專利名稱：一種治療脂肪肝的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制劑、制備方法和質(zhì)量檢測方法，具體涉及一種治療脂肪肝的藥物組合物及其制劑、制備方法和質(zhì)量檢測方法，屬制藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
近年來，隨著人們生活水平的不斷提高和飲食結(jié)構(gòu)的改變，脂肪肝的發(fā)病率呈明顯上升趨勢。脂肪肝的發(fā)病主要與肝脂質(zhì)代謝異常、肥胖、長期大量飲酒、糖尿病、病毒性肝炎等有關(guān)，可逐漸進展為肝硬化、肝癌等終末期肝病。目前對脂肪肝的治療以合理飲食、禁酒、增加運動為主的生活方式的干預(yù)較為有效，但患者依從性不夠。臨床上尚缺乏療效較為理想的抗脂肪肝藥，已報道的考來烯胺、煙酸肌醇酯、苯扎貝特、吉非羅齊等藥物雖然可以 從不同環(huán)節(jié)抑制脂肪肝，但不良反應(yīng)多、療程長、故臨床應(yīng)用受到限制。中醫(yī)認為脂肪肝病因為酒食不節(jié)、或感受濕邪，或嗜食肥甘等而致肝失疏泄，濕熱蘊結(jié)，血脈瘀阻而形成，在治療脂肪肝方面具有明顯優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療脂肪肝的藥物組合物及其制劑，本發(fā)明第二個目的在于提供該藥物組合物的制備方法，本發(fā)明第三個目的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為 茵陳50 250重量份、龍膽40 200重量份、桅子15 85量份、大黃3 18重量份、白茍10 50重量份、甘草10 50重量份、二七14 70重量份、蛇膽I 6重量份、牛黃I 4重量份、人工磨香0. 5 2. 5重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳150重量份、龍膽120重量份、桅子50重量份、大黃10重量份、白茍30重量份、甘草30重量份、三七42. 5重量份、蛇膽3. 5重量份、牛黃2. 5重量份、人工磨香I. 5重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳60重量份、龍膽190重量份、桅子18重量份、大黃16重量份、白茍12重量份、甘草48重量份、三七15重量份、蛇膽6重量份、牛黃I重量份、人工麝香2. 5重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳240重量份、龍膽50重量份、桅子82重量份、大黃4重量份、白茍48重量份、甘草12重量份、三七68重量份、蛇膽I重量份、牛黃4重量份、人工麝香0. 5重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳90重量份、龍膽170重量份、桅子30重量份、大黃14重量份、白茍18重量份、甘草42重量份、三七25重量份、蛇膽4重量份、牛黃I. 5重量份、人工麝香2重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳210重量份、龍膽70重量份、桅子70重量份、大黃7重量份、白茍42重量份、甘草18重量份、三七58重量份、蛇膽3重量份、牛黃3. 5重量份、人工麝香I重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳120重量份、龍膽140重量份、桅子40重量份、大黃12重量份、白茍24重量份、甘草36重量份、三七35重量份、蛇膽5重量份、牛黃2重量份、人工麝香I. 5重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茵陳180重量份、龍膽100重量份、桅子60重量份、大黃9重量份、白茍36重量份、甘草24重量份、三七48重量份、蛇膽2重量份、牛黃3重量份、人工麝香I. 5重量份。
