調(diào)控皮膚色素沉著的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法，所述方法包括向需要調(diào)控皮膚色素沉著的受試者給予用于抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的試劑的步驟。
【專利說明】調(diào)控皮膚色素沉著的方法
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]根據(jù)35U.S.C § 119(e)，本申請(qǐng)要求2011年9月I日提交的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/530, 197的優(yōu)先權(quán)。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法，所述方法包括向需要調(diào)控皮膚色素沉著(pigmentation)的受試者給予用于抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MicrophthalmiaTranscription Factor, MITF)的表達(dá)或活化的試劑的步驟。
【背景技術(shù)】
[0004]皮膚色素沉著是人類中最明顯且審美學(xué)上最突出的表型特征之一。皮膚色素沉著來自于表皮色素中黑色素(melanin pigments)的存在-由黃/紅色的褐黑素(pheomelanins)至褐/黑色的真黑色素(eumelanins)的在化學(xué)結(jié)構(gòu)方面有所不同的色素。在“紅發(fā)白膚”的人中最常觀察到極淺色皮膚的表型，這類人示出保有特定的基因多態(tài)性。本發(fā)明人對(duì)這種色素沉著表型的大量研究已使得對(duì)于理解和操控皮膚色素沉著、以用于人類中的多種潛在應(yīng)用產(chǎn)生了明顯益處。
[0005]色素沉著的控制由表皮內(nèi)復(fù)雜的一系列胞內(nèi)信號(hào)介導(dǎo)。盡管將酪氨酸轉(zhuǎn)化為黑色素的酶學(xué)機(jī)制存在于黑色素細(xì)胞中，然而色素沉著的諸多關(guān)鍵起始信號(hào)源自于堆疊的(overlaying)角化細(xì)胞(keratinocyte)群。類似地，由于黑色素細(xì)胞對(duì)黑素體(meIanosomes)進(jìn)行胞外運(yùn)輸,使得大部分表皮黑色素最終殘留在角化細(xì)胞中，因此角化細(xì)胞在色素沉著的后期步驟中起到關(guān)鍵作用。
[0006]在黑色素細(xì)胞內(nèi)，定性定量地控制色素生成的關(guān)鍵通路是由黑色素細(xì)胞刺激素(Melanocyte Stimulating Hormone, MSH)調(diào)控的通路。MSH是前肽前體阿黑皮素原(ProOpioMelanoCortin, P0MC)的12氨基酸肽裂解產(chǎn)物。MSH結(jié)合至黑色素細(xì)胞表面上的受體(黑皮質(zhì)素-1受體)，該受體是G蛋白偶聯(lián)受體，活化腺苷酸環(huán)化酶以誘導(dǎo)cAMP生成。cAMP水平升高轉(zhuǎn)而導(dǎo)致CREB轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化，其刺激小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)基因的轉(zhuǎn)錄(Lin JY, Fisher DE:Melanocyte biology and skin pigmentation, Nature2007,445:843-850)。
[0007]MITF是黑色素細(xì)胞特異性的轉(zhuǎn)錄因子，已發(fā)現(xiàn)其控制大量調(diào)控黑色素生成的基因的表達(dá)。由MITF被發(fā)現(xiàn)為色素酶基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控子(Hemesath TJ, Steingrimsson E,McGill G, Hansen MJ, Vaught J, Hodgkinson CA, Arnheiter H, Copeland NG, JenkinsNA, Fisher DE:microphthalmia, a critical factor in melanocyte development,defines a discrete transcription factor family, Genes Devl994,8:2770-2780),發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了大量關(guān)于控制MITF表達(dá)和轉(zhuǎn)錄活性的多條通路。MITF的突變可導(dǎo)致完全脫色或色素的彥頁色改變(Lin JY, Fisher DE:Melanocyte biology and skin pigmentation,Nature2007，445:843-850)。MITF啟動(dòng)子受到多個(gè)獨(dú)立地在人色素沉著中顯示出關(guān)鍵作用的因子的調(diào)控。這些因子包括fct通路(Widlund HR, Horstmann MA, Price ER, Cui J,Lessnick SL,Wu Μ,He X,Fisher DE:Beta-catenin_induced melanoma growth requiresthe downstream target Microphthalmia-associated transcription factor., J CellBiol2002,158:1079-1087.Epub2002Sepl016)、SOXlO (Huber WE, Price ER, Widlund HR,Du J, Davis IJ, Wegner M, Fisher DE:A tissue-restricted cAMP transcriptionalresponse:SOXlOmodulates alpha-melanocyte-stimulating hormone—triggeredexpression of microphthalmia-associated transcription factor in melanocytes.,J Biol Chem 2003，278:45224-45230.Epub42003Aug45227)以及 PAX3(Price ER,Fisher DE:Sensorineural deafness and pigmentation genes:melanocytes and theMitf transcriptional network, Neuron2001,30:15-18) ? MITF、S0X10 和 PAX3 突變?cè)诨加蠾aardenburg綜合征的患者中出現(xiàn)，其中患者中的MITF突變顯示出“純的”黑色素細(xì)胞表型，而S0X10或PAX3突變則引起黑色素細(xì)胞缺陷和其它異常(Price ER，F(xiàn)isher DE:Sensorineural deafness and pigmentation genes:melanocytes andthe Mitf transcriptional network, Neuron2001, 30:15-18)。MITF 的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控通過 MITF 的憐酸化(Hemesath TJ, Price ER, Takemoto C, Badalian T, Fisher DE:MAPkinase links the transcription factor Microphthalmia to c-Kit signalling inmelanocytes, Naturel998,391:298-301)、泛素化(Wu M, Hemesath TJ, Takemoto CM,Horstmann MA, Wells AG, Price ER, Fisher DZ, Fisher DE:c_Kit triggers dualphosphorylations,which couple activation and degradation of the essentialmelanocyte factor Mi, Genes Dev2000,14:301-312)或 SUMO 化(Miller AJ, Levy C,Davis IJ,Razin E,Fisher DE:SumoyIation of MITF and its related family membersTFE3and TFEB，J Biol Chem2005，280:146-155)發(fā)生?，F(xiàn)已部分了解這些修飾的功能性結(jié)果，而其它細(xì)節(jié)仍有待研究?？偟膩碚f，對(duì)MITF表達(dá)和活性的多水平控制為色素沉著的小分子調(diào)節(jié)提供了潛在機(jī)會(huì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]在黑色素細(xì)胞內(nèi)，對(duì)色素沉著的控制顯示出主要通過MITF轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控進(jìn)行。黑色素細(xì)胞內(nèi)的多個(gè)信號(hào)通路在這一因子上匯合，所述信號(hào)通路包括黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)通路、內(nèi)皮素通路、c-Kit通路和c-MET通路。這些信號(hào)的來源大部分來自表皮內(nèi)鄰近的角化細(xì)胞，并且紫外輻射是部分此類刺激因子的重要觸發(fā)因素。色素過度沉著是在大量人群中常見并在美容方面令人煩惱的問題。盡管其原因不完全清楚，但包括激素原因、炎癥后原因、年齡相關(guān)原因和其它病因。目前治療色素過度沉著的策略很大程度上限于對(duì)酪氨酸酶進(jìn)行抑制，這一策略顯示出有限的效果和某些相關(guān)的毒性。
[0009]本發(fā)明一方面提供了用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法。在一些實(shí)施方式中，所述用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法包括向需要調(diào)控皮膚色素沉著的受試者給予用于抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的試劑。在一些實(shí)施方式中，所述用于抑制MITF的表達(dá)或活化的試劑包括使用本發(fā)明的小分子篩選而識(shí)別的化合物。在一些實(shí)施方式中，所述用于抑制MITF的表達(dá)或活化的試劑可選自于由下列化合物所組成的組:
[0010]l-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；[0011]5-氯-7-[(2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0012](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0013]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0014]乙基-1-芐基-5-[3_(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0015]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0016]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0017][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0018]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)-1，3，4_噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；
[0019]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0020] 2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0021 ]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0022]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0023]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0024]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0025]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0026]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0027]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0028]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0029]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0030]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0031]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0032]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0033]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0034]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0035]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0036]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0037]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0038]N-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]-2-[ (5_硝基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]乙酸胺；
[0039]5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0040]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0041]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；[0042]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0043]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0044](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0045]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0046]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0047](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0048](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0049]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0050]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0051]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0052](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0053]11, 12~ _-羥基—3—異丁基—4, 5, 8— 二甲基—3, 3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0054]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0055]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基-2-甲基丁酸酯(I, 11, 12-trihydroxy-2, 16-dioxo-ll, 20-epoxypicras-3-en-15-yl-2-hydroxy-2-methylbutanoate)；
[0056]1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3-[3_氯_4_(異丙基橫酸基)_2_噻吩基]服；
[0057]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0058]以上化合物的任意組合。
[0059]在一些實(shí)施方式中，所述用于抑制MITF的表達(dá)或活化的試劑可選自于由下列化合物所組成的組:
[0060]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0061]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0062](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0063]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0064]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2_羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚_3_甲酸酯；
[0065]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0066]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0067][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0068]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0069]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；[0070]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0071 ]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙酰基)氨基} -2-甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0072]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0073]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0074]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0075]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0076]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0077]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；
[0078]5- (4-氯苯 基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0079]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0080]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0081]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0082]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0083]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0084]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0085]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0086]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0087]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0088]N-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]-2-[ (5_硝基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]乙酸胺；
[0089]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0090]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0091]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0092]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0093]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0094]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0095]以上化合物的任意組合。
[0096]在一些實(shí)施方式中，所述用于抑制MITF的表達(dá)或活化的試劑可選自于由下列化合物所組成的組:
[0097](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0098]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0099]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯-1-基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0100](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a- 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)_2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0101](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羥基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0102]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0103]乙基-4-氨基-2-{[ (IE)-3-(4-甲基苯基)-3_氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0104]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0105](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0106]11，12-二羥基-3-異丁基-4，5，8-三甲基-3，3a，4，6a，9，10，11，12-八氫 _1Η_ 環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0107]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0108]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基-2-甲
基丁酸酯；
[0109]1-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]_3_[3_氣_4_(異丙基橫酸基)-2_ B塞吩基]服；
[0110]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0111]以上化合物的任意組合。
[0112]在一些實(shí)施方式中，所述用于抑制MITF的表達(dá)或活化的試劑可選自于由下列化合物所組成的組:
[0113]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0114](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羥基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0115]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0116]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0117]以上化合物的任意組合。
