專利名稱：一種增加骨密度的中藥保健制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥保健品制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種增加骨密度的中藥保健制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
骨密度(BMD)全稱是骨骼礦物質(zhì)密度，是骨骼強(qiáng)度的一個(gè)重要指標(biāo)，骨組織的強(qiáng)度有75% 85%與骨密度有關(guān)。骨密度指骨單位面積的骨質(zhì)密度，是指骨組織結(jié)合的緊密程度，通常指骨礦物含量。是目前衡量骨質(zhì)疏松的一個(gè)客觀的量化的指標(biāo)，也是反映骨量的一個(gè)指標(biāo)，其單位為G/CM2，骨密度越高，骨質(zhì)強(qiáng)度越好。它與骨骼結(jié)構(gòu)、骨量、骨礦物含量等因素相關(guān)。隨著年齡的老化，周身各骨骼的骨密度均呈逐漸下降趨勢(shì)，股骨頸的骨密度在20-90歲之間，女性要下降58%，男性要下降39% ;股骨粗隆間區(qū)則分別下降53%及35%。骨密度下降到一定程度，易于發(fā)生骨折。骨密度下降的機(jī)理是骨代謝失衡，人在35歲前骨代謝旺盛，攝入的鈣很快吸收進(jìn)入骨骼中沉淀，骨骼生長(zhǎng)再生迅速，此時(shí)骨最強(qiáng)壯。由于骨骼中成骨細(xì)胞的作用，在此期間骨形成大于骨丟失。女性35歲、男性40歲后，由于胃腸功能減弱，骨營(yíng)養(yǎng)吸收減小而流失增加，骨形成和骨破壞失去平衡。表現(xiàn)骨結(jié)構(gòu)中骨小梁破壞，變細(xì)、斷裂、間隙變大、中空。中醫(yī)認(rèn)為骨密度下降起因有二，一為腎精不足，中醫(yī)學(xué)理論中有“腎主骨，生髓充腦，其華在發(fā)”之說(shuō)，故腎精不足則筋骨無(wú)力；二為脾腎氣虛，脾虛失運(yùn)化之功則腎精虧虛，骨骼失養(yǎng)，故而脆弱無(wú)力。 根據(jù)骨密度缺少產(chǎn)生原因和作用機(jī)理的不同，可以選擇不同的方法增加骨密度，如可以直接補(bǔ)充鈣質(zhì)、補(bǔ)充維生素D及其活性產(chǎn)物促進(jìn)鈣吸收；以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，則有補(bǔ)腎壯陽(yáng)，益氣健脾、活血調(diào)肝等方法。調(diào)查顯示:年齡與性別是影響人骨密度的因素之一。嬰兒至青春期骨密度含量隨年齡增長(zhǎng)而增加，且無(wú)明顯性別差異。青春期之后，骨密度的增加男性較女性顯著，30-40歲達(dá)到最高峰值。以后骨密度隨年齡的增長(zhǎng)逐漸下降，女性下降幅度較男性大。有資料記載對(duì)50-65歲婦女橈骨遠(yuǎn)端進(jìn)行測(cè)量，影響骨密度的骨礦物質(zhì)含量下降率為0.0118g/cm2/year ；一個(gè)65歲老年人其橈骨遠(yuǎn)端的骨礦含量比骨峰值下降了 39%左右。體重、身高也是影響人骨密度的因素之一。男性和絕經(jīng)期前的婦女骨密度與身高呈正相關(guān)，絕經(jīng)前和絕經(jīng)后的婦女骨密度與體重呈正相關(guān)。運(yùn)動(dòng)和飲食對(duì)人骨密度的影響也相當(dāng)大。實(shí)際觀測(cè)證明運(yùn)動(dòng)員的骨密度明顯高于對(duì)照組。攝入鈣相同的情況下，從事體力勞動(dòng)的人比不活動(dòng)的人可保持較高的骨骼健康狀態(tài)。骨專家的研究表明高鈣飲食的婦女其平均橈骨骨密度高于低鈣飲食的婦女。在國(guó)際骨質(zhì)疏松基金會(huì)(IFO) 2004年世界骨質(zhì)疏松大會(huì)上，英國(guó)謝菲爾德大學(xué)WHO代謝性骨病研究中心Johnell等對(duì)12個(gè)臨床研究進(jìn)行分析，該研究納入12個(gè)人群研究中的3萬(wàn)9千人。發(fā)現(xiàn)骨密度值越低，骨質(zhì)疏松性骨折(和各種類型骨折)的概率越高，這種情況在65歲年齡組中規(guī)律最為明顯。據(jù)聯(lián)合國(guó)統(tǒng)計(jì)老齡化己成為21世紀(jì)不可逆轉(zhuǎn)的世界性趨勢(shì)。而中國(guó)已于1999年進(jìn)入老齡化社會(huì)。中國(guó)社會(huì)老齡化速度快于全國(guó)總?cè)丝谠鲩L(zhǎng)速度，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國(guó)60歲以上的老年人骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率約為59.89%，因此增加骨密度、有效治療骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)成為人們廣泛關(guān)注的重要課題。目前市場(chǎng)上增加骨密度產(chǎn)品大致可以分為以下幾類:一類是含鈣的、通過(guò)直接補(bǔ)充鈣質(zhì)而達(dá)到增加骨密度目的的保健食品；二類是不含鈣或者不以補(bǔ)鈣為目的，而是通過(guò)調(diào)整內(nèi)分泌而促進(jìn)鈣的吸收從而達(dá)到增加骨密度這一目的的保健食品。查閱國(guó)產(chǎn)保健食品批件庫(kù)，與增加骨密度功能相關(guān)的產(chǎn)品共占到國(guó)產(chǎn)保健食品的2.93%。統(tǒng)計(jì)數(shù)字表明，目前市場(chǎng)上增加骨密度的保健食品為數(shù)不多。在中藥領(lǐng)域中具有保健功能的保健功藥材可篩選成分:
