一種鼻用疫苗組合物粉體制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種鼻用疫苗組合物粉體制劑及其制備方法。所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑包括如下原料組分：（1)0.05%?5%抗原；（2)0.3?45%油相；(3)0.3~45%表面活性劑；(4)2?20%黏膜黏附劑；和（5)4?40%凍干賦形劑;所述百分比為各成分占原料總量的質(zhì)量百分比。所述制備方法包括如下步驟：（1)將油相和表面活性劑混合，攪拌并加入水，得佐劑；（2)將步驟(1)制得的佐劑與抗原混合后，冷凍干燥得粉末，即得。本發(fā)明的鼻用疫苗組合物粉體制劑為經(jīng)鼻黏膜免疫，其制備方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性高，實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中操作便捷，能大幅提高接種率，具有非常好的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】一種鼻用疫苗組合物粉體制劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥劑領(lǐng)域，具體涉及一種鼻用疫苗組合物粉體制劑及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 疫苗是預(yù)防和治療病毒感染類疾病最為經(jīng)濟(jì)有效的手段。以流感疫苗為例，在發(fā) 達(dá)國(guó)家，如果流感疫苗的抗原和正在流行的流感病毒匹配良好，就能夠保護(hù)70-90%的健康 成人免于出現(xiàn)臨床疾病。目前，國(guó)內(nèi)主要的免疫手段仍然是傳統(tǒng)的注射接種，但是肌肉注射 的給藥方式存在諸多缺陷，包括注射接種不便、明顯的疼痛感(尤其對(duì)于嬰幼兒和兒童)、注 射可能存在的不安全因素等。
[0003] 口服流感疫苗需克服胃腸道的酸性環(huán)境，將敏感的抗原蛋白完整遞送至胃腸道黏 膜上的微褶細(xì)胞（M細(xì)胞)。由于胃腸道環(huán)境的不適宜及流感抗原蛋白的不穩(wěn)定性，口服流 感疫苗的研究鮮有突破。
[0004] 鼻噴霧流感疫苗的出現(xiàn)改善了肌注免疫因疼痛感造成的患者順應(yīng)性差，并且避免 了肌肉注射可能引起的血液感染或疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)。但鼻噴霧劑中的藥物仍以液體形式存 在，需低溫保存和運(yùn)輸，穩(wěn)定性不夠高。
[0005] 專利文獻(xiàn)CN1562364A公開(kāi)了一種含脂肪乳佐劑的鼻用流感疫苗，制劑制備過(guò)程 需要經(jīng)歷高速攪拌和納米對(duì)撞過(guò)程，即通過(guò)高速攪拌，混勻流感全病毒懸液與納米化脂肪 乳懸液；通過(guò)納米對(duì)撞，使流感病毒脂肪乳混合液裂解為l〇-12nm微粒。整個(gè)制備過(guò)程控制 難度高，且易導(dǎo)致抗原效價(jià)降低。
[0006] 專利文獻(xiàn)CN101405027A公開(kāi)了一種包含流感病毒重構(gòu)包膜的流感病毒顆粒組合 物，而無(wú)單獨(dú)添加的佐劑，用于經(jīng)鼻免疫；其制備工藝復(fù)雜，難以應(yīng)用于大生產(chǎn)。
[0007] 因此，為了提高免疫制劑給藥的便捷性、給藥途徑的安全性、提高免疫制劑的穩(wěn)定 性，減少醫(yī)療支出，本領(lǐng)域目前迫切需要發(fā)展新型的鼻用疫苗制劑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是為了克服現(xiàn)有的鼻用疫苗制劑制備繁瑣、穩(wěn)定性差的 缺陷，而提供一種新型的鼻用疫苗組合物粉體制劑。其適用于不同年齡人群及動(dòng)物的免疫 接種，提高免疫系統(tǒng)的黏膜應(yīng)答和系統(tǒng)應(yīng)答，改善接種者的順應(yīng)性。本發(fā)明的鼻用疫苗組合 物粉體制劑，其制備過(guò)程不需高壓均質(zhì)或納米裂解，簡(jiǎn)化了生產(chǎn)步驟，生產(chǎn)過(guò)程中抗原性質(zhì) 保持穩(wěn)定。
[0009] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案之一是：一種鼻用疫苗組合物粉體制劑，其包括如下原料 組分：
[0010] (1) 0· 05% ?5% 抗原；
[0011] (2) 0· 3 ?45% 油相；
[0012] (3) 0· 3?45%表面活性劑；
