本發(fā)明涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包含以下各項(xiàng)的組合：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含至少一種目標(biāo)化合物、通常是至少一種藥物化合物的至少一種載體，所述藥物組合物待被給藥到需要這樣的至少一種目標(biāo)化合物的受試者，其中所述至少一種生物相容性納米粒子和所述包含至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體的組合增強(qiáng)所述一種或多種目標(biāo)化合物的效率。所述生物相容性納米粒子的最長維度通常是約4nm至約500nm，并且它的絕對表面電荷值是至少10mv(|10mv|)。所述載體沒有任何表面空間穩(wěn)定劑。本發(fā)明還涉及這樣的一種組合物，所述組合物用于向有需要的受試者給藥所述一種或多種目標(biāo)化合物，其中所述在一側(cè)的至少一種納米粒子和所述在另一側(cè)的包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體優(yōu)選地在所述受試者中順序給藥，通常彼此相隔超過5分鐘至約72小時(shí)。當(dāng)與所述目標(biāo)化合物以標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量，通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下給藥時(shí)由所述化合物誘導(dǎo)的藥物益處和毒性相比時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子和所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體向所述受試者的組合并且通常是順序的給藥在所述受試者中以降低的毒性維持所述一種或多種目標(biāo)化合物的藥物(即治療、預(yù)防或診斷)益處，或以等同或降低的毒性增加它的藥物益處。當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下所述一種或多種化合物的標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量相比時(shí)，本發(fā)明的藥物組合物通常允許所給藥的一種或多種化合物的藥物劑量減少至少10％，同時(shí)以等同的毒性、優(yōu)選降低的毒性維持對于所述受試者相同的藥物益處，或同時(shí)以等同或降低的毒性增加對于所述受試者的藥物益處。
背景技術(shù)：
：：使用納米技術(shù)以更安全和更有效的方式向患者遞送治療劑和診斷劑已經(jīng)使得在過去的幾十年期間對該領(lǐng)域的關(guān)注增加。已經(jīng)出現(xiàn)了藥物遞送系統(tǒng)，通常是載體，如脂質(zhì)體、乳液或膠束，它們意在使藥物的治療功效由于它們的生物分布特征的控制而達(dá)到最大。那些系統(tǒng)提供了包封難溶性藥物、保護(hù)藥物不被破壞或消除、和/或改變藥物的血液循環(huán)和分布的可能性。所觀測到的第一代藥物遞送系統(tǒng)(dds)的快速血液清除(由于它們被單核吞噬系統(tǒng)(mps)捕捉)已經(jīng)促使開發(fā)第二代的dds，所述第二代dds表現(xiàn)出由空間穩(wěn)定劑改性的表面，所述空間穩(wěn)定劑被選擇以在連接到dds的表面時(shí)為dds帶來“隱形”特性。這些試劑通常是柔性和/或親水性聚合物，如聚乙二醇(peg)聚合物并且通?？梢詭晕⒇?fù)或正表面電荷?？臻g穩(wěn)定防止dds的表面與血液組分的非特異性結(jié)合并且減少它在體內(nèi)由單核吞噬系統(tǒng)(mps)的細(xì)胞快速吸收和清除，從而使得dds血液循環(huán)時(shí)間延長[jaink.r.和stylianopoulost.deliveringnanomedicinetosolidtumors(向?qū)嶓w腫瘤遞送納米藥物),naturereviews.clinicaloncology2010,7,653-664]。脂質(zhì)體長循環(huán)納米粒子藥用藥物遞送系統(tǒng)(ndds)是最常研究的ndds類型；然而，合成兩親性聚合物也已經(jīng)被用于使其它類型的ndds在空間上穩(wěn)定以改變它們的生物分布[torchilinv.p.multifunctional,stimuli-sensitivenanoparticulatesystemsfordrugdelivery(用于藥物遞送的多功能刺激敏感性納米粒子系統(tǒng)),naturereviews.drugdiscovery2014,13,813-827]。盡管存在這樣的血液循環(huán)時(shí)間增加(即血液轉(zhuǎn)運(yùn)增強(qiáng))，這被認(rèn)為有益于將治療性化合物遞送到它的靶位點(diǎn)，但是發(fā)現(xiàn)柔性和/或親水性聚合物涂層，通常是peg涂層會損害藥物化合物的細(xì)胞內(nèi)遞送(即化合物在它的靶位點(diǎn)的釋放)，這最終導(dǎo)致遞送系統(tǒng)的活性的喪失?？朔@一限制的一種途徑是使用可裂解的peg系統(tǒng)。然而，這樣的載體的設(shè)計(jì)的復(fù)雜性增加可能在載體表面特性的再現(xiàn)性方面產(chǎn)生困難，從而導(dǎo)致批次間的不可接受的變異性。此外，長時(shí)間暴露于那些“隱形”dds已經(jīng)與更不良的事件相關(guān)。doxil是包含多柔比星的聚乙二醇化脂質(zhì)體制劑，例如被發(fā)現(xiàn)會產(chǎn)生嚴(yán)重不良事件，如手足綜合征或粘膜炎。脂質(zhì)體的親水性涂層被質(zhì)疑為可能促進(jìn)它們在手掌和足底的外分泌汗腺中的積聚[pegylatedliposomaldoxorubicin-relatedpalmar-plantarerythrodysesthesia('hand-foot'syndrome)(聚乙二醇化脂質(zhì)體多柔比星相關(guān)的掌跖感覺喪失性紅斑(‘手足’綜合征)),d.lorusso等,annalsofoncology.2007；18,1159-1164]。wo2005/063305涉及一種組裝體，其包括氣體填充的微泡(通常具有至少0.5μm的尺寸)和與所述微泡締合的組分(具有約低于100nm的尺寸)。所得的組裝體用作診斷和/或治療活性制劑中的藥物活性組分。這兩種組分，即氣體填充的微泡和與微泡締合的組分通常同時(shí)給藥以增強(qiáng)超聲造影成像領(lǐng)域中的成像，包括靶向超聲成像領(lǐng)域、超聲介導(dǎo)的藥物遞送以及其它成像技術(shù)。如從現(xiàn)有技術(shù)所顯而易見的那樣并且盡管存在長期的醫(yī)療需求，但是將藥物化合物(包括治療性、預(yù)防性以及診斷性化合物)安全和有效地遞送到它們的一個(gè)或多個(gè)靶位點(diǎn)仍是一個(gè)問題。顯然需要提高化合物的功效和安全性，或換句話說，藥物化合物的轉(zhuǎn)運(yùn)和釋放，以使必要和足夠量的所述化合物到達(dá)它在受試者體內(nèi)的靶位點(diǎn)以獲得所期望的診斷、治療或預(yù)防作用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明現(xiàn)在允許優(yōu)化目標(biāo)化合物(在本文也簡稱為“化合物”)的效率，無論它在治療、預(yù)防還是診斷背景下的預(yù)期用途如何。