本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏及其制備方法。
背景技術(shù)：
：葉綠素是光合作用膜中的綠色色素，它是光合作用中捕獲光的主要成分。葉綠素是鎂和四個(gè)吡咯環(huán)上的氮結(jié)合以卟啉為骨架的綠色色素的總稱(chēng)，共有a、b、c、d和e等幾種。近年來(lái)，綠色食品受到了人們廣泛關(guān)注，而存在于綠色植物中的葉綠素的一些生理功能也開(kāi)始備受重視。葉綠素的結(jié)構(gòu)和血紅素極相似，易于被人體吸收，有賦活細(xì)胞的作用，在醫(yī)藥、食品和日化工業(yè)中有廣泛用途，由于葉綠素為天然品，無(wú)毒副作用，長(zhǎng)期食用安全、可靠，而且葉綠素還具有改善便秘、降低膽固醇、抗衰老、排毒消炎、脫臭、抗癌抗突變、抗貧血和保肝等功能，對(duì)皮膚組織有再生作用，可用于治療燙傷，慢性潰瘍，能抑制葡萄球菌和鏈球菌生長(zhǎng)，對(duì)齒齦炎、口臭、中耳炎等有一定療效，具有較大的藥用價(jià)值。中國(guó)專(zhuān)利CN103417401B公開(kāi)了一種葉綠素牙膏，所述葉綠素牙膏具有清熱、消炎、祛口臭、除菌斑、抗過(guò)敏、清潔牙齒、保護(hù)牙齦等多重功效，能全面護(hù)理口腔，保護(hù)口腔和牙齒健康。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201310582887.5一種葉綠素生發(fā)液，所述葉綠素生發(fā)液對(duì)于斑禿、普禿、全禿癥狀有再生和防脫作用，尤其是對(duì)于脂溢性脫發(fā)及遺傳性早、中期稀、脫發(fā)有明顯效果。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201410426768.5公開(kāi)了一種葉綠素潔顏乳，所述葉綠素潔顏乳泡沫細(xì)膩、溫和無(wú)刺激，潔面后令肌膚清爽細(xì)嫩、圓潤(rùn)不緊繃、白皙有彈性，是一種較為理想的潔顏乳。夏天的蚊蟲(chóng)給人們帶來(lái)很大的危害，嗡嗡的聲音徘徊在耳邊，擾人睡眠，而且蚊子還會(huì)傳播瘧疾、絲蟲(chóng)病、流行性乙型腦炎和登革熱等疾病。面對(duì)蚊蟲(chóng)的進(jìn)攻，人們除進(jìn)行環(huán)境整治和物理隔離外，衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑和驅(qū)蚊劑是防治的蚊蟲(chóng)的重要途徑。目前，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201510655157.2公開(kāi)了一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的乳液及其制備方法，所述的乳液含有以下物質(zhì)：甜杏仁油、紅花油、玫瑰玉米油、紫蘇籽油、香茅油、兩面針提取液、紫草浸泡油、薄荷提取液、黃原膠、天然蠶絲蛋白、左旋乳酸鈉、尼泊金乙酯、75％乙醇溶液、復(fù)合乳化劑AC-402、1,2-丙二醇、APG型乳化劑SMONTANOVL、蒸餾水。制備得到的乳液性質(zhì)溫和，安全性高，能補(bǔ)充皮膚需要的營(yíng)養(yǎng)、水分，防止皮膚缺水，達(dá)到滋養(yǎng)治愈的效果，可加速皮膚血液循環(huán)，促進(jìn)新陳代謝，及時(shí)修復(fù)蚊蟲(chóng)叮咬帶來(lái)的皮膚問(wèn)題，有效止癢。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)201510723104.X公開(kāi)了一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的藥膏及其制備方法，所述藥膏包括以下重量份的制備原料：艾葉、白芷、馬齒莧、荷葉、甘油、液體石蠟、硬脂酸、三乙醇胺和水。制備得到的防治蚊蟲(chóng)叮咬的藥膏溫和低敏，快速止癢消腫，可預(yù)防和治療蚊蟲(chóng)叮咬。然而，目前的防治蚊蟲(chóng)叮咬膏劑的軟膏劑吸收率較低，需要長(zhǎng)時(shí)間使用，治療效果不明顯。因此，研究和開(kāi)發(fā)出一種透皮吸收率高，治療蚊蟲(chóng)傷口效果顯著和驅(qū)蚊時(shí)間持續(xù)的防治蚊蟲(chóng)叮咬的藥膏是目前亟需解決的難題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)中防治蚊蟲(chóng)叮咬的外用制劑存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏及其制備方法，以解決上述的問(wèn)題。本發(fā)明提供了一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏，包括以下組分及其重量百分比：葉綠素10-20％、荷葉堿8-12％、丁香酸4-8％、油相基質(zhì)12-24％、乳化劑6-10％、滲透促進(jìn)劑2-6％、防腐劑0.1-0.2％和水30-45％。進(jìn)一步地，所述的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏包括以下組分及其重量百分比：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、防腐劑0.12％和水35.9％。進(jìn)一步地，所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1-3:4-6:0.5-2組成。進(jìn)一步地，所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成。進(jìn)一步地，所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比2-4:1-3組成。進(jìn)一步地，所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成。進(jìn)一步地，所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比2-4:3-5組成。