霞多麗種子產(chǎn)品的治療用途
【專利摘要】本公開內(nèi)容涉及霞多麗種子產(chǎn)品的健康益處。
【專利說明】霞多麗種子產(chǎn)品的治療用途 1.【背景技術(shù)】
[0001] 1. 1代謝病癥
[0002] 肥胖癥眾所周知是許多非常常見疾病如動(dòng)脈粥樣硬化癥、高血壓、2型糖尿病（非 胰島素依賴型糖尿?。∟IDDM))、血脂異常癥、冠心病和骨關(guān)節(jié)炎以及各種惡性腫瘤發(fā)展的 危險(xiǎn)因素。它通過減少運(yùn)動(dòng)性和降低生活質(zhì)量也引起相當(dāng)多的問題。肥胖癥和由此還有這 些疾病的發(fā)病率在整個(gè)工業(yè)化世界正在增加。
[0003] 術(shù)語肥胖癥是指脂肪組織過多。在此上下文中肥胖癥最好認(rèn)為是賦予健康風(fēng)險(xiǎn)的 任何程度的過多脂肪。正常和肥胖個(gè)體之間的分界線可能僅僅是近似的，但是由肥胖癥賦 予的健康風(fēng)險(xiǎn)可能是肥胖增加的延續(xù)。
[0004] 即使輕度肥胖癥也會(huì)增加過早死亡和病癥如糖尿病、血脂異常癥、高血壓、動(dòng)脈粥 樣硬化癥、膽囊疾病和某些類型的癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。在西方工業(yè)化世界，肥胖癥的患病率在過去 的幾十年內(nèi)顯著增加。由于肥胖癥的高發(fā)病率及其健康后果，其預(yù)防和治療應(yīng)該是一個(gè)應(yīng) 高度優(yōu)先考慮的公共健康問題。
[0005] 當(dāng)能量攝入超過支出時(shí)，多余熱量主要貯存在脂肪組織中，并且如果這種凈正平 衡延長(zhǎng)，則會(huì)導(dǎo)致肥胖癥，即，有兩個(gè)體重平衡的組成部分，而對(duì)任何一邊（攝取或支出）的 異常都可能導(dǎo)致肥胖癥。這個(gè)過程可以通過增加能量消耗（例如運(yùn)動(dòng)）或減少能量攝入 (例如，節(jié)食）進(jìn)行抵消。除了運(yùn)動(dòng)，飲食和食品限制，這對(duì)廣大的受試者是不可行的，目前 還沒有有效且可接受的降低體重的令人信服的治療。
[0006] 增加能量消耗的一種可能方式是增加代謝率（metabolic rate)。因此，通過增加 代謝率而起作用的藥物可能適用于治療肥胖癥，而且也適用于治療其它疾病如動(dòng)脈粥樣硬 化癥、高血壓、糖尿病尤其是2型糖尿病（NIDDM(非胰島素依賴型糖尿?。?、血脂異常癥、冠 心病、膽囊疾病、骨關(guān)節(jié)炎和不同類型的癌癥如子宮內(nèi)膜癌、乳癌、前列腺癌和結(jié)腸癌和過 早死亡的風(fēng)險(xiǎn)。
[0007] 因而，識(shí)別出能夠增加能量消耗的試劑將會(huì)是合乎需要的。優(yōu)選這種試劑會(huì)是天 然試劑而避免與藥物化合物相關(guān)的副作用。
[0008] 1. 2.腸道牛物群落
[0009] 嬰兒的腸道在出生前是無菌的。出生后，腸道內(nèi)迅速被環(huán)境細(xì)菌建群定居直至建 立密集的腸道生物群落。陰道分娩的嬰兒從其母親陰道和糞便菌群獲得腸道菌群集群細(xì) 菌。與此相反，通過剖腹產(chǎn)的嬰兒出生期間不會(huì)暴露于其母親的陰道和糞便菌群，而由此繁 衍的腸道生物群落在組成上不同于陰道分娩嬰兒的腸道生物菌群。這些腸道生物群落組成 的差異在出生之后即要保持?jǐn)?shù)月。同樣地，在母乳喂養(yǎng)和那些配方制品（配方奶，formula) 喂養(yǎng)的嬰兒之間已經(jīng)觀察到腸道生物群落組成的差異。
[0010] 成年人腸道有大約IO13 (10, 〇〇〇, 〇〇〇, 〇〇〇, 〇〇〇)種不同的定居者（Backhead，F(xiàn).， et al. (2004) PNAS Volume 101 ;ηο 44ρρ· 15718-15723)，而橫貫許多人類文化背景建立了 三種恒定的微生物分型（Arumugam，M.et al. (2011)Nature Vol. 473ρρ· 174-180)。腸道 生物群落受到飲食中植物基多酚的影響，并且據(jù)信，所述微生物會(huì)將其轉(zhuǎn)化為人類宿主可 生物利用的（Rastmanesh，R. (2011)，Chemico-Biol· Interact. Vol. 189ρρ· 1-8 ;Moco，S.， F. J. Martin，and S. Rezzi. (2012) J. Proteome Res. Volume 11，ρρ· 4781-4790)。充當(dāng)一種 器官，所述腸道生物群落也負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)化和生產(chǎn)關(guān)鍵的維生素如膽鈣化留醇（維生素 D25)、生物 素（維生素 Η)、核黃素（維生素 B2)、泛酸鹽（pantothenate)(維生素 B5)、抗壞血酸（維生 素 C)、硫胺素（維生素 B1)和葉酸（維生素 B9);特別是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的三種微生物分型（擬桿 菌（Bacteroides)、瘤胃球菌（Ruminococcus)和普雷沃氏菌（Prevotella))中的兩種（擬 桿菌和普雷沃氏菌）。一些多酷類物質(zhì)被Norman Hollenberg博士，哈佛醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)教授以 其自身的權(quán)利描述為維生素。然而，現(xiàn)代飲食，尤其是西方飲食，包含大量的加工食品，可能 會(huì)促進(jìn)腸道生物群落組成，其不能轉(zhuǎn)化或生產(chǎn)足量或最佳量的這些關(guān)鍵的維生素。
[0011] 因而，識(shí)別出能夠"填補(bǔ)"傳統(tǒng)加工食品消費(fèi)引起的"營(yíng)養(yǎng)空白"和調(diào)節(jié)人類腸道 生物群落而實(shí)現(xiàn)健康改善的試劑是合乎需要的。優(yōu)選這種試劑是天然試劑而避免與藥物化 合物相關(guān)的副作用。 2.
【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明公開內(nèi)容涉及霞多麗（莎當(dāng)妮、雪當(dāng)利，Chardonnay)種子產(chǎn)品的健康益 處。
[0013] 在某些方面中，本發(fā)明公開內(nèi)容涉及一種通過給予有效提高哺乳動(dòng)物中脂質(zhì)代謝 的量的霞多麗種子產(chǎn)品以提高哺乳動(dòng)物中脂質(zhì)代謝的方法。
[0014] 在某些方面中，本發(fā)明公開內(nèi)容涉及一種通過給予有效提高哺乳動(dòng)物中代謝率 (metabolic rate)的量的霞多麗種子產(chǎn)品以提高哺乳動(dòng)物代謝率的方法。
[0015] 本發(fā)明公開內(nèi)容還涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中肥 胖癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中肥胖癥、心血管病、血脂異常癥、異常 脂蛋白血癥或糖代謝障礙癥的方法。
[0016] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防所述哺乳 動(dòng)物中心血管病的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中心血管病的方法。在某些 方面中，心血管病是動(dòng)脈硬化癥、動(dòng)脈粥樣硬化癥、中風(fēng)、缺血、內(nèi)皮功能障礙癥、外周血管 疾病、冠心病、心肌梗塞、腦梗塞或再狹窄。
[0017] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防所述哺乳 動(dòng)物中血脂異常癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中血脂異常癥的方法。在 某些方面中，所述血脂異常癥是高血脂癥或低血水平的高密脂蛋白（HDL)膽固醇。在某些 方面中，所述高血脂癥是家族性高膽固醇血癥、家族性混合高血脂癥、降低或缺乏性脂蛋白 脂酶水平或活性、高甘油三酯血癥、高膽固醇血癥、高血水平酮體、高血水平Lp (a)膽固醇、 高血水平低密脂蛋白（LDL)膽固醇、高血水平極低密度脂蛋白（VLDL)膽固醇、或高血水平 非酯化脂肪酸。
[0018] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過給予有效治療或預(yù)防所述異常脂蛋白血癥 的量的霞多麗種子產(chǎn)品治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中異常脂蛋白血癥的方法。在某些方面中，所 述異常脂蛋白血癥是高血水平LDL、高血水平載脂蛋白B (apo B)、高血水平Lp (a)、高血水 平apo(a)、高血水平VLDL、低血水平HDL、降低或缺乏性脂蛋白脂酶水平或活性、低α脂蛋 白血癥、與糖尿病相關(guān)的脂蛋白異常、與肥胖癥相關(guān)的脂蛋白異常、與阿爾茲海默癥相關(guān)的 脂蛋白異常、或家族性混合高血脂癥。
[0019] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物 中糖代謝障礙癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中糖代謝障礙癥的方法。在 某些方面中，所述糖代謝障礙癥是受損的葡萄糖耐受性、胰島素耐受性（胰島素抵抗）、胰 島素耐受性相關(guān)乳癌、結(jié)腸癌或前列腺癌、糖尿病、胰腺炎、高血壓、多囊卵巢癥、高水平血 胰島素、或高水平血糖。在某些方面中，所述糖尿病是非胰島素依賴型糖尿?。∟IDDM)、胰島 素依賴型糖尿病（IDDM)、妊娠期糖尿?。℅DM)、或青春晚期糖尿?。∕ODY，maturity onset diabetes of the young)〇
[0020] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物 中代謝綜合癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中代謝綜合癥的方法。
[0021] 在某些方面中，給予的量有效調(diào)節(jié)一種或多種參與脂肪、膽固醇和/或膽汁代謝 的基因的表達(dá)。在【具體實(shí)施方式】中，所述量有效提高肝組織中ACOXl的表達(dá)、提高肝組織中 CYP51的表達(dá)、提高肝組織中CYP7al的表達(dá)、降低肝組織中S⑶1的表達(dá)、和/或降低肝組織 中ABCG5的表達(dá)，例如至少10%、至少20%、至少50%、或至少100%。
[0022] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效提高所述哺乳動(dòng)物腸 道中的梭菌（Clostridium)細(xì)菌量的量的霞多麗種子產(chǎn)品以提高哺乳動(dòng)物腸道中梭菌細(xì) 菌量的方法。
[0023] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效提高所述哺乳動(dòng)物腸 道中的腸桿菌（Enterobacteriaceae)細(xì)菌量的量的霞多麗種子產(chǎn)品以降低哺乳動(dòng)物腸道 中腸桿菌細(xì)菌量的方法。
[0024] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向所述哺乳動(dòng)物給予有效提高所述哺乳動(dòng) 物腸道中的脆弱擬桿菌（Bacteroides fragilis)群（group)細(xì)菌量的量的霞多麗種子產(chǎn) 品以提高哺乳動(dòng)物腸道中脆弱擬桿菌群細(xì)菌量的方法。