[0013] (4 ) 2?20%黏膜黏附劑；和
[0014] (5 ) 4?40%凍干賦形劑；
[0015] 所述百分比為各成分占原料總量的質(zhì)量百分比。
[0016] 較佳地，所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑包括如下原料組分：
[0017] (1) 0· 15% ?4% 抗原；
[0018] (2) 4 ?40% 油相；
[0019] (3 ) 4?40%表面活性劑；
[0020] (4) 4?16%黏膜黏附劑；和
[0021] (5 ) 8?36%凍干賦形劑；
[0022] 所述百分比為各成分占原料總量的質(zhì)量百分比。
[0023] 更佳地，所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑包括如下原料組分：
[0024] (1) 0· 25% ?3% 抗原；
[0025] (2) 20 ?30% 油相；
[0026] (3) 20?30%表面活性劑；
[0027] (4) 10?15%黏膜黏附劑；和
[0028] (5 ) 25?32%凍干賦形劑；
[0029] 所述百分比為各成分占原料總量的質(zhì)量百分比。
[0030] 本發(fā)明中，所述抗原可以為本領(lǐng)域常規(guī)所述的各類抗原。
[0031 ] 從抗原的種類而言，所述抗原可以包括但不局限于流感病毒抗原、SARS病毒抗原、 麻疫病毒抗原、人乳頭瘤狀病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原、狂犬病毒抗原以及脊髓灰質(zhì)炎病 毒抗原，更優(yōu)選流感病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和破傷風(fēng)病毒抗原中的任一種；所述的流 感病毒抗原包括季節(jié)性流感病毒抗原和大流行性流感病毒抗原(如流感病毒抗原HI、H2、 H3、H5、H7、H9、B亞型以及HA、NA、Ml、M2亞單位抗原等）。
[0032] 從抗原的來(lái)源而言，所述抗原可以包含一種或多種不同來(lái)源，即抗原可源自一種 或多種不同的病原體或不同的病原體血清型。
[0033] 從抗原的存在形式和制備方法而言，所述抗原可以為滅活疫苗、減活疫苗、裂解疫 苗、DNA疫苗、重組疫苗、亞單位疫苗和多肽蛋白疫苗中的一種或多種。
[0034] 本發(fā)明中，所述油相為本領(lǐng)域常規(guī)所述油相，較佳地，所述油相選自角鯊烯、角鯊 烷、中鏈甘油三酸酯、魚(yú)油、橄欖油和大豆油中的一種或多種，更優(yōu)選角鯊烯、角鯊?fù)楹椭墟?甘油三酸酯中的一種或多種。
[0035] 本發(fā)明中，所述表面活性劑為本領(lǐng)域常規(guī)所述表面活性劑，較佳地，所述表面活性 劑選自吐溫、聚乙二醇-12-羥基硬脂酸酯（Solutol HS15)、聚乙二醇-12-羥基硬脂酸酯 (Solutol HS15)和磷脂的混合物，以及吐溫與磷脂的混合物中的一種或多種。所述磷脂為 本領(lǐng)域常規(guī)，優(yōu)選可藥用的天然磷脂或合成磷脂，或磷脂的衍生物，更優(yōu)選自大豆磷脂、卵 磷脂、蛋黃卵磷脂和氫化大豆磷脂中的一種或多種。
[0036] 本發(fā)明中，所述黏膜黏附劑為本領(lǐng)域常規(guī)所述黏膜黏附劑，較佳地，所述黏膜黏附 劑選自殼聚糖、羧甲基纖維素鈉、海藻酸鈉、卡波姆和羥丙甲纖維素中的一種或多種。
[0037] 本發(fā)明中，所述凍干賦形劑為本領(lǐng)域常規(guī)所述凍干賦形劑，較佳地，所述凍干賦形 劑選自乳糖、蔗糖、海藻糖、菊糖、右旋糖酐、葡聚糖、氨基酸、甘露醇和山梨醇中的一種或多 種，更優(yōu)選海藻糖、乳糖、菊糖和甘露醇中的一種或多種。所述氨基酸為本領(lǐng)域常規(guī)所述的 各類氨基酸，如精氨酸、丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸等。
[0038] 本發(fā)明中，較佳地，所述的原料還包括不超過(guò)8% (優(yōu)選2?5%)的緩沖劑，所述百 分比為緩沖劑占原料總量的質(zhì)量百分比。所述的緩沖劑較佳地選自磷酸鹽、4-羥乙基哌嗪 乙磺酸（HEPES)、醋酸鹽和枸櫞酸中的一種或多種。
[0039] 本發(fā)明中，較佳地，所述的原料還包括不超過(guò)60% (優(yōu)選5?30%)的載體,所述百 分比為載體占原料總量的質(zhì)量百分比。所述載體較佳為羧甲基纖維素鈉和乳糖的混合物， 更優(yōu)選質(zhì)量比為1 : 50的羧甲基纖維素鈉和乳糖的混合物。
[0040] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案之二是：前述鼻用疫苗組合物粉體制劑的制備方法。
