金合歡提取物在抗衰老中的應用的制作方法
【專利摘要】一種金合歡的提取物，應用于皮膚抗衰老領域，該提取物先使用極性溶劑進行提取，所得粗提液經(jīng)吸附樹脂吸附并以水和乙醇組成的洗脫液洗脫后制得。本發(fā)明以單一的金合歡植物為原材料制取，簡單高效，對彈性蛋白酶活性具有抑制作用，能顯著清除自由基。以該提取物為活性成分制成食品、動物用飼料、藥品、準藥品和化妝品等產(chǎn)品。
【專利說明】金合歡提取物在抗衰老中的應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物提取物的用途，尤其涉及一種金合歡植物的提取物，作為抗 衰老劑在化妝品，或在食品、動物用飼料、藥品和準藥品等中的應用。

【背景技術】
[0002] "金合歡"是指豆科金合歡屬植物，如：阿拉伯膠樹、阿拉伯金合歡、大葉相思、鈍葉 金合歡、兒茶、粉被金合歡、光葉金合歡、黑荊、灰金合歡、尖葉相思、金合歡、臺灣相思、藤金 合歡、無刺金合歡、線葉金合歡、綠荊、銀荊、羽葉金合歡和云南相思樹等，這些植物的花蕾、 枝干、根莖、樹皮和樹葉部分均可用于制取抑制彈性蛋白酶的提取物，優(yōu)選源自豆科金合歡 屬植物黑荊（Acacia mearnsii De Wild.)，尤其是其花蕾、樹皮和樹葉。從黑荊中提取物 的多酚化合物可用于防止皮膚干燥，抑制特異性皮炎引起的瘙癢（Evid Based Complement Alternat Med. 2012, doi :10. 1155/2012/120389)。研究顯示黑荊多酚提取物具有抑制脂 肪酶和糖苷酶的活性，可以減少血脂和血糖的水平，具有減肥的功效。在歐洲，黑荊樹皮中 提取的多酚被用于消除葡萄酒的沉積物。澳大利亞原住民則將黑荊的嫩葉和果實作為食 物。研究顯示一天攝入3000mg/kg黑荊水醇提取物的大白鼠沒有出現(xiàn)死亡，15天每天攝入 300mg/kg和600mg/kg黑荊提取物的小白鼠沒有表現(xiàn)出任何顯著的體重變化，也未發(fā)現(xiàn)血 液和生化指標的改變。說明黑荊提取物在急性和亞急性毒性方面是安全的。
[0003] 彈性蛋白酶（Elastase，CAS No. 39445-21-1)是一種分布于多種組織和細胞中的 破壞性酶，它能水解結(jié)締組織成分如：彈性蛋白、蛋白多糖和某些膠原質(zhì)。結(jié)締組織蛋白質(zhì) 中的彈性蛋白被彈性蛋白酶消化分解后，可使皮膚失去彈性，表現(xiàn)出皮膚松弛、顯露暗紋和 出現(xiàn)皺紋等皮膚衰老現(xiàn)象。
[0004] 目前，尚未發(fā)現(xiàn)金合歡在抗衰老領域中的應用，尤其未涉及抑制彈性蛋白酶相關 技術方案。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的一個目的在于提供一種金合歡的提取物，具有抑制彈性蛋白酶活性的作 用。
[0006] 本發(fā)明的另一個目的在于提供一種金合歡的提取物，用于皮膚的抗衰老護理，使 皮膚的緊致得到增強，皮膚彈性得以提高，顯著減少暗紋和皺紋。
[0007] 本發(fā)明的又一個目的在于提供一種金合歡的提取物，作為活性組分應用于食品、 動物用飼料、藥品、準藥品和化妝品等產(chǎn)品。
[0008] 本發(fā)明所稱的"金合歡"是指金合歡屬植物，如：阿拉伯膠樹、阿拉伯金合歡、大葉 相思、鈍葉金合歡、兒茶、粉被金合歡、光葉金合歡、黑荊、灰金合歡、尖葉相思、金合歡、臺灣 相思、藤金合歡、無刺金合歡、線葉金合歡、銀荊、綠荊、羽葉金合歡和云南相思樹等，這些植 物的花蕾、枝干、根莖、樹皮和樹葉部分均可用于制取抑制酪氨酸酶的提取物，優(yōu)選選擇源 自豆科金合歡屬植物澳洲金合歡（Acacia dealbata link.)，尤其是其花蕾、樹皮和樹葉。
[0009] 本發(fā)明所稱的"提取物"是指提取自金合歡的含有一種或多種具有抑制酪氨酸酶 活性物質(zhì)的組合物或混合物。各個活性物質(zhì)按比例簡單混合，或與其它物質(zhì)形成另一種形 式，如：但不僅限于膠束、脂質(zhì)體和懸濁液等。
[0010] 本發(fā)明所稱的"活性物質(zhì)"或"活性成分"是指通過體外酶抑制實驗證明能夠抑制 酪氨酸酶活性的化合物、聚合物、核酸、多肽、蛋白質(zhì)及各自以離子鍵、共價鍵、配位鍵或疏 水相互作用等化學鍵形成的復合物和結(jié)合物。