取本發(fā)明中藥組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床可接受的各種制劑包括但不限于散劑、片劑、茶劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、丸劑、蜜丸、顆粒劑、蜜煉膏劑、緩釋制劑、控釋制劑、速釋制劑、口服液體制劑或注射制劑。本發(fā)明中藥組合物的制備方法包括如下步驟A.取大黃、白芍、三七粉碎得細粉1，取蛇膽、牛黃、人工麝香，粉碎得細粉2 ；B.取茵陳、龍膽、桅子、甘草等四味藥材經(jīng)過常規(guī)的中藥水提、醇沉工藝，得稠膏； C.在稠膏中加入細粉I、細粉2及及常規(guī)輔料制備成臨床可接受的制劑。所述步驟B具體可以為茵陳、龍膽、桅子、甘草四味藥材加入水提取I 3次，每次加5 10倍量水，每次I 3小時，濾過，合并濾液濃縮至相對密度為I. 200 I. 230(40°C 50°C時測定);加乙醇使藥液含醇量達70%，靜置，取上清液，回收乙醇并繼續(xù)濃縮至相對密度為I. 25 I. 30 (900C -100°C時測定)的稠膏。所述步驟C具體可以為在稠膏中加入細粉I、細粉2及及常規(guī)輔料，混合，制粒，干燥，制成口服固體制劑片劑、顆粒劑、膠囊劑、茶劑、散劑、丸劑。優(yōu)選地，本發(fā)明中藥組合物片劑的制備方法為A.取大黃、白芍、三七粉碎得細粉1，取蛇膽、牛黃、人工麝香，粉碎得細粉2 ；B.取茵陳、龍膽、桅子、甘草等四味藥材加入水提取2次，第一次加8倍量水，第二次6倍量水，每次2小時，濾過，合并濾液濃縮至相對密度為I. 200-1. 230 (40°C 50°C時測定)，加乙醇使藥液含醇量達70%，靜置，取上清液，回收乙醇并繼續(xù)濃縮至相對密度為
I.25-1. 30 (900C -100°C時測定)的稠膏；C.在稠膏中加入細粉I、細粉2及適量輔料混合制粒，干燥，壓片，每片0.5g，即得。本發(fā)明中藥組合物制劑的質(zhì)量檢測方法包括如下鑒別方法中的一種或兩種。a.取本發(fā)明藥物組合物制劑日服用成品量的1/2，加甲醇20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使其溶解，作為供試品溶液；另取桅子苷對照品適量，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各6 V- 1，分別點于同一娃膠G薄層板上，以10 30 :1 3 :1的醋酸乙酯一甲醇一水為展開齊U，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。b.取鑒別a項下的樣品溶液，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8 yl，對照品溶液6 V- I,分別點于同一娃膠G薄層板上，以10 30 :1 3 :1的醋酸乙酯一甲醇一水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。所述的取對照品適量按中華人民共和國藥典常規(guī)取樣量而定。本發(fā)明藥物組合物以清利濕熱的要藥茵陳為君藥；龍膽可助茵陳清熱燥濕、瀉火解毒，為其臣藥；桅子、蛇膽、大黃清熱瀉火解毒，牛黃清心瀉火，加強君臣藥清瀉肝膽實火之功；肝為剛臟，喜條達而惡抑郁，故在苦寒之中加入苦酸微寒的白芍以養(yǎng)血、柔肝止痛；以甘微苦溫之田七、辛溫之麝香活血消瘀，防苦寒傷中之弊，溫性藥物與苦寒藥相伍又溫而不燥，共為佐藥。甘草甘平，助白芍緩急止痛，緩和藥性且防苦寒之品傷胃，為使藥。全方配伍合理，用藥相宜，共奏清肝利膽，利濕退黃、活血消瘀的功效。本發(fā)明組合物制劑的鑒別方法通過對各藥材的篩選，選擇出鑒別藥材，確定鑒別方法，實驗結(jié)果顯示樣品斑點清晰，分離效果好，且陰性對照無干擾，可以達到對產(chǎn)品質(zhì)量進行有效控制的目的。