牛骨粉:牛骨頭營(yíng)養(yǎng)豐富，與鮮肉的營(yíng)養(yǎng)成分作比較，它的蛋白質(zhì)、鐵、鈉和產(chǎn)生的能量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于鮮肉。其蛋白質(zhì)高出奶粉23%，是豬肉的兩倍，高出牛肉61%，是雞蛋的I倍多；至于磷、鈣含量更是其它食物所不能比擬的。尤其難得的是，它的營(yíng)養(yǎng)成分比植物性食品更易為人體所吸收。另外，動(dòng)物骨中所含的骨髓自古就有“補(bǔ)精髓、壯筋骨、延年益壽”的記載，古籍《壽世真元》認(rèn)為:骨髓“專補(bǔ)虛損，活血榮筋，潤(rùn)澤肌膚，返老還童”。骨髓是抗衰老的造血器官，能增進(jìn)人體的造血機(jī)能，提高肌體免疫力，脊椎動(dòng)物骨髓中含有人體所需的全部營(yíng)養(yǎng)精華，有促進(jìn)兒童大腦發(fā)育、健腦增智之功效的卵磷脂；有滋潤(rùn)皮膚、美容養(yǎng)顏、防衰老的骨膠原、多種氨基酸和多種蛋白肽等。但是如何全面吸取骨頭中豐富的營(yíng)養(yǎng)一直是困擾人們的難題，許多國(guó)家對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)研究，最終發(fā)現(xiàn)骨粉是解決難題的突破點(diǎn)。文獻(xiàn)表明，牛骨粉為天然補(bǔ)鈣佳品，中小學(xué)生每日攝取兩克黃牛骨粉即可補(bǔ)足膳食供給量的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[1]。王淑芳等[2]對(duì)牛骨粉的加工方法及其主要營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，根據(jù)測(cè)定結(jié)果，發(fā)現(xiàn)骨粉中含蛋白質(zhì)24 %、f丐23.3 %、憐9.21 %,并有16種以上的氣基酸和人體必需的全部14種微量元素。由大白鼠試驗(yàn)看出，黃牛骨粉鈣對(duì)人體的生物利用率優(yōu)于無(wú)機(jī)鈣。馬丹丹[3]等將90只SPF級(jí)4周齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為9組:酶解牛骨粉、超微酶解牛骨粉、酶解魚(yú)骨粉、碳酸鈣低、高劑量組以及低鈣對(duì)照組，喂養(yǎng)13周。于試驗(yàn)第3周末做代謝試驗(yàn)，測(cè)量鈣吸收率和骨密度。發(fā)現(xiàn)酶解骨粉鈣表觀吸收率34.0% 67.93%，均明顯低于低鈣對(duì)照組(87.1% );碳酸鈣高劑量組鈣表觀吸收率高于相應(yīng)劑量試驗(yàn)組(P < 0.05)，其他各組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P >0.05)。酶解骨粉各組大鼠股骨中點(diǎn)、遠(yuǎn)心端和近心端骨密度均明顯高于低鈣對(duì)照組(P <0.05);酶解牛骨粉、超微酶解牛骨粉和酶解魚(yú)骨粉組一點(diǎn)或兩點(diǎn)骨密度高于相應(yīng)劑量碳酸鈣組(P < 0.05)。以上結(jié)果表明酶解牛骨粉、超微酶解牛骨粉、酶解魚(yú)骨粉均可有效改善大鼠的骨密度，其中超微酶解牛骨粉和酶解魚(yú)骨粉增加大鼠骨密度效果好于碳酸鈣。淫羊藿:淫羊藿，為小檗科多年生草本淫羊藿、心葉淫羊藿或箭葉淫羊藿的莖葉，主產(chǎn)于陜西、遼寧、山西、湖北、四川、廣西等地。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為淫羊藿性味辛甘、溫，有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、祛風(fēng)除濕的功效。淫羊藿莖葉含有淫羊藿甙和揮發(fā)油。
卞琴[4]等將50只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、淫羊藿苷組、補(bǔ)骨脂素組、齊墩果酸組(后3組合稱治療組)。模型組和治療組予皮質(zhì)酮皮下注射，每日1次，連續(xù)14天。正常對(duì)照組予等劑量橄欖油皮下注射。治療組皮質(zhì)酮注射前5天開(kāi)始按20mg/kg給予對(duì)應(yīng)藥物每日1次灌胃，連續(xù)19天。分別于造模第1、4、7、11和14天稱量體質(zhì)量，大鼠處死后取第4腰椎進(jìn)行Micro-CT掃描，評(píng)價(jià)骨量改變情況。采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)原代BMSC，于取材后第7天干細(xì)胞基因芯片技術(shù)檢測(cè)mRNA表達(dá)。發(fā)現(xiàn)造模和治療后各組大鼠體質(zhì)量沒(méi)有發(fā)生明顯變化。Micrc-CT顯示，皮質(zhì)酮注射14天后，模型組與正常對(duì)照組之間，治療組與模型組之間腰椎骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)未出現(xiàn)顯著變化。干細(xì)胞基因表達(dá)譜顯示在皮質(zhì)酮改變的基因中，淫羊藿苷、補(bǔ)骨脂素和齊墩果酸分別可逆轉(zhuǎn)11、12和15種基因。