一種中藥組合物在制備治療代謝重構(gòu)藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種中藥組合物在制備治療代謝重構(gòu)的藥物中的應(yīng)用，屬于中藥新用途領(lǐng)域，本發(fā)明中藥組合物由黃芪、附子、人參或黨參、丹參、葶藶子、香加皮或南五加皮、澤瀉、玉竹、桂枝、紅花、陳皮組成，本發(fā)明有助于改善能量代謝重構(gòu)。
【專利說明】一種中藥組合物在制備治療代謝重構(gòu)藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥組合物的新用途，具體地，涉及一種中藥組合物在治療代謝 改變的藥物中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] Van Bilsen提出"代謝重構(gòu)"概念，即由心肌細(xì)胞糖類和脂肪等物質(zhì)代謝紊亂引起 的心臟能量代謝途徑改變，導(dǎo)致心臟結(jié)構(gòu)與功能異常改變。
[0003] 心臟是機(jī)體內(nèi)耗能最大的器官，所需能量用于維持自身代謝及泵血功能，冠脈循 環(huán)的供應(yīng)量必須滿足心肌代謝需求，才能保障心臟功能正常。心肌氧氣供應(yīng)是否充足直接 影響到能量代謝的方式，正常情況下脂肪酸β氧化是機(jī)體能量來源的主要途徑，但提供等 量的ΑΤΡ，脂肪酸氧化要比葡萄糖氧化多消耗約10%的氧分子，因此組織氧含量直接決定了 能量來源物質(zhì)糖脂的代謝方式，進(jìn)而影響能量生成。
[0004] 根據(jù)能量代謝的物質(zhì)機(jī)理，相關(guān)生化指標(biāo)可分為三類：（1)能量物質(zhì)的儲存及動 員情況，如血液FFA、肌肉中的PCr、肌糖原、肝糖原、血糖等；（2 )運(yùn)動時物質(zhì)代謝的產(chǎn)物，如 LA、H+、丙酮酸、血UA、尿蛋白等；（3)代謝調(diào)節(jié)物，如酶、激素、維生素等。通過檢測血清LA、 LDH、FFA、UA含量，發(fā)現(xiàn)心臟由于能量代謝途徑改變，向"胚胎型"演變，循環(huán)代謝物質(zhì)LA、 FFA、UA增多。由于DNA及RNA自身處于不停的新陳代謝過程中，嘌呤是核酸的代謝產(chǎn)物， 而尿酸是嘌呤的代謝最終產(chǎn)物，所以尿酸是細(xì)胞分解的終末產(chǎn)物之一，研究表明血尿酸水 平與高血壓等心血管病危險度呈正相關(guān)，血尿酸可增加腎臟對鈉的重吸收，加重心臟損傷。 由于氧含量降低，心肌組織底物氧化方式改變，重度心衰時游離脂肪酸（FFA)的利用明顯減 少，使心肌細(xì)胞有氧代謝效率降低，而細(xì)胞內(nèi)FFA濃度升高具有"心肌毒性"，加重能量代謝 障礙。底物代謝方式改變一方面使心肌中ATP水平降低，另一方面乳酸增多及游離脂肪酸 的堆積將導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酸中毒、加重心肌細(xì)胞損傷。AMPK、PPARa是能量代謝調(diào)節(jié)的樞紐，分 別與葡萄糖代謝和脂肪酸代謝有關(guān)，對于血氧供需不足的心肌組織，如何調(diào)節(jié)底物代謝途 徑以達(dá)到氧分子的最優(yōu)利用是通過調(diào)節(jié)能量代謝改善心臟功能的有效措施。
[0005] PGC-Ia是促進(jìn)線粒體生物合成、調(diào)節(jié)線粒體數(shù)量和質(zhì)量，參與脂肪酸氧化和產(chǎn) 熱作用的一個關(guān)鍵的核受體激活因子。本研究證實(shí)，與模型組相比，芪藶強(qiáng)心激活A(yù)MPK并 上調(diào)PGC-I a的表達(dá)。PGC-I a有許多生物效應(yīng)，可通過TRP UNRFS和ERRS等下游信號因 子影響線粒體生物合成。研究已證實(shí)AICAR，一種活化的AMPK化合物，可上調(diào)PGC-I a mRNA 的表達(dá)。AMPK/PGC-1 a作為參與線粒體生物合成及功能狀態(tài)有關(guān)的信號通路，也是芪藶強(qiáng) 心發(fā)揮保護(hù)心肌線粒體結(jié)構(gòu)功能的有效途徑。
