本發(fā)明涉及一種中藥組合物，尤其涉及一種緩解體力疲勞和/或提高缺氧耐受力的中藥組合物、其制備方法和應用。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)代醫(yī)學認為，疲勞是機體過用(超限)而引起的功能降低并出現(xiàn)機體不適的狀態(tài)，主要表現(xiàn)為疲勞困倦，可出現(xiàn)頭暈、健忘、睡眠質(zhì)量下降等伴隨癥狀。疲勞的產(chǎn)生與能源物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物堆積、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性失調(diào)、自由基影響等因素關(guān)系密切。體力疲勞又稱運動性疲勞，是指由機體運動本身所引起的“機體生理過程不能持續(xù)其機能在一個特定水平上和(或)不能維持預定的運動強度”的機體運動能力下降的現(xiàn)象。缺氧是高原、航空、潛水等特殊環(huán)境最普遍的應激因素。研究表明，持續(xù)穩(wěn)定的缺氧環(huán)境可使體建立缺氧適應，這對機體維護自身平衡和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定是有益的，但是過強或長期的缺氧應激則會給機體帶來嚴重危害，最終可導致機體心、腦等重要臟器由于能量供應不足而死亡。缺氧對運動能力的影響與缺氧的程度和時間有關(guān)，海拔越高缺氧程度越重，運動能力的損害越明顯。急性缺氧時骨骼肌持續(xù)做功的時間和總的做功量顯著降低。中度缺氧時，運動能力的降低主要是由于Ⅲ/Ⅳ類纖維對中樞和α運動神經(jīng)元的抑制所致，而重度缺氧時，腦供氧降低對中樞的直接抑制可能起著更為重要的作用。目前中國專利文獻已公開了許多抗疲勞、提高缺氧耐受力的保健食品，其中部分產(chǎn)品選用了紅景天及其提取物、黃芪及其提取物作原料。如200610170948.7公開了一種增強體質(zhì)、消除疲勞的中藥制劑，由中藥冬蟲夏草、靈芝、雄蠶娥、黃芪、紅景天等22味藥材組成，采用或水提、或醇提、或超臨界CO2萃取法提取、制劑而成，具有提高免疫力、增強體質(zhì)作用。94110098.7公開了一種名為紅寶丹生命核能的保健制品。201210506240.X公開了以紅景天、川芎、天麻、三七為主要原料，輔以常用輔料經(jīng)加工制成的保健食品。上述保健品的配方有的太過復雜、幾十味原料組方，原料配伍機理不清；有的制法粗放、一般采用簡單的粉碎或提取工藝，服用量偏大；有的功能驗證方法不科學、療效不夠確切；因而推廣使用受到一定的限制。201110318847.0公開了一種緩解疲勞和提高缺氧耐受力的中藥組合物及其制備方法，該中藥組合物由紅景天、黃芪、紅花制成。本發(fā)明提供的緩解疲勞和提高缺氧耐受力的中藥組合物通過益氣、活血、固表來調(diào)節(jié)人體氣血虛弱以及臟腑功能失調(diào)，從而達到緩解體力疲勞和提高缺氧耐受力的功效，該發(fā)明提供的中藥組合物無遺傳毒性，具有較好的預防和治療效果。針對上述局限及現(xiàn)實需要，本發(fā)明人以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導，提供了一種緩解體力疲勞和/或提高缺氧耐受力的中藥組合物及其制備方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種緩解體力疲勞和/或提高缺氧耐受力的中藥組合物。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種緩解體力疲勞和/或提高缺氧耐受力的中藥組合物，其中，所述的中藥組合物由生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物組成，其中所述的生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為(1.5～4.5)：(0.5～2.5):1。優(yōu)選，所述的生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為(1.8～4.2)：(0.9～2.2):1。更優(yōu)選，所述的生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為(2.0～3.0)：(1.5～2.0):1。最優(yōu)選，所述的生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為2.5：1.8:1。中醫(yī)學認為“諸血者皆屬于心，諸氣者皆屬于肺”，“寒則血凝”血凝則“喘出于肺”、“食氣入胃，蝕氣歸心，脈氣流經(jīng)，經(jīng)氣歸于肺。氣虛者，肺虛也”、“肺為氣之母，腎為氣之根，肺主出氣，腎主納氣，陰陽相交，呼吸乃合，腎不納氣則動則氣喘、呼吸表淺”等理論，這些理論清晰地闡述了高寒地區(qū)人、動物機體為什么易產(chǎn)生缺氧癥候，而致心、肺、腎、腦等人體重要器官產(chǎn)生缺氧、功能減退等疲勞癥候的發(fā)生。中醫(yī)認為，人入高原則清氣不足，宗氣虛弱，難以司呼吸貫心脈；寒盛易傷人陽氣，令人氣血凝滯筋脈收引；干燥多風則易傷人陰津。當上述因素超過人體調(diào)節(jié)范圍時，就會產(chǎn)生高原病。因此，防治應以益氣、溫通活血、養(yǎng)陰生津為基本大法，其次參以豁痰、開竅、利水等治標之法。方中紅景天為景天科多年生草本或灌木植物，被譽為“高原人參”，具有活血止血、清肺止咳的功能。近年來，紅景天的多種藥理作用吸引了許多國內(nèi)外學者。研究表明，紅景天具有抗腫瘤、抗衰老、抗缺氧、抗疲勞、抗寒冷、抗輻射等多種顯著功能。生姜為姜科植物姜的新鮮根莖。生姜為臨床常用中藥，具有解表散寒、化痰止咳等功效。生姜的化學成分復雜，已發(fā)現(xiàn)的有100多種，可分為揮發(fā)油、姜辣素和二苯基庚烷三大類，研究表明，生姜具有很強的抗缺氧、抗疲勞、抗氧化作用和顯著的清除自由基的能力，生姜中姜辣素具有顯著的活血功能，被譽為“食品中的阿司匹林”，也具有優(yōu)良的抗暈動病作用。黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。具有補氣固表、利水消腫、托毒排膿、生肌等功能。含有黃芪皂苷、多糖、黃酮、氨基酸等多種成分?，F(xiàn)代藥理研究表明黃芪具有增強機體免疫、保肝、抗疲勞、抗缺氧的功能。上述三味藥材組合共奏溫陽益氣、活血通脈、豁痰平喘之功效。本發(fā)明所述的中藥組合物可制備成藥學上可接受的口服制劑。本發(fā)明所述的口服制劑為膠囊、顆粒、丸劑、片劑、口服液或軟膠囊。本發(fā)明所述的口服制劑優(yōu)選膠囊。本發(fā)明還進一步提供所述的中藥組合物的制備方法，所述的制備方法為：將紅景天或其提取物、生姜或其提取物、黃芪或其提取物按所述配比混合，得到所述的藥物組合物。進一步的，所述的藥物組合物加入藥學上可接受的輔料制備成藥學上可接受的口服制劑，優(yōu)選膠囊、顆粒、丸劑、片劑、口服液或軟膠囊。具體地說，本發(fā)明所述的中藥組合物可以以紅景天、生姜、黃芪為原料，也可以以紅景天提取物、生姜提取物、黃芪提取物為原料，加入藥學上可接受的輔料制備成藥學上可接受的口服制劑。本發(fā)明中藥組合物中的紅景天提取物、生姜提取物和黃芪提取物可以分別用適宜的溶劑和方法單獨提取加工得到提取物，再加入藥學上可接受的輔料制備成藥學上可接受的口服制劑。所述的“單獨提取”是指紅景天、生姜和黃芪每一味藥材分別通過不同的工藝單獨提取得到提取物。上述紅景天提取物、生姜提取物和黃芪提取物的提取制備方法中，所用的溶劑是指藥學上常用的溶劑，可以是水或乙醇等；所用的方法是指中藥提取的一般方法，可以是煎煮法、回流提取法、浸漬法、滲漉法或連續(xù)提取法等。例如，紅景天可以用乙醇回流提取或水提醇沉的方法提取制備得到紅景天提取物，生姜可以用乙醇回流提取制備得到生姜提取物，黃芪可以用水提醇沉的方法提取制備得到黃芪提取物。本發(fā)明提供了紅景天提取物、生姜提取物和黃芪提取物的優(yōu)選提取制備工藝，具體如下：所述的紅景天提取物的優(yōu)選提取制備工藝如下：取所述重量份的紅景天，加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至60℃下相對密度為1.08-1.12，得浸膏液，噴霧干燥，干膏粉碎，過80目篩，得紅景天提取物。所述的生姜提取物的優(yōu)選提取制備工藝如下：取所述重量份的生姜片，加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至60℃下相對密度為1.25-1.30，得浸膏液，低溫真空干燥，干膏粉碎，過80目篩，得生姜提取物。其中，所述的低溫真空干燥為在40～50℃，-0.06～-0.08Mpa下進行。所述的黃芪提取物的優(yōu)選提取制備工藝如下：取所述重量份的黃芪，加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并提取液，濾過，濃縮至60℃下相對密度為1.25-1.30的浸膏液，真空干燥，粉碎，過80目篩，得黃芪提取物。更具體地說，本發(fā)明還提供了所述的中藥組合物的另一種制備方法，包括如下步驟：1)原料準備：按配方備好所有原料，生姜切片，黃芪、紅景天破碎成粗段；2)提取濃縮：取步驟1)中的紅景天，加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.08-1.12(60℃)，得浸膏液，噴霧干燥，干膏粉碎，過80目篩，得紅景天提取物。另取步驟1中的生姜片，加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.25-1.30(60℃)，得浸膏液，低溫真空干燥(40～50℃，-0.06～-0.08Mpa)，干膏粉碎，過80目篩，得生姜提取物。最后取步驟1中的黃芪，加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并提取液，濾過，濃縮至相對密度為1.25-1.30(60℃)的浸膏液，真空干燥，粉碎，過80目篩，得黃芪提取物。3)制備中藥組合物：將步驟2)中的紅景天提取物、生姜提取物和黃芪提取物按所述配比混合，得到所述的藥物組合物。加入藥學上可接受的輔料，采用藥劑學上常規(guī)工藝制成所需的口服制劑，。進一步說明，本發(fā)明也可以通過將上述步驟2)所得到的紅景天提取物、生姜提取物、黃芪提取物按所述配比混合得到所述的藥物組合物后，加如藥學上可接受的輔料制成藥學意義的口服制劑，如膠囊劑、顆粒、丸劑、片劑、口服液、軟膠囊等。本發(fā)明所述中藥組合物的口服制劑，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法制得，必要時可以添加各種藥學上可接受的輔料，包括藥學領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑等。本發(fā)明還提供了所述中藥組合物在制備治療緩解體力疲勞、提高缺氧耐受力或緩解慢性疲勞綜合癥方面的藥物或保健品中的應用。本發(fā)明所提供的中藥組合物具有如下優(yōu)點：(1)本發(fā)明所提供的中藥組合物具有緩解體力疲勞、提高缺氧耐受力、緩解慢性疲勞綜合癥的保健功能；(2)本發(fā)明所提供的中藥組合物組方合理，效果顯著，無遺傳毒性。具體實施方式以下為本發(fā)明的具體實施方式，所述的實施例是為了進一步描述本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。實施例1、本發(fā)明的全方粉末取生姜1675g、紅景天850g、黃芪600g，生姜切片，黃芪、紅景天破碎成粗粒。紅景天加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮至適量，浸膏液干燥，粉碎，過篩，得紅景天提取物。生姜片加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，濾過， 合并濾液，回收乙醇，濃縮至適量，浸膏液干燥，粉碎，過篩，得生姜提取物。