mgmg，優(yōu)選500mg，600mg或700mg。
合并物或組合物中替諾福韋的聯(lián)合劑量可以為100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mgmg，優(yōu)選200mg，250mg，245mg或300mg。
合并物或組合物中阿德福韋的聯(lián)合劑量可以為5mg至20mg，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg，優(yōu)選10mg。
另一方面，本發(fā)明提供了用于治療對象hbv或hdv感染、乙型肝炎、慢性乙型肝炎、丁型肝炎或慢性乙型肝炎的方法的如上定義的合并物或組合物。
另一方面，本發(fā)明提供了用于治療對象中hbv或hdv感染、乙型肝炎、慢性乙型肝炎、丁型肝炎或慢性乙型肝炎的方法的前s1肽抑制劑，其中所述方法包括施用其它活性成分，其中所述其它活性成分選自免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選干擾素；核苷酸類似物，優(yōu)選替諾福韋或阿德福韋；和核苷類似物，優(yōu)選拉米夫定、替比夫定和恩替卡韋。
另一方面，本發(fā)明提供一種治療對象中hbv或hdv感染、乙型肝炎、慢性乙型肝炎、丁型肝炎或慢性戊型肝炎的方法，其包括向所述對象施用na+-?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(ntcp)，優(yōu)選前s1肽抑制劑，以及選自核苷酸類似物、核苷類似物和免疫調(diào)節(jié)劑的其它活性成分。
所述抑制劑和所述其它活性成分可以作為上述合并物或組合物提供。在該方法中可以使用多于一種的其它活性成分。
因此，所述方法可以例如包括施用：
前s1肽抑制劑如myrcludexb和ifna或peg-ifna；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和拉米夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替比夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和恩替卡韋；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替諾福韋；或
前s1肽抑制劑如myrcludexb和阿德福韋。
該方法可包括：
以0.5至20mg/天，例如每天1mg，2mg，3mg，4mg，5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg/天，優(yōu)選2mg，5mg或10mg/天的劑量施用前s1肽抑制劑，用于針對hdv和hbv感染，
和，進一步施用一種或多種以下其它活性成分：
以每周10μg至300μg的劑量施用聚乙二醇化的干擾素，例如10μg，30μg，50μg，70μg，90μg，100μg，120μg，130μg，140μg，150μg，160μg，170μg，180μg，190μg，200μg，210μg，220μg，230μg，240μg，250μg，260μg，270μg，280μg，290μg或300μg/周，優(yōu)選180μg/周。每周劑量可以每周施用一次或每周施用數(shù)次，例如每周或每天施用兩次或三次，其劑量經(jīng)確定例如加和為所述每周劑量。
拉米夫定，劑量為每天10mg至100mg，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg，優(yōu)選為100mg/天；
恩替卡韋，劑量為每天0.1mg至10mg，例如0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mgmg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，7.0mg，8.0mg，9.0mg，10.0mg/天，優(yōu)選0.5mg或1.0mg/天；
替比夫定，劑量為每天100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mg/天，優(yōu)選500mg，600mg或700mg/天；
施用替諾福韋，劑量為每天100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mg/天，優(yōu)選200mg，250mg，245mg或300mg/天；
以每天5mg至20mg的劑量施用阿德福韋，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mgmg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg/天，優(yōu)選10mg/天；和/或
可以依次施用本發(fā)明的抑制劑和其它活性成分。例如，抑制劑可以施用至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)的療程，然后施用其它活性成分至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)的療程。一個周期的持續(xù)時間可以是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個周期的持續(xù)時間可以至少是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個療程的持續(xù)時間可能是12周，24周，36周，48周，60周，1年，1.1年，1.2年，1.3年，1.4年，1.5年，1.6年，1.7年，1.8年，1.8年，1.9年，或2.0年，或3年，或4年。
本發(fā)明的抑制劑和其它活性成分可以同時/伴隨施用。根據(jù)該給藥方案，抑制劑的施用與其它活性成分的施用及時重疊。抑制劑和其它活性成分的施用的持續(xù)時間可以相同或基本相同。例如，抑制劑和其它活性成分可以施用至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)的療程。一個周期的持續(xù)時間可以是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個周期的持續(xù)時間可以至少是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個過程的持續(xù)時間可能是12周，24周，36周，48周，60周，1年，1.1年，1.2年，1.3年，1.4年，1.5年，1.6年，1.7年，1.8年，1.8年，1.9年，或2.0年，或3年，或4年。例如，24周的myrcludesb療程可以與24周的peg-ifna療程同時進行。種該給藥方案中，myrcludexb可以每天施用，而peg-ifna可以每周施用。在該給藥方案中，可以同時施用抑制劑和其它活性成分，例如以基本上相同的時間或在單一組合物中。
取決于成分的類型，抑制劑和其它活性成分可以通過各種遞送途徑遞送。給藥途徑包括腸內(nèi)途徑(例如，經(jīng)口和直腸)，胃腸外途徑(例如靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，皮下腹膜內(nèi))，局部途徑。優(yōu)選地，前s1肽抑制劑皮下遞送。優(yōu)選地，peg-ifna皮下遞送。
該方法可用于人類治療。
附圖說明
圖1.人類hbv基因型a至h和黑猩猩、大猩猩和絨毛猴乙型肝炎病毒的序列比對。短(殘基2至48)和長(殘基-11至48)源自hbv基因型a至h的共有序列，示于中間。相同的氨基酸用深灰色框標記。用于共有序列的不相同的氨基酸用淺灰色框標記。
發(fā)明詳述