[0006] 線粒體不僅是細(xì)胞氧化呼吸和能量代謝的場所，也是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的重要的細(xì)胞 器，隨著科技水平的進(jìn)步，三維成像技術(shù)使我們直觀看到了處于頻繁分裂與融合的線粒體 管網(wǎng)型立體結(jié)構(gòu)，線粒體空間結(jié)構(gòu)變化與線粒體能量代謝、氧化磷酸化等密切相關(guān)，分裂與 融合的動態(tài)平衡對細(xì)胞積極敏銳的適應(yīng)環(huán)境因素有重要意義。細(xì)胞色素 C介導(dǎo)的線粒體途 徑是引起心肌細(xì)胞凋亡的重要方式，而動力相關(guān)蛋白I (Drpl)是線粒體分裂的關(guān)鍵蛋白， Drpl缺失將導(dǎo)致線粒體管網(wǎng)化，但過度表達(dá)Drpl將促進(jìn)線粒體分裂和CytC的釋放，引起 細(xì)胞凋亡進(jìn)程。線粒體融合蛋白2 (Mfn2)是近年發(fā)現(xiàn)的新基因，主要心臟中表達(dá)，具有調(diào) 節(jié)線粒體新陳代謝和維持線粒體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的作用，參與線粒體融合，Mfn2基因缺失可引起 線粒體片段化，研究提示Drpl和Mfn2的表達(dá)變化可能與能量代謝重構(gòu)相關(guān)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明目的是提供一種中藥組合物在制備治療代謝重構(gòu)藥物中的應(yīng)用。
[0008] 尤其是，該組合物在制備調(diào)節(jié)ρ-AMPK/PPAR α信號通路藥物中的應(yīng)用，增加 p-AMPK、PPAR α蛋白表達(dá)。還有在制備抑制Drp 1基因表達(dá)藥物中的應(yīng)用或在制備提高M(jìn)fn2 基因表達(dá)藥物中的應(yīng)用。該中藥組合物在制備促進(jìn)β-MHC向a-MHC轉(zhuǎn)化藥物中的應(yīng)用。 [0009] 所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成： 黃芪150-450份、附子40-120份、人參或黨參75-225份、丹參75-225份、葶藶子 50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、澤瀉75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、紅 花30-90份、陳皮25-75份。
[0010] 優(yōu)選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成： 黃芪450份、附子112. 5份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子150份、香加皮或 南五加皮180份、澤瀉225份、玉竹75份、桂枝90份、紅花90份、陳皮75份。
[0011] 優(yōu)選地，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成： 黃芪250份、附子112. 5份、人參或黨參200份、丹參120份、葶藶子135份、香加皮或 南五加皮150份、澤瀉200份、玉竹60份、桂枝75份、紅花75份、陳皮60份。
[0012] 本發(fā)明中藥組合物的活性成分可以由常規(guī)的提取工藝[如范碧亭《中藥藥劑學(xué)》 (上?？茖W(xué)出版社1997年12月第1版）]制得，更優(yōu)選地，所述中藥組合物的活性成分由下 列步驟制成： (1) 將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮用7-9倍量70%乙醇提取，濾 過，濃縮提取液至在60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30的清膏； (2) 提取桂枝、陳皮的揮發(fā)油； (3) 附子、丹參、玉竹、紅花加6-10倍量水煎煮2次，每次2小時，合并提取液，濾過；桂 枝、陳皮提油后的水溶液濾過，收集水溶液濾液，再加6-10倍量水煎煮殘渣1小時，濾過，合 并水溶液；將上述所得的各種水溶液合并，濃縮至相對密度為1. 25-1. 30清膏，攪拌中加入 乙醇，至醇濃度70%，靜置，濾過，濾液濃縮至在60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30清膏。
