羅布麻葉有效部位及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術領域】，公開了一種羅布麻葉有效部位在制備高血壓藥物中的應用。本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位為純度超過50%的黃酮類物質(zhì)。本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位可以顯著降低SHR高血壓大鼠的血壓。該有效部位可制成臨床或藥學上可接受的任一劑型，優(yōu)選口服制劑。
【專利說明】羅布麻葉有效部位及其應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及羅布麻葉有效部位在制備原發(fā)性高血壓藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]高血壓病屬中醫(yī)學頭痛、眩暈、中風等范疇，是最常見的心血管疾病。中醫(yī)藥具有整體調(diào)節(jié)和個體化治療的特點，在改善高血壓病臨床癥狀、保護靶器官等方面具有獨特的優(yōu)勢。我國醫(yī)藥工作者在對高血壓病的臨床和實驗研究過程中，總結(jié)和研究出許多具有特定療效的中藥復方和單味藥，其作用機理可歸納成如下幾類。
[0003]1、抑制交感神經(jīng)系統(tǒng)活性
[0004]部分高血壓患者交感神經(jīng)系統(tǒng)功能亢進，體內(nèi)兒茶酚胺增多。遞質(zhì)與相應受體結(jié)合后，引起血管收縮，心臟興奮，從而導致血壓升高。阻斷交感神經(jīng)的興奮作用，可以從阻斷神經(jīng)節(jié)、抑制神經(jīng)遞質(zhì)釋放、拮抗相應受體等環(huán)節(jié)而發(fā)揮降壓作用。苦馬蘭黃酮有阻斷頸上交感神經(jīng)節(jié)作用，能降低狗、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、貓及正常大鼠血壓，2min內(nèi)降至最低水平，降壓幅度18%~50%。
[0005]2、改善腎性水鈉潴留
[0006]正常腎臟通過利鈉作用維持血管內(nèi)容量和調(diào)節(jié)血壓，有些患者腎臟利鈉作用被干擾，可引起水鈉潴留，血壓升高。一些中藥可以通過排鈉利尿造成體內(nèi)鈉和水的負平衡，使細胞外液和血容量減少而使血壓下降。如大麻水提液可使麻醉大鼠動脈血壓下降15%，同時尿量增加11%,尿鈉排泄增加28%。
[0007]3、對腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)的作用
[0008]腎素可使血管緊張素原形成血管緊張素II，血管緊張素II是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)中最終的活性物質(zhì)，有強烈的收縮血管作用，能通過多種機制，引起內(nèi)皮功能障礙，加重高血壓及相關疾病的進展。同時，可刺激腎上腺皮質(zhì)球帶分泌醛固酮，促使水鈉潴留，并作用于心、腎、中樞和自主神經(jīng)系統(tǒng)，加強其水鈉潴留和周圍血管收縮作用，導致血壓升高。沙苑子總黃酮可以使血漿血管緊張素II水平明顯降低，其降壓機理可能與抑制腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)有關。
[0009]4、對鈣離子通道的作用
[0010]在血管平滑肌上對藥物敏感的鈣通道有兩種，即電壓依賴性鈣通道(roc)和受體調(diào)控性鈣通道(ROC)。激活roc，引起細胞外鈣內(nèi)流；激活R0C，引起細胞外鈣內(nèi)流和細胞內(nèi)結(jié)合鈣的釋放，使胞漿內(nèi)游離Ca2+濃度增高；通過與調(diào)鈣素結(jié)合，可使肌動蛋白與肌球蛋白相互作用，致平滑肌收縮。前胡丙素是從傘形科白花前胡根中提取的有效成分，前胡丙素與硝苯地平相似，可非競爭性拮抗高鈣除極化誘導的收縮，非競爭性拮抗氯化鈣所致豬冠脈條的收縮。黃芩苷可顯著降低平滑肌細胞靜息Ca2+濃度，并顯著抑制去甲腎上腺素和高K+引起的細胞內(nèi)Ca2+的升高，提示黃芩苷可通過阻斷平滑肌細胞膜上的PDC和R0C，抑制細胞內(nèi)Ca2+濃度的升高。[0011]5、改善胰島素抵抗