[0025] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種通過向哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防乳酸性酸 中毒的量的霞多麗種子產(chǎn)品以治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中乳酸性酸中毒的方法。
[0026] 在這些方法的某些實(shí)施方式中，向所述哺乳動(dòng)物給予并非是霞多麗種子產(chǎn)品的第 二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品。在某些方面中，霞多麗種子產(chǎn)品和第二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品 的組合提供的療效或健康益處超過單獨(dú)給予霞多麗種子產(chǎn)品的效果。
[0027] 在某些方面中，所述霞多_種子產(chǎn)品由具有至少600mg表兒茶素 /IOOg種子的表 兒茶素含量或至少700mg表兒茶素 /IOOg種子的表兒茶素含量的種子制備。在具體實(shí)施方 式中，所述表兒茶素含量范圍為600-800mg/100g種子或650-800mg/100g種子。
[0028] 在某些實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品引入食品或飲料產(chǎn)品。
[0029] 在某些實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品是霞多麗種子粉。在某些實(shí)施方式中，所 述霞多麗種子產(chǎn)品是霞多麗種子提取物。在某些實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品來自生 長(zhǎng)于溫克勒（Winkler)地區(qū)氣候I、II、III或IV型中的葡萄。
[0030] 在某些實(shí)施方式中，所述哺乳動(dòng)物是家養(yǎng)寵物，例如，貓或狗。在這些方法的其它 實(shí)施方式中，所述哺乳動(dòng)物是人類。在其它實(shí)施方式中，所述人類是嬰兒。
[0031] 本發(fā)明公開內(nèi)容進(jìn)一步涉及一種包含霞多麗種子產(chǎn)品的嬰兒配方制品（infant formula)和使用所述嬰兒配方制品促進(jìn)嬰兒腸道微生物群落發(fā)展的方法。在某些方面 中，所述嬰兒配方制品當(dāng)給予嬰兒時(shí)通過調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌的水平而促進(jìn)腸道微生物群發(fā)展 (development)。在某些實(shí)施方式中，所述嬰兒通過剖腹產(chǎn)分娩。在某些實(shí)施方式中，所述 嬰兒是配方制品喂養(yǎng)。
[0032] 3.附圖簡(jiǎn)要說明
[0033] 圖1 :霞多麗（Chr)、解百衲（赤霞珠）（Cab)和西拉（Syrah) (Syr)種子（Sd)和皮 (Sk)的蛋白、脂肪、灰分、碳水化合物和總膳食纖維含量。
[0034] 圖2 :實(shí)施例1中倉鼠的膳食組成。
[0035] 圖3 :實(shí)施例1中動(dòng)物以周計(jì)的種子喂食體重。
[0036] 圖4 :實(shí)施例1中動(dòng)物以周計(jì)的皮喂食體重。
[0037] 圖5 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物的每周食物攝取。
[0038] 圖6 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物的總食物攝取。
[0039] 圖7 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物的總熱量攝取。
[0040] 圖8 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的血漿脂蛋白膽固醇水平。
[0041] 圖9 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的血糖水平。
[0042] 圖10 :實(shí)施例1的所述動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的器官重量。
[0043] 圖11 :不同葡萄品種的種子和皮中表兒茶素水平。
[0044] 圖12 :實(shí)施例2包含3wt%、7wt%和10wt%霞多麗種子粉的喂食飲食的動(dòng)物的體 重、體重增益和總食物攝取。
[0045] 圖13 :實(shí)施例2喂食霞多麗種子乙醇提取物（40EtChrSdEx)、霞多麗種子甲醇提取 物（MeChrSdEx)、霞多麗種子乙醇提取殘余物（40EtChrSdRes)、霞多麗種子甲醇提取物殘 余物（MeChrSdRes)、按照飲食重量的10 %、7 %和3 % (分別為10 % ChrScU 7 % ChrSd和3 % ChrSd)的霞多麗種子粉、10%飲食重量的白雷司令（White Riesling)種子粉（10% WRSd) 和10%飲食重量的長(zhǎng)相思（Sauvignon Blanc)種子粉（10% SBSd)的動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的 VLDL、LDL和HDL膽固醇水平。
[0046] 圖14 :實(shí)施例2喂食霞多麗種子乙醇提取物（40EtChrSdEx)、霞多麗種子甲醇提 取物（MeChrSdEx)、霞多麗種子乙醇提取物殘余物（40EtChrSdRes)、霞多麗種子甲醇提取 物殘余物（MeChrSdRes)、10 %，7 % 和 3 % 飲食重量（分別為 10 % ChrSd，7 % ChrSd 和 3 % ChrSd)的霞多麗種子粉、10%飲食重量的白雷司令（White Riesling)種子粉（10% WRSd) 和10%飲食重量的長(zhǎng)相思（Sauvignon Blanc)種子粉（10% SBSd)的動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的 LDL/HDL膽固醇比率。
[0047] 圖15 :實(shí)施例2喂食霞多麗種子乙醇提取物（40EtChrSdEx)、霞多麗種子甲醇提 取物（MeChrSdEx)、霞多麗種子乙醇提取物殘余物（40EtChrSdRes)、霞多麗種子甲醇提取 物殘余物（MeChrSdRes)、10 %、7 % 和 3 % 飲食重量（分別為 10 % ChrSd，7 % ChrSd 和 3 % ChrSd)的霞多麗種子粉、10%飲食重量的白雷司令（White Riesling)種子粉（10% WRSd) 和10%飲食重量的長(zhǎng)相思（Sauvignon Blanc)種子粉（10% SBSd)的動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的 肝、附睪脂肪（EA)和腹膜后脂肪（RA)重量。
[0048] 圖16 :實(shí)施例3的相對(duì)脂肪基因表達(dá)。
[0049] 圖17 :實(shí)施例3的相對(duì)肝基因表達(dá)。
[0050] 圖18 :實(shí)施例4喂食補(bǔ)充霞多麗種子粉（CharSdFl)、Vitacost?葡萄種子提取物 (VCl 和 VC7)、Mega Natural? BP 葡萄種子提取物（BPl、BP7)，Leucoselect?:葡萄種子提 取物（L1、L7)、兒茶素（Cat)和表兒茶素（EpiCat)的飲食的動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的總血漿脂 蛋白膽固醇水平。
[0051] 圖19 :實(shí)施例4喂食補(bǔ)充霞多麗種子粉（CharSdFl)、Vitac〇St?:葡萄種子提取物 (VCl 和 VC7)、Mega Natural? BP 葡萄種子提取物（BP1、BP7)，Leucoselect? 葡萄種子提 取物（L1、L7)、兒茶素（Cat)和表兒茶素（EpiCat)的飲食的動(dòng)物在四周結(jié)束時(shí)的VLDULDL 和HDL膽固醇水平。
[0052] 圖20 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ)充 霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的總糞便細(xì)菌水平。
[0053] 圖21 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食， 補(bǔ)充霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的腸球菌屬 (Enterococcus spp.)水平。
[0054] 圖22 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ) 充霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的雙歧桿菌屬 (Bifidobacterium spp.)水平。
[0055] 圖23 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ) 充霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的乳酸桿菌屬 (Lactobacillus spp.)水平。
[0056] 圖24 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ)充 霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的梭菌IV群細(xì)菌水 平。
[0057] 圖25 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ) 充霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的脆弱擬桿菌群 (group)細(xì)菌水平。
[0058] 圖26 :實(shí)施例5喂食對(duì)照飲食，補(bǔ)充解百衲種子粉（RGF+HF)的高脂肪飲食，補(bǔ)充 霞多麗種子粉（WGF+HF)的高脂肪飲食和高脂肪對(duì)照飲食（HF)的動(dòng)物的腸桿菌水平。 4.【具體實(shí)施方式】
[0059] 4. 1.霞多麗種子產(chǎn)品
[0060] 本發(fā)明涉及霞多麗種子產(chǎn)品和使用霞多麗種子產(chǎn)品治療或預(yù)防肥胖癥和其它病 癥的方法。優(yōu)選所述霞多麗種子產(chǎn)品由生長(zhǎng)于溫克勒（Winkler)地區(qū)氣候I-IV型的葡萄 生產(chǎn)（Jones et al，2010，Am.J.Enol.Vitic.61 (3):313-326)。在一些實(shí)施方式中，所述 霞多麗種子產(chǎn)品由生長(zhǎng)于北加利福利亞沿海山谷，例如，納帕（Napa)山谷和/或索諾瑪 (Sonoma)山谷的葡萄生產(chǎn)。在另一實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品由生長(zhǎng)于其它更熱的 內(nèi)陸山谷的葡萄園，例如，溫克勒（Winkler)地區(qū)氣候IV-V型的葡萄生產(chǎn)。在優(yōu)選的實(shí)施 方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品來自生長(zhǎng)于沿海地區(qū)中的葡萄。