黃芪加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并，濾過，濃縮適量，干燥，粉碎，過篩，得黃芪提取物。取上述紅景天提取物、生姜提取物和黃芪提取物，混合得到本發(fā)明的全方粉末。實施例2、本發(fā)明的全方粉末取生姜1050g、紅景天350g、黃芪700g，其他同實施例1。實施例3、本發(fā)明的全方粉末取生姜2250g、紅景天1250g、黃芪500g，其他同實施例1。實施例4、本發(fā)明的全方粉末取生姜1600g、紅景天1200g、黃芪800g，其他同實施例1。實施例5、本發(fā)明的全方粉末取生姜1800g、紅景天1200g、黃芪600g，其他同實施例1。實施例6、本發(fā)明的全方粉末取生姜提取物1500g、紅景天提取物1080g、黃芪提取物600g，混合得到本發(fā)明的全方粉末，其中生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物為按照現(xiàn)有技術(shù)的方法提取得到。實施例7、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天850g、黃芪600g，生姜切片，黃芪、紅景天破碎成粗粒。紅景天加入70％乙醇6倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮至適量，浸膏液干燥，粉碎，過篩，得紅景天提取物。生姜片加入70％乙醇5倍量，回流提取3次，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮至適量，浸膏液干燥，粉碎，過篩，得生姜提取物。黃芪加水8倍量，提取2次，每一次2h，第二次1.5h，合并，濾過，濃縮適量，干燥，粉碎，過篩，得黃芪提取物。取上述紅景天提取物、生姜提取物、黃芪提取物，加入膠囊劑常用的輔料，混勻，充填，制成膠囊1000粒。實施例8、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天1067g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例9、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天711g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例10、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天1067g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例11、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天1067g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例12、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天850g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例13、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天711g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例14、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天711g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例15、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天711g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例16、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天850g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例17、姜素紅景天膠囊取生姜1675g，紅景天850g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例18、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天1067g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例19、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天1067g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例20、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天850g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例21、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天850g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例22、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天850g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例23、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天711g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例24、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