進(jìn)一步地，所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。進(jìn)一步地，所述防腐劑為對(duì)羥基苯甲酸乙酯。另外，本發(fā)明還提供了一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的制備方法，包括以下步驟：S1取油相基質(zhì)加熱至75-85℃溶解，接著加入荷葉堿和丁香酸，攪拌至完全溶解，得油相液；S2將乳化劑加入水中加熱至75-85℃，攪拌至完全溶解，得水相液；S3將步驟S1得到的油相液加入步驟S2得到的水相液中混合，冷卻至30-40℃，加入葉綠素、滲透促進(jìn)劑和防腐劑，在pH值為6-8，轉(zhuǎn)速為1200-1500rpm的條件下攪拌30-60min，即得。本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏中葉綠素購(gòu)自海寧鳳鳴葉綠素有限公司，貨號(hào)為65963-40-8。丁香酸的化學(xué)名為3，5-二甲氧基-4-羥基苯甲酸，CAS號(hào)為530-57-4；荷葉堿的分子式為C19H21NO2，CAS號(hào)為475-83-2。卵磷脂的分子式為C42H84O9PN，CAS號(hào)為8002-43-5；蜂蠟購(gòu)于西安藻露堂康復(fù)醫(yī)藥有限公司，硬脂酸甘油酯的CAS號(hào)為123-94-4，肉豆蔻酸異丙酯的CAS號(hào)為110-27-0。本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏具有顯著的消炎止癢作用。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏可以顯著降低二甲苯致腫小鼠的耳重差，其消炎效果比止痛消炎軟膏好，同時(shí)，使用本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的豚鼠的止癢閥大于83.6，其止癢效果比止痛消炎軟膏的治療效果好，說(shuō)明本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏各組分相互協(xié)調(diào)起消炎止癢效果。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏具有顯著的驅(qū)蚊效果，其平均驅(qū)蚊時(shí)間為6小時(shí)，而且該防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏對(duì)皮膚安全、無(wú)刺激，不會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng)，適合廣大人群使用。本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏具有較高的透皮吸收率。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的透皮吸收速率大于4.10μg/cm2，說(shuō)明本發(fā)明由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按一定重量比組成的油相基質(zhì)，由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按一定重量比組成的乳化劑，由尿素和薄荷醇按一定重量比組成的滲透促進(jìn)劑可以有效提高軟膏的透皮率，更有利于蚊蟲(chóng)叮咬傷口的愈合。總之，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)勢(shì)：1)本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏有效成分明確，毒副作用小，載藥量高，具有顯著的消炎止癢、驅(qū)蚊的效果；2)本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏經(jīng)皮吸收率高，是一種理想的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏，有利于該防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的推廣和應(yīng)用。具體實(shí)施方式以下通過(guò)具體實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明不僅僅限于以下實(shí)施例。在本發(fā)明的范圍內(nèi)或者在不脫離本發(fā)明的內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的變更、組合或替換，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，且包含在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實(shí)施例1、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素10％、荷葉堿8％、丁香酸4％、油相基質(zhì)24％、乳化劑10％、滲透促進(jìn)劑6％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.1％和水37.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1:6:0.5組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比2:3組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比2:5組成。制備方法：S1取油相基質(zhì)加熱至75℃溶解，接著加入荷葉堿和丁香酸，攪拌至完全溶解，得油相液；S2將乳化劑加入水中加熱至75℃，攪拌至完全溶解，得水相液；S3將步驟S1得到的油相液加入步驟S2得到的水相液中混合，冷卻至30℃，加入葉綠素、滲透促進(jìn)劑和防腐劑，在pH值為6，轉(zhuǎn)速為1200rpm的條件下攪拌60min，即得。