[0011] 本發(fā)明所稱的"加工"或"預加工"應理解為以物理方式對原材料進行的分解或拆 分，以各種方式(如：切、鋸、壓、研磨、攪拌或粉碎等）將體積較大的材料分為體積較小的材 料，如：段狀、塊狀、片狀、條狀、顆粒狀、粉狀或末狀。
[0012] 本發(fā)明所稱的"極性溶劑"是指含有羥基或羰基等極性基團的有機溶劑，如：但 不僅限于水、甲酰胺、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、四甲基乙二胺、三乙胺、三丁胺、三辛 胺、乙酸、三氟乙酸、乙腈、甲酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、二甲亞砜、丙酮、甲乙酮、二氧 六環(huán)、吡啶、四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇和乙醚等一種或幾種，優(yōu)先選擇乙醇水 溶液，濃度為 30v/v%-90v/v%，或為 50v/v%-90v/v%，或為 30v/v%-39v/v%、40v/v%-49v/v%、 50v/v%_70v/v% 和 70v/v%_90v/v% 之一種或幾種，或為 50v/v%、55v/v%、60v/v%、65v/v%、 66v/v%>67v/v%> 68v/v%> 69v/v%> 70v/v%> 71v/v%> 72v/v%> 73v/v%> 74v/v%> 75v/v%> 76v/v%> 77v/v%、78v/v%、79v/v%、80v/v%、81v/v%、82v/v%、83v/v%、84v/v%、85v/v%、86v/v%、87v/v%、 88v/v%、89v/v% 和 90v/v% 之一種或幾種。
[0013] 本發(fā)明所稱的"吸附樹脂"是本領域一般技術人員的所了解的大孔吸附樹脂，優(yōu) 先選擇弱極性的或中等極性的吸附樹脂，如：但不僅限于X-5、AB-8、D101、XDA-6、LX-21、 NK-9、D3520和WLD等，尤其是AB-8樹脂。
[0014] 本發(fā)明中，浸泡金合歡所用的極性溶劑量并沒有特別的限定，應使金合歡與極性 溶劑充分接觸。由于原材料通常具有較大的體積，堆疊一起而占據(jù)較多空間，因此需要相 當?shù)臉O性溶劑，如：但不僅限于使用重量10-60倍于金合歡的極性溶劑即可實現(xiàn)對金合歡 原材料的浸泡，并取得良好的效果?？蓱糜诒景l(fā)明的重量倍數(shù)如：但不僅限于10-50、 10-20、20-50,以及 10、15、20、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59 和 60。
[0015] 如技術人員通常所能理解的，在用極性溶劑浸泡金合歡階段，提高金合歡與溶劑 的接觸面積能顯著提高物質(zhì)的溶出率，從而提高活性成分的提取效果。因此，用于浸泡的 金合歡也應理解為已進行過加工，如：切成塊、片和條，尤其是制成粉末(如：平均粒徑小于 2. 5mm)〇
[0016] 極性溶劑能浸潤金合歡，但活性物質(zhì)的浸出率或溶出率仍較低，有必要采用進一 步方法如：但不僅限于煎、煮、回流、攪拌、勻漿和超聲等提取方式，以提高作業(yè)效率。這些方 法可單獨或組合使用，也可以重復多次。上述提取方式經(jīng)適量的時間（不超過2小時)如：但 不僅限于〇. 5-1. 0小時，0. 5-2. 0小時以及1. 0-2. 0小時等即可增加活性物質(zhì)的浸出率或溶 出率。
[0017] 洗脫液洗脫是本發(fā)明獲得活性物質(zhì)的關鍵步驟之一，有助于提取物對酪氨酸酶 抑制效果的提高，但是其洗脫的具體方式，如：線性梯度洗脫、等度洗脫和階梯式梯度洗脫 等不得限定本發(fā)明。為了適應生產(chǎn)規(guī)模和分離介質(zhì)(如：吸附樹脂）的需要，本領域技術人 員可選擇并適用任何一種或幾種洗脫方式，并收集相應的洗脫液。本發(fā)明提供的洗脫方 式，如：以水和乙醇組成洗脫液，依次以水、20v/v%±5v/v%乙醇、40v/v%±5v/v%乙醇、60v/ v%±5v/v%乙醇和80v/v%±5v/v%乙醇進行洗脫，并分別收集洗脫液；又如：以水和乙醇 組成洗脫液，依次以水、40v/v%±5v/v%乙醇和80v/v%±5v/v%乙醇進行洗脫，并分別收集 洗脫液；再如：以水和乙醇組成洗脫液，進行20v/v%-80v/v%乙醇、20v/v%-60v/v%乙醇或 30v/v%-50v/v%乙醇線性梯度洗脫，并收集洗脫液。