[0013] 本發(fā)明還提供了該中藥組合物膠囊劑的制備方法： (1) 將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮按照比例量稱取加8倍量 70%乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙 醇，濃縮至60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30的清膏，備用； (2) 桂枝、陳皮按照比例量蒸餾提取揮發(fā)油，提油后的水溶液濾過，備用，殘渣再加8倍 量水煎煮1小時，濾過，合并水煎液，備用； (3) 附子、丹參、玉竹、紅花加水9倍量煎煮2次，每次2小時，合并提取液，濾過，與步驟 (2)中桂枝、陳皮水煎液合并，濃縮至60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30清膏，攪拌中加入 乙醇，至醇濃度70%，4°C以下靜置24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60°C熱測時相 對密度為I. 25-1. 30清膏，與步驟（1)的醇提清膏混合，65-70°C烘干； (4)將步驟（3)所得干膏粉碎成100目粉，加70%乙醇適量制粒，噴入桂枝、陳皮揮發(fā) 油，混勻，裝膠囊，即得。
[0014] 本發(fā)明中藥組合物中，作為活性組分的原料藥的拉丁名及其加工方法來自《中藥 大辭典》（1977年7月，第一版，上海科學(xué)技術(shù)出版社)和《中國藥典》（2005年版，化學(xué)工業(yè) 出版社)。
[0015] 本發(fā)明中藥組合物還可以按常規(guī)的制劑工藝，例如，范碧亭《中藥藥劑學(xué)》（上?？?學(xué)出版社1997年12月第1版）記載的制備工藝，制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，例如 膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑等。
[0016] 本發(fā)明的應(yīng)用中，所述中藥組合物制劑劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液 或丸劑，為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的輔料，例如：填充 劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括：淀粉、 預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預(yù)膠化淀粉、 微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素 鈉等；潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯 吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡 咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等； 矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽 類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括：PEG6000，PEG4000,蟲蠟等。為使上述劑型 能夠?qū)崿F(xiàn)中藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑 學(xué)》，上?？茖W(xué)出版社1997年12月第1版中各劑型記載的輔料)。
[0017] 實(shí)驗(yàn)例1 為了證明本發(fā)明中藥組合物的效果，采用實(shí)驗(yàn)例1所得本發(fā)明藥物進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)驗(yàn) 證效果： 材料與方法 1材料 1. 1動物 雄性Sprague Dawley大鼠，SPF級，150只，體重250?270g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動 物技術(shù)有限公司提供，許可證編號=SCXK(京）2012-0001。采用5%苦味酸標(biāo)記識別動物， 于國家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)研究室(心腦血管絡(luò)病)實(shí)驗(yàn)中心分籠飼養(yǎng)，5只/籠，飼以標(biāo)準(zhǔn)飼 料，自由進(jìn)食飲水，光照12h/天，溫度20?23°C，相對濕度40?60%。