本發(fā)明中藥組合物具有清肝利膽，消炎鎮(zhèn)痛的功能。藥效學(xué)比較試驗表明能顯著的降低脂肪肝模型大鼠血液中膽固醇(TC)和肝組織中膽固醇及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物(MDA)的含量，對防治脂肪肝有一定的作用，可用于治療急慢性肝炎、肝硬變。下述實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。實驗例I本發(fā)明組合物制劑對大白鼠實驗性脂肪肝的藥效比較試驗一、實驗?zāi)康挠^察本發(fā)明組合物制劑對大鼠脂肪肝(FLD)模型的作用，為本發(fā)明 組合物制劑具有防治脂肪肝作用提供藥效學(xué)實驗依據(jù)。二、實驗材料(一)實驗動物清潔級大白鼠，SD,6，120 140g，110只，合格證0023665，上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司。(二)試驗藥物本發(fā)明組合物片劑(商品名片仔癀肝寶，按實施例I方法制備):未制劑原粉，呈黃褐色顆粒，每克含生藥2. 916g,批號0608001。試驗時用蒸懼水配制。(三)其他藥品及試劑I、膽固醇白色結(jié)晶，生化試劑，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司，批號20060911。2、脫氧膽酸鈉類白色粉末，生化試劑，北京奧博星生物技術(shù)責(zé)任有限公司，批號20060931。3、丙硫氧嘧啶片50mgX100片，南通精華制藥有限公司，生產(chǎn)批號060201。4、吐溫-80 :500ml，CP，天津市博迪化工有限公司，生產(chǎn)日期同批號2006年9月8曰。5、1,2-丙二醇500ml，AR，天津市博迪化工有限公司，生產(chǎn)日期同批號2006年9
月30日。6、無水乙醇500ml，AR，上海振興化工一廠，批號20060830。7、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒南京建成生物研究所，批號20061107。8、丙二醛(MDA)試劑盒南京建成生物研究所，批號20061107。9、羥脯氨酸(HPY)試劑盒南京建成生物研究所，批號20061107。
10、甘油三酯(TG)試劑盒中生北控生物科技股份有限公司，批號061081。11、總膽固醇(TC)試劑盒中生北控生物科技股份有限公司，批號060281。12、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒賴氏改良法,北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號:060906。13、天門冬氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒賴氏改良法，北京北化康泰臨床試劑有限公司，批號:060904。14、三氯甲烷500ml，AR，汕頭市達濠精細化學(xué)品公司，批號20060310。15、甲醇500ml，AR，上海振興化工一廠，批號200609014。16、冰醋酸500ml，AR，上海振興化工一廠，批號試-2005-11-01。
17、東寶甘泰(復(fù)方蛋氨酸膽堿片):0. 43g/片(含藥量0. 21g/片)，通化東寶藥業(yè)、有限公司，批號060107。(四)主要儀器I、邁瑞B(yǎng)A-88半自動生化分析儀。2、分光光度計UV-9200。3、電子天平AL204梅特勒一托利多儀器(上海)有限公司。4、恒溫磁力攪拌器H01_3上海梅穎浦儀器儀表有限公司。三、實驗方法(一)實驗分組和劑量動物購進先適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。按體重分層隨機分成9組，正常對照組10只，其余每組11只。臨床用量樣品均為lg，每日三次，換算為公斤劑量=3. 0 + 60kg=0. 05g/kg。大鼠劑量樣品均選用lg/kg, 2g/kg和4g/kg三個劑量，即相當于人臨床用量的20,40和80倍，各組灌胃容量均為15ml/kg。I、正常對照組不造模，生理鹽水灌胃；2、脂肪肝病模組造模+生理鹽水灌胃；3、陽性對照組造模+東寶甘泰I. Og/kgo7、片仔癀肝寶高劑量組造模+肝寶4. 0g/kgo8、片仔癀肝寶中劑量組造模+肝寶2. 0g/kgo9、片仔癀肝寶低劑量組造模+肝寶I. 0g/kgo(二)模型制作用酒精合并高脂飲食建立脂肪肝大鼠模型，采用脂肪乳灌胃法。脂肪乳配制取豬油25g放入燒杯中，磁力攪拌加熱至100°C，加膽固醇10g，溶化，再加入丙基硫氧喃唳lg，攪勻，加入20ml吐溫-80制成油相。另取一燒杯,加入50%乙醇25ml,再加I. 2-丙二醇20ml,加熱至60°C,然后再加入2g脫氧膽酸鈉，攪拌全溶,制成水相。將水相緩慢加入油相，邊加邊混勻，即成脂肪乳100ml。冷藏備用，用時溫?zé)崛芑?三)給藥方法與造模同時開始，每天上午灌胃給藥，下午給脂肪乳15ml/kg灌胃(ig)，連續(xù)四周。(四)觀察指標