天711g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例25、姜素紅景天膠囊取生姜2000g，紅景天711g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例26、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天1067g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例27、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天1067g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例28、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天1067g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例29、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天850g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例30、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天850g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例31、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天850g、黃芪480g，其他同實施例7。實施例32、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天711g、黃芪800g，其他同實施例7。實施例33、姜素紅景天膠囊取生姜1428g，紅景天711g、黃芪600g，其他同實施例7。實施例34、姜素紅景天片的制備處方：制備工藝：將生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物粉碎過100目篩備用；按照處方量稱取原料和輔料；將羥丙基纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用；將生姜提取物、紅景天提取物、黃芪提取物、淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC50乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過20目篩制顆粒；顆粒在60℃的條件下干燥；干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻；取樣，半成品檢驗；按照檢驗確定的片重壓片；成品全檢，包裝入庫。該實施例中所述的生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物按照實施例1的提取制備工藝得到。實施例35、姜素紅景天顆粒的制備處方：制備工藝：將蔗糖粉碎過100目篩備用，生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物粉碎過100目篩備用；按照處方量稱取原料和輔料；將生姜提取物、紅景天提取物、黃芪提取物與糖粉、矯味劑以等量滴加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材；過20目篩制顆粒；顆粒在60℃的條件下烘干；干顆粒過18目篩整粒；取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量；包裝，成品檢驗，包裝入庫。該實施例中所述的生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物按照實施例1的提取制備工藝得到。實施例36、姜素紅景天丸劑的制備取生姜1675g、紅景天850g、黃芪600g，生姜切片，黃芪、紅景天破碎成粗粒，混勻后按照中藥丸劑的制備方法將其制備成中藥丸劑。實施例37、姜素紅景天軟膠囊的制備取生姜提取物1675g、紅景天提取物850g、黃芪提取物600g，混勻后按照中藥軟膠囊的制備方法將其制備成中藥軟膠囊。實施例38、姜素紅景天口服液的制備取生姜1675g，紅景天850g、黃芪600g，生姜切片，黃芪、紅景天破碎成粗粒，混勻后按照中藥口服液的制備方法將其制備成中藥口服液。試驗例11、材料與方法1.1樣品來源與處理：本發(fā)明中藥組合物復合粉(實施例1制得)，樣品內(nèi)容物為棕色粉末，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。1.2實驗動物及環(huán)境：雄性健康ICR小鼠，體重18-22g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供(合格證號：SCXK(滬)2012-0002號)。實驗動物環(huán)境設(shè)施合格證號：SYXK(蘇)2012-0037。實驗期間全部動物給予清潔級全價鼠顆粒飼料和滅菌水自由食用。1.3實驗方法1.3.1劑量與分組：游泳試驗及各項生化指標(血清尿素氮、肝糖原)所用動物均各按體重隨機分成4組，每組12只，設(shè)100、200和600mg/Kg/d3個劑量組(相當于成人每日每千克體重推薦攝入量的5、10、30倍)和溶劑(純凈水)對照組。1.3.2受試物的給予：分別取樣品500、1000和3000mg加純凈水至100ml配制成各組受試液，溶液對照組給予純凈水，各組受試液以每日20ml/Kgb.wt的量經(jīng)口灌胃，連續(xù)32d。1.3.3實驗方法：1.3.3.1游泳時間測定：末次經(jīng)口灌胃給予受試物30min后，置尾根部負荷5％體重鉛皮的小鼠于游泳箱中，水深大于30cm，水溫25℃±1.0℃，記錄小鼠從游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時間。