[0018] 1.2藥物和試劑 該中藥組合物膠囊粉、卡托普利 石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司 乳酸檢測試劑盒 南京建成生物工程研究所 (批號 20120710) 游離脂肪酸檢測試劑盒 英國朗道公司 (批號 234892) 乳酸脫氫酶生化試劑盒 北京九強(qiáng) 尿酸生化試劑盒 北京九強(qiáng) 5 ^ -三磷酸腺苷（ATP)鈉鹽 美國Sigma公司 (批號 100111202) 5 ^ -二磷酸腺苷（ADP)鈉鹽 美國Sigma公司 (批號 10090203190) 5 ^ --磷酸腺苷（AMP)鈉鹽 中國藥品生物制品檢定所 (批號 140719-200501) 羅丹明 123(Rhodamine_123) 美國 Sigma 公司 線粒體提取試劑盒 北京Solarbio公司 (批號 20120528) Mitochondria RCR assay kit 美國 GENMED 公司 (批號 1-425010-10) 考馬斯亮藍(lán) 南京建成生物工程研究所 (批號 20120721) ATP合酶 南京建成生物工程研究所 (批號 20120629) 氫氧化鈉(分析純） 廣東西隴化工有限公司 (批號 1111031) Trizol Reagent Invitrogen 公司產(chǎn)品 M-MLV 美國Promega公司產(chǎn)品 RNasin 美國Promega公司產(chǎn)品 dNTP 美國Promega公司產(chǎn)品 Taq DNA polymerase 美國 Promega 公司產(chǎn)品 Random primers 美國 Promega 公司產(chǎn)品 Agarose 美國Promega公司產(chǎn)品 Hot Start Fluorescent PCR Core 美國 BBI 公司 Reagent Kits (SYBR Green I) ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒 美國Pierce公司 蛋白定量試劑盒 美國Pierce公司 Marker 美國 Fermentas 公司 p-AMPK、AMPK、PPAR α -抗 美國 santa cruz 公司、 PGC-1 α -抗 英國Abcam公司 1. 3主要儀器 3Κ15低溫高速離心機(jī) 德國SIGM XD711酶標(biāo)分析儀 上海迅達(dá)醫(yī)療儀器公司 日立7080生化分析儀 日本日立公司 IOA高效液相色譜檢測儀 日本島津公司 流式細(xì)胞儀（EPICS-XL II ) 美國Beckman Coulter公司 ORION溶氧電解儀 美國Thermo Electron公司 756型紫外分光光度計 美國Thermo公司 ABI 7300 Real-Time PCR System 美國 ABI 公司 RS-28高速低溫離心機(jī) 德國賀利氏公司 超低溫冰箱 德國賀利氏公司 WB UVP凝膠掃描系統(tǒng) 美國UVP公司 微量移液器 德國Gilson公司 DYZ-22A型雙恒定時電泳儀 北京市六一儀器廠 DYY-III橋式電泳槽 北京市六一儀器廠 170-930電轉(zhuǎn)膜儀 美國Bio-Rad公司 170-3940半干轉(zhuǎn)膜儀 美國Bio-Rad公司 165-8001垂直電泳儀 美國Bio-Rad公司 2方法 2.1動物分組與給藥 大鼠心力衰竭模型的建立 采用胸主動脈縮窄法制作慢性心力衰竭模型，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，稱重后行腹腔麻 醉（5%水合氯醛，7ml/kg)，仰臥位固定，插管與呼吸：經(jīng)口氣管插管，固定后將氣管插管接 于小動物呼吸機(jī)上，潮氣量2~3ml，呼吸頻率90次/min ;開胸：剪去胸前毛發(fā)，碘伏或75% 乙醇消毒，沿胸骨左緣剪開皮膚，分離肌肉層，剪斷第2、3肋骨，打開胸腔，鈍性分開胸膜， 暴露胸腺及肺臟，充分暴露升主動脈，仔細(xì)將主動脈弓及其周圍血管和結(jié)締組織分離，在升 主動脈下穿一根絲線同時提起絲線，在無名動脈、左頸動脈、左鎖骨下動脈下方分離胸主動 脈，以彎鑷在胸主動脈下穿過1根4號縫合線，以無菌聚乙烯塑料管墊扎后撤出，胸主動脈 縮窄約50%。胸腔內(nèi)放置一塑料軟管，關(guān)胸，胸腔排氣并拔出軟管，逐層縫合肌肉及皮膚。待 大鼠自主呼吸恢復(fù)后，拔除氣管插管，腹腔注射青霉素10 〇〇〇 u，觀察2h后回籠飼養(yǎng)，術(shù)后 4h給予鼠飼料及飲用水。術(shù)后連續(xù)3d青霉素肌注預(yù)防感染。假手術(shù)組大鼠為同期開胸分 離胸主動脈未縮窄者。
[0019] 2.2藥物配制方法 0. 5%羧甲基纖維素鈉（CMC-Na)溶液：取5g CMC-Na定容于IL蒸餾水中，加熱攪拌至無 色透明。
[0020] 該中藥組合物膠囊藥粉：每克膠囊粉相當(dāng)于6. 325g生藥，各取12. 5g、25g、50g膠 囊藥粉加入〇. 5%羧甲基纖維素鈉溶液中混懸，分別定容量至500ml，終濃度為0. 025g/ml、 0. 05g/ml、0. lg/ml，設(shè)為zhw低劑量組、中劑量組與高劑量組，4°C儲存?zhèn)溆谩?br> [0021] 卡托普利片：取50mg (2片)研缽研磨成細(xì)粉，用0. 5%羧甲基纖維素鈉溶液混懸， 定容到80ml，終濃度為0. 625mg/ml，給藥前現(xiàn)用現(xiàn)配。
