多肽的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含其為普蘭林肽類似物的氨基酸序列的多肽、包含這些多肽的藥物組合物以及用作藥物的這些多肽。
【專利說明】多肽
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及包含其為SEQ ID No:2(普蘭林肽)類似物的氨基酸序列的多肽、包含這些多肽的藥物組合物以及用作藥物的這些多肽。
[0002]發(fā)明背景
[0003]大量人類遭受糖尿病和肥胖，并且數(shù)量在增長。糖尿病是利用葡萄糖的能力部分或完全喪失的代謝病癥。
[0004]大量治療方案靶向過量的血糖，而其他方案則主要集中在體重減輕。用于降低血糖的最有效抗糖尿病劑是胰島素和其類似物。早已知道，當(dāng)傳統(tǒng)的胰島素用于治療糖尿病時(shí)，其伴隨有體重增加。每天不得不皮下注射胰島素多達(dá)數(shù)次。
[0005]2型糖尿病通常在早期階段通過飲食和鍛煉進(jìn)行治療。隨著狀況發(fā)展，添加各種口服抗糖尿病劑。注射的藥劑例如GLP-1類似物也可在該階段使用。通常這些藥劑在具有能夠釋放胰島素和胰島淀粉樣多肽的功能性β-細(xì)胞的患者中最有效。
[0006]人胰島淀·粉樣多肽(SEQ ID No:1)是37個(gè)氨基酸長的多肽，其具有難以用作藥物的物理化學(xué)性質(zhì)。具體而言，在體外和/或離體它具有原纖維生成(即，形成原纖維)的傾向，并且由于沉淀而變得無效。此外，胰島淀粉樣多肽難以配制，因?yàn)樗瘜W(xué)不穩(wěn)定并且在生理pH下沉淀。因此，它在酸性溶液中配制。
[0007]人胰島淀粉樣多肽與兩個(gè)不同的受體復(fù)合物結(jié)合。這兩個(gè)復(fù)合物包含降鈣素受體和受體活性修飾蛋白RAMPl或RAMP3。由降鈣素受體和胰島淀粉樣多肽受體之間的親密關(guān)系，可預(yù)期胰島淀粉樣多肽受體激動劑與降鈣素受體的一定的交叉反應(yīng)性。作為實(shí)例，普蘭林肽對降鈣素受體具有一定的親和力，但對胰島淀粉樣受體更有效(14倍)。
[0008]降鈣素受體存在于全身的許多組織中，并且認(rèn)為其與骨代謝的調(diào)節(jié)有關(guān)。目前鮭魚降鈣素以商品名]Vlmcn丨CiG⑩銷售。該產(chǎn)品用于對抗高鈣血癥、骨質(zhì)疏松癥(包括更年期后骨質(zhì)疏松癥和糖皮質(zhì)激素相關(guān)的骨質(zhì)疏松癥)、變形性骨炎(ostitis derforman)(佩吉特病)，并且每天一次通過注射給予或經(jīng)鼻給予。降鈣素與骨膜、腎和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的特定受體結(jié)合。鮭魚降鈣素的血漿半壽期是約45分鐘。
[0009]對降鈣素受體具有活性的多肽可用于治療高鈣血癥、骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、肥胖或肥胖相關(guān)疾病，以及用于預(yù)防肥胖相關(guān)疾病。用目前使用的降鈣素制劑進(jìn)行治療的缺點(diǎn)是，由于鮭魚降鈣素的血漿半壽期短，藥物必須一天給予數(shù)次，并且必須在臨近進(jìn)餐前給予。
[0010]對降鈣素受體和胰島淀粉樣受體兩者具有雙活性的多肽可能是有利的。
[0011]普蘭林妝(SEQID No:2)是由 Amylin Pharmaceuticals 以上市的藥物產(chǎn)品，其作為胰島素的附加物用于治療糖尿病。普蘭林肽是胰島淀粉樣多肽受體激動劑。它對降鈣素受體具有較低的活性(約I / 14)。
[0012]普蘭林肽的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下顯示，并且也顯示于圖1中。
[0013]
【權(quán)利要求】
1.包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列為SEQID No: 2的類似物，其中: 所述類似物包含第37位上的脯氨酸殘基； 其中所述類似物的氨基酸序列編號與SEQ ID No: 2的氨基酸序列編號一致；和 任選所述多肽具有與其氨基酸殘基中的至少一個(gè)連接的至少一個(gè)取代基。
2.依據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其中所述類似物包含第14位上的殘基，所述殘基獨(dú)立地選自谷氨酸和天冬酰胺中的任何一個(gè)；優(yōu)選谷氨酸。
3.依據(jù)權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)的多肽，其中所述類似物包含第17位上的殘基，所述殘基獨(dú)立地選自組氨酸、精氨酸、賴氨酸和纈氨酸中的任何一個(gè)；優(yōu)選組氨酸和精氨酸；更優(yōu)選精氨酸。
4.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述類似物包含第35位的殘基，所述殘基獨(dú)立地選自組氨酸、精氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺中的任何一個(gè)；優(yōu)選組氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和谷氨酸；更優(yōu)選組氨酸、谷氨酰胺和天冬酰胺；更優(yōu)選天冬酰胺。
5.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述類似物包含第14位的為谷氨酸的氨基酸殘基、第17位的為精氨酸的殘基和第37位的為脯氨酸的殘基。
6.依據(jù)權(quán)利要求1的多肽，其包含為式⑴的SEQID No: 2的類似物的氨基酸序列:
7.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中至少一個(gè)取代基與所述多肽的至少一個(gè)氨基酸殘基連接。
8.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述取代基選自表1(較早顯示)所示的取代基中的任何一個(gè)。
9.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中取代基與N-末端氨基酸殘基的α-氨基連接，或與Lys殘基連接。
10.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其選自表9所示多肽中的任何一個(gè)。
11.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽為:N-a-[(S)-4_羧基-4-(19-羧基十九烷酰基氨基)丁?；鵠-[Glul4, Argl7, Pro37]-普蘭林肽[實(shí)施例53]。
12.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其用作藥物。
13.依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其用于治療或預(yù)防高血糖癥、2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、I型糖尿病、肥胖、高血壓、X綜合征、血脂障礙、認(rèn)知障礙、動脈硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管病癥、中風(fēng)、炎性腸綜合征、消化不良和胃潰瘍，和/或用于減少食物攝入、減少β-細(xì)胞凋亡、增加β-細(xì)胞功能和β-細(xì)胞質(zhì)量和/或用于恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性，高鈣血癥、骨質(zhì)疏松癥和變形性骨炎。
14.藥物組合物，包含依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽和藥學(xué)上可接受的賦形劑。
15.用于制備依據(jù)權(quán)利要求14的藥物組合物的方法，其包括將依據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽與至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑混合。
【文檔編號】A61K47/48GK103596972SQ201280028554
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年6月8日 優(yōu)先權(quán)日:2011年6月10日
【發(fā)明者】L.舍弗, T.克魯塞, H.托格森 申請人:諾沃—諾迪斯克有限公司