[0118]MITF在黑色素細(xì)胞的分化/色素沉著中起到中心作用。MITF的表達(dá)在黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)的下游由cAMP通路調(diào)控，其轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)包括酪氨酸酶和大部分活躍參與由酪氨酸生成黑色素的酶。因此，本發(fā)明一方面包含識(shí)別對(duì)于小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)和/或活性具有抑制能力的化合物，所述化合物可用于調(diào)控受試者、特別是人的皮膚色素沉著。
[0119]本發(fā)明另一方面提供了小分子篩選方法，以識(shí)別能夠下調(diào)MITF轉(zhuǎn)錄因子活性的化合物。
【具體實(shí)施方式】
[0120]本發(fā)明一方面提供了用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法。調(diào)控皮膚色素沉著的一個(gè)方式是通過控制黑色素細(xì)胞并抑制色素過度沉著。皮膚色素沉著的調(diào)控是多種病癥中有待解決的課題，所述病癥如黑棘皮病(Acanthosis Nigricans)、白化病、色素過度沉著、色素失禁癥(incontinentia pigmenti)、肝斑(liver spots)和手部衰老、mcCune-Albright綜合征、melisma、進(jìn)行性色素紫癜、Sturge-Weber綜合征、著色性干皮病(Xeroderma pigmentosum)和Waardenburg氏綜合征。在黑色素細(xì)胞內(nèi)，對(duì)色素沉著的控制顯示出主要通過MITF轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控發(fā)生。黑色素細(xì)胞內(nèi)的多個(gè)信號(hào)通路在這一因子上匯合,所述信號(hào)通路包括黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)通路、內(nèi)皮素通路、c-Kit通路和c-MET通路。這些信號(hào)的來源大部分來自表皮內(nèi)鄰近的角化細(xì)胞，并且紫外輻射是部分此類刺激因子的重要觸發(fā)因素。
[0121]在一些實(shí)施方式中，所述用于調(diào)控受試者皮膚色素沉著的方法包括向需要調(diào)控皮膚色素沉著的受試者給予用于抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的試劑的步驟。
[0122]為了識(shí)別對(duì)MITF的表達(dá)或活化具有抑制能力的試劑，開發(fā)了篩選分析系統(tǒng)。在一些實(shí)施方式中，與對(duì)照水平或參照水平相比，本文所述的化合物可抑制MITF的表達(dá)的至少 5% (例如，5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%,75%,80%,85%,90%,95%,99%,100% )。在一些實(shí)施方式中，與對(duì)照水平或參照水平相比，本文所述的化合物可抑制MITF的活化的至少5 % (例如，5 %、10 %、15 %、20 %、25%,30%,35%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,90%,95%,99%,100% )0將理解的是，無需完全抑制MITF的表達(dá)或活化。
[0123]根據(jù)所述篩選分析系統(tǒng)，發(fā)明人已識(shí)別出對(duì)小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化具有抑制能力的化合物。
[0124]在一些實(shí)施方式中，所述對(duì)MITF的表達(dá)或活化具有抑制能力的化合物選自于由下列化合物所組成的組:
[0125]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0126]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0127](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0128]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0129]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0130]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0131]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0132][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0133]N-(2_氣苯基)_2_ {[5_ (3_甲基苯基)-1, 3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酸胺；
[0134]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0135]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0136]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0137]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0138]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0139]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0140]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0141]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0142]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；[0143]5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0144]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0145]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0146]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0147]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0148]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0149]4-[(4_氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0150]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0151]3-{[(4-乙氧基苯氧 基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0152]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0153]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0154]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0155]3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0156]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0157]{[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0158]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0159](3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0160]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0161]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0162](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0163](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羥基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0164]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0165]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0166]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0167](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0168]11, 12- _-羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氫-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0169]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0170]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基-2-甲
基丁酸酯；[Ο171]1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服；
[0172]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0173]以上化合物的任意組合。
[0174]在一些實(shí)施方式中，所述對(duì)MITF的表達(dá)或活化具有抑制能力的化合物選自于由下列化合物所組成的組:
[0175]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0176]5-氯-7-[(2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0177](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0178]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0179]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0180]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0181]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0182][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0183]N-(2_氣苯基)_2_ {[5_ (3_甲基苯基)-1, 3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酸胺；
[0184]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0185]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0186]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0187]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0188]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0189]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0190]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0191]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0192]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0193]5-(4-氯苯基)-2_ 吡咯烷-1-基-6H-1，3，4-噻二嗪；
[0194]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0195]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0196]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0197]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0198]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0199]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0200]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0201]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0202] N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0203]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0204]5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；[0205]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0206]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0207]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0208]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0209]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0210]以上化合物的任意組合。
[0211 ] 在一些實(shí)施方式中，所述對(duì)MITF的表達(dá)或活化具有抑制能力的化合物選自于由下列化合物所組成的組:
[0212](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0213]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0214]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0215](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0216](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羥基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0217]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0218]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0219]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0220](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0221 ] 11, 12- _-羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氫-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0222]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0223]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯_15_基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；
[0224]1-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-3-[3-氯-4-(異丙基磺?；?-2_噻吩基]脲；
[0225]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0226]以上化合物的任意組合。
[0227]在一些實(shí)施方式中，所述對(duì)MITF的表達(dá)或活化具有抑制能力的化合物選自于由下列化合物所組成的組:
[0228]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0229](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0230]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0231]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0232]以上化合物的任意組合。
[0233]在一些實(shí)施方式中，可腸胃外給予所述用于抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的試劑，并且可將所述試劑制備為例如外用組合物(external composition)。
[0234]藥物組合物
[0235]本發(fā)明一方面提供了藥物組合物，所述藥物組合物包含一種以上(例如I種、2種、3種、4種、5種、6種、7種、8種、9種、10種或更多種)本文所述的化合物(或其前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其它藥學(xué)上可接受的形式)，以及任選的藥學(xué)上可接受的賦形劑(excipient)。在某些實(shí)施方式中，這些組合物任選地進(jìn)一步包含一種以上其它治療劑?；蛘?，可向有需要的患者給予本發(fā)明的化合物并聯(lián)合給予一種以上其它治療劑。例如，在皮膚色素沉著的調(diào)控中，用于與本發(fā)明的化合物共同給藥或與本發(fā)明的化合物共同包含于藥物組合物中的其它治療劑可以是獲批的皮膚色素沉著劑。
[0236]藥物組合物中化合物的量可以基于重量、摩爾或體積。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少0.0001%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少
0.1 %的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少0.5%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少I %的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少2%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少3%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少4%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少5%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含至少10%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含0.01% -99%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含0.05% -90%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含0.1% -85%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含0.5%-80%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含I % -75%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含2%-70%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含3% -65%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含4% -60%的本發(fā)明的化合物。在一些實(shí)施方式中，藥物組合物包含5% -50%的本發(fā)明的化合物。
[0237] 也能夠領(lǐng)會(huì)的是，用于治療時(shí)，本發(fā)明的某些化合物可以游離形式存在，或適當(dāng)時(shí)，以其藥學(xué)上可接受的衍生物存在。根據(jù)本發(fā)明，藥學(xué)上可接受的衍生物包括但不限于，藥學(xué)上可接受的鹽、酯、此類酯的鹽、或者前藥、或者本發(fā)明化合物的其它加合物或衍生物(當(dāng)向有需要的患者給予時(shí)，其能夠直接或間接地提供如本文其它部分所述的化合物、或者它們的代謝產(chǎn)物或殘基)。
[0238]如上所述，為適合于所期望的特定劑型，本發(fā)明的藥物組合物任選地包含藥學(xué)上可接受的賦形劑；本文所使用的賦形劑包括任何和所有的溶劑、稀釋劑或其它液態(tài)輔料(vehicle)、分散助劑或懸浮助劑、表面活性劑、等滲劑、增稠劑或乳化劑、防腐劑、抗氧化劑、固態(tài)粘合劑、潤滑劑等。Remington’s Pharmaceutical Sciences,第16版,E.ff.Martin (Mack Publishing C0., Easton, PA, 1980)公開了用于配制藥物組合物的各種賦形劑及用于對(duì)其進(jìn)行制備的已知技術(shù)。除非任何常規(guī)賦形劑介質(zhì)與本發(fā)明的化合物不相容(諸如通過產(chǎn)生任何不期望的生物學(xué)效應(yīng)或以有毒害的(deleterious)方式與藥物組合物中的任何其它組分產(chǎn)生相互作用)，否則其用途將涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)?？勺鳛樗帉W(xué)上可接受的賦形劑的材料的一些實(shí)例包括但不限于，糖類，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉類，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；西黃蓍膠粉(powdered tragacanth);麥芽；明膠；滑石；賦形劑如可可脂和栓蠟(suppository waxes);油類,如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇類(glycols)，如丙烯乙二醇；酯類，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸緩沖液；和其它無毒的相容性潤滑劑，如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂；根據(jù)配方設(shè)計(jì)師的判斷，著色劑、脫模劑(releasing agents)、涂層劑、甜味劑、調(diào)味劑和芳香劑、防腐劑、以及抗氧化劑也可出現(xiàn)在組合物中。
[0239]用于口服給藥的液體劑型包括但不限于，藥學(xué)上可接受的乳劑、微乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑(elixirs)。除了活性化合物以外，液體劑型可含有在本領(lǐng)域中常用的惰性稀釋劑，例如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特別是棉籽油、落花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇和失水山梨糖醇脂肪酸酯，以及上述物質(zhì)的混合物。除惰性稀釋劑外，口服組合物還可含有佐劑(adjuvants)，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調(diào)味劑和芳香劑。
[0240]可根據(jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)，使用合適的分散劑或潤濕劑以及懸浮劑，配制可注射的制劑，例如無菌可注射水性或油性懸浮制劑。無菌可注射制劑還可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液劑、混懸劑或乳劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液劑。可接受的輔料和溶劑可采用水、林格氏溶液、U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。此外，慣例采用無菌的不揮發(fā)性油(fixed oil)作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為這一目的，可采用任何無刺激性的(bland)不揮發(fā)性油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(如油酸)也可用于制備可注射制劑。