實(shí)施例2、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法：S1取油相基質(zhì)加熱至80℃溶解，接著加入荷葉堿和丁香酸，攪拌至完全溶解，得油相液；S2將乳化劑加入水中加熱至80℃，攪拌至完全溶解，得水相液；S3將步驟S1得到的油相液加入步驟S2得到的水相液中混合，冷卻至35℃，加入葉綠素、滲透促進(jìn)劑和防腐劑，在pH值為7，轉(zhuǎn)速為1400rpm的條件下攪拌40min，即得。實(shí)施例3、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素20％、荷葉堿12％、丁香酸8％、油相基質(zhì)12％、乳化劑6％、滲透促進(jìn)劑2％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.16％和水39.84％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比3:4:2組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比4:1組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比4:3組成。制備方法：S1取油相基質(zhì)加熱至85℃溶解，接著加入荷葉堿和丁香酸，攪拌至完全溶解，得油相液；S2將乳化劑加入水中加熱至85℃，攪拌至完全溶解，得水相液；S3將步驟S1得到的油相液加入步驟S2得到的水相液中混合，冷卻至40℃，加入葉綠素、滲透促進(jìn)劑和防腐劑，在pH值為8，轉(zhuǎn)速為1500rpm的條件下攪拌30min，即得。對(duì)比例1、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素22％、荷葉堿10％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，沒(méi)有添加丁香酸，增加葉綠素的重量份數(shù)。對(duì)比例2、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏包括以下組分及其重量百分比：葉綠素16％、荷葉堿10％、沒(méi)食子酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，將丁香酸替換為沒(méi)食子酸。對(duì)比例3、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述油相基質(zhì)由蜂蠟和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1:1組成。對(duì)比例4、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏包括以下組分及其重量百分比：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1:1:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比1:1:1組成。對(duì)比例5、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏包括以下組分及其重量百分比：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比1:1組成。對(duì)比例6、一種防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏所述防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏由以下組分及其重量百分比組成：葉綠素16％、荷葉堿10％、丁香酸6％、油相基質(zhì)20％、乳化劑8％、滲透促進(jìn)劑4％、對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.12％和水35.9％；所述油相基質(zhì)由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按重量比2:5:1組成；所述乳化劑由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按重量比3:2組成；所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比3:4組成。制備方法與實(shí)施例2類(lèi)似。與實(shí)施例2的區(qū)別在于，所述滲透促進(jìn)劑由尿素和薄荷醇按重量比1:1組成。試驗(yàn)例一、防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的消炎試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：選取60只昆明種小鼠，雌雄各半，體重為25-30g，由云南中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心提供。2、試驗(yàn)材料：實(shí)施例1、實(shí)施例2、對(duì)比例1和對(duì)比例2制備防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏；止痛消炎軟膏，購(gòu)于廣東恒健制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z44023482。