[0061] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述霞多_種子產(chǎn)品含有霞多_種子的脫脂部分，如霞多_ 果渣粗粉（粗磨粉，meal)、霞多麗果渣粉（精粉，flour)、霞多麗種子粗粉，或最優(yōu)選，霞多 麗種子粉（精粉、精磨粉，flour)。在一些實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品包含通過有機(jī) 溶劑不可提取的，例如，通過乙醇和/或甲醇不可提取的脫脂霞多麗種子的內(nèi)容物（內(nèi)含 物）。在某些方面中，所述霞多_種子產(chǎn)品由表兒茶素含量至少600mg表兒茶素 /IOOg種子 或表兒茶素含量至少700mg表兒茶素 /IOOg種子的種子制備。在【具體實(shí)施方式】中，所述表 兒茶素含量范圍為600-800mg/100g種子或650-800mg/100g種子。
[0062] 正如本文所用，"霞多麗種子粗粉"是經(jīng)研磨的整個(gè)種子而"霞多麗種子粉（霞多 麗種子精粉）"是在提取油后的研磨種子。霞多麗種子粉可以使用本領(lǐng)域內(nèi)已知從種子提 取油產(chǎn)生脫脂種子粉的"冷壓"、"熱壓"或溶劑提取方法而獲得的。粗粉或粉可以通過使用 適合干燥食品產(chǎn)品的常規(guī)干燥技術(shù)進(jìn)行干燥直至（獲得）所需水分含量。
[0063] 所述干燥的粗粉或粉進(jìn)一步在環(huán)境溫度條件下研磨而形成具有自由流動(dòng)粒子的 霞多麗種子粉末。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述自由流動(dòng)粒子可以為不超過841μπι(20目）的 尺寸到不超過37μπι(400目）的尺寸。在某些實(shí)施方式中，所述尺寸不超過20目、40目、60 目、80目、100目、200目、300目、或400目。
[0064] 在一種示例性方法中，霞多麗種子粉通過分離和干燥霞多麗葡萄種子，例如，由霞 多麗葡萄壓榨成葡萄果汁（例如，制成葡萄酒）之后產(chǎn)生的果渣而制成。所述葡萄種子能 夠"冷榨"而將其脫脂（生產(chǎn)作為副產(chǎn)品的霞多麗種子油）。葡萄種子粉由排油后的壓榨餅 進(jìn)行研磨。在一個(gè)實(shí)施方式，在葡萄榨汁后所述種子從葡萄皮中分離出來，經(jīng)過清洗，機(jī)械 脫脂，精細(xì)研磨并篩分而產(chǎn)生100目（150 ym)的可流動(dòng)粉末。
[0065] 霞多麗種子粉也能夠從Apres Vin(Yakima，華盛頓），Botanical Oil Innovations (Spooner，威斯康星州）或 Fruitsmart，Inc. (Grandview，華盛頓）商購。所 述FruitSmart霞多麗種子粉是85目可流動(dòng)的粉末，但可以進(jìn)一步研磨和篩分而產(chǎn)生具有 較小顆粒尺寸的粉。
[0066] 在一個(gè)實(shí)施方式中，皮、莖和葉（果渣的其余部分）在壓榨之前從種子中去除。除 去皮、莖和葉容許進(jìn)行最佳的榨油。
[0067] "霞多麗種子提取物"采用合適的溶劑，如乙醇或甲醇，通過溶劑提取霞多麗種子 而制成。例如，"40EtChrSdEx"是用40%的乙醇溶液作為提取溶劑制成的霞多麗種子提取 物。所述提取方法，除了含有所述溶劑可溶性組分的提取物之外，還會(huì)產(chǎn)生不溶性固體的殘 余物。
[0068] 4. 2.有效量
[0069] 在本發(fā)明所述方法的一個(gè)實(shí)施方式中，霞多麗種子粉作為日飲食的百分比消耗的 量以質(zhì)量計(jì)為至少3 %、至少5 %、或至少8 %。優(yōu)選5 % -10 %，更優(yōu)選7 %，而在一些實(shí)施 方式中10%以質(zhì)量計(jì)的日飲食是霞多麗種子粉。
[0070] 在本發(fā)明所述方法的一個(gè)實(shí)施方式中，霞多麗種子粉作為日飲食的百分比消耗的 量為至少3%，至少5%，或至少8%的總消耗的熱量（卡路里）。優(yōu)選5% -10%，更優(yōu)選 7 %，而在一些實(shí)施方式中10 %的所述日熱量來自霞多_種子粉。
[0071] 在另一實(shí)施方式中，日消耗的霞多麗種子粉的量為至少10g，至少15g，至少20g， 至少25g，至少30g，至少35g，至少40g，或至少45g。優(yōu)選，每日消耗50g霞多麗種子粉。
[0072] 在另一實(shí)施方式中，每日消耗的霞多麗種子粉的量為至少1湯匙，至少2湯匙，至 少3湯匙，至少4湯匙，或至少5湯匙。
[0073] 在另一實(shí)施方式中，日消耗的霞多麗種子粉的量基于霞多麗種子粉重量：體重為 至少0. 2g/kg，至少0. 5g/kg，或至少0. 7g/kg。優(yōu)選每天消耗至少Ig霞多麗種子粉/kg體 重。
[0074] 在某些方面中，給予霞多麗種子粉的量有效調(diào)節(jié)一種或多種參與脂肪，膽固醇，和 /或膽汁代謝的基因的表達(dá)。在【具體實(shí)施方式】中，所述量有效提高肝組織中ACOXl的表達(dá)， 提高肝組織中CYP51的表達(dá)，提高肝組織中CYP7al的表達(dá)，降低肝組織中S⑶1的表達(dá)，和 /或降低肝組織中ABCG5的表達(dá)，例如，至少10%，至少20%，至少50%，或至少100%。
[0075] 在本發(fā)明的方法中霞多麗種子粉能夠用霞多麗果渣粗粉、果渣粉、皮粉、種子提取 物或種子粗粉代替。霞多麗果渣粗粉、果渣粉、皮粉、種子提取物或種子粗粉每日需要消耗 而達(dá)到給定量霞多麗種子粉相同益處的量能夠由本領(lǐng)域內(nèi)那些技術(shù)人員容易地確定。例 如，預(yù)期受試者將需要消耗大約三倍霞多麗皮粉才能達(dá)到給定量的霞多麗種子粉的相同益 處。
[0076] 在某些實(shí)施方式中，所述霞多_種子產(chǎn)品，例如，霞多_種子粉，服用至少一周兩 次，至少一周三次，或隔天一次。優(yōu)選所述霞多麗種子產(chǎn)品引入所述日飲食中。
[0077] 所述霞多麗種子產(chǎn)品，例如，霞多麗種子粉服用的時(shí)間量足以治療和/或預(yù)防順 從于如本文所述的霞多麗種子產(chǎn)品的治療和/或預(yù)防的病癥。所述霞多麗種子產(chǎn)品能夠服 用至少一周、至少2周、至少3周、至少一個(gè)月、至少2個(gè)月、至少3個(gè)月、至少6個(gè)月、至少 一年，或無限期（indefinitely)服用。
[0078] 在這些方法的某些實(shí)施方式中，向所述哺乳動(dòng)物給予不是霞多麗種子產(chǎn)品的第二 葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品。在某些方面中，霞多麗種子產(chǎn)品和第二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品的 組合提供的療效或健康益處超過了單獨(dú)給予霞多麗種子產(chǎn)品的效果。
[0079] 在其它實(shí)施方式中，霞多麗種子產(chǎn)品的量和第二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品的量經(jīng)選 擇而使之所獲得的效果至少與通過單獨(dú)給予給定量的霞多麗種子產(chǎn)品所達(dá)到的效果相同。
[0080] 4. 3.霞多麗種子組合物
[0081] 所述霞多麗種子產(chǎn)品能夠包含于各種食品產(chǎn)品，如營(yíng)養(yǎng)飲料（例如，營(yíng)養(yǎng)奶昔 (nutritional shakes))，烘焙食品（例如，小餅干，布朗尼，蛋糕，面包，餅干，薄脆餅干）， 布丁，糖果（如，蜜餞），點(diǎn)心食品（例如，松餅），冰淇淋，冰凍甜點(diǎn)和新奇品（novelties)， 或非烘焙擠出食品產(chǎn)品如棒，包括健康或能量棒。所述霞多麗種子產(chǎn)品也能夠作為營(yíng)養(yǎng)補(bǔ) 充劑，或以片劑形式或作為適合用作營(yíng)養(yǎng)食品添加劑的粉末提供。
[0082] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品能夠與其它干食品材料共混而用于制備 富含霞多麗種子產(chǎn)品的食品產(chǎn)品。干食品材料包括，例如，干的含淀粉材料，干的含蛋白材 料或其組合。合適的含淀粉材料可以衍生自，例如，水稻，玉米，大豆，向日葵，油菜（蕓苔， canola)，小麥，燕麥，黑麥，馬鈴薯，或其任何組合。合適的干的含蛋白材料可源自例如，肉， 奶，魚或其任意組合。對(duì)于烘焙應(yīng)用，所述霞多麗種子產(chǎn)品適合使用的用量范圍為3%? 5%的干食品材料（例如，白色或全麥粉）。所述干食品還可以可選地包含另外的成分如維 生素，礦物質(zhì)強(qiáng)化劑，鹽，著色劑，調(diào)味劑，增味劑或甜味劑。
[0083] 霞多_種子廣品可引入到飲料，加工肉制品，冷凍甜品，糖果廣品，乳品型廣品， 醬組合物和谷物產(chǎn)品中。飲料產(chǎn)品包括，例如，冰沙（smoothies)，嬰兒配方制品，果汁飲 料，酸奶飲料，咖啡飲料，啤酒，干飲料混合物，茶融合飲料（tea fusion beverages)，運(yùn)動(dòng) 飲料，醬油（soy liquor)，汽水，軟冰（slushes)和冷凍飲料混合物。肉類產(chǎn)品包括，例 如，研磨雞肉產(chǎn)品，加水火腿產(chǎn)品，大紅腸，熱狗，法蘭克（franks)，雞肉餅，雞塊（chicken nugget)，牛肉餅，魚肉餅，魚糜，咸肉，午餐肉，三明治焰料，熟肉制品（deli meat)，肉干類 食品，肉丸，肉干（jerky)，牛肉條（fajitas)，培根片（bacon bits)，注射肉和德式香腸。 糖果產(chǎn)品包括，例如，巧克力，慕斯，巧克力涂層，酸奶涂層，可可粉，糖霜（frosting)，奶糖， 能量棒和塊狀糖（candy bar)。冷凍甜品類產(chǎn)品包括，例如，冰淇淋，麥芽糖（malt)，奶昔 (shakes)，冰棍，冰糕和冷凍布丁產(chǎn)品。乳品型產(chǎn)品包括，例如，酸奶，奶酪，冰淇淋，噴射奶 油（whipped topping)，咖啡稀奶油，奶油奶酪，酸奶，白干酪（cottage cheese)，黃油，蛋 黃醬（mayonnaise)，牛奶基調(diào)味醬，乳基沙拉醬和干酪凝乳。谷物產(chǎn)品包括，例如，面包，松 餅，百吉餅，面條，餅干，煎餅，華夫餅，甜餅干，粗粒麥粉，炸馬鈴薯?xiàng)l，玉米餅，蛋糕，薄脆餅 干，早餐谷物（包括即食的和烹熟谷物），椒鹽脆餅干，干面包混合物，梅爾巴吐司，棒形面 包，油炸面包，焰料，能量棒，甜甜圈，蛋糕，爆米花，玉米卷，油炸裹層，面糊，裹粉，酥皮，巧 克力糕餅，餡餅，膨化豆餅，可麗餅，牛角面包，粉和玉米粥。醬料組合物包括沙拉醬，堅(jiān)果黃 油涂抹醬（例如，花生黃油涂抹醬），鹵汁，醬汁，薩爾薩斯，果醬，奶酪醬，蛋黃醬，調(diào)味醬， 豆腐乳，蘸醬，水果糖漿和槭糖漿（maple syrup)。醬組合物還可以包括輔助維持組合物均 一性的懸浮助劑（懸浮劑）。合適的懸浮助劑的實(shí)例包括多糖，如淀粉，纖維素（例如，微 晶纖維素）和角叉菜膠，以及聚糖醛酸，如果膠。明膠是另一種懸浮助劑實(shí)例，它也可用于 飲料組合物。根據(jù)本發(fā)明使用預(yù)混物制備的額外補(bǔ)充食品產(chǎn)品的實(shí)例包括豆腐，配制大豆 精，粉狀蛋白補(bǔ)充劑，果汁可混合蛋白補(bǔ)充劑，發(fā)泡劑，混池劑（clouding agent)，嬰兒食 品，素食球，肉類似物，蛋產(chǎn)品（例如，炒雞蛋），湯，雜膾（chowder)，肉湯，奶替代品，豆奶 產(chǎn)品，辣椒，香料混合物，糖灑，豆豉（soy whiz)，沙拉澆料，可食用膜，可食用棒，口香糖，培 根片，蔬菜卷，比薩餅皮阻隔層（pizza crust barriers)，大豆焰餅，無氣合成豆腐，豆制品 幫手（soy helper)，大豆棉花糖果（soy cotton candy)，水果丁，比薩卷，土豆泥，紡大豆 蛋白纖維，豆卷，擠出小吃（extruded snack)，調(diào)味品，乳液，油炸食物（fries)，明膠甜點(diǎn) 產(chǎn)品，維生素補(bǔ)充劑，營(yíng)養(yǎng)棒，干餅，面包或松餅混合物和可微波瞬干混合物（microwavabIe instant dry mixes)〇
