抑制黑色素生物合成的混合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含乙?；咸前泛?-(1-苯基乙基)-1,3-苯二醇的混合物，其用作化妝品和/或藥物，并且特別用于抑制黑色素生物合成，并且本發(fā)明涉及包含所述混合物的化妝品制劑和/或藥物制劑，其用于治療色素沉著過(guò)度的皮膚損害例如但不限于日光斑、老人斑、黑斑病和黃褐斑，用于使得皮膚顏色均勻，用于對(duì)抗自由基形成以及用于對(duì)抗或預(yù)防皮膚老化體征例如皺紋和皮膚色調(diào)缺乏，并且通常用于改善皮膚審美條件。
【專利說(shuō)明】抑制黑色素生物合成的混合物
[0001] 說(shuō)明書 發(fā)明領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及化妝品和藥物工業(yè)【技術(shù)領(lǐng)域】，并且特別的是，本發(fā)明涉及抑制黑色素 生物合成的混合物。
[0003] 技術(shù)水平
[0004] 已知黑色素是最有助于確定人皮膚的色素沉著的物質(zhì)。實(shí)際上，通常所說(shuō)的黑色 素或黑素是生物學(xué)上出現(xiàn)的黑色、棕色或淡紅色色素，其賦予皮膚特征性顏色。
[0005] 黑色素是由黑色素細(xì)胞產(chǎn)生的，黑色素細(xì)胞是存在于表皮基底層的特別的細(xì)胞。 基本上，當(dāng)黑色素細(xì)胞暴露于光并且特別是紫外輻射時(shí)，其通過(guò)生物化學(xué)過(guò)程產(chǎn)生黑色素。
[0006] 相當(dāng)復(fù)雜的黑色素生物合成過(guò)程產(chǎn)生自氨基酸酪氨酸的氧化，酪氨酸是黑色素的 前體。
[0007] 盡管黑色素在生物體中起重要作用，但是病例不是罕見的，其中包括一些因素引 起的不希望的皮膚色素沉著過(guò)度，所述因素性質(zhì)上可以是內(nèi)源性或外源性的，例如衰老，疾 病例如皮膚疾病或者日光暴露引起的皮膚斑。
[0008] 因此，在這些病例和其它病例中，存在控制黑色素生物合成，并且特別是降低其生 物合成或者其它的需求，以獲得對(duì)皮膚的脫色素作用。
[0009] 在這方面，現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)提供了幾個(gè)化合物，其主要是但不僅僅是基于抑制酪氨 酸酶的酶活性的能力，所述酶與氧合作，以使得酪氨酸氧化為多巴醌。具有脫色素活性的其 它化合物促進(jìn)酪氨酸酶的蛋白質(zhì)降解，然而再其它的抑制酪氨酸酶形成。
[0010] 對(duì)于酪氨酸，據(jù)說(shuō)其氧化在黑色素生物合成中是關(guān)鍵且起決定性的步驟，因?yàn)殡S 后的步驟在人體中自然地發(fā)生。
[0011] 抑制酪氨酸酶的酶活性的方法通常是基于多種黑色素合成中間體的氧化過(guò)程的 直接抑制，并且其主要在于通過(guò)典型地競(jìng)爭(zhēng)型機(jī)制而抑制其催化能力。
[0012] 已知的酪氨酸酶抑制劑化合物屬于多酚，其包括黃酮醇、黃酮、二氫黃酮、異黃酮 醇、查耳酮、靈、香豆素，以及曲酸、光甘草定（glabridin)，以及通常是甘草衍生物。
[0013] 文獻(xiàn)W0 2007/077260描述了當(dāng)與多種其它物質(zhì)聯(lián)用時(shí)，二苯基甲烷及其衍生物 的脫色素活性，所述多種其它物質(zhì)的脫色素和UV輻射保護(hù)活性是已知的。
[0014] 然而，現(xiàn)有技術(shù)中已知的最有效的脫色素物質(zhì)是氫醌。氫醌通過(guò)細(xì)胞毒型機(jī)制起 作用，盡管其作用同時(shí)引起黑色體生長(zhǎng)的抑制，并且其還抑制多巴醌和二氧基苯基丙氨酸 的形成，所述的二氧基苯基丙氨酸是酪氨酸經(jīng)酶酪氨酸酶氧化得到的另一種化合物。