[0022] 2. 3動物分組與給藥 術(shù)后第5周將存活動物隨機(jī)分組：正常組（Control，n=15)、假手術(shù)組（Sham，n=15)、模 型組（Model，n=15)，zhw 低劑量組（zhw_L，n=15)、zhw 中劑量組（zhw_M，n=15)、zhw 高劑量 組（zhw-H，n=15)三組給予zhw藥粉量分別為I. 0、0. 5、0. 25g/kg/d，給藥體積為10ml/kg/ d，卡托普利組（Captopril，n=15)，以卡托普利6. 25mg/kg/d灌胃給藥。正常組、假手術(shù)組與 模型組灌服等體積的〇. 5%CMC-Na溶液，連續(xù)灌胃給藥6周，于末次給藥禁食12h后進(jìn)行指 標(biāo)測定。
[0023] 2. 2檢測指標(biāo)與方法 2. 2. 1血清乳酸（LA)、乳酸脫氫酶（LDH)、游離脂肪酸（FFA)、尿酸（UA)的檢測 血清LA檢測按照試劑盒說明書操作，酶標(biāo)儀測定OD值，經(jīng)公式計算得到其含量；LDH、 FFA、UA使用全自動生化儀檢測。
[0024] 2. 2. 2心肌組織能量負(fù)荷（EC) 所述稱取適量心肌組織，以5ml/g比例加入預(yù)冷的0. 4mol/L高氯酸，冰浴中勻漿后， 4°〇 4000 印111/111；[11離心10 111；[11，取400 4 1上清液加入25 4 121]1〇1/]^^0!1調(diào)？!1值至6.5， 再次4? 10000 rpm/min 10 min離心，吸取上清液用0.45微米濾膜過濾后進(jìn)樣。用高效液 相色譜儀分離并測定，檢測波長為254nm，根據(jù)洗脫峰面積和標(biāo)準(zhǔn)品濃度來計算ATP、ADP、 AMP含量，結(jié)果以μ mol/g組織表示，同時計算總腺苷酸池 （ATP + ADP + AMP)和能荷大小 EC= (ATP+0. 5XADP) / (ATP + ADP + AMP)。
[0025] 2. 2. 3線粒體膜電位（MMP) 取新鮮的心肌組織300mg左右，制備單細(xì)胞懸液，以Rhodamine 123為熒光探針(終濃 度為0. 5 μ mol/L)避光孵育15min，用流式細(xì)胞分析儀檢測各組大鼠線粒體MMP變化(激發(fā) 光波長480nm，發(fā)射光波長530nm)。Rhodaminel23是一種陽離子突光染料，由于線粒體內(nèi)膜 的負(fù)電性而滯留在活細(xì)胞線粒體內(nèi)，以其熒光強(qiáng)度變化表示MMP變化。
[0026] 2. 2. 4線粒體氧化呼吸活性（RCR) 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時取新鮮心肌組織，用線粒體提取試劑盒，低溫差速離心制備線粒體懸液，考 馬斯亮藍(lán)法測定心肌線粒體懸液的蛋白含量。加2. 5ml GENMED(聚乙二醇細(xì)胞融合試劑)介 質(zhì)液于反應(yīng)玻璃槽，混勻密閉后，依次加入線粒體、IV態(tài)呼吸底物溶液和III態(tài)呼吸底物液， 溶氧電解儀測定密閉反應(yīng)體系中線粒體III態(tài)（State3)呼吸、IV態(tài)（State4)呼吸耗氧率，根 據(jù)公式計算線粒體呼吸控制率RCR= III態(tài)呼吸速率/ IV態(tài)呼吸速率。
[0027] 2. 2. 5實(shí)時熒光PCR檢測CPT- I、Glut 4與PGC-I a mRNA相對表達(dá)量 提取RNA :取IOOmg心室肌組織置于勻漿器中，加 Iml Trizol，迅速研成勻漿液，加入 200 μ 1氯仿，震蕩30s，冰上放置5 min。4°C，12000 rpm，離心10 min，取上層水相轉(zhuǎn)移至 另一 I. 5ml離心管中，加入等體積的異丙醇，顛倒混勻，-20°C靜置。2h后4°C，12000 rpm， 離心20 min,棄上清，加入Iml 75%乙醇，輕輕混勻，4°C，12000 rpm，離心IOmin,吸凈上清 液，于室溫待干，加入20μ1 DEPC (焦碳酸二乙酯）預(yù)處理的去離子水溶解沉淀，-80°C保存 備用。
[0028] RNA純度與完整性檢測：取4 μ I RNA提取液，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，可見明 顯的28S、18S條帶，且28S為18S條帶的兩倍，5S條帶弱且彌散，表明提取的RNA較少降解， 完整性良好。用紫外分光光度計分別測定OD 26tl與OD28tl, OD26ciAD28tl比值在I. 8~2. 0之間，表 明提取的RNA蛋白污染較少，可于后續(xù)反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