本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)：hbv/hdv前s1進入抑制劑與核苷酸/核苷類似物或免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素的組合導(dǎo)致丁型肝炎中的hdvrna和/或乙型和丁型肝炎中的hbsag的降低或喪失。
一方面，本發(fā)明涉及合并物和組合物，優(yōu)選藥物組合物，其包含na+-?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(ntcp)的抑制劑和至少一種其它活性成分，所述至少一種活性成分選自核苷酸類似物、核苷類似物和免疫調(diào)節(jié)劑。ntcp抑制劑可以抑制hbv/hdv細胞進入，也可以稱為進入抑制劑。
合并物或組合物可以包含多于一種其它活性成分。組合物還可以包含藥學(xué)上可接受的賦形劑，載體等。組合物也可以稱為藥物組合物。
在組合中，單獨的活性成分，即所述na+-牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運多肽(ntcp)抑制劑和一種或多種所述活性成分在分開的小瓶中提供。在組合物中，單獨的活性成分，即所述na+-?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運多肽(ntcp)抑制劑和一種或多種所述活性成分在單個小瓶中提供。
本發(fā)明的hbv/hdv進入抑制劑是能夠抑制病毒進入細胞如肝細胞的化合物。特別地，hbv/hdv進入抑制劑能夠結(jié)合并抑制細胞表面的ntcp受體。因此，hbv/hdv進入抑制劑優(yōu)選為ntcp抑制劑。
在一個實施方案中，hbv/hdv進入抑制劑可以衍生自任何hbv病毒，特別是任何hbv株、基因型或亞型的大(l)hbv表面蛋白的n-末端結(jié)構(gòu)域，前s1。hbv病毒株的例子有hbv病毒株α1，乙肝病毒株lsh(黑猩猩分離株)，土撥鼠hbv，絨毛猴hbv(wmhbv)。hbv亞型ad，adr，adw，adyw，ar和ayw的例子。hbv基因型的實例是人類hbv的基因型a至h。根據(jù)標準的hbv命名法，前s1肽具有-11和108之間的氨基酸坐標。
圖1中提供了各種人類基因型的位置-11和48之間的前s1肽的氨基酸以及從黑猩猩、大猩猩和絨毛猴分離的乙型肝炎病毒的前s1肽的相應(yīng)序列的序列比對。hbv基因型a至h的比對顯示，與基因型d相比，所有其它基因型均含有額外的10(e和g)或11(a，b，c，f和h)n末端前s1氨基酸。因此，取決于病毒株、基因型或亞型，病毒前s1肽可以具有不同的氨基酸坐標并因此具有不同的長度。
序列比對也表明各種基因型的前s1肽與肽長度共有保守區(qū)。高度保守的區(qū)域位于氨基酸位置9至21之間。此外，個體高度保守的氨基酸位于氨基酸2和6之間。這些保守序列也存在于從黑猩猩，大猩猩和絨毛猴分離的乙型肝炎病毒中。
實驗證據(jù)表明，合成的hbv前s1衍生肽干擾hbv感染的能力取決于保守的前s1區(qū)域內(nèi)部分氨基酸的存在(schulze等，2010)。因此，對于肽活性而言重要的是前s1的氨基酸位置11和15之間的區(qū)域，特別是該區(qū)域內(nèi)的氨基酸11,12,13,14和/或15。此外，在位置2和9之間的區(qū)域內(nèi)的一些氨基酸的替代降低了前s1肽的hbv抑制活性，因此氨基酸9似乎是必需的?？赡苡兄趆bv前s1衍生肽的抑制活性的其它區(qū)域是氨基酸2至8,16至20，并且在較不顯著的程度上為34至48。
因此，前s1肽衍生的hbv/hdv進入抑制劑(以下稱為前s1肽抑制劑)可以跨越hbv前-s1的氨基酸-11至108(整個hbv前-s1)或該區(qū)域內(nèi)的任何部分。以下將參考標準的hbv氨基酸編號。特別地，前s1肽抑制劑可以跨越氨基酸-11至78。在一些基因型中，前10位(基因型e和g)或11(基因型a，b，c，f和h)氨基酸不存在。因此，前s1肽抑制劑可以跨越hbv的1至78個氨基酸。超過氨基酸48的，即氨基酸49至108的一個或多個氨基酸可以不存在。因此，前s1肽抑制劑可以跨越氨基酸-11至48。在-11至48的范圍內(nèi)，可以省去前1,2,3,4,5,6,7,8,9,10或11個氨基酸。因此，前s1肽抑制劑可以跨越氨基酸1至48。氨基酸1(met)可能不存在。各種前s1肽抑制劑可以跨越氨基酸2至48，并任選地在c-末端包含其它氨基酸。在2至48的范圍內(nèi)，氨基酸2至21和34至48對于前s1肽抑制劑功能比21至33氨基酸更重要。氨基酸9至15，特別是11至15是最重要的。因此，前s1肽抑制劑可以由氨基酸2至48或其截短的部分組成?；蛘?，前s1肽抑制劑可以包含氨基酸2至48或其截短部分。
截短部分可以通過從前s1肽的任一端的氨基酸缺失獲得，并且具有46至5個氨基酸的長度。具體地，截短部分的長度可為47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6或5個氨基酸。
截短部分優(yōu)選包含氨基酸9至15、10至15或11至15。截短部分優(yōu)選由氨基酸11至15組成。通過加入側(cè)接酸11至15的氨基酸可以逐漸延伸截短部分。例如，截短部分可以由氨基酸2至15、3至15、4至15、5至15、6至15、7至15、8至15、9至15或10至15組成。在該示例中可以使用任何氨基酸16至48來提供進一步的截短部分。
在另一個實例中，截短部分可以由氨基酸2至15、2至16、2至17、2至18、2至19、2至20、2至21、2至22、2至23、2至24、2至25、2至26、2至27、2至28、2至29、2至30、2至31、2至32、2至33、2至34、2至35、2至36、2至37、2至38、2至39、2至40、2至412至42、2至43、2至44、2至45、2至45、2至46、2至47或2至48組成。在該示例中可以使用氨基酸3至11的任何來提供進一步的截短部分。
截短部分的其它示例是氨基酸9至15、2至21、5至21、2至15、2至20、2至25、2至30、2至35、2至40。
前s1肽的截短部分可以是保留前s1肽在抑制hbv細胞進入、結(jié)合和/或抑制ntct(一種必需的hbv受體)的功能的前s1肽的功能片段。
前s1肽抑制劑衍生自各種hbv病毒的前s1肽，例如各種基因型、毒株或亞型。特別地，前s1肽抑制劑可以衍生自基因型a，b，c，d，e，f，g或h的前s1或亞型ad，adr，adw，adyw，ar和ayw的前s1。來自各種hbv病毒的前s1肽通常是同源物。來自各種物種的同源物具有結(jié)構(gòu)和功能相似性，通常共有共同的進化祖先?？梢栽O(shè)想，將來鑒定的其它基因型、菌株或亞型的前sl同源物同樣適合作為前s1肽抑制劑。
前s1肽抑制劑可以衍生自前s1共有序列(圖1)。
各種基因型的氨基酸-11或-10或1(取決于基因型)和48之間的hbv前s1共有序列和結(jié)果序列的示例如下所示：
hbv前s1共有序列(位置(-11)至48)
(-11)-mggwsstprkgmgtnlsvpnplgffpdhqldpafransnnpdwdfnpnkdhwpeankvg-48(seqidno:1)
hbv前s1基因型a序列(位置(-11)至48)
(-11)-mggwsskprkgmgtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpvkddwpaanqvg-48(seqidno:2)
hbv前s1基因型b序列(位置(-11)至48)
(-11)-mggwsskprkgmgtnlsvpnplgffpdhqldpafkansenpdwdlnphkdnwpdankvg-48(seqidno:3)
hbv前s1基因型c序列(位置(-11)至48)
(-11)-mggwsskprqgmgtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeanqvg-48(seqidno:4)
hbv前s1基因型d序列(位置(1)至48)
1-mgqnlstsnplgffpdhqldpafrantanpdwdfnpnkdtwpdankvg-48(seqidno:5)
