專利名稱：黑米花色苷提取物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥產(chǎn)品，具體涉及黑米花色苷提取物的用途，尤其是黑米花色苷提取物對溴酸鉀誘導(dǎo)小鼠氧化應(yīng)激性腎損傷的保護(hù)作用。
背景技術(shù)：
近年來研究確認(rèn)溴酸鉀可誘發(fā)人和其他哺乳動物的腎組織損傷。Watanabe等的研究證明溴酸鉀引起的腎損傷病理過程是來自氧化應(yīng)激反應(yīng)，腎臟在應(yīng)激負(fù)荷狀態(tài)下因氧自由基大量產(chǎn)生和蓄積而發(fā)生脂質(zhì)過氧化，進(jìn)而影響細(xì)胞膜功能導(dǎo)致腎臟器病變。黑米(Oryza sativa L.)是稻米中的珍品，自古享有“貢米”之美譽(yù),是一種藥、食兼用的大米，具有滋陰潤腦肺、健脾開胃、補(bǔ)中益氣、活血化淤等功效。研究發(fā)現(xiàn)黑米中花色苷含量非常豐富。同時研究發(fā)現(xiàn)不同的黑米花色苷含量有差別，且其花色苷單體構(gòu)成在不同的研究報道中也各不相同?！吨袊Z油學(xué)報》2010年第25卷第12期“黑米種皮中花色苷組成及含量的HPLC分析” 一文中公開了不同研究者對黑米種花色苷成分分析的差異包括Xia等檢測到矢車菊素-3-葡萄糖苷和茍藥-3-葡萄糖苷兩種,而Hiemori等則檢測到7種不同的花色苷及其異構(gòu)體。《中國生化藥物雜志》2010年第31卷第I期“中國黑米花色苷研究現(xiàn)狀及展望”一文中公開了黑米花色苷提取物的藥用用途，包括對動脈粥樣硬化斑塊發(fā)展的抑制、對癌細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移的抑制、對高脂血癥的治療效果等，但是未提及其對溴酸鉀引起的腎損傷的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明目的是提供一種黑米花色苷提取物的新的用途。為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種黑米花色苷提取物的用途，用于制備腎損傷性疾病的預(yù)防和治療藥物。黑米花色苷提取物的制備方法
將黑米粉碎用50%乙醇(含1%鹽酸)30°C震蕩提取2h，濾渣再用等體積的同一溶劑在上述條件下提取2h。合并兩次濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去乙醇。將濃縮液經(jīng)AB-8大孔樹脂純化得到暗紅色黑米花色苷提取物粉末。進(jìn)一步的技術(shù)方案，所述腎損傷性疾病為溴酸鉀誘導(dǎo)機(jī)體氧化應(yīng)激性腎損傷。由于上述技術(shù)方案運(yùn)用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點
本發(fā)明提供了黑米花色苷提取物的一種新用途，使用安全性高的天然黑米花色苷提取物在溴酸鉀誘導(dǎo)的機(jī)體氧化應(yīng)激性腎損傷方面發(fā)揮保護(hù)作用， 今后開發(fā)更多的抗氧化應(yīng)激性疾病的天然產(chǎn)物藥物奠定了基礎(chǔ)。


圖1是實施例中黑米花色苷提取物對血清肌酐的影響；圖2是實施例中黑米花色苷提取物對血清尿素氮水平的影響；
圖3是實施例中黑米花色苷提取物對腎組織黃嘌呤氧化酶(XOD)活性水平的影響；
圖4是實施例中黑米花色苷提取物對腎組織丙二醛(MDA)含量水平的影響。
具體實施例方式下面結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述
實施例
黑米花色苷提取物對溴酸鉀誘導(dǎo)小鼠氧化應(yīng)激性腎損傷的保護(hù)作用實驗 I實驗材料 1.1實驗動物