3個(gè)有效成分共同作用的基因有5種，涉及成骨分化、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞代謝和Notch信號(hào)通路。以上結(jié)果表明淫羊藿、補(bǔ)骨脂和女貞子等補(bǔ)腎中藥可能從BMSC周期調(diào)節(jié)和細(xì)胞代謝等方面發(fā)揮促進(jìn)BMSC成骨分化的作用，最終實(shí)現(xiàn)治療骨質(zhì)疏松的療效。李健英[5]等通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，壯骨靈膠囊(主要由白術(shù)、骨碎補(bǔ)、淫羊藿、菟絲子等組成)能夠促進(jìn)骨形成，調(diào)節(jié)骨代謝，在抗骨質(zhì)疏松方面有很好療效，而且有明顯鎮(zhèn)痛的作用，對(duì)維甲酸誘導(dǎo)的小鼠骨質(zhì)疏松癥有明顯防治作用。曲萍[6]等以維甲酸建立大鼠骨質(zhì)疏松模型，以淫羊藿總黃酮連續(xù)給藥28天，檢測(cè)血清鈣、血清磷、堿性磷酸酶水平的變化，并取股骨進(jìn)行骨鈣含量測(cè)定及股骨病理組織學(xué)檢查。發(fā)現(xiàn)各劑量的淫羊藿總黃酮對(duì)血清鈣、血清磷、堿性磷酸酶正常生理水平均無(wú)顯著影響，但均可增加股骨骨鈣含量、骨皮質(zhì)厚度及骨小梁數(shù)量。表明淫羊藿總黃酮對(duì)骨質(zhì)疏松癥具有明顯的預(yù)防和治療作用。女貞子:女貞子是木犀科女貞屬植物女貞的果實(shí)。女貞子又稱女貞實(shí)、冬青子、白蠟樹(shù)子、鼠梓子。該品呈卵形、橢圓形或腎形，表面黑紫色或灰黑色，皺縮不平，基部有果梗痕或具宿萼及短梗。體輕。外果皮薄，中果皮較松軟，易剝離，內(nèi)果皮木質(zhì)，黃棕色，具縱棱，破開(kāi)后種子通常為I粒，腎形，紫黑色，油性。無(wú)臭，味甘、微苦澀。原生于中國(guó)長(zhǎng)江流域及南方各地、河南、陜西、甘肅等地，北方不太寒冷的地方也有引種，在朝鮮南方、印度也有分布。女貞子味甘、苦，性涼。歸肝，腎經(jīng)。有補(bǔ)益肝腎，清虛熱，明目之效。作為補(bǔ)腎中藥，女貞子對(duì)骨質(zhì)疏松有較好療效，相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明女貞子可能從BMSC周期調(diào)節(jié)和細(xì)胞代謝等方面發(fā)揮促進(jìn)BMSC成骨分化的作用，最終實(shí)現(xiàn)治療骨質(zhì)疏松的療效[4]。趙勝m等選用wistar雌性大鼠，把摘除雙側(cè)卵巢的大鼠作為完全去勢(shì)動(dòng)物模型；把去勢(shì)左側(cè)卵巢，去勢(shì)右側(cè)卵巢的80%，同時(shí)保留20%右側(cè)卵巢的大鼠作為非完全去勢(shì)動(dòng)物模型。采用女貞子、淫羊藿、女貞子合淫羊藿進(jìn)行治療實(shí)驗(yàn)，以雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)水平、骨密度(BMD)、陰道脫落細(xì)胞成熟度、宮頸陰道病理切片為療效觀察指標(biāo)。并以更年寧心膠囊作對(duì)照。發(fā)現(xiàn)治療后女貞予完全及非完全去勢(shì)組、女貞子合淫羊藿完全及非完全去勢(shì)組、更年寧心完全及非完全去勢(shì)組E2水平均明顯升高(P均< 0.01)，F(xiàn)SH水平均明顯下降(P均<0.01);陰道脫落細(xì)胞成熟指數(shù)均明顯下降(P均<0.01);骨密度水平均明顯升高(P均<0.01);明顯改善了宮頸陰道上皮組織的形態(tài)(P均<0.01);其中以女貞子治療組的作用最明顯(P均<0.01)，有優(yōu)于更年寧心膠囊治療組的趨勢(shì)。治療后，無(wú)論在女貞子治療組還是更年寧心治療組，其非完全去勢(shì)組在E2水平的回升、FSH水平的降低、陰道脫落細(xì)胞成熟指數(shù)的降低、骨密度的增高、宮頸陰道上皮組織的改善方面都優(yōu)于完全去勢(shì)組(P均< 0.05)。以上結(jié)果表明單味中藥女貞子可以有效治療更年期綜合癥大鼠模型，推測(cè)該作用機(jī)制應(yīng)與其改善和促進(jìn)卵巢功能有關(guān)。結(jié)果還表明單味女貞子、女貞子合淫羊藿同用可以令更年期綜合癥大鼠的骨密度明顯增高。秦臘梅[8]等通過(guò)應(yīng)用UMR-106成骨細(xì)胞株，觀察通補(bǔ)強(qiáng)骨方中的四味主要藥物-淫羊藿、女貞子、黃芪、大黃對(duì)成骨細(xì)胞株增殖情況的影響。發(fā)現(xiàn)四種藥物在適當(dāng)濃度下均能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，其中淫羊藿、女貞子高濃度組(500m/L)較低濃度組(5mg/L)促增殖作用有上升趨勢(shì)。結(jié)果表明淫羊藿、女貞子在骨質(zhì)疏松癥的臨床治療中發(fā)揮著重要作用，在體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞系中，也有明顯促成骨細(xì)胞增殖作用。菟絲子:菟絲子屬于旋花科，菟絲子屬。別稱豆寄生、無(wú)根草。一年生寄生草本，缺乏根與葉的構(gòu)造。莖攀緣性，絲狀且光滑，淡黃色，植株以吸器附著寄主生存。菟絲子味辛、甘，性平。入肝、腎經(jīng)。有補(bǔ)肝腎，益精髓，明目之效。崔廣恒[9]等將58例原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患者隨機(jī)分為2組，治療組30例，對(duì)照組28例。