本文所述的組合物是以下各項(xiàng)的組合：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體，所述組合物優(yōu)化了所述至少一種目標(biāo)化合物的藥物代謝動力學(xué)參數(shù)，并且因此，現(xiàn)在使得有可能開發(fā)藥物化合物，所述藥物化合物原本由于例如它們的不可接受的毒性而不能被開發(fā)。通常，所述生物相容性納米粒子不被用作藥物化合物，即治療性、預(yù)防性或診斷性化合物。本發(fā)明的典型組合物(在本文一般被稱為“藥物組合物”)是包含以下各項(xiàng)組合的組合物：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含至少一種化合物(“目標(biāo)化合物”)的至少一種載體，其中所述生物相容性納米粒子的最長或最大維度通常是約4nm至約500nm，并且所述生物相容性納米粒子的絕對表面電荷值是至少10mv，并且其中所述載體沒有任何表面空間穩(wěn)定劑，即沒有柔性和/或親水性聚合物，優(yōu)選地沒有為所述載體的表面帶來略微負(fù)或正電荷的親水性聚合物，如peg。通常，所述(至少一種)生物相容性納米粒子與所述包含至少一種目標(biāo)化合物的(至少一種)載體之間的比率是0.1/1至1000/1或0.5/1至1000/1，優(yōu)選地是0.5/1至500/1，甚至更優(yōu)選地是0.5/1至300/1。術(shù)語“約”和“大約”在與例如像納米粒子的尺寸或時(shí)間間隔的值相關(guān)時(shí)表示指示值的變化，所述變化將由本領(lǐng)域技術(shù)人員識別為小的變化，基本上不影響與它相關(guān)的主題的特性并且所述主題仍落入要求保護(hù)的發(fā)明的精神內(nèi)。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的目的是一種藥物組合物，所述藥物組合物包含以下各項(xiàng)的組合：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含至少一種目標(biāo)化合物、通常是至少一種藥物化合物的至少一種載體，其中所述生物相容性納米粒子的最長或最大維度是約4nm至約500nm，并且所述生物相容性納米粒子的絕對表面電荷值是至少10mv(|10mv|)，并且其中所述載體沒有任何表面空間穩(wěn)定劑，所述藥物組合物用于向有需要的受試者給藥所述至少一種目標(biāo)化合物，其中在一側(cè)的所述至少一種生物相容性納米粒子和在另一側(cè)的所述包含所述至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體優(yōu)選地在需要所述至少一種目標(biāo)化合物的受試者中分開給藥，通常彼此間隔超過5分鐘至約72小時(shí)，并且其中所述生物相容性納米粒子不被用作藥物化合物。當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下由標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量的所述目標(biāo)化合物誘導(dǎo)的藥物益處和毒性相比時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子和所述包含目標(biāo)化合物的至少一種載體經(jīng)由本發(fā)明的組合物向所述受試者的組合并且通常是順序的給藥通常對于所述受試者以降低的毒性允許(維持)所述一種或多種化合物的相同的藥物(即治療、預(yù)防或診斷)益處，或?qū)τ谒鍪茉囌咭缘韧蚪档偷亩拘栽黾铀鲆环N或多種化合物的藥物益處。當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下所述化合物的標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量相比時(shí)，本發(fā)明的藥物組合物通常允許所給藥的一種或多種藥物(即治療性、預(yù)防性或診斷性)化合物的劑量減少至少10％，優(yōu)選地至少15％，并且(i)同時(shí)對于所述受試者以等同的毒性、優(yōu)選降低的毒性維持相同的藥物益處；或(ii)同時(shí)對于所述受試者等同或降低的毒性增加藥物益處。生物相容性納米粒子由于粒子的形狀可能影響它的“生物相容性”，因此具有非常均勻形狀的粒子在本文是優(yōu)選的。出于藥物代謝動力學(xué)原因，在形狀上基本上呈球形/圓形或卵形的納米粒子因此是優(yōu)選的。這樣的形狀還有利于納米粒子與細(xì)胞相互作用或被細(xì)胞攝入。球形/圓形形狀是特別優(yōu)選的。在本發(fā)明的精神范圍內(nèi)，術(shù)語“納米粒子”指的是產(chǎn)品，特別是合成產(chǎn)品，具有納米范圍的尺寸，通常是約1nm至約500nm，優(yōu)選地約4nm至約500nm、約4nm至約400nm、約30nm至約300nm、約20nm至約300nm、約10nm至約300nm，例如約4nm至約100nm，例如約10nm、15nm或20nm至約100nm、或約100nm至約500nm，通常約100nm至約300nm。本文的術(shù)語“納米粒子的尺寸”、“納米粒子的最大尺寸”以及“納米粒子的最長尺寸”通常指的是“納米粒子的最長或最大尺寸”或當(dāng)形狀是球形/圓形或卵形時(shí)“納米粒子的直徑”。可以使用透射電子顯微鏡術(shù)(tem)或冷凍tem來測量納米粒子的尺寸。同樣，可以使用動態(tài)光散射(dls)來測量溶液中納米粒子的流體動力學(xué)直徑。這兩種方法還可以一個(gè)接一個(gè)地使用以將通過dls所測量的納米粒子的流體動力學(xué)直徑與通過tem或冷凍tem所測量的所述納米粒子的尺寸相比較，以確認(rèn)所述尺寸。優(yōu)選的方法是dls(參考國際標(biāo)準(zhǔn)iso22412粒度分析：動態(tài)光散射，國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(internationalstandardiso22412particlesizeanalysis–dynamiclightscattering,internationalorganisationforstandardisation，iso)，2008年)。為了在本發(fā)明的背景下有用，生物相容性納米粒子的絕對靜電表面電荷(在本文也被稱為“電荷”或“表面電荷”)應(yīng)該高于|10mv|(絕對值)。納米粒子的表面電荷通常在水性介質(zhì)中通過ζ電位測量來確定，其中納米粒子濃度是0.2g/l至10g/l，ph值是6至8，并且通常水性介質(zhì)中電解質(zhì)的濃度是0.001m至0.2m，例如0.01m或0.15m。通常，本發(fā)明的生物相容性納米粒子具有至少|(zhì)10mv|的電子表面電荷，即低于-10mv或高于+10mv，例如低于-12mv或-15mv至-20mv或高于+12mv或+15mv至+20mv，通常低于-15mv或高于+15mv。優(yōu)選地，本發(fā)明的生物相容性納米粒子具有多于10mv的絕對電子表面電荷值(“絕對表面電荷值”)，所述電荷甚至更優(yōu)選地是負(fù)電荷。納米粒子的組合特性、尺寸和表面電荷允許納米粒子的血液循環(huán)短以及外滲到肝臟器官中。