I、一般情況觀察包括精神狀態(tài)、活動、毛發(fā)、大小便、食量(每日測飼料消耗量)、每周測體重一次，并按體重計算脂肪乳量和藥量灌胃。2、血清生化指標測定28天實驗結(jié)束時，給水禁食12h，稱重。斷頭取血3-4ml, _30°C保存，測血清TC(總膽固醇)，TG(甘油三酯)，ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)，AST (天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶)。3、肝臟外觀觀察和肝指數(shù)測定觀察并記錄肝色澤、質(zhì)地，稱肝重，計算肝指數(shù)(肝
重/體重比)。4、肝 TC、TG 的測定取肝右葉組織0. 5g，用4. 5ml氯仿甲醇(2: 1，V: V)，抽取脂質(zhì)，不時搖動，放置過夜，4000r/min，離心lOmin，取上清液可溶部分，用邁瑞B(yǎng)A-88半自動生化分析儀測定TC、TG05、肝 MDA、SOD, HPY 的測定10%勻漿的制備同一部位取肝組織I. Og,加l_2ml冰生理鹽水作勻漿后定容至IOml。(I)SOD測定1%肝組織勻漿30 ill，按SOD測試盒說明書操作；(2) MDA測定10%肝組織勻漿0. Iml，按MDA試劑盒說明書操作。(3)肝蛋白測定0. 5%肝組織勻漿50 yl，按考馬斯亮蘭試劑盒說明書操作。 (4)羥脯氨酸測定(樣本堿水解法)按羥脯氨酸測試盒說明書VI操作。實驗數(shù)據(jù)用SPSS13. 0統(tǒng)計軟件處理，比較組間差異的顯著性。四、實驗結(jié)果(一)一般情況試驗期間，正常組大鼠精神狀態(tài)好，活動正常，毛發(fā)光澤，膚色紅潤，大小便正常，體重持續(xù)增長。模型組大鼠，造模一周后出現(xiàn)精神萎靡、活動減少，毛發(fā)無光澤，灌脂肪乳時顯掙扎易怒現(xiàn)象，飼料消耗量比正常組少，體重增長較慢。第三周后出現(xiàn)稀軟的大便，甚至溏便，稀軟便持續(xù)至第四周實驗結(jié)束，且食量減少，體重增長緩慢。給肝寶大鼠一般情況比模型組稍好，第二周也出現(xiàn)毛發(fā)松臟，嗜睡，灌脂肪乳時呈現(xiàn)反抗掙扎的易怒現(xiàn)象，大鼠體重的增長，隨著給藥劑量的增加而減慢，其中高劑量組大鼠體重增長較病模組慢(p〈0. 05)。實驗期間有的組出現(xiàn)個別動物死亡，結(jié)果見表I。表I實驗期間大鼠體重(g)的變化T I S )
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟 A.取大黃、白芍、三七粉碎得細粉1，取蛇膽、牛黃、人工麝香粉碎得細粉2; B.取茵陳、龍膽、桅子、甘草等四味藥材經(jīng)過常規(guī)的中藥水提、醇沉工藝，得稠膏； C.在稠膏中加入細粉I、細粉2及及常規(guī)輔料制備成臨床可接受的制劑； 所述藥物組合物的原料藥組成為茵陳50 250重量份、龍膽40 200重量份、桅子15 85量份、大黃3 18重量份、白芍10 50重量份、甘草10 50重量份、三七14 70重量份、蛇膽I 6重量份、牛黃I 4重量份、人工磨香O. 5 2. 5重量份。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟B為 茵陳、龍膽、桅子、甘草四味藥材加入水提取I 3次，每次加5 10倍量水，每次I 3小時，濾過，合并濾液濃縮至相對密度為I. 200 I. 230 (40°C 50°C時測定)；加乙醇使藥液含醇量達70%，靜置，取上清液，回收乙醇并繼續(xù)濃縮至相對密度為I. 25-1. 30 (90°C 100°C時測定)的稠膏。