hbv前s1基因型e序列(位置(-10)至48)
(-10)-mglswtvplewgknisttnplgffpdhqldpafrantrnpdwdhnpnkdhwteankvg-48seqidno:6)
hbv前s1基因型f序列(位置(-11)至48)
(-11)-mgaplsttrrgmgqnlsvpnplgffpdhqldplfranssspdwdfntnkdswpmankvg-48(seqidno:7)
hbv前s1基因型g序列(位置(-10)至48)
(-10)-mglswtvplewgknlsasnplgflpdhqldpafrantnnpdwdfnpkkdpwpeankvg-48(seqidno:8)
hbv前s1基因型h序列(位置(-11)至48)
(-11)-mgaplstarrgmgqnlsvpnplgffpdhqldplfranssspdwdfntnkdnwpmankvg-48(seqidno:9)
以下提供了來自絨毛猴wmhbv的氨基酸1和48之間的前s1序列：
1-mglnqstfnplgffpshqldplfkanagsadwdknpnkdpwpqahdta(seqidno:10)
前s1肽抑制劑可以含有一個或多個(例如，1,2,3,4,5,6,7,8,9或10個)氨基酸取代，其基本上不降低其hbv抑制活性。優(yōu)選地，hbv抑制活性不應(yīng)降低超過兩個數(shù)量級。特別地，降低2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，17，18，19或20倍是容許的。hbv抑制活性可以根據(jù)ic50或ic90測量。氨基酸取代可以是保守的或非保守的。氨基酸取代優(yōu)選不影響對于前s1肽抑制劑的hbv抑制活性重要的氨基酸。位于前s1跨越氨基酸2至21的高度保守部分內(nèi)的單個氨基酸比該區(qū)域外的氨基酸對于活性更重要。在該區(qū)域內(nèi)，氨基酸9至15甚至更為重要。其中，氨基酸9,11,12和13是最重要的。因此，氨基酸取代優(yōu)選位于氨基酸11至15、9至15、5至15或2至15之外。氨基酸取代也可以位于氨基酸2至8、16至20或34至48之外。氨基酸取代可以位于氨基酸20至23、26至32內(nèi)。
來自基因型c的前s1序列并含有第46位的氨基酸取代(gin(q)→lys(k))的前s1序列的示例如下：
(-11)-mggwsskprqgmgtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeankvg-48(seqidno:11)。
優(yōu)選的肽抑制劑基于hbv前sl共有序列的氨基酸序列的位置2和48之間的前s1肽(根據(jù)標準hbv命名)：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafransnnpdwdfnpnkdhwpeankvg(seqidno:12)。
其它優(yōu)選的肽抑制劑基于hbv前sl基因型c的氨基酸序列的位置2和48之間的前s1肽(根據(jù)標準hbv命名)：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeanqvg(seqidno:14)。
最優(yōu)選的肽抑制劑基于含有第46位的氨基酸取代(gin(q)→lys(k))的基因型c的氨基酸序列的位置2和48之間的前s1肽(根據(jù)標準hbv命名)：
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeankvg(seqidno:13)。
前s1肽抑制劑可以是上述前s1抑制劑的n-末端或c-末端截短的部分，其至少為15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42,43,44,45或46個氨基酸。該部分保留其作為ntcp抑制劑、ntcp結(jié)合蛋白或hbv/hdv進入抑制劑的功能。
前s1肽抑制劑可具有跨基因型的抑制活性，即它們可以交叉抑制非前s1肽衍生來源的真實基因型的基因型。
前s1肽抑制劑優(yōu)選是疏水性的。它們可以修飾有疏水部分。通過酰化進行疏水修飾是優(yōu)選的。?；梢杂敏人幔舅峄蚓哂杏H脂側(cè)鏈的氨基酸進行?；??；蛘撸梢酝ㄟ^膽固醇，膽固醇衍生物，磷脂，糖脂，甘油酯，類固醇，陶瓷，異戊二烯衍生物，金剛烷，法呢醇，脂族基團或多芳族化合物來修飾前s1肽抑制劑。脂肪酸可以是飽和或不飽和脂肪酸，分支或非支鏈脂肪酸，優(yōu)選具有8至22個碳原子。用于?；暮线m的脂肪酸的實例是肉豆蔻酸(d14)，硬脂酸(c18)，棕櫚酸(c16)。疏水部分的變化允許調(diào)節(jié)特定的前s1肽活性。
疏水部分優(yōu)選連接到前s1肽抑制劑的n末端。因此，疏水部分可以連接到前s1肽抑制劑的n-末端氨基酸，或與n-末端非常接近的氨基酸例如氨基酸-5，-4，-3，-2，-1，1，2，3，4或5連接。可以使用多于一個疏水部分來修飾前s1肽抑制劑。疏水部分可以相同或不同。疏水部分的連接優(yōu)選通過共價結(jié)合，其可以通過氨基甲酸酯，酰胺，醚，二硫化物或本領(lǐng)域技術(shù)人員技能范圍內(nèi)的任何其它連接來實現(xiàn)。
優(yōu)選的肽抑制劑是下述氨基酸序列的前s1肽
gtnlsvpnplgffpdhqldpafgansnnpdwdfnpnkdhwpeankvg(seqidno:13),
其在n末端被肉豆蔻酰或硬脂酰修飾。
前s1肽抑制劑myrcludexb的化學(xué)名稱是
n-肉豆蔻酰-甘氨酰-l-蘇氨酰-l-天冬酰胺酰-l-亮氨酰-l-絲氨酰-l-纈氨酰-l-脯氨酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-亮氨酰-甘氨酰-l-苯丙氨酰-l-苯丙氨酰-l-脯氨酰-l-天冬氨酰-l-組氨酰-l-谷氨酰胺酰-l-亮氨酰-l-天冬氨酰-l-脯氨酰-l-丙氨酰-l-苯丙氨酰-甘氨酰-l-丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-絲氨酰-l-天冬酰胺酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-天冬氨酰-l-色氨酰-l-天冬氨酰-l-苯丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-脯氨酰-l-天冬酰胺酰-l-賴氨酰-l-天冬氨酰-l-組氨酰-l-色氨酰-l-脯氨酰-l-谷氨酰-l-丙氨酰-l-天冬酰胺酰-l-賴氨酰-l-纈氨酰-甘氨酰胺，乙酸鹽。
myrcludexb的縮寫化學(xué)名稱是
肉豆蔻酰-gly-thr-asn-leu-ser-val-pro-asn-pro-leu-gly-phe-phe-pro-asp-his-gln-leu-asp-pro-ala-phe-gly-ala-asn-ser-asn-asn-pro-asp-trp-asp-phe-asn-pro-asn-lys-asp-his-trp-pro-glu-ala-asn-lys-val-gly-nh2，乙酸鹽。
可以進一步以常規(guī)方式修飾前s1肽抑制劑以改善肽的穩(wěn)定性，例如，防止退化的穩(wěn)定性。這種修飾可以包括采用酰胺，d-氨基酸，修飾的氨基酸，環(huán)狀氨基酸，天然聚合物，合成聚合物或甘氨酸的修飾。
在另一個實施方案中，hbv/hdv進入抑制劑可以是小分子。
本發(fā)明的其它活性成分可以是免疫調(diào)節(jié)劑，核苷酸類似物或核苷類似物。
核苷類似物是含有核酸類似物和糖的核苷。用于治療hbv或hdv的核苷類似物的實例是拉米夫定，替比夫定和恩替卡韋。其它核苷類似物可用于本發(fā)明的實踐。
核苷酸類似物是含有核酸類似物、糖和一至三個磷酸基團的核苷酸。用于治療hbv或hdv的核苷酸類似物的實例是替諾福韋和阿德福韋。其它核苷酸類似物可用于本發(fā)明的實踐。