因此，通過順序給藥本發(fā)明的生物相容性納米粒子和包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的載體，實(shí)現(xiàn)了這兩種化合物(即生物相容性納米粒子和包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的載體)的不共循環(huán)或有限的共循環(huán)。因此，生物相容性納米粒子的組合特性、尺寸和表面電荷容許安全使用所述一種或多種目標(biāo)化合物，同時(shí)當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下由所述化合物的標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量所誘導(dǎo)的藥物益處和毒性相比時(shí)，對于受試者以降低的毒性允許(維持)所述一種或多種化合物的相同藥物(即治療、預(yù)防或診斷)益處，或換句話說，同時(shí)對于受試者以等同或降低的毒性(優(yōu)選地降低的毒性)增加所述一種或多種化合物的藥物益處。只要它帶電荷，在本發(fā)明的背景下有用的納米粒子就可以是有機(jī)的或無機(jī)的。還可以使用有機(jī)納米粒子和無機(jī)納米粒子的混合物。當(dāng)是有機(jī)納米粒子時(shí)，所述納米粒子可以是基于脂質(zhì)的納米粒子(甘油脂、磷脂、固醇脂質(zhì)等)，如固體脂質(zhì)納米粒子；基于蛋白質(zhì)的納米粒子，在本文也被稱為“蛋白質(zhì)納米粒子”(例如白蛋白)；基于聚合物的納米粒子(“聚合物納米粒子”)；基于共聚物的納米粒子(“共聚物納米粒子”)；基于碳的納米粒子；病毒樣納米粒子(例如病毒載體)。所述有機(jī)納米粒子還可以是納米球(普通納米粒子)或納米膠囊(中空納米粒子)，如脂質(zhì)體、凝膠、水凝膠、膠束、樹枝狀聚合物等。還可以使用本文所述的有機(jī)納米粒子的混合物。聚合物或共聚物可以是天然或合成來源的。在本發(fā)明的背景下可用于制備有機(jī)納米粒子的合成(人工)和天然聚合物或共聚物的實(shí)例可以選自聚乳酸(pla)、聚丙交酯-乙醇酸共聚物(plga)、聚乙二醇(peg)、聚糖乳酸(polyglactin)、聚丙交酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚丙二醇、聚山梨酸酯、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氰基丙烯酸烷基酯、聚乳酸酯-乙醇酸酯共聚物、聚酰胺-胺、聚乙烯亞胺、藻酸鹽、纖維素和纖維素衍生物聚合物、膠原、透明質(zhì)酸、聚谷氨酸(pga)、肌動蛋白、多糖、以及明膠。當(dāng)是無機(jī)納米粒子時(shí)并且當(dāng)它的最長維度通常低于約10nm，例如低于約8nm、低于約7nm，通常包括約7nm至約4nm，例如低于約6nm、低于約5nm或低于約4nm時(shí)，所述納米粒子可以由任何無機(jī)材料制成。所述無機(jī)材料可以例如包含來自門捷列夫周期表(mendeleev'speriodictable)的第3周期、第4周期、第5周期、第6周期的金屬元素，包括鑭系元素。當(dāng)納米粒子的最長維度通常低于約10nm時(shí)，所述納米粒子可以被組裝成更大的結(jié)構(gòu)。將納米粒子組裝成更大的結(jié)構(gòu)通?？梢酝ㄟ^納米粒子與一種或多種生物相容性聚合物、一種或多種蛋白質(zhì)等之間的相互作用來觸發(fā)。也可以通過將納米粒子捕集在載體中來獲得更大的結(jié)構(gòu)，所述載體通常是普通載體，如明膠結(jié)構(gòu)(在本文也被稱為“明膠納米粒子”)或中空載體，如脂質(zhì)體。在體內(nèi)給藥之后，那些更大的結(jié)構(gòu)可以進(jìn)一步由本領(lǐng)域技術(shù)人員設(shè)計(jì)成釋放納米粒子。當(dāng)是無機(jī)納米粒子時(shí)并且當(dāng)所述納米粒子的最長維度通常是至少10nm，通常10nm至500nm時(shí)，所述納米粒子可以包含以下各項(xiàng)中的至少一種或可以由以下各項(xiàng)組成：(i)選自例如mg、ca、ba以及sr的一種或多種二價(jià)金屬元素；(ii)選自例如fe和al的一種或多種三價(jià)金屬元素；以及(iii)包括si的一種或多種四價(jià)金屬元素。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，納米粒子的無機(jī)材料選自(i)選自例如mg、ca、ba以及sr的一種或多種二價(jià)金屬元素；(ii)選自例如fe和al的一種或多種三價(jià)金屬元素；以及(iii)包括si的一種或多種四價(jià)金屬元素。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，納米粒子的無機(jī)材料選自碳酸鈣(caco3)、碳酸鎂(mgco3)、鎂氫氧化物(mg(oh)2)、鐵氫氧化物(fe(oh)2)、羥基氧化鐵(feooh)、鐵氧化物(fe3o4或fe2o3)、鋁氧化物(al3o4)、鋁氫氧化物(al(oh)3)、羥基氧化鋁(alooh)以及硅氧化物(sio2)。用于本文所述的組合物中的納米粒子具有生物相容性，即與活組織相容。當(dāng)它們的組成需要時(shí)，納米粒子因此將被生物相容性材料包被以變成可用的。在本發(fā)明的一個(gè)具體的實(shí)施方式中，本文所提到的納米粒子因此被生物相容性涂層覆蓋。生物相容性材料可以是允許與生物靶標(biāo)相互作用的試劑。當(dāng)納米粒子的絕對電荷是至少10mv時(shí)，這樣的試劑通常將在納米粒子的表面上帶正電荷或負(fù)電荷。在納米粒子的表面上形成正電荷的試劑可以例如選自氨基丙基三乙氧基硅烷或聚賴氨酸。在納米粒子表面上形成負(fù)電荷的試劑可以例如選自磷酸鹽(例如多磷酸鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽等)、羧酸鹽(例如檸檬酸鹽或二羧酸，特別是丁二酸)以及硫酸鹽。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，只要納米粒子的絕對電荷是至少10mv(|10mv|)，所述納米粒子就可以被包含顯示空間基團(tuán)的試劑的生物相容性材料包被，這樣的試劑在本文也被稱為“表面空間穩(wěn)定劑”。這樣的顯示空間基團(tuán)的試劑可以例如選自聚乙二醇(peg)；聚氧化乙烯；聚乙烯醇；聚丙烯酸酯；聚丙烯酰胺(聚(n-異丙基丙烯酰胺))；聚碳酰二胺；生物聚合物；多糖，如葡聚糖、木聚糖以及纖維素；膠原；兩性離子化合物，如聚磺酸甜菜堿；等。生物相容性涂層可以有利地是“完全涂層”(完全單層)。這意味著在納米粒子的全部表面上存在形成適當(dāng)電荷的非常高密度的生物相容性分子。生物相容性涂層還可以包含標(biāo)記劑，通常是允許使用標(biāo)準(zhǔn)成像設(shè)備使顏色可視化的試劑。當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下由標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量、通常是治療劑量的所述化合物誘導(dǎo)的藥物益處和毒性相比時(shí)，通常當(dāng)彼此相隔超過5分鐘至約72小時(shí)向需要所述一種或多種目標(biāo)化合物的受試者給藥時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子與所述包含所述至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體一起組合給藥對于所述受試者以降低的毒性維持了所述一種或多種目標(biāo)化合物的藥物(即治療、預(yù)防或診斷)益處，通常是治療益處，或?qū)τ谒鍪茉囌咭缘韧蚪档偷亩拘栽黾恿怂鲆环N或多種目標(biāo)化合物的藥物益處。