治療組以鹿仙強(qiáng)骨湯(由鹿角膠、仙靈脾、杜仲、山萸肉、白術(shù)、巴戟、山藥、茯苓、菟絲子、牡丹皮、枸杞子、澤瀉組成)治療；對(duì)照組以碳酸鈣D3片600mg 口服，研究鹿仙強(qiáng)骨湯治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的臨床療效。發(fā)現(xiàn)總有效率治療組86.7%，對(duì)照組75.0%，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組，P < 0.05，治療組治療前后胸腰椎骨密度明顯升高，P < 0.05。結(jié)果表明組方中有菟絲子、枸杞子的鹿仙強(qiáng)骨湯治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松，療效顯著。錢楊佩娟[1°]等對(duì)40例絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松患者，予抗骨質(zhì)疏松中藥骨靈湯(由鹿茸、鹿角膠、菟絲子等組成)治療，3個(gè)月為一個(gè)療程。用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清E2水平，ELISA法檢測(cè)血清瘦素水平，雙能X線骨密度儀測(cè)定腰椎(L1-4)和Ward’ s三角區(qū)的骨密度。觀察骨靈湯對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者血清雌二醇、瘦素及骨密度的影響，進(jìn)一步探討骨湯治療絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制。結(jié)果表明補(bǔ)腎中藥骨靈湯可以升高絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者血清雌二醇、瘦素水平，增加骨密度，促進(jìn)骨形成，從而改善骨質(zhì)疏松。還有實(shí)驗(yàn)表明菟絲子提取液能顯著增加細(xì)胞基質(zhì)鈣，促進(jìn)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞的增殖和提高成骨細(xì)胞內(nèi)ALP活性；并能抑制體外培養(yǎng)破骨細(xì)胞的生存率，誘導(dǎo)其凋亡；血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)提示含藥血清也促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和分化的作用[11]。枸杞子:枸杞子為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實(shí)。其味甘、性平具有補(bǔ)肝益腎之功效，《本草綱目》中說(shuō)“久服堅(jiān)筋骨，輕身不老，耐寒暑?！蓖ㄟ^(guò)對(duì)鹿仙強(qiáng)骨湯治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的臨床療效進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)組方中有菟絲子、枸杞子的鹿仙強(qiáng)骨湯治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松，
療效顯著[9]。何小琦[12]將60例絕經(jīng)后被確診為骨質(zhì)疏松癥的患者隨機(jī)分為2組。2組同時(shí)服用鈣爾奇-D片，治療組加服補(bǔ)腎養(yǎng)血湯(處方:巴戟天、淫羊藿、金櫻子、枸杞子、當(dāng)歸、白茍、何首烏、大棗)治療。2組療程均為6月。觀察治療前后臨床療效及腰椎骨密度指標(biāo)的變化。發(fā)現(xiàn)其對(duì)絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏 松癥有較好療效，且對(duì)骨密度有明顯的提高作用。推測(cè)其機(jī)理可能是補(bǔ)腎養(yǎng)血湯促進(jìn)腎中精氣充盛，調(diào)節(jié)機(jī)體陰陽(yáng)平衡，從而提高性激素水平，促進(jìn)了活性維生素D在體內(nèi)的合成和吸收，并提高了鈣及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的利用，進(jìn)而提高了骨密度。賈冬[13]等人取體重150 200g大鼠40只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、造型對(duì)照組和骨疏康沖劑高、低劑量組?？瞻讓?duì)照組及造型組則每日灌服蒸餾水4ml/只，共4周。除空白對(duì)照組外，其余三組均在給藥同時(shí)給維甲酸70mg/kg.do連續(xù)給藥2周。于實(shí)驗(yàn)的第4周末.將各組動(dòng)物處死，取其股骨進(jìn)行病理切片檢查，并分別進(jìn)行骨強(qiáng)度、骨密度和骨鈣含量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，服用骨疏康沖劑(由枸杞子、黃芪、熟地黃等中藥組成)可使骨質(zhì)疏松癥大鼠的骨鈣含量、骨密度及骨強(qiáng)度均高于未服藥的單純骨質(zhì)疏松造型組。人參:人參,五加科多年生草本植物，喜陰涼、濕潤(rùn)的氣候，多生長(zhǎng)于晝夜溫差小的海拔500 1100米山地緩坡或斜坡地的針闊混交林或雜木林中。