[0241]可注射制劑可以是無菌的，例如通過經(jīng)由細(xì)菌滯留過濾器過濾，或通過在臨用前加入處于無菌固體組合物形式的無菌劑(所述無菌劑可溶于或分散于無菌水或其它無菌可注射介質(zhì)中)。
[0242]為了延長藥物的作用，通常期望能夠減緩來自皮下注射或肌內(nèi)注射的藥物吸收。上述情況可以通過使用水溶性差的液態(tài)混懸劑、或結(jié)晶材料或無定形材料來實(shí)現(xiàn)。藥物的吸收速率由此取決于其溶解速率，而其溶解速率又可取決于晶體大小和晶型?；蛘?，通過將藥物溶解或懸浮在油性輔料中來實(shí)現(xiàn)腸胃外給予的藥物形式的延遲吸收。通過在可生物降解的聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成藥物的微囊基質(zhì)來制備可注射的儲(chǔ)庫(depot)形式。根據(jù)藥物與聚合物的比例以及所使用的特定聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物釋放的速率。其它可生物降解的聚合物的實(shí)例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。還可以通過將藥物封裝(entrapping)在與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳劑中來制備儲(chǔ)庫型可注射制劑。
[0243]用于直腸或陰 道給藥的組合物優(yōu)選栓劑，栓劑可通過將本發(fā)明的化合物與合適的無刺激性賦形劑或載體(例如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟)混合而制備，并且所述栓劑在室溫下是固體、而在體溫下是液體，因此，所述栓劑會(huì)在直腸或陰道腔中融化，并釋放出活性化合物。
[0244]用于口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在此類固體劑型中，將活性化合物與至少一種惰性的藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體混合，所述賦形劑或載體例如為檸檬酸鈉或磷酸二鈣和/或以下物質(zhì):a)填充劑(fillers)或增量劑(extenders),如淀粉類、乳糖、鹿糖、葡萄糖、甘露醇和娃酸；b)粘合劑,如例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽/酯、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；c)保濕劑(humectant)，例如甘油；d)崩解劑，如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽/酯和碳酸鈉；e)溶液阻滯劑(solution retarding agents),如石臘；f)吸收加速劑,如季銨化合物；g)潤濕劑，如例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；h)吸收劑，如高嶺土和膨潤土 ；以及i)潤滑劑，如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固態(tài)聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，及以上物質(zhì)的混合物。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，劑型還可包含緩沖劑。
[0245]相似類型的固態(tài)組分也可以在軟填充明膠膠囊和硬填充明膠膠囊(使用此類賦形劑，如乳糖或奶糖，以及高分子量聚乙二醇等)中用作填充劑。片劑、糖衣劑(dragees)、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的固體劑型可制備為具有包衣和殼(如腸溶包衣和在藥物制劑領(lǐng)域中公知的其它包衣)。所述固體劑型可任選地含有乳池劑(opacifying agents),并且可以是僅在或優(yōu)先在腸道的某一部分任選地以延遲方式釋放活性成分的組合物?？梢允褂玫陌?embedding)組分的實(shí)例包括聚合性物質(zhì)和蠟。相似類型的固態(tài)組分也可以在軟填充明膠膠囊和硬填充明膠膠囊(使用此類賦形劑，如乳糖或奶糖，以及高分子量聚乙二醇等)中用作填充劑。
[0246]所述活性化合物也可與一種以上的上述賦形劑處于微囊化(micro-encapsulated)形式。片劑、糖衣劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的固體劑型可制備為具有包衣和殼(如腸溶包衣、控釋包衣和在藥物制劑領(lǐng)域中公知的其它包衣)。在此類固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性稀釋劑(如蔗糖、乳糖和淀粉)混合。在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)踐中，此類固體劑型還可包含除惰性稀釋劑外的其它物質(zhì)，例如片劑制備潤滑劑和其他片劑制備助劑(如硬脂酸鎂和微晶纖維素)。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，所述劑型還可包含緩沖劑。所述劑型可任選地含有乳濁劑，并且可以是僅在或優(yōu)先在腸道的某一部分任選地以延遲方式釋放活性成分的組合物?？梢允褂玫陌窠M分的實(shí)例包括聚合性物質(zhì)和蠟。
[0247] 本發(fā)明涵蓋本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的局部制劑。本文所使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的局部制劑”是指任何如下制劑:其對(duì)于通過將所述制劑施用于表皮的本發(fā)明化合物的皮內(nèi)給藥而言是藥學(xué)上可接受的。在本發(fā)明的某些實(shí)施方式中，所述局部制劑包含賦形劑系統(tǒng)。藥學(xué)上有效的賦形劑包括但不限于，溶劑(例如醇、多元醇、水)、霜?jiǎng)?creams)、洗劑(lotions)、軟膏劑(ointments)、油、硬膏劑(plasters)、脂質(zhì)體、散劑、乳劑、微乳劑和緩沖溶液(例如低滲鹽水或緩沖鹽水)、或本領(lǐng)域已知的用于局部給藥的藥劑的任何其它賦形劑。對(duì)于本領(lǐng)域已知的載體(carver)的更完整的教導(dǎo)由本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)提供，例如由 Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 出版的 Remington’ sPharmaceutical Sciences,第16版，1980以及第17版，1985 ;以引用的方式將其公開的內(nèi)容整體并入本文。在某些其它實(shí)施方式中，本發(fā)明的局部制劑可包含賦形劑。可使用本領(lǐng)域已知的任何藥學(xué)上可接受的賦形劑制備本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的局部制劑?？砂诒景l(fā)明的局部制劑中的賦形劑的實(shí)例包括但不限于，防腐劑、抗氧化劑、保濕劑(moisturizer)、軟化劑、緩沖劑、增溶劑、其它滲透劑、皮膚防護(hù)劑、表面活性劑和推進(jìn)劑(propellants)和/或與本發(fā)明化合物聯(lián)用的其它治療劑。合適的防腐劑包括但不限于，醇、季銨、有機(jī)酸、對(duì)羥基苯甲酸酯和酚類。合適的抗氧化劑包括但不限于，抗壞血酸及其酯、亞硫酸氫鈉、丁基羥基甲苯(butylated hydroxytoluene)、丁基羥基茴香醚(butylated hydroxyarrisole) >生育酚、以及螯合劑如EDTA和檸檬酸。合適的保濕劑包括但不限于，甘油、山梨醇、聚乙二醇、尿素和丙二醇。用于本發(fā)明的合適的緩沖劑包括但不限于，檸檬酸緩沖液、鹽酸緩沖液和乳酸緩沖液。合適的增溶劑包括但不限于，季銨氯化物、環(huán)糊精、苯甲酸芐酯、卵磷脂和聚山梨醇酯?？捎糜诒景l(fā)明局部制劑的合適的皮膚防護(hù)劑包括但不限于，維生素E油、尿囊素(allatoin)、二甲基硅油、甘油、礦脂(petrolatum)和氧化鋅。
[0248]在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的局部制劑至少包含本發(fā)明的化合物和滲透促進(jìn)劑。局部制劑的選擇取決于多種因素，包括待治療的病癥、本發(fā)明化合物和存在的其它賦形劑的理化特征、它們?cè)谥苿┲械姆€(wěn)定性、可用的制造設(shè)備以及成本限制。本文所使用的術(shù)語“滲透促進(jìn)劑”是指能夠?qū)⑺幚砘钚曰衔镛D(zhuǎn)運(yùn)通過角質(zhì)層并進(jìn)入表皮或真皮的試劑，優(yōu)選地，很少或不被全身性吸收。已評(píng)估了多種化合物在提高藥物滲透入皮膚速率方面的效果，參見例如，Percutaneous Penetration Enhancers, Maibach H.1.和 Smith
H.E.(編)， CRC Press, Inc.，Boca Raton, Fla.(1995)，該文獻(xiàn)調(diào)查了多種皮膚滲透促進(jìn)劑的使用和測試；以及 Buyuktimkin 等，Chemical Means of Transdermal Drug PermeationEnhancement in Transdermal and Topical Drug Delivery Systems,Gosh T.K.,Pfisterff.R.，Yum S.1.(編)，Interpharm Press Inc.，Buffalo Grove, 111.(1997)。在某些不例性的實(shí)施方式中，用于本發(fā)明的滲透劑包括但不限于，甘油三酯(例如大豆油)、蘆薈組合物(例如蘆薈凝膠)、乙醇、異丙醇、辛基苯基聚乙二醇、油酸、聚乙二醇400、丙二醇、N-癸基甲基亞砜、脂肪酸酯(例如，肉豆蘧酸異丙酯、月桂酸甲酯、甘油單油酸酯和丙二醇單油酸酯)和N-甲基吡咯烷酮。
[0249]在某些實(shí)施方式中，組合物可處于軟膏劑、糊劑(pastes)、霜?jiǎng)⑾磩?、凝膠劑、散劑、溶液劑、噴霧劑、吸入劑或貼劑(patches)的形式。在某些示例性的實(shí)施方式中，本發(fā)明所述組合物的制劑為霜?jiǎng)淇蛇M(jìn)一步含有飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸，如硬脂酸、棕櫚酸、油酸、棕櫚-油酸(palmito-oleic acid)、鯨臘醇或油醇,特別優(yōu)選硬脂酸。本發(fā)明的霜?jiǎng)┻€可含有非離子型表面活性劑，例如，硬脂酸聚烴氧(40)酯(polyoxy-40-stearate)。在某些實(shí)施方式中，如有需要，在無菌條件下將活性組分與藥學(xué)上可接受的賦形劑和任何需要的防腐劑或緩沖劑混合。眼用制劑、滴耳劑和滴眼劑也預(yù)期落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。此外，本發(fā)明預(yù)期使用透皮貼劑，其具有將化合物受控遞送至身體的額外優(yōu)點(diǎn)。此類劑型是通過將化合物溶解或分散于適當(dāng)介質(zhì)中來制備的。如上文所討論的，滲透促進(jìn)劑也可用于增加化合物穿過皮膚的通量?？赏ㄟ^提供速率控制膜或者通過將化合物分散于聚合物基質(zhì)(例如，PLGA)或凝膠中來對(duì)速率進(jìn)行控制。
[0250]在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物可用于外部施用，例如包括軟膏劑、霜?jiǎng)?、保護(hù)劑、粘性皮膚貼劑、面膜(pack)、化妝水(toner)、乳液、洗劑、浴用劑、洗發(fā)劑、潤發(fā)劑(hair tonic)、整發(fā)液(hair liquid)、洗發(fā)露(shampoo)和護(hù)發(fā)素(rinse)。此外,可任選地將外用劑常用的成分(例如美白劑、保濕劑、油性成分、UV吸收劑、表面活性劑、增稠劑、醇、粉末成分、著色材料、水性成分、水和各種皮膚營養(yǎng)劑)共混于試劑中，以增強(qiáng)本方法中使用的氧化還原相關(guān)因子的表達(dá)。此外，可任選地將外用制劑常用的助劑共混于試劑中，以抑制本方法中使用的MITF的表達(dá)，所述助劑例如為金屬螯合劑(如乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鈉、檸檬酸鈉、多聚磷酸鈉、偏磷酸鈉、葡糖酸)；咖啡因、單寧、維拉帕米(verapamil)、氨甲環(huán)酸(tranexamic acid),以及上述化合物的衍生物；藥劑,如甘草提取物、光甘草定(glabridin)、中國木瓜果實(shí)(Chinese quince fruit)的熱水提取物、各種草藥、生育酚乙酸酯、甘草酸鹽/酯，以及上述物質(zhì)的衍生物或鹽；美白劑，如維生素C、抗壞血酸磷酸鎂、抗壞血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸(kojic acid);糖類，如葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖和海藻糖；維生素A，如視黃酸、視黃醇、視黃醇乙酸酯和視黃醇棕櫚酸酯。
[0251]還應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會(huì)的是，本發(fā)明的化合物和藥物組合物可配制并用于聯(lián)合治療，即所述化合物和藥物組合物可與一種以上其它期望的療法(therapeutics)或醫(yī)療手段(medicalprocedures)共同配制，或者在一種以上其它期望的療法或醫(yī)療手段的同時(shí)、之前或之后給藥。組合方案中采用的治療(療法或手段)的特定組合將考慮期望的療法和/或手段的相容性以及待實(shí)現(xiàn)的期望的療效。還應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會(huì)的是，對(duì)于同一疾病，所采用的治療可實(shí)現(xiàn)期望的效果(例如，可同時(shí)給予本發(fā)明的化合物和另一皮膚色素沉著調(diào)控劑)，或者其能夠?qū)崿F(xiàn)不同效果(例如，控制有害效應(yīng))。
[0252]例如，可與本發(fā)明的化合物聯(lián)合用于調(diào)控皮膚色素沉著的其它療法或皮膚色素沉著調(diào)控劑包括但不限于，來自金雞納樹的基于喹啉的生物堿，特別是奎寧、氯喹(chloroquinine);青蒿素；以及氨基烷基酹。
[0253]在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物組合物進(jìn)一步包含一種以上其它治療活性成分(例如化療性的和/或姑息性的(palliative))。為了本發(fā)明的目的，術(shù)語“姑息性的”是指致力于緩解疾病的癥狀和/或治療方案的副作用的處理，但其并不是治愈性的。
[0254]此外，本發(fā)明提供了本發(fā)明的皮膚色素沉著調(diào)控化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物以及使用這些化合物、其藥物組合物或上述任意一種與一種以上其它治療劑的組合來治療受試者的方法。
[0255]還應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會(huì)的是，用于治療時(shí)，本發(fā)明的某些化合物可以游離形式存在，或者在適當(dāng)?shù)那闆r下以其藥學(xué)上可接受的衍生物的形式存在。根據(jù)本發(fā)明，藥學(xué)上可接受的衍生物包括但不限于，藥學(xué)上可接受的鹽、酯、此類酯的鹽、或前藥、或本發(fā)明化合物的其它加合物或衍生物(當(dāng)向有需要的患者給予時(shí)，其能直接或間接地提供如本文其它部分所述的化合物、或者它們的代謝產(chǎn)物或殘基)。
[0256]本發(fā)明還提供了上述化合物的前藥形式，其中所述前藥在體內(nèi)代謝以生成如上所述的類似物或衍生物。事實(shí)上，部分上述類似物或衍生物可以是另一類似物或衍生物的前藥。術(shù)語“前藥”是本領(lǐng)域所公知的，包括在生物系統(tǒng)中轉(zhuǎn)化為藥學(xué)活性化合物的化合物。例如，參見 Remington’s Pharmaceutical Sciences, 1980,第 16 卷，Mack PublishingCompany, Easton,第 61 和 424 頁。
[0257]本發(fā)明另一方面涉及用于方便有效地實(shí)施本發(fā)明所述方法的試劑盒。通常，藥物包裝(pack)或試劑盒包含一個(gè)以上容器，所述容器裝有本發(fā)明藥物組合物的一種以上成分。與這類容器任選相關(guān)的可以是管理藥品的生產(chǎn)、使用或銷售的政府機(jī)構(gòu)所規(guī)定形式的提示(notice)，該提示反映用于人類給藥的生產(chǎn)、使用或銷售的機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)。[0258]藥學(xué)用途和治療方法
[0259]通常， 使用本發(fā)明的化合物的方法包括向有需要的受試者給予治療有效量的本發(fā)明的化合物。
[0260]可通過合適的途徑給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物。合適的給藥途徑包括但不限于口服給藥、腹膜內(nèi)給藥、皮下給藥、肌肉內(nèi)給藥、透皮給藥、直腸給藥、舌下給藥、靜脈內(nèi)給藥、口腔(buccally)給藥或吸入給藥。優(yōu)選局部給予本發(fā)明的化合物和藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選含有此類藥學(xué)上可接受的賦形劑:所述賦形劑適合于使得所述化合物或混合物能夠口服給藥、腸胃外給藥、靜脈內(nèi)給藥、皮內(nèi)給藥、肌肉內(nèi)給藥或皮下給藥、直腸給藥、通過吸入或通過口腔給藥、或者透皮給藥。可將活性成分與常規(guī)的藥學(xué)上可接受的賦形劑混合或復(fù)合。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解的是，可利用常規(guī)使用的、對(duì)于活性劑呈惰性的給藥模式、輔料、賦形劑或載體來制備和給予本發(fā)明所述的藥物組合物。此類方法、輔料、賦形劑和載體的不例在例如Remington’s Pharmaceutical Sciences,第18版,(1990)中描述，以引用的方式將其公開內(nèi)容并入本文。在受試者中使用的本發(fā)明的制劑包含所述試劑及其一種或多種可接受的賦形劑和任選的其它治療劑。所述賦形劑在與所述制劑的其它成分的相容性方面必須是“可接受的”且不會(huì)損害其接受者。所述制劑可方便地以單位劑型存在，并且可通過藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法制備。所有方法均包括使所述試劑與構(gòu)成一種以上輔助成分的賦形劑相關(guān)聯(lián)的步驟。通常，通過使所述試劑與賦形劑均勻密切地相關(guān)聯(lián)，并且如果需要的話，隨后將產(chǎn)物分為其單位劑量，以制備所述制劑。
[0261]適合口服給藥的形式包括通過本領(lǐng)域公認(rèn)的方法制備的片劑、含片(troches)、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖衆(zhòng)劑、糯米紙包劑(wafers)、口香糖等。此類治療有益的組合物或制劑中活性化合物的量為使得將獲得合適劑量的量。糖漿制劑通常由化合物或鹽在液態(tài)載體(例如乙醇、甘油或水)中的混懸液或溶液組成，并含有調(diào)味劑或著色劑。當(dāng)組合物為片劑形式時(shí)，可使用常規(guī)用于制備固體制劑的一種以上藥用賦形劑。該賦形劑的實(shí)例包括硬脂酸鎂、淀粉、乳糖和蔗糖。當(dāng)組合物為膠囊劑形式時(shí)，使用常規(guī)包封技術(shù)通常是合適的，例如在硬明膠膠囊殼中使用上述賦形劑。當(dāng)組合物為軟明膠殼膠囊形式時(shí)，可以考慮常規(guī)用于制備分散劑或混懸劑的藥用賦形劑(例如水性樹膠、纖維素、硅酸鹽或油)，并且將所述賦形劑并入軟明膠膠囊殼中。
[0262]適合腸胃外給藥的制劑方便地包括優(yōu)選與接受者血液等滲的無菌水性制劑。合適的賦形劑溶液包括磷酸鹽緩沖鹽水、鹽水、水、乳酸林格氏液或右旋葡萄糖(5%，于水中)?？赏ㄟ^將試劑與水混合從而產(chǎn)生溶液或懸浮液，將其裝入無菌容器并密封防止細(xì)菌污染，從而方便地制備此類制劑。優(yōu)選地，在無菌制造條件下使用無菌材料，從而避免需要最后無菌化。此類制劑可以任選地含有一種或多種其它成分，所述成分可包括防腐劑，如羥苯甲酯、氯甲酚、間甲酚、苯酚和苯扎氯銨。當(dāng)制劑存在于多劑量容器中時(shí)，此類材料特別有用。
[0263]還可以含有緩沖液，從而為制劑提供合適的pH值。合適的緩沖物質(zhì)包括磷酸鈉和醋酸鈉。氯化鈉或甘油可用于使制劑與血液等滲。
[0264]如果期望的話，可在非活性氣氛(如氮?dú)?下將制劑裝入容器，該制劑可方便地以單位劑量形式或多劑量形式存在，例如，存在于密封的安瓿中。
[0265]本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到，根據(jù)本發(fā)明的方法向受試者給予的本發(fā)明組合物的各種成分的量取決于上文所述的那些因素。[0266]典型的栓劑制劑包含在以這一方式給藥時(shí)有活性的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及粘合劑和/或潤滑劑，例如聚二醇、明膠、可可脂或者其它低熔點(diǎn)植物蠟或脂肪。典型的透皮制劑包括常規(guī)的水性或非水性輔料，例如霜?jiǎng)?、軟膏劑、洗劑或糊劑，或者處于含藥的塑料、貼片或膜的形式。
[0267]典型的吸入式組合物處于溶液劑、混懸劑或乳劑的形式，其可使用常規(guī)的推進(jìn)劑(諸如二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷)以氣霧劑(aerosol)的形式給藥。
[0268]在每種情況下，本發(fā)明的化合物或藥物組合物的治療有效量取決于多個(gè)因素，例如待治療受試者的健康、年齡、性別、身材和狀態(tài)，預(yù)期的給藥模式以及受試者接受預(yù)期劑型的能力?；钚詣┑闹委熡行Я渴亲阋詫?duì)所治療的病癥具有期望效果的量。
[0269]本文所使用的術(shù)語“治療(treatment) ”包括對(duì)動(dòng)物、特別是哺乳動(dòng)物、更特別是人的病癥或疾病進(jìn)行的任何治療，包括:(i)預(yù)防尚未診斷出患病的受試者出現(xiàn)疾病或病癥，Qi)抑制疾病或病癥，即阻滯其發(fā)展；減輕疾病或病癥，即使得病癥消退；或減輕疾病導(dǎo)致的病癥，即疾病的癥狀。例如，在調(diào)控皮膚色素沉著的方法中，期望的效果是在皮膚色素沉著調(diào)控存在問題的哺乳動(dòng)物、例如人中，部分或全部地抑制、推遲或預(yù)防疾病或病癥的進(jìn)程；抑制、推遲或防止疾病或病癥的復(fù)發(fā)；或預(yù)防疾病或病癥的發(fā)生或發(fā)展。
[0270]術(shù)語“治療有效量”指的是當(dāng)給予需要這種治療的哺乳動(dòng)物時(shí)，足以實(shí)現(xiàn)本文定義的有效治療的量。治療有效量可隨著待治療的受試者和疾病狀態(tài)、患病的程度和給藥的方式而變化，并且可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員常規(guī)確定。
[0271]可在細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中通過標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)程序測定有效量、毒性和療效，例如測定LD50 (使50%的群體致死的劑量)和ED50 (對(duì)50 %的群體在治療上有效的劑量)。劑量可隨所使用的劑型和所用的給藥途徑而變化。毒性和療效之間的劑量比為治療指數(shù)(therapeutic index),可以用LD50/ED50的比值來表示。優(yōu)選顯示出高治療指數(shù)的組合物和方法?？捎杉?xì)胞培養(yǎng)分析初步評(píng)估治療有效劑量。還可在動(dòng)物模型中配制達(dá)到循環(huán)血漿濃度范圍的劑量，所述范圍包括在細(xì)胞培養(yǎng)或合適的動(dòng)物模型中測定的IC50(即，達(dá)到癥狀的半最大抑制(half-maximum inhibition)的本發(fā)明化合物的濃度)。可通過例如高效液相色譜測定血漿中的水平?？赏ㄟ^合適的生物分析監(jiān)測任何特定劑量的效果?？捎舍t(yī)師確定劑量，并可在有必要的情況下將劑量調(diào)整至適合所觀察到的治療效果。
[0272]在某些實(shí)施方式中，可一次性給予患者有效劑量的含有本文所述的本發(fā)明化合物的組合物。在某些實(shí)施方式中，可重復(fù)給予患者有效劑量的含有本發(fā)明化合物的組合物。可給予患者治療量的含有本發(fā)明化合物的組合物，所述治療量例如0.lmg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、40mg/kg、50mg/kg或以上?？稍谝欢螘r(shí)間(如在5分鐘、10分鐘、15分鐘、20分鐘或25分鐘的時(shí)間內(nèi))給予含有本發(fā)明化合物的組合物。如有保證，例如可按規(guī)律重復(fù)給藥，如按小時(shí)給藥3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)或以上，或如按兩周(即每兩周)給藥I個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月或以上。在一些實(shí)例中，在初步治療方案后，可基于降低的頻率給予治療。例如，在每兩周給藥3個(gè)月后，可每月一次地重復(fù)給藥，共給藥6個(gè)月或I年以上。
[0273] 可由醫(yī)師確定本文所述的組合物的劑量，并可在有必要的情況下將劑量調(diào)整至適合所觀察到的治療效果。關(guān)于治療持續(xù)時(shí)間和頻率，對(duì)熟練的臨床醫(yī)師而言，一般對(duì)受試者進(jìn)行監(jiān)測以確定所述治療何時(shí)提供治療效益，并確定是否增加或減少劑量、是否增加或減少給藥頻率、是否中止治療、是否恢復(fù)治療或是否對(duì)治療方案進(jìn)行其它改變。給藥計(jì)劃可根據(jù)多個(gè)臨床因素(如，受試者對(duì)本發(fā)明化合物的敏感性)在一周一次至一天一次的范圍內(nèi)變動(dòng)。