[0018] 本發(fā)明提供的一種金合歡的提取物，其按如下方法制得：
[0019] 使用極性溶劑對金合歡進行提取，如：但不僅限于施以煎、煮、回流、攪拌、勻漿和 超聲之一種或幾種提取方式處理而得金合歡粗提液，再經(jīng)吸附樹脂吸附后，以水和乙醇組 成的洗脫液洗脫，并收集洗脫液而得。
[0020] 經(jīng)測定，本發(fā)明制得各種金合歡的提取物，具有抑制彈性蛋白酶和清除自由基活 性的作用。進一步實驗驗證，以此護理皮膚具有抗衰老效果，可應用于食品、動物用飼料、藥 品、準藥品和化妝品等產(chǎn)品。
[0021] 本發(fā)明技術方案實現(xiàn)的有益效果：
[0022] 本發(fā)明以單一的金合歡植物為原材料，尤其是金合歡植物的花蕾、樹皮和樹葉，使 產(chǎn)品質(zhì)量可控，效用穩(wěn)定。
[0023] 本發(fā)明先使用極性溶劑進行提取，所得粗提液經(jīng)吸附樹脂吸附并洗脫后制得金合 歡提取物。該技術方案簡單高效，適合于以工業(yè)化方式對金合歡植物中的活性物質(zhì)進行提 取、利用和開發(fā)。
[0024] 本發(fā)明制取提取物的方法安全可靠，所得提取物具有抑制彈性蛋白酶和清除自由 基的作用，可作為活性成分制成食品、動物用飼料、藥品、準藥品和化妝品等產(chǎn)品，用于增強 皮膚緊致度，提高皮膚彈性，以及減少暗紋和皺紋等。

【具體實施方式】
[0025] 以下詳細描述本發(fā)明的技術方案。本發(fā)明實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而 非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解， 可以對發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的精神和范圍， 其均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍中。
[0026] 實施例1金合歡提取條件的優(yōu)選
[0027] 新鮮金合歡10g，采用L9 (34)正交試驗(藥物研究常用數(shù)學方法及計算機程序[P]， 貴州科技出版社，1997)進行提取工藝的優(yōu)化，以料液比（A)、乙醇濃度（B)、提取時間（C)為 試驗因素，以及空白列（D)。以提取率為指標進行正交設計試驗，優(yōu)化提取工藝條件。因素 水平設計見表1，其中從生產(chǎn)成本考慮，提取時間一般不超過2小時，結(jié)果見表2。
[0028] 表1正交試驗因素水平
[0029]

【權利要求】
1. 一種金合歡的提取物在皮膚抗衰老領域的應用。
2. -種金合歡的提取物在抑制彈性蛋白酶酶活性中的應用。
3. -種金合歡的提取物用于清除自由基。
4. 根據(jù)權利要求1-3之一所述的金合歡提取物的應用，其特征在于用于制成食品、動 物用飼料、藥品、準藥品或化妝品。
5. 根據(jù)權利要求1-3之一所述的金合歡提取物的應用，其特征在于所述的金合歡提取 物按如下方法制得：使用極性溶劑對金合歡進行提取處理而得金合歡粗提液，再經(jīng)吸附樹 脂吸附后，以水和乙醇組成的洗脫液洗脫，并收集洗脫液而得。
6. 根據(jù)權利要求5所述的金合歡的提取物的應用，其特征在于所述極性溶劑為乙醇水 溶液。
7. 根據(jù)權利要求5所述的金合歡的提取物的應用，其特征在于所述乙醇水溶液的濃度 為 50v/v% - 90v/v%。
8. 根據(jù)權利要求5所述的金合歡的提取物的應用，其特征在于所述極性溶劑的用量為 金合歡重量的10-60倍。
9. 根據(jù)權利要求5所述的金合歡的提取物的應用，其特征在于所述洗脫液為20v/ v%_80v/v% 乙醇。
10. 根據(jù)權利要求5所述的金合歡的提取物的應用，其特征在于所述吸附樹脂為AB-8。
【文檔編號】A61K8/97GK104147088SQ201310179837
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2013年5月15日 優(yōu)先權日:2013年5月15日
【發(fā)明者】方兆華, 李慧, 夏增華, 曹平 申請人:伽藍（集團）股份有限公司