免疫調(diào)節(jié)劑，即具有調(diào)節(jié)對象的免疫系統(tǒng)活性的能力的活性成分的實例是干擾素，治療性疫苗和佐劑。
干擾素可以是干擾素α，例如干擾素α2a或干擾素α2b。干擾素α2α和干擾素α2b的活性在hbv和hdv感染中可能相似。
干擾素可以是聚乙二醇化的，即連接到聚乙二醇(peg)部分上。聚乙二醇化可以改善患者的藥代動力學(xué)和方便性，但不影響干擾素的作用機制。此外，干擾素α2a和2b的活性在hbv和hdv感染中非常相似。
因此，提供包括以下成分的合并物和組合物：
前s1肽抑制劑如myrcludexb和ifna或peg-ifna；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和拉米夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替比夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和恩替卡韋；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替諾福韋；或
前s1肽抑制劑如myrcludexb和阿德福韋。
合并物或組合物中前s1肽抑制劑如myrcludexb的單位劑量可以為0.5mg至20mg，例如1mg，2mg，3mg，4mg，5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg，優(yōu)選2mg，5mg或10mg。
合并物或組合物中的干擾素或聚乙二醇化的干擾素的聯(lián)合劑量可以在10μg和300μg之間，例如10μg，30μg，50μg，70μg，90μg，100μg，120μg，130μg，140μg，150μg，160μg，170μg，180μg，190μg，200μg，210μg，220μg，230μg，240μg，250μg，260μg，270μg，280μg，290μg或300μg，優(yōu)選為180μg。
合并物或組合物中拉米夫定的單位劑量可以為10mg至100mg，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg，優(yōu)選50mg或100mg。
合并物或組合物中恩替卡韋的單位劑量可以為0.1mg至10mg，例如0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，7.0mg，8.0mg，9.0mg，或10.0mg，優(yōu)選0.5mg或1.0mg。
合并物或組合物中替比夫定的單位劑量可以為100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mgmg，優(yōu)選500mg，600mg或700mg。
合并物或組合物中替諾福韋的聯(lián)合劑量可以為100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mgmg，優(yōu)選200mg，250mg，245mg或300mg。
合并物或組合物中阿德福韋的聯(lián)合劑量可以為5mg至20mg，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg，優(yōu)選10mg。
本發(fā)明的示例性組合物或合并物包括：
1.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。
2.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。
3.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。
4.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。
5.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。
6.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。
7.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋；恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。
8.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋；恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。
9.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋；恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。
10.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定；替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
11.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定；替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
12.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定；替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
13.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋；替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
14.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋；替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
15.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋；替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。
16.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋；阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。
17.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋；阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。
18.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋；阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。
上述組合和組合物可用于治療hbv或hdv感染、乙型肝炎或丁型肝炎的方法。
另一方面，本發(fā)明涉及通過ntcp抑制劑/hbv/hdv進入抑制劑和至少一種其它活性成分的組合來治療hbv/hdv感染，乙型肝炎和丁型肝炎，以及慢性乙型和丁型肝炎，所述其它活性成分選自核苷酸類似物、核苷類似物和免疫調(diào)節(jié)劑。這種聯(lián)合治療導(dǎo)致病毒rna下降，最終導(dǎo)致hbsag水平的下降或hbsag的喪失，這是完全治愈的標志，因此是hbv/hdv治療的最終目標。
所述抑制劑和所述其它活性成分可以作為上述合并物或組合物提供。在該方法中可以使用多于一種的其它活性成分。
因此，該方法可以例如包括對需要hbv/hdv治療的個體施用：