3.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述步驟C為 在稠膏中加入細粉I、細粉2及及常規(guī)輔料，混合，制粒，干燥，制成口服固體制劑片劑、顆粒劑、膠囊劑、茶劑、散劑、丸劑。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于該制備方法為 A.取大黃、白芍、三七粉碎得細粉1，取蛇膽、牛黃、人工麝香粉碎得細粉2; B.取茵陳、龍膽、桅子、甘草等四味藥材加入水提取2次，第一次加8倍量水，第二次6倍量水，每次2小時，濾過，合并濾液濃縮至相對密度為I. 200 1.230 (40°C 50°C時測定)，加乙醇使藥液含醇量達70%，靜置，取上清液，回收乙醇并繼續(xù)濃縮至相對密度為1.25 I. 30 (90°C 100°C時測定)的稠膏； C.在稠膏中加入細粉I、細粉2及適量輔料混合制粒，干燥，壓片，每片O.5g，即得； 所述藥物組合物的原料藥組成為茵陳150重量份、龍膽120重量份、桅子50重量份、大黃10重量份、白芍30重量份、甘草30重量份、三七42. 5重量份、蛇膽3. 5重量份、牛黃2.5重量份、人工磨香I. 5重量份。
5.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為 茵陳60重量份、龍膽190重量份、桅子18重量份、大黃16重量份、白芍12重量份、甘草48重量份、三七15重量份、蛇膽6重量份、牛黃I重量份、人工磨香2. 5重量份。
6.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為 茵陳240重量份、龍膽50重量份、桅子82重量份、大黃4重量份、白芍48重量份、甘草12重量份、三七68重量份、蛇膽I重量份、牛黃4重量份、人工磨香O. 5重量份。
7.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為 茵陳90重量份、龍膽170重量份、桅子30重量份、大黃14重量份、白芍18重量份、甘草42重量份、三七25重量份、蛇膽4重量份、牛黃I. 5重量份、人工麝香2重量份。
8.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為茵陳210重量份、龍膽70重量份、桅子70重量份、大黃7重量份、白芍42重量份、甘草18重量份、三七58重量份、蛇膽3重量份、牛黃3. 5重量份、人工磨香I重量份。
9.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為 茵陳120重量份、龍膽140重量份、桅子40重量份、大黃12重量份、白芍24重量份、甘草36重量份、三七35重量份、蛇膽5重量份、牛黃2重量份、人工麝香I. 5重量份。
10.如權(quán)利要求1-3所述任意一種制備方法，其特征在于所述藥物組合物的原料藥組成為 茵陳180重量份、龍膽100重量份、桅子60重量份、大黃9重量份、白芍36重量份、甘草24重量份、三七48重量份、蛇膽2重量份、牛黃3重量份、人工麝香I. 5重量份。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療脂肪肝的藥物組合物的制備方法，該方法包括如下步驟A.取大黃、白芍、三七粉碎得細粉1，取蛇膽、牛黃、人工麝香粉碎得細粉2；B.取茵陳、龍膽、梔子、甘草等四味藥材經(jīng)過常規(guī)的中藥水提、醇沉工藝，得稠膏；C.在稠膏中加入細粉1、細粉2及及常規(guī)輔料制備成臨床可接受的制劑。所述藥物組合物的原料藥組成為茵陳50～250重量份、龍膽40～200重量份、梔子15～85量份、大黃3～18重量份、白芍10～50重量份、甘草10～50重量份、三七14～70重量份、蛇膽1～6重量份、牛黃1～4重量份、人工麝香0.5～2.5重量份。
文檔編號A61K36/744GK102727620SQ20121019601
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月14日
發(fā)明者曾金香, 洪緋, 潘杰, 黃進明 申請人:漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司