專利名稱：一種簕菜提取物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種簕菜提取物及其制備方法和應用。
背景技術：
M萊(Acanthopanan trifoliatus (L. ) iferr)又稱白簕、苦刺、鵝掌霸、三葉五加、三加皮，為五加科攀援狀灌木，主要分布于我國云南、四川、廣東等地區(qū)，印度東北部至印度支那、日本和菲律賓也有分布。簕菜自古就是藥食同源的地方特產(chǎn)，其使用具有悠久的歷史。李時珍曰“五加治風濕瘓庫，壯筋骨，其功良深”。明代《食物本草》中記有“五加，葉作蔬食，去皮膚風濕”。據(jù)《廣東藥用植物簡編》(吳修仁編)記載，簕菜根、莖、葉均可入藥， 其辛、微苦、澀、涼，氣微香。根，祛風除濕、散痕、止痛。葉，疏風，消腫，止癢，有舒筋活血、消腫解毒之功效。據(jù)《中國高等植物圖鑒》，簕菜味苦、辛、涼，具有清熱解毒、祛風利濕、舒筋活血、止咳平喘之功效。在廣東恩平等地，簕菜因其色澤翠綠、口感脆嫩、品味清香、苦中帶甘， 可泡茶、熬湯、清炒，且具有清熱除濕降火等作用而深受當?shù)厝藗兊南矏邸?br> 國內(nèi)外有研究者對簕菜進行了初步研究與開發(fā)。研究發(fā)現(xiàn)簕菜葉中含有大量的萜烯、萜醇類化合物以及少量的長鏈脂肪族和芳香族化合物，推測其應具有明顯的鎮(zhèn)咳、祛痰、抗真菌、抗炎和祛痛等作用，但至今未見有系統(tǒng)深入研究和開發(fā)應用。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供來源于植物，用于炎癥治療或抗氧化的化妝品、藥物和保健食品。
本發(fā)明以五加科植物簕菜trifoliatus (L. ) iferr)為原料。
本發(fā)明制備簕菜提取物能有效清除各種自由基(如超氧陰離子、羥基自由基和過氧化氫)。
本發(fā)明制備簕菜提取物能抑制炎癥細胞巨噬細胞的生長，抑制核轉錄因子NF-κ B 活性，降低小鼠巨噬細胞RAW264. 7中Erkl/2的活化程度，從而有效地減輕或抑制炎癥。
本發(fā)明提供了一種簕菜提取物的制備方法，其具體步驟如下1)稱取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，過60目篩，取IOOg置于5L圓底燒瓶中，加70wt% 乙醇溶液2000mL加熱至沸騰后保持2h，再用紗布過濾，取濾液，重復3次；2)將上述提取液減壓蒸干，稱重，加適量蒸餾水，超聲提取，冷凍干燥，得醇提物；3)在醇提物中加入質量比1:10的蒸餾水溶解，加入等體積的石油醚，搖勻，在分液漏斗中靜置lh，得石油醚層和水層，分別萃取三次，收集石油醚層萃取物；繼續(xù)按照1:1的體積比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶劑進行萃取，分液后取上層溶液，重復3次；收集水層物、乙酸乙酯層萃取物和正丁醇層萃取物。
本發(fā)明提供的一種簕菜提取物，采用上述的制備方法制備而得。
本發(fā)明提供的一種用于制備治療炎癥的藥物或抗氧化的化妝品組合物，其含所述的簕菜提取物。
本發(fā)明提供的一種用于制備防治炎癥藥物或抗氧化的食品組合物，其含有所述的簕菜提取物
本發(fā)明提供的一種用于治療炎癥的藥物或藥物組合物，其含有所述的簕菜提取物，以及一種或多種在藥學上可接受的輔助劑。
所述的治療炎癥的藥物或藥物組合物，包括片劑、丸劑、膠囊劑、懸浮劑或乳劑。
上述簕菜的石油醚萃取物在制備抗炎抗氧化劑中的用途。
上述簕菜的乙酸乙酯萃取物在制備抗炎抗氧化劑中的用途。
一種用于抗炎抗氧化的飲料、化妝品、藥物或保健食品，其中含有簕菜及其提取物，以及藥學上可接受的輔助劑。
上述用于抗炎抗氧化的飲料、化妝品、藥物或保健食品，其中含有簕菜石油醚萃取物，以及藥學上可接受的輔助劑。
上述用于抗炎抗氧化的飲料、化妝品、藥物或保健食品，其中含有簕菜乙酸乙酯萃取物，以及藥學上可接受的輔助劑。
所述的抗炎抗氧化的飲料、化妝品、藥物或保健食品是制成片劑、丸劑、膠囊劑、懸浮劑或乳劑。
本發(fā)明的有益效果是通過抗自由基氧化以及炎性因子實驗驗證簕菜及其提取物具有抗炎抗氧化能力。其中簕菜的石油醚及乙酸乙酯萃取物有很強的抗炎抗氧化能力。


圖I.簕菜提取物對RAW264. 7細胞NK- κ B轉錄活性的影響。
圖2.簕菜提取物對Erkl / 2活化的抑制作用。
上述圖中C :對照組；WE :水提物；EE :醇提物；PEL :石油醚部分；EAL :乙酸乙酯部分NBL:正丁醇部分；WL :水溶物；CUR :姜黃素。
磷酸化絲裂原活蛋白激酶I即Phospho-Erkl ；磷酸化絲裂原活蛋白激酶2即Phospho-Erk2 ；β肌動蛋白即β-actin。
具體實施方式