前s1肽抑制劑如myrcludexb和ifna或peg-ifna；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和拉米夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替比夫定；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和恩替卡韋；
前s1肽抑制劑如myrcludexb和替諾福韋；或
前s1肽抑制劑如myrcludexb和阿德福韋。
該方法可包括：
以0.5至20mg/天，例如1mg，2mg，3mg，4mg，5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg/天，優(yōu)選2mg，5mg或10mg/天的劑量施用前s1肽抑制劑，用于針對hdv和hbv感染，
并進一步施用一種或多種以下其它活性成分：
以每周10μg至300μg的劑量施用干擾素例如聚乙二醇化的干擾素α(peg-igna)，例如10μg，30μg，50μg，70μg，90μg，100μg，120μg，130μg，140μg，150μg，160μg，170μg，180μg，190μg，200μg，210μg，220μg，230μg，240μg，250μg，260μg，270μg，280μg，290μg或300μg/周，優(yōu)選180μg/周。每周劑量可以每周施用一次或每周施用數(shù)次，例如每周或每天施用兩次或三次，其劑量經(jīng)確定例如加和為所述每周劑量。
拉米夫定，劑量為每天10mg至100mg，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg，優(yōu)選為100mg/天；
恩替卡韋，劑量為每天0.1mg至10mg，例如0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mgmg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，7.0mg，8.0mg，9.0mg，10.0mg/天，優(yōu)選0.5mg或1.0mg/天；
替比夫定，劑量為每天100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mg/天，優(yōu)選500mg，600mg或700mg/天；
替諾福韋，劑量為每天100mg至1000mg，例如100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1000mg/天，優(yōu)選200mg，250mg，245mg或300mg/天；
阿德福韋，劑量為每天5mg至20mg，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mgmg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg/天，優(yōu)選10mg/天；和/或
該方法可包括施用：
1.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。前s1肽抑制劑和干擾素可以同時施用。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
2.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
3.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和180μg干擾素如聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)。干擾素的量也可以在10μg和300μg之間變化，并且可為例如10μg、30μg、50μg、70μg、90μg、100μg、120μg、130μg、140μg、150μg、160μg、170μg、180μg、190μg、200μg、210μg、220μg、230μg、240μg、250μg、260μg、270μg、280μg、290μg、或300μg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
4.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
5.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
6.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg拉米夫定。拉米夫定的量也可以在10至100mg之間變化，例如10mg，20mg，30mg，40mg，50mg，60mg，70mg，80mg，90mg或100mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
7.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋。恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
8.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋。恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
9.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和0.5mg或1.0mg恩替卡韋。恩替卡韋的量也可以在0.1至10mg之間變化，例如為0.1mg，0.2mg，0.3mg，0.4mg，0.5mg，0.6mg，0.7mg，0.8mg，0.9mg，1.0mg，2.0mg，3.0mg，4.0mg，5.0mg，6.0mg，70.0mg，8.0mg，9.0mg或10.0mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
10.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定。替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
11.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定。替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
12.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和600mg替比夫定。替比夫定的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
13.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋。替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
14.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋。替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
15.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和200mg，245mg或300mg替諾福韋。替諾福韋的量也可以在100至1000mg之間變化，例如100mg,200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，700mg，800mg，900mg或1,000mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