由于根部肥大，形若紡錘，常有分叉，全貌頗似人的頭、手、足和四肢，故而稱為人參。古代人參的雅稱為黃精、地精、神草。人參被人們稱為“百草之王”，是聞名遐邇的“東北三寶”(人參、貂皮、鹿茸)之一，是馳名中外、老幼皆知的名貴藥材。人參性平、味甘、微苦，微溫。歸脾、肺、心經(jīng)。有大補(bǔ)元?dú)?，?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津止渴，安神益智之功。能“補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目益智，久服延年輕身”。人參在強(qiáng)健骨骼方面也有較多應(yīng)用，其主要通過(guò)健脾益氣，補(bǔ)脾精以養(yǎng)腎精，最終達(dá)到填髓強(qiáng)骨的目的。徐富一 M等將SD大鼠的卵巢切除，以人為的方法誘導(dǎo)骨多孔癥，再給卵巢切除后誘發(fā)骨多孔·癥的大鼠投入人參提取液，然后，觀察脊椎骨的密度和骨無(wú)機(jī)質(zhì)成分的變化，發(fā)現(xiàn)人參投入組脊椎骨的密度和骨無(wú)機(jī)成分與卵巢切除組和偽手術(shù)組相比有顯著差異。結(jié)果表明人參對(duì)大鼠骨多孔癥有優(yōu)良效果。推測(cè)使用人參對(duì)人的骨多孔癥的治療將會(huì)顯示出比較優(yōu)良的效果。劉曉青[15]等將4.5月齡SD雌性大鼠，按體重隨機(jī)分為假手術(shù)組、去卵巢組、去卵巢后己烯雌酚陽(yáng)性用藥組、去卵巢人參用藥組，共給藥4周，除假手術(shù)組外，其余大鼠行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)，實(shí)驗(yàn)中取12h的尿做尿鈣測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取右尺骨測(cè)骨鈣和骨羥脯氨酸，取血清做血清中堿性磷酸酶和血總膽固醇測(cè)定。探討人參水煎劑用藥后，去卵巢大鼠生化指標(biāo)的變化。發(fā)現(xiàn)去卵巢4周后，血堿性磷酸酶有增加趨勢(shì)(P > 0.05)，血總膽固醇增力口(P <0.05)，尿鈣顯著增加(P <0.01);己烯雌酚用藥后尿鈣下降(P <0.05)，血總膽固醇F降(P < 0.05)，骨鈣含量和骨羥脯氨酸含量增加(P < 0.05);人參可使血堿性磷酸酶有增加趨勢(shì)(P>0.05)，尿鈣明娩下降(P <0.01)，血總膽同醇變化不明顯，骨鈣增加(P<0.05)。以上結(jié)果表明去卵巢大鼠骨量丟失，骨轉(zhuǎn)換率增高，出現(xiàn)明顯的骨質(zhì)疏松，在生化指標(biāo)變化上有表現(xiàn)，人參用藥后可使骨鈣增加，尿鈣下降，有一定的防治去卵巢大鼠骨丟失的作用。蘇華[16]等通過(guò)糖皮質(zhì)激素建立大鼠骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型，將SPF級(jí)3月齡雄性SD大鼠32只，隨機(jī)分為4組，每組8只。正常對(duì)照組上午給予蒸餾水5mL/ (kg.d)灌胃，醋酸潑尼松組給予0.7g/L醋酸潑尼松混懸液5mL/ (kg.d)灌胃。雙參組先給予0.7g/L醋酸潑尼松混懸液5mL/(kg.d)，灌胃3h后，分別給雙參口服液高、低劑量制劑按5mL/(kg.d)灌胃。88天后心肌抽血處死大鼠。檢測(cè)各組大鼠體質(zhì)量，單位骨中骨礦及骨羥脯氨酸含量；檢測(cè)各組大鼠左股骨骨密度；右股骨生物力學(xué)指標(biāo)。觀察雙參口服液(由人參、丹參組成的復(fù)方)對(duì)大鼠骨質(zhì)和骨量的干預(yù)作用。發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期應(yīng)用醋酸潑尼松抑制大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)(P< 0.01)，骨鈣、骨羥脯氨酸含量和骨密度明顯減少(P < 0.01或0.05)，股骨的最大載荷、彈性載荷和彎曲能量均減小(P < 0.01或0.05)。雙參口服液無(wú)論高劑量還是低劑量用藥對(duì)上述指標(biāo)均有不同程度的改善(P < 0.01或0.05)。上述結(jié)果表明長(zhǎng)期應(yīng)用醋酸潑尼松可致骨質(zhì)丟失，骨密度降低，骨生物力學(xué)特性降低。雙參口服液在所用劑量下具有預(yù)防醋酸潑尼松致大鼠骨質(zhì)疏松的作用。鹽酸氨基葡萄糖:鹽酸氨基葡萄糖可刺激軟骨細(xì)胞產(chǎn)生具有正常多聚體結(jié)構(gòu)的糖蛋白，抑制某些可損害關(guān)節(jié)軟骨的酶(如膠原酶和磷脂酶)抑制損傷細(xì)胞的超氧化物自由基的產(chǎn)生，防止皮質(zhì)激素及某些非甾體類抗炎藥對(duì)軟骨細(xì)胞的損害，減少損傷細(xì)胞的內(nèi)毒素因子的釋放，通過(guò)上述作用，本藥可直接抗炎，緩解骨性關(guān)節(jié)炎的疼痛癥狀，改善關(guān)節(jié)功能，并阻止骨性關(guān)節(jié)炎病程的發(fā)展。黃偉東等Μ對(duì)2010年3月 2011年3月進(jìn)行膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎治療的患者進(jìn)行回顧性分析，治療組選用雙氯芬酸結(jié)合鹽酸氨基葡萄糖進(jìn)行治療，對(duì)照組進(jìn)行常規(guī)治療。