[0274]在一些實(shí)施方式中，本文所述的技術(shù)涉及本文所述的含有本發(fā)明化合物的藥物組合物，以及任選的藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上可接受的載體和稀釋劑包括鹽水、水性緩沖液、溶劑和/或分散介質(zhì)。此類載體和稀釋劑的使用為本領(lǐng)域所熟知?？勺鳛樗帉W(xué)上可接受的載體的物質(zhì)的一些非限定性實(shí)例包括:(I)糖類，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉類，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；(3)纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、微晶纖維素和醋酸纖維素；(4)西黃蓍膠粉；(5)麥芽；(6)明膠；(7)潤滑劑，如硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉和滑石；(8)賦形劑，如可可脂和栓蠟；(9)油類，如花生油、棉籽油、向日葵油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；(10) 二醇類，如丙二醇；(11)多元醇類,如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇(PEG) ；(12)酯類，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；
(13)瓊脂；(14)緩沖劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20) pH緩沖液；(21)聚酯類、聚碳酸酯類和/或聚酸酐類；(22)膨松劑(bulking agents)，如多肽和氨基酸；(23)血清組分，如血清白蛋白、HDL和LDL;(24)C2-C12醇類，如乙醇；以及(25)其它在藥物制劑中使用的非毒性相容性物質(zhì)。濕潤劑、著色劑、脫模劑、涂層劑、甜味劑、調(diào)味劑、芳香劑、防腐劑和抗氧化劑也可出現(xiàn)在制劑中。術(shù)語如“賦形劑”、“載體”、“藥學(xué)上可接受的載體”等在本文中均可相互替換使用。在一些實(shí)施方式中，載體抑制活性劑(例如本文所述的本發(fā)明化合物)的降解。
[0275]不希望被理論所束縛，在某些實(shí)施方式中，本發(fā)明的化合物選擇性地抑制肝期寄生蟲。
[0276]根據(jù)本發(fā)明，可調(diào)控皮膚色素沉著。
[0277]定義
[0278]為了方便起見，此處收集了在說明書、實(shí)施例和所附權(quán)利要求中所用的若干術(shù)語。除非另有說明或在上下文中有所暗示，下列術(shù)語和短語包括下文提供的含義。除非另有明確說明或從上下文中可明顯看出，下列術(shù)語和短語不排除在其所屬領(lǐng)域已具有的含義。提供所述定義以輔助描述【具體實(shí)施方式】，而由于本發(fā)明的范圍僅受權(quán)利要求所限，因此并不意味著限制所請(qǐng)求保護(hù)的發(fā)明。除非另有定義，本文中使用的所有技術(shù)術(shù)語和科學(xué)術(shù)語具有與該發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】中的普通技術(shù)人員通常認(rèn)為的意思相同的意思。
[0279]本文所使用的術(shù)語“生物活性”指的是具有天然存在分子的結(jié)構(gòu)功能、調(diào)控功能或生化功能，并在細(xì)胞分析和/或體內(nèi)分析中表現(xiàn)出該分子的活性的蛋白質(zhì)。
[0280]本文所使用的術(shù)語“異構(gòu)體”指的是具有相同分子式、但具有不同結(jié)構(gòu)式的化合物。除非具有相同的官能團(tuán)，否則異構(gòu)體不必須具有相似的性質(zhì)。存在著多種不同類別的異構(gòu)體，如立體異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體(geometrical isomers)等。存在著異構(gòu)的兩類主要形式:結(jié)構(gòu)異構(gòu)和立體異構(gòu)(空間異構(gòu))。
[0281]標(biāo)記“R”和“S”用于表明分子關(guān)于其手性中心的絕對(duì)構(gòu)型。所述標(biāo)記可作為前綴或后綴存在；所述標(biāo)記能夠或不能通過連字號(hào)使其與異構(gòu)體相分離；所述標(biāo)記能夠或不能帶有連字號(hào)；并且所述標(biāo)記能夠或不能以括號(hào)括出。
[0282]本文所使用的術(shù)語“S異構(gòu)體”指的是根據(jù)對(duì)其每一取代基各自指定優(yōu)先級(jí)的系統(tǒng)，具有S手性中心的對(duì)映異構(gòu)體；根據(jù)Cahn-1ngold-Prelog(CIP)優(yōu)先規(guī)則,基于原子序數(shù)，其原子序數(shù)的優(yōu)先級(jí)沿逆時(shí)針方向降低則為S對(duì)映異構(gòu)體(來自于拉丁文Sinestra，意為“左”)。不希望被理論所限，如果中心的取向使得4個(gè)基團(tuán)中最低優(yōu)先級(jí)的方向背離觀察者，觀察者可得出兩種可能:若剩余的三個(gè)取代基的優(yōu)先級(jí)沿順時(shí)針方向降低，則該中心標(biāo)記為R(來自于拉丁文Rectus，意為“右”);若沿逆時(shí)針方向降低，則為S (來自于拉丁文Sinestra,意為“左”)。
[0283]本文所使用的術(shù)語“治療(treating) ”指的是改變被治療的受試者的疾病進(jìn)程。治療的療效包括但不限于，預(yù)防疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)、減輕癥狀、降低疾病直接或間接的病理結(jié)果、減緩疾病發(fā)展的速度、改善或緩和疾病的狀態(tài)、以及緩解或改善預(yù)后。
[0284]本文所使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的賦形劑”是指與本發(fā)明藥物組合物的活性成分(例如，本發(fā)明的化合物)相容(優(yōu)選能夠穩(wěn)定所述活性成分)、且不損害待治療受試者的載體和輔料。例如，可將與本發(fā)明化合物形成特定并更具溶解性的復(fù)合物的增溶劑用作遞送所述化合物的藥物賦形劑。合適的載體和輔料是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。本文所使用的術(shù)語“賦形劑”將包括全部的此類載體、佐劑、稀釋劑、溶劑或其它非活性添加劑。合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑包括但不限于，水、鹽溶液、醇、植物油、聚乙二醇、明膠、乳糖、直鏈淀粉、硬脂酸鎂、滑石、硅酸、粘性石蠟、芳香油、脂肪酸甘油單酯和甘油二酯、石油醚脂肪酸酯(petroethral fatty acid ester)、輕甲基纖維素、聚乙烯吡咯燒酮等。還可對(duì)本發(fā)明的藥物組合物進(jìn)行無菌化，如有需要，可將本發(fā)明的藥物組合物與助劑混合，所述助劑例如潤滑劑、防腐齊?、穩(wěn)定齊?、濕潤齊?、乳化齊?、影響滲透壓的鹽、緩沖齊?、著色劑、調(diào)味劑和/或芳香物質(zhì)等，所述助劑非破壞性地與本發(fā)明的活性化合物反應(yīng)。
[0285]術(shù)語“鹽”和“藥學(xué)上可接受的鹽”是指本文公開的化合物、化合物的立體異構(gòu)體或化合物的前藥的有機(jī)鹽和無機(jī)鹽。因此，本文所使用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是由本發(fā)明化合物的酸性或堿性基團(tuán)形成的鹽。示例性的鹽包括但不限于，硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥拍酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽(gentisinate)、富馬酸鹽、葡糖酸鹽(gluconate)、葡萄糖醒酸鹽(glucaronate)、糖酸鹽(saccharate)、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、及雙羥萘酸鹽(pamoate)。
[0286] 術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”還指由本文公開的具有酸性官能團(tuán)(如羧酸官能團(tuán))的化合物和藥學(xué)上可接受的無機(jī)堿或有機(jī)堿制備的鹽。合適的堿包括但不限于，堿金屬(如鈉、鉀和鋰)的氫氧化物、堿土金屬(如鈣和鎂)的氫氧化物、其它金屬(如鋁和鋅)的氫氧化物、氨和有機(jī)胺(如未取代或羥基取代的單烷基胺、二烷基胺或三烷基胺；二環(huán)己基胺；二丁基胺；吡卩定;N-甲基胺、N-乙基胺；二乙胺；二乙胺；單-(2-羥基-低級(jí)燒基胺)、雙-(2-羥基-低級(jí)烷基胺)或三-(2-羥基-低級(jí)烷基胺)，例如單-(2-羥乙基)胺、二-(2-羥乙基)胺、三-(2-羥乙基)胺、2-羥基-叔丁基胺或三-(羥甲基)甲胺；N，N- 二-低級(jí)烷基-N-(羥基低級(jí)烷基)-胺，例如N，N- 二甲基-N-(2-羥乙基)胺或三-(2-輕乙基)胺；N-甲基-D-葡糖胺(N-methyl-D-glucamine);以及氨基酸，如精氨酸、賴氨酸等)。其它藥學(xué)上可接受的鹽在Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties, Selection, and Use (P.Heinrich Stahl 和 C.Wermuth 編，Verlag HelveticaChica Acta, Zurich, Switzerland(2002))中描述。在其它實(shí)施方式中，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是由本發(fā)明化合物的酸性或堿性基團(tuán)形成的鹽。示例性的鹽包括但不限于，硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、及雙輕萘酸鹽。
[0287]本文所使用的術(shù)語“受試者”是指脊椎動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物、更優(yōu)選靈長類動(dòng)物、進(jìn)一步更優(yōu)選人。哺乳動(dòng)物包括但不限于，人、靈長類動(dòng)物、野生動(dòng)物、野化動(dòng)物(feralanimals)、農(nóng)場動(dòng)物(farm animals)、體育動(dòng)物(sport animals)和寵物。在一些實(shí)施方式中，受試者包括馴養(yǎng)的和市售的農(nóng)場動(dòng)物，例如但不限于，牛、豬、馬和其它市售動(dòng)物。在一些實(shí)施方式中，受試者為雄性受試者；然而，受試者還可包括雌性受試者以及由雌性變性為雄性的受試者。靈長類動(dòng)物包括黑猩猩、食蟹猴、蜘蛛猴和獼猴(如恒河猴)。嚙齒動(dòng)物包括小鼠、大鼠、旱獺(woodchucks)、雪紹(ferrets)、兔和倉鼠。馴養(yǎng)和狩獵動(dòng)物包括奶牛、馬、豬、鹿、野牛、水牛、貓科物種(如家貓)、犬科物種(如狗、狐貍、狼)、鳥類(如雞、鴯鹋、能鳥)和魚類(如鱒魚(trout)、It魚和鮭魚)?；颊呋蚴茉囌甙ㄇ懊嫠龅娜魏巫蛹?，上述所有。在本文描述方面的某些實(shí)施方式中，所述受試者是哺乳動(dòng)物，例如，靈長類動(dòng)物、如人類。術(shù)語“患者”和“受試者”在本文中可互換使用。此外，本文所述的方法和組合物可用于治療馴養(yǎng)動(dòng)物和/或?qū)櫸铩?br> [0288]術(shù)語“前藥”是指配制為前體化合物的化合物，該前體化合物于給藥后在體內(nèi)通過化學(xué)或生理學(xué)過程(例如通過被引入生理學(xué)pH下或通過酶活性)而活化或釋放化合物的活性成分。對(duì)于前藥的合成和使用的討論在Higuchi和Stella, Prodrugs as NovelDelivery Systems, the ACS Symposium Series 第 14 卷；以及 Bioreversible Carriersin Drug Design, Edward B.Roche 編，American Pharmaceutical Association andPergamon Press, 1987中提供。據(jù)此,術(shù)語“前藥”意味著能夠通過一些化學(xué)或生理過程(例如酶過程和代謝水解)轉(zhuǎn)化為非活性形式、并且該非活性形式能夠通過一些共化合物(co-compound)或特定環(huán)境因素(例如pH等)在體內(nèi)活化的化合物。當(dāng)給予受試者時(shí)，前藥可以是非活性的(即酯)，但能夠在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性化合物(例如通過水解為游離的羧酸或游離的羥基)。前藥化合物通常提供了在機(jī)體內(nèi)有利的溶解性、組織相容性或緩釋性。術(shù)語“前藥”還意味著包括任何共價(jià)結(jié)合的載體，當(dāng)給予受試者所述前藥時(shí)，所述載體能夠在體內(nèi)釋放活性化合物。
[0289]本文所用的術(shù)語“治療有效量”是指治療時(shí)足以產(chǎn)生有益的或所期望的臨床結(jié)果的量。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公認(rèn)的，治療有效量依賴于所治療的特定疾病、給藥途徑、選用的賦形劑和組合療法的可能性而變化。
[0290]確定治療有效量完全為本領(lǐng)域技術(shù)人員能力所及。通常，治療有效量可隨受試者的病史、年齡、狀況、性別、嚴(yán)重程度以及受試者的醫(yī)療條件類型、以及其它藥物活性劑的給予而變化。此外，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公認(rèn)的，治療有效量還依賴于所治療的特定疾病、給藥途徑、選用的賦形劑和組合療法的可能性而變化。
[0291]本文所使用的術(shù)語“皮膚”是指動(dòng)物的表皮和/或真皮。[0292]本文所使用的術(shù)語“降低/減少(decrease/reduced/reduction) ”或“抑制(inhibit) ”通常都意味著降低了有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的量。然而，為避免疑義，“減少”或“降低”或“抑制”表示相對(duì)于參比水平降低至少10%，例如降低至少約20%、或至少約30%、或至少約40%、或至少約50%、或至少約60%、或至少約70%、或至少約80%、或至少約90%、或上至并包括降低100% (如，相對(duì)于參比樣品而言的缺乏水平)、或相對(duì)于參比水平(例如不存在本發(fā)明化合物時(shí))的降低在10%到100%間的任意量。
[0293]本文使用的術(shù)語“增加/增強(qiáng)(increased/increase/enhance) ”或“活化(activate)”通常都意味著增加了有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性的量；為避免任何疑義，術(shù)語“增加”或“增強(qiáng)”或“活化”表示相對(duì)于參比水平增加至少10%，例如增加至少約20%、或至少約30%、或至少約40%、或至少約50%、或至少約60%、或至少約70%、或至少約80%、或至少約90%、或上至并包括增加100%、或相對(duì)于參比水平的增加在10%到100%之間的任意量；或相對(duì)于參比水平(例如不存在本發(fā)明化合物時(shí))存在至少約2倍、或至少約3倍、或至少約4倍、或至少約5倍、或至少約10倍的增加、或存在2倍到10倍之間的任意量的增加、或是更大量的增加。
[0294] 術(shù)語“統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(statistically significant)”或“顯著地(significantly)”表示統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，并且通常意味著比正常標(biāo)記物的濃度低至少兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差(2SD)或更低。這個(gè)術(shù)語表示存在差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)證據(jù)。它被定義為當(dāng)無效假設(shè)實(shí)際上是真時(shí)作出拒絕該無效假設(shè)決定的可能性。通常用P值來作出決定。
[0295]本文所使用的術(shù)語“實(shí)質(zhì)上(substantially) ”意味著至少約60%的部分,或優(yōu)選至少約70%、或至少約80%、或至少約90%、或至少約95%、或至少約97%、或至少約99%或以上的部分，或70%至100%之間的任意整數(shù)的部分。
[0296]本文所使用的術(shù)語“包含/包括(comprising/comprises) ”表示對(duì)本發(fā)明必要的組合物、方法及其各自的組成部分，并且無論是否必要都仍然對(duì)未指定的要素保持開放。
[0297]本文所使用的術(shù)語“基本上由…組成”涉及給定的實(shí)施方式所需的那些元素。該術(shù)語允許存在實(shí)質(zhì)上不影響本發(fā)明實(shí)施方式的基礎(chǔ)和新穎性或起作用的特征的其它要素。
[0298]術(shù)語“由…組成”涉及本文所述的組合物、方法及其各自的組成部分，排除沒有在實(shí)施方式描述中詳述的任何要素。
[0299]除非文中明確地另有所指，本說明書和所附權(quán)利要求中所用的單數(shù)術(shù)語“一 (a/an)”和“該/所述(the)”涵蓋復(fù)數(shù)的所指物。因此，例如，提及“所述方法/該方法(themethod) ”時(shí)，其包括一種或多種本文中所述的方法和/或步驟類型和/或本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀本公開等后將變得顯而易見的方法和/或步驟類型。
[0300]除了在操作實(shí)施例中或另有指示的地方,本文所用的表示成分的量或反應(yīng)條件的全部數(shù)值在所有情況下都應(yīng)該被理解為被術(shù)語“約”修飾。與百分比相連使用的術(shù)語“約”可意味著±1%。
[0301]除非另有說明，本申請(qǐng)和權(quán)利要求中單數(shù)的使用包括復(fù)數(shù)。另外，除非另有說明，在本申請(qǐng)中，“或”的使用意味著“和/或”。此外，術(shù)語“包括/包含(including) ”以及其它形式(例如“includes”和“included”)的使用是非限制性的。同樣，除非另有明確說明，術(shù)語“要素”或“成分/組分”均涵蓋包含一個(gè)單位的要素和成分/組分以及包含多于一個(gè)單位的要素和成分/組分。[0302]除非本文中另有定義，本申請(qǐng)中使用的科學(xué)術(shù)語和技術(shù)術(shù)語具有與該發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】中的普通技術(shù)人員通常認(rèn)為的意思相同的意思。應(yīng)理解的是，本發(fā)明不限于本文所述的特定的方法、方案或試劑等，其可以變化。本文所使用的術(shù)語僅用于描述【具體實(shí)施方式】，并不旨在限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍僅受權(quán)利要求所限。免疫學(xué)和分子生物學(xué)的慣用術(shù)語的定義可在如下出版物中找到:“The Merck Manual of Diagnosis andTherapy”，第 18 版，Merck Research Laboratories 出版，2006(ISBNO-911910-18-2)；Robert S.Porter 等(編)，The Encyclopedia of Molecular Biology, BlackwellScience Ltd.出版，1994 (ISBN0-632-02182-9);以及 Robert A.Meyers (編)，MolecularBiology and Biotechnology:a Comprehensive Desk Reference，由 VCH Publishers, Inc.出版，1995(ISBN1-56081-569-8) ；Werner Luttmann 著，Elsevier 出版的 Immunology，2006。分子生物學(xué)中的慣用術(shù)語的定義還可在下列出版物中找到！Benjamin Lewin，Genes IX，由 Jones&Bartlett Publishing 出版，2007 (ISBN-13:9780763740634) ；Kendrew等(編)，Blackwell Science Ltd.出版的 The Encyclopedia of Molecular Biology,1994 (ISBN0-632-02182-9)；以及 Robert A.Meyers (編)，Maniatis 等，MolecularCloning:A Laboratory Manual， Cold Spring Harbor Laboratory Press， Cold SpringHarbor，N.Y.，USA(1982) ;Sambrook 等，Molecular Cloning:A Laboratory Manual (第 2片反)，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，USA (1989)；Davis 等，Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier Science PublishingInc.，New York, USA (1986);或 Methods in Enzymology:Guide to Molecular CloningTechniques,第 152 卷，S.L.Berger 和 A.R.Kimmerl 編，Academic Press Inc., San Diego,USA (1987) ；Current Protocols in Molecular Biology (CPMB) (Fred M.Ausubel 等編，JohnWiley and Sons, Inc.), Current Protocols in Protein Science (CPPS) (John E.Coligan等編，John Wiley and Sons, Inc.)和 Current Protocols in Immunology (CPI) (JohnE.Coligan等編，John Wiley and Sons, Inc.),以引用的方式將其全部并入本文。
[0303]應(yīng)當(dāng)理解的是，上述詳細(xì)說明及下面的實(shí)施例僅是說明性的，并不作為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制。對(duì)本領(lǐng)域人員顯而易見的是，可在不脫離本發(fā)明的精神和保護(hù)范圍的情況下對(duì)所公開的實(shí)施方式進(jìn)行各種變化和改進(jìn)。此外，為了描述和公開的目的，通過引用的方式將所標(biāo)明的所有專利、專利申請(qǐng)以及出版物明確并入本文，例如，此類出版物中描述的可與本發(fā)明一起使用的方法學(xué)。這些出版物僅僅由于它們的公開早于本申請(qǐng)的申請(qǐng)日而提供。在這一方面不應(yīng)當(dāng)視作承認(rèn)本發(fā)明人沒有權(quán)利借助于先前的發(fā)明或因?yàn)槿魏纹渌蚨鴮⒐_的內(nèi)容提前。所有關(guān)于這些文件的日期的聲明或這些文件的內(nèi)容的表述是基于 申請(qǐng)人:可得的信息，并且不構(gòu)成關(guān)于這些文件的日期或內(nèi)容的正確性的任何承認(rèn)。篩選分析方法
[0304]在又一方面，本文公開了對(duì)能夠調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性的化合物進(jìn)行識(shí)別的方法。所述方法通常包括使細(xì)胞與測試化合物相接觸，并將報(bào)告子的表達(dá)與對(duì)照或參照相比較。相對(duì)于對(duì)照或參照而言，報(bào)告 子的表達(dá)、量或活性的變化表明該化合物能夠調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性。對(duì)照可以是不與化合物接觸的樣品。對(duì)照可以是用已知的MITF表達(dá)或活性調(diào)節(jié)劑處理的樣品。這一對(duì)照可作為陽性對(duì)照。陽性對(duì)照可以是用已知的MITF抑制劑處理的樣品。[0305]在所述分析方法的實(shí)施方式中，所述細(xì)胞能夠產(chǎn)生MITF，并包含報(bào)告基因，所述報(bào)告基因可操作地連接至MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子。所述細(xì)胞能夠由內(nèi)源基因產(chǎn)生MITF0或者(或此外)，細(xì)胞可以是含有外源MITF基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞。
[0306]本文所使用的術(shù)語“報(bào)告基因”指的是表達(dá)產(chǎn)生可檢測的響應(yīng)或信號(hào)的分子的基因。本文所使用的術(shù)語“可檢測的”涉及允許對(duì)所述分子的存在進(jìn)行檢測、成像和/或監(jiān)測的分子或分子中的元素或官能團(tuán)?？蓹z測的響應(yīng)通常是指通過觀測或儀器能夠檢測的信號(hào)變化或發(fā)生。不受限制地，可直接地檢測所表達(dá)的分子，或所述分子能夠在存在某試劑時(shí)產(chǎn)生可檢測的信號(hào)。此外，可使用確定培養(yǎng)物中的報(bào)告子的量的任何可用方法。在一些實(shí)施方式中，可檢測的響應(yīng)是光學(xué)信號(hào)，即報(bào)告子是光學(xué)報(bào)告子。合適的光學(xué)報(bào)告子包括但不限于熒光報(bào)告子和化學(xué)發(fā)光基團(tuán)。