本發(fā)明是通過以下方案實現(xiàn)實施例I :簕菜提取物的制備提取首先稱取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，過60目篩，取IOOg置于5L圓底燒瓶中， 加70%乙醇溶液2000mL加熱至沸騰后保持2h，再用紗布過濾，取濾液，重復3次；將上述提取液減壓蒸干，稱重，加適量蒸餾水，超聲提取，冷凍干燥，得醇提物；在醇提物中加入質量比1:10的蒸餾水溶解，加入等體積的石油醚，搖勻，在分液漏斗中靜置lh，得石油醚層和水層，分別萃取三次，收集石油醚層萃取物；繼續(xù)按照1:1的體積比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶劑進行萃取，分液后取上層溶液，重復3次；收集水層物、乙酸乙酯層萃取物和正丁醇層萃取物。得到石油醚萃取物I. Ig,乙酸乙酯萃取物7. 66g，正丁醇萃取物7. 43g，水溶物418.05g。
實施例2 :DPPH法測定簕菜提取物抗氧化活性使用1，I-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)測定簕菜提取物的抗氧化活性。DPPH是一種比較穩(wěn)定的脂性自由基，其N上有一個游離電子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm處有最大的吸收峰。加入簕菜提取物以后，DPPH捕捉一個電子與游離電子配對，紫色褪去，變?yōu)闊o色物質，在517nm處的吸收消失，其褪色程度與其接受的電子數(shù)成定量關系。依此原理用分光光度計檢測DPPH自由基與簕菜提取物反應后吸光值的變化，可檢定試樣提供氫原子、清除自由基抗氧化的能力。方法稱取O. 02g的DPPH晶體，用無水乙醇溶解，定容至500ml，配制成0.04mg/L溶液，避光保存。分別稱取各種簕菜提取物樣品，配制成O. 5mg/ml的樣品溶液。 使用I. 5ml的離心管作為反應容器，參比管中加900 μ I的DPPH·溶液和100 μ I的無水乙醇，以Iml的無水乙醇做為空白對比。樣品管中分別按5“1、1(^1、2(^1、4(^1、8(^1的梯度體積加入樣品溶液和900 μ I的DPPH·溶液，再加無水乙醇使總體積為1ml。4°C恒溫反應30min。用紫外可見分光光度計測得參比管的吸光度為AC，樣品管的吸光度為AS，通過公式計算其清除率，并計算其IC5tl值(IC50值指清除率達到50%時對應的樣品濃度)。簕菜提取物的清除效果如表I所示。
表I各組分抗氧化活性測試結果(DPPH法)
權利要求
1.一種簕菜提取物的制備方法，其特征在于具體步驟如下1)稱取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，過60目篩，取IOOg置于5L圓底燒瓶中，加70%乙醇溶液2000mL加熱至沸騰后保持2h，再用紗布過濾，取濾液，重復3次；2)將上述提取液減壓蒸干，稱重，加適量蒸餾水，超聲提取，冷凍干燥，得醇提物；3)在醇提物中加入質量比1:10的蒸餾水溶解，加入等體積的石油醚，搖勻，在分液漏斗中靜置lh，得石油醚層和水層，分別萃取三次，收集石油醚層萃取物；繼續(xù)按照1:1的體積比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶劑進行萃取，分液后取上層溶液，重復3次；收集水層物、乙酸乙酯層萃取物和正丁醇層萃取物。
2.一種簕菜提取物，其特征在于采用權利要求I所述的制備方法制備而得。
3.權利要求2所述的簕菜提取物在制備治療炎癥的藥物或抗氧化的化妝品組合物中的應用。
4.權利要求2所述的簕菜提取物在制備防治炎癥藥物或抗氧化的食品組合物中的應用。
5.一種治療炎癥的藥物或防治炎癥藥物，其含有權利要求2所述的簕菜提取物，以及一種或多種在藥學上可接受的輔助劑。
6.權利要求5所述的治療炎癥的藥物或藥物組合物，其特征在于所述的藥物或藥物組合物包括片劑、丸劑、膠囊劑、懸浮劑或乳劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種簕菜提取物及其制備方法和應用，首先稱取簕菜全草，用乙醇浸泡，經(jīng)旋轉蒸發(fā)濃縮后得到水溶液，然后分別用油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取水溶液；萃取液經(jīng)減壓蒸餾后得到膏體，即得到石油醚萃取物，乙酸乙酯萃取物，正丁醇萃取物，水溶物；通過抗自由基氧化實驗，巨噬細胞生長實驗、NF-kB核轉錄因子的抑制實驗和Erk1/2的激活作用實驗，證實簕菜提取物具有抗氧化和抗炎能力，添加了簕菜及其提取物的治療炎癥的藥物或抗氧化的化妝品或食品組合物具有抗炎和抗氧化作用，而可用于防治炎癥或衰老的化妝品、藥物、植物性飲料及保健食品。
文檔編號A61K36/254GK102920759SQ201210274788
公開日2013年2月13日 申請日期2012年8月3日 優(yōu)先權日2012年8月3日
發(fā)明者張焜, 胡瑞連, 王華倩, 艾倫·康尼, 杜志云, 鄭希, 李晨悅, 鄭俊霞, 盧宇靖, 吳盼盼, 黃華容, 方巖雄, 趙肅清, 汪艦, 曾華強 申請人:廣東工業(yè)大學, 完美(中國)有限公司, 五邑大學