[0015] 然而，氫醌的作用總是與潛在的高毒性和細(xì)胞毒性相關(guān)，這致使其在多個(gè)國(guó)家的 化妝品領(lǐng)域禁止使用，所述國(guó)家包括歐盟、日本和南非。
[0016] 此外，在一些歐洲國(guó)家包括意大利，其用途也已經(jīng)在制藥領(lǐng)域禁止。
[0017] 因此，現(xiàn)有技術(shù)描述了能抑制皮膚色素黑色素產(chǎn)生的幾個(gè)化合物，然而，需要解決 其一直不令人滿意的功效和具有不希望的副作用的風(fēng)險(xiǎn)或者甚至毒性和細(xì)胞毒性作用，高 效（即能提供顯著脫色素作用）的脫色素物質(zhì)是需要的，所述物質(zhì)的脫色素作用比已知物 質(zhì)更強(qiáng)，并且能降低或者甚至消除不希望的副作用，以及并且特別是毒性和細(xì)胞毒性作用。
[0018] 發(fā)明概述
[0019] 本發(fā)明潛在的技術(shù)問(wèn)題是對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，提供能克服所述缺點(diǎn)并具有上述特征的 脫色素產(chǎn)品。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明，所述問(wèn)題已經(jīng)通過(guò)包含乙酰基葡糖胺和4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二 醇的混合物解決，所述混合物用作化妝品和/或藥物，特別是用于抑制黑色素生物合成。
[0021] 有利的是，在完整組織的情況和受損組織的情況中，本發(fā)明的混合物均可以通過(guò) 外部施用例如通過(guò)應(yīng)用于皮膚或粘膜或者通過(guò)皮下注射而用于化妝品用途或藥物用途。
[0022] 有利的是，本發(fā)明的混合物在控制皮膚色素黑色素產(chǎn)生方面，可以用于預(yù)防、改 善或治療目的，特別是用于降低旨在作為真黑色素和褐黑素產(chǎn)生的黑色素產(chǎn)生，例如用于 治療黑色素沉著過(guò)度的皮膚損害，例如但不限于病理性、炎性或傳染性的損害，用于預(yù)防 和/或抵抗皮膚衰老體征，所述體征特別表現(xiàn)為膚色均勻度的變化、皺紋和皮膚色調(diào)（skin tone)的喪失，并且用于治療暴露于UV輻射引起的皮膚太陽(yáng)斑。
[0023]本發(fā)明令人驚奇地表明：當(dāng)乙酰基葡糖胺與二苯基甲烷衍生物4-(1_苯基乙 基）-1，3-苯二醇組合時(shí)，其能發(fā)揮對(duì)黑色素生物合成的顯著抑制作用，所述作用比所述兩 種活性成分單獨(dú)使用時(shí)的作用顯著更高。
[0024]特別地，本發(fā)明的混合物已經(jīng)顯示了乙?；咸前放c4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二 醇的組合不但比上述化合物各自單獨(dú)顯示的作用顯著更有效，而且其作用甚至與現(xiàn)有技術(shù) 已知的最有效的脫色素物質(zhì)氫醌的作用相當(dāng)，并且如在用于對(duì)抗皮膚色素形成過(guò)程的劑量 評(píng)價(jià)的，其未顯示可察覺(jué)水平的細(xì)胞毒性。
[0025]優(yōu)選地，基于混合物的總重量，本混合物包含重量濃度范圍為0. 05%至90%，更 優(yōu)選0. 5 %至10 %，甚至更優(yōu)選2 %至5 %的乙酰基葡糖胺。
[0026]優(yōu)選地，基于混合物的總重量，本混合物包含重量濃度范圍為0. 05%至90%，更 優(yōu)選0. 1 %至5. 0 %，甚至更優(yōu)選0. 5 %至2 %的4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇。
[0027]還根據(jù)本發(fā)明，令人驚訝地發(fā)現(xiàn)：除了上述活性成分乙?；咸前泛?-(1-苯基 乙基）-1，3-苯二醇之外，當(dāng)亞油酸乙酯存在時(shí)，本混合物的作用進(jìn)一步增強(qiáng)。