[0041] 本發(fā)明的鼻用疫苗組合物粉體制劑的制備方法同本領(lǐng)域常規(guī)，其只需要將抗原 (如流感病毒抗原原液）與油相和表面活性劑混合凍干后，再與粘膜粘附劑和凍干賦形劑混 合均勻即可。按照本領(lǐng)域常規(guī)，一般會(huì)將最后混合均勻所得的終產(chǎn)品灌裝于本領(lǐng)域常規(guī)的 給藥裝置中，作為鼻用干粉吸入劑備用。
[0042] 較佳地，所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑的制備方法包括如下步驟：
[0043] (1)將油相和表面活性劑混合，攪拌并加入水，得佐劑；所述水的加入量以能均勻 乳化油相和表面活性劑為準(zhǔn)；
[0044] (2)將步驟（1)制得的佐劑與抗原混合后，冷凍干燥得粉末，即得。
[0045] 其中，所述油相、表面活性劑和抗原的用量如前所述。
[0046] 在本發(fā)明中，在步驟（2)之后較佳地還包括步驟（3):將步驟（2)所得的粉末過(guò)篩， 然后分裝保存。
[0047] 優(yōu)選地，本發(fā)明中，在步驟（1)之前還包括步驟（a)，且步驟（3)替換為步驟（3'）； 所述的步驟（a)為：將羧甲基纖維素鈉溶于水制得粘合劑，再將乳糖加入所述粘合劑中，混 合均勻，制粒、整粒并烘干，得載體，其中，所述水的量以能溶解所述的羧甲基纖維素鈉為 準(zhǔn)；所述的步驟（3'）為：將步驟（2)所得的粉末與步驟（a)制得的載體混合均勻，即得。本 發(fā)明更優(yōu)選在步驟（3'）之后將步驟（3'）中混合均勻所得產(chǎn)物過(guò)篩，然后分裝保存。
[0048] 本發(fā)明中，所述的過(guò)篩較佳地為過(guò)100?400目篩。
[0049] 本發(fā)明中，步驟（1)所述攪拌為本領(lǐng)域常規(guī)所述的攪拌；步驟（2 )所述冷凍干燥為 本領(lǐng)域常規(guī)所述；步驟（a)中所述制粒、整粒和烘干為本領(lǐng)域常規(guī)操作。
[0050] 在符合本領(lǐng)域常識(shí)的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實(shí) 例。
[0051] 本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0052] 本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于：本發(fā)明的鼻用疫苗組合物粉體制劑為經(jīng)鼻黏膜免 疫，相比以往的免疫制劑，可以顯著提升免疫效果，其可同時(shí)誘導(dǎo)包括體液免疫和細(xì)胞免疫 在內(nèi)的系統(tǒng)免疫應(yīng)答和黏膜免疫應(yīng)答，還可經(jīng)由呼吸道黏膜入侵人體而引發(fā)疾病的病原體 在感染部位即時(shí)得到有效抵抗；其可通過(guò)共同黏膜免疫系統(tǒng)引起消化道和生殖道的遠(yuǎn)端黏 膜免疫應(yīng)答，還可使抗原經(jīng)黏膜特有的褶皺細(xì)胞(M細(xì)胞)轉(zhuǎn)運(yùn)至樹(shù)突狀細(xì)胞（DC)等抗原提 呈細(xì)胞（APC)，提高APC對(duì)抗原的攝取和提呈能力。此外，本發(fā)明的鼻用疫苗組合物粉體制 劑的制備方法簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性高，實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中操作便捷，能大幅提高接種率。

【具體實(shí)施方式】
[0053] 下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實(shí) 施例范圍之中。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，均按照常規(guī)方法和條件，或按照 商品說(shuō)明書(shū)選擇。
[0054] 實(shí)施例1
[0055] 稱取0. 64g羧甲基纖維素鈉，加64ml水，制備1%粘合劑；稱取30g乳糖，以粘合劑 制軟材；過(guò)20目篩制粒，60° C烘干30分鐘后分別過(guò)60目和80目篩整粒，60° C烘干120 分鐘，篩取100?400目顆粒，即得粉末載體。
[0056] 稱取角鯊烯0· 6g，中鏈甘油三酸酯0· 6g，Solutol HS150. 9g，蛋黃卵磷脂0· 3g， 攪拌，得到油相/表面活性劑混合物；稱取枸櫞酸1.6g，蔗糖8g加入15mL注射用水 中，攪拌使溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7作為水相；在攪拌下，將無(wú)菌注射用水緩 慢加入油相/表面活性劑混合物中，得到帶乳光的溶液；加入150mg HA的流感抗原（B/ Brisbane/60/2008)，加水至20mL，攪勻，0. 22 μ m濾膜濾過(guò)；使用Labconco冷凍干燥箱進(jìn)行 干燥(凍干程序如表1)。