[0084] 在一個(gè)具體方面中，所述霞多麗種子產(chǎn)品可以作為能量棒（適合生理活動(dòng)消耗） 或代餐棒。所述能量棒或代餐棒還能夠含有一種或更多的維生素，礦物質(zhì)，食品補(bǔ)充劑，植 物制品（botanical)，或植物或草本提取物或本領(lǐng)域內(nèi)已知的或能量棒或代餐棒中所用的 成分，如果汁或提取物，草藥（herb)或草本香料（herb flavor)，天然或人工香料，維生素， 礦物質(zhì)，含有抗氧化劑的提取物，輔酶Q，ω -3脂肪酸，瓜拉納，咖啡因，可可堿，麥芽糖糊精 和蛋白。在一些實(shí)施方式中，所述能量棒或代餐棒能夠具有分別為40/30/30的碳水化合物 /蛋白/脂肪的總可用能量水平。
[0085] 所述能量和代餐棒能夠進(jìn)一步補(bǔ)充用于運(yùn)動(dòng)能力的提高，精神能量或認(rèn)知重 點(diǎn)強(qiáng)化，和/或營(yíng)養(yǎng)益處。示例性補(bǔ)充劑包括，但不限于長(zhǎng)春西汀，長(zhǎng)春胺銀杏葉精華 (Vincamine Ginkgo Biloba)，L-精氨酸，乙酰左旋肉堿，野甘菊（黑葉母菊），DMAE(二甲氨 基乙醇），DMAE酒石酸氫鹽，乙酸對(duì)氯苯酚酯，維生素 B復(fù)合劑，人參，5HTP (5-羥色氨酸）， L-茶氨酸，雄烯二酮，L-谷氨酰胺，L-酪氨酸，L-甘氨酸；L-賴氨酸；乳清蛋白；DHEA (去氫 表雄酮）。
[0086] 在另一個(gè)方面中，所述霞多麗種子產(chǎn)品可以提供于或添加到液體或粉末嬰兒配方 制品中。所述嬰兒配方制品能夠含有蛋白源，脂肪源，和/或碳水化合物源。所述蛋白源能 夠是，例如，干的或液體牛奶，乳清和/或酪蛋白，或大豆蛋白。所述脂肪源能夠是，例如，乳 品脂肪和/或一種或多種植物油。所述碳水化合物源能夠是，例如，乳糖，葡萄糖或蔗糖。所 述嬰兒配方制品能夠另外含有一種或多種維生素，和/或一種或多種礦物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施 方式中，所述霞多麗種子產(chǎn)品可以添加到市售的液體或粉末嬰兒配方制品中。
[0087] 所述霞多麗種子組合物也能夠含有一個(gè)量的不是霞多麗種子產(chǎn)品的第二葡萄種 子或葡萄皮產(chǎn)品。在一些實(shí)施方式中，一個(gè)量的所述霞多_種子產(chǎn)品在所述霞多_種子組 合物中用一個(gè)量的第二葡萄種子和葡萄皮產(chǎn)品替代。需要添加到所述霞多麗種子組合物中 以獲得與給定量的霞多麗種子產(chǎn)品相同益處的第二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品的量能夠很容 易地由本領(lǐng)域的技術(shù)人員確定。
[0088] 4. 4.霞多麗種子粉組合物的治療用涂
[0089] 根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的組合物，包含霞多麗種子粉組合物，向受試者，優(yōu)選向人類 受試者給予，在所述受試者中脂質(zhì)代謝增加是有用的或是所希望的。所述受試者可能需要 治療或預(yù)防心血管病，血脂異常癥，葡萄糖代謝障礙，阿爾茨海默氏病，X綜合征，PPAR有關(guān) 的障礙癥，敗血癥，血栓性功能障礙癥（thrombotic disorder)，肥胖癥，胰腺炎，高血壓，腎 病，癌癥，炎癥，或陽瘺。
[0090] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，本發(fā)明的組合物，包含霞多麗種子粉組合物，向受試 者，優(yōu)選向人類受試者給予，在所述受試者中所述腸道生物群落的調(diào)節(jié)是有用的或是期望 的。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者可能需要治療或預(yù)防，例如，乳酸性酸中毒，結(jié)腸炎，或 結(jié)腸直腸癌。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者是遺傳性易患結(jié)腸癌的。
[0091] 在一個(gè)實(shí)施方式中，"治療"是指改善一種疾病或病癥，或其至少一種可辨別的癥 狀。在另一實(shí)施方式中，"治療"是指改善至少一種并不一定由主體可辨別的可測(cè)量生理參 數(shù)。在又一個(gè)實(shí)施方式，"治療"是指抑制疾病或病癥的進(jìn)展，無論是在身體上，例如，可辨 別癥狀的穩(wěn)定，在生理上，例如，生理參數(shù)的穩(wěn)定，或兩者兼而有之。在還有的一個(gè)實(shí)施方式 中，"治療"是指延緩疾病或病癥的發(fā)作。
[0092] 在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物給予受試者，優(yōu)選人類，作為對(duì)這些疾病的 預(yù)防性措施。正如本文所用，"預(yù)防"或"防止"是指降低獲得給定疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。在 一個(gè)優(yōu)選的方面中，本發(fā)明組合物作為預(yù)防措施給予受試者，優(yōu)選是對(duì)心血管病，血脂異常 癥，異常脂蛋白血癥，葡萄糖代謝障礙癥，阿爾茨海默氏病，X綜合征，PPAR有關(guān)的功能障 礙癥，敗血癥，血栓性功能障礙癥，肥胖癥，胰腺炎，高血壓，腎病，癌癥，炎癥，或陽瘺具有遺 傳易感性的人類。這種遺傳傾向的實(shí)例包括但不限于載脂蛋白E的E4等位基因，其會(huì)增 加阿爾茨海默病的可能性；脂蛋白脂酶基因編碼區(qū)域或啟動(dòng)子中功能缺失或無效突變（例 如，在導(dǎo)致替代D9N和N291S的編碼區(qū)內(nèi)的突變；回顧會(huì)增加心血管病，血脂異常癥和異 常脂蛋白血癥風(fēng)險(xiǎn)的脂蛋白脂酶基因中的基因突變，參見Hayden and Ma，1992，Mol. Cell Biochem. 113:171-176);和家族性混合高血脂癥和家族性高膽固醇血癥。
[0093] 在所述實(shí)施方式的另一種優(yōu)選模式中，本發(fā)明的組合物作為預(yù)防措施給予具有對(duì) 心血管病，血脂異常癥，異常脂蛋白血癥，葡萄糖代謝紊亂，阿爾茨海默氏病，X綜合征，PPAR 有關(guān)的功能障礙癥，敗血癥，血栓性功能障礙癥，肥胖癥，胰腺炎，高血壓，腎病，癌癥，炎癥 或陽瘺的非遺傳易感性的受試者。這種非遺傳易感性的實(shí)例包括但不限于：心臟搭橋手術(shù) 和經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)（percutaneous transluminal coronary angioplasty)，這 往往會(huì)導(dǎo)致再狹窄，動(dòng)脈粥樣硬化癥的加速形式；女性中的糖尿病，這往往會(huì)導(dǎo)致多囊卵巢 癥；和心血管病，這往往會(huì)導(dǎo)致陽瘺。
[0094] 在某些實(shí)施方式中，所述哺乳動(dòng)物消耗高脂肪飲食。在一個(gè)實(shí)施方式中，高脂肪飲 食是其中至少30%，35 %或40 %的總?cè)諢崃揩@自脂肪的飲食。
[0095] 在某些實(shí)施方式中，非霞多麗種子粉的第二葡萄種子或葡萄皮產(chǎn)品向所述哺乳動(dòng) 物給予而提供超過單獨(dú)給予霞多麗種子粉效果的效果。
[0096] 4. 4. 1.血臘異常癥
[0097] 本發(fā)明提供了用于治療或預(yù)防血脂異常癥的方法，包括向受試者給予治療有效量 的霞多麗種子粉組合物。
[0098] 本文所用的術(shù)語"血脂異常癥"是指導(dǎo)致或表現(xiàn)異常水平的循環(huán)脂質(zhì)的障礙癥。 血液中脂質(zhì)水平過高到一定程度，本發(fā)明的組合物給予受試者而恢復(fù)正常水平。脂質(zhì)的正 常水平報(bào)告于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的醫(yī)學(xué)論著中。例如，LDL，HDL，游離甘油三酯和其它與 脂質(zhì)代謝相關(guān)的參數(shù)的推薦血液水平都能夠在美國(guó)心臟協(xié)會(huì)的網(wǎng)站和國(guó)家心臟、肺和血液 研宄所的國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃的網(wǎng)站找到。在目前，HDL膽固醇在血液中的推薦水平高于 35mg/dL ;LDL膽固醇在血液中的推薦水平低于130mg/dL ;血液中推薦的LDL = HDL膽固醇比 率低于5:1，理想地3. 5:1 ;而游離甘油三酯在血液中的推薦水平小于200mg/dL。
[0099] 本發(fā)明的霞多麗種子粉組合物適用于治療或預(yù)防的血脂異常癥包括但不限于高 血脂癥和低血水平高密脂蛋白（HDL)膽固醇。在某些實(shí)施方式中，通過本發(fā)明的化合物預(yù) 防或治療的尚血脂癥是家族性尚膽固醇血癥；家族性混合尚血脂癥；降低或缺乏性脂蛋白 脂酶水平或活性，包括由脂蛋白脂酶突變所致的降低或缺乏；高甘油三酯血癥；高膽固醇 血癥；高血水平酮體（例如β - O H 丁酸）；高血水平Lp (a)膽固醇；高血水平低密脂蛋白 (LDL)膽固醇；高血水平極低密度脂蛋白（VLDL)膽固醇和高血水平非酯化脂肪酸。
[0100] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了改變受試者中脂質(zhì)代謝，例如，降低受試者血液中LDL，降低 所述受試者血液中游離甘油三酯，增加受試者血液中HDL/LDL比率，以及抑制皂化的和/或 非皂化脂肪酸合成的方法，所述方法包括向所述受試者給予有效改變脂質(zhì)代謝的量的霞多 麗種子粉組合物。
[0101] 4. 4. 2.心血管病
[0102] 本發(fā)明提供了用于治療或預(yù)防心血管病的方法，包括向受試者給予治療有效量的 霞多麗種子粉組合物。本文所用的術(shù)語"心血管病"是指心臟和循環(huán)系統(tǒng)的疾病。這些疾 病往往與異常脂蛋白血癥和/或血脂異常癥有關(guān)。本發(fā)明組合物適用于預(yù)防或治療的心血 管病包括但不限于動(dòng)脈硬化癥；動(dòng)脈粥樣硬化癥；中風(fēng)；缺血；內(nèi)皮功能障礙癥，特別是那 些影響血管彈性的功能障礙；外周血管疾?。还谛牟。恍募」Ｈ?；腦梗塞和再狹窄。
[0103] 4. 4. 3.異常脂蛋白血癥
[0104] 本發(fā)明提供了用于治療或預(yù)防異常脂蛋白血癥的方法，包括向受試者給予治療有 效量的霞多麗種子粉組合物。
[0105] 本文所用的術(shù)語"異常脂蛋白血癥"是指導(dǎo)致或表現(xiàn)為異常水平的血循環(huán)脂蛋白 的障礙癥。血液中脂蛋白水平過高至一定程度，本發(fā)明的組合物給予受試者而恢復(fù)正常水 平。相反，血液中脂蛋白水平過低至一定程度，本發(fā)明的組合物給予受試者而恢復(fù)正常水 平。脂蛋白的正常水平報(bào)告于本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員已知的醫(yī)學(xué)論著中。
[0106] 本發(fā)明組合物適用于預(yù)防或治療的異常脂蛋白血癥包括但不限于高血水平LDL ; 高血水平載脂蛋白B (apo B);高血水平Lp (a);高血水平apo (a);高血水平VLDL;低血水平 HDL ;降低或缺乏性脂蛋白脂酶水平或活性，包括由脂蛋白脂酶突變所致的降低或缺乏；低 α脂蛋白血癥；與糖尿病相關(guān)的脂蛋白異常；與肥胖癥相關(guān)的脂蛋白異常；與阿爾茲海默 癥相關(guān)的脂蛋白異常；和家族性混合尚血脂癥。