發(fā)現(xiàn)雙氯芬酸鹽結(jié)合鹽酸氨基葡萄糖治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎能夠有效地減少患者的疼痛，消除炎癥和腫脹，恢復(fù)受損的軟骨組織，達(dá)到治療的目的且療效顯著。陳作桓_對(duì)采用鹽酸氨基葡萄糖和雙氯芬酸鈉對(duì)患有骨性關(guān)節(jié)炎的患者進(jìn)行治療的臨床效果進(jìn)行對(duì)比觀察。發(fā)現(xiàn)采用鹽酸氨基葡萄糖對(duì)患有骨性關(guān)節(jié)炎的患者進(jìn)行治療的臨床效果非常理想，具有安全性高、起效快、不良反應(yīng)少等特點(diǎn)。張紅芬_通過(guò)觀察鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合仙靈骨葆治療骨關(guān)節(jié)炎的臨床療效，發(fā)現(xiàn)鹽酸氨基葡萄糖聯(lián)合仙靈骨葆治療骨關(guān)節(jié)炎安全有效，不良反應(yīng)輕微，可作為一種可行的方法。胡萍 回顧2005年4月 2010年4月收治膝骨性關(guān)節(jié)炎患者，經(jīng)鹽酸氨基葡萄糖的治療過(guò)程。發(fā)現(xiàn)鹽酸氨基葡萄糖治療膝骨性關(guān)節(jié)炎療效明顯，效果持久，不良反應(yīng)甚小，服用方便，易被患者接受，對(duì)中、早期膝骨性關(guān)節(jié)炎患者效果穩(wěn)定。左蕾蕾[21]等以葛根提取物、D-鹽酸氨基葡萄糖為主要原料，輔以硫酸軟骨素，并通過(guò)確定其生產(chǎn)工藝，研制出了保健食品葛根氨糖膠囊，經(jīng)安全性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明其安全無(wú)毒，經(jīng)功能實(shí)驗(yàn)表明其具有增加骨密度的功能。傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，腎藏精，主骨，生髓。髓藏于骨腔內(nèi)，滋養(yǎng)骨骼，骨的生長(zhǎng)發(fā)育依賴腎臟精氣的滋養(yǎng)與推動(dòng)。腎中精氣充盈則骨髓生化有源，骨才能得到骨髓的滋養(yǎng)，才能骨密度正常而骨強(qiáng)健有力。此外脾為“氣血生化之源”，若脾虛失運(yùn)化之功則腎精虧虛，骨骼失養(yǎng)。`

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題以根據(jù)現(xiàn)代科學(xué)理論結(jié)合中醫(yī)學(xué)理論，以緩解骨質(zhì)疏松、增加骨密度適宜脾、腎共補(bǔ)為目的提供一種增加骨密度的中藥保健制劑及其制備方法。本發(fā)明提供的一種增加骨密度的中藥保健制劑，包括下述重量組分:牛骨粉180-310份、淫羊藿330-460份、菟絲240-340份、女貞子200-300份、枸杞子500-700份、人參180-260份、鹽酸氨基葡萄糖70-120份。作為優(yōu)選，牛骨粉250份、淫羊藿390份提取物、菟絲280份提取物、女貞子245份提取物、枸杞600份提取物、人參210份提取物、鹽酸氨基葡萄糖100份。一種增加骨密度的中藥保健制劑的制備方法，包括如下步驟:一、女貞子，菟絲子，加乙醇提取三次，每次2小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇，濾液濃縮至70°C條件相對(duì)密度為1.1 1.2的稠膏；二、取女貞子，菟絲子醇提后的藥渣及淫羊藿，枸杞子和人參加水煎煮三次，每次2小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并濾液，濾液濃縮至85°C相對(duì)密度為1.2 1.4的稠膏；三、將步驟一和步驟二的稠膏分別干燥，100目粉碎，過(guò)篩，得干燥物；四、鹽酸氨基葡萄糖100目粉碎，過(guò)篩；五、將干燥物與牛骨粉、鹽酸氨基葡萄糖粉混合均勻，得到中藥活性成分，該活性成分可直接制成制劑或與藥物可接受的載體混合制成制劑。步驟一中的乙醇含量為50% -70%，加醇量為生藥量的6-8倍。步驟二中的加水量為生藥量的7-9倍。所述干燥為低溫真空干燥、噴霧干燥、微波干燥或沸騰干燥。所述藥物可接受的載體可以是淀粉、糊精、蔗糖、乳粉、甜味劑、甘露糖醇、乳糖、纖維素類及其衍生物、碳酸鈣、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、硬脂酸鎂、滑石粉、香精等。本發(fā)明的中藥制劑可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括:片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、膏劑、混懸劑、貼劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑。本發(fā)明的制劑，優(yōu)選的是口服劑型，如:膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸齊U、散劑，最優(yōu)選的是薄膜衣片劑。本發(fā)明所述牛骨粉為所有可補(bǔ)充鈣的無(wú)機(jī)鈣鹽、有機(jī)弱酸鈣鹽，以貝殼、珠蛘、骨粉為原料制成的活性鈣源。