[0012]胰島素除調(diào)節(jié)機體多種代謝外，還對體內(nèi)大多數(shù)血管具有舒張效應，并可以減少正常血管對縮血管物質(zhì)的反應性。據(jù)觀察,大多數(shù)高血壓患者空腹胰島素水平增高,而糖耐量有不同程度降低，提示有胰島素抵抗現(xiàn)象。治療高血壓不僅應控制血壓，還應注重改善胰島素抵抗，防治其所導致的其他心血管代謝性疾病，從而最大限度地降低心血管發(fā)病和死亡的總危險。大量臨床和基礎實驗證明，中藥在控制血壓的同時可有效的改善胰島素抵抗。大黃及其復方改善胰島素抵抗的研究顯示，大黃及其復方可通過降低瘦素、抵抗素、腫瘤壞死因子-α、游離脂肪酸，增加胰島素受體數(shù)目及胰島素與受體的結(jié)合力，降低胰島素水平等多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點、多因素改善胰島素抵抗。
[0013]6、對血管內(nèi)皮功能和血液流變學的改善作用
[0014]血管內(nèi)皮功能不全導致舒血管物質(zhì)，如內(nèi)皮舒張因子(NO)、降鈣素基因相關肽(CGRP)分泌降低；縮血管物質(zhì)如內(nèi)皮素(ET)分泌升高，使血管的收縮、舒張功能平衡失調(diào)，血壓升高。復方丹參注射液可通過改善血循環(huán)狀態(tài)，調(diào)節(jié)ET、CGRP代謝失衡狀況，從而調(diào)節(jié)血管舒縮功能。
[0015]7、對于基因環(huán)節(jié)的作用
[0016]研究發(fā)現(xiàn)，高血壓與原癌基因激活和抑癌基因突變有密切關系。經(jīng)研究表明myc、fos、ras等原癌基因的激活是平滑肌細胞增生的起始因素之一，p53和Bcl_2等抑癌基因突變可能也參與了高血壓的發(fā)病。蓮心堿能逆轉(zhuǎn)內(nèi)皮素引起的c-fos等原癌基因相關抗原和mRNA表達增強，以及p53抑癌基因相關抗原和mRNA表達減弱。唐成玉等研究發(fā)現(xiàn):ras等原癌基因在心肌肥厚形成和發(fā)展過程中起著一定的作用，中醫(yī)活血祛痰法可逆轉(zhuǎn)心肌肥厚，其治療機理可能是抑制了心肌ras原癌基因的高表達。在高血壓的靶器官如心、腎、腦等處細胞調(diào)亡呈顯著增加，Bcl-2基因是參與抑制細胞調(diào)亡的重要基因。鄧杰等研究結(jié)果顯示SHR心肌細胞調(diào)亡具有周齡的依賴性，中藥丹參能顯著減少SHR心肌細胞調(diào)亡，具有明顯上調(diào)Bcl-2基因蛋白表達的作用。
[0017]羅布麻為夾竹桃科植物羅布麻Apoeynum venetum L.的葉或根。主產(chǎn)于我國東北、西北、華北等地?，F(xiàn)江蘇、山東、安徽、河北等地有大量種植。葉在夏季開花前采摘，曬干或陰干，亦有蒸炒揉制后用者；全草在夏季挖取，除去雜質(zhì)，干燥，切段用。味甘、苦，性涼。有小毒。歸肝經(jīng)。平抑肝陽，清熱，利尿。羅布麻葉主要含黃酮苷，酚性物質(zhì)，有機酸，氨基酸，多糖苷，鞣質(zhì)，留醇，留體皂苷元和三萜類物質(zhì)；羅布麻根含強心苷，即加拿大麻苷，毒毛旋花子苷元和K-毒毛旋花子苷-β。羅布麻葉煎劑有降壓作用；羅布麻根煎劑有強心作用；羅布麻葉浸膏有鎮(zhèn)靜，抗驚厥作用，并有較強的利尿、降低血脂、調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、及抑制流感病毒等作用。據(jù)報道，用羅布麻根煎劑，治療慢性充血性心力衰竭50例，有較好療效(中華醫(yī)學雜志，1975,2:114)； 口服羅布麻沖劑或羅布麻膠囊治療高脂血癥。服藥3個月后，可使血清膽固醇及甘油三酯顯著降低(中醫(yī)雜志，1988，2:20);用20%羅布麻煎劑或50%羅布麻注射劑，可起到防治感冒的作用(《羅布麻的綜合利用》，科學出版社，1978，73)。羅布麻葉制劑內(nèi)服可出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹瀉、上腹不適，也可出現(xiàn)心動過緩和期前收縮。但是有關羅布麻葉有效部位提取物在制備抗高血壓的藥物中的應用未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0018]本發(fā)明的目的是提供羅布麻葉有效部位提取物在制備抗高血壓的藥物中的應用。本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位為純度超過50%的黃酮類物質(zhì)。本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位與藥用賦形劑制備的劑型主要包括口服制劑或注射劑。