16.2mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋。阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
17.5mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋。阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
18.10mg前s1肽抑制劑如myrcludexb和100mg阿德福韋。阿德福韋的量也可以在5至20mg之間變化，例如5mg，6mg，7mg，8mg，9mg，10mg，11mg，12mg，13mg，14mg，15mg，16mg，17mg，18mg，19mg或20mg。根據(jù)治療進展和治療結(jié)果，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
根據(jù)治療進展和副作用，施用持續(xù)時間可以是24周或48周或更長。
在本發(fā)明的方法中，可以順序施用本發(fā)明的抑制劑和其它活性成分。例如，抑制劑可以施用至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)，然后施用其它活性成分至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)。一個周期的持續(xù)時間可以是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個周期的持續(xù)時間可以至少是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個療程的持續(xù)時間可能是12周，24周，36周，48周，60周，1年，1.1年，1.2年，1.3年，1.4年，1.5年，1.6年，1.7年，1.8年，1.8年，1.9年，或2.0年，或3年，或4年或更長。
在本發(fā)明的方法中，可以同時/并發(fā)施用本發(fā)明的抑制劑和其它活性成分。根據(jù)該給藥方案，抑制劑的施用與其它活性成分的施用及時重疊。抑制劑和其它活性成分的施用的持續(xù)時間可以相同或基本相同。例如，抑制劑和其它活性成分可以施用至少一個周期或包含一個或多個周期(例如2,3,4,5,6,7,8,9或10個周期)的過程。一個周期的持續(xù)時間可以是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個周期的持續(xù)時間可以至少是1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11或12周。一個過程的持續(xù)時間可能是12周，24周，36周，48周，60周，1年，1.1年，1.2年，1.3年，1.4年，1.5年，1.6年，1.7年，1.8年，1.8年，1.9年，或2.0年，或3年，或4年。例如，24周的myrcludesb療程可以與24周的peg-ifna療程同時進行。種該給藥方案中，myrcludexb可以每天施用，而peg-ifna可以每周施用。在該給藥方案中，可以同時施用抑制劑和其它活性成分，例如以基本上相同的時間或在單一組合物中。
在本發(fā)明的方法中，根據(jù)成分的種類，抑制劑和其它活性成分可以通過各種遞送途徑遞送。給藥途徑包括腸內(nèi)途徑(例如，直腸和直腸)，胃腸外途徑(例如靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，皮下腹膜內(nèi))和局部途徑。優(yōu)選地，前s1肽抑制劑皮下遞送。優(yōu)選地，peg-ifna皮下遞送。
本發(fā)明提供如上所述以各種劑量施用的活性成分的各種組合，如上所述的治療方案和給藥途徑。例如，本發(fā)明提供以下治療方案：
每天給予2mgmyrcludesb持續(xù)24周，與每周一次的180μg聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)聯(lián)合給藥。該療程之后可以是每日2mgmyrcludexb再單獨給藥24周。兩種活性成分可以皮下遞送。在該示例中，每日myrcludexb劑量也可以為5mg或10mg。
每天給予2mgmyrcludesb，與周劑量180μg聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)聯(lián)合給藥。治療可能持續(xù)48周。在該示例中，每日myrcludexb劑量也可以為5mg或10mg。
每天給予2mgmyrcludesb，與每天給予245mg替諾福韋聯(lián)合給藥。治療可持續(xù)2年或更長時間(無限期)。在該示例中，每日myrcludexb劑量也可以為5mg或10mg。
可每天給予2mgmyrcludesb，與每天給予245mg替諾福韋聯(lián)合給藥。治療可持續(xù)至少48周。在該示例中，每日myrcludexb劑量可以為5mg或10mg。
每天給予2mgmyrcludesb，與每天給予1.0mg恩替卡韋聯(lián)合給藥。治療可持續(xù)2年或更長時間(無限期)。在該示例中，每日myrcludexb劑量也可以為5mg或10mg。
可每天給予2mgmyrcludesb，與每天給予1.0mg恩替卡韋聯(lián)合給藥。治療可能持續(xù)至少48周。在該示例中，每日myrcludexb劑量可以為5mg或10mg。
在本發(fā)明的方法中，可以根據(jù)患者在治療過程中發(fā)展的治療進展和/或副作用來調(diào)整每種活性成分的劑量。
本發(fā)明明確地包括具體的組合或活性成分以及如申請的實施例中所述的給藥方案。
將通過參考以下非限制性實施例來說明本發(fā)明。
實施例
實施例1：慢性hbv感染中mycludexb的2期臨床試驗
目的：
臨床試驗的目的是評估m(xù)yrcludexb在具有活動性肝炎的hbsag陽性患者中的安全性和耐受性以及抗病毒藥效。
方法：
隊列a：40名慢性hbv感染的hbeag陰性患者(所有hbvdna>2000iu/ml中位hbvdna4.7log10iu/ml；無肝硬化)治療12周，每日一次，每次sc給予0.5mg，1mg，2mg，5mg或10mgmyrcludexb，持續(xù)12周(每劑量8名患者)。接受10mg的患者治療延長至24周。
結(jié)果：
myrcludexb耐受性良好，注射側(cè)皮炎在接受10mgmyrcludexb的3例患者中發(fā)生，治療后減退。在接受10mgmyrcludexb的患者中有6/8(75％)觀察到12周時超過1log10hbvdna下降，而其余劑量組發(fā)生率較低(7/40；17％)。在22/40(55％)患者中標準化丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)，中位alt值從治療前的76u/l降至第12周時的36u/l(p<0.001)。hbsag水平無明顯變化。
結(jié)論：
myrcludexb是治療慢性乙型肝炎(chb)和慢性丁型肝炎(chd)的候選藥物。myrcludexb耐受性良好。然而，myrcludexb沒有影響hbsag水平。
實施例2：在hbv/hdv感染的細胞中進行myrcludexb和恩替卡韋組合的體外研究
核苷類似物恩替卡韋在體外未改善myrcludexb對hbv受體的抑制(通過用含有hbv/hdv的血清感染的heparg細胞的數(shù)量的免疫化學(xué)評估測量)：
表1：在不存在恩替卡韋和存在20μm恩替卡韋時使用增加濃度的myrcludexb，用hdv陽性血清(血清1)感染heparg細胞后，通過hbcag特異性if測定感染后第6天的hbcag陽性細胞數(shù)量。
myrcludexb與任何核苷和核苷酸類似物的組合預(yù)期類似的結(jié)果，因為它們基本上具有相同的作用機制，即抑制hbv聚合酶。
實施例3：在hbv感染細胞中進行myrcludexb和ifna組合的體外研究