[0029] 反轉(zhuǎn)錄（RT): 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液組成如下表：

【權(quán)利要求】
1. 一種中藥組合物在制備治療代謝重構(gòu)藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物由 如下重量份的原料藥制成： 黃芪150-450份、附子40-120份、人參或黨參75-225份、丹參75-225份、葶藶子 50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、澤瀉75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、紅 花30-90份、陳皮25-75份。
2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制 成： 黃芪450份、附子112. 5份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子150份、香加皮或 南五加皮180份、澤瀉225份、玉竹75份、桂枝90份、紅花90份、陳皮75份。
3. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制 成： 黃芪150份、附子40份、人參或黨參225份、丹參225份、葶藶子50份、香加皮或南五 加皮180份、澤瀉75份、玉竹75份、桂枝30份、紅花90份、陳皮25份。
4. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制 成： 黃芪250份、附子112. 5份、人參或黨參200份、丹參120份、葶藶子135份、香加皮或 南五加皮150份、澤瀉200份、玉竹60份、桂枝75份、紅花75份、陳皮60份。
5. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的應(yīng)用，其特征在于，所述中藥組合物的活性成分由下 列步驟制成： (1) 將黃芪、葶藶子、澤瀉、人參或黨參、香加皮或南五加皮用7-9倍量70%乙醇提取，濾 過，濃縮提取液至在60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30的清膏； (2) 提取桂枝、陳皮的揮發(fā)油； (3) 附子、丹參、玉竹、紅花加6-10倍量水煎煮2次，每次2小時，合并提取液，濾過；桂 枝、陳皮提油后的水溶液濾過，收集水溶液濾液，再加6-10倍量水煎煮殘渣1小時，濾過，合 并水溶液；將上述所得的各種水溶液合并，濃縮至相對密度為1. 25-1. 30清膏，攪拌中加入 乙醇，至醇濃度70%，靜置，濾過，濾液濃縮至在60°C熱測時相對密度為1. 25-1. 30清膏； 步驟（1)所得清膏、步驟（2)所得揮發(fā)油以及步驟（3)所得清膏共同構(gòu)成活性成分。
6. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備調(diào)節(jié)p-AMPK/ PPARa信號通路藥物中的應(yīng)用。
7. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在增加 p-AMPK、PPARa蛋白表 達(dá)藥物中的應(yīng)用。
8. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備抑制Drpl基因 表達(dá)藥物中的應(yīng)用。
9. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備提高M(jìn)fn2基因 表達(dá)藥物中的應(yīng)用。
10. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備促進(jìn)β-MHC 向a-MHC轉(zhuǎn)化藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P9/00GK104274690SQ201310276013
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月3日
【發(fā)明者】張軍芳, 魏聰, 王宏濤, 唐思文 申請人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司