1.3.3.2血清尿素氮(BUN)含量的測定：末次經(jīng)口灌胃給予受試物30min后，在溫度為30℃的水中游泳90min，休息60min后采血，分離血清按有關(guān)試劑盒要求檢測。1.3.3.3肝糖原含量測定：末次給予受試物30min后處死動物，取肝臟100mg，按程序勻漿，離心，95％乙醇沉淀糖原，蒽酮法測定肝糖原含量。1.4統(tǒng)計方法：實驗數(shù)據(jù)用spss軟件進行統(tǒng)計分析。2、結(jié)果2.1動物體重增重情況：本發(fā)明中藥組合物復合粉各劑量組小鼠體重與空白對照組比較差異無顯著性，見表1-a、表1-b和表1-c。表1-a、本發(fā)明中藥組合物復合粉對游泳組小鼠體重增長的影響組別動物數(shù)(只)初始體重(g)終末體重(g)對照組1219.3±0.836.2±3.2低劑量1219.0±1.034.5±2.5中劑量1219.5±1.036.9±1.9高劑量1219.3±0.935.7±2.4注：游泳組初始體重和終末體重經(jīng)ANOVA得P值分別為0.618和0.151。表1-b、本發(fā)明中藥組合物復合粉對肝糖原組小鼠體重增長的影響組別動物數(shù)(只)初始體重(g)終末體重(g)對照組1219.4±0.936.7±2.0低劑量1219.4±1.236.6±1.5中劑量1219.1±0.936.7±1.4高劑量1219.2±1.037.2±2.1注：肝糖原組初始體重和終末體重經(jīng)ANOVA得P值分別為0.836和0.853。表1-c、本發(fā)明中藥組合物復合粉對尿素氮組小鼠體重增長的影響(±s)組別動物數(shù)(只)初始體重(g)終末體重(g)對照組1219.2±1.136.0±2.1低劑量1219.3±0.735.3±2.5中劑量1219.7±1.034.9±2.0高劑量1219.4±1.035.2±2.9注：BUN組初始體重和終末體重經(jīng)ANOVA得P值分別為0.671和0.699。2.2本發(fā)明中藥組合物復合粉低、中、高劑量組小鼠游泳時間均延長，高劑量組明顯高于空白對照組(P＜0.01)，見表2。表2、本發(fā)明中藥組合物復合粉對小鼠負重游泳時間的影響2.3本發(fā)明中藥組合物復合粉低、中、高劑量組小鼠游泳90min后，各劑量組小鼠血清尿素氮含量均低于對照組值，高劑量組明顯高于空白對照組(P＜0.01)，高劑量組小鼠肝糖原含量增加，明顯高于對照組(P＜0.05)，見表3。表3、本發(fā)明中藥組合物復合粉對小鼠肝糖元的影響3、結(jié)論緩解體力疲勞動物試驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物復合粉負重游泳試驗結(jié)果陽性，肝糖原測定和血清尿素氮測定結(jié)果陽性，根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范(2003)》中緩解體力疲勞的結(jié)果判定標準，據(jù)此認為本發(fā)明中藥組合物復合粉具有緩解體力疲勞功能。對本發(fā)明其它實施例的全方粉末和制劑也進行了上述試驗，其獲得的結(jié)果相似。試驗例2本發(fā)明所述中藥組合物經(jīng)動物試驗證明，具有提高氧耐受力功能，且無毒副作用。具體實驗如下：1、材料與方法1.1樣品來源與處理：本發(fā)明中藥組合物復合物粉(實施例1制得)，樣品內(nèi)容物為棕色粉末，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。1.2實驗動物及環(huán)境：選用健康雌性ICR小鼠144只，清潔級，體重18-22g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供(合格證號：0152899，生產(chǎn)許可證號：SCXK(滬)2012-0002號，SPF級實驗動物環(huán)境設(shè)施合格證號：SYXK(蘇)2012-0037)。動物分批按體重隨機各分為4組，每組12只小鼠，共分3批分別進行常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗、急性腦缺血性缺氧實驗。實驗期間全部動物給予清潔級滅菌鼠飼料和滅菌水自由食用。1.3實驗方法1.3.1劑量與分組：每項實驗均各設(shè)100、200和600mg/Kg(相當于成人每日每千克體重推薦攝入量的5、10、30倍)三個劑量組和溶劑(純凈水)對照組。1.3.2受試物的給予：分別取樣品200、400和1200mg加純凈水至40ml配制成各組受試劑量，當日配制，每日經(jīng)口灌胃一次，灌胃容量20ml/Kg體重，連續(xù)給予受試物30d。溶劑對照組每日灌胃等量純凈水。1.3.3實驗方法：1.3.3.1常壓耐缺氧實驗：各組動物于實驗前后稱量體重，連續(xù)灌胃30天。末次灌胃1h后將小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250ml磨口瓶內(nèi)(每瓶1只)，涂凡士林密封瓶口，并立即計時，以停止呼吸為指標，觀察并記錄小鼠常壓耐缺氧存活時間。各組動物實驗前后體重及存活時間見表4，實驗前和實驗后動物體重無組間差異(P＞0.05)。與溶劑對照組相比，各劑量組小鼠存活時間均延長，低、中劑量組差異有顯著性(P＜0.05，P＜0.01)。見表4。表4、本發(fā)明中藥組合物復合粉對小鼠常壓耐缺氧的影響1.3.3.2亞硝酸鈉中毒存活實驗：各組動物于實驗前后稱量體重，連續(xù)灌胃30天。末次經(jīng)口灌胃1h后將小鼠按200mg/Kgb.wt劑量逐只腹腔注射亞硝酸鈉(注射量為0.1ml/10gb.wt)，立即計時，以呼吸停止為指標，記錄小鼠存活時間。實驗前和實驗后動物體重無組間差異(P＞0.05)。與溶劑對照組相比，各劑量組小鼠亞硝酸鈉中毒后存活時間均無統(tǒng)計學差異差(P＞0.05)見表5。表5、本發(fā)明中藥組合物復合粉對小鼠亞硝酸中毒的影響1.3.3.3急性腦缺血性缺氧實驗：各組動物于實驗前后稱量體重，連續(xù)灌胃30天。