[0107] 本發(fā)明還提供了降低受試者血液中apo C-II水平；降低受試者血液apo C-III水 平；提升HDL相關(guān)蛋白的水平，包括但不限于受試者血液的apo A-I，apo A-Il，apo A-IV和 apo E ;提高受試者血液的apo E的水平和促進(jìn)從受試者血液中清除甘油三酯的方法，所述 方法包括向所述受試者給予分別有效產(chǎn)生所述降低，提高或促進(jìn)的霞多麗種子粉組合物。
[0108] 4. 4. 4.糖代謝障礙癥
[0109] 本發(fā)明提供了治療或預(yù)防糖代謝障礙癥的方法，包括向受試者給予治療有效量的 霞多麗種子粉組合物。本文所用的術(shù)語"糖代謝障礙癥"是指導(dǎo)致或表現(xiàn)為異常葡萄糖貯 存和/或利用的病癥。葡萄糖代謝標(biāo)志（即，血胰島素，血糖）過高到一定程度，本發(fā)明的 組合物給予受試者而恢復(fù)正常水平。相反，葡萄糖代謝的標(biāo)志過低至一定程度，本發(fā)明的組 合物給予受試者而恢復(fù)正常水平。葡萄糖代謝的正常標(biāo)志報(bào)道于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的醫(yī) 學(xué)論著中。
[0110] 本發(fā)明組合物適用于預(yù)防或治療的糖代謝障礙癥包括但不限于受損的葡萄糖耐 受性；胰島素耐受性；胰島素耐受性相關(guān)的乳癌，結(jié)腸癌或前列腺癌；糖尿病，包括但不限 于非胰島素依賴型糖尿?。∟IDDM)，胰島素依賴型糖尿?。↖DDM)，妊娠期糖尿?。℅DM)和青 春晚期糖尿病（MODY);胰腺炎；高血壓；多囊卵巢癥；和高水平血胰島素和/或高血糖。
[0111] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了改變受試者中糖代謝，例如，提高受試者的胰島素敏感性和/ 或氧耗的方法，所述方法包括向所述受試者給予有效改變糖代謝的量的霞多麗種子粉組合 物。
[0112] 4. 4. 5.腸道細(xì)菌的調(diào)節(jié)
[0113] 根據(jù)所述細(xì)菌群落占優(yōu)勢(shì)的物種將人腸道生物群落分成三類微生物分型。這些微 生物分型是擬桿菌，瘤胃球菌和普雷沃氏菌。所述擬桿菌微生物分型據(jù)發(fā)現(xiàn)能夠制備幾種 維生素，包括C和H，而同時(shí)所述普雷沃氏菌微生物分型據(jù)發(fā)現(xiàn)能夠制備葉酸和維生素 Bl。
[0114] 本發(fā)明提供了調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌水平的方法，包括向受試者給予有效調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌水 平的量的霞多麗種子粉組合物。正如本文所用，"調(diào)節(jié)腸道細(xì)菌水平"是指（i)腸道細(xì)菌水 平總量降低，和/或（ii)總腸道細(xì)菌亞群（subset)的細(xì)菌水平增加或降低。總腸道細(xì)菌 亞群能夠是單個(gè)物種，屬，科，目，綱，門，或以上不只一種的組合。
[0115] 例如，調(diào)節(jié)通過剖腹產(chǎn)出生的嬰兒中腸道菌群水平，可能是合乎需要的，因?yàn)?所述腸道的細(xì)菌定植在剖腹產(chǎn)的嬰兒中相比于陰道分娩的嬰兒會(huì)延遲。腸道菌群的 差異可能在出生后持續(xù)長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月之久（Grolund，M.et al，Journal of Pediatric GastroenterolOgy&Nutrition，（1999)，vol.28(l) :19_25)。例如，通過剖腹產(chǎn)的嬰兒 相比于陰道分娩出生的嬰兒在六月齡時(shí)會(huì)定植顯著較少的脆弱擬桿菌群的細(xì)菌。出 生后七天，剖腹產(chǎn)的嬰兒相比于陰道分娩出生的嬰兒會(huì)具有作為總腸道細(xì)菌百分?jǐn)?shù)的 更高水平的腸桿菌細(xì)菌梓檬酸桿菌和大腸桿菌（Pandey，P. et al.，J. Biosci. (2012) vol. 37(6) :989-998)。霞多麗種子粉組合物能夠用于提高脆弱擬桿菌群細(xì)菌和梭菌的水 平，并例如降低剖腹產(chǎn)嬰兒中腸桿菌科細(xì)菌的水平而促進(jìn)腸道生物群落的形成，其更緊密 類似于陰道分娩出生嬰兒的腸道微生物群落。
[0116] 霞多麗種子粉組合物還能夠用于通過降低產(chǎn)乳酸細(xì)菌如乳酸桿菌在腸道中的量 而治療或預(yù)防乳酸性酸中毒。霞多麗種子粉組合物也能夠用于通過提高梭菌在腸道中的水 平而促進(jìn)結(jié)腸的健康。梭菌細(xì)菌產(chǎn)生丁酸酯，這是結(jié)腸粘膜中優(yōu)選的能量源。丁酸酯防護(hù) 結(jié)腸炎和結(jié)腸直腸癌，而對(duì)于結(jié)腸上皮細(xì)胞的正常發(fā)育是重要的。Shen，J. et al. ,Applied and Environmental Microbiology，vol. 72:5232-5238(2006)〇
[0117] 霞多麗種子粉組合物也能夠用于降低腸道中雙歧桿菌屬的水平。然而，如果降 低雙歧桿菌屬的水平是不希望的，而給予霞多麗種子粉的另一治療益處是所期望之時(shí)，則 含一種或多種雙歧桿菌菌種的益生菌補(bǔ)充劑可以給予所述受試者而提高所述受試者腸道 中雙歧桿菌菌種的水平?？梢越o予益生菌補(bǔ)充劑中的雙歧桿菌菌種的實(shí)例包括雙歧桿菌 屬雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum)，短雙歧桿菌（Bifidobacterium breve)，以及 長(zhǎng)雙歧桿菌（Bifidobacterium longum)。所述益生菌補(bǔ)充劑能夠包括其它細(xì)菌菌種，例 如，一種或多種嗜酸乳桿菌（Lactobacillus acidophilus)，植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)，唾液乳酸桿菌（Lactobacillus salivarious)，干酪乳桿菌（Lactobacillus casei)，副干酷乳酸桿菌（Lactobacillus paracasei)，鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus)和嗜熱鏈球菌（Streptococcus thermophilus) 〇
[0118] 在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者被確定為具有屬于擬桿菌，瘤胃球菌，或普雷沃氏 菌的微生物分型。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者具有擬桿菌微生物分型。在一個(gè)實(shí)施方 式中，所述受試者具有瘤胃球菌微生物分型。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者具有普雷沃氏 菌微生物分型。
[0119] 4. 5.霞多麗種子提取物組合物的治療用涂
[0120] 根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的組合物，包含霞多麗種子提取物組合物，給予受試者，優(yōu)選 人類受試者，對(duì)于第4. 4節(jié)中所述的每一治療用途。霞多麗種子提取物具有所述霞多麗種 子粉類似的生物效果（數(shù)據(jù)未示出）。為了實(shí)現(xiàn)堪比使用一定量的霞多麗種子粉獲得的益 處，所給予的霞多麗種子提取物的用量應(yīng)該是提供所述霞多麗種子粉量的2-5倍兒茶素水 平的量。為獲得與給定量的霞多麗種子粉相同益處所需要日消耗的霞多麗種子提取物的具 體量，能夠很容易地由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。
[0121] 5.實(shí)施例1 :霞多麗、長(zhǎng)相思（SAUVIGNON BLANC)和白雷司令（WHITE RIESLING) 產(chǎn)品健康益處的比較
[0122] 5. 1.材料&方法
[0123] 5. I. 1.倉鼠和飲畬
[0124] 雄性金色敘利亞倉鼠（?80g，LVG品系，Charles River)進(jìn)行馴化，并在實(shí)驗(yàn)飲 食開始之前隨意給予水和5001嚙齒動(dòng)物飲食（LabDiet，PMI International ;蛋白，239g/ kg ;脂肪，50g/kg ;非含氮物質(zhì)487g/kg ;粗纖維，51g/kg ;灰分，70g/kg ;能量，17MJ/kg ;和 用于維持健康的足夠量礦物質(zhì)和維生素）長(zhǎng)達(dá)1個(gè)星期。倉鼠稱重并隨機(jī)分為2組，每組 15只倉鼠，并隨機(jī)飼喂含10wt% (按重量計(jì)）的霞多麗，解百衲或西拉葡萄種子粉或葡萄 皮粉或?qū)φ眨嬍常┑母咧臼澄镞_(dá)4個(gè)星期。生產(chǎn)所述粉的葡萄生長(zhǎng)于北加州沿海山 谷。所述粉的組合物如圖1所示。飲食構(gòu)成為18%蛋白能量，43%碳水化合物能量，39%脂 肪能量（其中補(bǔ)充有〇. 1%膽固醇）（圖2)GenOil，是指一種來自未指定的葡萄品種的市售 葡萄種子油。體重每周記錄而食品的攝入每周監(jiān)測(cè)兩次。該研宄由動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì) (Animal Care and Use Committee)(Western Regional Research Center，USDA，Albany， CA)批準(zhǔn)。
[0125] 5.1.2.血漿和組織采集
[0126] 倉鼠禁食12小時(shí)，用異氟燒（菲尼克斯藥典（Phoenix Pharmaceutical))麻醉。 用預(yù)先用EDTA鉀溶液（15% wt :v)沖洗的注射器通過心臟穿刺收集血液并在4°C下以 2000 X g離心30分鐘后分離血漿。收集肝，稱重，并立即冷凍于液氮中用于分析。
[0127] 5. 1. 3.血漿牛物標(biāo)記分析
[0128] 血衆(zhòng)脂蛋白中的膽固醇如先前所述通過尺寸排阻色譜法進(jìn)行測(cè)定（German et al，1996.Nutr Res. 1996 ;16:1239-49)。血漿甘油三酯，總膽固醇，游離膽固醇和葡萄 糖通過使用具有分析試劑盒的羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics/ Hitachi 914Clinical Analyzer) (Roche Diagnostics and Wako Chemicals)的酶比色 分析法進(jìn)行測(cè)定。禁食倉鼠的脂聯(lián)素（B-bridge International)和胰島素（Mercodia) 的血漿濃度使用如前所述的小鼠脂聯(lián)素和超靈敏大鼠胰島素免疫測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定 (Hung et al，2009，J.Diabetes 1:194-206)。禁食倉鼠中的血糖濃度使用 OneTouch Ultrameter(LifeScan)在尾靜脈樣品中測(cè)定。
[0129] 5. 1. 4.肝脂質(zhì)分析
[0130] 凍干的磨碎肝樣品使用加速溶劑提取劑（Dionex)在100°C; 13. 8MPa下用75/25己 燒/2-丙醇提取。所述樣品提取物在羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics) 上分析而使用上述的試劑盒測(cè)定肝甘油三酯，總膽固醇和游離膽固醇。
[0131] 5. 1. 5.糞便陽汁酸和固醇分析
[0132] 在所述倉鼠宰殺之前立即連續(xù)3天收集糞便，并凍干，磨碎和儲(chǔ)存于-20°C 下。膽汁酸和固醇通過HPLC如前所述進(jìn)行測(cè)定（Hong et al，2007, .J Agric Food Chem. 55:9750-7) 〇