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，當(dāng)與通常在不存在任何生物相容性納米粒子和/或載體的情況下標(biāo)準(zhǔn)治療劑量的所述化合物相比時(shí)，通常當(dāng)彼此相隔超過5分鐘至約72小時(shí)向需要所述至少一種目標(biāo)化合物的受試者給藥時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子和所述包含所述至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體的組合給藥允許所給藥的一種或多種化合物的治療劑量減少至少10％，優(yōu)選地至少15％，同時(shí)對于所述受試者以等同的毒性或降低的毒性維持所述一種或多種化合物的相同的治療益處；或同時(shí)對于所述受試者以等同或降低的毒性增加所述一種或多種化合物的治療益處。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述至少一種納米粒子與幾種載體，通常是至少兩種載體一起給藥，所述載體中的每一種包含至少一種目標(biāo)化合物。第一載體中存在的目標(biāo)化合物可以與第二載體或另一個(gè)不同的載體中存在的那些相同或不同。所述納米粒子優(yōu)選地通常在被給藥到需要所述目標(biāo)化合物的受試者之后的1小時(shí)至6周內(nèi)，例如1個(gè)月(4周)內(nèi)；1小時(shí)至1個(gè)月內(nèi)，例如1小時(shí)至3周、或1小時(shí)至2周、或1小時(shí)至1周內(nèi)，從它被給藥到的受試者中清除。構(gòu)成納米粒子(包括它的生物相容性涂層(在存在時(shí)))的材料在確定所述納米粒子的生物持久性(即在受試者體內(nèi)的持久性)中是重要的。所述納米粒子可以被認(rèn)為是可生物降解的(當(dāng)由例如可生物降解的聚合物，如plga或pla構(gòu)成時(shí))和/或可溶解的(例如氧化鐵)、或不可生物降解的和不可溶解的?？缮锝到獾暮涂扇芙獾募{米粒子比不可生物降解的和/或不可溶解的納米粒子更快地從受試者體內(nèi)清除。目標(biāo)化合物不同的分子或藥劑可以根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)用作所述至少一種目標(biāo)化合物，通常至少一種目標(biāo)藥物化合物。這種化合物可以是如先前所解釋的治療性、預(yù)防性或診斷性化合物。它可以是有機(jī)化合物或無機(jī)化合物。用作“目標(biāo)化合物”的化合物的實(shí)例通常選自小分子、細(xì)胞毒性化合物以及過渡金屬配位絡(luò)合物。在本發(fā)明的背景下，小分子是具有約10-9m量級的尺寸的低分子量(<900道爾頓)有機(jī)化合物。大部分的藥物是小分子。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，在本發(fā)明的背景下使用的目標(biāo)化合物是靶向小分子。靶向小分子一般抑制惡性細(xì)胞內(nèi)突變、過表達(dá)、或在其它方面關(guān)鍵的蛋白質(zhì)(癌癥治療背景下的潛在靶標(biāo))上的酶結(jié)構(gòu)域。靶向小分子包括靶向細(xì)胞分裂(例如極光激酶抑制劑或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑)、或另外的生物機(jī)制，如蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換或染色質(zhì)修飾(例如組蛋白脫乙酰酶抑制劑)的那些分子。靶向小分子的實(shí)例是伊馬替尼(imatinib)、雷帕霉素(rapamycin)、吉非替尼(gefitinib)、埃羅替尼(erlotinib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、尼羅替尼(nilotinib)、達(dá)沙替尼(dasatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、硼替佐米(bortezomib)、阿托伐他汀(atorvastatin)等。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，在本發(fā)明的背景下使用的目標(biāo)化合物是細(xì)胞毒性化合物，例如化學(xué)治療劑。細(xì)胞毒性化合物可以例如選自dna修飾劑，如蒽環(huán)霉素(anthracycline)(例如多柔比星(doxorubicine)、柔紅霉素(daunorubicine)等)；烷化劑(例如美法侖(melphalan)或替莫唑胺(temozolomide))；以及非常精確地干擾限定的生理機(jī)制，如微管聚合(例如紫杉醇(taxol))、或代謝產(chǎn)物合成(例如甲氨蝶呤(methotrexate))的藥物。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述細(xì)胞毒性化合物是可活化的細(xì)胞毒性化合物。光卟啉(photofrin)是這樣的可活化的細(xì)胞毒性化合物的實(shí)例，通常用于光動力治療的背景下。光卟啉由激光源活化以產(chǎn)生它的治療作用。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，在本發(fā)明的背景下使用的目標(biāo)化合物是過渡金屬配合物。過渡金屬配位物相對于更常見的有機(jī)基藥物提供潛在的優(yōu)勢，包括廣泛的配位數(shù)和幾何形狀、可達(dá)到的氧化還原狀態(tài)、配體取代的熱力學(xué)和動力學(xué)的‘調(diào)節(jié)能力’以及廣泛的結(jié)構(gòu)多樣性。基于金屬的物質(zhì)與細(xì)胞分子靶標(biāo)相互作用，從而影響生物化學(xué)功能，進(jìn)而引起惡性細(xì)胞破壞。過渡金屬配合物通常是作用于dna結(jié)構(gòu)的細(xì)胞毒性劑(例如鉑配合物：順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、草酸鉑(oxaloplatin)、或釕或金配合物)。載體根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法將所述至少一種目標(biāo)化合物包封或浸漬于載體中，或接枝(結(jié)合)到這樣的載體。包含至少一種目標(biāo)化合物的載體的示意圖呈現(xiàn)于圖1中。所述載體可以是有機(jī)載體。有機(jī)載體通常選自脂質(zhì)載體(例如甘油脂、磷脂、固醇等)；聚合物載體；共聚物載體；含碳載體；以及病毒樣載體(例如病毒載體)。構(gòu)成載體的聚合物或共聚物可以是天然或合成來源的。