[0307]在一些實(shí)施方式中，所述可檢測的響應(yīng)為熒光或熒光的變化，例如，熒光強(qiáng)度的變化、熒光激發(fā)或發(fā)射波長分布的變化、熒光壽命的變化和/或熒光偏振的變化。在一些實(shí)施方式中，報(bào)告基因表達(dá)能夠催化由試劑產(chǎn)生可檢測的信號(hào)的酶。
[0308]在一些實(shí)施方式中,所述報(bào)告基因表達(dá)螢光素酶(Iuciferase)。
[0309]在一些實(shí)施方式中，所述報(bào)告基因表達(dá)熒光蛋白。適用的熒光蛋白的實(shí)例包括但不限于，綠色熒光蛋白、紅色熒光蛋白(例如，DsRed)、黃色熒光蛋白、青色熒光蛋白、藍(lán)色熒光蛋白，及它們的變體(參見，例如，美國專利N0.6，403，374、N0.6，800，733以及N0.7，157，566)。GFP變體的具體實(shí)例包括但不僅限于:增強(qiáng)型GFP(EGFP)、不穩(wěn)定EGFP、在 Doan 等，Mol.Microbiol，55:1767-1781 (2005)中描述的 GFP 變體、在 Crameri 等，Nat.Biotechnol.，14:315319 (1996)中描述的 GFP 變體、在 Rizzo 等，Nat.Biotechnol,22:445(2004)和 Tsien，Annu.Rev.Biochem.,67:509(1998)中描述的天藍(lán)色熒光蛋白、以及在Nagal等，Nat.Biotechnol.，2087-90 (2002)中描述的黃色熒光蛋白。DsRed變體在例如 Shaner 等，Nat.Biotechnol., 22:1567-1572 (2004)中有所描述，并包括 mStrawberry、mCherry、mOrange、mBanana、mHoneydew 和 mTangerine。其它 DsRed 變體在例如 Wang 等，Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.,101:16745-16749 (2004)中有所描述，并包括 mRaspberry 和mPlum。DsRed 變體的其它實(shí)例包括在 Fischer 等，F(xiàn)EBS Lett.，577:227-232 (2004)中描述的 mRFPmars 以及在 Fischer 等，F(xiàn)EBS Lett, 580:2495-2502 (2006)中描述的 mRFPruby。
[0310]熒光蛋白的其它非限制性實(shí)例包括AceGFP、AcGFPU AmCyanU AQ143、AsRed2、Azam1-Green (mAG)、Cerulean、Cerulean、Citrine、cOFP、CopGFP> Cyan、CyPet> Dronpa、DsRed/DsRed2/DsRed_Express、DsRed-Monomer、EBFP、ECFP、EGFP、Emerald、eqFP611、EYFP、GFPs、HcRedl、HcRed_tandem、J-RecU Kaede、KFP、KikGR、mBanana、mCFP、mCherry、mCitrine、mEosEP、mHoneydew> MiCy> mKO、mOrange、mPlum、mRaspberry> mRFPl、mStrawberry、mTangerine、mYFP、mYFP、mYFP、PA-GFP, PA-mRFP、PhiYFP, PS-CFP-2、Renilla、tdEosFP、tdTomato、T-Sapphire> TurboGFP> UV-T-Sapphire> Venus、YPet> ZsYellowl,以及它們的衍生物和類似物。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述熒光蛋白是綠色熒光蛋白(GFP)。
[0311] 本領(lǐng)域已知的檢測熒光(例如從熒光團(tuán)或熒光蛋白而來的熒光)的具體裝置或方法包括但不限于:體內(nèi)近紅外突光(參見，例如，F(xiàn)rangioni, Curr.0pin.Chem.Biol，7:626-634 (2003))、MaestroTM 體內(nèi)熒光成像系統(tǒng)(CambridgeResearch&Instrumentation, Inc.；ffoburn, Mass.)、使用飛點(diǎn)掃描裝置(flying-spotscanner)進(jìn)行的體內(nèi)突光成像(參見，例如，Ramanujam等，IEEE Transactions onBiomedical Engineering,48:1034-1041 (2001))等。其它用于檢測光學(xué)響應(yīng)的方法或裝置不受限制地包括目視檢查、(XD相機(jī)、攝影機(jī)、成像膠片(photographic film)、激光掃描裝置、突光計(jì)、光電二極管、量子計(jì)數(shù)器、落射突光顯微鏡(epifluorescence microscopes)、掃描顯微鏡、流式細(xì)胞儀、突光微板讀取儀(fluorescence microplate readers)、或使用光電倍增管進(jìn)行信號(hào)放大。
[0312]可將報(bào)告基因可操作地連接至作為MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子。“作為MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子”指的是由MITF直接調(diào)節(jié)的任何基因啟動(dòng)子。該調(diào)節(jié)可以是由MITF與啟動(dòng)子的直接相互作用所致。在一些實(shí)施方式中，作為MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子是TRPMl基因的啟動(dòng)子。
[0313]對(duì)于所述分析方法，任選地可使細(xì)胞在與測試化合物接觸前生長一段時(shí)間。在一些實(shí)施方式中，實(shí)際工作者可獲得已經(jīng)在合適的器皿中接種并允許其生長一定時(shí)間的細(xì)胞。在其它實(shí)施方式中，實(shí)際工作者可將細(xì)胞接種在合適的器皿中，并允許細(xì)胞在與測試化合物接觸前生長一段時(shí)間，例如至少一天、至少兩天、至少三天、至少四天、至少五天、至少六天、至少七天或以上。
[0314]在測試化合物與細(xì)胞接觸足夠長的一段時(shí)間后，測定報(bào)告子(例如，表達(dá)或活性)的量并與對(duì)照或參照進(jìn)行比較。例如，接觸時(shí)間可為數(shù)秒至數(shù)天或數(shù)周。實(shí)際工作者可對(duì)接觸時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化，從而得到最佳的信噪比、時(shí)間約束(time constraints)、待測試的測試化合物的量、細(xì)胞數(shù)目、測試體積、所述分析方法可用的試劑等。
[0315]本文所用的術(shù)語“測試化合物”指的是其對(duì)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活的刺激和/或提高和/或促進(jìn)能力有待篩選的化合物和/或組合物。所述測試化合物可包括各種不同的化合物，包括化合物和化合物的混合物，例如有機(jī)小分子或無機(jī)小分子；糖類；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白質(zhì)、以及肽類似物和衍生物；模擬肽；核酸；核酸類似物和衍生物；由生物材料(如細(xì)菌、植物、真菌或動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物組織)制得的提取物；天然存在的組合物或合成的組合物；以及以上化合物的任意組合。在一些實(shí)施方式中，所述測試化合物是小分子。
[0316]可能的測試化合物的數(shù)量達(dá)到數(shù)百萬。開發(fā)基于小分子、聚合物和基因組的文庫的方法在例如 Ding 等，J Am.Chem.Soc.124:1594-1596 (2002)和 Lynn 等，J.Am.Chem.Soc.123:8155-8156 (2001)中描述?？缮藤彽幕衔镂膸炜赏ㄟ^例如ArQule、Pharmacopia>graffinity>Panvera>Vitas-M Lab、Biomol International 和 Oxford 獲得?？捎帽疚乃龅暮Y選裝置和方法對(duì)這些文庫進(jìn)行篩選。也可使用例如來自NIH Roadmap、Molecular Libraries Screening Centers Network(MLSCN)的化合物文庫。www.broad,harvard, edu/chembio/platform/screening/compound_libraries/ind in.htm 上可找至丨J化合物文庫的詳細(xì)列表。化學(xué)品文庫或化合物文庫是通常最終用于高通量篩選或工業(yè)生產(chǎn)的儲(chǔ)備的化學(xué)品的集合。所述化學(xué)品文庫可簡單地由一系列儲(chǔ)備的化學(xué)品組成。各化學(xué)品的相關(guān)信息存儲(chǔ)在收錄了如下信息的一些類型的數(shù)據(jù)庫中:如化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度、量、以及物理化學(xué)特征。
[0317]根據(jù)所實(shí)踐的【具體實(shí)施方式】，測試化合物可以溶液中的游離形式提供，或者可以附著于載體或固體支持物(例如，珠子)。大量適當(dāng)?shù)墓腆w支持物可用于固定測試化合物。適當(dāng)?shù)墓腆w支持物的實(shí)例包括瓊脂糖、纖維素、葡聚糖(例如作為Sephadex、Sepharose可商購)、羧甲基纖維素、聚苯乙烯、聚乙二醇(PEG)、濾紙、硝化纖維素、離子交換樹脂、塑料膜、聚胺甲基乙烯基醚(polyaminemethylvinylether)馬來酸共聚物、玻璃珠、氨基酸共聚物、乙烯-馬來酸共聚物、尼龍和絲等。另外，對(duì)于本文所述的方法，測試化合物可以單獨(dú)篩選或成組篩選。在預(yù)期有效測試化合物的命中率(hit rates)低至預(yù)期給定組中不會(huì)有超過I個(gè)陽性結(jié)果的情況下，成組篩選特別有用。
[0318]可在任何所希望的濃度下對(duì)測試化合物進(jìn)行測試。例如，可在0.01nM至約IOmM的終濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試。此外，可在2個(gè)以上(例如，2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)、8個(gè)、9個(gè)、10個(gè)或更多個(gè))不同濃度下進(jìn)行測試。如果測試化合物僅在某濃度范圍內(nèi)具有活性，則該測試是有用的。當(dāng)在2個(gè)以上不同濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試時(shí)，濃度差別的范圍可以是10倍-10，000倍(例如，10倍-5000倍、10倍-1000倍、10倍-500倍或10倍-250倍)。
[0319]在一些實(shí)施方式中，對(duì)測試化合物進(jìn)行多于一次的所述分析方法，并且若其可重現(xiàn)地調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性，則對(duì)其進(jìn)行選擇。
[0320]在一些實(shí)施方式中，所述分析方法進(jìn)一步包括確定所述化合物在任何其它篩選中的得分的步驟。這可通過檢查描述多種分析方法中化合物活性的多個(gè)化學(xué)數(shù)據(jù)庫而實(shí)現(xiàn)。這一步驟有助于識(shí)別對(duì)本分析方法而言獨(dú)有的(unique)化合物。例如,可使用BroadInstitute的ChemBank分析工具。ChemBank是小分子篩選結(jié)果的數(shù)據(jù)庫，只要在BroadInstitute中進(jìn)行，不考 慮篩選的具體性質(zhì)。在一些實(shí)施方式中，選出的化合物是在少于3個(gè)(例如，3、2、1或O)其它篩選中得分(scores)的化合物。
[0321]在一些實(shí)施方式中，選出的測試化合物表現(xiàn)出劑量依賴性地調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性。在一些實(shí)施方式中，選出的測試化合物在所述分析方法中表現(xiàn)出最大地調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性。由于一些高效力的調(diào)節(jié)子(基于IC50)僅能實(shí)現(xiàn)弱的最大阻抑，而其它效力較低的調(diào)節(jié)子(基于IC50)即使在低于其IC50的劑量時(shí)仍能夠產(chǎn)生明顯更高的阻抑，因此這樣可以是有用的。
[0322]藥物的分配系數(shù)(distribution coefficient)極大地影響藥物到達(dá)其在體內(nèi)的預(yù)期靶標(biāo)的難易程度、一旦其到達(dá)靶標(biāo)將會(huì)產(chǎn)生多強(qiáng)的效果以及其將以活性形式停留在體內(nèi)多長時(shí)間。LogP是在藥物化學(xué)中使用的一個(gè)用來評(píng)估給定分子的類藥性(druglikeness)的標(biāo)準(zhǔn),并用于計(jì)算親脂性效率(lipophilic efficiency)(效力與LogP的函數(shù)，用于評(píng)估所研究的化合物的質(zhì)量)?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的方法實(shí)驗(yàn)性地確定LogP值。或者(或此外)，可由化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)預(yù)測LogP值。LogP值的預(yù)測方法也是本領(lǐng)域公知的。參見例如，Ghose 和 Crippen (J.Comp.Chem.9,80 (1988))。
[0323]通常，具有的LogP值范圍為0.7-5.9的化合物滲透皮膚，然而，如果log POW值高于5.5，則皮膚滲透性會(huì)減弱。據(jù)此，在一些實(shí)施方式中，選出的測試化合物具有的LogP小于或等于6 (例如，小于或等于5、小于或等于4、小于或等于3、小于或等于2、或者小于或等于I)。在一些實(shí)施方式中，選出的化合物具有的LogP值范圍為0.5-6 (例如，0.5-5.5,0.5)。
[0324]在一個(gè)實(shí)施方式中，選出的化合物具有的LogP值范圍為約0.7至約6。
[0325]不受限制地，可以任意密度接種或培養(yǎng)細(xì)胞，從而提供最佳的信噪比。例如，可以1，000-20, 000細(xì)胞/孔的密度將細(xì)胞接種或培養(yǎng)在384孔板中。在一些實(shí)施方式中，可以
I,000細(xì)胞/孔、2，000細(xì)胞/孔、4，000細(xì)胞/孔、8，000細(xì)胞/孔、12，000細(xì)胞/孔、16，000細(xì)胞/孔或20，000細(xì)胞/孔的密度將運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元接種在384孔板中?；谏鲜鰞?nèi)容，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠調(diào)整其它細(xì)胞培養(yǎng)器皿中的接種密度。例如，能夠計(jì)算384孔板和待使用的器皿中孔的規(guī)格、并基于384孔板和待使用的器皿中孔的體積比或表面積比來按比例決定待接種細(xì)胞的數(shù)目。
[0326]可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員可得的用于細(xì)胞培養(yǎng)的任何合適的容器或裝置進(jìn)行所述分析方法。例如，可在24孔板、96孔板或384孔板中進(jìn)行所述分析方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，在384孔板中進(jìn)行所述分析方法。
[0327]可由本領(lǐng)域技術(shù)人員可得的任何資源獲得本文公開的方面的細(xì)胞。此外，所述細(xì)胞可以是任何來源。據(jù)此，在一些實(shí)施方式中，所述細(xì)胞來自哺乳動(dòng)物來源。在一些實(shí)施方式中，所述細(xì)胞是黑色素細(xì)胞或來自于黑色素瘤細(xì)胞系。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述細(xì)胞來自于人黑色素瘤細(xì)胞系Skmel5。
[0328]在一些實(shí)施方式中，所述細(xì)胞來自于受試者，例如患者。在一些實(shí)施方式中，受試者(例如患者)是需要調(diào)控其皮膚色素沉著的受試者。
[0329] 在一些實(shí)施方式中，篩選方法是高通量篩選。高通量篩選(HTS)是采用機(jī)器人、數(shù)據(jù)處理和控制軟件、液體操作裝置以及靈敏性檢測器的用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的方法。高通量篩選或HTS使得研究者快速進(jìn)行數(shù)百萬的生化、遺傳或藥理學(xué)測試。高通量篩選是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，例如，在美國專利號(hào)5，976，813,6, 472，144,6, 692，856,6, 824，982和7，091，048中有所描述，以引用的方式將每一以上文獻(xiàn)的整體并入本文。
[0330]HTS使用自動(dòng)化對(duì)候選化合物文庫進(jìn)行分析篩選。分析方法是對(duì)特定活性(通常為對(duì)生化機(jī)制或生物機(jī)制的抑制或刺激)的測試。典型的HTS篩選文庫或“數(shù)據(jù)庫組(decks) ”可包含100，000至多于2，000，000個(gè)化合物。
[0331]HTS的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)設(shè)備或測試器皿為微滴定板:通常為一次性并由塑料制成的小型容器，其特征在于具有格狀排列的小的開放的隔斷(divot)，稱為孔。用于HTS的現(xiàn)代微板一般具有384個(gè)、1536個(gè)或3456個(gè)孔。它們均為96的倍數(shù)，對(duì)應(yīng)于最初的具有8 X 12、9mm間隙的96孔微板。
[0332]為了準(zhǔn)備分析方法，研究者將他/她希望利用其進(jìn)行試驗(yàn)的合適的反應(yīng)物(如運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元細(xì)胞群)填入板上的每一孔中。在經(jīng)過一段培養(yǎng)時(shí)間，允許反應(yīng)物吸收、結(jié)合孔中的化合物或者與孔中的化合物反應(yīng)(或不能反應(yīng))后，手動(dòng)或通過機(jī)器對(duì)板上的全部孔進(jìn)行測定。當(dāng)研究者使用顯微鏡(例如)尋找計(jì)算機(jī)自身難以檢測的變化時(shí)，手動(dòng)測量經(jīng)常是必須的?；蛘?，專用的自動(dòng)分析儀可對(duì)這些孔實(shí)施大量實(shí)驗(yàn)，例如比色測定、放射性計(jì)數(shù)等。在這種情況下，機(jī)器以數(shù)值網(wǎng)格輸出每一實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，每一數(shù)值映射至由單個(gè)孔獲得的結(jié)果。高容量分析儀器可在幾分鐘的間隙內(nèi)像這樣測定數(shù)十塊板，極快地生成數(shù)以千計(jì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)點(diǎn)。
[0333]另一方面，本發(fā)明提供了通過本文所述的篩選分析方法選出的化合物。將理解的是，本文也要求保護(hù)通過本文所述的篩選分析方法選出的化合物的類似物、衍生物、異構(gòu)體、以及藥學(xué)上可接受的鹽。
[0334]在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明可由任何編號(hào)段落進(jìn)行描述:
[0335]1.一種調(diào)控皮膚色素沉著的方法，所述方法包括:向有需要的受試者給予藥物組合物，所述藥物組合物包含抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的治療劑。[0336]2.如段I所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組:
[0337]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0338]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0339](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0340]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0341]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0342]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0343]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0344][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0345]N- (2-氟苯基)-2- {[5- (3_甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0346]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0347]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0348]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0349]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0350]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0351 ]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0352]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0353]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0354]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0355]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0356]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0357]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0358]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0359]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0360]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0361]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0362]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0363]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0364]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1- [(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0365]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0366]5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；[0367]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0368]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0369]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0370]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0371](3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0372]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0373]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0374](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0375](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0376]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0377]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0378]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0379](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0380]11, 12- _-羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氫-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0381]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0382]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯_15_基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；