末次經(jīng)口灌胃1h后將小鼠從頸部逐只斷頭，用秒表記錄每只小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間。各組動物實驗前后體重及存活時間見表3，實驗前和實驗后動物體重無組間差異(P＞0.05)。與溶劑對照組相比，各劑量組小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間均延長，低、中劑量組差異有顯著性(P＜0.05)。見表6。表6、本發(fā)明中藥組合物復合粉對小鼠急性腦缺血性缺氧的影響1.4統(tǒng)計方法：實驗數(shù)據(jù)用spss軟件進行統(tǒng)計分析。本實驗所得數(shù)據(jù)均為計量資料，原始數(shù)據(jù)先進行正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗，滿足“方差齊”和“正態(tài)分布”的要求，用單因素方差分析法(ANOVA)進行統(tǒng)計，對P＜0.05的數(shù)據(jù)用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計處理。2.3.3、結(jié)論提高缺氧耐受力功能動物試驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物復合粉提高小鼠常壓耐缺氧存活時間結(jié)果陽性，延長小鼠急性腦缺血性缺氧斷頭后至張口喘氣停止時間結(jié)果陽性，根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范(2003)》中提高缺氧耐受力的結(jié)果判定標準，據(jù)此認為本發(fā)明中藥組合物復合粉具有提高缺氧耐受力功能的作用。對本發(fā)明其它實施例的全方粉末和制劑也進行了上述試驗，其獲得的結(jié)果相似。試驗例3本發(fā)明所述中藥組合物經(jīng)動物試驗證明，具有緩解慢性疲勞綜合癥的功能，證明實驗如下：1、材料與方法1.1樣品來源與處理：本發(fā)明中藥組合物復合為粉(實施例1制得)，樣品內(nèi)容物為棕色粉末，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。批號：20140916。1.2實驗動物及環(huán)境：SPF級昆明種雄性小鼠，體重18～22g；清潔級WISTAR大鼠，體重180～220g，均由廣西醫(yī)科大學醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物質(zhì)量合格證號：SCXK桂2014-0002。1.3實驗方法1.3.1劑量與分組：每項實驗均各設(shè)400和800mg/Kg(相當于成人每日每千克體重推薦攝入量的20、40倍)兩個劑量組和溶劑(純凈水)對照組、陽性對照組(紅景天組)、模型組。1.3.2受試物的給予：分別取樣品400和800mg加純凈水至40ml配制成各組受試劑量，當日配制，每日經(jīng)口灌胃兩次，灌胃容量20ml/Kg體重，連續(xù)給予受試物30d。溶劑對照組每日灌胃等量純凈水。1.3.3試驗方法：1.3.3.1慢性疲勞綜合癥模型建立：給予兩個劑量組受試物后到第28天下午，將除空白對照組外的各組小鼠放入6mm水深塑料飼養(yǎng)籠內(nèi)，每籠3只小鼠，自由攝食和飲水，小鼠可以在飼養(yǎng)籠內(nèi)自由活動，當小鼠進入快速動眼睡眠時相，全身肌張力降低、肌肉松弛和節(jié)律性垂頭，小鼠頭部會觸及水面而覺醒，使其處于清醒狀態(tài)，如此反復，從而造成小鼠睡眠被剝奪。18h后即次日上午將小鼠從水中取出，用濾紙和紗布輕柔擦干小鼠全身，然后用低溫風筒將小鼠吹干，放入墊有干燥墊料的飼養(yǎng)籠中，同時給予充足的食物和飲水，期間禁止打擾，讓其恢復6h后再進入第2次睡眠剝奪?？瞻讓φ战M小鼠不給予任何干預，正常飼養(yǎng)。與模型對照組進行比較，各劑量組結(jié)果見表7。表7、本發(fā)明對慢性疲勞綜合癥小鼠體重的影響與空白對照組進行組間T檢驗，***P<0.001與模型組進行組間T檢驗，△P<0.05；△△P<0.01；△△△P<0.001由表7可見，小鼠經(jīng)睡眠剝奪后形成慢性疲勞綜合癥，其體重顯著減輕，低、高劑量 組均可使體重減輕；與模型組比較，低劑量組有顯著性差異(P<0.05)，高劑量組有非常顯著性差異(P<0.01)。1.3.3.2自主活動觀測實驗：測定時間分別為(1)開始進行睡眠剝奪之前的當天上午(基底值)；(2)第二次睡眠剝奪完成后用濾紙和紗布輕柔擦干小鼠全身，然后用低溫風筒將小鼠吹干，放入墊有干燥墊料的飼養(yǎng)籠中立即測定；(3)第二次睡覺剝奪結(jié)束休息2h后；(4)休息24h后，即次日上午再次測定。測定小鼠自主活動時，先讓其在小鼠自主活動記錄儀中適應3min，然后測定3min內(nèi)小鼠的自主活動情況。測定過程中保持環(huán)境安靜，每次測定結(jié)束后以干紗布擦干凈自主活動記錄儀各個反應箱以清除上只小鼠遺留下來的氣息，以避免影響測定結(jié)果的準確性。與模型對照組進行比較，各劑量組結(jié)果見表8。表8、本發(fā)明對慢性疲勞綜合癥小鼠自主活動的影響由表7可見，小鼠經(jīng)睡眠剝奪后形成慢性疲勞綜合癥，疲勞后自主活動時間明顯減少。與模型組比較，疲勞后0小時、2小時、24小時均有顯著性差異。結(jié)果表明，低劑量、高劑量組均能恢復慢性疲勞綜合癥小鼠自主活動的能力。1.3.3.3負重游泳時間測定：完成第2次睡眠剝奪、末次給予受試物后30min，置小鼠在游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水溫25℃±1.0℃，鼠尾根部負荷5％體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時間。計算各組平均游泳時間，各劑量組結(jié)果見表9。表9、本發(fā)明對慢性疲勞綜合癥小鼠負重游泳時間的影響與空白對照組進行組間T檢驗，***P<0.001與模型組進行組間T檢驗，△P<0.05由表9可見，小鼠經(jīng)睡眠剝奪后形式慢性疲勞綜合癥，其負重游泳死亡時間顯著縮短，全方組低、高劑量給藥可延長其死亡時間(P<0.05)。