在本發(fā)明的背景下可用于制備載體的合成(人工)和天然聚合物或共聚物的實(shí)例可以選自聚乳酸(pla)、聚丙交酯-乙醇酸共聚物(plga)、聚谷氨酸(pga)、聚己內(nèi)酯(pcl)、聚氨基酸、聚糖乳酸(polyglactin)、聚丙交酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚山梨醇酯、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氰基丙烯酸烷基酯、聚乳酸酯-乙醇酸酯共聚物、聚酰胺-胺、聚乙烯亞胺、藻酸鹽、纖維素和纖維素衍生物聚合物、膠原、透明質(zhì)酸、肌動蛋白、多糖、以及明膠。所述載體可以是無機(jī)載體。所述無機(jī)載體通常是納米粒子。所述納米粒子通常選自金屬納米粒子、金屬氧化物納米粒子、以及其混合物。所述載體可以是普通載體，如納米球(普通納米粒子)；或中空載體，如納米膠囊(中空納米粒子)。優(yōu)選的載體例如選自脂質(zhì)體、膠束、聚合物(polymeric/polymer)載體、水凝膠、樹枝狀聚合物、凝膠、共聚物載體、蛋白質(zhì)載體以及無機(jī)載體，如本文所定義的。本發(fā)明的載體的表面通常并且優(yōu)選地沒有(或換句話說，缺少或不暴露)任何表面空間穩(wěn)定劑，即沒有任何親水性和/或柔性聚合物。舉例來說，本發(fā)明的載體沒有或不暴露選自以下各項(xiàng)的聚合物：葡聚糖、聚唾液酸(psa)、透明質(zhì)酸、殼聚糖、肝素、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、聚乙烯醇(pva)、聚丙烯酰胺、聚乙二醇(peg)、以及基于peg的共聚物，如泊洛沙姆(poloxamer)、泊洛沙胺(poloxamine)或聚山梨酸酯。優(yōu)選地，本發(fā)明的載體沒有為載體的表面帶來略微負(fù)或正表面電荷的任何親水性聚合物，如聚乙二醇(peg)或基于peg的共聚物、聚乙烯醇(pva)或聚乙烯吡咯烷酮(pvp)。本發(fā)明的藥物組合物(參見圖2b)可以有利地取代現(xiàn)有的載體(或藥物遞送系統(tǒng))，所述現(xiàn)有的載體包含或暴露表面空間穩(wěn)定劑(圖2a)，如通常是親水性和柔性聚合物，更特別是為載體的表面帶來略微負(fù)或正表面電荷的親水性聚合物(例如聚乙二醇聚合物)，這樣的帶負(fù)或正表面電荷由本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為是中性的。當(dāng)與通常在不存在任何納米粒子和/或載體的情況下由以標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量給藥的所述化合物所誘導(dǎo)的藥物益處和毒性相比時(shí)，本發(fā)明的藥物組合物在所述受試者中以降低的毒性維持所述目標(biāo)化合物的藥物(即治療、預(yù)防或診斷)益處，或以等同或降低的毒性增加它的藥物益處。當(dāng)與通常在不存在任何納米粒子和/或載體的情況下所述化合物的標(biāo)準(zhǔn)藥物劑量相比時(shí)，本發(fā)明的藥物組合物通常允許所給藥的化合物的藥物劑量減少至少10％，同時(shí)對于所述受試者以等同的毒性、優(yōu)選降低的毒性維持相同的藥物益處，或同時(shí)對于所述受試者以等同或降低的毒性增加藥物益處。所述載體允許釋放目標(biāo)化合物，優(yōu)選地以受控方式釋放。所述載體通常可以被工程化而以預(yù)定或可調(diào)的速率或響應(yīng)于外部刺激來釋放所述一種或多種目標(biāo)化合物。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述載體允許釋放所述一種或多種目標(biāo)化合物，這通常是通過時(shí)間控制型釋放、通過目標(biāo)化合物從所述載體擴(kuò)散、通過所述載體的溶蝕(erosion)和/或通過所述載體的降解來實(shí)現(xiàn)的。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述載體允許由于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外活化，即響應(yīng)于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外刺激，如ph值變化或酶的作用來釋放所述一種或多種目標(biāo)化合物。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述載體允許響應(yīng)于外部刺激來釋放所述一種或多種目標(biāo)化合物。外部刺激的實(shí)例是電磁輻射(例如電離輻射，如x射線、γ射線或非電離輻射，如uv、可見光或紅外線)、超聲波以及磁場。當(dāng)所述載體暴露于選自電磁輻射、超聲波以及磁場的外部刺激時(shí)，藥物化合物例如從所述載體中釋放。沒有任何表面空間穩(wěn)定劑的載體可以是例如脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體具有包括37℃至45℃的膜相變溫度，包含62摩爾％的二棕櫚?；字Ｄ憠A(dppc)、22摩爾％的氫化大豆磷脂酰膽堿(hspc)以及16摩爾％的膽固醇(chol)、或90摩爾％的二棕櫚?；字Ｄ憠A(dppc)和10摩爾％的單棕櫚酰磷脂酰膽堿(mppc)。沒有任何表面空間穩(wěn)定劑的載體也可以是例如包含合成磷脂，如對剪切應(yīng)力敏感的1,3-二酰胺基磷脂的脂質(zhì)體。沒有任何表面空間穩(wěn)定劑的載體也可以是例如包含肽的脂質(zhì)體，所述肽在ph值或溫度刺激下改變它的構(gòu)象(α-螺旋變成β-折疊)。沒有任何表面空間穩(wěn)定劑的載體也可以是例如兩性脂質(zhì)體，所述兩性脂質(zhì)體包含摩爾比3:1的1-棕櫚?；?2-油?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(popc)和1,2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(dope)以及等量的弱陽離子和弱陰離子兩親物，這兩者衍生自膽固醇α-(3'-o-膽固醇氧羰基)-δ-(n-乙基嗎啉)-丁二酰胺(mochol)和膽固醇半丁二酸酯(chems)。本發(fā)明的藥物組合物(由至少一種生物相容性納米粒子和包含至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體的組合所限定)可以用于許多領(lǐng)域，特別是在人類醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)中。這種組合物通常用于動物，優(yōu)選地用于哺乳動物，甚至更優(yōu)選地用于人類，無論其年齡或性別如何。本發(fā)明的藥物組合物可以用于預(yù)防或治療選自以下各項(xiàng)的疾病或障礙：心血管疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)疾病、胃腸道疾病、遺傳障礙、血液障礙、激素障礙、免疫障礙、感染性疾病、代謝紊亂、肌肉骨骼障礙、癌癥、呼吸系統(tǒng)疾病以及中毒等。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物組合物用于預(yù)防或治療選自心血管疾病、cns疾病、癌癥、感染性疾病以及代謝紊亂的疾病或障礙。