細胞培養(yǎng)物：原代人肝細胞(phh)，hbv易感細胞系heparg，用hbv受體ntcp轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)導(dǎo)的細胞系。
細胞培養(yǎng)物將被hbv感染。將對不同濃度的myrcludex和干擾素的添加進行研究，以“治愈”細胞培養(yǎng)物的感染。
實施例4：在慢性hdv感染中對myrcludexb和聚乙二醇化的ifna的聯(lián)合治療進行的試點臨床試驗
myrcludexb沒有顯示對體內(nèi)hbsag水平的影響(myrcludexb作為單一療法的臨床試驗)。干擾素對臨床實踐中hbsag損失的影響非常小，在標準48周治療后，約3％的患者失去hbsag。因此，干擾素可以增強myrcludexb對hbv或hdv感染的影響，降低hbsag水平，最終達到hbsag喪失，即hbv治療的最終目標，這并非顯而易見。
目的：
臨床試驗的目的是評估m(xù)yrcludexb與聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)在丁型肝炎患者中的安全性和耐受性以及抗病毒藥效。特別是對病毒學(xué)參數(shù)(包括hbsag下降和損失)的影響進行了研究。
方法：
隊列b：24例丁型肝炎患者(代償性肝??；12.5％肝硬化)。
組b1(“myrcludexb單一療法”)：8名患者安排24周治療，每日2mgmyrcludexb，皮下遞送。
組b2：(“peg-ifna單一療法”)：8名患者安排24周治療，每周180μg聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)，皮下遞送。
組b3(“聯(lián)合治療”)：8名患者安排24周治療，每日皮下遞送2mgmyrcludexb，與每周皮下遞送180μg聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)組合。
也將考慮在開始干擾素治療之前的myrcludexb的預(yù)處理和/或在干擾素治療結(jié)束后myrcludexb的后處理。
結(jié)果：
myrcludexb耐受性良好。一名hdv患者(b3)出現(xiàn)銀屑病惡化，導(dǎo)致停藥。在組b1和組b3中，各有一個患者由于各種原因停止治療。
在myrcludexb單一療法(b1組，myrcludexb單藥治療)中，7名患者中有6名患者在第24周經(jīng)歷了>1log10hdvrna下降，而在b2組(peg-ifna單一療法)和b3組(組合治療)中觀察到7/7例患者產(chǎn)生該響應(yīng)。
b1組(myrcludexb單一療法)和b2(peg-ifna單一療法)的2/7例患者的hdvrna變?yōu)殛幮?。相比之下，b3組(聯(lián)合治療)的5/7例患者(71％)中hdvrna變?yōu)殛幮浴?/p>
6/7例患者(b1組)和4/7例(b3組)患者在第24周時和3/7例(b2組)患者在第12周時alt值下降。
1例患者(b3組)和3例患者(b2組)在第24周時出現(xiàn)>0.5log10hbsag下降。
結(jié)論：
myrcludexb在具有或不具有hdv共感染的hbsag陽性患者中是安全且耐受性良好的。hbv進入抑制與hbvdna和hdvrna的下降以及生化疾病活動性的改善有關(guān)。myrcludexb/peg-ifna聯(lián)合治療可增強其效果，其中超過70％的患者觀察到完全的hdvrna消除。當用前s1細胞進入抑制劑治療時，血清hdvrna的減少是產(chǎn)病毒細胞數(shù)減少的指示，對病毒復(fù)制沒有任何直接影響。在這項研究中，前s1肽抑制劑與干擾素的協(xié)同作用顯示在hdvrna水平上。這種效應(yīng)將轉(zhuǎn)化為長期的病毒抑制，也可用于hbv，并最終導(dǎo)致病毒消除。因此，觀察到的hdvrna下降以及病毒消除可以作為有效的丁型肝炎治療的標志，預(yù)期以延長治療持續(xù)時間用于hbsag下降和有效的乙型肝炎治療。
實施例5：在慢性hbv感染中進行mcludexb和聚乙二醇化的ifna的聯(lián)合治療的二期臨床試驗
目的：
臨床試驗的目的是評估m(xù)yrcludexb與聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)在慢性hbv感染的患者中的安全性和耐受性以及抗病毒藥效。特別是對病毒學(xué)參數(shù)(包括hbsag下降和損失)的影響進行了研究。
方法：
組1：聚乙二醇化的干擾素
組2：聚乙二醇化的干擾素和2mgmyrcludexb
組3：聚乙二醇化的干擾素與5mgmyrcludexb組合
組4：聚乙二醇化的干擾素與10mgmyrcludexb組合
用myrcludexb和聚乙二醇化的干擾素組合治療24周，接著是24周的myrcludexb單獨治療。該組合將允許增加干擾素功效并減少治療持續(xù)時間(48周是用干擾素治療的標準)。
實施例6：在慢性hbv感染中進行mcludexb和核苷/核苷酸類似物的聯(lián)合治療的二期臨床試驗
myrcludexb不影響體內(nèi)hbsag水平(myrcludexb作為單一療法的臨床試驗)。核苷/核苷酸類似物的治療導(dǎo)致hbsag血清轉(zhuǎn)換的比例非常小(兩年治療后的替諾福韋患者中為4％，其它藥物甚至更低)。因此，核苷/核苷酸類似物可以增強myrcludexb對hbv或hdv感染的影響，降低hbsag水平，最終達到hbsag喪失，即hbv治療的最終目標，這并非顯而易見。
目的：
臨床試驗的目的是評估m(xù)yrcludexb與核苷類似物(恩替卡韋)或核苷酸類似物(替諾福韋)的組合在慢性hbv感染患者中的安全性、耐受性和抗病毒效力。特別是對病毒學(xué)參數(shù)(包括hbsag下降和損失)的影響進行了研究。
方法：
組1：核苷或核苷酸類似物
組2：核苷或核苷酸類似物與2mgmyrcludexb組合
組3：核苷或核苷酸類似物與5mgmyrcludexb組合
組4：核苷或核苷酸類似物與10mgmyrcludexb組合
上述組合中的活性成分的施用是同時的。
在初治患者和已經(jīng)接受核苷或核苷酸類似物的患者中可以進行單獨的試驗。
將考慮在開始核苷或核苷酸類似物治療之前用myrcludexb進行預(yù)處理和/或在核苷或核苷酸類似物治療結(jié)束后用myrcludexb進行后處理。
實施例7:在慢性hdv感染中進行mcludexb和聚乙二醇化的ifna的聯(lián)合治療的二期臨床試驗
目的：
臨床試驗的目的是評估m(xù)yrcludexb與聚乙二醇化的干擾素α(peg-ifna)在慢性hdv感染的患者中的安全性和耐受性以及抗病毒藥效。特別是對病毒學(xué)參數(shù)(包括hdvrna損失、hbsag下降和喪失)的影響進行了研究。
方法：
組1：聚乙二醇化的干擾素
組2：聚乙二醇化的干擾素和2mgmyrcludexb
組3：聚乙二醇化的干擾素與5mgmyrcludexb組合
組4：聚乙二醇化的干擾素與10mgmyrcludexb組合
用myrcludexb和聚乙二醇化的干擾素組合治療24周，接著是24周的myrcludexb單獨治療。該組合將允許增加干擾素功效并減少治療持續(xù)時間(48周是用干擾素治療的標準)。
序列表
<110>myr有限公司(伯格維德)
<120>hbv和hdv感染的聯(lián)合治療
<130>103648pc
<150>ep14187865.2
<151>2014-10-07
<160>14
<170>patentinversion3.5
<210>1
<211>59
<212>prt
<213>人工
<220>
<223>hbv前s1共有序列(位置(-11)至48)
<400>1
metglyglytrpserserthrproarglysglymetglythrasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