[0057] 稱取海藻酸鈉6g，與所得凍干含藥粉體及載體混合，使總重為20g，按照2mg/劑 (即15 μ g/劑）灌裝于鼻用粉霧劑裝置中，即得疫苗組合物。
[0058] 表1凍干程序設(shè)置
[0059]

【權(quán)利要求】
1. 一種鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，其包括如下原料組分： (1) 0· 05% ?5% 抗原； (2) 0· 3 ?45% 油相； (3) 0.3?45%表面活性劑； (4) 2?20%黏膜黏附劑；和 (5) 4?40%凍干賦形劑； 所述百分比為各成分占原料總量的質(zhì)量百分比。
2. 如權(quán)利要求1所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，所述抗原選自流感病 毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和破傷風(fēng)病毒抗原中的任一種。
3. 如權(quán)利要求1所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，所述油相選自角鯊烯、 角鯊?fù)?、中鏈甘油三酸酯、魚(yú)油、橄欖油和大豆油中的一種或多種；所述表面活性劑選自吐 溫、聚乙二醇-12-羥基硬脂酸酯、聚乙二醇-12-羥基硬脂酸酯和磷脂的混合物以及吐溫與 磷脂的混合物中的一種或多種；所述黏膜黏附劑選自殼聚糖、羧甲基纖維素鈉、海藻酸鈉、 卡波姆和羥丙甲纖維素中的一種或多種；所述凍干賦形劑選自乳糖、蔗糖、海藻糖、菊糖、氨 基酸和甘露醇中的一種或多種。
4. 如權(quán)利要求3所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，所述油相選自角鯊烯、 角鯊?fù)楹椭墟湼视腿狨ブ械囊环N或多種；所述磷脂選自大豆磷脂、卵磷脂、蛋黃卵磷脂和 氫化大豆磷脂中的一種或多種；所述凍干賦形劑選自海藻糖、乳糖、菊糖和甘露醇中的一種 或多種。
5. 如權(quán)利要求1所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，所述的原料還包括不 超過(guò)8%的緩沖劑，所述百分比為緩沖劑占原料總量的質(zhì)量百分比；所述的緩沖劑選自磷酸 鹽、4-羥乙基哌嗪乙磺酸和枸櫞酸中的一種或多種。
6. 如權(quán)利要求1所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑，其特征在于，所述的原料還包括不 超過(guò)60%的載體，所述百分比為載體占原料總量的質(zhì)量百分比；所述載體為羧甲基纖維素 鈉和乳糖的混合物。
7. 如權(quán)利要求1?6任一項(xiàng)所述的鼻用疫苗組合物粉體制劑的制備方法，其特征在于， 其包括如下步驟： (1) 將油相和表面活性劑混合，攪拌并加入水，得佐劑； (2) 將步驟（1)制得的佐劑與抗原混合后，冷凍干燥得粉末，即得。
8. 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，在步驟（2)之后還包括步驟（3):將步 驟（2)所得的粉末過(guò)篩，然后分裝保存。
9. 如權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，在步驟（1)之前還包括步驟（a)，且步驟 (3)替換為步驟（3'）；所述的步驟（a)為：將羧甲基纖維素鈉溶于水制得粘合劑，再將乳糖 加入所述粘合劑中，混合均勻，制粒、整粒并烘干，得載體；所述的步驟（3'）為：將步驟（2) 所得的粉末與步驟（a)制得的載體混合均勻，即得。
10. 如權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，在步驟（3'）之后將步驟（3'）中混合 均勻所得產(chǎn)物過(guò)篩，然后分裝保存。
【文檔編號(hào)】A61K39/145GK104208029SQ201310211875
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2013年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月30日
【發(fā)明者】金方, 蔡偉, 惠王穎 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院