[0383]1-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (異丙基橫酸基)_2_喔吩基]服；
[0384]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0385]以上化合物的任意組合。
[0386]3.如段2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組:
[0387]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0388]5-氯-7_[ (2-氯_6_氟苯基)(吡唳~2~基氨基)甲基]喹啉-8-醇；
[0389] (1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0390]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0391]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0392]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0393]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0394][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0395]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0396]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；[0397]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0398]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0399]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0400]2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0401 ]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0402]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0403]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0404]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0405]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0406]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0407]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0408]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0409]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0410]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0411]4-[(4_氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0412]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0413]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0414]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0415]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0416]5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0417]3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0418]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0419]{[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0420]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0421]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0422]以上化合物的任意組合。
[0423]4.如段2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組:
[0424](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0425]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0426]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0427](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0428](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0429]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0430]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0431]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0432](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0433]11, 12- _-羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氫-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0434]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0435]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；
[0436]1-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (異丙基橫酸基)_2_喔吩基]服；
[0437]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0438]以上化合物的任意組合。
[0439]5.如段2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組:
[0440]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0441](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羥基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0442]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0443]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0444]以上化合物的任意組合。
[0445]6.如段1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述藥物組合物包含其它治療劑。
[0446]7.如段I所述的方法，其中，所述藥物組合物包含0.001%-99%的抑制MITF的表達(dá)或活化的所述治療劑。
[0447]8.如段I所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為局部制劑。
[0448]9.如段I所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為腸胃外制劑。
[0449]10.如段I所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為口服制劑。
[0450]11.如段I所述的方法，其中，每天給予一次所述藥物組合物。
[0451]12.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含:
[0452]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0453]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0454](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0455]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]_3_甲氧基苯甲酰胺；
[0456]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0457]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0458]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；[0459][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0460]N- (2-氟苯基)-2- {[5- (3_甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0461]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0462]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0463]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0464]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0465]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0466]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0467]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0468]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0469]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；
[0470]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0471]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0472]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0473]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0474]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0475]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0476]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0477]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0478]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0479]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0480]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0481 ]5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0482]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0483]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0484]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0485]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0486] (3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0487]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0488]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯-1-基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0489](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a- 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)_2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0490](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0491]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0492]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0493]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0494](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
[0495]11，12-二羥基-3-異丁基-4，5，8_ 三甲基 _3，3a, 4，6a, 9，10，11，12-八氫 _1Η_ 環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0496]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基- 2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0497]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；
[0498]1-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (異丙基橫酸基)_2_喔吩基]服；
[0499]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0500]以上化合物的任意組合。
[0501]13.如段12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含:
[0502]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0503]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0504](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0505]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0506]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0507]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0508]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0509][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0510]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)-1，3，4_噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；
[0511]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0512]2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N-(2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0513]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0514]1-(4-氯芐基)-N_(吡啶-3-基甲基)-1Η-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0515]2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0516]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0517]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0518]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；[0519]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0520]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0521]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0522]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0523]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0524]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0525]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0526]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0527]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0528]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0529]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0530]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0531 ]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0532]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0533]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0534]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0535]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0536]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0537]以上化合物的任意組合。
[0538]14.如段12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含:
[0539](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0540]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0541]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0542](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0543](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0544]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0545]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0546]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0547](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0548]11, 12~ 二羥基 _3_ 異丁基 _4，5, 8— 二甲基 _3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；[0549]3-(羥甲基)-6-異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0550]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基-2-甲
基丁酸酯；
[0551]1-[3，5_雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服；
[0552]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0553]以上化合物的任意組合。
[0554]15.如段12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含:
[0555]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0556](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0557]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0558]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0559]以上化合物的任意組合。
[0560]16.如段12-15中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物進(jìn)一步包含其它治療劑。
[0561]17.一種用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于:
[0562]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0563]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0564](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0565]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]_3_甲氧基苯甲酰胺；
[0566]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0567]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0568]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸；