本發(fā)發(fā)明方案中菟絲子補(bǔ)肝腎、益精髓、明目；女貞子補(bǔ)益肝腎、清虛熱、明目；枸杞子補(bǔ)腎益精、養(yǎng)肝明目。此三子皆有補(bǔ)腎填髓、養(yǎng)肝益精之功效，淫羊藿補(bǔ)腎陽(yáng)，輔助增加強(qiáng)筋骨之功。牛骨粉可補(bǔ)充人體所需鈣劑。人參則以大補(bǔ)元?dú)猓a(bǔ)脾益肺之力助脾運(yùn)化，補(bǔ)脾精以養(yǎng)腎精。鹽酸氨基葡萄糖具有止痛，促進(jìn)軟骨再生的功效。諸藥合用，共奏健脾補(bǔ)腎，強(qiáng)筋壯骨之效。各原料均有充分的專業(yè)文獻(xiàn)支持增加骨密度功效。本品經(jīng)安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)表明安全無(wú)毒，經(jīng)動(dòng)物功能試驗(yàn)證明具有增加骨密度的保健功能。本發(fā)明制劑急性和遺傳毒性試驗(yàn)報(bào)告I材料和方法1.1樣品本發(fā)明制劑，由吉林華康食元生物科技有限公司提供，樣品為片劑，棕黃色，生產(chǎn)批號(hào)為20110110。0.7g/片，人體每日推薦用量為5.6g/60kg.bw。1.2試驗(yàn)動(dòng)物選用山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的健康SPF級(jí)昆明種小鼠，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(魯)20090001。SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施合格證號(hào)為魯動(dòng)環(huán)字SYXK(魯)20100011號(hào)。實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度22°C ±2°C，相對(duì)濕度50% ±10%。1.3小鼠急性毒性試驗(yàn)采用最大耐受量(MTD)試驗(yàn)。健康昆明種小鼠20只，雌雄各半，體重為18g 22g。稱取受試物25g,用蒸懼水溶解并定容至50ml,小鼠空腹16h后，間隔4h，以0.20ml/10g.bw容量灌胃2次，總劑量為20.0g/kg.bw灌胃，連續(xù)觀察14天，記錄中毒表現(xiàn)及死亡情況。1.4遺傳毒性試驗(yàn)1.4.1Ames試驗(yàn)采用經(jīng)鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗(yàn)菌進(jìn)行試驗(yàn)。采用多氯聯(lián)苯(PCB)誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿作為體外代謝活化系統(tǒng)。試驗(yàn)設(shè)8、40、200、1000、5000 μ g/皿5個(gè)劑量，每個(gè)劑量做3個(gè)平行皿。該樣品預(yù)試驗(yàn)中高劑量組均未見(jiàn)苔樣異常增長(zhǎng)，故未進(jìn)行去除組氨酸處理。稱取1.25g樣品，用蒸餾水溶解并定容至25ml，混勻。0.055MpaX20min滅菌，4°C存放備用。臨用前將以上溶液按1: 4依次用滅菌蒸餾水稀釋成以下濃度:50000 μ g/ml (原液)、10000 μ g/ml、2000 μ g/ml、400 μ g/ml、80 μ g/ml。在頂層瓊脂中加入0.1ml試驗(yàn)菌液、0.1ml受試樣品溶液(溶劑對(duì)照加入0.1ml滅菌蒸餾水)和0.5mlS-9混合液(當(dāng)需要代謝活化時(shí))，混勻后倒入底層培養(yǎng)基平板上。同時(shí)設(shè)自發(fā)回變、陽(yáng)性對(duì)照。37°C培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)每皿回變菌落數(shù)。如果受試樣品的回變菌落數(shù)是自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍以上，并具有劑量-效應(yīng)關(guān)系者則定為陽(yáng)性。整套試驗(yàn)在相同條件下重復(fù)做兩次。1.4.2小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)體重25g 30g小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。受試物劑量分別為2.50,5.00、10.00g/kg.bw。分別稱取受試物2.50、
5.00、10.00g，用蒸餾水溶解并定容至20ml，灌胃量為0.20ml/10g.bw。以40mg/kg.bw劑量的環(huán)磷酰胺為陽(yáng)性對(duì)照，蒸餾水為陰性對(duì)照，間隔24h，灌胃2次，末次給受試物后6h，處死動(dòng)物，取胸骨骨髓涂片，甲醇固定，Giemsa染色，在光學(xué)顯微鏡下，觀察200個(gè)嗜多染紅細(xì)胞(PCE)，同時(shí)計(jì)數(shù)正染紅細(xì)胞(NCE)，計(jì)算PCE/NCE比值，每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，微核率以含微核的嗜多染紅細(xì)胞千分率計(jì)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。1.4.3小鼠精子畸形試驗(yàn)體重30g 35g的性成熟雄性小鼠25只，隨機(jī)分為5組，每組5只，受試物劑量為2.50,5.00、10.00g/kg.bw。分別稱取受試物2.50,5.00、10.00g，用蒸懼水溶解并定容至20ml,灌胃量為0.20ml/10g.bw。