結(jié)果表明，全方組具有提高慢性疲勞綜合癥小鼠力竭運動的能力。2.3.3、結(jié)論小鼠慢性疲勞綜合癥試驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物復合粉具有緩解慢性疲勞綜合癥功能。對本發(fā)明其它實施例的全方粉末和制劑也進行了上述試驗，其獲得的結(jié)果相似。實驗例4、本發(fā)明所述中藥組合物經(jīng)拆方動物試驗證明，在緩解體力疲勞作用方面，優(yōu)于紅景天單方，其詳細說明如下：1、材料與方法1.1樣品來源與處理：本發(fā)明中藥組合物復合粉全方(實施例1制得)、紅景天提取物粉、黃芪提取物粉、生姜提取物粉、紅景天黃芪提取物粉、紅景天生姜提取物粉、生姜黃芪提取物粉均由桂林金可保健品有限公司提供，臨用前用蒸餾水配制成所需濃度。1.2實驗動物及環(huán)境：SPF級昆明種雄性小鼠，體重18～22g；清潔級WISTAR大鼠，體重180～220g，均由廣西醫(yī)科大學醫(yī)學實驗動物中心提供，實驗動物質(zhì)量合格證號：SCXK桂2014-0002。1.3實驗方法1.3.1劑量與分組：實驗各組各設(shè)兩個劑量組，分別為400、800mg/kg體重(相當于人體推薦用量的20、40倍)，每天經(jīng)口給予受試物2次(20ml/kg體重)，空白對照組、模型組給予等容量蒸餾水，連續(xù)灌胃30天。1.3.2受試物的給予：分別取樣品400和800mg加純凈水至40ml配制成各組受試劑量，當日配制，每日經(jīng)口灌胃兩次，灌胃容量20ml/Kg體重，連續(xù)給予受試物30d。溶劑對照組每日灌胃等量純凈水。1.3.3實驗方法：1.3.3.1游泳時間測定：末次給予受試物后30min，置小鼠在游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水溫25℃±1.0℃，鼠尾根部負荷5％體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時間。計算各組平均游泳時間，各劑量組結(jié)果與空白對照組進行比較。1.3.3.2血清尿素氮(BUN)含量的測定：末次給予受試物后30min，小鼠不負重游泳90min，水溫30℃，休息60min，眼內(nèi)眥采血，按試劑盒進行血清尿素氮測定。1.3.3.3肝糖原含量測定：末次給予受試物后30min，小鼠不負重游泳90min，水溫30℃，休息60min，處死取肝，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟75mg，依試劑方法測定肝糖原含量。1.3.3.4乳酸測定：末次給予受試物后30min，小鼠在30℃水中不負重游泳10min。于游泳前、游泳后立即及游泳后休息20min，分別眼球采血，測定全血血乳酸含量。各劑量組以血乳酸曲線下面積為指標與空白對照組進行比較。血乳酸曲線下面積＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0mIn的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)1.4統(tǒng)計方法：實驗數(shù)據(jù)用spss軟件進行統(tǒng)計分析。2、結(jié)果2.1本發(fā)明中藥組合物復合粉低、高劑量全方組、生姜黃芪組、黃芪組小鼠游泳時間明顯高于空白對照組(P＜0.01)；黃芪紅景天組、生姜組、生姜紅景天組小鼠游泳時間明顯高于空白對照組(P＜0.05)，見表10。表10、本發(fā)明中藥組合物復合粉及拆方各組樣對小鼠負重游泳時間的影響與空白對照組進行組間T檢驗，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0012.2本發(fā)明中藥組合物復合粉高劑量全方組、黃芪紅景天組、黃芪組血清中尿素氮明顯低于空白對照組(P＜0.01)；復合粉低劑量全方組、紅景天組、生姜黃芪組、生姜組、生姜紅景天組血清中尿素氮明顯低于空白對照組(P＜0.05)；復合粉高劑量全方組血清中尿素氮明顯低于單方紅景天組、生姜組(P＜0.05)。見表11。表11、本發(fā)明中藥組合物復合粉和拆方各組樣對小鼠尿素氮的影響與空白對照組進行組間T檢驗，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0012.3本發(fā)明中藥組合物復合粉高劑量全方組、黃芪紅景天組、黃芪組、生姜黃芪組、生姜紅景天組小鼠肝組織中肝糖元含量明顯高于空白對照組(P＜0.01)；復合粉低劑量全方組、紅景天組、生姜黃芪組、生姜組血清中小鼠肝組織中肝糖元含量明顯高于空白對照組(P＜0.05)；復合粉高劑量全方組血清中小鼠肝組織中肝糖元含量明顯高于單方紅景天組(P＜0.05)。見表12。表12、本發(fā)明中藥組合物復合粉及拆方各組樣對小鼠肝糖元的影響與空白對照組進行組間T檢驗，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0012.4本發(fā)明中藥組合物復合粉高劑量全方組、紅景天組、生姜組、黃芪組、黃芪+紅景天組、生姜+紅景天組、生姜+黃芪組都能降低疲勞小鼠血清中乳酸的含量，均低于空白對照組(P＜0.05)；復合粉高、低劑量全方組疲勞小鼠血清中乳酸的含量，與單方紅景天組、黃芪組、生姜組無顯著性差異(P＞0.05)。見表13。表13、本發(fā)明中藥組合物復合粉和拆方各組樣對疲勞小鼠血清乳酸的影響(mmol/L)與空白對照組進行組間T檢驗，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0013、結(jié)論動物試驗表明，在延長小鼠游泳時間、降低血清中尿素氮、提高肝組織中肝糖元量方面，本發(fā)明中藥組合物復合粉高劑量組、生姜黃芪組均高于單方紅景天組(P＜0.05)，拆方實驗表明，本發(fā)明中藥組合物有明顯的增效作用。對本發(fā)明其它實施例的全方粉末和制劑也進行了上述試驗，其獲得的結(jié)果相似。