本發(fā)明公開(kāi)了一種廣譜蛇毒解毒劑的制備方法，屬于醫(yī)藥合成領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

地球上有蛇類1000種左右，其中對(duì)人類有危害的約占15%，其分布極廣，除南極洲，大西洋緯度400以上的冷水中，和少數(shù)島嶼如愛(ài)爾蘭、冰島、加勒比海和太平洋種的大部分海島外，在高至5000米的高山，冷至北極環(huán)，都有毒蛇存在。因此毒蛇咬傷是世界性問(wèn)題，只是發(fā)病率不同而已。其中最多的熱帶和亞熱帶山區(qū)，特別是發(fā)展中國(guó)家。毒蛇雖危害人類，但蛇也是人類的朋友，對(duì)環(huán)境的生態(tài)平衡起著重要作用，毒蛇還可以開(kāi)發(fā)為治療某些疾病的特效藥。據(jù)最近的蛇傷流行病學(xué)研究表明，全球每年發(fā)病率在5/106以上，中毒率為50%。盡管有抗蛇毒血清治療，但每年仍有125000人死于蛇傷，100000人留下嚴(yán)重后遺癥。

隨著多年來(lái)的應(yīng)用和生產(chǎn)工藝的改進(jìn)，抗毒血清已被公認(rèn)為蛇傷的最有效治療藥物。到1991年初，全世界已生產(chǎn)不同種類的抗毒蛇血清168種。但抗毒蛇血清并非十全十美，在應(yīng)用中暴露出許多缺點(diǎn)，（1）抗毒血清專一性強(qiáng)，用藥前必須鑒定蛇種，這往往不易做到；（2）必須在咬傷后立即用藥才能取得最好療效，這在交通不變的山區(qū)很難做到；（3）毒蛇毒液中的小肽能引起休克，其抗原性差，血清中的抗體達(dá)不到有效的治療濃度；（4）抗毒血清易發(fā)生過(guò)敏，因此有些臨床專家強(qiáng)調(diào)不要將抗毒血清作為蛇傷的常規(guī)用藥，要在出現(xiàn)明顯全身中毒癥狀時(shí)才用；（5）抗毒血清價(jià)格昂貴，有效期不長(zhǎng)，一般醫(yī)院不可能經(jīng)常儲(chǔ)備。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題：針對(duì)傳統(tǒng)蛇毒解毒劑使用抗毒血清專一性強(qiáng)，用藥前需要鑒定蛇種，且易發(fā)生過(guò)敏，有效期不長(zhǎng)，導(dǎo)致中毒者無(wú)法及時(shí)接受治療的問(wèn)題，提供了一種廣譜蛇毒解毒劑的制備方法，本發(fā)明首先取奶汁樹(shù)葉研磨后用酶解，得濾液，再取鮮柿經(jīng)洗滌后粉碎成果漿，經(jīng)果膠酶水解后用檸檬酸調(diào)節(jié)pH，再加入葡萄酒酵母密閉發(fā)酵，使柿子中有效成分分散于發(fā)酵產(chǎn)生的酒精中，再取雄黃，粉碎后用鹽酸除雜，經(jīng)干燥后將其與柿子發(fā)酵濾液，奶汁樹(shù)葉酶解濾液按比例混合，經(jīng)旋蒸濃縮后封裝得廣譜蛇毒解毒劑。本發(fā)明充分利用植物提取物對(duì)蛇毒中酶的抑制作用，配合除雜后的雄黃與蛇毒中酶蛋白分子上的巰基和羥基結(jié)合形成穩(wěn)定的絡(luò)合物或環(huán)狀化合物，使其失活，達(dá)到快速解毒的效果，且使用后不會(huì)發(fā)生過(guò)敏現(xiàn)象，封裝后可長(zhǎng)期存放，可大規(guī)模推廣使用。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

（1）采集新鮮奶汁樹(shù)葉300～500g，經(jīng)人工用去離子水反復(fù)清洗3～5次后，加入石磨中研磨，在研磨過(guò)程中混入800～1000mL去離子水，收集得綠色漿液，將其轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g纖維素酶和0.2～0.4g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為600～800r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)30～45min，抽濾，去除濾餅，得奶汁樹(shù)葉酶解濾液，備用；

（2）稱取新鮮柿子600～800g，經(jīng)人工用質(zhì)量濃度為0.05～0.07%高錳酸鉀溶液反復(fù)清洗去除表面污物，再用去離子水洗滌3～5次，隨后人工去除柿子果柄和花盤，再將柿子轉(zhuǎn)入植物組織粉碎機(jī)中，粉碎成果漿，將所得果漿轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為540～600r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～3h；