alapheargalaasnserasnasnproasptrpasppheasnproasn
354045
lysasphistrpproglualaasnlysvalgly
5055
<210>2
<211>59
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>2
metglyglytrpserserlysproarglysglymetglythrasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
alapheglyalaasnserasnasnproasptrpasppheasnproval
354045
lysaspasptrpproalaalaasnglnvalgly
5055
<210>3
<211>59
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>3
metglyglytrpserserlysproarglysglymetglythrasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
alaphelysalaasnsergluasnproasptrpaspleuasnprohis
354045
lysaspasntrpproaspalaasnlysvalgly
5055
<210>4
<211>59
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>4
metglyglytrpserserlysproargglnglymetglythrasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
alapheglyalaasnserasnasnproasptrpasppheasnproasn
354045
lysasphistrpproglualaasnglnvalgly
5055
<210>5
<211>48
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>5
metglyglnasnleuserthrserasnproleuglyphepheproasp
151015
hisglnleuaspproalapheargalaasnthralaasnproasptrp
202530
asppheasnproasnlysaspthrtrpproaspalaasnlysvalgly
354045
<210>6
<211>58
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>6
metglyleusertrpthrvalproleuglutrpglylysasnileser
151015
thrthrasnproleuglyphepheproasphisglnleuaspproala
202530
pheargalaasnthrargasnproasptrpasphisasnproasnlys
354045
asphistrpthrglualaasnlysvalgly
5055
<210>7
<211>59
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>7
metglyalaproleuserthrthrargargglymetglyglnasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
leupheargalaasnserserserproasptrpasppheasnthrasn
354045
lysaspsertrpprometalaasnlysvalgly
5055
<210>8
<211>58
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>8
metglyleusertrpthrvalproleuglutrpglylysasnleuser
151015
alaserasnproleuglypheleuproasphisglnleuaspproala
202530
pheargalaasnthrasnasnproasptrpasppheasnprolyslys
354045
aspprotrpproglualaasnlysvalgly
5055
<210>9
<211>59
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>9
metglyalaproleuserthralaargargglymetglyglnasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
leupheargalaasnserserserproasptrpasppheasnthrasn
354045
lysaspasntrpprometalaasnlysvalgly
5055
<210>10
<211>48
<212>prt
<213>絨毛猴乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>10
metglyleuasnglnserthrpheasnproleuglyphepheproser
151015
hisglnleuaspproleuphelysalaasnalaglyseralaasptrp
202530
asplysasnproasnlysaspprotrpproglnalahisaspthrala
354045
<210>11
<211>59
<212>prt
<213>人工
<220>
<223>位置46具有氨基酸取代(gln/q->lys/k)的hbv前s1基因型c(位置(-11)至48)
<400>11
metglyglytrpserserlysproargglnglymetglythrasnleu
151015
servalproasnproleuglyphepheproasphisglnleuasppro
202530
alapheglyalaasnserasnasnproasptrpasppheasnproasn
354045
lysasphistrpproglualaasnlysvalgly
5055
<210>12
<211>47
<212>prt
<213>人工
<220>
<223>hbv前s1共有序列(位置2至48)
<400>12
glythrasnleuservalproasnproleuglyphepheproasphis
151015
glnleuaspproalapheargalaasnserasnasnproasptrpasp
202530
pheasnproasnlysasphistrpproglualaasnlysvalgly
354045
<210>13
<211>47
<212>prt
<213>人工
<220>
<223>位置46具有氨基酸取代(gln/q->lys/k)的hbv前s1基因型c(位置2至48)
<400>13
glythrasnleuservalproasnproleuglyphepheproasphis
151015
glnleuaspproalapheglyalaasnserasnasnproasptrpasp
202530
pheasnproasnlysasphistrpproglualaasnlysvalgly
354045
<210>14
<211>47
<212>prt
<213>乙肝病毒（hepatitisbvirus）
<400>14
glythrasnleuservalproasnproleuglyphepheproasphis
151015
glnleuaspproalapheglyalaasnserasnasnproasptrpasp
202530
pheasnproasnlysasphistrpproglualaasnglnvalgly
354045