在本發(fā)明的背景下，所述至少一種納米粒子和所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體有利地彼此相隔超過5分鐘至約72小時(shí)，通常超過5分鐘至約24小時(shí)，優(yōu)選地超過5分鐘或30分鐘至約12小時(shí)被給藥至需要所述一種或多種目標(biāo)化合物的受試者以優(yōu)化所述一種或多種化合物的藥物功效。在本發(fā)明中，當(dāng)所述至少一種納米粒子和所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體有利地彼此相隔超過5分鐘至約72小時(shí)被給藥至需要所述化合物的受試者時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子的絕對表面電荷值是至少10mv(|10mv|)。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式中，當(dāng)所述至少一種納米粒子和所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體有利地彼此相隔超過5分鐘至約24小時(shí)被給藥至需要所述化合物的受試者時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子的絕對表面電荷值有利地是至少15mv(|15mv|)。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方式中，當(dāng)所述至少一種納米粒子和所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體有利地彼此相隔超過5分鐘至約12小時(shí)被給藥至需要所述化合物的受試者時(shí)，所述至少一種生物相容性納米粒子的絕對表面電荷值有利地是至少20mv(|20mv|)。本文還描述了一種對疑似易患疾病或正患疾病，如本文所提到的那些的受試者進(jìn)行預(yù)防或治療的方法，其中所述方法包括向所述受試者給藥本發(fā)明的藥物組合物，通常是如本文所述的至少一種生物相容性納米粒子和包含至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體。所述至少一種納米粒子或包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體中的任一種可以首先向所述受試者給藥，只要所述至少一種生物相容性納米粒子和所述包含所述一種或多種化合物的至少一種載體被分開給藥，通常是以超過5分鐘至約72小時(shí)的時(shí)間間隔分開給藥即可。所述至少一種納米粒子或包含一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體的給藥可以是每一種的單次給藥、每一種的重復(fù)給藥，例如每一種的幾次連續(xù)給藥。可以將所述生物相容性納米粒子給藥一次并且可以將所述包含一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體給藥不止一次，反之亦然。在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述至少一種生物相容性納米粒子至少在包括所述包含一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體的幾次給藥的方案開始時(shí)，即至少在所述至少一種載體的首次給藥時(shí)以及在其給藥之前或之后給藥。在另一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述生物相容性納米粒子不在包括所述包含一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體的幾次給藥的方案開始時(shí)給藥并且不在所述至少一種載體的第二次給藥或第三次給藥之前以及在其給藥之前或之后給藥。在這最后兩個(gè)實(shí)施方式的背景下，所述至少一種生物相容性納米粒子也可以連同所述包含所述一種或多種目標(biāo)化合物的至少一種載體一起在所述至少一種載體的后續(xù)給藥的一部分或全部期間給藥(之前或之后，如先前所解釋)。本發(fā)明的藥物組合物的一種或多種生物相容性納米粒子可以通過任何途徑，如靜脈內(nèi)(iv)、動脈內(nèi)、腹膜內(nèi)途徑、真皮內(nèi)途徑、氣道(吸入)、肌內(nèi)途徑和/或口服途徑(口服)來給藥。優(yōu)選的給藥途徑是靜脈內(nèi)途徑。本發(fā)明的藥物組合物的包含一種或多種目標(biāo)化合物的一種或多種載體可以通過任何途徑來給藥，所述途徑選自皮下途徑、靜脈內(nèi)(iv)途徑、真皮內(nèi)途徑、動脈內(nèi)途徑、氣道(吸入)、腹膜內(nèi)途徑、肌內(nèi)途徑、口服途徑(口服)以及先前所提到的那些當(dāng)中的幾種不同的途徑。所述一種或多種合適的途徑將由專業(yè)人員根據(jù)待檢測、預(yù)防或治療的疾病或障礙來選擇。以下實(shí)施例示出了本發(fā)明而不限制它的范圍。附圖說明圖1：包含至少一種目標(biāo)化合物的沒有任何空間穩(wěn)定劑的載體的示意圖。所述載體可以是普通載體(a、b)或中空載體(c、d)。所述目標(biāo)化合物通常被截留或浸漬(a、c)或借助于接頭或在不存在任何接頭的情況下接枝(結(jié)合)到載體(b、d)。圖2：a)包含至少一種目標(biāo)化合物的載體的示意圖。所述載體的表面由空間穩(wěn)定劑改性。b)根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物的示意圖，所述藥物組合物包含以下各項(xiàng)的組合：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含至少一種目標(biāo)化合物的至少一種載體，所述載體沒有任何空間穩(wěn)定劑。圖3：n-(3-羧基-1-氧代丙基)-l-谷氨酸1,5-二-十六烷基酯(sa脂質(zhì))的化學(xué)式。具體實(shí)施方式實(shí)施例實(shí)施例1：作為生物相容性納米粒子的脂質(zhì)體的1號合成使用脂質(zhì)膜再水化方法來制備脂質(zhì)體：a)將脂質(zhì)溶解在氯仿中。最終在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)氯仿。在50℃用20mmhepes和140mmnacl(ph7.4)將脂質(zhì)膜進(jìn)行再水化，以使脂質(zhì)濃度是5mm。使用以下脂質(zhì)組成來制備帶電荷的脂質(zhì)體：dppc(二棕櫚酰基磷脂酰膽堿)：86摩爾％；mppc(單棕櫚酰磷脂酰膽堿)：10摩爾％；dspe-peg(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-[甲氧基聚乙二醇-2000])：4摩爾％。b)然后通過連續(xù)將樣品浸入液氮中和被調(diào)節(jié)到50℃的水浴中，進(jìn)行6次凍融循環(huán)。c)使用熱桶擠出機(jī)(lipextm擠出機(jī)，northernlipids公司)在受控的溫度和壓力下校準(zhǔn)脂質(zhì)體的尺寸。在所有情況下，在50℃，在10巴的壓力下進(jìn)行擠出。使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司(malverninstrument))，用633nmhene激光器以90°的角度，通過動態(tài)光散射(dls)來確定所制備的脂質(zhì)體的尺寸分布。將脂質(zhì)體懸浮液在20mmhepes和140mmnacl(ph7.4)中稀釋100倍。