（3）待反應(yīng)結(jié)束，靜置，待燒杯中果漿自然冷卻至室溫，滴加濃度為0.5～0.7mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.4～4.6，將燒杯中物料轉(zhuǎn)入盛有2～3L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入20～30g葡萄酒酵母，于溫度為28～30℃條件下，密閉發(fā)酵5～7天，過(guò)濾，除去濾渣，收集得柿子發(fā)酵濾液，備用；

（4）稱取雄黃200～300g，加入萬(wàn)能粉碎機(jī)中，粉碎后過(guò)120～180目篩，得雄黃粉，并將其加入燒杯中，再加入300～400mL質(zhì)量濃度為37%鹽酸，用玻璃棒攪拌混合10～15min后，靜置18～24h，過(guò)濾，除去濾液，用去離子水洗滌濾餅至中性，再將濾餅轉(zhuǎn)入烘箱中，于80～85℃條件下，干燥4～5h，得除雜雄黃粉；

（5）按重量份數(shù)計(jì)，在混料機(jī)中依次加入100～120份步驟（3）備用柿子發(fā)酵濾液，8～12份上述所得除雜雄黃粉，4～6份步驟（1）備用奶汁樹(shù)葉酶解濾液，以450～500r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合40～60min，再將混料機(jī)中物料轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，于溫度為65～70℃條件下，旋蒸濃縮至原體積的1/2，出料，自然冷卻至室溫，封裝，即得廣譜蛇毒解毒劑。

本發(fā)明的應(yīng)用方法：被毒蛇咬傷后，迅速用清水沖洗傷口，并用力按壓住傷口周圍，隨后將本發(fā)明所得廣譜蛇毒解毒劑涂抹于傷口處，待4～6min后，擠壓傷口，用清水清洗除去傷口血液，用本發(fā)明所得解毒劑再次涂抹于傷口處，再用紗布包扎，每隔6～8h換藥一次，重復(fù)給藥3～5天，本發(fā)明所得解毒劑攜帶和使用方便，使用后患者中毒現(xiàn)象立刻緩解，經(jīng)重復(fù)給藥后毒性可徹底解除，且對(duì)使用者皮膚無(wú)刺激，無(wú)毒副作用，可大規(guī)模推廣使用。

本發(fā)明的有益效果是：

（1）本發(fā)明所得解毒劑攜帶和使用方便，對(duì)人體皮膚無(wú)毒副作用，可作為蛇傷的常規(guī)用藥推廣使用；

（2）本發(fā)明所用原材料來(lái)源廣泛，廉價(jià)易得，成品可長(zhǎng)期存放，療效好，使用前無(wú)須鑒定蛇種，具有廣譜抗毒效果，具有廣闊的市場(chǎng)前景。

具體實(shí)施方式

采集新鮮奶汁樹(shù)葉300～500g，經(jīng)人工用去離子水反復(fù)清洗3～5次后，加入石磨中研磨，在研磨過(guò)程中混入800～1000mL去離子水，收集得綠色漿液，將其轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g纖維素酶和0.2～0.4g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為600～800r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)30～45min，抽濾，去除濾餅，得濾液，備用；稱取新鮮柿子600～800g，經(jīng)人工用質(zhì)量濃度為0.05～0.07%高錳酸鉀溶液反復(fù)清洗去除表面污物，再用去離子水洗滌3～5次，隨后人工去除柿子果柄和花盤，再將柿子轉(zhuǎn)入植物組織粉碎機(jī)中，粉碎成果漿，將所得果漿轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為540～600r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～3h；待反應(yīng)結(jié)束，靜置，待燒杯中果漿自然冷卻至室溫，滴加濃度為0.5～0.7mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.4～4.6，將燒杯中物料轉(zhuǎn)入盛有2～3L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入20～30g葡萄酒酵母，于溫度為28～30℃條件下，密閉發(fā)酵5～7天，過(guò)濾，除去濾渣，收集得發(fā)酵濾液，備用；稱取雄黃200～300g，加入萬(wàn)能粉碎機(jī)中，粉碎后過(guò)120～180目篩，得雄黃粉，并將其加入燒杯中，再加入300～400mL質(zhì)量濃度為37%鹽酸，用玻璃棒攪拌混合10～15min后，靜置18～24h，過(guò)濾，除去濾液，用去離子水洗滌濾餅至中性，再將濾餅轉(zhuǎn)入烘箱中，于80～85℃條件下，干燥4～5h，得除雜雄黃粉；按重量份數(shù)計(jì)，在混料機(jī)中依次加入100～120份備用發(fā)酵濾液，8～12份上述所得除雜雄黃粉，4～6份備用濾液，以450～500r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合40～60min，再將混料機(jī)中物料轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，于溫度為65～70℃條件下，旋蒸濃縮至原體積的1/2，出料，自然冷卻至室溫，封裝，即得廣譜蛇毒解毒劑。