[0133] 5. I. 6.統(tǒng)計(jì)分析
[0134] 所有數(shù)據(jù)均表示為平均值土 SE。對(duì)照和不同飲食組之間的差異通過雙尾學(xué)生t檢 驗(yàn)（2-tailed Student's t test)進(jìn)行確定。當(dāng)各組的方差不等時(shí)，差異顯著性采用韋氏 檢驗(yàn)（Welch's test)進(jìn)行確定。計(jì)算出皮爾遜相關(guān)系數(shù)而研宄血漿總膽固醇，血漿脂聯(lián)素 濃度，肝膽固醇和甘油三酯濃度與肝基因表達(dá)的關(guān)系（JMP7統(tǒng)計(jì)程序，SAS軟件研宄所（SAS Institute))。顯著性定義為 Ρ〈0· 05。
[0135] 5. 2.結(jié)果
[0136] 相比于喂食其它飲食的動(dòng)物，飼喂霞多麗種子粉的動(dòng)物體重顯著降低（圖3-4)。 喂食霞多麗種子粉飲食的動(dòng)物在4個(gè)星期后就有約97g的平均體重。飼喂對(duì)照飲食的動(dòng)物 4個(gè)星期后具有約IlOg的平均體重。
[0137] 雖然所述霞多麗種子粉治療動(dòng)物體重低于對(duì)照動(dòng)物，但所述霞多麗種子粉治療動(dòng) 物吃得多（圖5)，無論是依據(jù)體積（圖6)，還是熱量（圖7)。
[0138] 喂食所述霞多麗種子粉飲食的動(dòng)物表現(xiàn)出VLDL(66% )和LDL(50% )膽固醇的最 大降低（圖8)。血糖表現(xiàn)出略有降低（圖9)。
[0139] 霞多麗種子粉降低肝重量和附睪脂肪組織（EA)重量分別為30%和20% (圖10)。
[0140] 這些數(shù)據(jù)表明，霞多麗種子粉在所測(cè)試的葡萄產(chǎn)品中明顯突出。霞多麗皮粉表現(xiàn) 出類似的趨勢(shì)，但益處沒有霞多麗種子粉那樣大。
[0141] 6.實(shí)施例2 :霞多麗、長(zhǎng)相思（SAUVIGNON BLANC)和白雷司令（WHITE RIESLING) 產(chǎn)品的健康益處的比較
[0142] 6. 1.材料&方法
[0143] 6. I. 1.倉鼠和飲畬
[0144] 雄性金色敘利亞倉鼠（?80g，LVG品系，Charles River)進(jìn)行馴化，并在實(shí)驗(yàn)飲 食開始之前隨機(jī)給予水和5001嚙齒動(dòng)物飲食（LabDiet，PMI International ;蛋白，239g/ kg ;脂肪，50g/kg ;非含氮物質(zhì)，487g/kg ;粗纖維，51g/kg ;灰分，70g/kg ;能量，17MJ/kg ;和 用于維持健康的足夠量礦物質(zhì)和維生素）長(zhǎng)達(dá)一個(gè)星期。倉鼠稱重并隨機(jī)分為10組，每組 10只倉鼠，并隨機(jī)飼喂含霞多麗種子乙醇提取物，霞多麗種子甲醇提取物，霞多麗種子乙醇 提取殘余物，霞多麗種子甲醇提取殘余物，10% (按重量計(jì)）霞多麗種子粉，10% (按重量 計(jì)）長(zhǎng)相思（Sauvignon Blanc)種子粉，10% (按重量計(jì)）白雷司令（White Riesling)種 子粉，7% (按重量計(jì)）霞多麗種子粉，3% (按重量計(jì)）霞多麗種子粉的高脂肪飲食，或?qū)?照飲食長(zhǎng)達(dá)4個(gè)星期。生產(chǎn)所述粉的葡萄生長(zhǎng)于北加州沿海山谷。乙醇提取物和提取殘余 物通過"茶提取方法"制備，包括下列步驟：（1)將溶劑（1625mL40%蒸餾水中的乙醇）加入 到325g霞多麗種子粉中并在80°C振動(dòng)2h ; (2)步驟⑴的混合物隨后通過Whatman 1濾 紙進(jìn)行過濾；（3)隨后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上從步驟（2)的濾液中去除乙醇；(4)步驟（3)的溶液 和步驟（2)的濾餅分別進(jìn)行冷凍和凍干而產(chǎn)生霞多麗種子乙醇提取物和霞多麗種子乙醇 提取殘余物。類似的方法用于生產(chǎn)霞多麗種子甲醇提取物和霞多麗種子甲醇提取殘余物。
[0145] 飲食構(gòu)成為18%作為蛋白的能量，43%作為碳水化合物的能量，39%作為脂肪的 能量（其中補(bǔ)充有0.1%膽固醇）。每周記錄體重而食品攝入每周監(jiān)測(cè)兩次。該研宄由動(dòng) 物護(hù)理和使用委員會(huì)（Animal Care and Use Committee) (Western Regional Research Center，USDA，Albany，CA)批準(zhǔn)。
[0146] 6. I. 2.血漿和組織采集
[0147] 倉鼠禁食12小時(shí)，用異氟燒（Phoenix Pharmaceutical)麻醉。采用預(yù)先用EDTA 鉀溶液（15% wt: V)沖洗的注射器通過心臟穿刺收集血液并在4°C下以2000 Xg離心30分 鐘后分離血漿。收集肝，稱重，并立即冷凍于液氮中用于分析。
[0148] 6. 1. 3.血漿牛物標(biāo)記分析
[0149] 血衆(zhòng)脂蛋白中的膽固醇如先前所述通過尺寸排阻色譜法進(jìn)行測(cè)定（German et al，1996. Nutr Res. 1996 ;16:1239-49)。血漿甘油三酯，總膽固醇，游離膽固醇和葡萄糖通 過使用具有分析試劑盒的羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics/Hitachi 914Clinical Analyzer) (Roche Diagnostics and Wako Chemicals)的酶比色分析法進(jìn)行 測(cè)定。禁食倉鼠的脂聯(lián)素（B-bridge International)和胰島素（Mercodia)的血衆(zhòng)濃度 使用如前所述的鼠脂聯(lián)素和超靈敏鼠胰島素免疫測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定（Hung et al，2009， J.Diabetes 1:194-206)。禁食倉鼠中的血糖濃度使用 OneTouch Ultrameter(LifeScan) 在尾靜脈樣品中測(cè)定。
[0150] 6. 1. 4.肝脂質(zhì)分析
[0151] 凍干的磨碎肝樣品使用加速溶劑提取劑（Dionex)在100°C; 13. 8MPa下用75/25己 燒/2-丙醇提取。所述樣品提取物在羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics) 上分析而使用上述的試劑盒測(cè)定肝甘油三酯，總膽固醇和游離膽固醇。
[0152] 6. 1. 5.糞便陽汁酸和固醇分析
[0153] 在所述倉鼠宰殺之前立即連續(xù)3天收集糞便，并凍干，磨碎和儲(chǔ)存于-20°C 下。膽汁酸和固醇通過HPLC如前所述進(jìn)行測(cè)定（Hong et al，2007, .J Agric Food Chem. 55:9750-7) 〇
[0154] 6. I. 6.統(tǒng)計(jì)分析
[0155] 所有數(shù)據(jù)均表示為平均值土SE。對(duì)照和不同飲食組之間的差異通過雙尾學(xué)生t 檢驗(yàn)（2-tailed Student's t test)進(jìn)行確定。當(dāng)各組的方差不等時(shí)，差異顯著性采用韋 氏檢驗(yàn)（Welch's test)進(jìn)行確定。計(jì)算出皮爾遜相關(guān)系數(shù)而研宄血漿總膽固醇，血漿脂聯(lián) 素濃度，肝膽固醇和甘油三酯濃度與肝基因的表達(dá)的關(guān)系（JMP7統(tǒng)計(jì)程序，SAS軟件研宄所 (SAS Institute))。顯著性定義為 Ρ〈0· 05。
[0156] 6. 2.結(jié)果
[0157] 占所述飲食10wt%的霞多麗種子粉表現(xiàn)出實(shí)施例1的可再現(xiàn)結(jié)果。飼喂具有占飲 食10wt%的霞多麗種子粉的飲食的動(dòng)物體重相比于對(duì)照動(dòng)物對(duì)于35%脂肪飲食具有最低 體重增益。
[0158] 霞多_種子粉表現(xiàn)出劑量-響應(yīng)。動(dòng)物喂食10%，7%或3%霞多_種子粉作為其 飲食的一部分長(zhǎng)達(dá)4個(gè)星期。觀察到響應(yīng)逐漸增加，這指示為體重的差異；動(dòng)物吃得越多， 其增加的重量越少（圖12)。
[0159] 霞多麗種子提取物表現(xiàn)出對(duì)體重有一定的影響，但沒有直接加入霞多麗種子粉那 樣顯著。
[0160] 霞多麗種子提取物和霞多麗種子提取物殘余物對(duì)膽固醇水平（圖13)和LDL/HDL 之比（圖14)表現(xiàn)出一定的效果，但并不如直接加入霞多麗種子粉那樣顯著。類似地，所述 霞多麗種子提取物顯示出對(duì)器官重量具有一定作用（圖15)，但并不如直接加入霞多麗種 子粉那樣顯著。
[0161] 其它白色種子粉；例如長(zhǎng)相思（Sauvignon Blanc)或白雷司令（White Riesling) 相比于所述對(duì)照飲食對(duì)體重表現(xiàn)出很少甚至沒有差異。霞多麗與其它四種品種（變種）逐 個(gè)比較，并明顯出色。
[0162] 7.實(shí)施例3 :霞多麗種子粉對(duì)相對(duì)脂肪和肝基閔表汰的影晌
[0163] 7. 1.材料&方法
[0164] 7. I. 1.倉鼠和飲畬
[0165] 雄性金色敘利亞倉鼠（?80g，LVG品系，Charles River)進(jìn)行馴化，并在實(shí)驗(yàn)飲 食開始之前隨機(jī)給予水和5001嚙齒動(dòng)物飲食（LabDiet，PMI International ;蛋白，239g/ kg ;脂肪，50g/kg ;非含氮物質(zhì)，487g/kg ;粗纖維，51g/kg ;灰分，70g/kg ;能量，17MJ/kg ;和 用于維持健康的足夠量礦物質(zhì)和維生素）長(zhǎng)達(dá)一個(gè)星期。倉鼠稱重并隨機(jī)分為2組，并隨 機(jī)飼喂含10% (以重量計(jì)）霞多麗種子粉或?qū)φ诊嬍抽L(zhǎng)達(dá)4個(gè)星期。生產(chǎn)所述粉的葡萄生 長(zhǎng)于北加州沿海山谷。飲食構(gòu)成為18%作為蛋白的能量，43%作為碳水化合物的能量，39% 作為脂肪的能量（其中補(bǔ)充有0.1%膽固醇）。每周記錄體重而食品攝入每周監(jiān)測(cè)兩次。 該研宄由動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)（Animal Care and Use Committee) (Western Regional Research Center，USDA，Albany，CA)批準(zhǔn)。
[0166] 7. I. 2. mRNA 分析
[0167] 定量PCR(qPCR)用于測(cè)定來自喂食所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食或?qū)φ诊嬍车膫} 鼠的脂肪和肝樣品中所述炎癥，膽固醇，膽汁酸和脂肪酸途徑的所選基因的mRNA表達(dá)。
[0168] 7. 1. 3.統(tǒng)計(jì)分析
[0169] 所有數(shù)據(jù)都表示為平均值土 SD。所示平均值是喂食所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食的 倉鼠的脂肪或肝組織中mRNA水平相對(duì)于喂食對(duì)照飲食的倉鼠的脂肪或肝組織中mRNA水平 的相對(duì)值。
[0170] 7. 2.結(jié)果