[0569][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0570]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0571]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0572]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0573]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0574]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0575]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0576]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0577]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0578]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0579]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；[0580]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0581]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0582]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0583]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0584]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0585]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0586]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0587]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0588]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0589]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；
[0590]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0591 ] 5- [4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0592]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0593]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0594]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0595]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0596](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0597]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0598]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0599](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0600](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0601]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0602]乙基-4-氨基-2-{[(1E)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0603]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0604](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0605]11，12-二羥基-3-異丁基-4，5，8_ 三甲基 _3，3a, 4，6a, 9，10，11，12-八氫 _1Η_ 環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0606]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0607]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；[0608]1-[3，5_雙(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (異丙基橫酸基)_2_喔吩基]服；
[0609]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0610]以上化合物的任意組合。
[0611]18.如段17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于:
[0612]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0613]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0614](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0615]N-[(4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0616]乙基-1-芐基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0617] 5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0618]N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0619][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0620]N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0621]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0622]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0623]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0624]1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0625]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0626]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0627]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0628]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0629]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0630]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0631]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-雙(三氟甲基)_5，8_ 二氫嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0632]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；
[0633]3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0634]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0635]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0636]4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0637]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0638]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0639]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶_4_甲酰胺；[0640]N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0641] 5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0642]3-{[2-氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0643]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；
[0644]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及
[0645]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金剛烷-1-基]甲胺；
[0646]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0647]以上化合物的任意組合。
[0648]19.如段17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于:
[0649](3，5- 二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二腈；
[0650]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羥基-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0651]1，3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0652](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0653](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0654]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0655]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0656]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基環(huán)己_2_烯_1_酮；
[0657](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0658]11, 12~ _-羥基—3—異丁基—4, 5, 8— 二甲基—3, 3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0659]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0660]I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11，20-環(huán)氧苦味_3_烯-15-基_2_羥基_2_甲
基丁酸酯；
[0661]1-[3，5_雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服；
[0662]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0663]以上化合物的任意組合。
[0664]20.如段17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于:
[0665]I, 3，6-三羥基-7-甲氧基_2，8_雙(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧雜蒽_9_酮；
[0666](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羥基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0667]3-(羥甲基)-6_異丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯?；?氧基]_2_氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0668]以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及，
[0669]以上化合物的任意組合。[0670]21.一種用于識(shí)別調(diào)節(jié)小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活性的化合物的分析方法，所述方法包括:
[0671](iii)使細(xì)胞與測試化合物相接觸，其中，所述細(xì)胞包含報(bào)告基因，所述報(bào)告基因可操作地連接至MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子，并且其中，所述細(xì)胞能夠產(chǎn)生MITF ;以及
[0672](iv)在與所述測試化合物孵育后，確定所述報(bào)告基因的表達(dá)量，
[0673]其中，與對(duì)照或參照相比，所述報(bào)告基因表達(dá)的變化表明所述化合物調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性。
[0674]22.如段21所述的分析方法，其中，與對(duì)照或參照相比，所述測試化合物抑制MITF的表達(dá)或活性。
[0675]23.如段21或22所述的分析方法，其中，所述啟動(dòng)子是TRPMl基因的啟動(dòng)子。
[0676]24.如段21-23中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述報(bào)告基因是螢光素酶基因。
[0677]25.如段21-24中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述細(xì)胞內(nèi)源性產(chǎn)生MITF。
[0678]26.如段21-25中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述細(xì)胞是黑色素細(xì)胞或來自于黑色素瘤細(xì)胞系。
[0679]27.如段21-26中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，在0.01nM至約IOmM的終濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行孵育。
[0680]28.如段21-27中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，在2個(gè)以上不同濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試。
[0681]29.如段28所述的分析方法，其中，在10倍-10，000倍范圍內(nèi)的2個(gè)以上不同濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試。
[0682]30.如段21-29中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述測試化合物選自于由下列化合物所組成的組:有機(jī)小分子或無機(jī)小分子；糖；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白質(zhì)、以及肽類似物和衍生物；模擬肽；核酸、核酸類似物和衍生物，包括但不限于siRNA、shRNA、反義RNA、核酶和適配子；由生物材料制得的提取物，所述生物材料如細(xì)菌、植物、真菌或動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物組織；天然存在的組合物或合成的組合物；以及以上化合物的任意組合。
[0683]31.如段21-30中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所選出的化合物的1gP值小于7。
[0684]32.如段21-31中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所選出的化合物表現(xiàn)出對(duì)MITF的表達(dá)或活性進(jìn)行劑量依賴性的調(diào)節(jié)。
[0685]33.如段21-32中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述分析方法為高通量篩選(HTS)分析方法。
[0686]34.由段21-33中任一項(xiàng)所述的分析方法所選出的化合物。
[0687]實(shí)施例
[0688] 為了成功實(shí)施MITF拮抗劑的篩選，發(fā)明人采用TRPMl-螢光素酶報(bào)告子。發(fā)明人觀察到，TRPMl基因含有多個(gè)MITF結(jié)合位點(diǎn)，并表現(xiàn)出響應(yīng)于MITF轉(zhuǎn)錄活化的極穩(wěn)健的上調(diào)。因此，穩(wěn)定整合入黑色素瘤細(xì)胞的TRPMl-螢光素酶報(bào)告子可有效地用于所述篩選分析方法。盡管黑色素瘤細(xì)胞的使用與原代人黑色素細(xì)胞相比并不完美相關(guān)，然而其為篩選提供了速度和重現(xiàn)性方面的優(yōu)勢。另外，大部分的人黑色素瘤細(xì)胞系表現(xiàn)出cAMP信號(hào)的基線(baseline)，該基線不依賴于外源提供的黑色素細(xì)胞刺激素或cAMP激動(dòng)劑，由此對(duì)該分析系統(tǒng)的一致性做出了進(jìn)一步貢獻(xiàn)。
[0689]為了設(shè)計(jì)廣泛阻抑MITF的活性(通過阻抑MITF的表達(dá)，或通過抑制MITF的活性)的篩選，發(fā)明人采用了含有MITF的強(qiáng)直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)(即TRPMl基因)的啟動(dòng)子的螢光素酶報(bào)告子，發(fā)明人識(shí)別出對(duì)小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化具有抑制能力的活性成分，以提供藥用或美學(xué)益處。之前，發(fā)明人已將TRPMl基因(也稱為“Melastatin”)識(shí)別為MITF的直接靶標(biāo)，TRPMl基因含有多個(gè)MITF結(jié)合位點(diǎn)，并以強(qiáng)有力的方式直接響應(yīng)于MITF過表達(dá)(Miller AJ, Du J, Rowan S, Hershey CL, Widlund HR, Fisher DE:Transcriptionalregulation of the melanoma prognostic marker melastatin(TRPMl)by MITF inmelanocytes and melanoma, Cancer Res2004,64:509-516)。TRPMl 表達(dá)還與人黑色素瘤細(xì)胞系中以及臨床中的色素沉著病變(痣和黑色素瘤)中的MITF表達(dá)密切相關(guān)。
[0690]將TRPMl啟動(dòng)子與螢光素酶基因連接，并插入逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和慢病毒載體中。使用慢病毒載體感染原代人黑色素細(xì)胞，隨后使用BroadChemical Genetics核心篩選設(shè)備(core screening facility)及其天然產(chǎn)物/提取物文庫對(duì)所述細(xì)胞進(jìn)行初篩。作為備選，將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體穩(wěn)定整合入黑色素瘤細(xì)胞得基因組，這可用于進(jìn)行同一小分子篩選。使用毛喉素(forskolin)和MSH作為陽性對(duì)照小分子(其上調(diào)cAMP和MITF表達(dá)(D’OrazioJA, Nobuhisa T, Cui R, Arya M, Spry M, Wakamatsu K, Igras V, Kunisada T, Granter SR,Nishimura EK,Ito S, Fisher DE:Topical drug rescue strategy and skin protectionbased on the role of Mclr in UV-1nduced tanning, Nature2006,443:340-344))進(jìn)行篩選優(yōu)化。阻抑MSH誘導(dǎo)的TRPMl-螢光素酶而不改變細(xì)胞數(shù)目或生存力的小分子代表本次篩選的初步“命中物”。陰性對(duì)照在相同細(xì)胞內(nèi)包含組成型螢光素酶載體(例如由組成型啟動(dòng)子(如胸苷激酶啟動(dòng)子)驅(qū)動(dòng))，從而對(duì)本底轉(zhuǎn)錄機(jī)制的非特異性抑制劑進(jìn)行控制，其將在對(duì)候選命中物的二次/三次分析中進(jìn)行具體評(píng)價(jià)。
[0691]篩選設(shè)計(jì)
[0692]由于Skmel5有利的生長性質(zhì)以及Skmel5表達(dá)典型水平的MITF蛋白這一發(fā)明人的已有經(jīng)驗(yàn)，采用人黑色素瘤細(xì)胞系Skmel5。此外，發(fā)明人的已有經(jīng)驗(yàn)表明，MITF水平與MITF的多個(gè)色素沉著目標(biāo)基因的表達(dá)相關(guān)，這強(qiáng)烈表明通過MITF對(duì)色素沉著通路的轉(zhuǎn)錄控制在該細(xì)胞系中保持完好。因此，生成了整合的TRPMl-螢光素酶報(bào)告子，隨后(連續(xù))兩次克隆細(xì)胞以保證報(bào)告子細(xì)胞群的純度。在藥物選擇中維持細(xì)胞，以保證螢光素酶報(bào)告子的維持(當(dāng)去除藥物時(shí)，觀測到螢光素酶信號(hào)最終喪失)。再次克隆后，如小分子篩選所要求的，選擇明顯的隔離群(isolates)以基于在384孔板上的克隆源性(clonogenic)生長作進(jìn)一步使用。阻抑TRPMl-螢光素酶信號(hào)的陽性對(duì)照采用了:編碼針對(duì)MITF的shRNA的慢病毒載體。這一載體產(chǎn)生可重現(xiàn)的MITF mRNA水平的下調(diào)，以及螢光素酶測定中的相應(yīng)(>90%)降低。對(duì)接種效率的每日變化進(jìn)行分析，在選出用于在篩選中進(jìn)一步使用的系中發(fā)現(xiàn)非常強(qiáng)的重現(xiàn)性。
[0693]以來自Broad Institute的文庫進(jìn)行篩選，該文庫包含了天然產(chǎn)物、已知的生物活性劑以及其它化合物的混合(總量約13，000種化合物)。表1中總結(jié)了最初階段的數(shù)據(jù)采集和分析。如所指出的，用TRPMl-螢光素酶活性的阻抑定義“命中物”，所述命中物包含了約I %的篩選分子(約130種化合物)。進(jìn)行了其它分析/驗(yàn)證步驟，以進(jìn)一步評(píng)估在該篩選中阻抑報(bào)告子的候選命中物的可重現(xiàn)性、劑量依賴性以及效果的效能/量級(jí)(potency/magnitude of the effects)。
[0694]分析的第一步是對(duì)可重現(xiàn)性進(jìn)行直接測試。值得繼續(xù)進(jìn)行分析的化合物需要在重復(fù)的篩選中有相似表現(xiàn)。其次，采用了 Broad Institute的ChemBank分析工具。ChemBank是小分子篩選結(jié)果的數(shù)據(jù)庫，只要在Broad Institute中進(jìn)行，就不考慮篩選的具體性質(zhì)。在該數(shù)據(jù)集中檢查候選命中物行為的價(jià)值在于，其將有助于發(fā)明人快速確定該命中物是否對(duì)于該篩選是獨(dú)特的，或所述命中物是否還在其它無關(guān)的篩選中“得分”。從ChemBank數(shù)據(jù)集內(nèi)包含的數(shù)百個(gè)篩選中，僅當(dāng)候選命中物在3個(gè)以下的列于ChemBank上的其它篩選(共幾百個(gè)篩選，該數(shù)字還在持續(xù)增長)中得分時(shí)，發(fā)明人才選擇保留候選命中物。第三項(xiàng)驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)為在劑量滴定分析中的行為。