脂質(zhì)體尺寸(即流體動力學(xué)直徑)等于約170nm(按強(qiáng)度分布)，其中多分散指數(shù)(pdi)等于約0.1。如可由本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，由于所選擇的脂質(zhì)組成而獲得所期望的表面電荷，并且通過使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)測量ζ電位來確認(rèn)它的值。將脂質(zhì)體在水中稀釋100倍并且將所得的懸浮液的ph值調(diào)節(jié)到ph7.4。脂質(zhì)體表面電荷在ph7.4等于約-14mv。實(shí)施例2：作為生物相容性納米粒子的脂質(zhì)體的2號合成使用脂質(zhì)膜再水化方法來制備脂質(zhì)體：a)將脂質(zhì)溶解在氯仿中。最終在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)氯仿。在65℃用20mmhepes和140mmnacl(ph7.4)將脂質(zhì)膜進(jìn)行再水化，以使脂質(zhì)濃度是25mm。使用以下脂質(zhì)組成來制備脂質(zhì)體：dspc(二硬脂?；字Ｄ憠A):dspg(二硬脂酰磷脂酰甘油):chol(膽固醇)＝7:2:1摩爾比。b)然后通過連續(xù)將樣品浸入液氮中和被調(diào)節(jié)到65℃的水浴中進(jìn)行6次凍融循環(huán)。c)使用熱桶擠出機(jī)(lipextm擠出機(jī)，northernlipids公司)在受控的溫度和壓力下校準(zhǔn)脂質(zhì)體的尺寸。首先，在5巴下5次通過聚醚砜(pes)0.45μm孔徑的膜，然后在10巴下10次通過pes0.22μm孔徑的膜，并且最終在15巴下10次通過聚偏二氟乙烯(pvdf)0.1μm孔徑的膜。使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)，用633nmhene激光器以90°的角度，通過動態(tài)光散射(dls)來確定所制備的脂質(zhì)體的尺寸分布。將脂質(zhì)體懸浮液在20mmhepes和140mmnacl(ph7.4)中稀釋100倍。脂質(zhì)體尺寸(即流體動力學(xué)直徑)等于約145nm(按強(qiáng)度分布)，其中多分散指數(shù)(pdi)等于約0.1。由于所選擇的脂質(zhì)組成而獲得通常低于-10mv的所期望的表面電荷，并且通過使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)測量ζ電位來確認(rèn)它的值。實(shí)施例3：當(dāng)與相同劑量的單獨(dú)的目標(biāo)化合物相比時(shí)，允許在向受試者給藥被包括在根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物中的目標(biāo)化合物之后功效提高和/或毒性降低的方法。以如下方式向攜帶mda-mb-231-lucd3h2ln異種移植腫瘤的裸小鼠給藥根據(jù)技術(shù)方案1的藥物組合物，所述藥物組合物包含以下各項(xiàng)的組合：(i)至少一種生物相容性納米粒子；以及(ii)包含多柔比星的至少一種載體：a)-向第一組裸小鼠給藥(通過靜脈內(nèi)注射)(多柔比星的聚乙二醇化的脂質(zhì)體制劑)；-向第二組裸小鼠給藥(通過靜脈內(nèi)注射)多柔比星；-向第三組裸小鼠給藥(通過靜脈內(nèi)注射)生物相容性納米粒子；-向第四組裸小鼠給藥(通過靜脈內(nèi)注射)生物相容性納米粒子，并且在向第四組裸小鼠給藥生物相容性納米粒子之后超過5分鐘至72小時(shí)，向所述第四組裸小鼠給藥(通過靜脈內(nèi)注射)包含多柔比星的載體，其中所述載體沒有任何空間穩(wěn)定劑；b)在給藥(第一組)、多柔比星(第二組)、生物相容性納米粒子(第三組)以及藥物組合物(第四組)之后評估裸小鼠的任何臨床毒性體征；以及c)在給藥(第一組)、多柔比星(第二組)、生物相容性納米粒子(第三組)以及藥物組合物(第四組)之后測量腫瘤再生長延遲。實(shí)施例4：作為生物相容性納米粒子的脂質(zhì)體的3號合成使用脂質(zhì)膜再水化方法來制備脂質(zhì)體：a)將脂質(zhì)溶解在氯仿中。最終在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)氯仿以在pyrex管壁上形成脂質(zhì)膜。在60℃用25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)將脂質(zhì)膜進(jìn)行再水化，以使脂質(zhì)濃度是50mm。使用以下脂質(zhì)組成來制備帶電荷的脂質(zhì)體：dppc(二棕櫚?；字Ｄ憠A)58摩爾％；hspc(氫化大豆磷脂酰膽堿)21摩爾％；chol(膽固醇)16摩爾％；pops(1-棕櫚?；?2-油?；字＝z氨酸)5摩爾％。b)然后通過連續(xù)將樣品浸入液氮中和被調(diào)節(jié)到60℃的水浴中進(jìn)行6次凍融循環(huán)。在每3次凍融循環(huán)30秒期間以及在即將擠出之前對脂質(zhì)體溶液進(jìn)行超聲處理。c)使用熱桶擠出機(jī)(lipextm擠出機(jī)，northernlipids公司)在受控的溫度和壓力下校準(zhǔn)脂質(zhì)體的尺寸。在60℃進(jìn)行擠出。在10巴的壓力下10次通過0.1μm孔徑的聚偏二氟乙烯(pvdf)膜。使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)，用633nmhene激光器以173°的角度，通過動態(tài)光散射(dls)來確定所制備的脂質(zhì)體的尺寸分布。將脂質(zhì)體溶液在25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)中稀釋200倍。脂質(zhì)體尺寸(即流體動力學(xué)直徑)等于約170nm(按強(qiáng)度分布)，其中多分散指數(shù)(pdi)等于約0.2。如可由本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，由于所選擇的脂質(zhì)組成而獲得所期望的表面電荷，并且通過使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)測量ζ電位來確認(rèn)它的值。將脂質(zhì)體在1mm氯化鈉溶液中稀釋200倍并且將溶液的ph值調(diào)節(jié)到ph7。脂質(zhì)體表面電荷在ph7、1mmnacl下等于約-40mv。通過比色測定(巴特利特法(bartlettmethod))測量脂質(zhì)體溶液的最終脂質(zhì)濃度。所述方法是基于經(jīng)由磷脂的酸性消化進(jìn)行的總磷測定。釋放的無機(jī)磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)，絡(luò)合物產(chǎn)生強(qiáng)烈的藍(lán)色。脂質(zhì)濃度等于約50mm。實(shí)施例5：作為生物相容性納米粒子的脂質(zhì)體的4號合成使用脂質(zhì)膜再水化方法來制備脂質(zhì)體：a)將脂質(zhì)溶解在氯仿中。最終在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)氯仿以在pyrex管壁上形成脂質(zhì)膜。