[0171] 比較喂食所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食的倉鼠的脂肪組織中的基因表達(dá)相對(duì)于喂 食對(duì)照飲食的倉鼠的脂肪組織中的基因表達(dá)的相對(duì)基因表達(dá)水平如圖16所示。比較喂食 所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食的倉鼠的肝組織中的基因表達(dá)相對(duì)于喂食對(duì)照飲食的倉鼠的 肝組織中的基因表達(dá)的相對(duì)基因表達(dá)水平如圖17所示。
[0172] 肝AC0X1，CYP51和CYP7al基因的表達(dá)在喂食所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食的倉鼠 中顯著升高，而同時(shí)肝ABCG5和SCDl基因表達(dá)在喂食所述霞多麗種子粉補(bǔ)充飲食的倉鼠中 卻顯著下降。
[0173] ACOXl參與脂肪氧化的調(diào)節(jié)，CYP51參與膽固醇生物合成的調(diào)節(jié)，CYP7al參與膽汁 酸合成的調(diào)節(jié)，SCDl參與脂肪合成，ABCG5參與了膽固醇向腸內(nèi)返回運(yùn)輸。因此，所述結(jié)果 表明，補(bǔ)充霞多麗種子粉的飲食可以降低膽固醇和/或膽汁的再吸收，導(dǎo)致所述肝中的水 平降低。所述結(jié)果進(jìn)一步表明，補(bǔ)充霞多麗種子粉的飲食可以通過肝基因?qū)χ狙趸险{(diào) (ACOXl)和/或通過脂肪合成的下調(diào)（SCDl)而降低體重增益。
[0174] 8.實(shí)施例4 :霞多麗種子粉和霞多麗葡萄種子提取物對(duì)比于市售葡萄種子提取物 的健康益處的比較
[0175] 8. 1.材料&方法
[0176] 8. I. 1.倉鼠和飲畬
[0177] 雄性金色敘利亞倉鼠（?80g，LVG品系，Charles River)進(jìn)行馴化，并在實(shí)驗(yàn)飲 食開始之前隨機(jī)給予水和5001嚙齒動(dòng)物飲食（LabDiet，PMI International ;蛋白，239g/ kg ;脂肪，50g/kg ;非含氮物質(zhì)，487g/kg ;粗纖維，51g/kg ;灰分，70g/kg ;能量，17MJ/kg ;和 用于維持健康的足夠量礦物質(zhì)和維生素）長(zhǎng)達(dá)一個(gè)星期。所有葡萄種子提取物都通過HPLC 方法進(jìn)行表征而其喂食用量經(jīng)過調(diào)節(jié)而提供7% (w/w)霞多麗種子粉相同的兒茶素量。倉 鼠稱重并隨機(jī)分成10組，每組8只倉鼠，并隨機(jī)喂食包含7% (以重量計(jì)）霞多麗種子粉 (1組），Vitacost?葡萄種子提取物（2組），Mega Natural? BP葡萄種子提取物（2組）， Leucoselect?葡萄種子提取物（2組），兒茶素（約〇. oo〇785g/g飲食）（1組），表兒茶素 (約0· 00104g/g飲食）（1組），或?qū)φ诊嬍常?組）長(zhǎng)達(dá)4個(gè)星期。兒茶素水平用于將每 種葡萄種子提取物標(biāo)準(zhǔn)化成霞多麗種子粉的量。表兒茶素和兒茶素都包含在食物飲食中作 為這些化合物的對(duì)照，它們?cè)谄渌绣持斜砻髫?fù)責(zé)血壓和脂質(zhì)調(diào)節(jié)。生產(chǎn)所述霞多麗種子 粉的葡萄生長(zhǎng)于北加州海岸山谷中。飲食包含18%作為蛋白的能量，43%作為碳水化合物 的能量，39%作為脂肪的能量（其補(bǔ)充有0. 1 %膽固醇）。每周記錄體重而食品攝入每周 監(jiān)測(cè)兩次。該研宄由動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)（Animal Care and Use Committee) (Western Regional Research Center，USDA，Albany，CA)批準(zhǔn)。
[0178] 8.1.2.血漿和組織采集
[0179] 倉鼠禁食12小時(shí)，用異氟燒（Phoenix Pharmaceutical)麻醉。采用預(yù)先用EDTA 鉀溶液（15% wt: V)沖洗的注射器通過心臟穿刺收集血液并在4°C下以2000 Xg離心30分 鐘后分離血漿。收集肝，稱重，并立即冷凍于液氮中用于分析。
[0180] 8. 1. 3.血漿牛物標(biāo)記分析
[0181] 血衆(zhòng)脂蛋白中的膽固醇如先前所述通過尺寸排阻色譜法進(jìn)行測(cè)定（German et al，1996. Nutr Res. 1996 ;16:1239-49)。血漿甘油三酯，總膽固醇，游離膽固醇和葡萄糖通 過使用具有分析試劑盒的羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics/Hitachi 914Clinical Analyzer) (Roche Diagnostics and Wako Chemicals)的酶比色分析法進(jìn)行 測(cè)定。禁食倉鼠的脂聯(lián)素（B-bridge International)和胰島素（Mercodia)的血衆(zhòng)濃度 使用如前所述的鼠脂聯(lián)素和超靈敏鼠胰島素免疫測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定（Hung et al，2009， J.Diabetes 1:194-206)。禁食倉鼠中的血糖濃度使用 OneTouch Ultrameter(LifeScan) 在尾靜脈樣品中測(cè)定。
[0182] 8. 1. 4.肝脂質(zhì)分析
[0183] 凍干的磨碎肝樣品使用加速溶劑提取劑（Dionex)在100°C; 13. 8MPa下用75/25己 燒/2-丙醇提取。所述樣品提取物在羅氏診斷/日立914臨床分析儀（Roche Diagnostics) 上分析而使用上述的試劑盒測(cè)定肝甘油三酯，總膽固醇和游離膽固醇。
[0184] 8. 1. 5.糞便陽汁酸和固醇分析
[0185] 在所述倉鼠宰殺之前立即連續(xù)3天收集糞便，并凍干，磨碎和儲(chǔ)存于-20°C 下。膽汁酸和固醇通過HPLC如前所述進(jìn)行測(cè)定（Hong et al，2007, .J Agric Food Chem. 55:9750-7) 〇
[0186] 8. I. 6.統(tǒng)計(jì)分析
[0187] 所有數(shù)據(jù)均表示為平均值土 SE。對(duì)照和不同飲食組之間的差異通過雙尾學(xué)生t檢 驗(yàn)（2-tailed Student's t test)進(jìn)行確定。當(dāng)各組的方差不等時(shí)，差異顯著性采用韋氏 檢驗(yàn)（Welch's test)進(jìn)行確定。計(jì)算出皮爾遜相關(guān)系數(shù)而研宄血漿總膽固醇，血漿脂聯(lián)素 濃度，肝膽固醇和甘油三酯濃度與肝基因表達(dá)的關(guān)系（JMP7統(tǒng)計(jì)程序，SAS軟件研宄所（SAS Institute))。顯著性定義為 Ρ〈0· 05。
[0188] 8. 2.結(jié)果
[0189] 飼喂霞多麗種子粉的動(dòng)物的總膽固醇和LDL膽固醇血漿水平比喂食補(bǔ)充市售葡 萄種子提取物的飲食的動(dòng)物顯著降低（圖18-19)，但是喂食補(bǔ)充Leucoselect?葡萄種子 提取物（L7)的飲食的動(dòng)物組中的一個(gè)是例外。這些數(shù)據(jù)表明，霞多麗種子粉優(yōu)于所有，但 用于降低總膽固醇和LDL膽固醇測(cè)試的商業(yè)葡萄種子提取物之一除外。
[0190] 9.實(shí)施例5 :霞多麗種子粉對(duì)糞便微牛物水平的影晌
[0191] 9. 1.材料&方法
[0192] 9. I. 1.糞便樣品
[0193] 在第0天（對(duì)照）和在第20天（霞多麗種子粉補(bǔ)充的飲食，解百衲種子粉補(bǔ)充的 飲食和高脂肪對(duì)照飲食）收集實(shí)施例1的所述動(dòng)物的糞便。這些糞便進(jìn)行干燥和冷凍。
[0194] 9. I. 2. RNA提取和宙量
[0195] 將冷凍奠便樣品加入到10倍體積的RNA/i7ter?-ICE (Applied Biosystems， Foster City，CA，USA)中長(zhǎng)達(dá)至少24h?？俁NA使用糞便總RNA純化試劑盒（Stool Total RNA Purification Kit) (Norgen Biotek Corp.，加拿大）按照廠商方案進(jìn)行制備。
[0196] 所述分離的RNA的數(shù)量和純度通過分光光度法（A260/A280比率）進(jìn)行驗(yàn)證。對(duì) 于每一樣品使用 250ng 總 RNA 和 PrimeScript?RT 試劑盒（PrimeScript?RT reagent kit) (Takara Bio Inc.，Shiga，Japan)根據(jù)廠商方案制備 cDNA。
[0197] 使用 AB 7500 實(shí)時(shí) PCR 系統(tǒng)（Applied Biosystems，F(xiàn)oster City，CA，USA)實(shí)施 實(shí)時(shí)PCR對(duì)腸細(xì)菌16S rRNA基因表達(dá)進(jìn)行定量。使用SYBR Premix Ex Taq (Takara Bio Inc.，Shiga，日本）實(shí)施雙份擴(kuò)增。使用表1所示引物的擴(kuò)增采用以下溫度曲線進(jìn)行實(shí)施： 一個(gè)循環(huán)在95°C下進(jìn)行30秒，以下進(jìn)行40個(gè)循環(huán)：變性在95°C下進(jìn)行5?10s，在最佳溫 度下退火（annealating)5?15s并在72°C下延伸20s。
[0198] 表 1
【權(quán)利要求】
1. 一種提高哺乳動(dòng)物中脂質(zhì)代謝的方法，包括向所述哺乳動(dòng)物給予有效提高脂質(zhì)代謝 的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
2. -種提高哺乳動(dòng)物中代謝率的方法，包括向所述哺乳動(dòng)物給予有效提高哺乳動(dòng)物的 代謝率的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
3. -種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中肥胖癥、心血管病、血脂異常癥、異常脂蛋白血癥或糖代 謝障礙癥的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng)物給予有效治療或預(yù)防肥胖癥的量的霞多 麗種子產(chǎn)品。
4. 一種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中心血管病的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng)物給予 有效治療或預(yù)防所述心血管病的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述心血管病是動(dòng)脈硬化癥、動(dòng)脈粥樣硬化癥、中 風(fēng)、缺血、內(nèi)皮功能障礙癥、外周血管疾病、冠心病、心肌梗塞、腦梗塞或再狹窄。
6. -種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中血脂異常癥的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng)物給 予有效治療或預(yù)防所述血脂異常癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述血脂異常癥是高血脂癥或低血水平的高密脂 蛋白（HDL)膽固醇。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述高血脂癥選自家族性高膽固醇血癥、家族性 混合高血脂癥、降低或缺乏性脂蛋白脂酶水平或活性、高甘油三酯血癥、高膽固醇血癥、高 血水平酮體、高血水平Lp(a)膽固醇、高血水平低密脂蛋白（LDL)膽固醇、高血水平極低密 度脂蛋白（VLDL)膽固醇和高血水平非酯化脂肪酸。
