專利名稱：脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及脂肪酸類化合物，特別涉及脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來，伴隨著藥學(xué)和生命科學(xué)研究的飛速進(jìn)展，惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡、血管生成以及細(xì)胞與胞外基質(zhì)的相互作用等各種基本過程正漸被闡明。以一些與腫瘤細(xì)胞分化增殖相關(guān)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵酶(如蛋白酪氨酸激酶)作為藥物篩選靶點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)選擇性作用于特定靶位的高效、低毒、特異性強(qiáng)的新型抗腫瘤藥，即分子靶向藥(molecular targeted drugs)和抗體革巴向藥(antibody targeted drugs),已成為當(dāng)今抗癌藥研發(fā)的重要方向(1、張石革.腫瘤靶向 治療藥物的進(jìn)展與臨床評價.中國醫(yī)院用藥評價與分析.2009; 9 (I): 4-7)。在癌癥的起始和發(fā)展過程中，蛋白酪氨酸磷酸化起著非常重要的作用。而蛋白酪氨酸磷酸化水平取決于蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)之間的平衡。蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是當(dāng)今公認(rèn)的腫瘤治療的重要靶點(diǎn)，在癌癥的治療中起著非常重要的作用。與PTKs的作用相反，PTPs能夠促進(jìn)腫瘤的生長。所以，PTPs抑制劑的發(fā)現(xiàn)將對癌癥的治療提供廣闊前景(2、Scott LM, Chen Lff, Daniel KG, Brooks WH, GuidaWCj Lawrence HR, et al.Shp2protein tyrosine phosphatase inhibitor activityof estramustine phosphate and its triterpenoid analogs.Bioorg Med ChemLett.2011;21 (2):730-733)。PTP-SHP2，是一種非受體蛋白酪氨酸磷酸酶，它由PTPNll基因編碼，在人體內(nèi)多種器官廣泛表達(dá)。它由N端的2個SH2結(jié)構(gòu)域，中間的PTP結(jié)構(gòu)域及C末端組成。在癌細(xì)胞中，SHP2通常會被一些生長因子受體激活，進(jìn)而調(diào)節(jié)下游蛋白的磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞生長。在原癌基因引起的惡性腫瘤中，PTP-SHP2通常被激活?？傊?，PTP-SHP2在細(xì)胞信號調(diào)節(jié)中發(fā)揮正調(diào)控作用，促進(jìn)細(xì)胞生長。隨著癌癥的靶點(diǎn)治療越來越得到大家的認(rèn)可，PTP-SHP2也成為了大家研究的熱點(diǎn)。如今，它已經(jīng)成為人們公認(rèn)的尋找抗癌藥物的重要革巴標(biāo)。一些合成的PTP-SHP2特異性抑制劑也已被發(fā)現(xiàn)，如phenylhydrazonopyrazolonesulfonate (3、Hellmuth K,Grosskopf S，Lum CT, Wurtele M, Roder N，von Kries JP, etal.Specific inhibitors of the protein tyrosine phosphatase Shp2identified byhigh-throughput docking.Proc Natl Acad Sci U S A.2008;105 (20):7275-7280)和 8_hydroxy-7- (6-sulfonaphthalen-2-yl)diazenyl-quinoline-5-sulfonicacid(NSC-87877)(4、Chen L, Sung SS, Yip ML, Lawrence HR, Ren Y, Guida WC, et al.Discovery of a novelshp2protein tyrosine phosphatase inhibitor.Mol Pharmacol.2006;70(2):562-570)。中國傳統(tǒng)中藥(TCM)在已有幾千年的藥用歷史，它具有化學(xué)成分多樣和結(jié)構(gòu)復(fù)雜雙重優(yōu)勢，是尋找PTP-SHP2特異性抑制劑的良好資源，這是化學(xué)合成藥無法匹敵的。Caspases是一組存在于胞質(zhì)溶膠中的結(jié)構(gòu)上相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶，目前已確定至少存在11種caspase,其中，caspasel和caspasell,以及可能還有caspase4被認(rèn)為不直接參與凋亡信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，它們主要參與白介素前體的活化；而caspase2，caspase8，caspase9和caspase 10參與細(xì)胞凋亡的起始；參與細(xì)胞凋亡執(zhí)行的則是caspase3,caspase6和caspase7,其中caspase3和7具有相近的底物和抑制劑特異性，它們降解PARP, DFF-45 (DNA fragmentation factor-45),導(dǎo)致 DNA 修復(fù)的抑制并啟動 DNA 的降解。目前認(rèn)為細(xì)胞凋亡的起始者(caspase2，8，9和10)和執(zhí)行者(caspase3，6，7)之間存在著上下游關(guān)系，即起始者活化執(zhí)行者(5、朱愿，馬勇，陳立軍.Caspase與細(xì)胞凋亡.武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).2004; 13 (4): 346-348)。