[0028]優(yōu)選地，基于混合物的總重量，亞油酸乙酯以重量濃度范圍0. 1 %至35%，更優(yōu)選 0. 23%至20%，甚至更優(yōu)選2%至15%存在于本發(fā)明的混合物中。
[0029]根據(jù)上述并還根據(jù)本發(fā)明，本混合物用于制備用于黑色素生物合成抑制治療的化 妝品制劑和/或藥物制劑，并且更通常地，本混合物用于制備用于抑制黑色素生物合成的 化妝品和/或藥物。
[0030] 因此，本發(fā)明還提供了包含上述混合物和生理學(xué)可接受的介質(zhì)或載體的化妝品制 劑和/或藥物制劑，所述制劑特別用于抑制黑色素生物合成。
[0031]文中，術(shù)語(yǔ)混合物旨在表示在有或無(wú)亞油酸乙酯的條件下，上述活性成分乙?；?葡糖胺和4-(1_苯基乙基）_1，3-苯二醇的任何物理-化學(xué)、固體、液體或氣體形式例如混 合物、溶液、分散物、乳液、混懸液、氣霧劑、溶膠、凝膠、泡沫形式的組合。
[0032]文中，術(shù)語(yǔ)制劑旨在表示適合于本混合物通過(guò)體外或皮下途徑施用的任何產(chǎn)品， 例如通常用于化妝品和或藥理學(xué)的油膏劑、乳膏劑、軟膏劑、糊劑、凝膠劑、乳狀物、洗劑、噴 霧劑、溶液劑、乳劑、混懸劑、肥皂劑（soap)和類似形式。
[0033] 當(dāng)考慮下文一些優(yōu)選但不是唯一的實(shí)施方案的詳細(xì)描述，本發(fā)明進(jìn)一步的特征和 優(yōu)點(diǎn)將變得更顯而易見，提供所述實(shí)施方案是用于解釋，并不是限制目的。
[0034] 發(fā)明詳述
[0035] 本發(fā)明的混合物包含作為活性成分的乙?；咸前泛?-(1_苯基乙基）_1，3-苯 二醇（也稱作4-(1-苯基乙基）-1,3-苯二醇或4-(1-苯基乙基）苯-1,3-二醇或4-(1-苯 基乙基）間苯二酚或者4-(a-甲基芐基）間苯二酚），其用于化妝品用途和/或作為藥物， 特別是用于抑制黑色素生物合成。
[0036] 乙?；咸前肥且阴０坊钠咸前?，其是能阻止酶酪氨酸酶糖基化，從而抑制所 述酶成熟的氨基糖（酪氨酸酶是糖蛋白，其需要糖基化，以便活化）。
[0037] 4-(1_苯基乙基）_1，3-苯二醇是二苯基甲烷的衍生物，能用作酪氨酸酶催化活 性的直接抑制劑，并且能同時(shí)用作氧化過(guò)程中優(yōu)先于酪氨酸的底物（還關(guān)于酪氨酸酶）。 4-(1_苯基乙基）_1，3-苯二醇的特征特別在于抗氧化劑和自由基清除活性，這也是乙酰 基葡糖胺所顯示的特征，并且由此，如同乙?；咸前罚湓诟鼜V泛意義上，可用于對(duì)抗 光-誘導(dǎo)的和衰老引起（chronological)的皮膚老化。
[0038] 令人驚訝的是，本發(fā)明已經(jīng)說(shuō)明上述化合物的組合應(yīng)用顯示了很大的協(xié)同作用， 并且提供在無(wú)細(xì)胞毒性水平要實(shí)現(xiàn)的對(duì)黑色素生物合成的顯著抑制作用。
[0039] 不希望受任何科學(xué)理論或論證的束縛，認(rèn)為：乙酰基葡糖胺和4-(1_苯基乙 基）-1，3-苯二醇組合應(yīng)用提供了通過(guò)協(xié)同作用機(jī)制控制黑色素生物合成過(guò)程，其中乙酰 基葡糖胺抑制了酪氨酸酶糖基化過(guò)程，從而抑制了活性形式的該酶的生物利用度，同時(shí) 4-(1_苯基乙基）-1，3-苯二醇用于阻止其催化活性。
[0040] 特別地，得到的乙?；咸前泛?- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇組合所示的試驗(yàn)數(shù) 據(jù)可以獲得高脫色素作用，所述作用比這些化合物各自單獨(dú)使用時(shí)獲得的作用更大。
[0041] 根據(jù)上述預(yù)期，認(rèn)為協(xié)同作用是通過(guò)兩種化合物在調(diào)節(jié)黑色素生物合成過(guò)程的不 同作用機(jī)制測(cè)定的。