9. 一種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中異常脂蛋白血癥的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng) 物給予有效治療或預(yù)防所述異常脂蛋白血癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述異常脂蛋白血癥是高血水平LDL、高血水平 載脂蛋白B (apo B)、高血水平Lp (a)、高血水平apo (a)、高血水平VLDL、低血水平HDL、降低 或缺乏性脂蛋白脂酶水平或活性、低α脂蛋白血癥、與糖尿病相關(guān)的脂蛋白異常、與肥胖 癥相關(guān)的脂蛋白異常、與阿爾茲海默癥相關(guān)的脂蛋白異常或家族性混合尚血脂癥。
11. 一種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中糖代謝障礙癥的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng) 物給予有效治療或預(yù)防所述糖代謝障礙癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述糖代謝障礙癥是受損的葡萄糖耐受性，胰 島素耐受性，胰島素耐受性相關(guān)的乳癌、結(jié)腸癌或前列腺癌，糖尿病，胰腺炎，高血壓，多囊 卵巢癥，高水平血胰島素或高水平血糖。
13. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述糖代謝障礙癥是糖尿病，且其中所述糖尿 病是非胰島素依賴型糖尿病（NIDDM)、胰島素依賴型糖尿病（IDDM)、妊娠期糖尿病（GDM)或 青春晚期糖尿?。∕ODY)。
14. 一種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中代謝綜合癥的方法，包括向需要或期望其的哺乳動(dòng)物 給予有效治療或預(yù)防代謝綜合癥的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
15. -種增加哺乳動(dòng)物腸道中梭菌（Clostridium)細(xì)菌量的方法，包括向需要或期望 其的哺乳動(dòng)物給予有效增加所述腸道中梭菌細(xì)菌量的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
16. -種減少哺乳動(dòng)物腸道中腸桿菌（Enterobacteriaceae)細(xì)菌量的方法，包括向需 要或期望其的哺乳動(dòng)物給予有效減少所述腸道中腸桿菌細(xì)菌量的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
17. -種增加哺乳動(dòng)物腸道中脆弱擬桿菌（Bacteroides fragilis)群細(xì)菌量的方法， 包括向需要或期望其的哺乳動(dòng)物給予有效提高所述腸道中脆弱擬桿菌群細(xì)菌量的量的霞 多麗種子產(chǎn)品。
18. -種治療或預(yù)防哺乳動(dòng)物中乳酸性酸中毒的方法，包括向哺乳動(dòng)物給予有效治療 或預(yù)防乳酸性酸中毒的量的霞多麗種子產(chǎn)品。
19. 根據(jù)權(quán)利要求1-18任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品引入食品或飲料 產(chǎn)品中。
20. 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述食品或飲料產(chǎn)品是嬰兒配方制品。
21. 根據(jù)權(quán)利要求1-20任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品是霞多麗種子 粉。
22. 根據(jù)權(quán)利要求1-20任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品是霞多麗種子提 取物。
23. 根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述霞多麗種子提取物是甲醇或乙醇提取物。
24. 根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品以按質(zhì)量計(jì)至少 3%、至少5%、至少8%、或至少10%日飲食的霞多麗種子粉當(dāng)量進(jìn)行給予。
25. 根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品以每天0. 2g/kg 體重、至少0. 5g/kg體重、至少0. 7g/kg體重、或至少lg/kg體重的霞多麗種子粉當(dāng)量進(jìn)行 給予。
26. 根據(jù)權(quán)利要求1-25任一項(xiàng)所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人類。
27. 根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述人類具有選自擬桿菌（Bacteroides)、瘤胃 球菌（Ruminococcus)和普雷沃氏菌（Prevotella)的腸道微生物分型。
28. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述人類具有選自擬桿菌和普雷沃氏菌的腸道 微生物分型。
29. 根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述人類具有瘤胃球菌腸道微生物分型。
30. 根據(jù)權(quán)利要求26-29任一項(xiàng)所述的方法，其中所述人類是嬰兒。
31. 根據(jù)權(quán)利要求26-30任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品以每天至少 l〇g、至少15g、至少20g、至少25g、至少30g、至少35g、至少40g、至少45g、或至少50g的量 給予。
32. 根據(jù)權(quán)利要求1-25任一項(xiàng)所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是家養(yǎng)寵物。
33. 根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述家養(yǎng)寵物是貓或狗。
34. 根據(jù)權(quán)利要求1-33任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品以一周兩次、一 周至少三次、隔天一次、或每日一次進(jìn)行給予。
35. 根據(jù)權(quán)利要求1-34任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品給予至少一周、 至少2周、至少一個(gè)月、至少2個(gè)月、至少3個(gè)月、至少6個(gè)月、至少一年、或無限期給予。
36. 根據(jù)權(quán)利要求1-35任一項(xiàng)所述的方法，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品來自生長(zhǎng)于溫克 勒地區(qū)氣候I、II、III或IV型中的葡萄。
37. 根據(jù)權(quán)利要求36所述的方法，其中所述葡萄生長(zhǎng)于沿海地區(qū)。
38. -種包括霞多麗種子產(chǎn)品的嬰兒配方制品。
39. 根據(jù)權(quán)利要求38所述的嬰兒配方制品，其進(jìn)一步包含蛋白源、脂肪源和碳水化合 物源。
40. 根據(jù)權(quán)利要求39所述的嬰兒配方制品，其中所述蛋白源是牛奶。
41. 根據(jù)權(quán)利要求38-40任一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品，其中所述脂肪源是植物油。
42. 根據(jù)權(quán)利要求39-41任一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品，其中所述碳水化合物源是乳糖。
43. 根據(jù)權(quán)利要求38-42任一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品是霞 多麗種子粉或霞多麗種子提取物。
44. 根據(jù)權(quán)利要求43所述的嬰兒配方制品，其中所述霞多麗種子提取物是甲醇或乙醇 提取物。
45. 根據(jù)權(quán)利要求38-44任一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品，其中所述霞多麗種子產(chǎn)品來自 生長(zhǎng)于溫克勒地區(qū)氣候I、Π、III或IV型中的葡萄。
46. 根據(jù)權(quán)利要求45所述的嬰兒配方制品，其中所述葡萄生長(zhǎng)于沿海地區(qū)。
47. 根據(jù)權(quán)利要求46所述的嬰兒配方制品，其中所述沿海地區(qū)是納帕或索諾瑪。
48. -種提高嬰兒腸道中梭菌細(xì)菌量的方法，包括向嬰兒給予權(quán)利要求38-47任一項(xiàng) 所述的嬰兒配方制品。
49. 一種減少嬰兒腸道中腸桿菌細(xì)菌量的方法，包括向嬰兒給予權(quán)利要求38-47任一 項(xiàng)所述的嬰兒配方制品。
50. -種增加?jì)雰耗c道中脆弱擬桿菌群細(xì)菌量的方法，包括向嬰兒給予權(quán)利要求 38-47任一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品。
51. -種治療或預(yù)防嬰兒中乳酸性酸中毒的方法，包括向嬰兒給予權(quán)利要求38-47任 一項(xiàng)所述的嬰兒配方制品。
52. 根據(jù)權(quán)利要求48-51任一項(xiàng)所述的方法，其中所述嬰兒配方制品以 按質(zhì)量計(jì)至少3%、至少5%、至少8%、或至少10%日飲食的霞多 麗種子粉當(dāng)量進(jìn)行給予。
53. 根據(jù)權(quán)利要求48-51任一項(xiàng)所述的方法，其中所述嬰兒配方制品以每天0. 2g/kg體 重、至少0. 5g/kg體重、至少0. 7g/kg體重、或至少lg/kg體重的霞多麗種子粉當(dāng)量進(jìn)行給 予。
54. 根據(jù)權(quán)利要求48-51任一項(xiàng)所述的方法，其中所述嬰兒配方制品以每天至少10g、 至少15g、至少20g、至少25g、至少30g、至少35g、至少40g、至少45g、或至少50g的霞多_ 種子粉當(dāng)量進(jìn)行給予。
55. 根據(jù)權(quán)利要求48-54任一項(xiàng)所述的方法，其中所述嬰兒配方制品一周兩次、一周至 少三次、隔天一次、每日一次、或每日多次給予。
56. 根據(jù)權(quán)利要求48-55任一項(xiàng)所述的方法，其中所述嬰兒配方制品給予至少一周、至 少2周、至少一個(gè)月、至少2個(gè)月、至少3個(gè)月、至少6個(gè)月、至少一年或無限期給予。
57. 根據(jù)權(quán)利要求48-56任一項(xiàng)所述的方法，進(jìn)一步包括給予益生菌補(bǔ)充劑。
【文檔編號(hào)】A61K36/87GK104519895SQ201380026061
【公開日】2015年4月15日 申請(qǐng)日期:2013年4月29日 優(yōu)先權(quán)日:2012年4月30日
【發(fā)明者】托里·詹姆斯·阿爾維克, 麗貝卡·蘇珊·利普森, 華萊士·H·約科亞馬 申請(qǐng)人:索那麥提科有限責(zé)任公司, 美國(guó)政府農(nóng)業(yè)部