3、試驗(yàn)方法：將60只小鼠隨機(jī)分為6組，分別為模型組、止痛消炎軟膏組、實(shí)施例1組、實(shí)施例2組、對(duì)比例1組和對(duì)比例2組，每組10只，然后在各組小鼠右耳均勻涂二甲苯50μl，左耳作對(duì)照，致炎后1h后，涂藥，給組給藥量如下：模型組：取等量的生理鹽水涂抹于小鼠背部的患處；止痛消炎軟膏組：取1g/kg的止痛消炎軟膏涂抹于小鼠背部的患處；實(shí)施例1組：取1g/kg的實(shí)施例1制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；實(shí)施例2組：取1g/kg的實(shí)施例2制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；對(duì)比例1組：取1g/kg的對(duì)比例1制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；對(duì)比例2組：取1g/kg的對(duì)比例2制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；分別涂上述藥膏3次，間隔30min涂1次。末次涂藥后30min脫椎處死，沿耳廓剪下二耳，用8mm打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片，稱(chēng)重，計(jì)算耳重差，耳重差＝右耳圓耳片重-左耳圓耳片重。4、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。表1防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏對(duì)小鼠耳殼二甲苯致腫的影響組別耳重差(mg)對(duì)照組8.12±1.30止痛消炎軟膏組5.70±0.42**實(shí)施例1組4.83±0.36**實(shí)施例2組4.08±0.35**對(duì)比例1組7.28±0.98對(duì)比例2組7.85±1.04注：與模型組組相比**P＜0.01。由表1可知，與模型組相比，實(shí)施例1組和實(shí)施例2組可以極顯著地降低小鼠的耳重差，其消炎效果比止痛消炎軟膏好，而對(duì)比例1組和對(duì)比例2組的耳重差與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏配伍合理，可以協(xié)同增強(qiáng)其消炎效果。試驗(yàn)例二、防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的止癢試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：選取60只豚鼠，體重250-300g，雌雄各半，由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2、試驗(yàn)材料：實(shí)施例1、實(shí)施例2、對(duì)比例1和對(duì)比例2制備防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏；止痛消炎軟膏，購(gòu)于廣東恒健制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z44023482。3、試驗(yàn)方法：將60只豚鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，試驗(yàn)24h前，給各組豚鼠右后足背剃毛，按本組劑量于動(dòng)物右后足背剃毛涂藥1次。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，用粗砂紙擦傷右后足剃毛處，面積1cm2，局部再涂藥1次，10min后開(kāi)始在創(chuàng)面處滴0.01％磷酸組織胺0.05ml/只，各組藥量如下：模型組：取等量的生理鹽水涂抹于小鼠背部的患處；止痛消炎軟膏組：取2g/kg的止痛消炎軟膏涂抹于小鼠背部的患處；實(shí)施例1組：取0.1g/kg的實(shí)施例1制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；實(shí)施例2組：取0.1g/kg的實(shí)施例2制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；對(duì)比例1組：取0.1g/kg的對(duì)比例1制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；對(duì)比例2組：取0.1g/kg的對(duì)比例2制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏涂抹于小鼠背部的患處；此后每隔3min依次用0.02％、0.03％、0.04％增濃度涂藥，每次均為0.05ml/只。直至豚鼠回頭添右后足時(shí)所給予的磷酸組織胺總量(μg)為致癢閾，記錄并比較各組的致癢閾。4、試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。表2防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的止癢試驗(yàn)組別止癢閥(磷酸組織胺總量μg)模型組32.4±11.5止痛消炎軟膏組72.5±11.56**實(shí)施例1組83.6±30.43**實(shí)施例2組90.6±30.14**對(duì)比例1組48.8±10.32對(duì)比例2組40.6±13.65注：與模型組組相比**P＜0.01。由表2可知，本發(fā)明實(shí)施例1組和實(shí)施例2組制備得到的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的止癢閥大于83.6，其止癢效果比止痛消炎軟膏的治療效果好，而對(duì)比例1組和對(duì)比例2組制備得到的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的止癢效果與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏各組分相互協(xié)調(diào)起止癢效果。試驗(yàn)例三、防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的安全性檢測(cè)按照《新藥毒理學(xué)研究指導(dǎo)原則》的要求對(duì)實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3制得的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏進(jìn)行皮膚刺激性、過(guò)敏性評(píng)價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表3。