caspase-3在細(xì)胞凋亡中起著不可替代的作用，最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP (poly (ADP-ribose) polymerase)，該酶與DNA修復(fù)、基因完整性監(jiān)護(hù)有關(guān)。在細(xì)胞凋亡啟動時，116kD的PARP在Asp216-Gly217之間被caspase-3剪切成31kD和85kD兩個片段，使PARP中與DNA結(jié)合的兩個鋅指結(jié)構(gòu)與羧基端的催化區(qū)域分離，不能發(fā)揮正常功能。結(jié)果使受PARP負(fù)調(diào)控影響的Ca2+/Mg2+依賴性核酸內(nèi)切酶的活性增高，裂解核小體間的DNA，引起細(xì)胞凋亡。caspase-8具有FADD樣DED結(jié)構(gòu)域，并且能夠通過DED結(jié)構(gòu)域與FADD結(jié)合，所以caspase-8可以在凋亡過程中間接與細(xì)胞膜受體發(fā)生聯(lián)系，從而將細(xì)胞膜事件轉(zhuǎn)化為細(xì)胞衆(zhòng)事件。caspase-8在死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中起著重要作用。而caspase_9在線粒體途徑中對細(xì)胞凋亡有重要作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用。所述肪酸類化合物包括:化合物I，化合物I為油狀物，化學(xué)名為10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式為C19H34O2,分子量為294,結(jié)構(gòu)式為:`
權(quán)利要求
1.脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述肪酸類化合物包括: 化合物1，化合物I為油狀物，化學(xué)名為10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式為C19H34O2,分子量為294,結(jié)構(gòu)式為:
2.如權(quán)利要求1所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述脂肪酸類化合物的制備方法，包括以下步驟: 1)使用乙醇對白芷進(jìn)行煮沸回流，過濾，收集濾液，即得白芷提取液； 2)將所得白芷提取液進(jìn)行萃取，萃取所得溶液進(jìn)行真空干燥，即得白芷粗提物； 3)將白芷粗提物進(jìn)行硅膠柱層析，再進(jìn)行反相硅膠柱層析，分別得化合物1，化合物2，化合物3。
3.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于在步驟I)中，所述乙醇的濃度為60%，所述乙醇體積與白芷質(zhì)量的比例為IOL: Ikg,其中乙醇以體積計(jì)，白芷以質(zhì)量計(jì)。
4.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于在步驟I)中，所述煮沸回流的時間為2 3h。
5.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于在步驟2)中，所述萃取的溶劑為乙酸乙酯。
6.如權(quán)利要求5所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述萃取的溶劑與白芷提取液的體積之比為1:1。
7.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于在步驟3)中，所述硅膠柱層析的具體步驟:將白芷粗提物，加入硅膠，干燥得到硅膠層析樣品；將硅膠層析樣品置于硅膠柱頂部，以體積之比為100: 0,99: 1,98: 2,95: 5，10: 1,5: 1,0: 100的氯仿-甲醇溶液為洗脫劑，進(jìn)行硅膠柱梯度洗脫，收集氯仿-甲醇體積比為99: I和95: 5的洗脫液，蒸干，即得白芷柱層析樣品；所得白芷柱層析樣品再經(jīng)硅膠柱色譜和ODS柱色譜即得化合物1，化合物2和化合物3。
8.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于在步驟2)中，所述反相硅膠柱層析的流動相為甲醇-水或乙腈-水溶液。
9.如權(quán)利要求8所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈-水的體積比為(0.25 9): I。
10.如權(quán)利要求9所述的脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈- 水的體積比為(0.4 4): 1，最好為1.85: I。
全文摘要
脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用，涉及脂肪酸類化合物。提供脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療肝癌藥物中的應(yīng)用。使用乙醇對白芷進(jìn)行煮沸回流，過濾，收集濾液，即得白芷提取液；將所得白芷提取液進(jìn)行萃取，萃取所得溶液進(jìn)行真空干燥，即得白芷粗提物；將白芷粗提物進(jìn)行硅膠柱層析，再進(jìn)行反相硅膠柱層析，分別得化合物1，化合物2，化合物3。所述脂肪酸類化合物可制備成PTP-SHP2的特異性抑制劑，通過抑制蛋白酪氨酸磷酸酶從而發(fā)揮抗癌以及預(yù)防和治療與蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-SHP2相關(guān)的人類疾病的作用。所述脂肪酸類化合物在制備預(yù)防和治療癌癥藥物中具有廣泛的應(yīng)用。
文檔編號A61P35/00GK103181918SQ201310112138
公開日2013年7月3日 申請日期2011年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月4日
發(fā)明者陳海峰, 呂忠顯, 陳全成, 劉東萍, 崔傳文, 孔桂萍, 李陽 申請人:廈門大學(xué)