實(shí)例1

采集新鮮奶汁樹(shù)葉300～500g，經(jīng)人工用去離子水反復(fù)清洗3～5次后，加入石磨中研磨，在研磨過(guò)程中混入800～1000mL去離子水，收集得綠色漿液，將其轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g纖維素酶和0.2～0.4g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為600～800r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)30～45min，抽濾，去除濾餅，得濾液，備用；稱取新鮮柿子600～800g，經(jīng)人工用質(zhì)量濃度為0.05～0.07%高錳酸鉀溶液反復(fù)清洗去除表面污物，再用去離子水洗滌3～5次，隨后人工去除柿子果柄和花盤，再將柿子轉(zhuǎn)入植物組織粉碎機(jī)中，粉碎成果漿，將所得果漿轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為540～600r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～3h；待反應(yīng)結(jié)束，靜置，待燒杯中果漿自然冷卻至室溫，滴加濃度為0.5～0.7mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.4～4.6，將燒杯中物料轉(zhuǎn)入盛有2～3L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入20～30g葡萄酒酵母，于溫度為28～30℃條件下，密閉發(fā)酵5～7天，過(guò)濾，除去濾渣，收集得發(fā)酵濾液，備用；稱取雄黃200～300g，加入萬(wàn)能粉碎機(jī)中，粉碎后過(guò)120～180目篩，得雄黃粉，并將其加入燒杯中，再加入300～400mL質(zhì)量濃度為37%鹽酸，用玻璃棒攪拌混合10～15min后，靜置18～24h，過(guò)濾，除去濾液，用去離子水洗滌濾餅至中性，再將濾餅轉(zhuǎn)入烘箱中，于80～85℃條件下，干燥4～5h，得除雜雄黃粉；按重量份數(shù)計(jì)，在混料機(jī)中依次加入100～120份備用發(fā)酵濾液，8～12份上述所得除雜雄黃粉，4～6份備用濾液，以450～500r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合40～60min，再將混料機(jī)中物料轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，于溫度為65～70℃條件下，旋蒸濃縮至原體積的1/2，出料，自然冷卻至室溫，封裝，即得廣譜蛇毒解毒劑。

被毒蛇咬傷后，迅速用清水沖洗傷口，并用力按壓住傷口周圍，隨后將本發(fā)明所得廣譜蛇毒解毒劑涂抹于傷口處，待4min后，擠壓傷口，用清水清洗除去傷口血液，用本發(fā)明所得解毒劑再次涂抹于傷口處，再用紗布包扎，每隔6h換藥一次，重復(fù)給藥3天，本發(fā)明所得解毒劑攜帶和使用方便，使用后患者中毒現(xiàn)象立刻緩解，經(jīng)重復(fù)給藥后毒性可徹底解除，且對(duì)使用者皮膚無(wú)刺激，無(wú)毒副作用，可大規(guī)模推廣使用。

實(shí)例2

采集新鮮奶汁樹(shù)葉300～500g，經(jīng)人工用去離子水反復(fù)清洗3～5次后，加入石磨中研磨，在研磨過(guò)程中混入800～1000mL去離子水，收集得綠色漿液，將其轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g纖維素酶和0.2～0.4g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為600～800r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)30～45min，抽濾，去除濾餅，得濾液，備用；稱取新鮮柿子600～800g，經(jīng)人工用質(zhì)量濃度為0.05～0.07%高錳酸鉀溶液反復(fù)清洗去除表面污物，再用去離子水洗滌3～5次，隨后人工去除柿子果柄和花盤，再將柿子轉(zhuǎn)入植物組織粉碎機(jī)中，粉碎成果漿，將所得果漿轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為540～600r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～3h；待反應(yīng)結(jié)束，靜置，待燒杯中果漿自然冷卻至室溫，滴加濃度為0.5～0.7mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.4～4.6，將燒杯中物料轉(zhuǎn)入盛有2～3L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入20～30g葡萄酒酵母，于溫度為28～30℃條件下，密閉發(fā)酵5～7天，過(guò)濾，除去濾渣，收集得發(fā)酵濾液，備用；稱取雄黃200～300g，加入萬(wàn)能粉碎機(jī)中，粉碎后過(guò)120～180目篩，得雄黃粉，并將其加入燒杯中，再加入300～400mL質(zhì)量濃度為37%鹽酸，用玻璃棒攪拌混合10～15min后，靜置18～24h，過(guò)濾，除去濾液，用去離子水洗滌濾餅至中性，再將濾餅轉(zhuǎn)入烘箱中，于80～85℃條件下，干燥4～5h，得除雜雄黃粉；按重量份數(shù)計(jì)，在混料機(jī)中依次加入100～120份備用發(fā)酵濾液，8～12份上述所得除雜雄黃粉，4～6份備用濾液，以450～500r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合40～60min，再將混料機(jī)中物料轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，于溫度為65～70℃條件下，旋蒸濃縮至原體積的1/2，出料，自然冷卻至室溫，封裝，即得廣譜蛇毒解毒劑。