[0019]本發(fā)明所用的羅布麻葉有效部位，參見文獻(韓利文，鄭新元，趙亮，等.羅布麻葉不同成分群對一氧化氮合酶的抑制活性研究.中國醫(yī)院藥學雜志.2009，29:14-16.)的方法獲得:取羅布麻葉100g，加入60%乙醇IOOOmL回流提取0.5h，過濾，得濾液，濾渣再加入等量溶劑同法提取，合并提取液，減壓濃縮，過濾至澄清，過預先處理好的聚酰胺樹脂柱，分別用10%乙醇、60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，減壓濃縮至無醇，用醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯層，減壓濃縮，干燥，既得。
[0020]本發(fā)明的積極效果是:
[0021](I)本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位，增加了抗高血壓的新用途。
[0022](2)與羅布麻葉制劑內(nèi)服可出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹瀉、上腹不適相比，本發(fā)明提供的羅布麻葉有效部位更加安全。
【具體實施方式】
[0023]本發(fā)明結(jié)合實施例作進一步說明。
[0024]實施例1.羅布麻葉有效部位對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血壓的影響
[0025](一 )實驗動物
[0026]12周齡自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)，雌雄各半。
[0027]( 二)實驗分組
[0028](I)模型對照組:給予生理鹽水，連續(xù)灌胃14天，給予容積為2毫升。
[0029](2)羅布麻葉有效部位低劑量組:給予羅布麻葉有效部位灌胃50mg/kg (總黃酮含量為79%，下同)，連續(xù)灌胃14天，給予容積為2毫升。
[0030](3)羅布麻葉有效部位中劑量組:給予羅布麻葉有效部位灌胃100mg/kg,連續(xù)灌胃14天,給予容積為2毫升。
[0031](4)羅布麻葉有效部位高劑量組:給予羅布麻葉有效部位灌胃200mg/kg，連續(xù)灌胃14天,給予容積為2毫升。
[0032](5)陽性對照組:給予尼群地平灌胃20mg/kg，連續(xù)灌胃14天，給予容積為2毫升。
[0033](三)實驗方法
[0034]自發(fā)性高血壓大鼠一周內(nèi)尾動脈法測定大鼠血壓兩次(第1、6天)，取血壓穩(wěn)定的大鼠用于實驗。將大鼠按血壓分組， 具體給藥劑量見表1。給藥2周后，動物行動脈、靜脈插管，恢復24小時后大鼠與計算機系統(tǒng)連接后穩(wěn)定2小時，連續(xù)記錄4小時的收縮壓。
[0035](四)統(tǒng)計分析
[0036]計量資料用平均值土標準差表示，兩組間數(shù)據(jù)比較采用組間t檢驗。以P〈0.05為顯著性標準。
[0037](五)實驗結(jié)果
[0038]羅布麻葉有效部位可有效降低SHR大鼠血壓，與模型對照組比較有顯著差異，〈0.05)，見表 I。
[0039]表1.羅布麻葉有效部位連續(xù)給藥14天對SHR大鼠血壓的影響
【權(quán)利要求】
1.羅布麻葉有效部位的應用，其特征是:羅布麻葉有效部位在制備原發(fā)性高血壓藥物中的應用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅布麻葉有效部位，其特征在于，該有效部位為純度超過50%的黃酮類物質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1~2所述的羅布麻葉有效部位，其特征在于，該有效部位可制成任何一種臨床上或藥學上可接受的制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求4所述的羅布麻葉有效部位，其特征在于，該有效部位可制成口服制劑或注射劑。
【文檔編號】A61K36/24GK103463147SQ201210187527
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2012年6月8日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月8日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請人:蘇州法莫生物技術有限公司