以40mg/kg.bw劑量的環(huán)磷酰胺為陽(yáng)性對(duì)照，蒸餾水為陰性對(duì)照，每日灌胃，連續(xù)5天，末次灌胃后30天處死動(dòng)物，取附睪制片，伊紅染色，每組計(jì)數(shù)5只動(dòng)物，每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)結(jié)構(gòu)完整的精子，計(jì)算精子畸形率(以百分率計(jì))，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。1.5數(shù)據(jù)處理采用SPSSl1.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行2檢驗(yàn)、Fisher精確概率法、One-way ANOVA分析及Dunnett檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α =0.05。2 結(jié)果2.1急性毒性試驗(yàn)由表I可見(jiàn)，將受試樣品以20.0g/kg.bw的劑量給小鼠灌胃后，觀察14天，兩種性別的小鼠均未見(jiàn)明顯的中毒癥狀，也無(wú)死亡。將受試動(dòng)物處死后進(jìn)行解剖檢查，肝臟、脾臟、腎臟、心臟、肺、胃、腸等主要器官，均未見(jiàn)明顯異常改變。受試樣品對(duì)兩種性別小鼠的最大耐受劑量(MTD)均大于20.0g/kg.bw。表I本發(fā)明制劑對(duì)小鼠的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種增加骨密度的中藥保健制劑，其特征在于，包括下述重量組分:牛骨粉180-310份、淫羊藿330-460份、菟絲240-340份、女貞子200-300份、枸杞子500-700份、人參180-260份、鹽酸氨基葡萄糖70-120份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種增加骨密度的中藥保健制劑，其特征在于，包括下述重量組分:牛骨粉250份、淫羊藿390份、菟絲280份、女貞子245份、枸杞600份提取物、人參210份提取物、鹽酸氨基葡萄糖100份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增加骨密度的中藥保健制劑，其特征在于:該制劑為片劑、膠囊劑、口含片、顆粒劑、丸劑、散劑、混懸劑或口服液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增加骨密度的中藥保健制劑的制備方法，其他特征在于，包括如下步驟: 一、女貞子，菟絲子，加乙醇提取三次，每次2小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并濾液，回收乙醇，濾液濃縮至70°C條件相對(duì)密度為1.1 1.2的稠膏； 二、取女貞子，菟絲子醇提后的藥渣及淫羊藿，枸杞子和人參加水煎煮三次，每次2小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并濾液，濾液濃縮至85°C相對(duì)密度為1.2 1.4的稠膏； 三、將步驟一和步驟二的稠膏分別干燥，100目粉碎，過(guò)篩，得干燥物； 四、鹽酸氨基葡萄糖100目粉碎，過(guò)篩； 五、將干燥物與牛骨粉、鹽酸氨基葡萄糖粉混合均勻，得到中藥活性成分，該活性成分直接制成制劑或與藥物可接受的載體混合制成制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其他特征在于；乙醇含量為50%-70%，加醇量為生藥量的6-8倍，加水量為生 藥量的7-9倍，所述干燥為低溫真空干燥、噴霧干燥、微波干燥或沸騰干燥；所述藥物可接受的載體可以是淀粉、糊精、蔗糖、乳粉、甜味劑、甘露糖醇、乳糖、纖維素類及其衍生物、碳酸鈣、環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、磷脂類材料、硬脂酸鎂、滑石粉、香精。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增加骨密度的中藥保健制劑，其特征在于所述牛骨粉替換為所有可補(bǔ)充鈣的無(wú)機(jī)鈣鹽、有機(jī)弱酸鈣鹽，以貝殼、珠蛘、骨粉為原料制成的活性鈣源。
全文摘要
本發(fā)明提供的一種增加骨密度的中藥保健制劑，包括下述重量組分牛骨粉180-310份、淫羊藿330-460份、菟絲240-340份、女貞子200-300份、枸杞子500-700份、人參180-260份、鹽酸氨基葡萄糖70-120份。以牛骨粉、菟絲子、枸杞子、女貞子為主要原料，經(jīng)現(xiàn)代研究證明本品各原料均有增加骨密度功能，再配以適當(dāng)?shù)妮o料加工制成保健食品，通過(guò)增加骨密度來(lái)改善、緩解因骨密度下降引起的骨質(zhì)疏松及易骨折癥狀。本品經(jīng)保健食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)證實(shí)安全、無(wú)毒，可以長(zhǎng)期服用；經(jīng)動(dòng)物功能試驗(yàn)證實(shí)具有增加骨密度的功能；經(jīng)衛(wèi)生學(xué)、穩(wěn)定性、功效成分檢驗(yàn)證實(shí)質(zhì)量穩(wěn)定、可控。
文檔編號(hào)A61K31/7008GK103110744SQ20131008845
公開(kāi)日2013年5月22日 申請(qǐng)日期2013年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月20日
發(fā)明者張輝, 姜志剛, 孫佳明, 劉會(huì)梅, 高曉晨, 李光華 申請(qǐng)人:吉林華康食元生物科技有限公司