表3本發(fā)明消炎止痛膏安全性檢測(cè)結(jié)果組別現(xiàn)象結(jié)論實(shí)施例1無(wú)紅斑、無(wú)水腫無(wú)刺激、無(wú)致敏性實(shí)施例2無(wú)紅斑、無(wú)水腫無(wú)刺激、無(wú)致敏性實(shí)施例3無(wú)紅斑、無(wú)水腫無(wú)刺激、無(wú)致敏性由表3可知，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏對(duì)皮膚安全、無(wú)刺激，不會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng)，適合廣大群眾使用。試驗(yàn)例四、防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的驅(qū)蚊效果試驗(yàn)：1、選取對(duì)象：采用現(xiàn)場(chǎng)采集的野外品系致倦庫(kù)蚊蟲(chóng)，在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)羽化2-3天后進(jìn)行測(cè)定。2、試驗(yàn)材料：實(shí)施例2制備防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏。3、試驗(yàn)方法：隨機(jī)選取200只蚊蟲(chóng)，放入長(zhǎng)寬高均為40cm的蚊籠內(nèi)，選取8名試驗(yàn)者，其中男性4例，女性4例，選一只手涂抹本發(fā)明實(shí)施例2制備防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏，作為試驗(yàn)組；另一只手作為對(duì)照組。涂抹兩小時(shí)后，將手放入蚊籠內(nèi)2分鐘，觀察是否有蚊蟲(chóng)來(lái)吸血，以后每半小時(shí)測(cè)定一次，直至涂抹有精油的手有蚊蟲(chóng)叮咬時(shí)，停止觀察，結(jié)束試驗(yàn)，記錄有效保護(hù)時(shí)間。4、試驗(yàn)結(jié)果：8名試驗(yàn)者的有效保護(hù)時(shí)間分別為：6、7、6、5、5.5、7、6.5、5小時(shí)，經(jīng)計(jì)算得知，本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的驅(qū)蚊，平均有效保護(hù)時(shí)間可達(dá)到6小時(shí)，說(shuō)明本發(fā)明提供的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏驅(qū)蚊效果顯著。試驗(yàn)例五、透皮吸收試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、對(duì)比例3、對(duì)比例4、對(duì)比例5和對(duì)比例6制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏。2、試驗(yàn)方法：采用改良的Franz雙室滲透裝置，以離體小鼠皮膚為透皮屏障，以艾灰為指標(biāo)，采用體外擴(kuò)散池法，進(jìn)行體外滲透試驗(yàn)。分別稱(chēng)取3g實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、對(duì)比例3、對(duì)比例4、對(duì)比例5和對(duì)比例6制備的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏3份，均勻涂抹于離體小鼠皮膚后進(jìn)行透皮試驗(yàn)，分別于給藥后1、2、4、6、8、10、12、14h各取接受液1mL，采用高效液相色譜法測(cè)定葉綠素的累積滲透量，取樣后即向接收池內(nèi)補(bǔ)充1ml含2％吐溫80的PBS液。其累積滲透量的計(jì)算公式如下：Qn=Cn×1+Σi=1n-1Ci×1A]]>其中：Cn為第n個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度；A為滲透面積；Ci為第i(i<n—1)個(gè)取樣點(diǎn)測(cè)得的藥物濃度。以累積滲透量的平均值分別對(duì)時(shí)間t分別按零級(jí)、一級(jí)及Higuchi方程進(jìn)行擬合，所得方程的斜率即為透皮速率常數(shù)J。其中擴(kuò)散池面積為2.92cm2，接收液體積為7ml，接收液溫度為37±0.5℃，磁振子轉(zhuǎn)速200r·min-1，接收液為含2％吐溫-80的PBS液。3、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表4所示，以零級(jí)速率透皮轉(zhuǎn)運(yùn)，則Q-t直線(xiàn)的斜率即為透皮吸收速率。表4防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的透皮吸收試驗(yàn)組別透皮吸收速率(μg/cm2)實(shí)施例14.10實(shí)施例24.30實(shí)施例34.12對(duì)比例33.88對(duì)比例43.98對(duì)比例52.87對(duì)比例63.35由表4可知，本發(fā)明實(shí)施例1-3制備得到的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的透皮吸收速率大于4.10μg/cm2，而對(duì)比例2-6制備得到的防治蚊蟲(chóng)叮咬的葉綠素軟膏的透皮吸收速率均比本發(fā)明實(shí)施例1-3的乳膏劑的透皮吸收速率低，說(shuō)明本發(fā)明由蜂蠟、卵磷脂和肉豆蔻酸異丙酯按一定重量比組成的油相基質(zhì)，由硬脂酸甘油酯和三乙醇胺按一定重量比組成的乳化劑，由尿素和薄荷醇按一定重量比組成的滲透促進(jìn)劑可以有效提高軟膏的頭皮率，更有利于蚊蟲(chóng)叮咬傷口的愈合。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3