在60℃用25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)將脂質(zhì)膜進(jìn)行再水化，以使脂質(zhì)濃度是50mm。使用以下脂質(zhì)組成來制備帶電荷的脂質(zhì)體：dppc(二棕櫚?；字Ｄ憠A)45.15摩爾％；chol(膽固醇)45.15摩爾％；dspe-peg(二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-[甲氧基聚乙二醇-2000])0.60摩爾％；n-(3-羧基-1-氧代丙基)-l-谷氨酸1,5-二-十六烷基酯(sa脂質(zhì))9.10摩爾％。sa脂質(zhì)在脂質(zhì)體表面上帶來cooh基團(tuán)。b)然后通過連續(xù)將樣品浸入液氮中和被調(diào)節(jié)到60℃的水浴中進(jìn)行6次凍融循環(huán)。c)使用熱桶擠出機(jī)(lipextm擠出機(jī)，northernlipids公司)在受控的溫度和壓力下校準(zhǔn)脂質(zhì)體的尺寸。在60℃進(jìn)行擠出。在3巴的壓力下七次通過0.45μm孔徑的聚偏二氟乙烯(pvdf)膜并且在10巴的壓力下十次通過0.22μm孔徑的聚偏二氟乙烯(pvdf)膜。使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)，用633nmhene激光器以173°的角度，通過動態(tài)光散射(dls)來確定所制備的脂質(zhì)體的尺寸分布。將脂質(zhì)體溶液在25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)中稀釋200倍。脂質(zhì)體尺寸(即流體動力學(xué)直徑)等于約230nm(按強(qiáng)度分布)，其中多分散指數(shù)(pdi)等于約0.2。如可由本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，由于所選擇的脂質(zhì)組成而獲得所期望的表面電荷，并且通過使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)測量ζ電位來確認(rèn)它的值。將脂質(zhì)體溶液在1mm氯化鈉溶液中稀釋200倍并且將溶液的ph值調(diào)節(jié)到ph7。脂質(zhì)體表面電荷在ph7、1mmnacl下等于約-60mv。通過比色測定(巴特利特法)測量脂質(zhì)體溶液的最終脂質(zhì)濃度。所述方法是基于經(jīng)由磷脂的酸性消化進(jìn)行的總磷測定。釋放的無機(jī)磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)并且絡(luò)合物產(chǎn)生強(qiáng)烈的藍(lán)色。脂質(zhì)濃度等于約50mm。實(shí)施例6：作為生物相容性納米粒子的脂質(zhì)體的5號合成使用脂質(zhì)膜再水化方法來制備脂質(zhì)體：a)將脂質(zhì)溶解在氯仿中。最終在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)氯仿以在pyrex管壁上形成脂質(zhì)膜。在60℃用25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)將脂質(zhì)膜進(jìn)行再水化，并且脂質(zhì)濃度是50mm。使用以下脂質(zhì)組成來制備帶電荷的脂質(zhì)體：dspc(1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿)60摩爾％；chol(膽固醇)35摩爾％；以及丁二?；鵳e(1,2-二油?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-n-丁二?；?5摩爾％。b)然后通過連續(xù)將樣品浸入液氮中和被調(diào)節(jié)到60℃的水浴中進(jìn)行6次凍融循環(huán)。在每3次凍融循環(huán)30秒期間以及在即將擠出之前對脂質(zhì)體溶液進(jìn)行超聲處理。c)使用熱桶擠出機(jī)(lipextm擠出機(jī)，northernlipids公司)在受控的溫度和壓力下校準(zhǔn)脂質(zhì)體的尺寸。在60℃進(jìn)行擠出。在12巴的壓力下十二次通過0.22μm孔徑的聚偏二氟乙烯(pvdf)膜。d)使對氨基苯基-α-d-吡喃甘露糖苷(man)綴合到丁二?；鵳e脂質(zhì)體：使用碳二亞胺偶聯(lián)將丁二酰基pe脂質(zhì)體表面用甘露糖衍生的配體對氨基苯基-α-d-吡喃甘露糖苷(man)改性以產(chǎn)生甘露糖綴合的脂質(zhì)體。使man通過它的氨基共價(jià)偶聯(lián)到預(yù)先形成的丁二?；鵳e脂質(zhì)體的表面上存在的丁二?；鵳e的羧酸基。簡單地說，向預(yù)先形成的丁二?；鵳e脂質(zhì)體溶液中添加edc(1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亞胺鹽酸鹽)(丁二酰基pe/edc＝1:10摩爾比)和n-羥基丁二酰亞胺(nhs)(nhs/edc＝1:2.5摩爾比)。然后用1mnaoh將懸浮液的ph值調(diào)節(jié)到6并且在室溫下將所得的懸浮液攪拌15分鐘。隨后，用1mnaoh將溶液的ph值調(diào)節(jié)到7并且將man水溶液添加(丁二?；鵳e/man＝1:2摩爾比)到溶液中。使用1mnaoh將ph值再調(diào)節(jié)到7并且將懸浮液在室溫下再攪拌2小時(shí)。通過使用50kda纖維素膜以稀釋因子(×500；×500；×500)進(jìn)行3個(gè)透析步驟來去除過量的未結(jié)合的man、edc以及nhs分子。值得注意的是，由于可能在透析時(shí)稀釋，因此可以在具有聚乙烯砜(pes)膜和截止300kda的vivaspin濃縮器上，使用膜超濾，通過離心(通常是sigma3-15k離心機(jī)，在5℃；1,200rpm)將脂質(zhì)體溶液濃縮。使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)，用633nmhene激光器以173°的角度，通過動態(tài)光散射(dls)來確定所制備的脂質(zhì)體的尺寸分布。將脂質(zhì)體溶液在25mmhepes和150mmnacl(ph7.4)中稀釋200倍。脂質(zhì)體尺寸(即流體動力學(xué)直徑)是約230nm(按強(qiáng)度分布)，其中多分散指數(shù)(pdi)是約0.2。如可由本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，由于所選擇的脂質(zhì)組成而獲得所期望的表面電荷，并且通過使用zetasizernanozs(馬爾文儀器公司)測量ζ電位來確認(rèn)它的值。將脂質(zhì)體溶液在氯化鈉溶液(1mm和ph7)中稀釋200倍。脂質(zhì)體表面電荷在nacl(1mm，ph7)下是約-70mv。通過比色測定(巴特利特法)測量脂質(zhì)體溶液的最終脂質(zhì)濃度。所述方法基于經(jīng)由磷脂的酸性消化進(jìn)行的總磷測定。釋放的無機(jī)磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)并且絡(luò)合物產(chǎn)生強(qiáng)烈的藍(lán)色。脂質(zhì)濃度等于約50mm。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12