[0695]僅當(dāng)其表現(xiàn)出劑量依賴性地阻抑TRPMl-螢光素酶信號(hào)時(shí)，候選命中物才是可接受的。盡管各命中物之中的劑量響應(yīng)的形狀可以變化，然而發(fā)明人仍選擇囊括全部可產(chǎn)生劑量依賴性效果的候選物。確定的第四項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)為IC50(以qAC50的形式描述)，其表示半最大阻抑劑量(half-maximal suppression dose)。在該標(biāo)準(zhǔn)中，大部分候選命中物位于高納摩爾至低微摩爾的范圍(全部這些驗(yàn)證數(shù)據(jù)均在表1中列出)。第五項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)為(任何劑量下的)最大阻抑，該標(biāo)準(zhǔn)表示不考慮實(shí)現(xiàn)阻抑所需的劑量而能夠達(dá)到的阻抑的量級(jí)(magnitude)。由于一些高效力的抑制劑(基于IC50)僅能實(shí)現(xiàn)弱的最大阻抑，而其它低效力的抑制劑(基于IC50)即使在低于其IC50的劑量也能夠產(chǎn)生明顯更高的阻抑，因此該標(biāo)準(zhǔn)是有價(jià)值的。第六項(xiàng)待確定的標(biāo)準(zhǔn)為LogP分配系數(shù)，該系數(shù)是對(duì)親脂性的預(yù)期。為此，發(fā)明人使用Ghose和Crippen的方法計(jì)算預(yù)期的辛醇-水分配系數(shù)(partitioncoefficient) (J.Comp.Chem.9,80(1988))。雖然這僅為對(duì)皮膚滲透潛能的評(píng)估,但由于該分析在理論上有助于對(duì)可能的局部有效性進(jìn)行優(yōu)化，因而仍實(shí)施該分析。第七項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)為采用突光生存力探針(CellTiter-Fluo?Cell Viability Assay(Promega))進(jìn)行的毒性分析。由于端點(diǎn)(endpoint)表示藥物處理組與對(duì)照組的差別(variation)除以標(biāo)準(zhǔn)誤的綜合(composite)這一事實(shí)，因此對(duì)該端點(diǎn)的解釋較為復(fù)雜。示于表1中的結(jié)果指出了滿足上述概括的全部標(biāo)準(zhǔn)的34個(gè)候選分子。具體而言，這些化合物可重現(xiàn)地表現(xiàn)出對(duì)TRPMl-螢光素酶的阻抑，并表現(xiàn)出劑量響應(yīng)行為。這些化合物的效力(potencies)大部分略低于或略高于ΙμΜ。盡管其親脂性得分對(duì)皮膚滲透能力的預(yù)測仍有缺憾。然而，該數(shù)字>3時(shí)更可能滲透。從表1中的數(shù)據(jù)可以看出，大量命中物符合該標(biāo)準(zhǔn)。
[0696]表1
[0697]
【權(quán)利要求】
1.一種調(diào)控皮膚色素沉著的方法，所述方法包括:向有需要的受試者給予藥物組合物，所述藥物組合物包含抑制小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活化的治療劑。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組: 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； 1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； 3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； 4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； 3- {[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4-(4-叔丁基苯 甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； . 1,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羥基-3-異丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮； . 3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； . 1,11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； . 1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組: .1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺；. . 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； . 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N- (3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； . 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； . 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； .3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； . 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；. 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； . 4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺；. 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；. . 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 5-[4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； . 3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組: (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆； . 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； . 1,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮； .3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； .1, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； .1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述治療劑選自于由下列治療劑所組成的組: .1, 3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
6.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述藥物組合物包含其它治療劑。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述藥物組合物包含0.001% -99%的抑制MITF的表達(dá)或活化的所述治療劑。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為局部制劑。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為腸胃外制劑。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述藥物組合物被配制為口服制劑。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，每天給予一次所述藥物組合物。
12.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含: .1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； .5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S，6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺；甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](異煙酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； .1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； .2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基_[3-(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； .2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； .5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； .7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； .3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； .5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； .2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； .4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； .3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； .3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； .5-[4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； .3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆； .2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； .1,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮；(2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
.11,12- 二羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮；.3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； .1,11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； . 1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
13.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含: . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； . 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (1S, 2R, 3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基_[3-(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； .2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺； .5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； .7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； . 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； .5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； .2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
14.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含: (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； 2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； 3_[ (5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； II,12- 二羥基-3-異丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮； 3-(羥甲基)-6-異丙基-5-[ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； 1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
15.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，所述藥物組合物包含: I, 3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
16.如權(quán)利要求12-15中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物進(jìn)一步包含其它治療劑。
17.一種用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于: 1-[(1S，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲?；鵠甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺?；鵠(異煙?；?氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； 1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； 3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； 4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代) 丙酸； 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸；N- [4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[ (2，5- 二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5- [6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； 2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； 3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5-二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
II,12- 二羥基-3-異丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮；3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； 1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
18.如權(quán)利要求17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于: l-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷 _1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲?；?6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羥基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-芐基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羥基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5-二甲 基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氫-1，4-苯并二氧雜芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](異煙?；?氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯芐基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；. 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺；. 5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪；. 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-雙(三氟甲基)_5，8-二氫嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮；. 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； . 3-{[4-(羥甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；. 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；. 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氫苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； . 4-[(4-氯芐基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； . 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；. 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙?；鵠氨基}苯甲酸； N- [4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[ (2，5- 二甲氧基苯基)磺?；鵠哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-雙(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 5-[4- (4-叔丁基苯甲?；?哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； . 3-{[2_氯-4-(羥甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟芐基)硫代]亞甲基}丙二腈；以及 . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金剛烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
19.如權(quán)利要求17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于: (3，5-二叔丁基-4-羥基苯亞甲基)丙二臆；. 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羥基_2_ (羥甲基)四氫呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羥基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氫奧并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基環(huán)己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羥基-3-異丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-環(huán)十一烷并[d]異吲哚-1，15(2H)_ 二酮； .3-(羥甲基)-6-異丙基-5-[ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羥基-2，16-二氧代-11,20-環(huán)氧苦味-3-烯-15-基-2-羥基-2-甲基丁酸酯； .1-[3，5-雙(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(異丙基橫酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
20.如權(quán)利要求17所述的用于調(diào)控皮膚色素沉著的化合物，所述化合物選自于: I, 3，6-三羥基-7-甲氧基-2，8-雙(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧雜蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羥基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .3-(羥甲基)-6-異丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯?；?氧基]-2-氧代環(huán)己-3-烯-1-基.4-羥基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的藥學(xué)上可接受的鹽；以及， 以上化合物的任意組合。
21.一種用于識(shí)別調(diào)節(jié)小眼轉(zhuǎn)錄因子(MITF)的表達(dá)或活性的化合物的分析方法，所述方法包括: (iii)使細(xì)胞與測試化合物相接觸，其中，所述細(xì)胞包含報(bào)告基因，所述報(bào)告基因可操作地連接至MITF的直接轉(zhuǎn)錄靶標(biāo)的啟動(dòng)子，并且其中，所述細(xì)胞能夠產(chǎn)生MITF ;以及 (iv)在與所述測試化合物孵育后，確定所述報(bào)告基因的表達(dá)量， 其中，與對(duì)照或參照相比，所述報(bào)告基因表達(dá)的變化表明所述化合物調(diào)節(jié)MITF的表達(dá)或活性。
22.如權(quán)利要求21所述的分析方法，其中，與對(duì)照或參照相比，所述測試化合物抑制MITF的表達(dá)或活性。
23.如權(quán)利要求21或22所述的分析方法，其中，所述啟動(dòng)子是TRPMl基因的啟動(dòng)子。
24.如權(quán)利要求21-23中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述報(bào)告基因是螢光素酶基因。
25.如權(quán)利要求21-24中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述細(xì)胞內(nèi)源性產(chǎn)生MITF。
26.如權(quán)利要求 21-25中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述細(xì)胞是黑色素細(xì)胞或來自于黑色素瘤細(xì)胞系。
27.如權(quán)利要求21-26中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，在0.01nM至約IOmM的終濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行孵育。
28.如權(quán)利要求21-27中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，在2個(gè)以上不同濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試。
29.如權(quán)利要求28所述的分析方法，其中，在10倍-10，OOO倍范圍內(nèi)的2個(gè)以上不同濃度下對(duì)所述測試化合物進(jìn)行測試。
30.如權(quán)利要求21-29中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述測試化合物選自于由下列化合物所組成的組:有機(jī)小分子或無機(jī)小分子；糖；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白質(zhì)、以及肽類似物和衍生物；模擬肽；核酸、核酸類似物和衍生物，包括但不限于siRNA、shRNA、反義RNA、核酶和適配子；由生物材料制得的提取物，所述生物材料如細(xì)菌、植物、真菌或動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物組織；天然存在的組合物或合成的組合物；以及以上化合物的任意組合。
31.如權(quán)利要求21-30中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所選出的化合物的1gP值小于7。
32.如權(quán)利要求21-31中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所選出的化合物表現(xiàn)出對(duì)MITF的表達(dá)或活性進(jìn)行劑量依賴性的調(diào)節(jié)。
33.如權(quán)利要求21-32中任一項(xiàng)所述的分析方法，其中，所述分析方法為高通量篩選(HTS)分析方法。
34.由權(quán)利要求21-33中任一項(xiàng)所述的分析方法所選出的化合物。
【文檔編號(hào)】A61K31/4709GK103917229SQ201280054160
【公開日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2012年8月31日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月1日
【發(fā)明者】戴維·E·費(fèi)希爾, 里茲萬·哈克, 漢斯·拉格納·瓦爾德馬·維德隆德 申請(qǐng)人:通用醫(yī)療公司