[0042] 特別地，認(rèn)為乙酰基葡糖胺主要通過(guò)抑制酪氨酸酶糖基化，從而抑制酶的成熟，由 此能降低其糖基化的活性形式的生物利用度而起作用，而認(rèn)為4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二 醇用作酶活性抑制劑并且由此用作酪氨酸酶催化活性抑制劑。
[0043] 兩種機(jī)制引起黑色素生物合成抑制，這不應(yīng)考慮為兩種化合物內(nèi)在活性的簡(jiǎn)單總 和，而應(yīng)考慮為通過(guò)同步生化機(jī)制可能獲得的作用，所述同步生化機(jī)制致使黑色素細(xì)胞產(chǎn) 生的黑色素預(yù)料不到的顯著降低。
[0044] 事實(shí)上，已經(jīng)顯示當(dāng)以25 ii g/mL、50 ii g/mL和75 ii g/mL的不同濃度試驗(yàn)時(shí)，單獨(dú) 使用乙酰基葡糖胺不能引起黑色素生物合成可察覺(jué)的降低，基于前面所述的三種濃度，其 顯示平均8 %的降低。
[0045] 相反，當(dāng)以10Ug/mL的濃度使用4-(1_苯基乙基）_1，3_苯二醇時(shí)，其引起黑色素 生物合成約50%的百分?jǐn)?shù)降低。
[0046] 令人驚訝的是，當(dāng)將兩種化合物乙?；咸前泛?- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇組 合，并且分別以75 y g/mL和10 y g/mL的濃度一起使用時(shí)，在黑色素生物合成的抑制方面， 可以將黑色素生成過(guò)程降低至多72 %，其相應(yīng)于與單獨(dú)使用4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇 相比的約44 %的增加，并且相應(yīng)于與4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇和乙酰基葡糖胺混合物 相比的約25 %的增加。
[0047] 還根據(jù)本發(fā)明，已令人驚訝地顯示當(dāng)本混合物還包含亞油酸乙酯時(shí)，黑色素生物 合成的抑制還顯著增強(qiáng)。
[0048] 特別地，已經(jīng)顯示除了上述濃度的乙酰基葡糖胺和4-(1_苯基乙基）_1，3-苯二醇 之外，還包含50 y g/mL濃度的亞油酸乙酯的混合物引起黑色素生物合成抑制接近于82%， 如關(guān)于相對(duì)于乙?；咸前泛?-(1_苯基乙基）-1，3-苯二醇的組合分別以上述濃度即 75 y g/mL和10 y g/mL提供的黑色素生物合成抑制能力計(jì)算，其具有約15 %的黑色素生物 合成抑制活性的增加。
[0049] 因此，因?yàn)橐呀?jīng)特別顯示僅與4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇組合的亞油酸乙酯分 別以50 y g/mL和10 y g/mL的濃度使用時(shí)，引起黑色素生物合成被抑制約50 %，結(jié)果與上述 4-(1_苯基乙基）-1，3-苯二醇的50%的百分?jǐn)?shù)相當(dāng)，那么，可以將上述化合物亞油酸乙酯 考慮為本發(fā)明混合物的特別的協(xié)同劑。
[0050] 此外，當(dāng)亞油酸乙酯與單獨(dú)的乙?；咸前方M合，分別以50ii g/mL和75ii g/mL濃 度使用時(shí)，將黑色素生物合成抑制約15%。