昆明清潔級小鼠，雄性，體重18-22g，購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司，許可證號 SCXK (滬)2012-0002。飼養(yǎng)溫度 23± 1°C，照明時間 12h/d (7:00-19:00)。1.2材料與試劑 黑米花色苷提取物。丙二醛(MDA)測定試劑盒、黃嘌呤氧化酶(XOD)試劑盒、血清尿素氮(BUN)試劑盒、考馬斯亮藍(lán)蛋白試劑盒(南京建成生物工程研究所);肌酐(上海Sinopharm化學(xué)公司);磷酸二氫鉀、氫氧化鉀(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；亞硝酸鈉(江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司)、溴酸鉀(上海琳帝化工有限公司)、萘乙二胺(西亞試劑)。

1. 3實驗儀器
BS210S電子分析天平,德國Sartorius公司；
高速冷凍離心機(jī)，長沙湘儀離心機(jī)公司；
UV-2600紫外可見分光光度計，日本島津公司；
Agilent 1260高效液相色譜系統(tǒng)；
Cosmosil 系列 5C18 (4. 6mmX 150mm)色譜柱，日本 Nacalai Tesque 公司； SB-5200DTN超聲清洗器，寧波新芝生物科技股份有限公司。2.方法
2.1動物分組
小鼠40只適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，稱重后按體重均勻分為正常組、腎損傷模型組、低劑量黑米花色苷提取物治療組、高劑量黑米花色苷提取物治療組，每組10只。給藥劑量為
O.lml/10g。2. 2給藥設(shè)計
正常組給以正常的食物和水。模型組腹腔注射給以溴酸鉀生理鹽水溶液，劑量200mg/Kg。低劑量組灌胃給以花色苷提取物，劑量100mg/Kg。高劑量組灌胃給以花色苷提取物，劑量200mg/Kg。2. 3動物給藥
各給藥組連續(xù)灌胃5天，每天一次，正常組和模型組均灌胃同體積蒸餾水。第5天腎損傷模型組和各給藥組一次性腹腔注射溴酸鉀生理鹽水溶液，正常對照組腹腔注射等體積生理鹽水，9h后進(jìn)行多項指標(biāo)的測定。
2.4 測定
2.4.1血清肌酐水平測定
小鼠眼球取血后，靜置30min,在4°C條件下5000rpm的速度離心IOmin,分離血清，加等計量6%高氯酸去蛋白，12000rpm離心15min,取上清液用O. 45 μ m微孔濾膜過濾,-20°C保存用于肌酐測定。測定使用日本Nacalai Tesque公司Cosmosil系列5C18柱(4. 6_X150mm)，流動相為20mmol/L磷酸鹽緩沖溶液(PH=6. 5)。柱溫為25°C，流速Iml/min，檢測波長235nm。標(biāo)準(zhǔn)對照肌酐用流動相溶解并稀釋成不同濃度用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。2. 4. 2血清尿素氮水平測定(二乙酰一肟法)
小鼠眼球取血后，靜置30min,在4°C條件下5000rpm的速度心IOmin,分離血清,按下表操作
權(quán)利要求
1.一種黑米花色苷提取物的用途，其特征在于用于制備腎損傷性疾病的預(yù)防和治療藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑米花色苷提取物的用途，其特征在于所述腎損傷性疾病為溴酸鉀誘導(dǎo)機(jī)體氧化應(yīng)激性腎損傷。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黑米花色苷提取物的用途，其特征在于用于制備腎損傷性疾病的預(yù)防和治療藥物。尤其是用于溴酸鉀誘導(dǎo)機(jī)體氧化應(yīng)激性腎損傷的預(yù)防和治療。本發(fā)明提供了黑米花色苷提取物的一種新用途，使用安全性高的天然黑米花色苷提取物在溴酸鉀誘導(dǎo)的機(jī)體氧化應(yīng)激性腎損傷方面發(fā)揮保護(hù)作用，今后開發(fā)更多的抗氧化應(yīng)激性疾病的天然產(chǎn)物藥物奠定了基礎(chǔ)。
文檔編號A61K36/899GK103055185SQ20131003569
公開日2013年4月24日 申請日期2013年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月30日
發(fā)明者李賀然, 郝杰 申請人:蘇州大學(xué)