被毒蛇咬傷后，迅速用清水沖洗傷口，并用力按壓住傷口周圍，隨后將本發(fā)明所得廣譜蛇毒解毒劑涂抹于傷口處，待5min后，擠壓傷口，用清水清洗除去傷口血液，用本發(fā)明所得解毒劑再次涂抹于傷口處，再用紗布包扎，每隔7h換藥一次，重復(fù)給藥4天，本發(fā)明所得解毒劑攜帶和使用方便，使用后患者中毒現(xiàn)象立刻緩解，經(jīng)重復(fù)給藥后毒性可徹底解除，且對(duì)使用者皮膚無(wú)刺激，無(wú)毒副作用，可大規(guī)模推廣使用。

實(shí)例3

采集新鮮奶汁樹(shù)葉300～500g，經(jīng)人工用去離子水反復(fù)清洗3～5次后，加入石磨中研磨，在研磨過(guò)程中混入800～1000mL去離子水，收集得綠色漿液，將其轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g纖維素酶和0.2～0.4g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為600～800r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)30～45min，抽濾，去除濾餅，得濾液，備用；稱取新鮮柿子600～800g，經(jīng)人工用質(zhì)量濃度為0.05～0.07%高錳酸鉀溶液反復(fù)清洗去除表面污物，再用去離子水洗滌3～5次，隨后人工去除柿子果柄和花盤，再將柿子轉(zhuǎn)入植物組織粉碎機(jī)中，粉碎成果漿，將所得果漿轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入0.3～0.5g果膠酶，隨后將燒杯轉(zhuǎn)入水浴磁力攪拌器中，于溫度為42～45℃，轉(zhuǎn)速為540～600r/min條件下，恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～3h；待反應(yīng)結(jié)束，靜置，待燒杯中果漿自然冷卻至室溫，滴加濃度為0.5～0.7mol/L檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH至4.4～4.6，將燒杯中物料轉(zhuǎn)入盛有2～3L去離子水的發(fā)酵罐中，再加入20～30g葡萄酒酵母，于溫度為28～30℃條件下，密閉發(fā)酵5～7天，過(guò)濾，除去濾渣，收集得發(fā)酵濾液，備用；稱取雄黃200～300g，加入萬(wàn)能粉碎機(jī)中，粉碎后過(guò)120～180目篩，得雄黃粉，并將其加入燒杯中，再加入300～400mL質(zhì)量濃度為37%鹽酸，用玻璃棒攪拌混合10～15min后，靜置18～24h，過(guò)濾，除去濾液，用去離子水洗滌濾餅至中性，再將濾餅轉(zhuǎn)入烘箱中，于80～85℃條件下，干燥4～5h，得除雜雄黃粉；按重量份數(shù)計(jì)，在混料機(jī)中依次加入100～120份備用發(fā)酵濾液，8～12份上述所得除雜雄黃粉，4～6份備用濾液，以450～500r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合40～60min，再將混料機(jī)中物料轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，于溫度為65～70℃條件下，旋蒸濃縮至原體積的1/2，出料，自然冷卻至室溫，封裝，即得廣譜蛇毒解毒劑。

被毒蛇咬傷后，迅速用清水沖洗傷口，并用力按壓住傷口周圍，隨后將本發(fā)明所得廣譜蛇毒解毒劑涂抹于傷口處，待6min后，擠壓傷口，用清水清洗除去傷口血液，用本發(fā)明所得解毒劑再次涂抹于傷口處，再用紗布包扎，每隔8h換藥一次，重復(fù)給藥5天，本發(fā)明所得解毒劑攜帶和使用方便，使用后患者中毒現(xiàn)象立刻緩解，經(jīng)重復(fù)給藥后毒性可徹底解除，且對(duì)使用者皮膚無(wú)刺激，無(wú)毒副作用，可大規(guī)模推廣使用。