[0051] 因此，根據(jù)本發(fā)明并且根據(jù)所報(bào)道的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，已經(jīng)顯示當(dāng)本混合物主要包含乙 ?；咸前泛?- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)黑色素生成抑制能力的令人驚 訝的增加，其比僅使用4-(1-苯基乙基）-1，3-苯二醇獲得的抑制增加約44%，并且與兩種 組分單獨(dú)使用獲得的抑制作用的總和相比，也還具有顯著性，如果計(jì)算關(guān)于單獨(dú)使用乙酰 基葡糖胺獲得的抑制，所述增加甚至是更大的，并且，當(dāng)使用還含有亞油酸乙酯的本發(fā)明的 混合物時(shí)，黑色素抑制的相對(duì)增加還進(jìn)一步令人驚訝地增強(qiáng)，當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，亞油酸乙酯抑 制黑色素合成的能力比包含相同亞油酸乙酯的本發(fā)明混合物的能力顯著更低。
[0052] 所有的組合物已經(jīng)顯示是無(wú)細(xì)胞毒性的。
[0053] 根據(jù)下文所述的相同方法，當(dāng)在無(wú)細(xì)胞毒濃度誘導(dǎo)時(shí)，氫醌抑制黑色素生物合成 的能力是約40%。
[0054] 因此，可以假定特異性協(xié)同作用機(jī)制，其中乙酰基葡糖胺引起糖基化的酪氨酸酶 減少，從而活性-酪氨酸酶減少，并且同時(shí)促進(jìn)蛋白酶體消化，這已經(jīng)被亞油酸乙酯刺激。 在所述情況下，還存在4- (1-苯基乙基）-1，3-苯二醇對(duì)酪氨酸酶（其還是活性的和生物可 用的）催化活性的抑制作用。
[0055] 試驗(yàn)數(shù)據(jù)也支持的所述作用機(jī)制可以通過(guò)下述流程圖表示。
[0056]
【權(quán)利要求】
1. 包含乙?；咸前泛?-(1-苯基乙基）-1，3-苯二醇的混合物，其用作化妝品和/或 藥物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的混合物，其中基于混合物的總重量，乙?；咸前返闹亓繚舛葹?0? 05%至0? 90%，優(yōu)選0? 5%至10%，更優(yōu)選2%至5%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的混合物，其中基于混合物的總重量，4-(1-苯基乙基）-1，3-苯 二醇的重量濃度為0. 05 %至90 %，優(yōu)選0. 1 %至5. 0 %，更優(yōu)選0. 5 %至2 %。
4. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的混合物，其還包含亞油酸乙酯。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4的混合物，其中基于混合物的總重量，亞油酸乙酯是的重量濃度為 0. 1%至35%，優(yōu)選0.23%至20%，更優(yōu)選2%至15%。
6. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的混合物，其用于抑制黑色素生物合成。
7. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的混合物，其用于治療色素沉著過(guò)度的皮膚損害，包括 日光斑、老人斑（老化的斑）、黑斑病、黃褐斑。
8. 根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的混合物，其用于提供均勻膚色和/或?qū)棺杂苫纬?和/或?qū)够蝾A(yù)防皮膚老化體征例如皺紋和皮膚色調(diào)缺乏。
9. 化妝品和/或藥物制劑，其包含根據(jù)前述任意一項(xiàng)權(quán)利要求的混合物和生理學(xué)上可 接受的載體。
【文檔編號(hào)】A61K8/06GK104507462SQ201380040108
【公開日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2013年6月4日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月4日
【發(fā)明者】保利 安布羅西 G·德 申請(qǐng)人:整體護(hù)膚有限責(zé)任公司