實驗例5、本發(fā)明不同配比的中藥組合物全方粉末對抗疲勞作用的影響。1、材料及方法1.1動物健康清潔級昆明種小鼠110只[(由解放軍總醫(yī)院醫(yī)學動物實驗中心提供，許可證編號SCXK(京)2007-0015]，6周齡，體質(zhì)量(22.1±2.7)g，雌雄各半。1.2藥品與試劑將生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物按不同配比(生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的總質(zhì)量為3000g，各提取物的提取方法同實施例1，各配比見表14所示)制得各不同配比的中藥組合物全方粉末。1.3動物分組及給藥方法將小鼠隨機分為生理鹽水對照組(NS)、抗疲勞中藥復方高、中、低劑量組，共計11組，每組10只，設(shè)600mg/Kg/d劑量(相當于成人每日每千克體重推薦攝入量的30倍)的不同配比組和生理鹽水對照組。受試藥的給予：分別取不同配比的樣品3000mg加純凈水至100ml配制成各組受試藥，生理鹽水對照組給予生理鹽水，各組受試液以每日20ml/Kgb.wt的量經(jīng)口灌胃，連續(xù)32d。1.4爬竿試驗爬竿架及其規(guī)格為:直徑0.7cm，長120cm的玻璃棒，上端垂直固定于爬竿架上，下端懸空，距地面大約40cm。小鼠從第1周開始適應性訓練，以后每周3次，每次5min訓練，經(jīng)1周適應性訓練后，無運動功能異常的小鼠進入測試實驗。各組小鼠在末次灌胃30min后，置于已設(shè)置好的爬竿下段，記錄從放置開始至小鼠因疲勞無力從上端滑落的時間，為小鼠爬竿時間。連續(xù)滑落3次后將時間累加即為最終爬竿時間。1.5力竭性游泳運動試驗小鼠游泳池選用大小為80cm×60cm×60cm的玻璃水槽，訓練時注水深約40cm，水溫(22±1)℃，各實驗組小鼠置于水中同池游泳且不互相接觸，從第1周開始予以適應性訓練，每次游泳20min。小鼠末次灌胃30min后，放入水槽內(nèi)進行游泳實驗，每鼠尾部負重為體重的4％，記錄每只小鼠游泳持續(xù)時間。小鼠游泳時間:小鼠置于水中后立即計時，當小鼠頭部沉入水面10s不能浮出，即刻計時為小鼠游泳時間。1.7統(tǒng)計學分析采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進行分析，各組數(shù)據(jù)分別以平均數(shù)±標準差表示，組間差異比較用單因素方差分析，差異有統(tǒng)計學意義時再用最小顯著差值法(LSD)進行兩兩比較。2結(jié)果2.1抗疲勞中藥對對小鼠體質(zhì)量、一般情況的影響實驗初始、中期、終末的體質(zhì)量與對照組相比，差異均無顯著性(P＞0.05)。實驗期間生理鹽水組和抗疲勞中藥復方紅景天復方高、中、低劑量組飲食好，毛發(fā)光澤，體格較強悍，動作敏捷。2.2各組對小鼠負重游泳時間、爬竿時間的影響抗疲勞中藥復方能延長小鼠負重游泳的時間以及爬竿時間；隨著抗疲勞中藥復方給藥劑 量增加，小鼠負重游泳時間逐漸延長，大劑量組的負重游泳時間、爬竿時間明顯延長，與生理鹽水組比較差異性顯著(P＜0.05)，見表14。表14、抗疲勞中藥對小鼠負重游泳時間、爬竿時間的影響(n＝10，)分組游泳時間(s)爬桿時間(s)對照組331±71216±671.2:0.2:1332±70217±681.5:0.5:1387±67251±611.8:0.9:1405±64282±612.0:1.5:1412±71290±682.5:1.8:1423±63301±653.0:2.0:1413±68291±723.5:2.1:1410±69289±634.2:2.2:1407±68285±674.5:2.5:1390±65253±614.8:2.8:1333±69218±69從上述實驗結(jié)果可以看出，在生姜、紅景天和黃芪的總質(zhì)量一定的情況下，生姜、紅景天和黃芪以不同配制組成的中藥組合物全方粉末具有不同的抗疲勞作用。較對照組相比，當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為1.5～4.5：0.5～2.5:1時具有明顯的抗疲勞作用；當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為1.8～4.2：0.9～2.2:1時抗疲勞作用增強；當生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為2.0～3.0：1.5～2.0:1時抗疲勞作用更加明顯；當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為2.5：1.8:1時抗疲勞作用最強。3討論疲勞是機體在一定環(huán)境條件下，由于長時間或過于繁重、緊張的勞動(包括腦力和體力)而引起的工作效率暫時降低的一種生理心理現(xiàn)象。游泳是全身消耗性運動，劇烈的運動消耗大量的能量。本實驗以生理鹽水作為對照，觀察到本發(fā)明的不同配比的全方復合粉末對小鼠負重游泳時持續(xù)時間、鼠爬桿時間有不同的影響。當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為1.5～4.5：0.5～2.5:1時小鼠負重游泳持續(xù)時間、鼠爬桿時間加長；當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為1.8～4.2：0.9～2.2:1時小鼠負重游泳持續(xù)時間、鼠爬桿時間明顯加長；當生姜或其提取物、紅景天或其提取物和黃芪或其提取物的質(zhì)量比為2.0～3.0：1.5～2.0:1時小鼠負重游泳持續(xù)時間、鼠爬桿時間加長更加顯著；當生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物的質(zhì)量比為2.5：1.8:1時小鼠負重 游泳持續(xù)時間、鼠爬桿時間最長。說明不同配比的生姜提取物、紅景天提取物和黃芪提取物對小鼠具有不同的抗運動型疲勞的作用。當前第1頁1 2 3