關(guān)于st2蛋白抑制劑多肽及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及具有抑制ST2蛋白表達，治療子宮癌的多肽。其序列為DDACFGKGTQFLA是全新的序列，該多肽可體外抑制子宮癌細胞Hela細胞增殖、遷移，治療子宮癌；在體荷瘤模型實驗中成功的增加了小鼠的生存率，抑制子宮癌腫瘤ST2蛋白表達，具有潛在的新藥開發(fā)價值。
【專利說明】關(guān)于ST2蛋白抑制劑多肽及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及ST2蛋白抑制劑多肽及其應(yīng)用，具體涉及具有抑制ST2蛋白表達，治療 子宮癌的多肽。

【背景技術(shù)】
[0002] 子宮癌子宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一。治療半年以手術(shù)為主輔，以放射 治療、化學治療、孕酮抗雌激素等藥物為輔。但是手術(shù)難以完全切除癌組織與亞臨床病灶。 其次就是放化療，但是這兩種治療方式均對正常組織器官有明顯副反應(yīng)，進一步提高療效 并減少對正常組織的損傷是值得研究的課題。目前生物靶向治療腫瘤是非常有前景的，靶 向治療是針對腫瘤發(fā)生過程中阻斷某個或多個信號通路，達到治療腫瘤的目的。
[0003] 直到現(xiàn)在醫(yī)學界還未可以確定是什么原因引致子宮癌，一般認為可能是多項因素 的交叉協(xié)同作用所引起的，其危險因子有：子宮頸糜爛、性行為頻繁、或性生活紊亂、或忽略 性行為之清潔、忽略經(jīng)期衛(wèi)生、性伴侶包皮過長、且可能與皰疹二型病毒（HSV_2)及人乳頭 瘤（HPS)有密切關(guān)系，甚至連性病、披衣菌感染等炎癥有關(guān)。腫瘤患者外周血淋巴細胞處于 Th2型細胞占優(yōu)勢的狀態(tài)，并且腫瘤細胞本身也處于Th2占優(yōu)勢的狀態(tài)，由于Thl細胞受到 抑制，細胞免疫功能不能有效地激活，抗腫瘤免疫能力下降，從而不利于機體組織以細胞免 疫為主的抗腫瘤免疫反應(yīng)，使腫瘤細胞得以生存發(fā)展。ST2是比較強的Th2細胞誘導劑， 在子宮癌中Th2型細胞因子的大量釋放，促成了 ThO細胞向Th2方向極化，而Th2極化又 會產(chǎn)生大量的諸如IL-6的促炎細胞因子，引發(fā)和加劇了全身炎癥反應(yīng)。此外，在Th2型細 胞占優(yōu)勢時常伴隨著免疫耐受，這也促成了子宮出血壞死加重。刪除小鼠的子宮腫瘤的跨 膜型ST2受體（ST2L)可導致腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移的降低，并增加了循環(huán)水平的促炎性細胞因 子、活化的NK細胞和⑶8 + T細胞。ST2蛋白功能升高是子宮癌生的一個重要因素。因此， 抑制ST2蛋白表達，抑制子宮癌發(fā)展，是治療子宮癌的新靶點。但是，尚未有開發(fā)成熟的ST2 蛋白抑制劑多肽的治療子宮癌的藥物 本專利中的ST2蛋白抑制劑多肽已證明在子宮癌中有效，具有在其他腫瘤模型中開發(fā) 的前景。
[0004]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明目的 本發(fā)明提供全新的序列，該序列抑制ST2蛋白表達，對子宮癌具有很好的療效。
[0006] 技術(shù)方案 ST2蛋白抑制劑多肽，其特征在于其序列為DDACFGKGTQFLA。
[0007] -種藥物組合物，其特征在于其包含如權(quán)利要求1所述多肽與一種以上藥學上可 接受的賦形劑、填充劑、粘合劑、潤滑劑、崩解劑、或穩(wěn)定劑。
[0008] 所述的藥物組合物，其特征在于，所述組合物為注射劑。
[0009] 所述的多肽，其特征在于有效劑量為10mg/kg。
[0010] ST2蛋白抑制劑多肽在治療子宮癌藥物中的應(yīng)用。
[0011] 有益效果 ST2蛋白抑制劑多肽，該多肽具有全新的序列，該多肽可體外抑制子宮癌細胞Hela細 胞增殖、遷移，治療子宮癌；在體荷瘤模型實驗中成功的增加了小鼠的生存率，抑制子宮癌 腫瘤ST2蛋白表達，具有潛在的新藥開發(fā)價值。

【具體實施方式】
[0012] 實施例1 ST2蛋白抑制劑多肽對人子宮癌細胞Hela遷移的作用。
[0013] 將10mg/ml Matrigel (BD公司，USA)用無血清的DMEM細胞培養(yǎng)液以1:3稀釋，涂 布于Transwell小室（Greiner公司，USA)膜上，室溫風干。將培養(yǎng)到對數(shù)生長期的Hela細 胞用胰蛋白酶消化，收集，用無血清DMEM細胞培養(yǎng)液重懸，于顯微鏡下計數(shù)，將細胞濃度調(diào) 整到IX 105個/ml。配制各組試驗用液，分組如下：空白對照組：為不含藥物的無血清DMEM 細胞培養(yǎng)液；恩度組：用不含藥物的無血清DMEM細胞培養(yǎng)液將5mg/ml的恩度儲液稀釋到 預(yù)定濃度；ST2蛋白抑制劑多肽組：用不含藥物的無血清DMEM細胞培養(yǎng)液將ST2蛋白抑制 劑多肽稀釋到各個預(yù)定濃度。將細胞接種到Transwell小室中，每孔100 μ 1，并將各組試 驗用液加入小室中。24孔板中加入0. 6ml含5%胎牛血清和1%內(nèi)皮細胞生長因子（ECGS) 的DMEM細胞培養(yǎng)液刺激細胞遷移，于5%C02 , 37°C孵育24小時。棄去孔中培液，用無水乙 醇常溫固定30分鐘，0. 1%結(jié)晶紫常溫染色10分鐘，清水漂凈，用棉簽輕輕擦掉上層未遷移 細胞，顯微鏡下觀察并隨機選擇四個視野拍照計數(shù)。按照公式計算遷移抑制率(migration inhibition, MI)： MI (%) = (1-Ntest/Ncontrol) X 100% 其中Ntest為測試組的細胞遷移數(shù)，Ncontrol為空白對照組的細胞遷移數(shù)。試驗得到 的結(jié)果以mean ± SD表示，并進行統(tǒng)計T檢驗，#〈 0. 05為顯著性差異，構(gòu)W〈 0. 01為極顯 著性差異。
[0014] 表1. ST2蛋白抑制劑多肽對人子宮癌細胞Hela遷移抑制作用

【權(quán)利要求】
1. ST2蛋白抑制劑多肽，其特征在于其序列為DDACFGKGTQFLA。
2. -種藥物組合物，其特征在于其包含如權(quán)利要求1所述多肽與一種以上藥學上可接 受的賦形劑、填充劑、粘合劑、潤滑劑、崩解劑、或穩(wěn)定劑。
3. 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述組合物為注射劑。
4. 如權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于有效劑量為10mg/kg。
5. 如權(quán)利要1所述的ST2蛋白抑制劑多肽3在治療子宮癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P35/00GK104059130SQ201410293557
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年6月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月27日
【發(fā)明者】羅瑞雪 申請人:蘇州普羅達生物科技有限公司